ATP含量检测试剂盒(可见分光光度法)使用说明
ATP荧光检测仪使用说明解析
ATP荧光检测仪使用说明解析ATP荧光检测仪是一种用于检测微生物活性的仪器。
ATP是细胞内的能量储存分子,其浓度与细胞活性呈正相关关系。
ATP荧光检测仪可以通过测量样品中ATP分子的荧光强度,快速、准确地评估样品中微生物的活性水平。
本文将对ATP荧光检测仪的使用说明进行详细解析。
第一步:仪器准备1.检查仪器是否安装正确,所有连接口是否连接牢固。
2.检查是否有足够的ATP检测试剂盒和清洗溶液,并确保这些试剂的保存条件符合要求。
3.打开ATP荧光检测仪的电源开关,让仪器预热10-15分钟。
第二步:样品准备1.根据需要选择合适的样品类型(如水质、食品、土壤等)。
2.依据样品特性和使用的ATP检测试剂盒,选择合适的提取方法将样品中的ATP释放出来,常用的提取方法包括破碎细胞、离心沉淀等。
3.提取样品中的ATP后,获取样品的取样体积,根据ATP检测试剂盒的说明书,将相应体积的ATP检测试剂加入样品中。
第三步:测量操作1.将ATP样品和ATP检测试剂混合均匀,确保反应发生。
2.打开ATP荧光检测仪的样品室盖,将混合样品倒入样品室中。
注意不要超过样品室的标记线。
3.关上样品室盖,调节仪器的参数(如增益、积分时间等),确保仪器的测量参数符合试剂盒说明书中的建议。
4.点击仪器上的开始测量按钮,等待一定时间(通常几秒钟到几分钟不等),仪器将测量并记录样品中的ATP荧光强度。
5.把样品室清洗干净,避免交叉污染。
第四步:数据分析1.仪器测量完毕后,ATP荧光检测仪将显示出测量结果。
2.根据ATP检测试剂盒的说明书,将测得的荧光强度转化成对应的ATP浓度。
3.将不同样品的ATP浓度进行比较,并结合样品的特性和背景资料,评估样品中微生物的活性水平。
第五步:仪器的日常维护1.每次使用完毕后,将ATP荧光检测仪的样品室和周围区域彻底清洗干净,以防止污染和交叉感染。
2.定期检查仪器的电源线、通信线和连接线是否完好无损。
3.定期检查ATP检测试剂盒的保质期和存储条件,及时更换过期或损坏的试剂盒。
ATP检测试剂盒使用说明书北京康碧泉代理
1. Introduction
ATPLite TM is an Adenosine TriPhosphate (ATP) monitoring system based on firefly (Photinus pyralis) luciferase. This luminescence assay is the alternative to colorimetric, fluorometric and radioisotopic assays for the quantitative evaluation of proliferation and cytotoxicity of cultured mammalian cells. ATP monitoring can be used to assess the cytocidal, cytostatic and proliferative effects of a wide range of drugs, biological response modifiers and biological compounds 1,2,3,4,5,6. The major advantages of this system are high sensitivity, excellent linearity, simplicity, fast results and the lack of cell harvesting or separation steps. Furthermore, the PerkinElmer ATPLite “Constant Quanta TM ” assay system produces a long lived “glow” type signal with a half-life of greater than five hours, therefore a special luminometer with injectors is not required. The kit is ideal for use with the PerkinElmer TopCount Microplate Scintillation and Luminescence Counter and the LumiCount Microplate Reader in both 96- and 384-well microplates. The simplicity of the ATPLite assay system in a 96-well microplate is illustrated in Figure 1.
ATP试剂操作说明
Ultrasnap TM操作说明北京中城科技开发有限公司Ultrasnap TM操作说明Ultrasnap TM含有独特的高灵敏度液态稳定一体化试剂,与采样器于一身,快捷方便。
Ultrasnap TM检测物体表面上的细菌或其它微生物以及食物残留物中所含的总ATP活性,给出快速全面的洁净检测结果。
标准量的试剂应用,提高了检测的稳定性,并可减少人为浪费。
预先湿润的采集拭子,最大程度上减少了操作环节的污染。
预制好的一体化试剂无需现场配制,大大提高工作效率。
最先进的速流阀技术,大大简化了现场工作程序。
Ultrasnap TM与systemSURE II TM ATP荧光仪配合使用。
使用说明◆打开检测管,取出棉拭子取样;◆不要触摸棉拭子或棉拭棒;◆Ultrasnap TM检测管从冰箱中取出后,检测之前需放置5分钟左右,使其恢复到室温状态;◆避光情况下棉拭子样品可放置4小时左右;◆Ultrasnap TM棉拭子中样品和溶液反应后,需放置在荧光仪中,并于15秒钟之内读数。
