11种中草药对8种常见细菌的体外抑菌试验
中草药对8种畜禽肠道病原菌的体外抑菌试验的开题报告
中草药对8种畜禽肠道病原菌的体外抑菌试验的开题报告一、研究背景和意义随着畜禽养殖业的快速发展,畜禽肠道病原菌的感染和传播成为制约畜禽健康生产的重要因素之一。
抗生素的过度使用已经导致了多种病原菌的耐药性出现,这给畜禽生产和人类健康带来了严重威胁。
因此,寻求一种安全有效的抗菌方法,已成为广大畜禽养殖者和相关研究人员关注的重点。
中草药作为一种传统中医疗法,具有广泛的抗菌活性、低毒性和高效性。
然而,中草药对畜禽肠道病原菌的抑菌作用研究相对较少,为此,本研究拟从中草药抗菌方面展开研究,评价其对8种畜禽肠道病原菌的体外抑菌效果,有助于寻找一种安全、有效、环保的畜禽抗菌方法,为我国畜禽养殖业健康生产提供新思路和新方法。
二、研究目的本研究的一般目的是评价多种中草药的体外抑菌效果,并为中草药开发新的应用提供科学依据。
具体目标如下:1. 筛选具有良好抑菌活性的中草药;2. 测试这些中草药对8种常见的畜禽肠道病原菌(如大肠杆菌、沙门氏菌等)的体外抑菌效果;3. 确定最佳中草药浓度和处理时间,探究其抑菌机制;4. 建立中草药对畜禽肠道病原菌的最小抑菌浓度;5. 评价中草药的安全性和对畜禽生长的影响。
三、研究方法1. 选取8种不同来源的畜禽肠道病原菌,如大肠杆菌、沙门氏菌等;2. 选取10种常见的中草药,收集其干燥植物,制备药材粉末;3. 实施球板法或扩散法评价中药的体外抑菌效果;4. 确定最佳中草药浓度和处理时间,探究其抑菌机制;5. 建立中草药对畜禽肠道病原菌的最小抑菌浓度;6. 评价中草药的安全性和对畜禽生长的影响。
四、预期成果及意义本研究预期通过对中草药抑菌活性的体外测试,明确其对8种畜禽肠道病原菌的有效性和安全性,为畜禽饲养业提供新的抗菌方法和防控策略。
研究成果可望为畜禽饲养业的健康生产、在中药领域的开发利用等方面提供参考和借鉴。
10味中草药抑菌作用研究
10味中草药抑菌作用研究薛密,王倩,王海涛,谢明杰*(辽宁师范大学生命科学学院,辽宁大连116029)摘要 [目的]研究藜芦等10味中草药提取物的抑菌作用。
[方法]以金黄色葡萄球菌和大肠杆菌为指示菌,测定藜芦等10味中草药乙醇提取物的抑菌作用,并通过呼吸代谢抑制试验对其中抑菌效果最好的藜芦提取物进行了抑菌机制研究。
[结果]10味中草药藜芦中提取物的抑菌效果最好。
藜芦提取物对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的最低抑菌浓度均为6.25m g/m l 。
呼吸代谢抑制试验结果显示,藜芦提取物的浓度为6.25m g/m l 时,可抑制2种指示菌的苹果酸脱氢酶活性,加药组的大肠杆菌苹果酸脱氢酶(M D H )比活性与对照组相比降低了46.52%;加药组的金黄色葡萄球菌M DH 比活性与对照组相比降低了55.82%。
[结论]10味中草药提取物中藜芦的抑菌效果最佳,其抑菌机制是通过抑制细菌的呼吸代谢过程的方式实现的。
关键词 藜芦;抑菌作用;最低抑菌浓度;苹果酸脱氢酶中图分类号 Q946 文献标识码 A 文章编号 0517-6611(2009)13-05970-03S tud y on th e An tiba c te ria l E ffe c ts o f 10K in d s o f Ch in e se H e rba l M e d ic in e s X UE M i e t a l (C o llege o f L ife S cien ce ,L iaon in g N o rm a l U n iv er sity ,D a lian,L ia on i n g 116029)A b s tra c t [O b je ctive]T h e resea rch a i m ed to in ve stiga te th e an tibac te ria l e ffects o f 10k in ds o f C h in e se h e rba l m ed icin es.[M e th od]U s in g E scherich i a co il and S taphy loco ccus aureu s as ind ica to r ba cte ria ,th e an tibacte r ia l e ffects o f 10k in ds o f C h in ese h e rba l m ed icin es w e re m easu red.R e sp ira tory m e tabo lismtes t w as u sed to in ve stig a te th e an tibacter ia l m ech an ismo f V er atr um nig r um ex tracts w ithth e bes t an tibacte r ia l e ffe ct .