菊花的组织培养
植物的组织培养-菊花
05
结论与展望
实验结论
组织培养技术成功应用于菊花繁殖，通 过无菌操作和适宜的培养条件，可以诱 导菊花愈伤组织形成和分化，进而获得
完整的植株。
实验结果表明，适宜的培养基和激素组 合对菊花组织培养具有显著影响，其中 MS培养基和适量的生长素与细胞分裂 素组合是最适合菊花组织培养的培养条
件。
此外，可以进一步优化培养条件和探索更高效的繁殖方法，提高菊花组织培养的效率和成功 率。同时，加强与其他学科的交叉研究，推动菊花组织培养技术的创新发展。
THANKS
感谢观看
培养过程与管理
总结词
控制适宜的培养条件并定期观察管理
VS
详细描述
适宜的培养条件是菊花组织培养成功的关 键因素之一。在培养过程中，需要控制适 宜的温度、湿度、光照、气体等条件，以 保证外植体的正常生长和发育。同时，需 要定期观察和管理，及时调整培养条件和 发现并解决问题，以确保组培的成功进行 。
04
根据所培养植物的种类和实验需求， 选择适宜的培养基配方。
根据培养基的类型和植物生长的需求， ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ整培养基的酸碱度。
制备培养基
按照所选培养基配方，精确称量各种 成分，按照规定的顺序加入，混合均 匀后进行灭菌处理。
培养条件及其控制
温度控制
光照控制
根据所培养植物的种类和生长阶段，保持 恒定的温度，以满足植物生长的需求。
药物等。
菊花的组织培养研究背景
菊花是中国传统名花之一，具有 丰富的品种和花色。
菊花的组织培养研究始于上世纪 80年代，随着技术的不断发展 和完善，已经实现了菊花的快速
繁殖和种质保存。
目前，菊花的组织培养技术已经 广泛应用于园艺、花卉产业等领
菊花组织培养方法(一)
菊花组织培养方法(一)菊花组织培养菊花是一种常见的观赏植物，而进行菊花组织培养可以促进菊花的繁殖和改良。
本文将详细介绍菊花组织培养的方法。
材料准备进行菊花组织培养需要以下材料：•菊花种子或植株•无菌的培养基•移液器•培养皿•剪刀和火柴（用于灭菌）菊花种子无菌播种法步骤1.对菊花种子进行消毒处理，将种子放在75%乙醇中浸泡5分钟，然后用无菌的蒸馏水洗净种子表面。
2.将种子放在培养皿内，培养皿事先用75%乙醇消毒并晾干。
加入适量无菌的培养基。
3.再将培养皿密封，放入25℃，避光昼夜温度（12小时黑暗+12小时光照）条件下培养。
菊花组织培养步骤1.将菊花叶片进行消毒处理，将新鲜的菊花叶片浸泡在75%酒精或无菌水中，然后用火进行消毒。
2.将叶片剪成小块，通常为直径0.5-1cm的圆形叶片。
3.将叶片置于含有植物生长激素的培养基中进行培养。
4.将培养皿密封，置于温度为25℃，避光昼夜温度（12小时黑暗+12小时光照）条件下培养。
菊花愈伤组织培养步骤1.将菊花叶片进行消毒处理，将新鲜的菊花叶片浸泡在75%酒精或无菌水中，然后用火进行消毒。
2.将叶片剪成小块，通常为直径0.5-1cm的圆形叶片。
3.将叶片置于含有高浓度植物生长激素的培养基中进行培养。
4.将培养皿密封，置于温度为25℃，避光昼夜温度（12小时黑暗+12小时光照）条件下培养。
总结菊花组织培养是一种重要的技术，可以促进菊花的繁殖和改良，实现优质菊花的生产。
通过菊花种子无菌播种法、菊花组织培养和菊花愈伤组织培养等方法，可以成功进行菊花组织培养。
注意事项•消毒操作必须严格进行，以避免在培养过程中产生污染。
•培养过程中要避免培养基表面的水分蒸发，应定时加入水分。
•培养过程中要避免光照强烈，以免影响菊花的正常生长。
•需要进行多次次的分离和传代，以保持菊花组织的纯度和优良性状。
结语通过本文的介绍，我们可以了解到菊花组织培养的方法以及注意事项，同时也能够意识到菊花组织培养在优质菊花的生产中的重要性。
菊花的组织培养课件(经典)
光照要求
每天光照时间应控制在12-16小时， 光照强度为2000-3000lx，以提供 充足的光照条件，促进菊花组织生 长和分化。
湿度控制
培养室内相对湿度应保持在70%80%之间，以防止培养物失水或过 度吸水。
营养液成分调整策略
01
02
03
大量元素调整
根据菊花生长需求，适时 调整营养液中氮、磷、钾 等大量元素的含量和比例。
课程结束后一周内提交。
报告格式
其他要求
采用书面形式，字数不少于1000字，需包 含标题、正文及结论等部分。
报告需真实反映学生的学习情况和自我感 受，不得抄袭或剽窃他人成果。
THANKS
感谢观看
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02
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快速繁殖
利用组织培养技术可以快速繁 殖出大量优质种苗，满足市场
需求。
种质保存
通过组织培养技术可以长期保 存菊花的种质资源，避免种质
退化。
遗传转化
利用组织培养技术可以将外源 基因导入菊花细胞，实现遗传
转化和基因工程育种。
新品种选育
通过组织培养技术可以诱导菊 花产生变异，从中选育出优良
新品种。
考核内容
涵盖课程讲授的所有知识点，包括菊花的生物学特性、组织培养 的基本原理、技术操作等。
成绩评定
结合学生的出勤率、课堂表现、实验操作能力及考试成绩等多方 面因素进行综合评定。
学生自我评价报告提交要求
报告内容
提交时间
学生需对自己在课程学习过程中的表现进 行全面评价，包括知识掌握情况、实验将抗病虫害相关基因导入菊花
细胞，提高植株的抗病虫害能力。
06
总结回顾与课程考核要求
关键知识点总结回顾
菊花的组织培养
基因编辑
通过组织培养技术结合基因编辑技术， 可以对菊花的基因进行精确编辑，提 高菊花的抗性、产量和品质。
