血栓与止血一般检验 PPT课件
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血栓与止血检测-PPT课件
第五节 纤溶活性检测
P305
复习
纤溶系统
几乎在凝血开始的同时，纤维蛋白溶解 系统也被激活。
纤溶活性检测
筛选试验：
1、D-二聚体定性试验（D-D） 2、纤维蛋白（原）降解产物定性试验（FDP）
诊断试验：
1、D-二聚体定量试验（D-D） 2、纤维蛋白（原）降解产物定量试验（FDP）
D-二聚体测定（D-dimer,D-D）
子（TF或组织凝血活酶），观察血浆的 凝固时间即为凝血酶原时间。
【参考值】
① PT秒数：直接测定的时间
【参考值】 （12±1）s （超过对照 3s 以上为异 常）
② PT比值（PTR) ：待测血浆PT/对照PT
【参考值】 PTR ： 1.0±0.05
③国际正常化比值（INR）： INR＝PTRISI （ISI=国际敏感指数）
纤维蛋白（原）降解产物检测（FDPs）
纤维蛋白原降解产物和纤维蛋白降解 产物统称为纤维蛋白（原）降解产物 （FDPs）。FDPs对血液凝固和血小 板的功能均有一定的影响。
【临床意义】纤溶活性增强的筛选、确 诊试验。
1、原发性纤溶
2、继发性纤溶：DIC、恶性肿瘤、急性 早幼粒细胞白血病、肺血栓栓塞、深静 脉血栓形成、心、肝、肾疾病，溶栓治 疗等所致的继发性纤溶亢进时FDP含量 升高。
第七节 检测项目的选择和应用
下述4项为血管和血小板异常出血性疾病的检查：
出血象：
束臂试验
出血时间 血小板计数
初筛试验
血块收缩试验
下述4项为凝血功能障碍性疾病的检查：
凝血象：
APTT PT
初筛试验
Fg
TT
一、筛检试验的选择与应用
（一）一期止血缺陷筛检试验的选择与应用
《血栓与止血检验》PPT课件
第三章 第一节 血管壁的止血作用及检验
TM 操作
1.绘制校正曲线 人TM标准品用缓冲液A做倍比稀释，TM的浓度分别为 500，250，125，31.25，15.6，7.3,3.9和0ng/ml,以人TM浓度为横 坐标，以cpm为纵坐标绘制校正曲线。
2.将200μl的抗人TM单抗包被液加入聚苯乙烯放免小杯中，4℃过夜， 用洗涤液A洗3次，将待测样本（或标准品）0.25ml与等量缓冲液A 混合，每小杯加入20μl稀释样品液（空白管加入缓冲液A），37℃ 水浴2h，用洗涤液A洗3次，加入200μl125I-抗人TM单抗，37℃水 浴2h，再用洗涤液B洗六次，在γ闪烁测定仪上测定放射活性，在 校正曲线上查出相应的浓度。
vWF:Ag 操作
单抗以0.1mol/L的碳酸盐缓冲液（pH9.5）稀释成 10μg/ml加入反应板中，每孔0.2ml，置于湿盒中4℃ 过夜。
0.05%Tween—20，0.01mol/L磷酸盐缓冲液（pH7.4， Tween—PBS）洗3次后加入用0.4%BSA—PBS稀释的待 测血浆或培养液上清，每孔0.2ml，37℃温育2小时。
一、基本理论
血管壁的止血功能
激活血 小板
收缩 反应
激活凝 血过程
抗血 栓特 性
第十三章 第一节 血管壁的止血作用及检验
血小板的止血功能
血管损伤（抗血栓特性降低）
血管收缩
激
活凝血过程
血流减慢 纤维蛋白形成
血管内皮下成分暴露
血小板黏附、聚集、释放
血栓形成
第十三章 第一节 血管壁的止血作用及检验
二、血管壁（内皮）检验
血浆血管性血友病因子抗原vWF:Ag，ELISA法
原理纯化的兔抗人vWF:Ag抗体包被聚苯乙烯反应板，加入 稀释的待测血浆，样本中的vWF:Ag结合于固相的抗体 上，然后加入酶标记兔抗人vWF:Ag抗体，与其定量结 合，洗去多余抗体后，加底物显色，通过查找标准曲 线，即可计算出vWF:Ag的含量。
TM 操作
1.绘制校正曲线 人TM标准品用缓冲液A做倍比稀释，TM的浓度分别为 500，250，125，31.25，15.6，7.3,3.9和0ng/ml,以人TM浓度为横 坐标，以cpm为纵坐标绘制校正曲线。
2.将200μl的抗人TM单抗包被液加入聚苯乙烯放免小杯中，4℃过夜， 用洗涤液A洗3次，将待测样本（或标准品）0.25ml与等量缓冲液A 混合，每小杯加入20μl稀释样品液（空白管加入缓冲液A），37℃ 水浴2h，用洗涤液A洗3次，加入200μl125I-抗人TM单抗，37℃水 浴2h，再用洗涤液B洗六次，在γ闪烁测定仪上测定放射活性，在 校正曲线上查出相应的浓度。