[R esu lt]T h e resu lts in -d ica ted th a t th e an tibacter ia l e ffect o f V.n igru m w as be tte r th anth e o th e r n in e k in ds .T h e m in i m umi n h ib ito ry con cen tra tion(M IC )to S taphy lo co ccu s au-reus an d E scherich i a co il w e re 6.25m g/m l .T h e re su lts o f respira to ry m e tabo lismte st sh ow ed th a t th e m a lic deh yd rogen a se(M D H )activ ity o f tw o ind ica to r bacte r ia w a s inh ib ited by 6.25m g/m l V.nig r um.M D H a ctiv ity o f E sche rich ia co il in m ed icin e g roup w as rem ark ab ly redu ced by 46.52%th an con tro l g roup ,an d M D Hactiv ity o f Staphy lo coccu s au reu s in m edici n e g rou p w a s rem a rk ab ly redu ced by 55.82%th ancon tro l g roup.[C on clu sion]T h e an ti ba cte-r ia l e ffe ct o f V.n ig r um w a s th e be st am on g 10k ind s o f C h in ese h e rba l m ed icin es.T h e an tiba cte ria l m ech an ismw a s rea lized by th e w ay s o f in h ibitin g th e re sp ira to ry m e tabo lismo f bacte r ia.K e y w o rd s V eratru m n ig r um ;A n tibacte r ia l e ffects ;M in i m umi n h ib ito ry con cen tra tion;M a lic deh yd ro gen ase基金项目 辽宁省自然科学基金(20072153)资助。
8种中草药对大肠杆菌的体外抑菌试验_向双云
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8 种中草药对大肠杆菌的体外 MIC 测定结果 黄芩 + + ++ ++ +++ +++ ++++ ++++ ++++ ++++ ++++ 黄连 - - - + ++ ++ +++ ++++ ++++ ++++ ++++ 黄柏 + + ++ ++ +++ +++ ++++ ++++ ++++ ++++ ++++ 鱼腥草 穿心莲 五味子 - + - - - + ++ ++ +++ ++++ ++++ ++++ ++++ + ++ ++ +++ +++ ++++ ++++ ++++ ++++ ++++ - - - + + ++ +++ ++++ ++++ ++++ 连翘 - + ++ +++ +++ ++++ ++++ ++++ ++++ ++++ ++++ 艾草 - - - - + + + ++ +++ ++++ ++++
中药的抑菌作用及其抗菌谱
中药的抑菌作用及其抗菌谱2005版中国药典中规定微生物限度检查和无菌检查需要做验证,对于绝大部分化学类药物来说,它们抑菌性的有无及抗菌谱比较容易判断;然而,对于中药制剂来说,却无法准确判断,给验证和检查工作带来了极大的不便.针对这种情况,本人查阅了《药用植物学》、《生药学》及部分其他文献资料,把有抑菌作用的中药及其抗菌谱整理如下,希望对大家有所帮助,同时敬请各位同仁多加指正,补充,谢谢!艾叶对多种致病细菌及真菌有轻度抑制作用白矾对金黄色葡萄球菌、变形杆菌、绿脓杆菌、炭疽杆菌、痢疾杆菌、伤寒及副伤寒杆菌、白色念珠菌、链球菌、肺炎双球菌、白喉杆菌等多种细菌有抑制作用白果白果酸能抑制结核杆菌的生长,体外对多种细菌及皮肤真菌有不同程度的抑制作用白蔹水浸剂对同心性毛癣菌,奥杜盎氏小胞癣菌、腹股沟和红色表皮癣菌等皮肤真菌,有不同程度的抑制作用。
5%煎剂在体外对金黄色葡萄球菌亦有抑制作用。
萆薢抗真菌荜茇对白色及金黄色葡萄球菌和枯草杆菌、痢疾杆菌有抑制作用萹蓄对葡萄球菌、福氏痢疾杆菌、绿脓杆菌以及须疮癣菌、羊毛状小芽胞菌、皮肤霉菌等均有抑制作用。
柴胡煎剂对结核杆菌有抑制作用;蟾皮蟾蜍总甙注射液对变形杆菌、绿脓杆菌、四联球菌、白色葡萄球菌、卡他球菌有抑制作用;蟾酥还有镇痛作用葱白对白喉杆菌、结核杆菌、痢疾杆菌、葡萄球菌、链球菌有抑制作用,对皮肤真菌也有抑制作用。
大黄有抗感染作用,对多种革兰氏阳性和阴性细菌均有抑制作用,其中最敏感的为葡萄球菌和链球菌,其次为白喉杆菌、伤寒和副伤寒杆菌、肺炎双球菌、痢疾杆菌等;对流感病毒也有抑制作用;大蓟对人型结核杆菌有抑制作用。
大蒜挥发油、浸出液及大蒜素对多种致病细菌、真菌、阿米巴原虫及阴道滴虫等具有明显的抑菌或杀菌作用地榆体外抑菌试验对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、志贺氏痢疾杆菌、伤寒杆菌、副伤寒杆菌、人型结核杆菌以及某些致病真菌均有作用远志人型结核杆菌、金黄色葡萄球菌、痢疾杆菌,伤寒杆菌白芷对大肠杆菌、痢疾杆菌、伤寒杆菌、绿脓杆菌、变形杆菌有一定抑制作用;水浸剂对奥杜盎小芽胞癣菌等致病真菌有一定抑制作用。
10味中草药对金黄色葡萄球菌的体外抑菌试验
