第五章酶类药物
第五章酶类药物
第五章酶类药物
第一节药用酶概述
酶是生物催化剂，在生理pH值和温度下具有高度专一的催化活性，能迅速产生高效的特异性反应，随着科技的发展，酶类药物大大地应用到治疗上，如神曲和麦芽等药物，含有能降解糖、脂肪与蛋白质的水解酶，可以用于帮助消化，近几十年来，酶类药物在治疗上有较大的进展。大多数酶制剂为口服剂型，现能由于注射的酶制剂只有细胞色素C、纤溶酶等少数几种。
目前对药用酶的研究热点是，在维持活性状态下的酶蛋白能否被吸收，如何减少药用酶的抗原性问题及新型药用酶的研究等
一、酶类药物应具备的条件：
①在生理pH值下（中性），具有最高活力和稳定性。如大肠杆菌谷氨酰胺酶最适pH值为5.0，在生理pH值时基本没有活性，所以不能用于人类疾病的治疗。
②对基质（作用的底物）有较高的亲和力。酶的Km值较低时，只需要少量的酶制剂就能催化血液或组织中较低浓度的基质发生化学反应，从而高效发挥治疗作用。
③血清中半衰期较长。要求药用酶从血液中清除率较慢，以利于充分发挥治疗作用。
④纯度高，特别是注射用的纯度要求更高。
⑤免疫原性较低或无免疫原性。酶是蛋白质，所以酶类药物都不同程度存在免疫原问题，可以对酶进行化学修饰降低免疫原性，或者寻求制备免疫原性较低或无免疫原性的酶。
⑥最好不需要外源辅助因子的药用酶。有些酶需要辅酶或ATP和金属离子方能进行酶反应，在治疗中常常受到限制。
二、药用酶的分类及应用
（一）促进消化酶类：为最早的医用酶，包括蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶等水解酶，乳糖酶。
（二）消炎酶类：溶菌酶，核酸酶等可以移去血块治疗血栓静脉炎等疾病。
（三）与治疗心脑血管疾病有关的酶类：纤维蛋白溶解酶、尿激酶等，这类酶对于溶解血栓有独特效果，可以促进血块溶解，防止血栓的形成。
（四）抗肿瘤的酶类：通过破坏肿瘤细胞所需的代谢物来抑制其生长，L-天冬酰胺酶，可以治疗白血病。
（五）与纤维蛋白溶解作用有关的酶类：链激酶，尿激酶等，血纤维在血液的凝固与解凝过程中有重要作用，提高血液中蛋白水解酶的水平，助于促进血栓的溶解。
（六）其他治疗酶：细胞色素C参与生物氧化的一种有效的电子传递体，用于组织缺氧治疗的急救和辅助用药。
第二节酶类药物的制造过程
酶制备的步骤：
①酶的原材料的选择和预处理。
②酶的提取与纯化。
③酶活性的测定和纯度检测。
一、酶类药物的原料选择
酶作为生物催化剂普遍存在于动植物和微生物中，可直接从生物体分离获得。酶可以通过化学合成法合成，但由于各种因素的限制，目前药用酶的生产主要是直接从动植物种提取、纯化和利用微生物发酵生产。近10多年来，动植物细胞培养技术取得了很大的进步，但因为周期长，成本高等问题，实际应用还有一定困难。目前工业大规模生产一般都是以微生物为主要来源
（一）动物类或植物类原料
1、选用材料注意事项：
（1）选择含有效成分高的动、植物及不同的器官和组织。提取不同的酶，原料选择有很大的区别
（2）注意不同生长发育情况及营养状况。动物与年龄、性别和饲养条件有关，植物注意生长的季节，选择最佳采集时间。
（3）原料来源丰富、易得。
（4）提纯步骤简便易行。动物去结缔和脂肪组织，冷冻储存，植物，择时采集，并就地去除不用部分，有用部分保鲜处理。原料储存法有：冷冻法、有机溶剂脱水法、防腐剂保险等。
2、动物材料的预处理
（1）机械处理（2）反复冻融
（3）丙酮粉组织经过丙酮迅速脱水干燥制成丙酮粉，不仅可以减少酶的变性，同时因细胞结构成分的破碎使得蛋白质与脂质结合的某些化学键打开，促使某些结合酶释放到溶液中。
3、微生物的预处理要是胞外酶，则除去菌体后再直接从发酵液中吸附提取酶。但对胞内酶则需要将菌体细胞破壁，制成无细胞的悬浮液后再行提取。
（1）干燥法：空气干燥、真空干燥、冷冻干燥
（2）机械法：研磨法、组织匀浆、超声波法、高压匀浆法
（3）酶法处理
（二）微生物发酵法生产酶类药物
1、微生物酶制剂高产菌株的选育
（1）酶制剂生产菌的要求：
①产酶量高，酶的性质应符合使用要求；
②不是致病菌，不产毒素；
③稳定，不易变异退化，不易感染噬菌体；
④能利用廉价的原料，发酵周期短，易于培养。
（2）获取优良菌株有三种途径：
①从自然界分离筛选。自然界是产酶菌种的主要来源，筛选产酶菌的方法与其他发酵微生物的筛选方法疾病一致，包括菌样采集、菌种的分离与初筛、纯化、复筛和生产性能鉴定等步骤。
②用物理或化学方法处理、诱变。X射线照射等等。
③用基因重组与细胞融合技术，构建性能优良的工程菌。同源重组等。
2、生物酶制剂的生产发酵技术
（1）培养基组成
碳源、氮源、无机盐、生长因子和产酶促进剂
（2）培养方式：
固体培养：固体培养法亦称麸曲培养法，该法是利用麸皮或米糠为主要原料，另外视需要添加其它谷糠、豆饼等，加水拌成含水适度的半固态物料作为培养基。
液体培养：液体培养法是利用液体培养进行微生物的生长繁殖和产酶。根据通气（供氧）方法的不同，又分为液体表面培养和液体深层培养两种。
3、影响酶产量的因素
（1）温度：一般发酵温度比种子培养时略高些，这样对产酶有利。
（2）发酵的pH：可用糖或淀粉调节，pH低则可用氨来调节。一般pH值为4-6.