转基因技术
通过组织培养技术，可以将外源基因 导入菊花中，实现转基因菊花的培育， 为新品种的研发提供技术支持。
在育种上的应用
品种改良
通过组织培养技术，可以对菊花品种进 行改良，提高其抗性、产量和品质，满 足市场需求。
菊花组织培养
目录
• 引言 • 菊花组织培养的基本流程 • 影响菊花组织培养的因素 • 菊花组织培养的应用前景 • 菊花组织培养的挑战与展望 • 参考文献
01
引言
组织培养技术的简介
01
组织培养是一种通过人工模拟植 物体内环境，将植物的离体组织 或细胞培养成完整植株的技术。
02
该技术可用于快速繁殖、品种改 良、种质资源保存等方面，具有 高效、可控的特点。
织的生长和发育。
规模化生产
通过改进设备和工艺， 实现菊花组织培养的规
模化生产。
未来研究方向与展望
基因编辑技术的应用
利用基因编辑技术，定向改良菊花的某 些性状，提高其观赏价值和抗逆性。
种质资源保护与创新
通过组织培养技术，保存珍稀、濒危 的菊花种质资源，并进行创新利用。
次生代谢产物的生产
利用组织培养技术，生产菊花中的有 效成分，为医药、食品等领域提供原 料。
快速繁殖优良品种
01
02
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快速繁殖
通过组织培养技术，可以 在短时间内快速繁殖出大 量优良品种的菊花，提高 生产效率和品质。
保持优良性状
组织培养繁殖的菊花能够 保持优良性状，避免传统 繁殖方式中优良性状的丢 失。
实现规模化生产
通过组织培养技术，可以 实现规模化生产，满足市 场需求，降低生产成本。
【高中生物】高中生物知识点：菊花的组织培养
【高中生物】高中生物知识点：菊花的组织培养菊花的组织培养：1.植物组织培养(1)原理：植物细胞具有全能性。
（2）方法：愈伤组织培养（固体培养基）和细胞悬浮培养（液体培养基）。
(3)基本过程① A代表一个孤立的组织、器官或细胞。
植物细胞具有全能性是它能被培养成D细胞的根本原因。
②b表示愈伤组织，它与a相比分化程度低，全能性高。
③ 如果a是花药，D是单倍体植株。
如果用秋水仙碱处理，可以获得染色体加倍的植株(4)操作流程MS固体培养基的制备：① 各种母液的配制→ 培养基的制备→ 绝育↓②培养基由大量元素、微量元素、有机成分组成③ 在菊花的组织培养基中，植物激素不可添加，因为它容易在短时间内培养外植体的消毒：用70％的酒精和0.1％的氯化汞溶液对外植体进行消毒↓接种：接种过程中插入外植体时形态学上端朝上，每个锥形瓶接种6-8块外植体。
外植体↓ 接种与细菌接种相似。
操作步骤相同，都需要无菌操作。
培养：接种后的锥形瓶应诙放在无菌箱中进行培养，并定期进行消毒，保持适宜的温度和光照↓移栽：将生根的苗从锥形瓶中移至消过毒的珍珠岩或蛭石中生活一段时间，苗健壮后再移至土中↓栽培2.示例：菊花组织培养（1）菊花的选材：未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。
（2）过程：知识点拨：1.影响植物组织培养的因素：①不同植物组织培养的难易程度差别很大。
② 激素调节。
2、肉汤培养基以有机营养为主，ms培养基则需提供大量无机营养。
知识发展：1、植物激素与组织培养生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、去分化和再分化的关键激素。
它们的功能和特点如下：①在生长素存在的情况下，细胞分裂素的作用呈现加强的趋势。
② 结果因使用顺序而异，如下所示：使用顺序实验结果先使用生长素，后使用细胞分裂素它有利于细胞分裂，但细胞不分化先使用细胞分裂素，后使用生长素细胞分裂和分化同时使用分化频率增加③用量比例不同，结果也不同（2）在组织培养中，合成激素被用来代替天然激素，因为植物中有相应的酶分解天然激素，但没有相应的酶分解合成激素。
菊花的组织培养
实验具体操作过程
2、配置培养基 ①定容 ②调PH ③培养基的分装
（二）外植体消毒
1、选材：菊花茎段，取生长旺盛的嫩枝
2、消毒
①流水冲洗 菊花茎段用流水冲洗后可少许洗衣粉，用软刷 轻轻刷洗，并在流水下冲洗20min左右。
②酒精处理
用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入体 积分数为70％的酒精中摇动2－3次，持续6－ 7s，立即将外植体取出，在无菌水中清洗。
③消毒液处理 取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分， 放入质量分数为0.1％的氯化汞溶液中1－2min， 取出后在无菌水中至少清洗3次，漂净消毒液。
（三）接种
1、接种室消毒 污染的主要来源是空气中的细菌和孢子，接种室消 毒是至关重要的。用70％的酒精喷雾使空气消毒， 酒精或新洁尔灭搽洗工作台并用紫外线照射20分钟。
•观察时不打开封口膜 •手持锥形瓶锥形瓶观察时正握 •发现染菌外植体，及时转瓶，打开封口膜前先 高压蒸汽灭菌
三、课题延伸
1、一般来说，容易进行无性繁殖的植物，也 容易进行组织培养 2、实例：芦荟、豆瓣绿、秋海棠、月季
无菌条件如何保证？Байду номын сангаас
需要保证无菌 条件步骤
关键操作
培养基及实验 •高压蒸汽灭菌 器材的灭菌 •灭菌干燥后直接拿到无菌操作台中
外植体的消毒 •酒精、升汞、无菌水彻底清洗
接种的 无菌操作
培养箱中的培 养
•始终在酒精灯旁进行 •每次使用器械后，都需要浸泡在95%的酒精中 •每次使用器械前，都需要用火焰灼烧灭菌 •操作过程中避免双手从培养皿上方移动 •每瓶内接种材料不宜过多
2、无菌操作要求 操作要在酒精灯火焰旁完成，每次使用器械后，都 需要用火焰灼烧灭菌，接种后立即盖好瓶盖。