10味中草药对金黄色葡萄球菌的体外抑菌试验韩梅红【摘要】为了解金荞麦、黄连、连翘等10味中草药对鸡源性金黄色葡萄球菌(Sta ph yloccocus aureus)的体外抑菌效果,采用打孔法测定了10味中草药煎剂对临床分离的1株鸡源性金黄色葡萄球菌的抑菌圈的直径,并用试管法和平板法分别测定了其最小抑菌浓度和最低杀菌浓度.结果表明,供试菌株对这10种中草药存在不同程度的敏感性,其中抑菌效果最好的是黄连、大青叶和连翘,其最小抑菌浓度均为12.5mg/ml,最低杀菌浓度分别为12.5、50.0mg/ml和100mg/ml.该结果可为防治鸡金黄色葡萄球菌病中草药制剂的开发提供科学依据.【期刊名称】《长江大学学报(自然版)理工卷》【年(卷),期】2011(008)010【总页数】4页(P240-242,248)【关键词】中草药;金黄色葡萄球菌(Sta ph yloccocus aureus);最小抑菌浓度;最低杀菌浓度【作者】韩梅红【作者单位】长江大学动物科学学院,湖北荆州434025【正文语种】中文【中图分类】Q935金黄色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus)可引起多种畜禽疫病,临床最常见的有败血症、关节炎、乳房炎、皮肤、组织器官化脓性感染及蜂窝织炎等。
鸡金黄色葡萄球菌性关节炎是鸡葡萄球菌病中常见的一种。
鸡、鸭常因趾、蹼或腿部被铁丝、碎玻璃等杂物划伤而感染金黄色葡萄球菌[1],从而导致关节肿大、跛行,行走困难,采食和饮水受到极大影响,病鸡逐渐消瘦、脱水,最终死亡。
该病是一种条件性、环境性疾病,对肉鸡育成期的影响极大,常可由此带来巨大的经济损失。
目前,临床上主要还是使用抗菌药物来控制鸡金黄色葡萄球菌病,但由于广泛、大量、长期不规范地使用抗生素而导致该菌的耐药性大幅度提高,防治效果越来越差,并导致药物残留和一些药源性疾病,严重威胁着食肉安全[2]。
近年来,国内外研究者在科学实验和生产实践中,运用中兽医学理论,开发利用中药资源,取得了一定的成绩。
宁夏、青海产紫花地丁对8种菌株的抑菌作用研究
宁夏、青海产紫花地丁对8种菌株的抑菌作用研究李嘉欣;杨凤琴;王好欣;张立明【摘要】目的研究宁夏、青海两产地紫花地丁不同极性部位提取物对不同菌种抑菌效果.方法宁夏、青海两产地紫花地丁石油醚提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物、水提取物用试管二倍稀释法联合琼脂平板法,进行体外抑菌试验研究.结果宁夏产地紫花地丁乙酸乙酯提取物(A2)对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌最小抑菌浓度(MIC)均为3.13mg·mL-1;青海产地紫花地丁乙酸乙酯提取物(B2)对表皮葡萄球菌MIC为6.25mg·mL-1.宁夏产地紫花地丁石油醚提取物(A1)、正丁醇提取物(A3)、水提物(A4)对8种细菌MIC为6.25~50.00mg·mL-1.青海产地紫花地丁石油醚提取物(B1)、正丁醇提取物(B3)、水提取物(B4)对8种细菌MIC为12.5~50.0mg·mL-1.结论宁夏产地紫花地丁乙酸乙酯提取物(A2)对葡萄球菌的抑菌效果优于青海产地紫花地丁乙酸乙酯提取物(B2).%Objective To investigate the antibacterial effects to different strains of the different polar parts extraction in Ningxia and Qinghai herba violae. Methods Ningxia and Qinghai herba violae petroleum ether extract, ethyl acetate extract, n-butanol extract and water extract were conducted in vitro bacteriostasis tests by tube double dilution method combined with agar plate method. Results The minimum inhibitory concentration (MIC) of Ningxia herba violae ethyl acetate extract (A2) to staphylococcus aureus and epidermis staphylococcus aureus was 3.13 mg·m L-1. The MIC of Qinghai herba violae ethyl acetate extract (B2) to epidermis staphylococcus aureus was 6.25 mg·m L-1. The MIC of Ningxia herba violae petroleum ether extract (A1), n-butanol extract (A3) and water extract (A4) to eight bacteria strainswere 6.25-50.00 mg·m L-1. The MIC of Qinghai herba violae petroleum ether extract (B1), n-butanol extract (B3) and water extract (B4) to eight bacteria strains were 12.5-50.0 mg·m L-1. Conclusion The antibacterial effect on staphylococcus aureus of Ningxia herba violae ethyl acetate extract (A2) was better than that of Qinghai herba violae ethyl acetate extract (B2).【期刊名称】《宁夏医科大学学报》【年(卷),期】2019(041)001【总页数】4页(P49-52)【关键词】紫花地丁;提取物;不同菌株;抑菌作用【作者】李嘉欣;杨凤琴;王好欣;张立明【作者单位】宁夏医科大学药学院, 银川 750004;宁夏医科大学临床医学院, 银川750004;宁夏医科大学药学院, 银川 750004;宁夏医科大学药学院, 银川 750004;宁夏回药现代化工程技术研究中心, 银川 750004;宁夏医科大学回医药现代化省部共建教育部重点实验室, 银川 750004【正文语种】中文【中图分类】TQ461紫花地丁性苦、辛、寒,归心、肝经,具有清热解毒,凉血消肿的功效[1]。