◆棉拭子溶液已经稀释,可安全用于是食品表面。
注意:使用前请避光保存。
储藏1)Ultrasnap TM 检测试管需保存在2-8℃的冰箱内,不要冷冻。
2)长达一年的试剂保质(25℃以下为6周 , 2℃—8℃为一年)。
3) 避光保存,放于铝膜袋中,密封保存。
超过保值期的试剂请不要使用。
安全性如按照标准实验程序操作,Ultrasnap TM 各部组成不对人体健康有任何威胁。
废弃装置丢弃无需经过特别处理。
为起到防腐作用,棉子溶液中含有叠氮钠(0.05% w/v )。
废液丢弃之前请先用大量的水稀释。
试剂如溅入眼中或皮肤上,请即刻用大量的水冲洗。
atp效果测试方法
atp效果测试方法ATP效果测试方法是一种常见的测试方法,主要用于测试细胞的活力和生物分子的活性。
ATP是细胞内能量的一种重要指标,因此测试ATP效果可以反映细胞的活力和生物分子的活性。
下面将介绍ATP效果测试的方法。
一、仪器和试剂ATP效果测试需要用到一些常见的仪器和试剂。
其中,ATP酶试剂盒是必不可少的试剂之一,它可以用于ATP酶的检测。
此外,还需要用到ATP标准品、反应物和缓冲液等试剂。
仪器方面,需要使用荧光光度计或发光光度计等仪器。
二、ATP酶试剂盒的使用ATP酶试剂盒是ATP效果测试的核心试剂之一。
具体使用方法如下:1.制备样品:将待测样品制备好,如细胞、生物分子等。
2.加入试剂:取一定量的ATP酶试剂盒,加入标准品和缓冲液,制备成一定浓度的反应液。
3.加入样品:将制备好的样品加入到反应液中,并混合均匀。
4.测量荧光或发光:将反应液加入到荧光光度计或发光光度计中,测量荧光或发光。
5.计算ATP含量:根据荧光或发光的测量结果,可以计算出样品中的ATP含量。
三、其他相关试验除了ATP酶试剂盒外,还有一些其他相关的试验可以用于ATP效果测试。
例如,ATP酶活性的测定、ATP水解反应的测定等。
这些试验都可以反映出ATP效果的好坏。
四、注意事项在进行ATP效果测试时,需要注意以下几点:1.样品的制备需要严格按照试剂盒的说明书进行,避免样品的影响。
2.反应液的制备需要准确,避免浓度过高或过低。
3.荧光或发光的测量需要准确,避免干扰因素的影响。
4.ATP酶试剂盒的储存需要在-20℃下,避免试剂的失效。
5.实验过程中需要注意安全,避免试剂的误食或误触。
ATP效果测试方法是一种常见的测试方法,可以用于反映细胞的活力和生物分子的活性。
在实验过程中需要注意各种细节,保证实验的准确性和可靠性。
ATP含量试剂盒使用说明
ATP含量试剂盒使用说明一、试剂盒的组成1.ATP酶:可催化ATP与啶酮核苷酸底物反应,产生荧光发射。
2.底物液:包含啶酮核苷酸底物、辅酶CoA、磷酸化底物和缓冲液等成分。
3.酶反应终止液:用于停止ATP酶的活性,停止荧光信号的产生。
4.荧光标准品:已知浓度的ATP溶液,用于绘制标准曲线。
5.读取缓冲液:用于在荧光分析仪上读取荧光信号。
二、使用步骤1.试剂室温平衡:将试剂盒中的所有试剂恢复到室温,并确保所有试剂充分均匀混合。
2.样品预处理:根据实验需要,选择合适的方法提取细胞或组织中的ATP,并计算样品的蛋白质含量。
3.准备标准曲线:取不同浓度的荧光标准品,并用读取缓冲液稀释到一系列已知浓度的溶液。
每个浓度至少重复3次。
将这些标准品稀释到试管中。
4.样品处理:将不同待测样品分别加入到试管中,各样品至少重复3次。
同时加入空白对照组,只加读取缓冲液而无待测样品。
5.加入试剂:将相应体积的底物液加入到每个试管中,充分混合。
立即向每个试管中加入适量的ATP酶,同时进行混合。
6.反应:将试管密封,并在37℃下孵育一段时间,一般为10-30分钟。
7.停止反应:向每个试管中加入相应体积的酶反应终止液,停止ATP酶的活性,停止荧光信号的产生。
8.读取荧光:将每个试管置于荧光分析仪上,使用适当的激发波长和发射波长对荧光信号进行测量,记录下荧光单位值。
9.绘制标准曲线:将标准曲线上的荧光单位值与标准品的ATP浓度进行对应,绘制标准曲线。
10.计算样品ATP含量:根据样品荧光单位值和标准曲线,计算出样品中的ATP含量。
三、注意事项1.所有试剂的操作应按照试剂盒说明进行,不同品牌可能有些许差异,应严格按照相应说明进行操作。
2.手术操作时应采取无菌操作,避免对样品的污染。
3.混合试剂时需充分振荡,确保试剂均匀混合。
4.在实验过程中,所有试管、吸头等实验用具应标注清楚,避免混淆和误操作。
5.反应时间会影响结果,不同实验目的可根据需要进行时间的调整,一般30分钟内可得到稳定的信号。
atp荧光检测仪操作规程
ATP荧光检测仪操作规程1. 引言ATP荧光检测仪是一种用于测量生物系统中三磷酸腺苷(ATP)含量的设备。
它可以快速准确地检测出水、食品、医疗器械等样品中的微生物污染情况,是一项重要的卫生检测工具。
为了正确、安全地使用ATP荧光检测仪,本文档将详细介绍其操作规程。
2. 检测仪的准备工作在使用ATP荧光检测仪之前,需要进行一些准备工作,确保检测仪处于良好的工作状态。
- 确保仪器表面干净,无尘、无污染。
- 检查仪器的电源线是否稳固连接。
- 检查荧光检测仪的光源是否正常工作。
- 准备好测试所需的样品和试剂。
3. 检测仪的启动与校准ATP荧光检测仪需要在每次使用前进行启动和校准,以确保结果的准确性。
1. 将电源线插入电源插座,并将仪器打开。
2. 检查显示屏上的时间、日期等信息,确保没有异常。
3. 按照仪器说明书的要求,进行校准操作。
- 使用标准品进行校准,确保各项指标符合标准要求。
- 若校准不通过,重新校准或联系维修人员进行处理。