专题3.1 菊花的组织培养
课题1 菊花的组织培养★课题目标1、熟悉植物组织培养的基本过程2、理解细胞分化的概念及离体植物细胞的脱分化和再分化3、通过联系农业生产实际，培养学生活学活用，理论联系实际的能力★课题重点植物组织培养过程中使用的无菌技术★课题难点植物组织培养过程中使用的无菌技术★教学方法启发式教学★教学工具多媒体课件★教学过程（一）引入新课上节课我们探讨学习了如何从土壤中分离出尿素分解菌和纤维素分解微生物及其计数方法。
这节课我们来学习研究植物的组织培养技术。
（二）进行新课1．基础知识知识回顾：联系“植物细胞工程”，回答下列问题：1．1具有某种生物全套遗传信息的任何一个活细胞，都具有发育成完整个体的能力，即每个生物细胞都具有全能性。
但在生物体的生长发育过程中并不表现出来，这是因为在特定的时间和空间条件下，通过基因的选择性表达，构成不同组织和器官。
1．2植物组织培养技术的应用有：实现优良品种的快速繁殖；培育脱毒作物；制作人工种子；培育作物新品种以及细胞产物的工厂化生产等。
活动1：阅读“植物组织培养的基本过程”，讨论并完成以下问题：1．3细胞分化：个体发育中细胞在形态、结构和生理功能上出现稳定性差异的过程。
〖思考1〗细胞分化是一种持久性的变化，它有什么生理意义？使多细胞生物体中细胞结构和功能趋向专门化，有利于提高各种生理功能的效率。
1．4愈伤组织是通过细胞分裂形成的，其细胞排列疏松而无规则，高度液泡化呈无定形状态的薄壁细胞。
〖思考2〗填表比较根尖分生组织和愈伤组织的异同：1．5植物组织培养的过程可简单表示为：活动2：阅读“影响植物组织培养的条件”，讨论并完成以下问题：1．6材料：植物的种类、材料的年龄和保存时间的长短等都会影响实验结果。
菊花组织培养一般选择未开化植物的茎上部新萌生的侧枝作材料。
〖思考3〗一般来说，容易进行无性繁殖的植物容易进行组织培养。
〖思考4〗选取生长旺盛嫩枝进行组培的原因是嫩枝生理状态好，容易诱导脱分化和再分化。
菊花的组织培养实验设计
菊花的组织培养实验设计引言概述菊花是一种常见的观赏植物，其花朵色彩丰富，形态优美，深受人们喜爱。
为了研究菊花的生长发育规律以及促进其繁殖，进行菊花的组织培养实验是一种有效的方法。
本文将详细介绍菊花组织培养实验的设计。
一、实验材料准备1.1 选择适宜的菊花组织在进行菊花组织培养实验时，需要选择健康、无病虫害的菊花植株作为实验材料。
可以选择嫩芽、叶片或花蕾等组织进行培养。
1.2 准备无菌工作环境在进行组织培养实验时，需要准备无菌工作环境，包括无菌培养室、无菌操作台、无菌培养器具等，以确保实验的无菌条件。
1.3 配制培养基根据菊花组织培养的需要，可以选择适宜的培养基，如MS培养基、B5培养基等，并添加适当的植物生长调节剂，如激素等。
二、组织切割和接种2.1 组织切割将选取的菊花组织进行切割，保持组织的完整性，避免受损，以提高组织培养的成功率。
2.2 组织接种将切割好的菊花组织放入含有培养基的培养器具中，进行组织接种，确保组织与培养基充分接触，促进组织生长。
2.3 培养条件控制在组织接种后，需要控制培养条件，如光照、温度、湿度等，以促进组织生长和分化。
三、培养过程管理3.1 培养器具清洁在培养过程中，需要定期清洁培养器具，避免细菌和真菌的污染，影响组织的生长。
3.2 培养基更换随着培养时间的推移，培养基中的营养物质会逐渐耗尽，需要定期更换新的培养基，以维持组织生长所需的营养。
3.3 组织生长监测在培养过程中，需要定期观察和记录组织的生长情况，包括组织的形态、颜色、生长速度等，以及时调整培养条件。
四、组织分化和再生4.1 组织分化诱导通过调节培养基中植物生长调节剂的浓度和种类，可以诱导菊花组织进行分化，形成新的器官或植株。
4.2 再生植株培养对分化成功的组织进行再生培养，培养出新的植株，为菊花的繁殖提供新的途径。
4.3 植株移栽将再生的植株移栽到适宜的生长环境中，进行后续的生长观察和繁殖。
五、实验结果分析5.1 记录实验数据在实验过程中，需要详细记录实验数据，包括组织的生长情况、分化情况、再生植株数量等，以便后续的结果分析。
原创4：3.1 菊花的组织培养
器官要区别对待
A.①②③
B.①②③④
C.①③④
D.①②④
【解析】无菌操作是植物培养技术的关键,如果灭菌不 好就会导致整个培养工作的失败。对于整个操作过程
中凡是和植物组织接触的材料、用具和试剂都要进行 灭菌或消毒,但不同的用具、材料要用不同的方法进行 灭菌,如培养基的灭菌要用高压蒸汽灭菌法,而植物组织 要用消毒液进行灭菌而不能用高压灭菌。
练习 1.下列关于植物组织培养的叙述中,正确的是( B )
A.为了提供营养和调节渗透压,培养基中应添加葡萄 糖
B.培养液中的生长素和细胞分裂素会影响愈伤组织 的生长和分化
C.器官、组织的细胞在不离体的情况下必须通过脱 分化才能形成愈伤组织
D.同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得 的愈伤组织的基因是相同的
1.针对培养基应进行高压蒸汽灭菌,针对外植体应先 后使用70%酒精及0.1%的氯化汞予以消毒。如玻 璃器皿、金属用具进行干热杀菌,操作中常需灼烧 灭菌。
2.操作者的手或外植体等进行消毒,而不进行灭菌, 因灭菌所用的强烈理化方法会对操作者或外植体造 成伤害。
3.容易进行营养繁殖的植物细胞,其全能性容易表达 ,易进行植物组织培养。
实验结果 有利于① 细胞分裂 ,但细胞 ② 不分化
细胞③ 既分裂,又分化 ④ 分化 频率提高 促进愈伤组织的生长 有利于根的形成
有利于芽的形成