中草药抗菌实验实验报告
一、实验目的1. 了解中草药的抗菌作用;2. 探究不同中草药对细菌的抑制作用;3. 分析中草药抗菌成分及其作用机制。
二、实验材料1. 实验菌株:金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌;2. 中草药:金银花、黄连、大蒜、黄芩、板蓝根等;3. 试剂与仪器:营养肉汤、生理盐水、细菌接种环、无菌试管、培养箱、显微镜、电热恒温水浴锅等。
三、实验方法1. 中草药提取:将中草药洗净、晾干,用粉碎机粉碎成粉末。
取适量粉末,加入一定量的蒸馏水,煮沸30分钟,过滤,浓缩至一定浓度。
2. 菌株培养:将金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌分别接种于营养肉汤中,37℃培养箱中培养18小时。
3. 中草药抗菌实验:将培养好的菌株分别用无菌生理盐水洗涤,制成菌悬液。
取无菌试管若干,每管加入0.1mL菌悬液,再加入不同浓度的中草药提取液,对照管加入等量的生理盐水。
37℃培养箱中培养24小时。
4. 观察结果:观察各试管中菌落生长情况,以无菌生理盐水为对照,记录菌落数。
5. 数据处理:对实验数据进行统计分析,比较不同中草药对细菌的抑制作用。
四、实验结果1. 金银花提取液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌均有抑制作用,其中对金黄色葡萄球菌的抑制作用最强。
2. 黄连提取液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌均有抑制作用,其中对金黄色葡萄球菌的抑制作用最强。
3. 大蒜提取液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌均有抑制作用,其中对金黄色葡萄球菌的抑制作用最强。
4. 黄芩提取液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌均有抑制作用,其中对金黄色葡萄球菌的抑制作用最强。
5. 板蓝根提取液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌均有抑制作用,其中对金黄色葡萄球菌的抑制作用最强。
五、实验结论1. 金银花、黄连、大蒜、黄芩、板蓝根等中草药具有抗菌作用,对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌等细菌均有抑制作用。
2. 不同中草药对细菌的抑制作用存在差异,其中金银花、黄连、大蒜、黄芩、板蓝根等对金黄色葡萄球菌的抑制作用最强。
抗菌抗病毒常用实验研究方法
抗菌抗病毒常用实验研究方法细菌、病毒性疾病是目前国内外流行的主要传染病,尤其是近两年来,由冠状病毒引起的SARS及由流感病毒引起的禽流感给动物及人类带来的严重危害,是人所共知的"由于各种疫苗的不断出现,虽然一些细菌、病毒病已得到了有效的控制,但是其治疗尚无有效的解决方法因此研制高效、低毒的新型中药抗菌、抗病毒制剂已成为巫待解决的问题。
1、常用的抗菌方法1、1稀释法1、1、1试管稀释法培养基内抗生素的含量按几何级数稀释并接种适量的细菌,经孵育后,观察能引起抑菌作用最低抗生素浓度,称最低抑菌浓度(MIC)为该菌对药物的敏感度。
稀释法所获得的结果比较准确,常被用作校正其他方法的标准。
如以下黄贝贝等的青钱柳抗菌作用的实验研究和黄利权等的火绒草的抗菌活性研究的实验方法:1、应用试管稀释法,测定青钱柳提取物对试验菌的抑菌效果,检验不同浓度下青钱柳提取物对细菌、霉菌的抗菌作用。
结果:青钱柳提取物在体外对金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌等革兰氏阳性菌具有较强的抗菌作用;而对大肠埃希氏菌、铜绿假单孢菌等革兰氏阴性菌的抗菌作用不明显;对黄曲霉、烟曲霉等霉菌的抗菌作用不明显[1]。
2、采用试管稀释法,分别测定了火绒草水煎液、水提醇沉液、醇提物、醇提石油醚部分、醇提乙酸乙酯部分、醇提正丁醇部分、醇提水溶部分等7种提取物对大肠杆菌C83882、大肠杆菌C83903、大肠杆菌C83914、沙门氏菌C79-20、金黄色葡萄球菌Newbould S-305、金黄色葡萄球菌临床分离株等6株病原菌的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。
试验结果表明,火绒草醇提物及其石油醚部分和乙酸乙酯部分对两种金黄色葡萄球菌具有较强的抑制作用,其MIC为0114 mg/ml生药浓度,MBC为0127 mg/ml生药浓度,而其它部分对金黄色葡萄球菌的抑制作用较弱。
火绒草醇提正丁醇部分和水溶部分对3株大肠杆菌和1株沙门氏菌具有较强的抑制作用,其MIC为2170 mg/ml生药浓度,MBC为2170 mg/ml 生药浓度,显示了较强的抗菌活性[2]。
