厌氧菌的培养特性共50页
厌氧菌
2.培养特性
• 严格厌氧。 • 厌氧血琼脂平板 直径3~ 5mm 、圆形、白色或淡黄色 、 边缘不齐、表面粗糙、不溶 血的菌落。 • CCFA( 环丝氨酸 - 头孢甲氧噻 吩-果糖-卵黄琼脂) 直径 3 ~ 5mm 、表面粗糙、边缘不 齐的黄色菌落,在紫外线照 射下,可见黄绿色荧光。
(二)临床意义
• 革兰阳性粗大杆菌,缺少芽胞,有荚膜
(2)分离培养
• 厌氧血平板、牛乳培养基、卵黄琼脂平板
(3)鉴定
• 革兰阳性粗大杆菌,缺少芽胞,有荚膜; • 双层溶血环 • “汹涌发酵”现象 • 生化试验 • 卵磷脂酶试验及Nagler试验阳性 • 动物毒力试验和保护试验阳性
肉毒梭菌
(一)微生物特性
1.形态与染色 • 革兰阳性粗大杆菌 • 芽胞卵圆形,大于菌体,位于菌体次极端,呈汤匙 状或网球拍状。 • 有周鞭毛 • 无荚膜
确定厌氧菌 (耐氧试验)
需氧培养 无生长
厌氧培养 生长
兼性厌氧菌
生长
专性厌氧菌 菌种保存 分类鉴定 菌落 生化 反应 药敏性 鉴定 药物敏感试验 气液相 色谱
形态与 染色
梭状芽胞杆菌属
简称梭菌属,现有150个种。
在自然界分布广泛,多数为腐生菌。少数为致病菌, 能产生强烈外毒素和侵袭性酶类,引起人和动物疾病。
常见菌种:
破伤风梭菌 产气荚膜梭菌
肉毒梭菌
艰难梭菌
破伤风梭菌
(一)生物学特性
1.形态与染色
• 菌体细长, • 芽胞圆形,大于菌体,位于菌体顶端,使细菌 呈鼓槌状。芽胞形成后,易转变成革兰阴性。 • 有周鞭毛,无荚膜,
2.培养特性
• 专性厌氧菌。
• 在普通平板上不易生长, 在潮湿的血琼脂平板上呈 扩散生长
厌氧菌
第三节一、生物学特性 Nhomakorabea肉毒梭菌
1.革兰阳性粗短杆菌;芽胞呈椭圆形,粗于菌体,位于次极端,使细
胞呈汤匙状或网球拍状;有鞭毛,无荚膜。 2. 厌氧,营养要求不高。血液琼脂平板上有β溶血。 二、致病性 肉毒梭菌的外毒素是已知毒素中最强的一种,它比氰化钾毒力还大一 万倍,人服0.1微克即可致命,纯化的肉毒毒素1mg能杀死2亿只小鼠。 内毒毒素是一种嗜神经毒素,经肠道吸收后进入血液,作用于脑神经 核、神经接头处以及植物神经末梢,阻止乙酰胆碱的释放。妨碍神经冲动 的传导而引起肌肉松驰性麻痹。 肉毒中毒的发生,主要由于豆类、肉类、腊肠及罐头食品等被肉毒梭 菌或芽胞污染,在厌氧条件下繁殖产生外毒素,被人食入所引起。表现为 全身无力、视力模糊不清、吞咽及呼吸困难,严重者可因呼吸衰竭或心力 衰竭而死亡。因毒素不直接刺激肠粘膜,故无明显的消化道症状。
二、致病性:
1.感染途径:经伤口感染。 2.感染条件:伤口形成厌氧环境: (1)窄而深的伤口,伴有泥土、杂物混入; (2)大面积创伤,坏死组织多。 (3)需氧菌或兼性厌氧菌混合感染
3.致病性
破伤风梭菌没有侵袭力,只在污染的局部组织中生长繁殖,一般不入血 流。破伤风梭菌能产生强烈的外毒素,即破伤风痉挛毒素或称神经毒素。 破伤风毒痉挛毒素是一种神经毒素, 为蛋白质,不耐热,可被肠道蛋白酶破坏 ,故口服毒素不起作用。破伤风毒素的毒 性非常强烈,仅次于肉毒毒素。 当局部产生破伤风痉挛毒素后,通过运 动终板吸收,沿神经纤维间隙至脊髓前角神 经细胞,上达脑干,也可经淋巴吸收,通过 血流到达中枢神经。毒素能与神经组织中的 神经节苷脂结合,封闭了脊髓抑制性突触 末端,阻止释放抑制冲动的传递介质,从而 破坏上下神经原之间的正常抑制性冲动的传 递,导致屈肌和伸肌兴奋性同时异常增高, 出现牙关紧闭,角弓反张等症状。
