【整理】外周血细胞形态学检验及诊断技巧
外周血细胞形态学
外周血细胞形态的临床意义
外周血细胞形态的临床意义摘要：一、外周血细胞形态的基本概念二、外周血细胞形态的临床检测方法三、外周血细胞形态的临床意义1.红细胞形态2.白细胞形态3.血小板形态四、外周血细胞形态异常的临床应用五、总结正文：外周血细胞形态的临床意义外周血细胞形态是指血液中红细胞、白细胞和血小板的外观特征。
这些形态特征对于临床诊断和治疗疾病具有重要意义。
本文将详细介绍外周血细胞形态的临床意义，以便于大家更好地理解其在临床实践中的应用。
一、外周血细胞形态的基本概念外周血细胞形态主要包括红细胞、白细胞和血小板的外观特征。
红细胞形态主要包括大小、形状、染色质等方面；白细胞形态主要包括大小、形状、核形等方面；血小板形态主要包括大小、形状、颗粒等方面。
二、外周血细胞形态的临床检测方法临床检测外周血细胞形态主要通过光学显微镜进行。
在光学显微镜下，医生可以观察到血细胞的形态特征，从而为诊断和治疗疾病提供依据。
此外，现代医学还采用自动化血液分析仪对血细胞形态进行检测，提高检测的准确性和效率。
三、外周血细胞形态的临床意义1.红细胞形态红细胞形态异常常见于多种疾病，如缺铁性贫血、β-地贫、再生障碍性贫血等。
通过观察红细胞形态的变化，可以对上述疾病进行初步诊断和病情评估。
2.白细胞形态白细胞形态异常常见于感染、炎症、免疫系统疾病等。
通过观察白细胞形态的变化，可以对病因进行初步判断，并为抗生素的应用提供参考。
3.血小板形态血小板形态异常常见于血小板减少性紫癜、骨髓增生异常综合征等。
通过观察血小板形态的变化，可以对相关疾病进行诊断和治疗。
四、外周血细胞形态异常的临床应用外周血细胞形态异常在临床诊断和治疗中具有重要意义。
例如，在临床实践中，通过观察红细胞形态异常，可以初步判断患者是否存在贫血等疾病；通过观察白细胞形态异常，可以判断患者是否存在感染、炎症等疾病；通过观察血小板形态异常，可以判断患者是否存在血小板减少性紫癜等疾病。
五、总结外周血细胞形态在临床诊断和治疗中具有重要价值。
外周血细胞形态学检验及技巧
外周血细胞形态学检验及技巧卫生部医院血液科天林卫生部临床检验中心明婷谷小林陆红一．血液学及血细胞形态学临床应用：●是临床血液病诊断与治疗及临床医学检验学的基础工作。
●血细胞形态学适用于临床血液病诊断快速简捷的要求。
●近年来由于血细胞学及超微结构、免疫学、细胞遗传学、融合基因、造血干细胞及其细胞因子、骨髓造血微环境、基质细胞、树突状细胞、淋巴系细胞发生及其疾病表现，细胞增殖动力学与细胞凋亡以及骨髓组织病理学应用，推动了血液的临床与实验室的新知识迅猛发展。
●当前血液病不能单凭临床与形态学作出诊断，必须以临床和血细胞形态学为基础，将免疫学、细胞遗传学及分子生物学新知识、新技术应用到血液学中，构成现代临床血液学与分子生物学诊断技术，弥补形态学的经验性与主观性带来负面缺陷，才能提高血液病的诊断与治疗水平。
●进入90 年代以来，国外采用多学科联合技术综合诊断技术与方案：○FAB-AL （1976 ）、NCL （美国国家癌症研究所）对FAB-AL 分型的补充（1995 ）、AL-MIC 分（类）型，MIC 及MICM 分型（1985-1990 ）；○FAB-CL 分型（1989 ）、中国CL 分型（1997 ）；○FAB-MDS 分型（1982 ）、MIC 协作组对FAB-MDS 分型提出补充建议（1987 ）；○WHO 对造血系统及髓系恶性疾病和淋巴系恶性肿瘤WHO 分类（2000 ）；●血细胞形态学诊断技术正在进入显微图象软件时期：○创造出许多多功能软件，如血细胞形态学、细胞化学染色、血液病诊断与鉴别诊断、CL 诊断与治疗及教学系统多媒体软件等。
○将显微镜与微机相连，应用储存、分类、检索软件，编辑、打印诊断报告，并可附多幅细胞图象。
二．血细胞形态学基本概念血细胞形态学作为临床血液病基础诊断：●观察血细胞形态和数量及其比例的变化来研究造血器官的结构和功能是血液学的重要组成部分，是诊断造血系统疾病最基本、最简便实用的检查方法，被临床普遍应用。
外周血细胞形态学检验及诊断技巧