4. 样品检测操作步骤在进行样品检测前,应先准备好样品和相应的试剂,并按照以下步骤进行操作。
1. 取出一片无菌的试剂卡片。
2. 使用无菌的棉签或滤纸,将待测样品擦拭在试剂卡片的表面上。
3. 将试剂卡片插入ATP荧光检测仪中,确保试剂卡片与仪器接触良好。
4. 按下“开始”按钮,开始检测。
5. 等待一段时间,直到仪器显示出检测结果。
6. 记录并保存检测结果。
5. 结果分析和判定检测结果的分析和判定应根据ATP荧光检测仪的说明书及相关标准进行。
1.根据检测结果的数值,对结果进行分析,如比较与标准值的差异。
2. 根据标准值及相关标准,对检测结果进行判定。
一般情况下,结果分为阳性和阴性。
3. 根据实际情况,判断是否需要进行其他检测或措施。
6. 检测仪的日常维护与保养为了保证ATP荧光检测仪的正常使用寿命和准确性,需要进行日常的维护与保养工作。
- 定期清洁仪器表面和配件,确保无尘、无污染。
ATP测定试剂盒使用说明书 产品简介:
本试剂盒使用方便,通常可以在 30-60 分钟内测定完成 10-20 个样品的测定。 本试剂盒提供的试剂可以检测 100 个样品。 包装清单:
ATP 检测试剂
1ml×5 瓶
ATP 标准溶液(1mM)
1ml
ATP 检测裂解液 5×
5ml
说明书
1份
保存条件: -20℃保存,半年有效。-70℃保存,一年有效。 ATP 检测试剂需避光保存。ATP 检测
沈阳中科靓马生物工程有限公司
ATP测定试剂盒使用说明书
产品简介:
本公司提供的 ATP 测定试剂盒(ATP Determination Kit),是基于有 ATP 存在的条件下,萤
火虫荧光素酶可催化底物 D-荧光素氧化并发射荧光(约 560nm,pH7.8),以及在除 ATP
外其它底物处于过量的情况下,光子数量与 ATP 量呈线性关系这一原理。
液 4℃保存请于 5 天内使用完。 注意事项: 1、ATP 检测试剂中含有荧光素酶,反复冻融将导致失活。 2、ATP,特别是裂解后样品中的 ATP 在室温下不稳定,需在 4℃或冰上操作。
1
沈阳中科靓马生物工程有限公司
3、5×ATP 检测裂解液要用双蒸水稀释成 1 倍浓度后使用。 4、本试剂盒须与光度计或液闪仪匹配使用。 5、实验时应穿戴一次性手套操作,以免外源 ATP 污染。 使用说明: 1. ATP 标准曲线制定:
⑴.冰浴上溶解待用试剂,把 ATP 标准溶液用双蒸水或去离子水稀释成适当的浓度梯 度。具体的浓度需根据样品中 ATP 的浓度而定。一共需稀释 5 个梯度。加入标准检测溶液 中稀释的 ATP 标准溶液其体积不应超过总检测液的 10%。
大鼠三磷酸腺苷(ATP) 说明书
450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中大鼠三磷酸腺苷(ATP)浓度。
试剂盒组成
1 30 倍浓缩洗涤液
20ml×1 瓶
7 终止液
6ml×1 瓶
2 酶标试剂
6ml×1 瓶
8 标准品(1600nmol/L) 0.5ml×1 瓶
3 酶标包被板
12 孔×8 条
9 标准品稀释液
1.5ml×1 瓶
100nmol/L
2 号标准品
150µl 的 3 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
50nmol/L
1 号标准品
150µl 的 2 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、 待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50µl,待测样品孔中先加样品稀释液 40µl,
4 样品稀释液
6ml×1 瓶
10 说明书
1份
5 显色剂 A 液
6ml×1 瓶
11 封板膜
2张
6 显色剂 B 液
6ml×1/瓶
12 密封袋
1个
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
大于标准品孔第一孔的 OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计 算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。 5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。 6.底物请避光保存。 7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9.本试剂不同批号组分不得混用。 10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。 保存条件及有效期 1.试剂盒保存:;2-8℃。 2.有效期:6 个月
ATP检测试剂盒
ATP检测试剂盒产品简介:ATP检测试剂盒(ATP Assay Kit)可以用于检测普通溶液中或细胞或组织内的ATP(adenosine 5’-triphosphate)水平。
ATP,作为最重要的能量分子在细胞的各种生理、病理过程中起着重要作用。
ATP水平的改变,会影响许多细胞的功能。
通常细胞在凋亡、坏死或处于一些毒性状态下,ATP水平会下降,而高葡萄糖刺激等对于一些细胞可以上调细胞内ATP水平。
通常ATP水平的下降表明线粒体的功能受损或下降,在细胞凋亡时ATP水平的下降通常和线粒体的膜电位下降同时发生。
本试剂盒根据萤火虫荧光素酶(firefly luciferase)化荧光素产生荧光时需要ATP提供能量研制而成。
当萤火虫荧光素酶和荧光素都过量时,在一定的浓度范围内荧光的产生和ATP的浓度成正比。
这样就可以高灵敏地检测溶液中的ATP浓度。
本检测试剂盒可以检测浓度低达0.1nmol/L的ATP。