厌氧菌
3.生化反应:H2S-,蔗糖-,葡萄糖+,乳糖 -,麦芽糖-,吲哚-,脂酶-
(二)临床意义
正常菌群。医院感染的重要病原菌。产生A、B 两种毒素,即肠毒素和细胞毒素,引起假膜性肠 炎。 (三)微生物学检查
直接涂片镜检 ,分离培养,鉴定鉴别
引起人类疾病的各种常见厌氧芽胞梭菌
细菌名称
所致疾病
破伤风梭菌 产气荚膜梭菌
肉毒梭菌
艰难梭菌
破伤风 气性坏疽、毒血症、坏死性肠炎、
食物中毒等 食物中毒、婴儿肉毒梭菌症、创伤
肉毒症 抗生素相关性腹泻、抗生素相关性
伪膜性肠炎
破伤风梭菌
临床意义
无侵袭力,仅在局部繁殖,不入血 致病因素--痉挛毒素(外毒素) 临床症状--牙关紧闭,角弓反张等
3.生化反应:H2S+,明胶+,葡萄糖+,乳糖-,麦 芽糖+,吲哚-,卵磷脂酶 -
(二)临床意义 肉毒毒素--毒性最强 嗜神经性,使神经麻痹;食 物中毒。
剧毒(对人致死量为0.1µg)
(三)微生物学检查 直接涂片镜检 ,分离培养,鉴定鉴别
艰难梭菌
(一)生物学性状:
1.形态染色:革兰阳性大杆菌,芽胞椭圆形 或长方形,位于菌体次极端,无荚膜,有 鞭毛。
药物敏感试验
考虑做厌氧菌体外药敏试验的临床情况:①明确厌氧菌引起的严重感 染,②已确证厌氧菌感染而经验用药无效,③需长期用药的厌氧菌 感染。
方法 培养基 接种浓度 孵育时间 优点
琼脂稀释法 布氏血琼脂 105细胞/点 48H
可同时测多个菌株
肉汤稀释法 布氏心脑浸液 106CFU/ML 48H
经济,可商品化
实验十二 厌氧性细菌(1稿)
实验十二厌氧性细菌(厌氧培养方法)厌氧性细菌(Anaerobicbacteria)是一大群必须在无氧或低氧环境中才能生长繁殖的细菌;一般情况下,这类细菌在无氧条件下比在有氧环境中生长好,不能在空气(氧气浓度大于18%)和(或)二氧化碳浓度小于10%以下的固体培养基表面生长。
这类细菌缺乏完整的代谢酶体系,其能量代谢多以无氧发酵的方式进行。
它能引起人体不同部位的感染,包括阑尾炎、胆囊炎、中耳炎、口腔感染、心内膜炎、子宫内膜炎、脑脓肿、心肌坏死、骨髓炎、腹膜炎、脓胸、输卵管炎、脓毒性关节炎、肝脓肿、鼻窦炎、肠道手术或创伤后伤口感染、盆腔炎以及菌血症等。
(一)无芽胞厌氧菌主要种类及生物学性状无芽胞厌氧菌共有23个属,与人类疾病相关的主要有10个属。
1.革兰阴性厌氧杆菌有8个属,类杆菌属中的脆弱类杆菌最为重要。
形态呈多形性,有荚膜。
除类杆菌在培养基上生长迅速外,其余均生长缓慢。
2.革兰阴性厌氧菌有3个属,其中以韦荣菌属最重要。
为咽喉部主要厌氧菌,但在临床厌氧菌分离标本中,分离率小于1%,且为混合感染菌之一。
其他革兰阴性球菌极少分离到。
3.革兰阳性厌氧菌有5个属,其中有临床意义的是消化链球菌属,主要寄居在阴道。
本菌属细菌生长缓慢,培养需5~7天。
4.革兰阳性厌氧杆菌有7个属,其中以下列3个属为主:(1)丙酸杆菌属:小杆菌,无鞭毛,能在普通培养基上生长,需要2~5天,与人类有关的有3个种,以痤疮丙酸杆菌最为常见。
(2)双歧杆菌:呈多形性,有分枝,无动力,严格厌氧,耐酸。
29个种中有10个种与人类有关,其中只有齿双歧杆菌与龋齿和牙周炎有关。
其他种极少从临床标本中分离到。
(3)优杆菌属:单一形态或多形态,动力不定,严格厌氧,生化反应活泼,生长缓慢,常需培养7天,最常见的是迟钝优杆菌。