vWF:Ag 操作
单抗以0.1mol/L的碳酸盐缓冲液（pH9.5）稀释成 10μg/ml加入反应板中，每孔0.2ml，置于湿盒中4℃ 过夜。
0.05%Tween—20，0.01mol/L磷酸盐缓冲液（pH7.4， Tween—PBS）洗3次后加入用0.4%BSA—PBS稀释的待 测血浆或培养液上清，每孔0.2ml，37℃温育2小时。
一、基本理论
血管壁的止血功能
激活血 小板
收缩 反应
激活凝 血过程
抗血 栓特 性
第十三章 第一节 血管壁的止血作用及检验
血小板的止血功能
血管损伤（抗血栓特性降低）
血管收缩
激
活凝血过程
血流减慢 纤维蛋白形成
血管内皮下成分暴露
血小板黏附、聚集、释放
血栓形成
第十三章 第一节 血管壁的止血作用及检验
二、血管壁（内皮）检验
血浆血管性血友病因子抗原vWF:Ag，ELISA法
原理纯化的兔抗人vWF:Ag抗体包被聚苯乙烯反应板，加入 稀释的待测血浆，样本中的vWF:Ag结合于固相的抗体 上，然后加入酶标记兔抗人vWF:Ag抗体，与其定量结 合，洗去多余抗体后，加底物显色，通过查找标准曲 线，即可计算出vWF:Ag的含量。
血栓与止血检验PPT课件
一、基本理论
血管壁的止血功能
激活血 小板
收缩 反应
激活凝 血过程
抗血 栓特 性
第十三章 第一节 血管壁的止血作用及检验
血小板的止血功能
血管损伤（抗血栓特性降低）
血管收缩
激活凝血过程
血流减慢
纤维蛋白形成
血管内皮下成分暴露
血小板黏附、聚集、释放
血栓形成
第十三章 第一节 血管壁的止血作用及检验
二、血管壁（内皮）检验
第十三章 第一节 血管壁的止血作用及检验
血浆6-酮-前列腺素F1α检测 参考区间
标准曲线与计算
B/B 0A (标 A % 零 准 )标 品 — 准 — A 非 或 A 非 孔 特 样 特 1 异 品 异 00%
式中:B为测定管；B0为不加样品管，最大结合率管； B/B0为结合率。
以标准品含量为横坐标，B/B0（%）为纵坐标，在半对 数纸上绘制出标准曲线。根据样品孔B/B0（%）值在标 准曲线上读出6-酮-PGF1α的含量。 样品6-酮-PGF1α浓度（pg/ml）=测定值×10。 参考范围10.7～25.1 pg/ml。
内皮损伤（内皮下组织暴露） 血小板粘附
血小板初期释放 ADP等
血小板聚集 血小板进一步激活、释放 血小板促凝作用
纤维蛋白形成
ADP 5-HT
血小板的主要释放产物
类别
成分
活性胺
腺嘌呤核苷酸 阳离子 血小板因子 凝血因子 血小板蛋白 血栓烷
5-HT，组胺，肾上腺素， 去甲肾上腺素
ADP,ATP,cAMP
血浆6-酮-前列腺素F1α检测
原理 ELISA法：将抗原（血浆6-酮-前列腺素F1α-牛血 清白蛋白连接物）包被于固相载体上，与游离抗原 （待测样品或6-酮-前列腺素F1α标准品）竞争性地与 一定量的抗6-酮-PGF1α抗体结合，洗涤后加入过量 的酶标记第二抗体，再加入底物显色。待检血浆或标 准品中的6-酮-PGF1α含量与显色程度呈负相关，根 据显色程度（A值）即可从标准曲线中推算出待检血 浆中6-酮-PGF1α的含量。
[诊断学]-血栓与止血检测PPT课件
![[诊断学]-血栓与止血检测PPT课件](https://img.taocdn.com/s3/m/29ecb35a53d380eb6294dd88d0d233d4b14e3f9e.png)
组织损伤释放
PKa PK XII——————XIIa HMWK
（凝血旁路）
组织因子（III）
XI
XIa
IX
IXa
IIa
Ca2+
VIII--------------- VIIIa
VIIa IIa VII
III
Plt------------------ PF3 IIa
X
Xa
Xa
V——————————————Va
.
2.PAdT减低 见于vWD、巨大血小板综合征、血 小板无力症、尿毒症、肝硬化、异常蛋白血症、 骨髓增生异常综合征(MDS)、急性白血病、服 用抗血小板药物等。
.