外周血细胞形态学检验及诊断技巧病理性形态学改变：①中性粒细胞●中性粒细胞分叶分化程度，○被认为从干细胞至粒细胞生成是否正常及与粒细胞年龄相关；如核分叶不良，Pelger-huet现象；○核仅一叶或二叶，其百分率增加时谓之"左移"，反之，多数细胞四叶以上谓之右移，○一般认为正常中性粒细胞胞核分叶情况：--4叶者为15~25%3叶者为40~50%--2叶者为20~40%1叶者为5%--5叶以上者提示有巨幼细胞性贫血的可能。
○右移现象：-多见于巨幼细胞性贫血、肝脏疾患，并可以5叶与4叶所占比例计算，得出简单实用的分叶指数：分叶指数=5叶/4叶100%正常核分叶指数：0~17%还见于缺铁性贫血、类风湿性关节炎、遗传性高分叶症(显性遗传)及某些败血症(以左移多见)。
○左移现象-见于感染、败血症、出血、小儿慢性中性粒细胞减少症等。
●中性粒细胞毒性颗粒及空泡改变：中性粒细胞由于受到外来刺激(包括感染及应激反应)引起颗粒变性，粗大着色深染及浆内空泡等病理性改变。
上述改变及白细胞数增多和出现幼稚及原始细胞则为类白血病反应。
○慢性粒细胞白血病(CGL)的中性成熟粒细胞一般胞浆颗粒较正常稀少，但无空泡及毒性颗粒，而慢性中性粒细胞白血病(CNL)的中性成熟粒细胞则与类白血病反应形态相似。
○假性嗜酸性颗粒形态异常：类似嗜酸性样颗粒的出现。
-在某些干细胞疾病如MDS、粒细胞缺乏症、肾性贫血某些患者中性粒细胞的颗粒增多○遗传性白细胞异常疾病：是先天性白细胞异常疾病，临床上虽罕见，但为了提高辨别的能力，应有所认识。
○Pelger-Huer白细胞异常：属于显性遗传，其白细胞形态特点：核分叶不良，不分叶，核呈花生形、亚铃形等形状，无核丝形成，胞浆正常，此外，还有假性(即继发性)Pelger-huet白细胞异常应加以鉴别，后者常见于急性肠炎、伤寒、疟疾、流感，无家族史，但在原发病得到治疗后白细胞形态恢复正常。
○Alder-Reilly颗粒异常：常染色体隐性遗传性多糖代谢障碍性疾病，常伴有软骨畸形、肝、脾肿大等，中性、嗜酸性及嗜碱性粒细胞含有多量嗜天青颗粒遮盖整个细胞，单核细胞亦有类似改变。
外周血细胞形态检验
详细描述
自动化血液分析仪法具有快速、高效的特点，能够提供大量数据，如白细胞计数 、分类比等。但该方法对异常细胞的识别能力有限，可能漏检或误诊。
流式细胞术
总结词
流式细胞术是一种高灵敏度的外周血 细胞形态检验方法，通过流式细胞仪 对细胞表面标记物进行检测。
疾病筛查
外周血细胞形态检验可辅 助筛查某些潜在疾病，如 肿瘤、感染等。
免疫系统评估
观察外周血细胞形态变化， 有助于评估免疫系统的功 能状态，判断个体对疾病 的抵抗力。
04 外周血细胞形态检验的注 意事项
样本采集和处理
采集时间
样本处理
选择清晨空腹时采集样本，以避免饮 食和日常活动对检验结果的影响。
详细描述
流式细胞术能够快速检测大量细胞， 并对细胞表面标记物进行分析，有助 于疾病的诊断和预后评估。但该方法 对仪器和试剂的要求较高，且数据分 析需要专业人员。
03 外周血细胞形态检验的应 用
诊断血液系统疾病
贫血
通过观察红细胞大小、形态和染色情 况，判断贫血的类型和原因，如缺铁 性贫血、巨幼细胞贫血等。
全自动血细胞分析仪
01
能够自动完成血样的稀释、染色、计数和分类等步骤，提高检
验效率。
智能化识别系统
02
通过图像识别和机器学习等技术，实现血细胞形态的自动识别
和分类，减少人为误差。
自动化样本处理
03
利用机器人技术实现样本的自动取样、稀释、染色和检测等操
作，提高检验过程的自动化水平。
临床应用前景
精准医疗
利用计算机算法对显微镜下的血 细胞图像进行自动识别和分析，
外周血细胞形态检验的临床分析
外周血细胞形态检验的临床分析外周血细胞形态检验是通过显微镜观察染色后的外周血涂片，对红细胞、白细胞和血小板的形态进行定性和定量的分析。
其中，红细胞形态检查主要观察红细胞的大小、形状、染色性和有无形态异常；白细胞形态检查则主要观察白细胞的类型、数量和形态异常；血小板形态检查则主要观察血小板的数量和形态异常。
通过观察这些形态特征，可以初步判断患者是否存在红细胞、白细胞或血小板相关的疾病。
在临床上，外周血细胞形态检验在很多疾病的诊断和鉴别诊断中起到重要的作用。
以红细胞形态检查为例，当发现红细胞大小、形状和染色性有异常时，可以初步推测存在红细胞的遗传性贫血病、获得性贫血病以及一些器质性疾病如肾性贫血等。