（3）通气：（供氧）临界氧浓度。氧必须是溶解于培养基中的氧。
（4）搅拌：增加液体湍流速度，减少气泡周围液膜厚度。有利于促进细胞的新陈代谢。
（5）和消泡剂：发酵过程中，由于发酵液受到强烈的通气搅拌，培养基中某些成分的变化及代谢中产生气体，会形成较多的泡沫，而且气泡不易消失，是由于培养基中蛋白质分子排在气泡表面形成一层吸附膜，聚集成泡沫层之故。
消泡剂：天然油类，醇类，脂肪酸类，胺类，酰胺类，磷酸酯类，金属皂类，聚硅氧烷等。
（6添加诱导剂和抑制剂：诱导酶诱导酶的合成，诱导酶是该酶作用底物或者是其类似物。抑制剂促进酶的形成。加入适量表面活性剂。
二、酶类药物的提取和纯化
1、酶的提取
（1）水溶液法常用稀盐溶液或缓冲液提取，经过预处理的原料，包括组织糜，匀浆，细胞颗粒，丙酮粉都可用水溶液抽提。
水溶液的pH选择对抽提具有影响，应考虑的因素有：
①酶的稳定性
②酶的溶解性
③酶与其他物质结合的性质
④选择pH的总原则是，在酶稳定的pH范围内，选择偏离等电点的适当的pH。
（2）有机溶剂法某些结合酶，由于和脂质结合牢固，需用有机
溶剂除去脂质，且不能使酶变性。常用有机溶剂是丁醇。
①丁醇性质：亲脂性强、兼具亲水性、在脂与水分子间能起表面活性剂的桥梁作用。
②丁醇提取方法：均相法和两相法
（3）表面活性剂法表面活性剂能与蛋白质结含而分散在溶液中，故可用于提取结合酶。
2、酶的纯化
不同的酶，因性质不同，其纯化工艺可能有很大不同。评价一个纯化工艺好坏，主要看两个指标：酶比活和总活力回收率。
纯化过程中的技术难点：（1）杂质的除去酶提取液中，除所需酶外，还含有大量的杂蛋白、多糖、脂类和核酸等。
①调pH和加热沉淀法
②蛋白质表面变性法利用蛋白质表面变性性质的差别，也可除去杂蛋白，加入氯仿和乙醇进行震荡，
可以除去杂蛋白。
③选择性变性法利用蛋白质稳定性的不同，除去杂蛋白。
④降解或沉淀核苷酸法用核酸酶，将核酸降解成核苷酸，使粘度下降便于离心分离。用核酸沉淀剂
如三甲基十六烷基溴化铵、硫酸链霉素、聚乙烯亚胺、鱼精蛋白和二氯化锰等
⑤利用结合底物保护法除去杂蛋白酶和底物结合或竞争性抑制剂结合后，热稳定性大大提高，这样
就可用加热法除去杂蛋白。
（2）脱盐
①透析
②凝胶过滤
（3）浓缩
①冷冻干燥法
②离子交换法
③超滤法
④凝胶吸水法
（4）酶的结晶
①酶的结晶方法酶的结晶方法主要是缓慢地改变酶蛋白的溶解度，使其略处于过饱和状态。盐析法：操作要在低温下进行，加盐，缓冲液pH要接近酶的等电点。多数酶就可形成结晶。有时也可交替置在4C。冰箱中和室温下来形成结晶。
有机溶剂法：一般要含少量无机盐的情况下，选择使酶稳定的pH,缓慢地滴加有机溶剂。使用的缓冲液一般不用磷酸盐,而用氯化物或乙酸盐。
复合结晶法：有时可以利用某些酶与有机化合物或金属离子形成复合物或盐的性质来结晶。
透析平衡法、等电点法
②结晶条件的选择
酶液的纯度：酶的纯度越高，结晶越容易，长成大的单晶可能性也越大。结晶对酶有明显的纯化
作用。
酶的浓度
温度：结晶的温度通常在4C。下或室温25C。下，低温条件下酶不仅溶解度低，而且不易变性。时间：结晶形成的时间,数小时到几个月，有的甚至需要1年或更长时间。一般来说，较大而性能好的结晶是在生长慢的情况下得到的。一般希望使微晶的形成快些，然后慢慢地改变沉淀条件，再使微晶慢慢长大。
pH:
晶种：不易结晶的蛋白质和酶，有的需加入微量的晶种才能结晶
结晶器皿处理：结晶用的器皿要充分清洗、烘干。使用前用结晶母液再冲洗一次。结晶的玻璃
器皿，可用硅涂料进行表面处理，以使表面光滑且不润湿。这样可减少晶核数目，形成大的结晶。
（5）酶分离和纯化中应注意的问题
①防止酶蛋白变性
②防止辅助因子流失
③防止酶被蛋白水解酶降解
第三节重要酶类药物
一、胃蛋白酶
广泛存在哺乳动物、鸟类、爬虫类及鱼类的胃液中，以酶原的方式存在于胃底的细胞里。
（一）化学组成与性质药用胃蛋白酶是胃液中多种蛋白水解酶的混合物，含有胃蛋白酶、组织蛋白酶、胶原酶等，为粗制的酶制剂。水溶液呈酸性，难溶于乙醇、氯仿等有机溶剂。
pl为pHI.O，最适pH1.5〜2.0。可溶于70%乙醇和pH4的20％乙醇中。
胃蛋白酶能水解大多数天然蛋白质底物。
（二）生产工艺
1、工艺流程
2、工艺过程及控制要点
①酸解，过滤
②脱脂，去杂质
③浓缩，干燥
3、胃膜素和胃蛋白酶联产工艺
①胃膜素也是从猪胃粘膜中提取的一种黏蛋白。胃膜素水溶液能被60%以上的乙醇或丙酮沉淀，所
以可利用提取胃膜素的母液制备胃蛋白酶。
②联产工艺：向分离胃膜素的母液中，边搅拌边加冷丙酮，至相对密度0.91，既有淡黄色胃蛋白酶
沉出，静置过夜，去上清液，沉淀真空干燥，即得胃蛋白酶。
4、结晶胃蛋白酶的制备
（三）质量控制
1、质量标准：
2、活力测定
二、胰蛋白酶
（一）组成和性质
胰蛋白酶是从牛、羊胰脏提取、结晶的冻干制剂。易溶于水，不溶于氯仿、乙醇、乙醚等有机溶剂。在pH1.8时，短时煮沸几乎不失活；在碱溶液中加热则变性沉淀，Ca2+有保护和激活作用,胰蛋白酶的pI为10.1。牛胰蛋白酶在肠激酶或自身催化下，释放出6肽，变成有活性的胰蛋白酶。胰蛋白酶分子量*****，由223个氨基酸残基组成。
胰蛋白酶专一作用于由碱性氨基酸精氨酸及亮氨酸羧基所组成的肽键。酶本身很容易自溶。
（二）、生产工艺
（1）工艺路线
（三）检验方法
（1）质量标准
①性状白色或类白色结晶性粉末。
②澄清度本品10mg加蒸馏水或生理盐水1ml完全溶解。溶解
应完全澄清。
③pH0.5%的水溶液pH为5〜7。
④干燥失重真空干燥到恒重，失重不得超过8%。
⑤糜蛋白酶限度检查不得超过5%。
（2）活性测定
三、尿激酶
是一种碱性蛋白，由肾脏产生，主要存在于人及哺乳动物的尿中。人尿中平均含量5-6IU/mL。临床上尿激酶已经广泛用于治疗各种新血栓形成或血栓梗塞疾病。
（一）结构与性质
①存在多种相对分子质量形式，主要的有*****、*****两种。
②尿中存在尿胃蛋白酶原，酸性条件下可以激活生成尿胃蛋白酶，可以把分子量*****的天然尿激
酶降解成分子量*****的尿激酶。
③尿激酶是丝氨酸蛋白酶，丝氨酸和组氨酸是其活性中心的必须氨基酸。
④尿激酶是专一性很强的蛋白水解酶，尿激酶也有酯酶活力。
⑤尿激酶PI为8-9，溶液中不稳定，冻干可稳定数年。
（二）生产工艺
1、工艺流程
（三）质量控制
成品为白色或米色澄清溶液或白色冻干粉。
每毫克蛋白的酶活力不得低于120XX年0IU。
尿激酶活力测定方法：
（1）气泡上升法
①试剂：血纤维蛋白原溶液、牛凝血酶溶液、血纤维溶酶原溶液、尿激酶标准品溶液。
②反应体系：四种溶液的混合体系。
③操作：12mm*75mm小试管，置于冰水浴中，依次加入
上述溶液，迅速搅拌，立即置于37度水浴
保温。反应体系应在30-45s凝结，凝块内有小气泡生成。当凝块溶解时，气泡逐渐上升，在气泡上升到反应体系体积一半时作为反应终点。
④标准取消：以酶浓度为纵坐标，凝块溶解时间为横坐标，绘制标准曲线。
样品测定：被测样品稀释成10-20IU/ML，同以上操作，根
据凝块溶解时间，从标准曲线查得样品的活力单位。
（2）平板法
四、超氧化物歧化酶（SOD）
SOD是一种重要的氧自由基清除剂，能专一清楚超氧阴离子自由基。
目前SOD临床应用集中在自身免疫性疾病上，也可用于抗辐射，
抗肿瘤，治疗氧中毒，心肌缺氧
与缺血再灌注综合症一级某些心血管疾病。
SOD属于重金属酶，广泛存在于动植物、微生物细胞中。（一）结构和性质
SOD的性质不仅取决于蛋白质部分，还取决于活性中心金属离子的存在，金属离子种类不同，SOD的性质有所不同，其中
Cu,Zn-SOD与其他两种SOD差别较大，而Mn-SOD与Fe-SOD之间差别较小。
1、SOD活性中心和构象
2、SOD的理化性质
SOD是一种金属蛋白，因此它对热、pH及其在某些性质上表现出异常的稳定性。
（1）热稳定性
（2）pH对SOD的影响
在pH=5.3-10.5范围内对SOD活性不受影响。pH=3.6时SOD中Zn要脱落95%。
pH=12.2时，SOD的构象会发生不可逆的转变，从而导致酶活性丧失。
（3）吸收光谱取决于酶蛋白和金属辅基。
紫外光谱区：250nm-270nm可见光区：680nm
4、金属辅基与酶活性
Cu与Zn的作用是不同的
Zn仅与酶分子结构有关，而与催化活性无关。
Cu与催化活性有关，透析除去Cu则酶活性全部丧失，一旦重新加入Cu,酶活性又可以恢复。
（二）生产工艺
1、收集红细胞
2、溶血、去血红蛋白
3、沉淀、热变性
第 13 章 酶类药物