而常规的细胞或组织裂解液中ATP的浓度仅为0.1-1μmol/L,一些常见细胞的细胞内ATP水平约为10 nmol/mg蛋白。
检测细胞或组织内ATP浓度时,用本试剂盒提供的裂解液裂解后即可以测定ATP浓度。
本试剂盒方便快捷,通常10-20个样品可以在30-60分钟内测定完毕。
本试剂盒至少可以检测200个样品。
保存条件:-20℃保存,半年有效。
-70℃保存,一年有效。
ATP检测试剂需避光保存。
注意事项:A TP检测试剂中含有荧光素酶,反复冻融会导致其逐渐失活。
为取得较好的使用效果,冻融的次数不宜超过3次。
A TP检测试剂稀释成ATP检测工作液后,最好一次用完,不宜冻存后再使用。
ATP,特别是裂解后样品中的ATP在室温不太稳定,需在4℃或冰上操作。
A TP在冰上可以稳定长达6小时。
本试剂盒需使用luminometer(检测荧光素酶报告基因时所用的仪器)。
如果没有luminometer,也可以使用液闪仪。
液闪仪的测定效果取决于液闪仪的检测灵敏度和检测精度。
ATP含量试剂盒使用说明
ATP含量试剂盒使用说明产品简介:ATP广泛存在于动物、植物、、微生物和培养细胞中,是描述细胞能量代谢状态的主要参数。
测定ATP含量并且计算能荷,能够反映能量代谢状态。
ATP在254nm下有吸收峰,可以利用高效液相色谱法测定其含量。
试验中所需的仪器和试剂:高效液相色谱仪、低速离心机、溶剂抽滤装置、针头式过滤器(水系,50个,0.22μm)、滤膜(水系和有机系各1个,0.45μm)、C18柱(4.6×150mm)、可调式移液器、样品瓶(50个,2mL)、甲醇(色谱级,300mL)、甲醇(色谱级,300mL)、蒸馏水产品内容:试剂一:液体60mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体60mL×1瓶,4℃保存;试剂三:粉剂1×1瓶,粉剂2×1瓶,4℃保存;临用前用少量蒸馏水将粉剂1和粉剂2溶解后倒入1000mL容量瓶中,用蒸馏水定容至1000mL,形成流动相缓冲液基质(注:试剂瓶中的粉剂要冲洗干净),4℃可保存1周;试剂四:ATP标准品5mg×1支,-20℃保存。
临用前加入1mL双蒸水,配成5mg/mL溶液,配好后-20℃可保存1周;操作步骤:一、实验前的准备工作:1、将双蒸水1000mL、流动相缓冲液基质1000mL和甲醇300mL用0.45μm的滤膜抽滤,以除去溶剂中的杂质,防止堵塞色谱柱。
(注:双蒸水和缓冲液基质用水系滤膜抽滤,甲醇用有机系滤膜抽滤)。
2、流动相的配制:将抽滤完毕的流动相缓冲液基质1000mL与甲醇配比为99.9:0.1(v/v),即取999mL缓冲液基质与1mL甲醇混合。
3、将抽滤完毕的甲醇和双蒸水配比成100%的甲醇,10%的甲醇,双蒸水各250mL。
将2和3中的溶剂超声30分钟,以脱去溶剂中的气泡,防止堵塞色谱柱。
二、ATP的提取:1、组织的处理:准确称取组织重量0.1g,加入1mL试剂一,提取ATP,4000g常温离心15min,取上清液,加入等体积的试剂二,混匀,4000g常温离心15min,取上清,0.22μm水系微孔滤膜过滤后冰上放置,待测。
ATP含量检测试剂盒(可见分光光度法)使用说明
ATP含量检测试剂盒(可见分光光度法)使用说明注意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号:BC0300规格:100T/48S产品内容:组分规格保存试剂一底物液Ⅰ粉剂×1瓶室温保存底物液Ⅰ配制:用时加10mL煮沸双蒸水溶解,并沸水浴使溶解完全;临用前观察如有结晶,可沸水浴溶解后置于37℃保存待测。
试剂二底物液Ⅱ20mL×1瓶4℃保存试剂三促进剂粉剂×2支-20℃保存稀释液760μL×2瓶4℃保存试剂三应用液(促进剂)配制:临用前取1支试剂三稀释液加入1支试剂三粉剂中,充分溶解备用。
试剂四沉淀剂液体 5.5mL×1瓶4℃保存试剂五显色剂甲液7mL×4瓶4℃保存乙液6mL×4瓶4℃保存显色应用液的配制:用时取一瓶显色剂甲液加入一瓶显色剂乙液中,充分混匀4℃待用,现用现配。
试剂六终止剂50mL×1瓶室温保存试剂七ATP标准品粉剂×2支4℃保存5mmol/L ATP标准品贮备液配制:用时加双蒸水定容至1mL,制备5mmol/L ATP标准品贮备液。
1mmol/L ATP标准品应用液配制:将标准品贮备液与双蒸水1:4稀释,即5倍稀释。
产品说明:三磷酸腺苷(adenosine5'-triphosphate,ATP)是生物体内能量转换最基本的载体,其含量的变化直接关系到各器官的能量代谢。
ATP作为最重要的能量分子在细胞的各种生理、病理过程中起着重要作用。
ATP水平的改变,会影响许多细胞的功能。
通常细胞在凋亡、坏死或处于一些毒性状态下,ATP水平会下降,而高葡萄糖刺激等对于一些细胞可以上调细胞内ATP水平。
通常ATP水平的下降表明线粒体的功能受损或下降,在细胞凋亡时ATP水平的下降通常和线粒体的膜电位下降同时发生状态。
ATP含量测定试剂盒可以用于检测红细胞或组织内的ATP水平。
自备仪器和用品:分光光度计、水浴锅、可调式移液枪、台式离心机、研钵和蒸馏水。
ATP荧光检测拭子操作说明
ATP荧光检测拭子操作说明ATP (Adenosine Triphosphate)是一种存在于所有活细胞中的分子,它是细胞内能量储存和转移的主要形式。
ATP荧光检测拭子是一种快速检测环境中微生物污染的方法,通过测量样品中ATP含量来评估细菌、霉菌和其他微生物的水平。
以下是ATP荧光检测拭子的操作说明:1.预处理工作:a.首先,确保所有操作台面和仪器表面都是干净的,使用无菌消毒溶液擦拭。
b.使用无菌手套和无菌拭子,避免污染样品。
2.样品采集:a.选择要检测的样品表面,例如工作台、生产设备或其他物体表面。