对于白细胞形态的检查，可以通过观察不同种类的白细胞数量的变化以及它们的形态特征，来推测出不同的疾病情况，如感染、白血病和淋巴瘤等。
此外，对血小板的形态检查，也可以帮助检查血小板减少或增多的原因，如血液病、骨髓增生异常综合征等。
然而，外周血细胞形态检验的结果并不能确定具体的疾病，只能作为初步的参考，需要结合临床症状和其他实验室检查结果来进行综合分析和判断。
因此，在进行外周血细胞形态检验时，医生还需要了解患者的病史、临床表现和其他实验室检查结果，以进行综合性的临床分析。
除了观察细胞形态特征外，外周血细胞形态检验还可以通过一些特殊染色方法，对一些细胞结构和功能进行进一步检查。
例如，在进行血小板形态检查时，可以用光学显微镜观察血小板的形态和数量，并通过其他染色方法检查血小板内的颗粒、免疫球蛋白等成分的存在情况。
这些进一步检查可以为解释外周血细胞形态异常的原因提供更多的线索。
总之，外周血细胞形态检验是一项常见的临床检验方法，在疾病的诊断和鉴别诊断中起到重要的作用。
通过观察和分析患者的红细胞、白细胞和血小板的形态特征，可以初步判断患者是否存在血液相关的疾病，并为进一步诊断、治疗和随访提供参考依据。
然而，外周血细胞形态检验的结果需要结合临床病史、症状和其他实验室检查结果进行综合分析和判断，以获得更准确的诊断结果。
外周血细胞形态分析2篇
外周血细胞形态分析2篇文章一：外周血细胞形态分析外周血细胞形态分析是一种常用的临床检测方法，可以通过观察外周血液中各种细胞在形态、数量、比例等方面的变化，辅助诊断多种疾病，包括感染性疾病、肿瘤、贫血等。
下面我们来详细介绍一下外周血细胞形态分析的相关内容。
一、外周血细胞形态分类外周血细胞形态分类包括红细胞、白细胞和血小板三种类型，它们都具有不同的形态特点。
1、红细胞：正常人的红细胞呈圆盘状，直径为7.2-7.5微米，厚度为2.2-2.5微米，中央凹陷，内有胞质色素。
血液中红细胞数量和质量的变化对诊断贫血有很大的帮助。
2、白细胞：正常人的白细胞数量为4000-11000个/μl，包括中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞五种类型。
不同类型的白细胞在形态和功能上都有所差异，可以根据它们的比例和数量来判断人体对感染的反应以及肿瘤等疾病的情况。
3、血小板：正常人的血小板数量为150-400×10^3个/μl，它们是无肌肉、无核的小片状细胞，主要功能是在血管损伤处形成血栓，以保护身体。
二、外周血细胞形态变化的意义1、白细胞增多：当人体感染入侵病原体或出现炎症等状况时，白细胞会增加。
增多的白细胞主要是中性粒细胞，而淋巴细胞数量也会增加，但比例不如中性粒细胞。
白细胞增多也可以是骨髓增生异常综合征、白血病等造成的。
2、白细胞减少：当人体免疫功能下降、免疫缺陷病毒感染或恶性肿瘤等病情时，白细胞会减少。
减少的白细胞包括多种类型，以淋巴细胞减少为主。
3、中性粒细胞增多：当人体感染或出现炎症时，中性粒细胞会增多。
增多的中性粒细胞可以估计感染的严重程度和感染细菌的种类。
这种情况发生在肺炎、腹腔炎、化脓性脑膜炎等疾病中。
4、中性粒细胞减少：中性粒细胞减少在感染性疾病、药物治疗后和自身免疫性疾病等病情中常常发生。
5、淋巴细胞增多：淋巴细胞增多通常发生在病毒感染、慢性炎症和淋巴组织肿瘤疾病等情况中。
外周血细胞形态学检验
外周血细胞形态学检验
外周血细胞形态学检验是通过对患者的外周血液样本进行显微镜检查，观察和描述各类血细胞（红细胞、白细胞和血小板）的形态结构，以了解患者的血液情况。
这种检验通常由临床实验室的医学实验室专业人员进行。
具体步骤包括：
一、采集外周血样本：通过采血针抽取一小量患者外周血。
二、制备血涂片：将采集的外周血涂抹在载玻片上，通过专用的技术制备出薄而均匀的血涂片。
三、染色：对血涂片进行染色，常用的染色方法包括Wright染色或Giemsa染色。
这些染色方法能够突出血细胞的核和胞浆结构，使其在显微镜下更容易观察。
四、显微镜观察：将染好色的血涂片放在显微镜下观察。
实验室技术人员会仔细检查红细胞、白细胞和血小板的数量、形状、大小、颜色、核形态等方面的特征。
五、形态学描述：根据观察结果，进行详细的形态学描述。
这可能包括有关红细胞形态（比如贫血、红细胞异常）、白细胞形态（比如感染、白血病）和血小板形态（比如凝血功能异常）的信息。
