丙型肝炎病毒抗体操作规程

丙型肝炎病毒抗体操作规程

【试剂盒组份】

1.HCV抗原包被板48孔*1块

2.酶结合物5ml*1瓶

3.阳性对照0.5 ml*1管

4.阴性对照0.5 ml*1管

5.浓缩洗涤液：用前每瓶1：20稀释30 ml*1瓶

6.显色剂A 3ml*1瓶

7.显色剂B 3ml*1瓶

8.终止液3ml*1瓶

9.样品稀释液5ml*1瓶

10.封口纸2片

11.说明书1份

【检测方法】

1.每次试验设阴性，阳性对照各两孔，分别加入阴，阳性对照血清100μl，再设一孔空白对

照，加样品稀释液100μl。其余孔加入100μl样品稀释液，再加待测血清10μl。充分混匀后，置37℃温育30分钟。弃去孔内样品，扣干。

2.用洗涤液注滿每孔（至少300μl洗涤液/孔），勿溢出，静置5秒钟后扣干，重复5次。

3.每孔加酶结合物100μl（空白对照孔除外），置37℃温育20分钟，同上法洗反应板5次。

4.每孔加显色剂A液、B液各50μl,轻轻振荡后，37℃避光静置10分钟。

5.每孔加终止液50μl终止反应，以空白调零，在酶标仪中读取各孔OD450。

【结果判定】

1.阳性对照平均值大于1.20，实验结果有效。

2.实验设计要求阳性、阴性对照OD值之差应大于1.20，否则本次实验无效。

3.若阴性对照读数小于0.050时，按0.050计算。

4.临界值（Cut off value）=阴性对照平均值+0.1。

5.测试标本的计算值小于Cut off value则为HCV抗体阴性。

6.测试标本的计算值等于或大于Cut off value则为HCV抗体阳性。

【注意事项】

1.从冷藏环境中取出的试剂盒应置室温平衡20分钟再进行测试。

2.若洗涤液不够可自行配制。PH7.2 0.1MPBS-0.5℅Tween20。用前10倍稀释成0.01MPBS-0.5

℅Tween20。

3.本试剂盒中的样品稀释液采用变色技术，在加原始血清或血浆标本后由工黄绿色变为蓝绿

色。非原始血清或血浆（如稀释标本等）颜色变化不明显或变为其他颜色，为正常现象。

4.不同批号试剂请勿通用。

5.本试剂盒应视为有传染性物质，请按传染病实验室检查规程操作。