黄岑等10种中药对大肠埃希菌的体外抑菌试验观察
黄岑等10种中药对大肠埃希菌的体外抑菌试验观察许韦;邵志伟;李小东;张琪【摘要】目的观察黄岑等10种中药水煎液对非产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和产ESBLs大肠埃希菌的体外抑菌效果,了解中药制剂对2类细菌的抑菌效果是否一致,旨在为产ESBLs大肠埃希菌感染的临床治疗寻求新途径.方法采用MicroScan-4细菌分析仪进行细菌鉴定,用Kirby-Bauer法检测全部29株大肠埃希菌对临床常用15种抗菌药物的敏感性,按照美国临床实验室标准化研究所(CLSI)2006年标准判断结果;将10种中草药制备成一定浓度的水煎液,用琼脂稀释法测定不同菌株的最低抑菌浓度(MIC).结论 10种中药对2类菌株均有不同程度的抑菌作用,其中黄岑抑菌作用最强,其次是赤芍、黄连、仙鹤草.结论 10种中药对非产ESBLs和产ESBLs大肠埃希菌菌株均具有一定的抗菌作用,敏感性差异无统计学意义(P>0.05).%Objective To observe in vitro bacteriostatic effect of 10 kinds of traditional Chinese medicine decoction on non -producing extended-spectrum β4actamases( ESBLs) and ESBLs producing Escherichia coli to explore , whether the two kinds of bacteria antibacterial effect are consistent ,and to seek new ways for clinical treatment. Methods the MicroScan-4 bacteria analyzer was adopted for bacterial identification, using Kirby-Bauer assay for the detection of sensitivity of all 29 strains of Escherichia coli to 15 antibiotics, results of which were judged according to the United States of America Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI)2006 standard; 10 kinds of Chinese herbal were made into preparations with certain concentrations , using the agar dilution method for the determination of the minimum inhibitory concentration ( MIC) ofdifferent strains. Results All of the 10 kinds of Chinese herbs have different degrees of antibacterial effect on 2 strains,including skullcap with the strongest antibacterial activity ,followed by red peonyroot ,Coptis,agrimony. Conclusion 10 kinds of traditional Chinese medicine have certain antibacterial effects on non ESBLs and ESBLs producing Escherichia coli strains , sensitivity difference between which does not have statistical significance (P >0.05).【期刊名称】《安徽医药》【年(卷),期】2013(017)005【总页数】3页(P846-848)【关键词】大肠埃希菌;中药;超广谱β-内酰胺酶;最低抑菌浓度【作者】许韦;邵志伟;李小东;张琪【作者单位】安徽省淮北市人民医院,安徽,淮北,235000【正文语种】中文大肠埃希菌是人体肠道正常菌群,广泛分布于自然界,是临床最常见的条件致病菌之一,近年来,由于抗菌药物在临床上的广泛使用,产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的检出率逐年增加,已成为医院感染的重要病原菌[1]。
板蓝根等10种中草药对沙门氏菌的体外抑菌试验
板蓝根等10种中草药对沙门氏菌的体外抑菌试验李国旺;苗志国;赵恒章【摘要】为了研究板蓝根、黄连、贯众、鱼腥草、连翘、葛根、苦参、黄柏、白术、黄芪等10种中草药的抑菌效果,通过不同梯度药物提取物进行体外抑菌试验,采用试管2倍稀释法测定其最小抑菌浓度(MIC),观察其对沙门氏菌的体外抑制作用.结果表明,贯众、黄连对沙门氏菌的平均MIC值均为7.8 g/L,在各种单味中草药中的MIC值最小,表明贯众、黄连对沙门氏菌的抑菌效果最好;板蓝根、黄芪、鱼腥草、连翘、葛根、苦参、白术的MIC值在15.6~31.3 g/L,抑菌效果较好;黄柏的平均MIC值为62.5 g/L,抑菌作用较弱.【期刊名称】《贵州农业科学》【年(卷),期】2010(038)002【总页数】3页(P142-144)【关键词】中草药;沙门氏菌;体外抑菌【作者】李国旺;苗志国;赵恒章【作者单位】河南科技学院,动物科学学院,河南,新乡,453003;河南科技学院,动物科学学院,河南,新乡,453003;河南科技学院,动物科学学院,河南,新乡,453003【正文语种】中文【中图分类】S859.8沙门氏菌(Salmonella)是一大群寄生于人类和动物肠道内生化反应和抗原构造相似的革兰氏阴性杆菌,是一种常见的人兽共患病原菌,它不仅能导致仔猪副伤寒、流产等动物疾病,还能使人类发生伤寒、副伤寒、败血症、肠胃炎和食物中毒[1]。