外周血细胞形态检验
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空泡
可在细胞质或核中出现， 常为多个，被认为是 细胞脂肪变性后未能 着色所致。
外周血细胞形态检验
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杜勒小体
细胞质内出现嗜碱性 多呈斑块、梨形或云 雾状，可能为核浆发 育不平衡所致，为细 胞严重毒性变表现
外周血细胞形态检验
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核棘突
胞核有各种形态芽状突出， 临床意义尚不明确，可能 与中毒、癌转移、严重放 射损伤等相关。
外周粒血细细胞胞形异态检常验：中性粒细胞巨幼变，细胞分叶过多，呈7叶状58。/87
粒细胞异常：佩尔格尔休特（Pelger-Huet)异常，细胞分叶
外周血到细2胞叶形为态止检验，圆形或卵圆形，染色质显著浓缩。
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粒细胞异常：佩尔格尔休特（Pelger-huet）异常，细胞分两
外周叶血，细胞核形染态色检验质显著浓缩，如眼镜状。
拖外周鞋血形细胞红形细态胞检验，环形红细胞，泪滴形红细胞。
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异常白细胞形态检验
外周血细胞形态检验
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白细胞 粒细胞
中性粒细胞：中性粒细胞核分叶情况 1叶<5-8% 2叶20-35% 3叶40-50% 4叶15-20% 5叶<0.5% 6叶 0%
核左移：外周血中性杆状核细胞增多或出现晚 幼粒、中幼粒，甚至早幼粒细胞现 象。
外周血细胞形态检验
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血涂片染色
● 原理 瑞氏（Wright）染色法（经典染色法） 瑞氏染色法使细胞着色现有化学亲和反应，又有物理吸附作用。 瑞氏染液含美蓝和伊红两种成份：美蓝偏碱性，与细胞内酸性物质有亲和
力（胞 浆），染成兰色； 伊红偏酸性，与细胞内碱性物质有亲和力（胞核）， 染成紫红色。
外周血细胞形态分析报告
外周血细胞形态分析报告摘要外周血细胞形态分析是一种常见的临床检查方法，通过观察和描述血液中各类细胞的形态特征，可以为医生提供诊断和治疗患者的参考依据。
本文将详细介绍外周血细胞形态分析的步骤和注意事项。
1. 准备样本在进行外周血细胞形态分析之前，首先需要采集患者的外周血样本。
通常，医生会在患者的肘部内侧或手背的静脉附近进行采血。
采血时，需要使用无菌技术，以避免样本污染。
采集到的外周血样本通常需尽快送至实验室进行分析。
2. 细胞涂片制备将外周血样本送至实验室后，需要制备细胞涂片以供观察。
制备细胞涂片的步骤包括：取一滴外周血样本，将其均匀涂布于玻璃载玻片上，然后用另一片载玻片将其横向涂开。
制备完毕后，将载玻片晾干。
3. 染色制备好的细胞涂片需要进行染色，以增强细胞形态的对比度。
常用的染色方法有Wright染色、Giemsa染色等。
染色液可以根据实验室的标准制备或购买。
将细胞涂片浸入染色液中，一般需要几分钟至十几分钟的时间，然后取出并用水冲洗。
4. 镜检观察经过染色的细胞涂片可以放置在显微镜下进行观察。
观察时，可以使用低倍镜（如10倍或20倍）进行初步扫描，然后再切换到高倍镜（如50倍或100倍）进行详细观察。
通过观察细胞的形态特征，可以识别出红细胞、白细胞和血小板等不同类型的细胞。
5. 形态分析在观察细胞时，需要注意细胞的大小、形状、颜色、核形态等特征。
例如，红细胞的正常直径约为6-8微米，呈双凸形，中间凹陷，颜色为淡红色；而白细胞的大小和形状则因类型不同而有所差异。
通过比对细胞的形态特征与正常值的对比，可以判断患者是否存在异常情况。
6. 结果分析根据细胞形态分析的结果，可以得出相应的结论。
例如，红细胞形态异常、白细胞数量增多或减少、血小板形态异常等都可能与某些疾病相关。