第13 章酶类药物 第一节酶类药物的原料来源 一、原料选择 选用原料应注意以下几点: （1）不同酶的用料选择：哪里有，含量高，选哪。 （2）注意不同生长发育情况及营养状况, 用微生物制酶，故需测其活力来决定取酶阶段。用动物器官提取酶，则与动物年龄及饲养条件有关。 （3）从原料来源是否丰富考虑； （4）从简化提纯步骤着手 （5）如用动物组织作原料，则此动物宰杀后应立即取材。 从动物或植物中提取酶受到原料的限制，随着酶应用日益广泛和需求量的增加，工业生产的重点已逐渐转向微生物。用微生物发酵法生产药用酶，不受季节、气候和地域的限制，生产周期短，产量高，成本低，能大规模生产。 二、微生物酶制剂高产菌株的选育 菌种是工业发酵生产酶制剂的重要条件。与增加品种、缩短生产周期、改进发酵和提炼工艺条件等密切相关。 优良菌种的获得有三条途径： ①是从自然界分离筛选： ②是用物理域化学方法处理、诱变； ③是用基因重组与细胞融合技术。因此微生物的分离筛选是一切工作的基础。 三、微生物酶制剂生产的发酵技术 首先要合理选择培养方法、培养基、培养温度、pH和通气量等。还要研究酶的分离提纯技术和制备工艺。 （—）原料 利用微生物生产酶制剂的主要原料为碳源和氮源，此外还有无机盐、生长因素和产酶促进剂等。 如果添加少量某种物质就能明显增加酶的产量时，这类物质通称为产酶促进剂。它们大多属于酶的诱导物或表面活性剂。 1、固体培养法 固体培养法亦称麸曲培养法，该法是利用麸皮或米糠为主要原料，另外视需要添加其它谷糠、豆饼等，加水拌成含水适度的半固态物料作为培养基。 2、液体培养法 液体培养法是利用液体培养进行微生物的生长繁殖和产酶。根据通气（供氧）方法的不同，又分为液体表面培养和液体深层培养两种。 3、影响酶产生的一些因素 菌种的产酶性能是决定发酵效果的重要因素，但是发酵工艺条件对产酶的影响也是十分明显的。 （1）温度一般发酵温度比种子培养时略高些，这样对产酶有利。 （2）pH 可用糖或淀粉调节，pH低则可用氨来调节。 （3）通气（供氧）临界氧浓度。氧必须是溶解于培养基中的氧。 （4）搅拌增加液体湍流速度，减少气泡周围液膜厚度。有利于促进细胞的新陈代谢。（5）泡沫和消沫剂由于培养基中蛋白质分子排在气泡表面形成一层吸附膜，聚集成泡沫层之故。
生物制药(修正版)
第一章概述 一、药物、药品的概念 药物：用于预防、治疗或诊断疾病或调节机体生理功能、促进机体康复保健的物质。 药品：直接用于临床的药物产品，是特殊商品。 二、中国三大药源：中药、化学药、生药 三、生物药物的概念 是以生物体、生物组织或其成份为原料（包括组织、细胞、细胞器、细胞成分、代谢、排泄物）综合应用生物学、物理化学与现代药学的原理与方法加工制成的药物。 四、生物药物的分类 1、天然生化药物：氨基酸类药物（谷氨酸、胱氨酸）、多肽和蛋白质类药物（催产素、胰岛素）、酶和辅酶类药物（胃蛋白酶、胰蛋白酶、SOD、）、核酸类药物（DNA、RNA、阿糖腺苷）、多糖类药物（肝素、透明质酸）、脂类药物（卵磷脂、胆固醇、血红素） 2、微生物药物：抗生素（青霉素、红霉素、土霉素）、酶抑制剂（β-内酰胺酶抑制剂）、免疫调节剂（环孢菌素A） 3、基因工程药物：重组多肽与蛋白质类激素（重组人胰岛素、重组人生长素）、重组溶栓类药物（重组水蛭素）、细胞因子类（干扰素、白介素） 4、基因药物：如重组疫苗、DNA片段、核酶 5、生物制品：预防制品（乙肝疫苗、卡介苗、白喉类毒素） 五、生物制药工艺学的任务 1.生物药物的来源及其原料药物生产的主要途径和工艺过程； 2.生物药物的一般提取、分离、纯化、制造原理和生产方法； 3.各类生物药物的结构、性质、用途及其工艺和质量控制。 六、生物药物的特点及要求 特点: 1．在化学构成上十分接近于体内的正常生理物质，容易为机体吸收利用； 2．在药理上具有更高的生化机制合理性和特异治疗有效性； 3．在医疗上具有药理活性高、针对性强、毒性低、副作用小、疗效可靠； 4．化学与生物学性质不稳定，对各种理化因素敏感，生物活性易受影响。 5、生物药物的有效成分在生物材料中浓度都很低，杂质的含量相对比较高。 6、生物药物常常是一些生物大分子，不仅分子量大，组成、结构复杂，而且具有严格的空间构象，以维持其特定的生理功能。 要求: 1.必须有严格的制造管理要求（GMP）质量管理要求； 2.对制品的有效期、贮存条件、使用方法必须做出明确规定； 3.对有效成分应拟定其生物活性检测方法； 4.对制品的均一性、有效性、安全性和稳定性等都有严格要求。 第二章工艺基础 一、生物活性物质存在的特点 1.生物活性物质在生物体材料中含量较低、杂质含量很高。 2.生物材料中的生化组成数量大，种类多，目的物与杂质的理化性质接近，分离纯化困难 二、组织与细胞的破碎方法 1.物理方法：磨切法、压力法、震荡法、冻融法 2.化学法：用稀酸、稀碱、浓盐、有机溶剂、表面活性剂处理细胞。
药理第五章
第五章 名词解释 1、胆碱能效应 胆碱能效应：能够兴奋胆碱能受体（M样与N样作用）引起的效应。 M样作用：瞳孔缩小，调节痉挛；心脏抑制，骨骼肌血管扩张；内脏平滑肌收缩，括约肌扩张；腺体分泌增多；突触前膜受体被激动，抑制Ach释放 N样作用：自主神经结兴奋；肾上腺髓质分泌增多；骨骼肌收缩 2、肾上腺素能效应 α效应：瞳孔扩大；血管平滑肌收缩，内脏扩约肌收缩；大汗腺分泌，糖原分解，糖异生； 突触前膜受体被激动，抑制NE释放 β效应：调节麻痹；心脏兴奋，血管扩张；内脏平滑肌舒张；糖原分解，糖异生；脂肪分解，肾素释放突触前膜受体被激动，兴奋NE释放 简述题 1、试述Ach、NA的合成、储存、释放和代谢过程。 1、乙酰胆碱的体内过程 胆碱乙酰化酶 ①合成：胆碱＋乙酰辅酶A---------------------------------→乙酰胆碱 胆碱能神经末梢的胞浆内 ②贮存：乙酰胆碱＋三磷酸腺苷（ATP）＋囊泡蛋白→复合物→存于囊泡中 少部分则以游离形式在于胞浆中。 ③释放：神经冲动→突触前膜通透性发生改变→Ca2+ 内流→囊泡与突触前膜融合→产生裂孔→乙酰胆碱排至突触间隙。这种方式称为胞裂外排。 胆碱酯酶（ChE）
④代谢：突触间隙内的乙酰胆碱----------------------------→乙酸＋胆碱 水解 部分胆碱又可被胆碱能神经末梢摄取，再参与乙酰胆碱合成。 NA合成的主要部位在神经末梢。 酪氨酸从血液由钠依赖性载体转运进入神经元后，经酪氨酸羟化酶催化生成多巴，再经多巴脱羟酶催化生成多巴胺，后者进入囊泡中由多巴胺β－羟化酶催化，生成NA并与ATP和嗜铬颗粒蛋白结合，贮存于囊泡中。 当胞浆中多巴胺或游离NA浓度增高时，对该酶有反馈性抑制作用。反之，则对该酶抑制作用减弱，催化作用加强。 酪氨酸羟化酶是整个合成过程的限速酶。 2、简述传出神经系统受体分类及药物分类。 1、胆碱受体 （1）毒蕈碱型胆碱受体（M受体）M受体主要分布于副交感神经节后纤维所支配的效应器官如心肌、血管、胃肠平滑肌、支气管平滑肌、腺体、虹膜括约肌、睫状肌等处。M受体兴奋时，表现为心脏抑制、血管扩张、胃肠及支气管平滑肌收缩、腺体分泌、瞳孔缩小、导致近视等。 （2）烟碱型胆碱受体（N受体）N1受体分布于植物神经节和肾上腺髓质，N2受体分布于骨骼肌。N受体兴奋时，表现为植物神经节兴奋、肾上腺髓质分泌、骨骼肌收缩。 2、肾上腺素受体 （1）α肾上腺素受体（α受体）α1受体主要分布于皮肤、粘膜、内脏的血管、虹膜辐射肌、腺体等处。兴奋时，表现为皮肤、粘膜、内脏的血管收缩，瞳孔散大，手、脚心腺体分泌等。突触前膜的α受体为α2受体，兴奋时可使去甲肾上腺素释放减少，这是一种负反馈的调节作用。 （2）β肾上腺素受体（β受体）β1受体主要分布于心脏、脂肪组织、肾小球旁细胞等处。兴奋时，表现为心脏兴奋、脂肪分解、肾素分泌增加；β2受体主要分布于支气管、骨骼肌血管、冠状血管、
生物产品分类及标准
生物产品分类及标准 目录 第一章绪论 ......................................................................... 1.1 ............................................................................................................................................................................ 1.2 ............................................................................................................................................................................ 1.3 ............................................................................................................................................................................ 1.4 ............................................................................................................................................................................ 1.5 ............................................................................................................................................................................ 第二章产品分类 ........................................................................ 2.1酶....................................................................................................................................................................... 2.2氨基酸 ............................................................................................................................................................... 2.3植物药物 ........................................................................................................................................................... 2.4核酸................................................................................................................................................................. 2.5 糖类 .................................................................................................................................................................. 2.6抗生素 ............................................................................................................................................................... 2.7基因工程药物 ................................................................................................................................................... 2.8 疫苗 .................................................................................................................................................................. 2.9 脂质类 .............................................................................................................................................................. 2.10多肽及蛋白质................................................................................................................................................. 第三章产品标准 ........................................................................ 3.1. ........................................................................................................................................................................... 3.2 ............................................................................................................................................................................ 3.3 ............................................................................................................................................................................ 3.4 ............................................................................................................................................................................ 3.5 ............................................................................................................................................................................ 3.6 ............................................................................................................................................................................ 3.7 ............................................................................................................................................................................ 3.8 ............................................................................................................................................................................ 3.9 ............................................................................................................................................................................ 3.10 .......................................................................................................................................................................... 第四章生产企业及联系方式............................................................... 第五章生产工艺 ........................................................................ 第六章展产品贸易 ...................................................................... 第七章附录 ............................................................................