(二)微生物学检查要从感染灶深部采取标本。
最好是切取感染灶组织或活检标本,立即送检医.学教育网搜集整理。
1.直接涂片镜检:将采集的标本直接涂片染色镜检,观察细菌形态、染色及菌量,为进一步培养以及初步诊断提供依据。
厌氧菌的培养特性50页PPT
厌氧菌的培养特性
谢谢
11、越是没有本领的就越加自命不凡。——邓拓 12、越是无能的人,越喜欢挑剔别人的错儿。——爱尔兰 13、知人者智,自知者明。胜人者有力,自胜者强。——老子 14、意志坚强的人能把世界放在手中像泥块一样任意揉捏。——歌德 15、最具挑战性的挑战莫过于提升自我。——迈克尔·F·斯特利
6、法律的基础有两个,而且只法律和礼节。——歌德
8、法律就是秩序,有好的法律才有好的秩序。——亚里士多德 9、上帝把法律和公平凑合在一起,可是人类却把它拆开。——查·科尔顿 10、一切法律都是无用的,因为好人用不着它们,而坏人又不会因为它们而变得规矩起来。——德谟耶克斯
厌氧性细菌
所致疾病
• • • • • • 败血症 中枢神经系统感染 呼吸道感染 口腔牙齿感染 腹部会阴部感染 女性生殖道感染
四、防治原则
• 预防
– 及时处理伤口,破坏和消除厌氧微环境 – 预防性的使用抗生素
• 治疗
– – – – 局部感染的处理 抗生素 多价抗毒素 高压氧舱法
三、肉毒梭菌
(C.botulinum)
一、生物学性状
• 芽胞呈椭圆 形,粗于菌 体,位于次 极端,使细 胞呈汤匙状 或网球拍状
一、生物学性状
三、免疫性
• 破伤风免疫属外毒素免疫,主要是抗毒 素发挥中和作用(毒素与中枢神经组织 结合非常牢固,一旦结合即非抗毒素所 能中和) • 病后不会获得牢固免疫力 • 获得有效抗毒素的途径是人工免疫
四、微生物学检查 法
• 一般不进行涂片镜检和分离培养 • 典型的症状和病史即可作出诊断
五、防治原则
一、主要种类
与人类疾病相关的主要无芽胞 厌氧菌
革兰阴性 杆菌 球菌 类杆菌属 韦 荣 菌 属 (Bacteriodes ) (Veillonella) 普雷沃菌属 (Prevotella) 紫单胞菌属 (Porphyromonas) 梭杆菌属 (Fusobacterium) 革兰阳性 杆菌 丙酸杆菌属 (Propionibacterium) 双歧杆菌属 (Bifidobacterium) 真杆菌属 (Eubacterium) 放线菌属 (Actinomyces) 球菌 消化链球菌属 (Peptostrept ococus)
一、生物学性状
培养特性及生化反应:
• 蛋黄琼脂平板: Nagler反应 • 牛奶培养基: “汹涌发酵”
分解乳糖→产酸→酪蛋白凝固,产气体 (H2、CO2)→凝固的酪蛋白冲成蜂窝状, 并将液面上的凡士林向上推挤,甚至冲开 管口棉塞,气势汹猛
厌氧性细菌课件
破伤风梭菌
形态染色
中等大的细长杆状,两 端钝圆。有 周身鞭毛,无 荚膜,芽胞正圆形,位于菌 体顶端,比菌体粗,呈鼓槌 状,为本菌典型特征,G+菌, 形成芽胞后易形成G-。
分布
厌氧菌的分类及区别
厌氧芽胞梭菌 染色 感染类型
G+ 外源性感染为主 外毒素为主,毒性强
无芽胞厌氧菌
G+或G内源性感染为主 内毒素及侵袭因素,毒性弱
致病因素
临床感染比例 机体条件 临床病型 治疗 预防 包括菌种
10%
关系不明显
90%
机体免疫功能下降