医生可以根据分析结果判断患者是否存在潜在的疾病风险，并制定相应的治疗方案。
7. 注意事项在进行外周血细胞形态分析时，需要注意以下几点： - 采血时要严格遵守无菌技术，以防止样本污染。
外周血细胞形态学检查
1:10 1:20 1:50
增生极度减低 1:200
50-100 20-50 5-10
<5
白血病，增 生性贫血 健康人，贫
血 造血功能低 下，部分稀
释 再障，完全
稀释
3.巨核细胞计数并分类
巨核细胞体积大，全片数量少（尾部等边缘 部位较多），故巨核细胞计数一般在低倍镜 下进行。
4.观察全片有无成堆分布异常细胞
2.计数与分类
计数分类一定数量的有核细胞（至少100 个），同时注意观察各细胞形态，并要全片观 察血涂片的其他部位（尤其尾部等血膜边缘 处）。
粒细胞系统
观察各阶段粒细胞的数量（50%-70%） 及形态，注意有无原始细胞、幼稚粒细胞、 棒状小体、粒细胞毒性改变、粒细胞分叶过 多或过少等。
淋巴细胞系统
当发生干抽时，在针头中有时可以有少量 骨髓组织，如用针心将其推出，可以制作 一张涂片，仍可供检查。一般可更换部位 再行穿刺，部份病例（如骨髓纤维化）须 作骨髓活检
骨髓涂片的制备
与血片制备基本相同
每次制备4-6张，选取制备良好的 染色
低倍镜观察
1.观察涂片质量
观察涂片厚薄、骨髓小粒多少、油滴、染色 等，然后选择满意的区域进行有核分类、计数。
传染性淋巴细胞增多症是一种传染病，主要 发生于儿童，少数散发于成人。1941年由 Smith将其与传染性单核细胞增多症区别开来。 本病的特征为外周血中白细胞总数增多，其 中以淋巴细胞增多为主，持续时间较长，症 状较轻且为非特异性，部分无症状或体征而 仅在血常规检查时发现。
3.骨髓象变化不显著而血象变化显著
骨髓细胞形态学检查
骨髓细胞可通过多种手段进行检查，其中 最简单、最实用的是普通显微镜检查，是诊 断许多疾病，尤其是血液系统疾病的重要手 段之一。
外周血细胞形态学
外周血细胞形态学
外周血细胞形态学是一种检查外周血细胞的形态和数量的实验室检查方法，通过观察和计数血液中的红细胞、白细胞、血小板等细胞的形态和数量来评估一个人的健康状况。
外周血细胞形态学可以帮助诊断和监测多种疾病，包括贫血、感染、白血病、骨髓问题等。
在这个检查中，一般会对血液样本进行染色，然后在显微镜下观察细胞的形态，并计数各种细胞的数量。
通过观察红细胞的形态可以评估贫血的类型和原因，如巨幼红细胞可以提示巨幼细胞性贫血；通过观察白细胞的形态可以帮助诊断感染或白血病等；通过观察血小板的形态可以评估出血或凝血问题等。
外周血细胞形态学是一项常见且重要的实验室检查，可以为医生提供有关患者健康状况的重要信息，帮助诊断和治疗疾病。
外周血细胞形态学检验及技巧
外周血细胞形态学检验及技巧外周血细胞形态学检验及技巧卫生部北京医院血液科郑天林卫生部临床检验中心彭明婷谷小林陆红一.血液学及血细胞形态学临床应用：•是临床血液病诊断与治疗及临床医学检验学的基础工作。
•血细胞形态学适用于临床血液病诊断快速简捷的要求。
•近年来由于血细胞学及超微结构、免疫学、细胞遗传学、融合基因、造血干细胞及其细胞因子、骨髓造血微环境、基质细胞、树突状细胞、淋巴系细胞发生及其疾病表现，细胞增殖动力学与细胞凋亡以及骨髓组织病理学应用，推动了血液的临床与实验室的新知识迅猛发展。
•当前血液病不能单凭临床与形态学作出诊断，必须以临床和血细胞形态学为基础，将免疫学、细胞遗传学及分子生物学新知识、新技术应用到血液学中，构成现代临床血液学与分子生物学诊断技术，弥补形态学的经验性与主观性带来负面缺陷，才能提高血液病的诊断与治疗水平。
• 进入90 年代以来，国内外采用多学科联合技术综合诊断技术与方案：O FAB-AL ( 1976 )、NCL (美国国家癌症研究所 ) 对FAB-AL 分型的补充( 1995 )、AL-MIC 分(类)型，MIC 及MICM 分型( 1985-1990 )；O FAB-CL 分型 ( 1989 )、中国CL 分型( 1997 )；O FAB-MDS 分型( 1982 )、MIC 协作组对FAB-MDS 分型提出补充建议( 1987 )；O WHO 对造血系统及髓系恶性疾病和淋巴系恶性肿瘤WHO 分类 ( 2000 )；• 血细胞形态学诊断技术正在进入显微图象软件时期：O创造出许多多功能软件，如血细胞形态学、细胞化学染色、血液病诊断与鉴别诊断、CL 诊断与治疗及教学系统多媒体软件等。