多酶片的功能主治用法用量是多少
多酶片的功能、主治、用法、用量是多少 1. 功能 多酶片是一种含有多种酶类成分的药物，它能够帮助人体消化、吸收食物中的 营养物质。多酶片中包含的酶类成分能够分解碳水化合物、蛋白质和脂肪，促进食物的消化和吸收。 2. 主治 多酶片主要用于治疗消化不良相关的症状，包括胃胀、腹胀、食欲不振和消化 不良等。这些症状通常由于胃肠道酶活性不足或胃肠功能紊乱引起。 3. 用法和用量 多酶片一般口服，建议饭后或进食时使用，以保证酶类成分能够与食物充分接触。 3.1 用法 多酶片的用法如下： 1.将多酶片取出，放入口中。 2.配合饮水咀嚼，使其更好地与食物混合。 3.2 用量 多酶片的用量以医生建议为准。一般来说，成人每次可口服1-2片，每天3次。儿童的用量应由医生根据年龄和体重来确定。 4. 注意事项 在使用多酶片时，应注意以下几点： 1.孕妇、哺乳期妇女和儿童应在医生指导下使用多酶片。 2.对多酶片成分过敏的人不宜使用。 3.如果在使用多酶片过程中出现过敏反应、不适或不良反应，请及时停 止使用并就医咨询。 4.多酶片可能与其他药物发生相互作用，患者在服用多酶片时应向医生 告知正在使用的其他药物。 5.储存多酶片时应放置在干燥、阴凉处，避免阳光直射。
5. 常见副作用 多酶片是一种广泛应用的药物，但在使用过程中仍可能出现一些副作用。常见的副作用包括： 1.胃部不适，如胃痛、胃灼热感等。 2.口干舌燥。 3.轻度胃肠不适，如腹胀、腹胀等。 4.过敏反应，如皮疹、荨麻疹等。 如果出现以上副作用，应立即停止使用多酶片并就医咨询。 6. 结论 多酶片是一种帮助消化、吸收食物的药物，常用于治疗消化不良相关的症状。正确的用法和用量能够更好地发挥其疗效，但在使用过程中仍应注意注意事项和可能的副作用，如有需要应及时就医咨询。
生物化学重点
生物化学重点 第三章蛋白质化学 1.氮是蛋白质的特征元素 2.蛋白质的结构单位――氨基酸结构式 3.芳香族r基氨基酸、带正电荷r基氨基酸、带负电荷r基氨基酸（定义、所 涵盖的氨基酸的种类、习惯名称和符号） 4.两性解离与紫外线吸收特征（定义）等电点定义 5.谷胱甘肽（巯基抗氧化剂定义） 6.蛋白质的一、二、三级结构（定义化学键常用的结构及特点保持平衡的 因素）7.结构域（定义）8.变构效应（定义） 9.呈色反应涵盖哪些，存有什么促进作用10.蛋白质就是胶体溶液其主要的平衡因素11.变性复性（定义机理） 12.沉降与沉降系数（定义机理）13.蛋白质复性的定义 14.蛋白质结晶的机理、方法、条件、特点（四种方法分别阐释）15.电泳（定义）16.层析技术定义17.输血（定义促进作用）18.肽键的定义 19.能辨别寡肽和多肽链20.肽链的书写顺序 第四章核酸化学 1.2.3.4.5.6.7. dna与rna核苷酸的区别核酸的种类、功能、原产 核苷酸是核酸的结构单位和水解产物核苷酸的组成 核苷酸的相连接方式功能、衍生物核苷酸与核苷酸的相连接方式 基因与基因组的概念：基因：是决定蛋白质多肽链或rna所必需的全部核酸序列（通常是dna序列）它是遗传的基本功能单位。一个完整的基因不仅包含编码蛋白质多肽链（或rna）的核酸序列，还应包括与转录表达调控有关的核酸序列；基因组：指一个细胞或生物体内全部的dna序列，它储存了一个物种所有的遗传信息 8.核酸的一、二级结构的定义、保持的化学键、特点9.dna与rna的区别 10.三种rna在蛋白质合成中的作用11.真核生物的mrna与原核生物的区别12.trna 的一、二、三级结构的特点13.核酶的定义14.紫外吸收特征
《生物制药工艺学》课程教学大纲
《生物制药工艺学》课程教学大纲 课程编号：0803016 课程总学时/学分：36/2（其中理论36学时，实验0学时） 课程类别：专业限选课 一、教学目的和任务 本课程是一门制药工程类专业限选课程。本课程主要包括基因工程菌发酵和动物细胞培养制药工艺及重组蛋白质药物的分离纯化工艺与鉴定等。学习本课程是进入医药领域的重要途径，能使学生充分掌握生物制药的上、下游知识和技术，为学生在生物医药领域的发展提供良好的知识、技术结构。 二、教学基本要求 通过本课程的学习，培养学生掌握药物制造的基本理论和基本知识及其相应的基本技能，并能够综合运用所学知识进行制药工艺的创新及开展新药的研制与开发等方面的工作，了解制药工艺学的最新方法及研究进展。 三、教学内容及学时分配 第一章绪论（2学时） 第一节生物药物概述 一、生物药物的概念 二、生物药物的性质 三、生物药物的分类 第二节生物药物与生物制药工艺学 一、生物制药的发展历程 二、生物制药工艺学的研究内容 三、生物制药的研究发展趋势 教学要求： 通过本章的学习使学生掌握生物药物、生物制药工艺学的概念、分类；了解生物制药工艺学的研究内容、发展趋势。 教学重点： 生物药物的概念和分类。 教学难点： 生物药物的类别。 第二章生物制药工艺技术基础（10学时） 第一节生化制药工艺技术基础
一、生物材料 二、生物材料的选择、预处理和保存 三、组织和细胞的破碎及细胞器的分离 四、生物活性物质的提取和纯化 五、生物活性物质的浓缩、干燥和保存 第二节微生物制药工艺基础 一、制药微生物菌种的发育与保藏 二、微生物代谢产物的生物合成 三、微生物药物发酵基础 第三节基因工程制药技术基础 一、目的基因的制备 二、基因重组 三、基因工程菌或细胞的构建 四、基因工程菌或细胞的培养 五、基因工程产物的分离和纯化 第四节细胞工程制药技术基础 一、动物细胞工程制药技术基础 二、植物细胞工程制药技术基础 第五节酶工程制药技术基础 一、概述 二、药用酶的生产 三、药用酶的修饰 四、酶的固定化及其在制药方面的应用 五、酶的非水相催化及其在制药方面的应用 教学要求： 1. 掌握生化制药、微生物制药、基因工程制药、细胞工程制药和酶工程制药的技术基础；传统生化制药的基本工艺过程，包括材料的选择、预处理，组织细胞的破碎，细胞器的分离纯化，浓缩干燥等步骤； 2. 了解微生物制药技术的研究内容，包括菌种的选育和保藏、代谢产物的生物合成、发酵工艺、发酵产物的提取、分离纯化； 3. 掌握基因工程制药的研究内容，包括基因的制备、基因重组、基因工程菌的构建、工程菌的培养、产物的分离纯化； 4. 学习细胞工程制药技术，包括动植物细胞培养的特性、方法、培养基组成与种类、培养条件等
第5章 消化系统药物