多见外伤感染、食物中毒, 各部位炎症,脓肿,败血症 临床症状特殊 无特殊 抗毒素治疗为主 抗毒素紧急预防、类 毒素预防 抗菌治疗为主 增强机体抵抗力
③毒素(透明质酸酶) ④ 毒素(DNA酶) 这些毒素和酶协同作用,使组织溶解、坏死、产气、水肿, 以致病变迅速蔓延并出现全身中毒症状,此外还有些能产 生肠毒素。
所致疾病
• 气性坏疽:潜伏期短,仅为 8—48h,
细菌在局部繁殖,产生多种毒素及
侵袭性酶,造成病变部位水肿,水 气夹杂,触摸有“捻发感”,并产
微生物学检查
临床症状典型,一般无需进行微生物学检查。
防治原则
(1)正确处理伤口及清创扩创,是重要的预防措施。 ( 2 )人工主动免疫:注射类毒素,尤其对军人、儿童、易受伤 人群计划免疫,儿童用DPT(白百破三联疫苗)
(3)人工被动免疫:破伤风抗毒素(telanus an所致疾病:破伤风
外伤性破伤风:多见于战伤和创伤感染
厌氧菌的培养特性
临床微生物教研室
袁小澎
一定义
有氧条件下不能生长,无氧条件(不是绝 对)下才可以生长的一类细菌 1836年Pasteur提出 临床上日益受到重视,60%临床标本存在 厌氧菌感染---------------------需要 重视
二 分类
1 有芽孢厌氧性细菌 一个梭菌属包括83个种 2 无芽孢厌氧性细菌 40多个菌属,300多个菌 种和亚种
1.直接涂片镜检 从伤口深部取材涂片, 革兰氏染色镜检,可见革兰氏阳性大杆 菌,并有荚膜,常伴有其他杂菌,白细 胞甚少,形态不规则,这是气性坏疽标 本涂片的特点。
2.分离培养与鉴定 取坏死组织制成悬液, 接种于血球脂平板上或疱肉培养基中, 厌氧培养,观察生长情况。取细菌培养 物涂片镜检,并进一步用生化反应鉴定。
革兰氏阴性的杆菌 -----正常菌群的组成部分 类杆菌属
厌氧菌标本的采集和送检
标本的采集和送检-----------1 标本决不能被正常菌群污染; 2 应尽量避免空气
标本的采集
标本来源 封闭性脓肿 妇女生殖道 下呼吸道分泌物 胸腔 窦道,子宫腔,深部创伤 组织 尿道 收集的方法 针管抽取 后穹隆穿刺抽取 肺穿刺术 胸腔穿刺术 静脉注射的塑料导管穿入 无菌外科切开 上阴部膀胱穿刺
三)微生物学检验
标本采集 检验程序 检验方法和鉴定
五 气性坏疽病原菌
以组织坏死,水肿,产气及全身中毒的 严重的急性外伤感染 包括很多-----重点 产气夹膜梭菌
产气夹膜梭菌
生物学性状
形态和染色 培养特性 生化反应
致病性
为革兰氏阳性粗大梭菌,3~4×1~ 1.5um。单独或成双排列,有时也可成短 链排列。芽胞呈卵圆形,芽胞宽度不比 菌体大,位于中央或末次端。培养时芽 胞少见,须在无糖培养基中才能生成芽 胞。在脓汁、坏死组织或感染动物脏器 的涂片上,可见有明显的荚膜,无鞭毛, 不能运动。
厌氧菌ppt课件
厌 氧 菌
保护性挖掘存放有木乃伊的棺木
2019 4
厌 氧 菌
ห้องสมุดไป่ตู้
从木乃伊的表面采取样本
2019 5
厌 氧 菌
棺木的下面的金属片(局部)
2019 6
厌 氧 菌
棺木的下面的金属片(内侧局部)
2019 7
厌 氧 菌
棺木的下面的金属片(外侧局部)
2019 8
厌 氧 菌
棺木的下面的金属片(顶部局部)
2019 14
厌氧菌的分布和正常菌群
正常人的腔道包括肠道、口腔、阴道等处均有大量的厌氧菌寄居, 它们与需氧菌一起共同组成人体的正常菌群。此外,人体皮肤、 呼吸道、泌尿道也有厌氧菌分布。 在胃肠道尤其寄居大肠的厌氧菌比大肠埃希氏菌要多1000~ 10000倍。