O将显微镜与微机相连，应用储存、分类、检索软件，编辑、打印诊断报告，并可附多幅细胞图象。
二．血细胞形态学基本概念血细胞形态学作为临床血液病基础诊断：•观察血细胞形态和数量及其比例的变化来研究造血器官的结构和功能是血液学的重要组成部分，是诊断造血系统疾病最基本、最简便实用的检查方法，被临床普遍应用。
外周细胞形态学检查技术
2.原单、原粒及原淋的鉴别
鉴别 原单
原粒
原淋
大小 大，14～25µm
中等，10～20µm
小，10～18µm
胞体 核形
类圆或不规则，可有伪足 圆形、类圆形
不规则或规则、类圆形，常 圆或类圆形，也可不
有折叠
规则
类圆、椭圆或不规则 圆形、类圆或不规则
核仁 染色质
1～3个（常1），大而清
2～5个，小而清晰
外周细胞形态学检查技术
一、各种类似细胞等的鉴别 二、儿童血片的主要特点
外周血细胞形态学检查技术目录
➢ 绪论 ➢ 血细胞的发育（略） ➢ 外周成熟血细胞形态学 ➢ 外周异常血细胞形态学 ➢ 各种类似细胞的鉴别 ➢ 外周血细胞形态学检查 ➢ 血液系统等疾病的血常规检验特点 ➢ 外周血细胞形态学考核（略）
13. 中性幼稚粒细胞与淋巴细胞
➢ 中性幼稚粒细胞中性颗粒减少、大淋巴细胞较大或颗粒较 多等，两者需进行鉴别
➢ 中性幼稚粒细胞：染色质较细，胞质中含有中性颗粒，胞 质的颜色蓝色或淡蓝色
➢ 大淋巴细胞：染色质粗，副染色质不明显，胞质一般 呈清澈淡蓝色
14. 中性粒细胞与晚幼红细胞
14. 中性粒细胞与晚幼红细胞
细胞相似的原因？
大致有以下几种情况 ➢ 制片及染色技术造成 ➢ 选择观察的部位不当造成的 ➢ 细胞本身的特征不明显 ➢ 基本功不够扎实
➢形态不是一个简单的图谱，它代表着一种语言， 是一种疾病的某种表现，我们应该抛却静态的 眼光，以动态的眼光观察细胞，透过一些表面 现象看到其本质。
➢培养科学的态度，哲学的思辨分析细胞，寻找 和推理与临床内在联系和规律，只有这样才能 掌握细胞的灵魂与精髓，将得到的感性认识融 会贯通，运用自如。
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外周血细胞形态学检验及诊断技巧主讲：卫生部北京医院郑天林录制：卫星卫生科技教育网监制：卫生部科教司一.概述（一）血细胞形态学基本概念（二）血细胞形态学检查方法（三）血液学及血细胞形态学临床应用（四）临床/形态学诊断与血液学检验及专业人员素质问题二．血细胞染色法（一）细胞染色机理（二）瑞氏染色（三）姬姆萨染色（四）瑞氏-姬姆萨染色液鉴定（五）瑞氏-姬姆萨混合染色三．形态学与血液检查与自身特性（一）血常规（二）白细胞分类（三）骨髓外周血细胞形态学及分类（四）血细胞涂片特性四．血细胞形态学采样、制片与检查程序（一）采样、制片、染色工序至关重要（二）染色五．外周血细胞形态学检验技巧（一）WBC形态学（二）红细胞形态学（三）出现有核（内/巨幼）红/幼粒细胞意义（四）血小板巨核细胞六．外周血细胞形态学检查步骤、注意事项及检查报告书写内容（一）注意事项（二）外周血涂片检查步骤（三）外周血涂片报告内容一、概述（一）．血细胞形态学基本概念（二）血细胞形态学检查方法（三）血液学及血细胞形态学临床应用（四）临床/形态学诊断与血液学检验及专业人员素质问题一．概述血细胞形态学是血液病基础诊断与血液学检验的重要项目●正常人的血液及造血器官中，各种血细胞的数量有一定的正常范围，不同血细胞及细胞发育的不同阶段有一定形态结构特点。
●观察血细胞形态和数量及其比例的变化来研究造血器官的结构和功能是血液学的重要组成部分，是诊断造血系统疾病最基本、被临床普遍应用的最简便实用的检查方法。
●在造血系统疾病发生造血功能紊乱，引起血细胞形态学的量和质的改变。
在临床各科某些原发性疾病患者出现继发性血液学形态学的病理改变，籍以了解患者机体状况如感染（细菌、病毒、寄生虫、药物）等反应。
●血细胞形态学检查是为临产提供诊断依据，应备有患者的临床表现基础检查初步诊断的病历摘要，才能进行形态学检查。
必要时还要做骨髓活检（切片、活检材料滚片、活检穿刺针残液图片）细胞化学染色,免疫学表型等检查的必备程序。