b.用无菌拭子轻轻擦拭样品表面,确保尽可能地覆盖整个区域。
避免过度压力,以免污染拭子。
c.使用无菌拭子,采集多个样品,以获得更准确的结果。
d.确保采集到的样品不受其他环境因素的干扰,如水、化学药剂等。
e.确保所有样品在采集后尽快送到实验室进行测试,以防止样品中ATP降解。
3.ATP提取:a.使用ATP提取试剂盒,根据厂家提供的说明进行操作。
通常,需要添加提取缓冲液到拭子管中,然后将拭子管放入震荡器中进行震荡。
b.震荡时间和速度根据试剂盒的说明进行调整。
c.确保所有拭子都被充分提取,以获得准确的ATP含量。
4.ATP荧光测量:a.使用ATP荧光检测仪器,根据厂家提供的操作说明进行设置。
b.将提取液转移到ATP检测仪器的相应孔板或试管中。
c.启动检测仪器,等待程序运行完毕。
d.记录ATP测量结果,根据标准曲线或参考值进行数据分析。
5.结果解读:a.根据ATP测量结果,比较不同样品之间的ATP含量,评估微生物污染水平。
通常,ATP含量越高,说明微生物污染越严重。
b.根据实际需要,设置不同的阈值来确定是否需要采取清洁措施或其他紧急处理措施。
c.分析结果时,应将ATP含量与其他环境因素(如温度、湿度等)结合考虑,以获得更准确的评估。
总结:ATP荧光检测拭子是一种快速、简便的微生物污染检测方法,但使用时应注意保持采样和测试过程的无菌性,并按照厂家提供的操作说明进行操作。
ATP含量试剂盒说明书
货号:MS1702 规格:100管/48样ATP含量试剂盒说明书微量法正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定测定意义:ATP广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是生物能量通货,能荷是描述细胞能量代谢状态的主要参数。
测定ATP含量并且计算能荷,能够反映能量代谢状态。
测定原理:肌酸激酶催化肌酸和ATP反应生成磷酸肌酸,可在700nm下用磷钼酸比色法检测磷酸肌酸含量,以此反应ATP含量。
自备实验用品及仪器:分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液枪、微量石英比色皿/96孔板、研钵和蒸馏水。
试剂组成和配制:酸性提取液:液体60mL×1瓶,4℃保存;碱性提取液:液体60mL×1瓶,4℃保存;试剂一:粉剂×1支,4℃保存;临用前加入1mL蒸馏水充分溶解待用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
试剂二:液体1.5mL×1支,4℃保存;试剂三:粉剂×1支,4℃保存;临用前加入500μL蒸馏水充分溶解待用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
试剂四:液体5mL×1瓶,4℃避光保存;试剂五:液体25mL×1瓶,4℃保存;标准液:液体10mL×1瓶,2μmol/mLATP标准液,4℃保存;ATP提取:1、血清(浆)中ATP的提取:按照血清(浆)体积(mL):酸性提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议取约0.1mL血清(浆),加入1mL酸性提取液),进行冰浴匀浆,8000g 4 ℃离心10min;取上清液至另一EP管中,加入等体积的碱性提取液使之中和,混匀,8000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测(不可用于蛋白质含量测定)。
2、组织中ATP的提取:按照组织质量(g):酸性提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL酸性提取液),进行冰浴匀浆,8000g 4℃离心10min,取上清至另一EP管中,加入等体积的碱性提取液使之中和,混匀,8000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测(不可用于蛋白质含量测定)。
Na+K+-ATP酶活性检测试剂盒说明书
Na +K +-ATP 酶活性检测试剂盒说明书可见分光光度法货号:BC0060规格:50T/24S产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件试剂一液体30 mL×1瓶2-8℃保存试剂二液体4 mL×1瓶2-8℃保存试剂三粉剂×2支-20℃保存试剂四液体2 mL×1瓶2-8℃保存试剂五液体3mL×1瓶2-8℃保存试剂六粉剂×1瓶2-8℃保存试剂七粉剂×1瓶2-8℃保存试剂八液体15 mL×1瓶常温保存标准品液体1 mL×1支2-8℃保存溶液的配制:1、试剂三:用时取1支加1 mL 蒸馏水,现用现配。
用不完的试剂-20℃分装保存一周。
2、试剂六:用时加入15 mL 蒸馏水,溶解后2-8℃保存两周。
3、试剂七:用时加入15 mL 蒸馏水,溶解后2-8℃保存两周。
4、标准品:10 μmol/m L 标准磷贮备液。
将标准品20倍稀释,即取0.1 mL 标准品加1.9 mL 蒸馏水充分混匀,配成0.5 μmol/m L 标准磷应用液。
5、定磷剂的配制:按H 2O :试剂六:试剂七:试剂八=2:1:1:1的比例配制,配好的定磷剂应为浅黄色。
若变色则试剂失效,若是蓝色则为磷污染,定磷剂根据实验用量现用现配。
注意:配试剂最好用新的烧杯、玻棒和玻璃移液器,也可以用一次性塑料器皿,避免磷污染。
产品说明:Na +K +- ATP 酶广泛分布于植物、动物、微生物和细胞中,可催化ATP 水解生成ADP 和无机磷。
Na +K +-ATP 酶分解ATP 生成ADP 及无机磷,通过测定无机磷的量来确定ATP 酶活性。
