丙型肝炎病毒IgG抗体定量测定作业指导书

丙型肝炎病毒IgG抗体定量测定作业指导书

一、目的：规范丙型肝炎病毒IgG抗体测定的标准操作程序，确保丙型肝炎病毒IgG

抗体测定的结果准确有效。

二、适用范围：在AutoLumo A2000化学发光检测仪上定量测定人血清中的丙型肝炎病毒

IgG抗体。

三、临床意义

丙型肝炎是一种广泛流行的病毒性疾病，据 WHO调查，全世界估计有1.7

亿人感染丙型肝炎病毒 (HCV)，在不同的国家慢性丙型肝炎病毒感染的流行

病学统计是在 0.5％～20％，我国一般人群抗 HCV阳性率为3.2％。而急性

丙型肝炎绝大多数都会形成有慢性感染的过程，慢性丙型肝炎病毒感染是肝

硬化和肝癌的主要原因之一[1,2]。

丙型肝炎的诊断有赖于 HCV抗体的血清学检定及病毒学检测。HCV抗体

阳性代表机体对病毒感染的应答，一般在感染 1～2月后出现抗体，急性和

慢性丙型肝炎的区别在于 HCV核心 IgG量的差异，慢性

病人的 IgG抗体水

平比急性的要高些，并且通常有更长的免疫活性。通过自然恢复或经治疗清

除病毒的急性丙型肝炎患者，IgG会在几年之后消失或低于检测下限而无法

检出[3]。临床上也应注意到一些血液透析、免疫功能缺陷和自身免疫性疾病

患者可出现抗-HCV假阳性，可以采用抗-HCV RIBA或HCV RNA检测确认，有

助于确诊这些患者是否合并感染HCV。

四、方法原理

本试剂盒采用间接法原理进行检测。以HCV抗原包被磁微粒，辣根过氧

化物酶标记的抗人IgG制备酶结合物，通过免疫反应形成抗原－抗体－酶标

记抗体复合物，该复合物催化发光底物发出光子，发光强度与HCV IgG抗体

的含量成正比。

五、标本的采集与处理

5. 1. 采用正确医用技术收集血清样本（详见标准血液标本前处理流程）。

5.2. 样本中勿添加叠氮钠作为防腐剂。

5.3.样本中的沉淀物和悬浮物可能会影响试验结果，应

离心除去，并确定样本未变质方可使用。

5.4. 样本处理、收集后在室温放置不可超过8小时；

如果不在8小时内检测需将样本

放置在2～8℃的冰箱中；若需48小时以上保存或

运输，则应冻存于-20℃以下，

避免反复冻融。使用前恢复到室温，轻轻摇动混

匀。

六、标本拒收标准

1）严重溶血、脂血 2）标本标识不明

七、仪器与材料

7.1.仪器：适用于Lucy2、Lumo、AutoLumoA2000化学发光检测仪。

7.2.试剂：AutoLumo A2000专用丙型肝炎病毒IgG抗体

试剂

7.2.1.试剂准备：本试剂为即用型试剂，可

以直接放在仪器上。

7.2.2.试剂盒于2～8℃储存，有效期12个

月。

7.2.3.试剂盒应防止冷冻，避免强光照射。

7.2.4.试剂盒开启使用后，2～8℃保存可使

用1个月。

7.2.5.试剂盒可适应1周内常温运输，运输

过程中应轻拿轻放，避免重压，防止

雨雪淋湿和阳光曝晒。

7.2.6.试剂机载稳定性

7.2.6.1.试剂包（磁微粒混悬液、酶

结合物、样品稀释液）竖直

向上存放，在2～10℃环境

下冷藏保存2小时后，才可

上机使用。首次使用后，机

载或在2～10℃环境下稳定

期为28天。

7.2.6.2.校准品开瓶后保存于2～

8℃，稳定期可维持1个月；

若需使用更长时间，应根

据需要进行分装，于-20℃

冻存（可以保存2个月），但

应避免反复冻融。

7.2.6.3.试剂在2～8℃保存可稳定

至标签上所标示的有效期。

7.3.质控液：推荐使用安图配套质控品或第三方质控品

BioRAD QC

八、检验方法

8.1.消耗品检查：

8.1.1.根据仪器说明装载或检查消耗品是否充足。

8.1.2.参考相应的仪器系统操作说明。

8.2.试剂包装载：

8.2.1.试剂包首次上机前，轻轻地倒转试剂包多次以

混合新试剂包内的成分，避免产生气泡。不

要倒转已经打开的试剂包。

8.2.2.仪器通过扫描试剂包条码自动获得测试所需

的参数。

8.2.3.如果特殊情况下仪器无法识别条码，可以手工

输入。

8.2.4.参考相应的仪器系统操作说明。

8.3.测试：

8.3.1.将样本容器放置在仪器配套样本架中，每次测

试样本量为10µl。

8.3.2.装载样本架，在仪器软件界面中输入样本信

息。

8.3.3.选择“运行”开始测试，系统自动进行试验操

作。

8.3.4.参考相应的仪器系统操作说明。

8.4. 定Cutoff值

8.4.1. 仪器通过扫描条码卡自动获取测试所需

的参数。

8.4.2.如果特殊情况下仪器无法识别条码卡，可以手工输入。

8.4.3.将阴阳性对照转移至样本容器，放置在仪器配套样本架中。

8.4.4. 装载样本架，在仪器软件界面中输入Cutoff值信息。

8.4.5. 选择“运行”开始测试，生成Cutoff值。

8.4.6.Cutoff值有效期为28天。

8.4.7. 参考相应的仪器系统操作说明。

8.4.8.出现以下情况需要重新生成Cutoff值：

8.4.8.1. 质控结果经重复测定后仍然超出范围；

8.4.8.2.试剂盒或发光底物液的批号更改；

8.4.8.3.超出Cutoff值有效期限；

8.4.8.4.仪器重要部件更换或维修。

8.5. 质控：

8.5.1.使用至少两个分析物水平的质控品进行质

控。

8.5.2.出现以下情况需要进行质控：

8.5.2.1.测试试剂盒使用超过24小时；