第五章作用于消化系统的药物 机体消化系统包括口腔、食道、胃、肠、肝脏、胆囊和胰腺，这些器官保证了机体对于所需营养的正常吸收，同时又将对机体无用的废物清除出体外。显而易见，消化系统的正常与否，将对机体的健康产生直接和重要的影响。 第一节健胃药与助消化药Stomachics and Digestant 一、健胃药(Stomachics) 定义：指能促进唾液、胃液等消化液的分泌，加强胃的消化机能，从而提高食欲的一类药物。该类药多数是植物药。 分类：苦味健胃药、芳香性/辛辣健胃药、盐类健胃药。 1、苦味健胃药 机理：本类药有强烈的苦味，通过刺激味觉感受器，反射性引起胃液分泌增加，利于消化，促进食欲，健胃。 使用要点：制成合理的剂型。经口给药。饲喂前5~30min给药。不宜反复使用。 常用药物： 龙胆 作用:因味苦，内服作用于舌味觉感受器，促进唾液与胃液的分泌增加，加强消化，提高食欲。 应用:用于食欲不振，某些热性病引起的消化不良。 马钱子 药理作用:1味苦，内服后发挥苦味健胃剂作用 2吸收后对中枢神经系统，尤其是脊髓有选择性兴奋作用。 应用:治疗消化不良，食欲不振，前胃迟缓，瘤胃积食 注意事项:本品安全范围小，应严格控制剂量，连续用药不超过一周。解毒可用巴比妥类和水合氯醛。 2、芳香性健胃药/辛辣健胃药 机理：含挥发油具有辛辣味或苦味的中草药。 作用： ●轻度刺激消化道黏膜，健胃。 ●轻度抑菌、制止发酵。 ●祛痰。 ●健胃、制酵、驱风、祛痰。 药物： a陈皮 作用:刺激消化道粘膜，增强消化液的分泌和胃肠蠕动，呈现健胃祛风功效 应用:消化不良，积气食胀 桂皮 作用:本品对胃肠黏膜有温和刺激作用，可增强消化机能，排除积气。 可缓解胃肠痉挛疼痛，因有扩张末梢血管作用，故能改善血液循环。 应用:消化不良，受凉感冒，产后虚弱。
药物化学第五章习题及答案
第五章消化系统药物 一、单项选择题 5-1、可用于胃溃疡治疗的含咪唑环的药物是C. 西咪替丁 5-2、下列药物中，不含带硫的四原子链的H2-受体拮抗剂为B. 罗沙替丁 5-3、下列药物中，具有光学活性的是D. 昂丹司琼 5-4、联苯双酯是从中药的研究中得到的新药。B. 五味子 5-5、熊去氧胆酸和鹅去氧胆酸在结构上的区别是 E. 七位取代的光学活性不同 二、配伍选择题 [5-11-5-15] A. 地芬尼多 B. 硫乙拉嗪 C. 西咪替丁 5-11、5-HT3受体拮抗剂 E D. 格拉司琼 E. 多潘立酮 5-12、H1组胺受体拮抗剂 B 10 5-13、多巴胺受体拮抗剂 E 5-15、H2组胺受体拮抗剂 C [5-16-5-20] A. 治疗消化不良 B. 治疗胃酸过多 C. 保肝 D. 止吐 E. 利胆 5-16、多潘立酮 A 5-17、兰索拉唑 B 5-18、联苯双酯 C 5-14、乙酰胆碱受体拮抗剂 A 5-19、地芬尼多 D 5-20、熊去氧胆酸 E 三、比较选择题 [5-21-5-25] A. 水飞蓟宾 B. 联苯双酯 C. 二者皆有 D. 二者皆无 5-21、从植物中提取 A 5-22、全合成产物 B 5-23、黄酮类药物 A 5-24、现用滴丸 B 5-25、是新药双环醇的先导化合物 B [5-26-5-30] A. 雷尼替丁 B. 奥美拉唑 C. 二者皆有 D. 二者皆无 5-26、H1受体拮抗剂D 5-27、质子泵拮抗剂 B
5-28、具几何活性体 A 5-29、不宜长期服用 B 5-30、具雌激素样作用 四、多项选择题 5-36、抗溃疡药雷尼替丁含有下列哪些结构 B. 含有呋喃环 D. 含有硝基 E. 含有氮酸结构的优势构象 5-37、属于H2受体拮抗剂有 A. 西咪替丁 D. 法莫替丁 5-38、经炽灼、遇醋酸铅试纸生成黑色硫化铅沉淀的药物有 B. 法莫替丁 C. 雷尼替丁 E. 硫乙拉嗪 5-39、用作“保肝”的药物有A. 联苯双酯 C. 水飞蓟宾 E. 乳果糖 5-40、 5-HT3镇吐药的主要结构类型有A. 取代的苯甲酰胺类 D. 吲哚甲酰胺类 五、问答题 1、为什么质子泵抑制剂抑制胃酸分泌的作用强，选择性好？ 胃酸分泌的过程有三步。第一步，组胺、乙酰胆碱或胃泌素刺激壁细胞底一边膜上相应的受体，引起第二信使cAMP或钙离子的增加；第二步，经第二信使cAMP 或钙离子的介导，刺激由细胞内向细胞顶端传递；第三步，在刺激下细胞内的管状泡与顶端膜内陷形成的分泌性微管融合，原位于管状泡处的胃质子泵—H／K—ATP酶移至分泌性胃管，将氢离子从胞浆泵向胃腔，与从胃腔进入胞浆的钾离子交换，氢离子与顶膜转运至胃腔的氯离子形成盐酸(即胃酸的主要成分)分泌。 质子泵抑制剂是胃酸分泌必经的最后一步，可完全阻断各种刺激引起的胃酸分泌。且因质子泵抑制剂是以共价键的方式与酶结合，故抑制胃酸分泌的作用很强。而且质子泵仅存在于胃壁细胞表面，质子泵抑制剂如Omeprazole在口服后，经十二指肠吸收，可选择性地浓缩在胃壁细胞的酸性环境中，在壁细胞中可存留24小时，因而其作用持久。即使血药浓度水平低到不能被检出，仍能发挥作用。 故质子泵抑制剂的作用专一，选择性高，副作用较小。 2、请简述镇吐药的分类和作用机制。 止吐药物可阻断呕吐神经反射环的传导，达到止吐的临床治疗效果。该反射环受多种神经递质影响，如组胺、乙酰胆碱、多巴胺和5一羟色胺。止吐药，现以其作用靶点和作用机制(即拮抗的受体)分为抗组胺受体止吐药、抗乙酰胆碱受体止吐药、抗多巴胺受体止吐药和抗5一H T3受体的5一HT3受体拮抗剂。 3、试从化学结构上分析多潘立酮比甲氧氯普胺较少中枢副作用的原因。
第五章酶类药物
第五章酶类药物 第五章酶类药物 第一节药用酶概述 酶是生物催化剂，在生理pH值和温度下具有高度专一的催化活性，能迅速产生高效的特异性反应，随着科技的发展，酶类药物大大地应用到治疗上，如神曲和麦芽等药物，含有能降解糖、脂肪与蛋白质的水解酶，可以用于帮助消化，近几十年来，酶类药物在治疗上有较大的进展。大多数酶制剂为口服剂型，现能由于注射的酶制剂只有细胞色素C、纤溶酶等少数几种。 目前对药用酶的研究热点是，在维持活性状态下的酶蛋白能否被吸收，如何减少药用酶的抗原性问题及新型药用酶的研究等。 一、酶类药物应具备的条件： ①在生理pH值下（中性），具有最高活力和稳定性。如大肠杆菌谷氨酰胺酶最适pH值为5.0，在生理pH值时基本没有活性，所以不能用于人类疾病的治疗。 ②对基质（作用的底物）有较高的亲和力。酶的Km值较低时，只需要少量的酶制剂就能催化血液或组织中较低浓度的基质发生化学反应，从而高效发挥治疗作用。 ③血清中半衰期较长。要求药用酶从血液中清除率较慢，以利于充分发挥治疗作用。