小结 1.植物组织培养的理论基础是细胞的全能性。全能性表达的条件 包括离体状态、无菌操作、适宜物质的诱导和调节。 2.无菌技术包括对培养基和植物材料(外植体)的灭菌和消毒。 3.在植物组织培养进行异养的状况下,大多植物不能进行光合作用 合成糖类,因此需要在培养基中添加糖类(蔗糖)作为碳源和能源物 质,同时糖对保持培养基中的渗透压也有重要作用。
《菊花的组织培养》课件
菊花组织培养案例
菊花种子萌发的组织培养
利用组织培养技术，可实现菊花 种子取代传统方式萌发的目的。
菊花组织快速繁殖的组织 培养
通过组织培养技术，可以将菊花 的种子迅速繁殖，提高育种效率。
菊花细胞的悬浮培养
通过菊花细胞的悬浮培养技术， 可以在短时间内大量生产和收获 菊花组织。
常见问题及解决方案
1 细胞污染
《菊花的组织培养》PPT 课件
本课程将介绍如何进行菊花的组织培养。组织培养可以有效地促进植物生长 并获得质量更高的植物。让我们一起开始吧！
概述
什么是组织培养？
组织培养是指利用外界因素来控制细胞组织生 长、分化和发育的一种方法。
组织培养的意义
组织培养可用于繁殖难以育种的珍稀植物，也 可以研究细胞分裂及开发新品种等。
组织培养的发展趋势
未来的发展趋势是要提高组织培养技术的效率 和实用性，广泛应用于众多领域。
进行无菌操作可以避免细 胞污染，严格控制实验条 件。
2 培养基配制不当
按照具体的实验步骤制备 营养液，不同的植物需要 不同的培养基。
3 培养条件不合适
掌握适宜的环境温度、湿 度和通气量等因素，即可 提高菊花的培养成功率。
结语
菊花组织培养的应用前景
组织培养技术在植物学、农业及医学等领域有 广泛应用，将来有望推动更多领域的发展。
菊花的组织培养方法
1
材料准备
2
玻璃器皿、无菌培养基等实验用品。
3
培养基配制
பைடு நூலகம்
4
按照一定比例调配不同种类的营养物质，
如有机物、水、微量元素、激素等。
5
基本步骤
细胞分离、培养基配制、培养条件设置、 菊花细胞的悬浮培养等。
菊花的组织培养实验设计
菊花的组织培养实验设计引言概述：菊花的组织培养是一种常见的实验方法，它可以用来研究菊花的生长发育、遗传变异以及植物组织的再生能力等。
本文将介绍一种菊花的组织培养实验设计，包括实验材料的准备、实验步骤的安排以及实验结果的分析等。
一、实验材料的准备1.1 菊花的种子：选择健康、无病虫害的菊花种子作为实验材料。
1.2 培养基：准备含有适当濃度的植物激素的培养基，如MS培养基。
1.3 高温消毒器具：为了防止细菌和真菌的污染，需要准备高温消毒的器具，如高温培养箱。
二、实验步骤的安排2.1 种子表面消毒：将菊花的种子表面进行消毒处理，以杀灭种子表面的细菌和真菌。
2.2 菊花的离体培养：将消毒后的种子放置在含有培养基的培养皿中，进行离体培养。
2.3 培养条件的调节：调节培养皿中的温度、光照和湿度等条件，以促进菊花的生长和发育。
三、实验结果的分析3.1 菊花的生长情况：观察菊花在培养基上的生长情况，包括根系的形成、茎的生长以及叶片的展开等。
3.2 菊花的再生能力：观察菊花在培养基上的再生能力，包括新芽的形成、花蕾的发育以及花朵的开放等。
3.3 菊花的遗传变异：通过观察不同菊花品种在培养基上的生长情况和形态变化，分析菊花的遗传变异情况。
四、实验注意事项4.1 实验环境的准备：实验室应保持整洁，避免细菌和真菌的污染。
4.2 实验操作的规范：实验操作要严格按照实验步骤进行，避免误操作导致实验结果的偏差。
4.3 实验结果的记录：实验过程中要及时记录实验结果，以便后续的数据分析和讨论。
综上所述，本文介绍了一种菊花的组织培养实验设计，包括实验材料的准备、实验步骤的安排以及实验结果的分析等。
通过这种实验方法，可以深入研究菊花的生长发育、遗传变异以及植物组织的再生能力等方面的问题。
希望本文能为菊花的组织培养实验提供一定的参考和指导。
菊花常用的组培方法
菊花常用的组培方法菊花是一种重要的观赏植物，不仅具有美丽的花朵和丰富的品种，而且可以应用于药用和食用等多个领域。
为了满足人们对菊花苗种质的需求和加速菊花育种研究进程，组培技术被广泛用于菊花的育种和繁殖。
本文介绍了菊花常用的组培方法，帮助读者更好地了解菊花组培。
一、愈伤组织培养法愈伤组织培养法是菊花组培研究中最常用的方法之一，也是最基础的组培方法。
该方法是将菊花组织通过切割、去皮等手段形成小型的组织片段，再将其培养在含有适宜营养物质和生长激素的培养基中，让其形成小型愈伤组织并快速生长繁殖。
愈伤组织培养常用的培养基有MS、B5、N6等，最主要的激素为2,4-D、NAA、IBA、TDZ等。
在菊花愈伤组织培养过程中，应注意菌株选取、外植体处理、培养基配方、温度、光周期等因素的控制。
二、叶片和茎段组织培养法叶片和茎段组织培养法是将菊花的叶片或者茎段切割成小段，通过营养液或者培养基中适宜的生长激素刺激其生长而得到苗。
这种方法的最大优势是能够利用大量已有菊花株的组织进行繁殖，且培养的时间短。
这种方法同样需要注意菌株的选择、外植体的处理、培养基的配方等因素的控制。
三、花粉培养法花粉培养法是通过将菊花的花粉切割种植在含有营养物质的培养基上，让花粉萌发并生长为菊花幼苗的方法。
在花粉培养过程中，需要注意花粉的提取、消毒和筛选，以及培养基的配方和温度的控制。
四、微繁殖法微繁殖法是通过将菊花的细胞分化成愈伤组织细胞，再通过诱导分化为芽或根，将其形成小苗并逐步培育成成苗的方法。
此方法能够得到大量质量较高的菊花苗，而且操作简单，对于推广和产业化应用有很大的意义。
组培技术为快速育种和大规模生产高质量菊花苗提供了核心技术支持，应当得到更深入的研究和广泛的应用。
菊花组培技术在菊花栽培和育种应用中的优势已经得到了广泛认可。
虽然不同的组培方法略有差异，但基本原理是相似的，都是在营养基质中通过适宜生长激素的加入利用组织培养达到繁殖和育种的目的。