三、血小板聚集试验（PAgT）
诊断试验
1.PAgT增高 反映血小板聚集功能增强,见于血栓 前状态和血栓性疾病,如心肌梗塞、心绞痛、糖 尿病、脑血管病变、妊高征、DVT。
血小板
纤维蛋白网
血凝块
血栓收缩蛋白
收缩
血清被挤出 血块缩小加固
.
5．血小板促凝活性
PF3提供凝血因子催化表面
.
血小板止血功能（小结）
① 维持血管壁的完整性，毛细血管的通透性 ② 粘附、聚集在血管破损处，形成白色血栓 ③ 释放活性物质，促进血小板聚集，增强
血管收缩 ④ 促进凝血过程 ⑤ 血块收缩，形成稳固血栓
延长：
1. 因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ严重减少，如血友病 2. 凝血酶原严重减少，如严重肝病，阻塞性黄疸 3. 纤维蛋白原严重减少，如DIC、纤溶亢进 4、应用肝素、口服抗凝药物等
缩短:
高凝状态（hypercoagulation state） 如血栓性疾病
.
三、血浆凝血酶原时间测定 （Prothrombin time, PT）
第三章--血栓与止血检测PPT课件
2023/12/31
[参考值] 5cm直径圆圈内新出血点的数目,男性少
于5个,女性及儿童少于10个。
2023/12/31
[临床意义] 1、毛细血管脆性增加的病理情况见于： 1)毛细血管壁有异常,见于过敏性紫癜等。 2)血小板减少,见于原发性血小板减少性紫癜等
。 3)血小板功能不良,见于血小板无力症等。 4)血管性血友病等。
2023/12/31
三、凝血因子检测
▲ [血浆纤维蛋白原测定] [参考值] 2～4g/L [临床意义]纤维蛋白原减少见于：
1.先天性纤维蛋白原减少症。 2.严重肝损伤。 3.DIC等。
2023/12/31
纤维蛋白原增高： 见于糖尿病，大手术后，急性感染等血
栓前状态。
2023/12/31
四 、纤溶活性检测
管性血友病、单纯性紫癜、过敏性紫癜等） 可使用出血时间测定器检测出血时间,但不作 为常规检查。
2023/12/31
2、停止使用凝血时间测定玻片法，无条件地 区用全血凝固时间(CT,试管法)测定替代，有 条件地区用活化部分凝血活酶时间(APTT)。 3、手术前做PLT、APTT、PT、TT、纤维蛋 白原测定。
1.凝血酶原时间 11--13秒超过正常对照3秒为异常。
2023/12/31
2.凝血酶原对比值 （prothrombin ratio PTR) PTR=被检血浆的凝血酶原时间（S）/正
常血浆的凝血酶原时间（S）,参考值为 1.0±0.05。
2023/12/31
3.国际标准化比值 （international normalized ratio INR).即
time,APTT) 本试验是反映内源性凝血系统各凝血因
子有无异常。 [参考值]
[参考值] 5cm直径圆圈内新出血点的数目,男性少
于5个,女性及儿童少于10个。
2023/12/31
[临床意义] 1、毛细血管脆性增加的病理情况见于： 1)毛细血管壁有异常,见于过敏性紫癜等。 2)血小板减少,见于原发性血小板减少性紫癜等
。 3)血小板功能不良,见于血小板无力症等。 4)血管性血友病等。
2023/12/31
三、凝血因子检测
▲ [血浆纤维蛋白原测定] [参考值] 2～4g/L [临床意义]纤维蛋白原减少见于：
1.先天性纤维蛋白原减少症。 2.严重肝损伤。 3.DIC等。
2023/12/31
纤维蛋白原增高： 见于糖尿病，大手术后，急性感染等血
栓前状态。
2023/12/31
四 、纤溶活性检测
管性血友病、单纯性紫癜、过敏性紫癜等） 可使用出血时间测定器检测出血时间,但不作 为常规检查。
2023/12/31
2、停止使用凝血时间测定玻片法，无条件地 区用全血凝固时间(CT,试管法)测定替代，有 条件地区用活化部分凝血活酶时间(APTT)。 3、手术前做PLT、APTT、PT、TT、纤维蛋 白原测定。
1.凝血酶原时间 11--13秒超过正常对照3秒为异常。
2023/12/31
2.凝血酶原对比值 （prothrombin ratio PTR) PTR=被检血浆的凝血酶原时间（S）/正
常血浆的凝血酶原时间（S）,参考值为 1.0±0.05。
2023/12/31
3.国际标准化比值 （international normalized ratio INR).即
time,APTT) 本试验是反映内源性凝血系统各凝血因
子有无异常。 [参考值]