沙门氏菌的中毒主要是菌体内毒素的作用。
许多血清型沙门氏菌都能产生内毒素,尤其是肠沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌和猪霍乱沙门氏菌。
其产生的内毒素是一种多糖、类脂、蛋白质化合物[2]。
内毒素具有耐热能力,75℃经1h后仍有毒力,可使人发生食物中毒。
动物从被污染饲料中摄入大量活菌,病菌可在肠道内继续繁殖,经肠系膜淋巴系统进入血液循环,形成一过性菌血症。
肠道内大量的细菌及菌体崩解后释放出来的内毒素,对肠道黏膜,肠壁及肠壁的神经,血管有强烈的刺激作用,造成肠道黏膜肿胀、渗出、黏膜脱落而中毒,症状为呕吐、腹痛及不同性质的腹泻。
对辣椒等10种中草药的体外抑菌实验及分析
对辣椒等10种中草药的体外抑菌实验及分析【摘要】目的研究辣椒粉、大蒜、黄柏等10种常见中草药的体外抑菌性能及培养基对中草药抑菌效果的影响。
方法采用药敏纸片扩散法确定各中草药对各病原菌抑菌性能及最小抑菌浓度(mic)。
结果辣椒粉对副伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌有抑制作用,mic分别为11.5%,11.5%;大蒜对副伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌有抑菌作用,mic分别为6.25%,12.5%;黄柏等常见中草药对各病原菌也都有一定的抑菌效果。
结论大蒜、辣椒提取物对特定病原菌有抑制作用,黄柏等常见中草药对各种病原菌均有较强抑菌效果。
【关键词】辣椒大蒜黄柏药敏纸片扩散法体外抑菌辣椒是一种重要的日常调味品,有增进食欲和维持消化道正常菌群平衡的功能;辣椒碱对大肠杆菌、酵母等多种病原菌有抑制作用。
大蒜中大蒜素和辣椒中辣椒碱有抑菌作用,这并不排除大蒜、辣椒中其它抑菌成分的存在,也不能完全代表它们的抑菌性能。
本实验对辣椒水煎剂和大蒜乙醇制剂的抑菌性能加以研究,以期完善这两种保健调味品的抑菌性能研究。
大蒜、黄柏、蒲公英等常见中草药常用于微生物性传染病的治疗。
在此,我们探讨了辣椒、大蒜、黄柏等10种药用植物提取物对大肠杆菌、副伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌等常见病原菌的抗菌谱及最小抑菌浓度(mic),希望能为它们的医药用途及生产应用提供科学依据。
1 材料与仪器1.1 菌株和培养基大肠杆菌、副伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌为本实验室存留;大肠杆菌、副伤寒沙门氏菌和枯草杆菌培养基为营养琼脂no.3,金黄色葡萄球菌培养基为葡萄球菌琼脂110和营养琼脂no.3。
1.2 仪器垂直流超净工作台,dh3600a型电热恒温培养箱,手提式高压灭菌锅,2d-85型恒温振荡器,tu-1800型紫外可见分光光度仪,zd-85型恒温摇床,ab204-s基础型电子分析天平等。
1.3 中草药辣椒、大蒜等购自农贸市场,其它中草药购自中药店。
八种中草药对常见病原菌的体外抑菌试验
八种中草药对常见病原菌的体外抑菌试验王雄;赵志光;邵爱华;吴润【摘要】本试验就民间草药中筛选出的具有一定抗菌作用的8种中草药,进行常见病原菌的体外抑菌作用测试,采用机械榨取、煎煮方法提取其有效成分,先以琼脂扩散试验法筛选具有明显抑菌作用的草药,再用试管稀释法测定其最小抑菌浓度(MIC).结果表明,对大肠杆菌、肠道沙门菌、痢疾志贺菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、猪链球菌的抑菌圈,连根韭菜均大于16.6 mm,韭菜叶、韭菜根均大于9.1 mm,茉莉花茶均大于8.3 mm;艾叶对痢疾志贺菌和金黄色葡萄球菌的抑菌圈分别为8.9 mm和11.9 mm,苦瓜对痢疾志贺菌的抑菌圈为8.6 mm,其余几种草药均无明显的抑菌作用;连根韭菜对各菌的MIC,培养12 h时分别为1:8、1:8、1:8、1:16、1:32和1:16,培养24 h时分别为1:4、1:4、1:4、1:8、1:8和1:8;研究证实连根韭菜、韭菜根、韭菜叶和茉莉花茶对上述细菌具有较好的抑菌效果,尤以连根韭菜的抑菌效果更佳.【期刊名称】《甘肃农业大学学报》【年(卷),期】2010(045)002【总页数】5页(P25-29)【关键词】中草药;常见病原菌;抑菌作用;体外试验【作者】王雄;赵志光;邵爱华;吴润【作者单位】甘肃农业大学动物医学院,甘肃,兰州,730070;甘肃农业大学生命科学技术学院,甘肃,兰州,730070;甘肃农业大学生命科学技术学院,甘肃,兰州,730070;甘肃农业大学动物医学院,甘肃,兰州,730070【正文语种】中文【中图分类】R582.5近年来,随着人们对健康理念的认识不断深入和化学合成药物存在的问题不断显现,使中草药越来越受到人们的关注[1-3].中国中草药资源极为丰富,国内现已利用一些先进的提取与合成技术并结合中医给药机理,开发出多种中成药,弥补了西药在治疗疾病过程中会对人体所产生一定副作用的缺陷[4-5].