实验十二菊花的组织培养
实验十二菊花的组织培养背景知识1. 植物组织培养，即利用植物细胞的全能性，在无菌和人工控制的环境条件下，利用适当的培养基，对离体的植物器官、组织、细胞或原生质体进行培养，获得再生的完整植株或生产相关产品的技术。
植物组织培养广泛应用于植物快速繁殖、脱毒（脱除植物病毒）、种质资源保存、单倍体或多倍体育种、杂交、诱变等方面，也是遗传学、分子生物学等其他生物学科研究的一种基本技术。
2. 菊花，菊科菊属多年生草本，高60-150厘米。
茎直立，分枝或不分枝，被柔毛。
叶卵形至披针形，长5-15厘米，羽状浅裂或半裂，有短柄，叶下面被白色短柔毛。
头状花序直径2.5-20厘米，大小不一。
总苞片多层，外层外面被柔毛。
舌状花颜色各种。
管状花黄色。
对菊花进行组织培养，既可快速繁殖，又可使其脱毒而提高产量和品质。
活动目标1．基本目标（1）理解植物组织培养的原理。
（2）叙述组织培养过程中，植物从外植体发育到完整植株的变化过程。
（3）建立无菌概念，学习无菌技术。
（4）学习并尝试植物组织培养的技术与方法。
2．发展目标（1）体验严谨细致的生物学实验操作。
（2）感受科学技术在生产实践中的重要价值。
（3）通过审视自己动手操作的过程，总结分析实验成败原因。
实验准备1．实验原理（1）离体的植物器官、组织、细胞或原生质体，在无菌和人工控制的环境条件下，处于适当的培养基中，可以经过脱分化形成愈伤组织，愈伤组织经过再分化，形成完整植物体。
在植物组织培养的各个阶段中，植物激素的种类、用量、比例需进行适当调整已达成不同培养目标。
（2）无菌技术。
凡是暴露在（未经处理的）空气中的物体，曾经接触过自然水源的物体都是有菌的。
培养所用的培养基含有植物细胞生长所必需的各类营养物质，也使各种细菌、真菌易于滋生繁殖。
组织培养必须采用无菌技术，在取材、接种、培养的整个过程中，必须严格进行培养基和培养材料的灭菌，同时，严格进行无菌操作，防止污染。
2．材料、试剂、器具（1）材料：菊花，可进行生根培养的菊花试管苗。
高二生物 3.1菊花的组织培养
高二生物 3.1菊花的组织培养
5
应用领域
4、突变育种 采用组织培养可以直接诱变和筛 选出具抗病、抗盐、高赖氨酸、高蛋白等优良性状 的品种。
5、基因工程 基因工程主要研究DNA的转导， 而基因转导后必须通过组织培养途径才能实现植株 再生。
6、生物制品 有些极其昂贵的生物制品，如抗 癌首选药物--紫杉醇等，可通过组织培养方式生产。
高二生物 3.1菊花的组织培养
培养基配制(I)—母液配制：
按照MS培养基成分表, 配制分别配制培养基的
母液。 1、大量元素母液(10倍液)
分别称取10倍用量的各种大量无机盐，依次溶 解于大约800ml热的（60-80℃）蒸馏水中。（一 种成分完全溶解后再加入下一种，最后加水，定容 至1000ml后装入试剂瓶中，冰箱内贮存备用）。
3
离体（in vitro)条件下利用人工培养条件 在无菌情况下培养、生长、发育再生出完整 植株的过程。
1958年，英国科学家Steward 等用胡萝 卜根的愈伤组织细胞进行悬浮培养，成功诱 导出胚状体并分化为完整的小植株，不但使 细胞全能性理论得到证实，而且为组织培养 的技术程序奠定了基础。
高二生物 3.1菊花的组织培养
15
植物组织培养营养条件-培养基 (Culture Medium)
培养基是植物组织培养的重要基质。 培养基的成分主要可以分水、无机盐、 有机物、天然复合物、培养体的支持材 料等五大类。
高二生物 3.1菊花的组织培养
16
国际上流行的培养基有几十种，常 用的培养基有：
MS培养基、B5培养基、White培养基、 N6培养基、KM-8P培养基
③ 3-4周后完全形成愈伤组织状态（脱分化） 组织块失去色素
课题菊花的组织培养
是
。
答案：（1） aB Ab （2）纤维素酶 （3）聚乙二醇 （4）愈伤组织 （5）2 甲、乙两烟草品种旳花粉 48 AaBb 7/16
专题知识归纳
菊花旳组织培养
植物组 织培养
月季旳花药培养
概念：
原理：细胞旳全 基础：
能性
条 件 ： 脱分化
再分化
植物组织培养旳基本过 外植体
愈伤组织
胚状体
程：
外植体旳选择
• 2.你能说出MS培养基中多种营养物质旳作用吗？ 同专题2中微生物培养基旳配方相比，MS培养基 旳配方有哪些明显旳不同？
提醒：微量元素和大量元素提供植物细胞生活所 必需旳无机盐；蔗糖提供碳源，同步能够维持细 胞旳渗透压；甘氨酸、维生素等物质主要是为了 满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响 后所产生旳特殊营养需求。微生物培养基以有机 营养为主。与微生物旳培养不同，MS培养基则需 提供大量无机营养，无机盐混合物涉及植物生长 必须旳大量元素和微量元素两大类。
• 取甲乙两品种旳花粉分别培养成植株，将它们旳叶肉细胞制成原 生质体，并将两者相混，使之融合，诱导产生细胞团。然后，放 到不小于800勒克斯光照下培养，成果有旳细胞团不能分化，有 旳能分化发育成植株。请回答下列问题：
• （1）甲、乙两烟草品种旳花粉旳基因型分别为 和 。
• （2）将叶肉细胞制成原生质体时，使用 破除细胞壁。
• 3．基因型为AaBb旳水稻（24条染色体）旳花药经过无菌操作， 接入试管后，在一定条件下培养形成试管苗。
• （1）愈伤组织是花粉细胞不断分裂后形成旳不规则旳细胞团，
愈伤组织形成中，必须从培养基中取得
和小分子有机
物等营养物质。
• （2）要增进花粉细胞分裂生长，培养基中应有
3.1菊花的组织培养