ADP + Pi注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:Phosphomolybdate Blue (660nm )可见分光光度计、水浴锅/恒温培养箱、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
Elabscience ATP含量比色法测试盒说明书
(本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断!)Elabscience®ATP含量比色法测试盒ATP Colorimetric Assay Kit产品货号:E-BC-K157-S产品规格:50 assays(24 samples)/100 assays(48 samples)检测仪器:紫外-可见光分光光度计(636 nm)使用前请仔细阅读说明书。
如果有任何问题,请通过以下方式联系我们:销售部电话************,************技术部电话131****6790具体保质期请见试剂盒外包装标签。
请在保质期内使用试剂盒。
联系时请提供产品批号(见试剂盒标签),以便我们更高效地为您服务。
用途本试剂盒适用于检测动物组织样本中A TP的含量。
检测原理肌酸激酶催化肌酸和A TP 反应生成磷酸肌酸,通过比色法检测磷酸肌酸的含量,以此反应出A TP的含量。
提供试剂和物品说明:试剂严格按上表中的保存条件保存,不同测试盒中的试剂不能混用。
对于体积较少的试剂,使用前请先离心,以免量取不到足够量的试剂。
所需自备物品仪器:紫外-可见光分光光度计(636 nm)、水浴锅(100°C )试剂:双蒸水、生理盐水(0.9% NaCl)试剂准备①检测前,所有的试剂平衡至室温。
②试剂二工作液的配制向试剂二中加入6 mL双蒸水,拧紧瓶盖,放入沸水中水浴使其完全溶解;使用前观察到有结晶析出,可沸水浴溶解后,放置37℃保存待用。
使用完后2-8℃保存7天。
③试剂四工作液的配制:取1.8mL双蒸水加入到试剂四中,充分溶解后放置冰盒上待用。
使用完后-20℃保存7天。
④对照工作液的配制:按试剂二工作液:试剂三:双蒸水=100:200:30的比例配制,现用现配,按需配制。
测定工作液的配制:按试剂二工作液:试剂三:试剂四工作液=100:200:30的比例配制,现用现配,按需配制。
⑤显色剂工作液配制:按试剂六:试剂七=3:1配制,37℃放置1小时,现用现配,按需配制。
ATP含量测定方法
ATP含量测定方法
ATP含量测定
一、仪器与试剂
(1) FQ-300发光光度计,100ml烧杯,比色杯
(2) 5×10-8mmol/L的ATP标准液:一支ATP加入1ml萤光素酶缓冲液
(3) 萤光素酶缓冲液:一支萤光素酶缓冲液粉剂用蒸馏水定容到50ml
(4) 荧光素酶溶液:每毫升缓冲液中加入荧光素酶3mg
二、测定步骤
(1)标准曲线
将A TP标准液配成5×10-8、5×10-9、5×10-10、5×10-11、5×10-12、5×10-13μmol/ml 等浓度梯度,于发光光度计比色测定,测定峰高值,以ATP浓度的对数为横坐标,以峰高值的对数为纵坐标,绘制标准曲线。
(2)测定
准确称取1g左右块根,剪碎→放入刻度试管中,加入4-5ml蒸馏水→沸水浴提取15min→冷却后定容至10ml(即为A TP提取液)。
取0.2mlATP提取液于比色杯,放入反应暗室,注射0.8ml萤光素酶溶液后,记录发光峰值。
三、计算
ATP(μmol.g-1FW)=查得ATP量(μmol/ml)×提取液总体积(ml)/样品重(g)。
A095 ATP含量测定试剂盒说明书
ATP 含量测定试剂盒简化说明书一、所需仪器可见分光光度计、恒温水浴锅、漩涡混匀器 样本前处理:○ 红细胞:抗凝全血取下层压积红细胞,一般按1:4的体积比加双蒸水进行稀释,再混匀使溶血完全,制备成溶血液。
将制好的溶血液加入玻璃试管中沸水加热煮10分钟,流水冷却后,4000转离心10分钟,取出混匀抽提1分钟,取上清液待测。
○ 组织样本:称重后,剪碎,按重量体积比(W/V)1:9加入沸双蒸水,在沸水中匀浆,制成10%的匀浆液,再置于沸水浴中煮10分钟,取出混匀抽提1分钟,4000转/分离心10分钟,取上清液待测。
○ 培养细胞:先离心处理将细胞核培养上清分离,除去培养上清,得到下层沉淀细胞(一般细胞数量达到106),将收集好的细胞加入300-500μl热双蒸水,置于热水浴(90-100℃)中匀浆破碎,后将细胞悬液于沸水浴中加热10分钟,取出混匀抽提1分钟,即可用于测定。
注:混匀抽提1分钟即为漩涡混匀1分钟。
二、操作步骤:旋涡混匀,37°C 水浴30分钟试剂四:蛋白沉淀剂 50 50 50 50 充分混匀后, 4000rmp/min 离心5分钟,取上清液210ul 进行测定试剂五:显色液500500500500混匀,室温静置2分钟试剂六:终止剂 500 500 500 500室温静置5分钟,在636nm 处0.5cm 光径,蒸馏水调零,测各管吸光度值。
注:在比色前比色皿用自来水洗10余次,再用蒸馏水洗4~5次,以免磷污染。
五、计算公式及举例:① 红细胞中ATP 含量计算公式:(/)0.05/BBATP mmol gHb U U mmol L S S −=××÷−−=×××÷−浓度测定管对照管标准浓度样本测定前稀释倍数血红蛋白含量(Hbg/L)标准管标准空白管 样本测定前稀释倍数血红蛋白含量(Hbg/L)② 组织中ATP 含量计算公式:(/gprot)0.05/BBATP mmol U U mmol L S S −=××÷−−=×××÷−浓度测定管对照管标准浓度样本测定前稀释倍数蛋白含量(gprot/L)标准管标准空白管 样本测定前稀释倍数蛋白含量(gprot/L)。