●血细胞形态学检查应包括外周血和骨髓两部分组成，必须平行进行检查。
外周血细胞改变往往反映骨髓病变的重要信息，有利于诊断。
●疑似血液病和血液学检查异常情况不能只依赖使用分析仪做血常规检查而废弃镜下血涂片细胞形态学检查的错误倾向。
二）细胞形态学检查方法1．光镜细胞形态学；细胞形态学的基本内容和常用的检查方法，广泛用于临床方法。
2．细胞化学染色：是细胞和化学两者相结合的形态学方法，保持细胞完整组织结构显示化学结构成分-定性/半定量，主要用于白血病分型鉴别诊断3．相差镜检查：用于观察活细胞的内部结构及活动，细胞生长成熟衰亡过程及对各种刺激的反应4．荧光显微镜检查用荧光染色血细胞，常用于DNA、RNA的检查。
近年来由于流式细胞仪的应用而逐渐被替代。
5．电镜（透射/扫描）观察细胞超微结构改变了不少光镜细胞结构概念，在形态学上是对光镜的一个重要扩展和补充。
6．骨髓组织病理学检查是对骨髓涂片检查的一个重要补充，相互补遗提高诊断水平。
（三）血液学及血细胞形态学临床应用：●是临床血液病诊断与治疗及临床医学检验学的基础工作。
●血细胞形态学适用于临床血液病诊断的基础诊断快速简捷的要求。
●近年来由于血细胞学及超微结构、细胞化学、造血干细胞及其细胞因子、骨髓造血微环境、基质细胞、树突状细胞、淋巴系细胞发生及其疾病表现，细胞增殖动力学与细胞凋亡以及骨髓组织病理学免疫学、细胞遗传学、融合基因、分子生物学的血液分析仪、流式细胞仪的应用，推动了血液病与血液学的新知识迅猛发展。
●当前血液病不能单凭临床与形态学作出诊断，必须以临床和血细胞形态学为基础，将免疫学、细胞遗传学及分子生物学新知识、新技术应用到血液学中，构成现代临床血液学与分子生物学诊断技术，弥补形态学的经验性与主观性带来负面缺陷，才能提高血液病的诊断与治疗水平达到WHO新分类的分子生物学水平。
进入90年代以来，国内外采用多学科联合技术综合诊断技术与方案：○FAB-AL（1976）、 NCL （美国国家癌症研究所1990）对FAB-AL分型的补充建议、AL-MIC分（类）型及MICM分型（1985-1990）；○FAB-CL分型（1989）、中国CL分型（1997）；○FAB-MDS分型（1982）、MIC 协作组对FAB-MDS分型提出补充建议（1987）；○WHO对造血系统及髓系恶性疾病和淋巴系恶性肿瘤WHO分类（2000）血细胞形态学诊断技术正在进入显微图象软件时期：○创造出许多多功能软件，如血细胞形态学、细胞化学染色、血液病诊断与鉴别诊断、CL诊断与治疗及教学系统多媒体软件等。
○将显微镜与微机相连，应用储存、分类、检索软件，编辑、打印诊断报告，并可附多幅细胞图象。
（四）临床-形态学诊断与血液学检验及专业人员素质●普遍存在临床与实验室知识面分离现象：○临床医师缺乏实验室知识和技能，甚至不掌握基本形态学能力，诊断依赖实验室报告○实验室人员往往缺乏血液病基本知识与诊断及鉴别诊断的能力“就形态论形态”，常有报告不确实●具备临床与细胞形态学等实验室技术、知识的双重本领及其相互融合十分重要。
缺其一都是血液专业上的缺陷。
●随着血液分析仪普及和档次升高而忽视废弃形态学检查的错误倾向。
即是最好的五分类血液分析仪也不能替代镜下形态学观察，否则导致延误或漏诊严重错误的发生●形态学诊断是十分费时、细致、艰苦的工作，来不得半点虚假，因此形态学专业人员要具有高素质的基本条件：○要充分发挥人的主观能动性；○要具有较高的形态学水平、全面的临床与血液学及有关边缘学科知识，才能算得上德材兼备的优秀专业人才。
○因此只有认真观察与思维才能发现问题，解决问题。
应牢记著名微生物学家-巴士德铭言“在观察的领域中，机遇总是偏爱那些有准备的头脑”。
●树立起临床疾病的正确思维程序，遵循循证医学起到“纲举目张”的功效。
是指导在临床和检验实践中确立诊疗时应以个人知识与技术和当前获得最佳的临床资料与参数有机的结合起来，充分运用诊断与检验技巧在工作中取得更多的客观依据，才能把血液病诊断与血液学检验提高到新的高度。
所谓技巧就是解决实际问题的诀窍。
二．血细胞染色法（一）细胞染色机理：染色是将细胞经染色剂的物理及化学作用，使其清楚显示细胞各个组成部分，有利辨识细胞形态。
●染色可分二个步骤：1．染料受相应物质吸附而附着于物质表面；2．固着作用：○即染色粒子进入细胞内起化学反应（染料透过细胞膜的学说很多，尚无定论），与相应的物质形成溶解度很低的盐固着于细胞内而显色。