大量元素：C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S 微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co 有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖 等
培养基中的各种成分的作用是什么？
大量元素和微量元素提供植物细胞需要 的各种无机盐；蔗糖提供碳源的同时维 持细胞渗透压；甘氨酸、维生素等物质 主要是满足离体植物细胞的特殊营养物 质需求
专题3 植物组织培养技术
课题一 菊花的组织培养
细 胞 分裂
细 胞 分 化
一、基础知识 （1）细胞的分化
概念： 在个体发育中，相同细胞的后代在 形态、结构、生理功能上发生稳定 性差异的过程 .
本质：基因选择性表达
细胞分化的特点： （1）持久性：
是一种持久性的变化，它发生在生物体的整 个生命过程中,在胚胎期达到最大限度
四、实验操作
（哪6步？） 1、配制各种母液（大量元素、微量元素 各浓缩多少倍？用量较小的有机物呢？）
2、配制培养基（菊花组培是否添加植物激
素？）
制备MS固 体培养基
3、灭菌（哪种灭菌方法？）
外植体消毒
接种
流水冲洗—无菌纸吸干—70%酒精—无
菌水冲洗—无菌纸吸干—0.1%氯化 培 养
注 将直菊意接汞 （花接移流—茎种栽无水段时到菌是插的土水为入各壤冲消培种中洗毒养无吗至吗基菌？少？时操三能特作次消别。之毒应上的注是意什什么么？？
答：每种材料或配方至少要做一组以上的重复。 设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养 基的锥形瓶，与接种操作后的锥形瓶一同培养， 用以说明培养基制作合格，没有被杂菌污染。
结果分析与评价
（一）对接种操作中污染情况的分析 （二）是否完成了对植物组织的脱分化和再分化 （三）是否进行了统计、对照与记录 （四）生根苗的移栽是否合格
菊花的组织培养精心设计
菊花的组织培养精心设计简介菊花是一种常见的花卉，具有丰富的花形和丰富的花色，备受人们喜爱。
为了满足市场对优质菊花的需求，培育高质量的菊花品种成为了菊花生产的重要环节之一。
本文将介绍菊花的组织培养技术，并提供一套精心设计的菊花组织培养方案。
菊花的组织培养技术菊花的组织培养是利用植物的组织细胞为材料，通过培养基和适当的生长条件，快速繁殖出大量相同的菊花植株。
菊花的组织培养可以有效地提高繁殖效率，加快新品种的选育速度，并且可以克服菊花育种中的某些难点。
菊花的组织培养步骤菊花的组织培养可以分为以下几个步骤：1.材料采集：选择器官发育完全的、无病虫害的菊花植株作为材料，从植株中切取茎段、芽鳞或叶片等组织细胞。
2.无菌处理：将采集到的材料进行表面消毒处理，以保证培养过程中无菌条件的要求。
3.培养基配置：根据菊花的生长需求，配置适宜的培养基，通常包括基本培养基、植物生长调节剂和营养物质等。
4.营养激素添加：根据不同的培养阶段，调整培养基中的营养激素种类和浓度，以促进组织分化和植株生长。
5.培养条件控制：菊花的组织培养需要适宜的光照、温度和湿度等条件，以确保培养过程的顺利进行。
6.观察和记录：定期观察培养过程中的植株生长情况和组织分化情况，并进行记录和分析。
菊花的组织培养方案为了提高菊花的组织培养效果，下面是一套精心设计的菊花组织培养方案：1. 材料采集：选择茎段为材料，茎段长度约为2-3厘米，要选取茎段顶部的生长点。
2. 无菌处理：将采集到的茎段进行外层消毒处理，可以使用75%酒精或次氯酸钠溶液进行浸泡消毒。
3. 培养基配置：本方案采用MS培养基，配方如下：•植物生长调节剂：添加0.3 mg/L的6-BA（6-苄氨基腺嘌呤）和0.1 mg/L的NAA（萘乙酸）。
•pH值调节：将培养基的pH值调整至5.8-6.2。
4. 营养激素添加：根据不同的培养阶段，可以适当调整培养基中的营养激素浓度。
例如，在茎段分化阶段，可以增加6-BA的浓度，以促进茎段的分化生长。
人教版选修1生物技术实践《菊花的组织培养》教案及教学反思
人教版选修1生物技术实践《菊花的组织培养》教案及教学反思一、教案设计1.1 实验目的：•掌握组织培养的基本原理和操作方法；•熟悉组织培养的实验操作流程；•了解组织培养在农业、医学、工业等领域的应用。
1.2 实验器材和药品：•菊花种子•MSD基本培养基•NAA生长调节剂•BA生长调节剂•蒸馏水•酒精灯•微型无菌操作室•培养箱、显微镜等1.3 实验步骤：步骤一：菊花种子表皮消毒将菊花种子进行表皮消毒，消毒液为75%的酒精浸泡5min，10%的漂白粉浸泡15min，然后用蒸馏水3次洗净消毒液。
步骤二：种子接种将表皮消毒的菊花种子连同种子量不超过1g的MSD基本培养基分别加入宽口直颈瓶中，培养基的PH值为5.8-6.0。
步骤三：组织培养将菊花幼芽雏轴打成2-3mm的小段，选取完整、新鲜、直径不超过5mm的芽段作为组织培养的外植体，接种在初培养基上并在暗处培养7天。
步骤四：移植到调节培养基中将芽段移植到含有生长调节剂NAA和BA的调节培养基中，并在暗处培养14天，避免直接阳光照射。
步骤五：移植到非调节培养基中将生长良好的组织移植到未添加生长调节剂的非调节培养基中，培养时间根据组织生长情况而定。
1.4 实验注意事项：•实验操作要精细，无菌操作要做好；•控制实验室的温度、光照和湿度；•在实验操作前，先了解各种实验器材的使用和消毒方法。
二、教学反思本次实验是一次对组织培养的基本原理和操作方法的学习，同时也是一次对于实验操作流程的熟悉，让学生们通过实际动手操作来加深对生物技术实践的理解和掌握。
在实验设计上，首先进行表皮消毒，这是一项十分关键的操作，如果消毒不彻底，会对实验结果产生影响。
因此在这一步骤中，教师需要向学生讲解消毒液的浓度和使用方法。