在正常情况下,寄居于人体的正常菌群对人无损害,与人体保持 平衡状态,而且主常菌群之间也相互制约,维持相对的平衡。
2019
-
2
概述
厌氧菌是指一大群在有氧条件下不能生长,仅在 无氧条件下才能生长的细菌。包括革兰阳性和革 兰阴性的杆菌和球菌。过去一个相当长的时期主 要是研究由梭菌属引起的感染,如破伤风梭菌引 起的破伤风,产气荚膜梭菌引起的气性坏疽和肉 毒梭菌引起的肉中毒等,特别是对这些感染有着 重要影响的毒素方面。近10年来,由于厌氧菌培 养技术的进步,厌氧菌的检出率逐渐提高,并且 培养出许多无芽胞厌氧菌和新种。对于厌氧菌的 基础研究以及它引起感染的重要性,已日益受到 重视。
(8)最近有流产史者,以及胃肠道手术后发生的感染。
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厌氧菌标本的采集
基本原则:采集标本时要力求避免需氧和厌氧的正常
菌群污染,并尽量避免接触空气。
第章厌氧菌ppt课件
厌氧菌
郑州大学第一临床学院
冯羡菊
2019
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1
第一节
概
述
厌氧性细菌(anaerobic bacteria)指一 群在有氧条件下不能生长,必须在无氧条件 下才能生长繁殖的细菌。
2019
-
2
厌氧菌的分类
分为两类: 一类为有芽胞厌氧菌,只有一个属,即梭菌属, 共有130个种,以芽胞形式存于体外。 另一类为无芽胞厌氧菌, 包括40多个属, 300 多个菌种和亚种;多为体内正常菌 群, 存在于皮肤、口腔、上呼吸道、肠道和泌尿生 殖道。易引起这些部位的内源性感染。
坏死梭杆菌形态
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致病性
坏死梭杆菌是毒力很强的梭杆菌,常引起急性 扁桃体炎,有时并发单核细胞增多症,是儿童 和青年人扁桃体周围脓肿中最常分离到的厌氧 菌。局部症状还包括颈间隙感染和颈静脉脓毒 性血栓静脉炎,尚可引起胸膜渗出性脓胸、增 生性转移脓肿和菌血症。
2019
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ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ五节
革兰阳性无芽胞厌氧杆菌
2019革兰染色形态及其他特征脆弱类杆菌两端钝圆着色深中间色浅不均匀有空泡长短不一标本有琥珀味产黑色素普雷沃菌球杆菌可见多形性长短不一紫外线照射发红色荧光标本有恶臭具核酸杆菌菌体细长两头尖紫色颗粒沿菌体长轴成双排列标本有丁酸味坏死梭杆菌菌体细长高度多形性长短不一菌体中部膨胀呈圆球形韦荣球菌极小的革兰阴性球菌消化链球菌球形或卵圆形呈链状的小球菌易染成阴性乳酸杆菌细长无芽胞有时多形性标本有乳酸气味痤疮丙酸杆菌排列呈xyv或栅状标本有丙酸气味放线菌分枝呈棒状xyv或栅状排列脓汁中的黄色颗粒呈琥珀酸气味破伤风梭菌细长鼓槌状极端芽胞圆形产气荚膜梭菌粗大杆菌呈单或双排列有芽胞有荚膜艰难梭菌粗长杆菌芽胞卵圆形或长方形位于次极端2019初代培养
厌氧菌ppt课件
正常情况下菌群之间保持着微生态平衡, 厌氧菌代谢产生的乙酸、乳酸等能抑制病原菌 生长。