然而,一些虽具有良好治疗效果的中草药由于提取技术复杂,资源分布单一,价格昂贵等因素而制约其批量生产.同时,国内外对中草药活性成分及中医药理作用的研究仍处于探索阶段,使得中药制剂的研发更加漫长[8].因此,开发替代抗生素的低毒或无毒副作用、安全高效的抗微生物中草药已引起广大科研人员的关注.本研究通过在甘肃兰州、甘肃武威、吉林双辽等地的走访,针对民间偏方单味治疗腹泻和化脓性疾病的入药和未入药的中草药进行调查,筛选金银花、蒲公英、艾叶、马勃、茄子叶、韭菜、苦瓜和茉莉花茶等8种中草药进行大肠杆菌、沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、猪链球菌等常见病原菌的抑菌试验,旨在筛选出具有较好抑菌效果的中草药,为今后研发出效果显著、价格低廉、无药物残留等副作用的新型抗菌药物或食品防腐剂提供一定的科学依据.1 材料与方法1.1 试验材料1.1.1 药材与菌种供试中草药新鲜蒲公英(Taraxacum mongolicum)、金银花(Lonicera japonica)、艾叶(Artemisia argyi)、连根韭菜(Allium tuberosum)、茄子叶(Solanum melongena)采自甘肃农业大学种植区及其周边蔬菜种植区;苦瓜((Momordica charantia)购自兰州市安宁区桃海蔬菜市场;马勃(Lasiosphaera fenzlii)采自甘肃省古浪县古丰乡,茉莉花茶为湖南猴王茶叶有限公司(B00784260)产品.供试大肠杆菌、肠道沙门菌、痢疾志贺菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、猪链球菌均由甘肃农业大学动物医学院兽医微生物学实验室提供.1.1.2 主要试剂蛋白胨、牛肉膏、琼脂粉、NaCl、等均为国产分析纯.1.2 试验方法1.2.1 菌种活化将保存的各试验菌种接种于适宜的琼脂斜面培养基上使其活化,试验前接种于6 mL普通肉汤培养基中,37℃培养24 h后,取100 μ L菌液扩培于4.5 mL肉汤培养基中,37℃培养12 h后备用.1.2.2 药液制备参照文献[9]中的方法制备各测试中草药的药液.茉莉花茶和马勃采用煎煮法,称取茉莉花茶和马勃各10 g,分别加水150 mL,煮沸后文火煎煮15 min,分别过滤取药液后进行水浴浓缩至生药含量1 g◦mL-1;其他草药采用机械破碎法,将采集的各新鲜草药用流水冲洗去除泥沙,自然晾干表面水分,分别称取各草药60 g,榨汁取药液,将药液于10 000 r◦min-1高速离心30 min,吸取上清液.取各制备药液少许,分别接种需氧培养基和厌氧培养基做无菌检验.1.2.3 最佳涂布浓度的确定用普通肉汤培养基进行各活化菌液10-1~10-5的10倍递增稀释,取各稀释度菌液100 μ L涂布琼脂平板,各稀释浓度做3个重复,置37℃培养12 h后观察菌苔生长状况,并确定各菌的最佳涂布浓度.1.2.4 抑菌试验参照文献[10]进行各中草药的琼脂扩散抑菌试验.按无菌操作规程,吸取最佳涂菌浓度的菌液100 μ L涂布于普通琼脂平板,置温箱中37℃培养1 h后在培养基上等距离打孔,孔径6 mm,每孔加入对应标号的无菌药液100 μ L,37℃培养12 h后观察并测量其抑菌圈直径.各药液对每种试验菌均做3个重复,取抑菌圈直径平均值.1.2.5 最小抑菌浓度测定对筛选出的具有明显抑菌效果的药液,参照文献[11-12]的方法采用试管倍比稀释法测定其最小抑菌浓度(MIC).按无菌操作规程,以灭菌普通肉汤培养基为稀释液,分别取4 mL普通肉汤培养基进行药液的1∶2、1∶4、1∶8……1∶256倍比稀释,各稀释倍比药液培养基分别加入100 μ L菌液,设置空白普通肉汤培养基和空白菌液对照,37℃下培养12 h、24 h后分别观察细菌的生长状况,并确定其最小抑菌浓度.各药液对每种试验菌均做3次重复.2 结果与分析2.1 最佳涂布浓度根据不同稀释度细菌在琼脂平板上的生长状况,选择生长菌苔呈薄膜状、均匀布满平板表面的试验菌最高稀释度为该菌的最佳涂布浓度.由表1可见,确定大肠杆菌、肠道沙门菌、痢疾志贺菌的最佳涂布浓度为原始活化菌液的10-1,金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、猪链球菌的最佳涂布浓度为原始活化菌液的10-2.2.2 抑菌试验结果8种中草药提取液对常见病原菌的抑制作用如表2所示.新鲜连根韭菜、韭菜根和韭菜叶榨汁对6种常见病原菌的抑菌效果显著,连根韭菜的抑菌圈直径均大于16.6 mm,韭菜叶、韭菜根的抑菌圈直径均大于9.1 mm,具有潜在的广谱抗菌活性;茉莉花茶水煎药液也有一定的广谱抑菌性,但效果较韭菜榨汁次之,抑菌圈均大于8.3 mm.此外,艾叶榨汁仅对痢疾志贺菌和金黄色葡萄球菌,苦瓜榨汁明显对痢疾志贺菌有一定的抑制作用;新鲜金银花、蒲公英、茄子叶榨汁和马勃水煎药液对6种试验菌均无明显抑制作用.表1 不同稀释度下各菌在琼脂平板上的生长情况Tab.1 The growth state of each bacterium in different diluted concentration on the agar plate注:﹟表示菌苔较厚、重叠长满平板;+++表示菌苔呈薄膜状、均匀布满平板;++表示菌苔、菌落呈分散生长;+表示只有很少菌落生长;-表示没有细菌生长.