接下来是种子接种，这是实验中相对简单的一步，但是也需要将种子与培养基完全接触，保证实验成功。
在组织培养过程中，需要注意保持洁净、无菌的实验室环境，控制适当的温度、光照和湿度；培养箱的温度不能超过25℃，不能阳光直接照射；要避免湿度过大。
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操作要在酒精灯火焰旁完成，每次使用器械后， 都需要用火焰灼烧灭菌，接种后立即盖好瓶盖。 3、材料的切取和接种
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4、接种注意事项 ①每接种一块外植体前，镊子需放入体积分 数为75％的酒精溶液中消毒一次，然后在酒 精灯火焰上烧一遍，冷却后再接种. ②外植体在培养基中要分布均匀，放置外植体 数量根据锥形瓶的大小确定，一般胡萝卜3－4 块，菊的茎或叶6－8块，也不要太少，以充分 利用培养基中的营养成分和光照条件. ③插入时应注意方向，不要倒插。茎段、茎尖 基部插入培养基利于吸收水分和养分.
3、植物组织培养过程:
植物细胞培养 离 体 愈 脱分化 组 伤 再分化 织 组 或 细胞分裂素 织 ≈生长素 细胞分裂素 细 <生长素 胞 细胞分裂素> 生长素 芽 根
植 物 体
不需要光?
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需要光
植物组织培养的过程
离体的植 物组织或 细胞
脱分化
愈伤组织
再分化
根和芽
完整的植 物体
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珍珠岩：固体基质型，含水量高、蓄水性强、 透性好，适合栽培.
3、移栽 幼苗长壮后，移栽到土壤中. （六）栽培 幼苗移栽后，每天观察并记录幼苗的生长情 况，适时浇水、施肥，直至开花.
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三、课题延伸 1、一般来说，容易进行无性繁殖的植物，也 容易进行组织培养.
2、实例：芦荟、豆瓣绿、秋海棠、月季.
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本课题内容小结
细胞分化 植物体的 组织培养 细胞全能性 组织培养过程 营养 影响组织培 养的因素 激素 环境条件
基础知识
菊花 组织 培养
实验操作
MS固体培养基制备 外植体消毒 接种 培养 移栽
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栽培
作业：P36
1、在植物组织培养过程中，为什么要进行一系列的消毒、 灭菌，并且要求无菌操作。
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二、实验操作
（一）制备MS固体培养基 MS培养基包括20多种营养成分，实验室一般 使用4。C保存配制好的培养基母液来制备. 1、配置各种母液
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①无机物中大量元素浓缩10倍，微量元素浓 缩100倍，常温保存.
②激素类、维生素类以及用量较小的有机物一 般可按1mg/ml的质量浓度单独配制成母液.
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③特点： A.持久性： 是一种持久性的变化，它发生在生物体的 整个生命过程中,在胚胎期达到最大限度. B.稳定性： 细胞分化是稳定的，一般是不可逆转的. C.全能性： 已分化的细胞，仍具有发育的潜能.
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④结果： 形成不同的细胞和组织
⑤原因： 基因在特定的时间和空间条件下的选 择性表达的结果. （2）细胞的全能性
课题1 菊花的组织培养
组织培养是指在人工培养基上，离体培养植物的器官、组织、细胞 和原生质体，并使其生长、增殖、分化以及再生植株的技术。
一、基础知识
1、植物的组织培养 （1）细胞的分化
①概念： 在个体发育中，相同细胞的后代在形态、 结构、生理功能上发生稳定性差异的过 程 . ②过程： 如：受精卵增殖、生长、分化形成组 织、器官、系统.
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（2）离体的植物组织和细胞对营养、环境等条 件的要求相对特殊，需配置不同的培养基 MS培养基主要成分包括： A、大量元素: N、P、 S 、 K、Ca、Mg等 B、微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、 Co等 C、有机物、植物激素
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MS固体培养基成分及比例
③用母液配制培养基时，需要根据各种母液 的浓缩倍数，计算用量.
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2、配置培养基 ① 配制培养液 ② 调PH ③培养基的分装 分装到锥形瓶中，每瓶分装50ml或100ml. 由于菊花的茎段的组织培养比较容易，因此 不必添加植物激素.
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3、灭菌
分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸 汽灭菌.