④纯度高，特别是注射用的纯度要求更高。 ⑤免疫原性较低或无免疫原性。酶是蛋白质，所以酶类药物都不同程度存在免疫原问题，可以对酶进行化学修饰降低免疫原性，或者寻求制备免疫原性较低或无免疫原性的酶。 ⑥最好不需要外源辅助因子的药用酶。有些酶需要辅酶或ATP和金属离子方能进行酶反应，在治疗中常常受到限制。 二、药用酶的分类及应用 （一）促进消化酶类：为最早的医用酶，包括蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶等水解酶，乳糖酶。 （二）消炎酶类：溶菌酶，核酸酶等可以移去血块治疗血栓静脉炎等疾病。 （三）与治疗心脑血管疾病有关的酶类：纤维蛋白溶解酶、尿激酶等，这类酶对于溶解血栓有独特效果，可以促进血块溶解，防止血栓的形成。 （四）抗肿瘤的酶类：通过破坏肿瘤细胞所需的代谢物来抑制其生长，L-天冬酰胺酶，可以治疗白血病。 （五）与纤维蛋白溶解作用有关的酶类：链激酶，尿激酶等，血纤维在血液的凝固与解凝过程中有重要作用，提高血液中蛋白水解酶的水平，助于促进血栓的溶解。 （六）其他治疗酶：细胞色素C参与生物氧化的一种有效的电子传递体，用于组织缺氧治疗的急救和辅助用药。 第二节酶类药物的制造过程
生物制药工艺学考试重点
第一章绪论 生物药物：利用生物体、生物组织或其成分、综合应用多学科（生物学与医学﹑生物化学与分子生物学﹑微生物学与免疫学﹑物理化学与工程学和药学）的原理和方法进行加工、制造而成的用于预防﹑诊断﹑治疗疾病的药物。 现代生物药物四大类型： 1、天然生物药物，来自动植物、微生物和海洋生物的天然产物，包括天然生化药物，微生物药物，海洋药物； 2、合成与部分合成的生物药物； 3、基因重组多肽，蛋白类治疗剂； 4、基因药物，以DNA,RNA为基础的基因治疗剂、基因疫苗,反义药物和核酶等。 后两类为新生物技术药物。 生物药物的性质 1、化学构成上，生物药物接近于体内的正常生理物质, 更易为机体所吸收利用和参与人体的正常代谢与调节。 2、药理学上, 生物药物具有更高的生化机制合理性和特异治疗有效性。 3、医疗上，生物药物具有药理活性高、针对性强、毒性低、副作用小、疗效可靠及营养价值高等特点。 4、生物药物的有效成分在生物材料中浓度都很低, 杂质的含量相对较高。 5、生物药物常常是一些生物大分子。它们不仅分子量大, 组成、结构复杂, 而且具有严格空间构象, 以维持其特定的生理功能。 6、生物药物对热、酸、碱、重金属及pH变化较敏感，各种理化因素的变化易对生物活性产生影响。 生物药物的分类 1、天然生物药物 2、基因工程药物 3、基因药物 4、生物制品 组织与细胞的破碎 1）机械破碎：组织捣碎、匀浆器破碎、研磨器破碎 2）物理破碎：超声波、渗透压、温差 3）化学破碎：溶剂处理、表面活性剂处理 4）酶学破碎：自溶法、加酶法 细胞器的分离：差速离心法 某些与细胞结构结合牢固的生物大分子，在提取时采用高 浓度盐溶液（如4mol/L盐酸胍，8 mol/L脲或其他变性剂， 这种方法称“盐解”）。 P15盐析、等电点沉淀（了解）
第5章--酶化学习题精编版
第五章 酶与维生素 一、名词解释 1．米氏常数（Km 值）：当酶反应速度为最大反应速度一半时的底物浓度称为米氏常数。 2. 活性中心：酶分子中能直接与底物分子结合，并催化底物化学反应的部位称为酶的活性中心。 3．辅基：是指以共价键和酶蛋白相结合的辅助因子，不能通过透析除去，需要经过一定的化学处理才能与酶蛋白分开。 4．单体酶：只有一条多肽链，分子量在35000~13000，一般多属于水解酶。如胰蛋白酶、溶菌酶和胃蛋白酶等。 5. 酶的比活力：指每毫克酶蛋白所含的活力单位数。 6．多酶体系：由几种功能相关的酶彼此嵌合而形成的复合体，分子量一般在几百万以上。 7．激活剂：凡能增加酶活性的物质，通称为激活剂。 8．抑制剂：凡是能降低或抑制酶活性但不引起酶变性的物质称为酶的抑制剂。 9．变构酶：某些小分子物质与酶的调解中心相结合，改变酶的构象而使酶的活性发生改变，这种调节酶活性的方式称为变构调节，具有变构调节的酶称为变构酶。 10．同工酶：指能催化相同的化学反应，但其蛋白质的分子结构、理化性质以及免疫学性质不同的一组酶。 11．酶原：有些酶（如消化系酶和凝血酶）在细胞内初合成或分泌时是无活性的，这些有活性的酶的前身称为酶原。 二、填空题 1．酶是 活细胞 产生的，具有催化活性的 蛋白质 或 核酸 。 2．酶具有 高效性 、 专一性 、 作用条件温和 和 受调控性 等催化特点。 3．影响酶促反应速度的因素有 底物浓度 、 酶浓度 、 PH 、 温度 、 激活剂 和 抑制剂 。 4. 与酶催化高效率有关的因素有 邻近效应和定向效应 、 诱底物分子的“张力”和“形变”效应 、 酸碱催化 、 共价催化 、 活性中心的低介电性 等。 5．丙二酸和戊二酸都是琥珀酸脱氢酶的 竞争性 抑制剂。 6．变构酶的特点是：（1） 由多个亚基组成 ，（2） 具有T 态和R 态两种构象 ，它不符合一般的 米氏方程 ，当以V 对[S]作图时，它表现出 S 型曲线，而非 矩形 曲线。它是 寡聚 酶。 8．全酶由 酶蛋白 和 辅助因子 组成，在催化反应时，二者所起的作用不同，其中 酶蛋白决定酶的专一性和高效率， 辅助因子 起传递电子、原子或化学基团的作用。 9．辅助因子包括 辅酶 、 辅基 和 金属离子 等。其中 辅基 与酶蛋白结合紧密，需要 化
酶工程笔记和期末重点