○染色剂皆有选择作用，其染色不是将细胞全部一齐着色，而只是将其中一部分染色，多余的被冲洗掉。
目前多以吸附学说（电力吸附、机械吸附、化学吸附）来解释。
●一般染色方法由两种染色剂（酸性、碱性）组成，通常细胞核及浆碱性粒体为碱性，细胞浆为酸性。
○酸性染料可和带正电荷的（碱性）物质结合，这种物质称嗜酸性物质，对酸性染料具有亲和力，因此嗜酸性粒细胞之颗粒本身为碱性物质；○碱性染料可和带负电荷的（酸性）物质相结合，这种物质称嗜碱性物质，对碱性染色粒具有亲和力。
○另一种蛋白质在pH6.4 呈等电状态，本身所含的正/负电荷相等，既能和酸性染料又能和碱性染料结合，这种物质称中性物质，如中性粒细胞之颗粒。
●一般用pH6.4 PBS 来稀释染液：○在恒定条件下着色，使染色效果趋于一致。
○染液过碱时，蛋白质带有负电荷，对次甲蓝有色部分的正电荷吸附力强染成的细胞一般着色较蓝，说明pH不适合。
●染色与固定亦有极大关系：○因细胞经固定后，其蛋白质的电力吸附（电附）可能有变化，有些固定液能将细胞某部分的电附加强，使其染色更为容易。
○伊红与胞核虽无电附仍有机械吸附，能染上少量红色，苏木液与胞浆虽无电附但也有机械吸附，因而胞浆略显蓝色。
●血细胞的染色多采用瑞氏染色和姬姆萨染色两种，○作者取其两种染色的优点，采用瑞氏和姬姆萨混合染色法，比单用一种染色法更佳。
○一些快速和改良染色方法及染色液商品化，对血细胞形态染色不一定适用。
（二）瑞氏（Wright’s staim；美蓝－伊红Ｙ）染色：1．瑞氏染料是由碱性染料美蓝（Methvlem blue）和酸性染料黄色伊红（Eostm Y）合称伊红美蓝染料即瑞氏（美蓝－伊红Ｙ）染料。
2．用甲醇作瑞氏染料溶剂，即成瑞氏染液。
甲醇是瑞氏染料良好溶剂，有两种作用：（1）甲醇使瑞氏染料中美蓝（M）与伊红（E）在溶液中离解，可使细胞成分选择性吸附其中的有色物质而着色。
甲醇ME（瑞氏染料）----→M+ + E-在配制的瑞氏染液中美蓝如放置过久即可氧化而含有天青，美蓝天青与伊红化合物能使核染成紫红色，但不能使胞浆染为蓝色，多余美蓝就可以使胞浆染成蓝色，染色主要是化学作用，是离子彼此结合的反应。
（2）甲醇具有强大的脱水力，可将细胞固定在一定形态及增加细胞结构的表面积，提高细胞对染料吸收作用，同时由于甲醇吸附染色液中的水，使染色液升温，加速染色反应。
3.瑞氏染液配制：(1) 瑞氏染液配制：瑞氏染料 830gm或1g甲醇（AR） 500ml或600ml○先称干燥（事先放入温箱干燥过夜）瑞氏染料放置乳钵内，用乳棒轻轻敲碎染料成粉末，再行研磨至听不到研芝麻声即呈细粉末，加少许甘油或甲醇溶解研磨，使染料在乳缸内显“一面镜”光泽，而无染料粉粒沉着。
○再加较多量甲醇研磨呈一面镜光亮，静置片刻，将上层液体倒入一清洁储存瓶内（最好用甲醇空瓶），再加甲醇研磨，重复数次，至乳钵内染料及甲醇用完为止，摇匀，密封瓶口。
○存室温暗处，储存愈久，则染料溶解、分解就越好，一般储存3个月以上为佳。
(2) 缓冲液：●缓冲液作用：○染色对氢离子浓度是十分敏感的，据观察pH值的改变，可使蛋白质与染料形成的化合物重新离解。
○缓冲液须保持一定的pH使染色稳定，PBS的pH 一般在6.4~6.8，○偏碱性染料可与缓冲液中酸基起中和作用，偏酸性染料则与缓冲液中的碱基起中和作用，使pH恒定。
●缓冲液配制（pH6.4~6.8，弱酸性）：配方1 ：配方2：1% KH2PO4 30ml M/15 KH2PO4 73.5 ml1% Na2HPO4 20ml M/15 Na2HPO4 26.5mlH2O(新鲜) 加至1000ml置室温黑暗处，瓶口密封，防止霉菌污染，如有污染则应报废。
（三）姬姆萨（Giemsa’s stain；天青-伊红）染色1．姬姆萨染料是伊红(AzurII Eqsin)和天青（蓝）2号合成的。
2．姬姆萨染料（ Giemsa, 天青-伊红）染液配制：姬姆萨染料（粉末） 0.5g或7.5g甲醇（AR） 33ml 或500ml甘油（AR） 33ml或 500ml●先将姬姆萨染料放入乳钵中，逐渐倒甘油研磨溶于甘油中，置于56℃水温箱内，90～120分钟，然后加入甲醇，摇匀后放置数天，过滤后或不过滤即可使用。