③生长素和细胞分裂素同时使用，用量的比例对 植物细胞发育方向的影响 生长素 > 细胞分裂素： 有利于根的分化 生长素 < 细胞分裂素： 有利于芽的分化，抑 制根的分化 生长素 ＝ 细胞分裂素： 促进愈伤组织生长 （4）pH、温度、光照 pH控制在5.8左右，温度控制在18－22。C,每日 用日光灯照射12h. 点此播放教学视频
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2、愈伤组织的继代培养 继代培养所用的培养基与培养愈伤组织的相同， 在严格的无菌条件下，将愈伤组织连同原来的外 植体一起移到新培养基上。愈伤组织的继代培养 一代为20d。如果延长时间，培养基中营养物质 减少，外植体会分泌有毒物质，造成自身中毒。 如果愈伤组织长到直径为1－1.5cm时，就可以进 行试管苗培养，否则还需进行第二代继代培养. 在愈伤组织继代培养期间，将恒温箱的门打开， 让愈伤组织见光，愈伤组织见光后颜色可以转为 绿色. 点此播放教学视频
（二）外植体消毒
1、选材：菊花茎段，取生长旺盛的嫩枝. 2、消毒 ①流水冲洗 菊花茎段用流水冲洗后可少许洗衣粉，用软刷 轻轻刷洗，刷洗后在流水下冲洗20min左右.
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② 酒精处理 用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入体 积分数为70％的酒精中摇动2－3次，持续6－ 7s，立即将外植体取出，在无菌水中清洗.
①定义： 生物体的细胞具有使后代细胞形成完整 个体的潜能的特性. ②原理： 生物体的每一个细胞都包含有该物种所 特有的全套遗传物质，都有发育成为完 整个体所必需的全部基因.
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③实例 已分化的植物细胞，仍具有全能性. 高度特化的动物细胞，从整个细胞来说，全能 性受到限制。但它的细胞核仍然保持着全能性， 这是因为细胞核内含有该物种遗传性所需要的 遗传物质. ④全能性的比较: 受精卵>生殖细胞>体细胞
答案：（1）离体的植物组织或器官 植物细胞具有全能性 （2） 愈伤组织 低 高 （3）③ （4）单倍体植株 秋水仙素 纯合 体 单倍体育种 （5）绿色 含有表达叶绿体的基因 （6）②
4、植物组织培养的应用： (1)、培育无病毒植株 (2)、 培养紫草愈伤组织,提取紫草素（治疗 烫伤和割伤的药物以及染料和化妆品的原料） (3)、诱导离体的植物组织形成具有生根发芽能 力的胚状结构，包裹上人造种皮，制成人工种 子，可以解决有些作物品种繁殖能力差，结子 困难或发芽率低等问题. (4)、基因工程中亦需用到植物组织培养的方法
微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养 不同，MS培养基则需提供大量无机营养，无机盐 混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素 点此播放教学视频 两大类。
（3）植物激素的影响 ①常用的植物激素：生长素、细胞分裂素和赤霉 素 生长素类： 2，4－二氯苯氧乙酸（2，4－D）、吲 哚乙酸（IAA）、萘乙酸（NAA）、吲 哚丁酸（IBA）
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（3）植物组织培养 细胞离体 ①必要条件： 一定的营养物质、激素和其他 外界条件 ②原理: 细胞的全能性
③相关概念: A.外植体：从活植物体上切下进行培养的那 部分细胞、组织或器官.
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B.脱分化：由高度分化的植物器官、组织或细 胞产生愈伤组织的过程，又称去分化。 C.再分化：脱分化产生的愈伤组织在培养过程中 重新分化根或芽等器官的过程 D.愈伤组织:细胞排列疏松而无规则,是高度液 泡化的、成无定形状态的薄壁细胞.
植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差，对培养 条件的要求较高。用于植物组织培养的培养基同样适合于 某些微生物的生长，如一些细菌、真菌等的生长。而培养 物一旦受到微生物的污染，就会导致实验前功尽弃，因此 要进行严格的无菌操作。 2、在选取菊花茎段是，为什么要选取生长旺盛的嫩枝？ 外植体的生理状态是成功进行组织培养的重要条件之一。 生长旺盛的嫩枝生理状况好，容易诱导脱分化和再分化。
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思考：你打算做几组重复？你打算设置对照实 验吗？
答：每种材料或配方至少要做一组以上的重复。 设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养 基的锥形瓶，与接种操作后的锥形瓶一同培养， 用以说明培养基制作合格，没有被杂菌污染。
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（四）培养 1、愈伤组织的培养 从接种外植体到出现愈伤组织需经过2周时间。2 周之内可以看到外植体上逐渐长出乳白色或黄白 色的瘤状愈伤组织。首次培养愈伤组织时，恒温 箱的门应该关闭不必见光，因为在无光条件下愈 伤组织长的更快。2周后，培养基成分接近耗尽， 必须更换培养基，进行继代培养.
讨论：你能说出各种营养物质的作用吗？同专题 2中微生物培养基的配方相比，MS培养基的配方 有哪些明显的不同？
答：微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必 需的无机盐；蔗糖提供碳源，同时能够维持培养 基的渗透压；甘氨酸、维生素等物质主要是为了 满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响 后所产生的特殊营养需求。
③消毒液处理
取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放 入质量分数为0.1％的氯化汞溶液中1－2min，取 出后在无菌水中至少清洗3次，漂净消毒液.
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（三）接种 1、接种室消毒 污染的主要来源是空气中的细菌和孢子，接种 室消毒是至关重要的。用70％的酒精喷雾使空 气消毒， 酒精或新洁尔灭搽洗工作台并用紫外 线照射20分钟
细胞分裂素类：激动素（KT）、6－苄基嘌呤 （ 6－BA）、玉米素（ZT） 赤霉素类： 赤霉酸（ GA3） 点此播放教学视频
②生长素和细胞分裂素作用 植物中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、 脱分化和再分化的关键性激素。在生长素存在 的情况下，细胞分裂素的作用呈现加强的趋势 使用顺序 先使用生长素，后使用 细胞分裂素 先使用细胞分裂素后使 用生长素 同时使用 实验结果 有利于细胞分裂，但不 利分化 细胞既分裂也分化 分化频率高