ATP发光检测试剂盒 说明书
ATP发光检测试剂盒(ATP-Lite Assay Kit)产品说明:ATP,是生命体最基本的能量分子,一种通用的能量“货币”。
ATP参与多种酶促反应,维持正常的生命活动。
通过ATP检测,可以间接定量测定细菌、细胞的数量和活性状态,了解体外ATP参与的酶促反应的进程,在生物检定和生命科学研究中有广泛的应用。
本试剂盒采用生物发光(bioluminescent)法,依据荧光素酶(luciferase)催化底物荧光素的转化,高效利用ATP的能量,发射出光子。
萤火虫荧光素酶(Fireflyluciferase)催化的发光反应,与ATP浓度具有很好的线性依赖关系和极高的敏感性,ATP的检测灵敏度达到10-13 mol。
本试剂盒采用优化的酶反应体系,使发光反应持续数十分钟,以便于手工操作多个样品。
操作简便,可快速获得结果。
产品内容与储存方法:名称数量保存条件100x Lysis Buffer (细胞裂解液) 1 ml -20℃ATP Assay Buffer (反应缓冲液) 10 ml -20℃mlLuciferin 0.5-20℃Firefly luciferase 1 ml -20℃ATP (1 mM) 0.5 ml -20℃可作200次以上ATP检测。
低温运输,-20℃或-80℃避光保存。
有效期6个月。
所需其它试剂:使用者需准备PBS 、双蒸水等。
操作方法:样品准备:对于细胞或微生物样品,应首先提取ATP。
本试剂盒提供培养哺乳细胞的ATP提取方法如下。
其它标本来源的ATP提取,一般可用三氯乙酸的提取方法,或参照文献一些有效提取方法进行。
对体外酶促反应样品,一般可直接用双蒸水稀释后进行检测。
样品中ATP含量应稀释到0.1 mM一下,以保证在测定的线性范围内。
培养哺乳细胞样品准备:1)配制裂解液:临用前,取适量100x Lysis Buffer (ULB),用双蒸水稀释至1xLB,混匀。
1xLB可长期冻存于-20℃。
ATP 含量测试盒说明书
ATP含量测试盒说明书化学发光法一、测定意义:三磷酸腺苷(Adenosine 5'-triphosphate,ATP)是生物体内能量转换最基本的载体, 其含量的变化直接关系到各器官的能量代谢。
ATP作为最重要的能量分子在细胞的各种生理、病理过程中起着重要作用。
ATP水平的改变,会影响许多细胞的功能。
通常细胞在凋亡、坏死或处于一些毒性状态下,ATP水平会下降,而高葡萄糖刺激等对于一些细胞可以上调细胞内ATP水平。
通常ATP水平的下降表明线粒体的功能受损或下降,在细胞凋亡时ATP水平的下降通常和线粒体的膜电位下降同时发生。
二、测试原理:本试剂盒根据萤火虫荧光素酶(Firefly Luciferase)催化荧光素产生荧光时需要ATP提供能量研制而成。
当萤火虫荧光素酶和荧光素都过量时,在一定的浓度范围内荧光的产生和ATP的浓度成正比。
这样就可以高灵敏地检测溶液中的ATP浓度。
本试剂盒在样品体积为100μl时可以检测浓度低达1nmol/L的ATP。
而常规的细胞或组织裂解液中ATP的浓度仅为0.1- 1μmol/L,一些常见细胞的细胞内ATP水平约为10nmol/mg 蛋白。
三、试剂组成及配制:(200T)试剂组成试剂名称包装规格R1 裂解液 100mlR2 底物酶贮备液 0.5ml×4支R3 底物酶稀释液 20ml临用前,取适量的酶贮备液,用酶稀释液按照1:9的比例稀释,配制成酶工作液。
现用现配。
R4 标准品 0.1ml 四、保存条件:-20℃保存6个月。
-80℃可保存一年。
底物酶贮备液需避光保存。
五、样本前处理:1、贴壁细胞:吸除培养液,按照6孔板每孔加入200μl裂解液裂解细胞。
裂解细胞时为了裂解充分,可以使用移液器进行反复吹打,或晃动培养板使裂解液充分接触并裂解细胞。
通常细胞在接触裂解液后会立即裂解。
裂解后4℃,12000g离心5分钟,取上清,用于后续的测定。
2、悬浮细胞:用离心管离心沉淀细胞,弃上清,轻轻弹散细胞,按照6孔板每孔加入200μl裂解液裂解细胞。
ATP 酶测试盒说明书
ATP酶测试盒说明书(简化版)(可测Na+-k+、Ca2+-Mg2+、Ca2+、Mg2+-ATPase)此试剂盒可测不需要高速离心的红细胞膜以及不需要高速离心的组织匀浆中的ATPase。
100管/96样一、测定原理:ATP酶可分解ATP生成ADP及无机磷,测定无机磷的量可判断ATP酶活力的高低。
二、试剂组成与配制:试剂一:液体10ml×3瓶,4℃保存6个月。
试剂二:液体10ml×1瓶,4℃保存6个月。
试剂三:液体10ml×1瓶,4℃保存6个月。
试剂四:粉剂×3支,-20℃以下保存6个月。
用时每支加蒸馏水至5ml,现用现配。
余下的-20℃以下可保存一周。
试剂五:粉剂×1支,4℃保存6个月。
用时加蒸馏水至5ml,适当加热溶解,4℃保存3个月。
试剂六:粉剂×1支,4℃保存6个月。
用时加蒸馏水至10ml,充分加热使其完全溶解,室温保存。
试剂七:液体10ml×2瓶,室温保存6个月。
试剂八:粉剂×3瓶,4℃保存6个月。
用时每瓶加水至40ml溶解。
(溶解后避光4℃可保存一周)。
试剂九:粉剂×1瓶,4℃保存6个月。
用时加水至100ml溶解,室温保存3个月。
试剂十:液体100ml×1瓶,室温保存6个月。
试剂十一:10mmol/L标准磷贮备液10ml×1瓶,4℃保存6个月。
0.5μmol/ml标准磷应用液配制:用时将贮备液20倍稀释,即取0.5ml加蒸馏水定容至10ml。
定磷剂的配制:按试剂八:试剂九:蒸馏水:试剂十=1:1:2:1的比例配制,配好的定磷剂应为浅黄色,若无色则试剂失效,若是蓝色则为磷污染,定磷剂现用现配。
三、试剂组成与配制:试剂一:液体10ml×6瓶,4℃保存6个月。
试剂二:液体10ml×2瓶,4℃保存6个月。