如长期使用广谱抗生素、激素、免疫抑制 剂等,在发生菌群失调或机体免疫力下降或细 菌进入非正常寄居部位时,这些厌氧菌即可作 为条件致病菌而导致内源性感染。
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(二) 临床意义
由厌氧菌引起人类的感染在所有感染性 疾病中占有相当大的比重,有些部位的感 染如脑脓肿、牙周脓肿、盆腔脓肿等80% 以上是由厌氧菌引起的。其中一部分厌氧 菌单独感染,大部分与需氧菌混合感染。
• G-C:主要包括韦荣球菌属
(Veillonella)、氨基酸球菌属 (Acidaminococcus)和巨球菌属 (Megasphaera)。
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临床意义
• 黑色消化球菌和消化链球菌在临床上可
厌氧菌感染的条件 厌氧菌感染的临床特征
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1. 厌氧菌感染的条件
(1)局部组织血供障碍(内伤) (2)皮肤黏膜屏障破坏(外伤) (3)各种因素引起的机体免疫力降低(疾病) (4)菌群失调(药物)
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2. 厌氧菌感染的临床及细菌学指征
凡有下列情况者应怀疑有厌氧菌感染:
(1)感染组织局部产生大量气体,造成组织肿 胀和坏死,皮下有捻发音,是产气荚膜梭菌所 引起感染的特征。
• 4. 大量液体标本运送法 装满标本瓶,即可驱除
瓶中的空气,加盖密封即可运送。
• 5. 组织块运送法 组织块放在密封的厌氧罐中运
送。罐内放入一团用酸化硫酸铜浸泡过的钢丝绒。
• 6. 厌氧袋运送法。
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3.处理与观察
标本送到实验室后,应在2O~30min内处理完 毕,最迟不超过2h。如果一时来不及接种,可将标 本置室温下保存。一般认为标本不要冷藏。
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11、战争满足了,或曾经满足过人的 好斗的 本能, 但它同 时还满 足了人 对掠夺 ,破坏 以及残 酷的纪 律和专 制力的 欲望。 ——查·埃利奥 特 12、不应把纪律仅仅看成教育的手段 。纪律 是教育 过程的 结果, 首先是 学生集 体表现 在一切 生活领 域—— 生产、 日常生 活、学 校、文 化等领 域中努 力的结 果。— —马卡 连柯(名 言网)
13、遵守纪律的风气的培养,只有领 导者本 身在这 方面以 身作则 才能收 到成效 。—— 马卡连 柯 14、劳动者的组织性、纪律性、坚毅 精神以 及同全 世界劳 动者的 团结一 致,是 取得最 后胜利 的保证 。—— 列宁 摘自名言网
15、机会是不守纪律的。——雨果
61、奢侈是舒适的,否则就不是奢侈 。——CocoCha nel 62、少而好学,如日出之阳;壮而好学 ,如日 中之光 ;志而 好学, 如炳烛 之光。 ——刘 向 63、三军可夺帅也,匹夫不可夺志也。 ——孔 丘 64、人生就是学校。在那里,与其说好 的教师 是幸福 ,不如 说好的 教师是 不幸。 ——海 贝尔 65、接受挑战,就可以享受胜利的喜悦 。——杰纳勒 尔·乔治·S·巴顿
谢谢!