第五章生物药物的酶学分析法 酶学分析法原理：利用酶作为分析工具，测定样品中待测物质含量的方法称作酶法分析。待测物质应是酶的底物，或者是酶的抑制剂、活化剂或酶的辅因子，否则不能采用酶法进行分析检查。 酶法分析可分为终点法和反应速度法。 （一）终点法，又称总变量法 基本原理：利用酶的生物催化反应，使待测物质发生转化，然后测定产物产量或底物残余量，通过定量分析，从而明确待测物质的含量。 可以是单酶反应，也可以是几种酶构成的偶联酶反应。 在生物药物分析中，终点法是最常用的酶法分析。 终点法的条件 必须有专一地作用该被测物质的酶，并能得到它的制品。 能够确定使这种酶反应接近进行完全的条件。 反应中底物的减少或产物的增加或辅酶物质的改变等可以借助某种简单的方法进行测定。 在能满足这些条件的情况下，最好是采用单一酶反应就能进行定量检测。 使用终点法应注意的问题 1．酶的底物专一性： 绝对专一性 相对专一性 立体异构专一性 对于酶法分析来说，最理想的酶是具有绝对专一性的酶。 若样品中存在除待测物质外其他可作为底物的物质时，可利用偶联酶的专一性进行区别定量分析。 2．反应的平衡 对于终点法来说，要求反应接近进行完全，故对不同的酶反应须采取不同的措施使反应进行到接近完全。 若酶反应平衡十分偏向进行方向，则可方便的用终点法进行检测，不需进行任何处理。若反应的平衡并不十分偏向进行方向，或偏向逆方向，那么由于反应不能完全，因而也就不能正常定量。为了解决这一问题，通常采取以下一些措施： 对于双底物反应尽可能提高第二底物的浓度 对氧化还原之类与H＋有关的反应要选择适当的pH 设法除去产物 用具有不同平衡常数的辅酶类似物代替原有的辅酶 和第二底物的再生系统偶联，则第一底物可能完全转化为反应产物 3．反应液中的酶量 对于一个具体的测定来说不同的酶反应有不同的Km值，通过米氏方程和均相溶液反应的动力学推算和分析，可以大致得到如下的结论： 对于单酶反应的酶法分析：所加入的酶量（u/ml）相当于Km（mmol） 对于偶联反应的酶法分析，所加入的酶量如下： 第一反应为酶量（u/ml）相当于Km1（mmol） 第二反应为酶量（u/ml）相当于（1～2）×Km2（mmol）
生物化学-酶化学
生物化学-酶化学 生物化学-酶化学 第五章酶化学 一：填空题 1.全酶由________________和________________组成，在催化反应时，二者所起的作用不同，其中 ________________决定酶的专一性和高效率，________________起传递电子、原子或化学基团的作用。 2.辅助因子包括________________，________________和________________等。其中________________与酶蛋白结合紧密，需要________________除去，________________与酶蛋白结合疏松，可用________________除去。 3.酶是由________________产生的，具有催化能力的________________。 4.酶活力的调节包括酶________________的调节和酶________________的调节。 5.T.R.Cech和S.Altman因各自发现了________________而共同获得1989年的诺贝尔奖(化学奖)。 6.1986年，R.A.Lerner和P.G.Schultz等人发现了具有催化活性的________________，称________________。 7.根据国际系统分类法，所有的酶按所催化的化学反应的性质可以分为六大类________________， ________________，________________，________________，________________和________________。 8.按国际酶学委员会的规定，每一种酶都有一个唯一的编号。醇脱氢酶的编号是EC1.1.1.1，EC代表 ________________，4个数字分别代表________________，________________，________________和 ________________。
生物药物分析第五章作业答案
A.待测物质应是酶的底物 B.待测物质是酶的抑制剂 C.待测物质是活化剂 D.待测物质是酶底物复合物 正确答案： D 试题解析：底物复合物是酶与底物相结合产生的中间产物。所以答案为 D。 A.产物的含量 B.底物复合物的含量 C.底物残存量 D.物的产量 正确答案： B 试题解析：终点法的原理：利用酶的生物催化反应，使待测物质发生转化，然后测定产物产量或者底物产量或者底物残存量，通过定量分析，从而明确待测物质的含量。所以答案为B。 A.反应产物的促进性 B.酶促反应的平衡性 C.反应液中加入的酶量和酶促反应时间 D.酶对底物的特异性 正确答案： A 试题解析：采用终点法进行生物药物分析的注意事项:(1)酶对底物的特异性； (2)酶促反应的平衡性； (3)反应液中加入的酶量和酶促反应时间； (4)反应产物的抑制。所以答案为 A。 A.胰蛋白酶 B. 甲状腺素 C.辣根过氧化物酶 D.H2O2-邻联甲苯胺 正确答案： C 试题解析：在酶免疫测定法中最常用的标记物：辣根过氧化物酶(HRP)，碱性磷酸酶(AP)。所以答案为 C。 A.底物 B.产物 C.辅酶 D. 中间产物 正确答案： D 试题解析：单酶反应定量法需测量底物减少量、产物增加量和辅酶变化量。所以答案为 D。 A.360nm
C.340nm D.260nm 正确答案： C 试题解析：还原型辅酶 I (NADH) 和还原型辅酶 II (NADPH) 在 340nm 处有特征性吸收峰。所以答案为 C。 A.NAD B.NADP C.氧化型色素 D D.氧化型色素 H 正确答案： D 试题解析：除 NAD 或者 NADP 为辅酶的脱氢酶类被广泛用作指示剂以外，还有些酶可用作指示剂。例如，参预某些色素氧化还原的酶就可用作指示剂。其基本原理是用氧化酶氧化被测物，生成 H2O2，而 H2O2 在过氧化物酶作用下，与 4-氨基安替比林(还原型色素DH2) 和酚类衍生物反应生成醌亚胺色素(氧化型色素 D)。所以答案为 D。 A.循环放大法 B.终点法 C.普通反应速度法 D.特殊反应速度法 正确答案： A 试题解析：酶循环放大法仍然利用酶对底物的专一性，使微量的底物“增幅放大”以达到定量分析目的。所以答案为 A。 A.换反应 B.置换反应 C.循环反应 D.指示反应 正确答案： B 试题解析：酶循环放大分析法是一种超微量分析法，分三个步骤：①转换反应,②循环反应,③指示反应。所以答案为 B。 A.双抗体夹心法 B.竞争法 C.双抗原夹心法 D.间接法 正确答案： B 试题解析：在酶联免疫吸附测定法中，用于抗原测定的类型有双抗体夹心法、双位点一步法和竞争法；而用于抗体测定的类型有间接法、双抗原夹心法和竞争法。既能用于抗原测定又能用于抗体测定的类型是竞争法。所以答案为 B。 A.假阴性结果