试剂三:液体10ml×1瓶,4℃保存6个月。
试剂四:粉剂×5支,-20℃以下保存6个月。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
ATP含量检测试剂盒(可见分光光度法)使用说明
注意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号:BC0300
规格:100T/48S
产品内容:
组分规格保存
试剂一底物液Ⅰ粉剂×1瓶室温保存
底物液Ⅰ配制:用时加10mL煮沸双蒸水溶解,并沸水浴使溶解完全;临用前观察如有结晶,可沸水浴溶解后置于37℃保存待测。
试剂二底物液Ⅱ20mL×1瓶4℃保存
试剂三促进剂粉剂×2支-20℃保存稀释液760μL×2
瓶
4℃保存
试剂三应用液(促进剂)配制:临用前取1支试剂三稀释液加入1支试剂三粉剂中,充分溶解备用。
试剂四沉淀剂液体 5.5mL×1瓶4℃保存
试剂五显色剂
甲液7mL×4瓶4℃保存
乙液6mL×4瓶4℃保存
显色应用液的配制:用时取一瓶显色剂甲液加入一瓶显色剂乙液中,充分混匀4℃待用,现用现配。
试剂六终止剂50mL×1瓶室温保存
试剂七ATP标准品粉剂×2支4℃保存
5mmol/L ATP标准品贮备液配制:用时加双蒸水定容至1mL,制备5mmol/L ATP标准品贮备液。
1mmol/L ATP标准品应用液配制:将标准品贮备液与双蒸水1:4稀释,即5倍稀释。
产品说明:
三磷酸腺苷(adenosine5'-triphosphate,ATP)是生物体内能量转换最基本的载体,其含量的变化直接关系到各器官的能量代谢。
ATP作为最重要的能量分子在细胞的各种生理、病理过程中起着重要作用。
ATP水平的改变,会影响许多细胞的功能。
通常细胞在凋亡、坏死
或处于一些毒性状态下,ATP水平会下降,而高葡萄糖刺激等对于一些细胞可以上调细胞内ATP水平。
通常ATP水平的下降表明线粒体的功能受损或下降,在细胞凋亡时ATP水平的下降通常和线粒体的膜电位下降同时发生状态。
ATP含量测定试剂盒可以用于检测红细胞或组织内的ATP水平。
自备仪器和用品:
分光光度计、水浴锅、可调式移液枪、台式离心机、研钵和蒸馏水。
操作步骤:
一、样本前处理:
1、红细胞:抗凝全血取下层积压红细胞,一般按1:4的体积比加双蒸水进行稀释,再混匀使溶血完全,制备成溶血液。
将制好的溶血液加入玻璃试管中沸水加热煮10分钟,取出混匀抽提1分钟,4000转/分钟,离心10分钟,取上清液待测。
2、组织样本:准确称取组织重,按质量(g):体积(mL)为1:9的比例加入9倍体积的沸双蒸水,制成10%的匀浆液,再置于沸水中煮10min,取出混匀抽提1min,3500转/分钟,离心10min,取上清液待测。
3、培养细胞:先离心处理将细胞核培养上清分离,弃上清,得到下层沉淀细胞(一般细胞数量达到106个),将收集好的细胞加入300-500μL的热双蒸水,置于热水浴(90-100℃)中匀浆破碎后,将细胞悬液于沸水浴中加热10min,取出混匀抽提1min(涡旋混匀),即可用于测定。
(如果存在大块细胞碎片,需离心后取上清测定)
二、操作步骤
试剂名称(μL)测定管对照管标准管空白管
样本3030
1mmol/L标准液3030
试剂一100100100100
试剂二200200200200
试剂三3030
蒸馏水3030
充分混匀,37℃水浴30min
试剂四50505050
充分混匀,4000rpm离心5min,取上清液300μL测定
样本上清液300300300300
试剂五500500500500
混匀,室温静置2min
试剂六500500500500
混匀,室温静置5min,波长636nm,光径0.5cm,双蒸水调零,测定各管吸光值。
注意:在比色前比色皿用自来水洗10次,再用蒸馏水洗4-5次,以免磷污染。
如果样本量大,建议将试剂混合后再按照该表操作
1混合试剂配制:
工作液A:按试剂一:试剂二:试剂三=100:200:30的比例配制,现用现配,按需配制。
工作液B:按试剂一:试剂二=100:200的比例配制,现用现配,按需配制。
2、试剂配好后按下表操作:
试剂名称(μL)测定管对照管标准管空白管
样本3030
1mmol/L标准
3030
液
工作液A330330
工作液B300300
蒸馏水3030
充分混匀,37℃水浴30min
试剂四50505050
充分混匀,4000rpm离心5min,取上清液300μL测定
样本上清液300300300300
试剂五500500500500
混匀,室温静置2min
试剂六500500500500
混匀,室温静置5min,波长636nm,光径0.5cm,双蒸水调零,测定各管吸光值。
注意:在比色前比色皿用自来水洗10次,再用蒸馏水洗4-5次,以免磷污染。
ATP含量计算:
1、红细胞中ATP含量计算
ATP含量(μmol/gHb)=[(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白)]×标准品浓度(1×10 3μmol/L)×样本测定前稀释倍数÷血红蛋白浓度(gHb/L)
2、组织、细胞中ATP含量计算
3、ATP含量(μmol/gprot)=[(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白)]×标准品浓度(1×103μmol/L)×样本测定前稀释倍数÷待测样本蛋白浓度(gprot/L)
注意:
1.要求不能有任何磷污染,建议最好用一次性塑料试管。
2.显色应用液配好后,不可放置太久,一般可保存5天,最好现配现用。
3.组织匀浆宜用2%-5%浓度的匀浆上清,若样本浓度过高,则底色过深(对照管OD过高),需稀释测定,一般通过预实验将对照OD值控制在 1.0以下。