细菌名称最高稀释度10-110-210-310-410-5大肠杆菌E.coli+++++++++肠道沙门菌S.enterica++++++++++痢疾志贺菌S.dysenteriae++++++++-金黄色葡萄球菌S.aureus﹟++++++++铜绿假单胞菌P.aeruginosa﹟++++++++猪链球菌S.suis﹟++++++++表2 8种中草药对常见病原菌的抑菌作用Tab.2 The bacteriostasis of 8 Chinese herbal medicines on common pathogenic bacteria注:-表示无抑菌作用.细菌名称抑菌圈直径/mm金银花蒲公英马勃艾叶茄子叶苦瓜连根韭菜韭菜根韭菜叶茉莉花茶大肠杆菌E.coli------19.29.39.18.7肠道沙门菌S.enterica------16.614.112.28.3痢疾志贺菌Sh.dysenteriae---8.9-8.626.711.011.811.4金黄色葡萄球菌S.aureus---11.9--33.011.511.523.1铜绿假单胞菌P.aeruginosa------17.015.710.39.8猪链球菌S.suis------19.512.812.69.72.3 最小抑菌浓度测定结果选择抑菌作用最强和广谱性最好的草药—连根韭菜,测定其榨汁对6种常见病原菌的MIC,结果如表3所示,对大肠杆菌、肠道沙门菌、痢疾志贺菌培养12 h时提取液稀释浓度为1∶8、培养24 h时提取液释稀浓度为1∶4,对金黄色葡萄球菌和猪链球菌培养12 h时提取液释稀浓度为1∶16、培养24 h时提取液释稀浓度为1∶8,对铜绿假单胞菌培养12 h时提取液释稀浓度为1∶32、培养24 h时提取液释稀浓度为1∶8.结果表明,连根韭菜对各试验菌都有明显的抑制作用,但MIC有所差异,抑制效力依次为铜绿假单胞菌>金黄色葡萄球菌和猪链球菌>大肠杆菌、肠道沙门菌和痢疾志贺菌,对3种肠杆菌的抑制效力基本一致.表3 连根韭菜对常见病原菌的最小抑菌浓度Tab.3 The minimal inhibitory concentrations of the rooted leek on common pathogenic bacteria注:+表示培养12 h后细菌生长良好;-表示培养12 h后细菌未生长;(+)表示培养24 h后细菌生长良好;(-)表示培养24 h后细菌未生长.细菌名称提取液稀释浓度1∶21∶41∶81∶161∶321∶641∶1281∶256大肠杆菌E.coli-(-)-(-)-(+)+(+)+(+)+(+)+(+)+(+)肠道沙门菌S.enterica-(-)-(-)-(+)+(+)+(+)+(+)+(+)+(+)痢疾志贺菌Sh.dysenteriae-(-)-(-)-(+)+(+)+(+)+(+)+(+)+(+)金黄色葡萄球菌S.aureus-(-)-(-)-(-)-(+)+(+)+(+)+(+)+(+)铜绿假单胞菌P.aeruginosa-(-)-(-)-(-)-(+)-(+)+(+)+(+)+(+)猪链球菌S.suis-(-)-(-)-(-)-(+)+(+)+(+)+(+)+(+)3 讨论进行药物琼脂扩散抑菌试验时,试验菌菌苔生长浓厚或稀疏直接影响抑菌结果的判定.因此,在试验前先要进行各试验菌的活化培养,以求得生长势能和活菌数基本一致的幼龄菌.在培养基、培养温度、时间和接种量等均相同的条件下,选取细菌菌苔呈薄膜状、均匀铺满平板的该菌最高稀释度为其最佳涂板浓度.经抑菌试验反复验证,平行试验间的抑菌圈直径相差在0.5~1.5 mm以内,试验重复性好.确定最佳涂菌浓度,对于检测药物未知抑菌性能具有重要意义,尤其是可以对一些抑菌效力相差不大的药物之间进行抑菌效力强弱的比较,提供科学的抑菌效果判定依据.药物体外抑菌试验,细菌培养时间对抑菌效果的判定至关重要.因此,本试验将体外抑菌及最小抑菌浓度测定观察时间设为12 h与24 h[13],与体内给药时间同步,以便为药液继续进行体内药代动力学及药效动力学测定提供参照.连根韭菜榨汁对6种试验菌12 h与24 h时的MIC随培养时间延长均呈2倍递增趋势,这可能与培养时间延长而药效成倍降低或一定浓度药液抑制细菌数的临界值有关.本试验发现,对铜绿假单胞菌的MIC培养24 h时提高了4倍,明显大于对其他细菌的2倍,这也暗示了不同细菌对药物稳定性的影响不同,或存在一定浓度药液抑制菌数临界值的现象,对此有待从连根韭菜榨汁的稳定性、最小杀菌浓度(MBC)等的测试中予以证实.艾叶、金银花、蒲公英、苦瓜及马勃都具一定的抑菌作用,且效果较好[14-16].本研究中金银花、蒲公英、马勃对6种细菌均无抑制作用,艾叶仅对痢疾志贺菌和金黄色葡萄球菌有抑制作用,苦瓜只对痢疾志贺菌有抑菌作用.表明在同种条件下,本试验采用新鲜植物榨汁中药效成分浓度较低,而相关研究以风干中草药煎剂浓缩至相当于原药1 g◦mL-1浓度药液进行试验,故有明显的抑菌效果.马勃的抗菌活性、抗菌谱广和抗菌效力与其种属相关[15].用茄秧、茄根、茄蒂治疗仔猪白痢、牛马口舌肿烂、母猪乳房炎等家畜疾病在民间验方中多有应用,但未见其体外抑菌作用的研究.本试验未能观察到茄子叶榨汁对6种细菌的抑制作用,而民间走访得知其对腹泻病具有较好的治疗效果.分析认为,茄子叶榨汁中药效成分浓度低或者茄子秧、根、蒂等对腹泻病、细菌性感染的治疗作用可能另有原因,对此需作进一步探讨.茶叶对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌以及口腔常见致病菌等有明显的抑菌作用,而对酵母菌、霉菌无明显抑制作用,其抑菌有效成分是茶多酚,茶叶品种不同其抑菌效果存在差异[17].本试验也证实茉莉花茶具有广谱抑菌作用,尤其对金黄色葡萄球菌抑制作用最为显著.韭菜在中医理论中具有温中,下气,补虚,调和脏腑,益阳,止泻化脓等作用.现代医学研究表明,韭菜提取物具有杀虫抗菌、抗突变、抗氧化、温肾助阳等多种生物学功能作用[18].韭菜对食源性微生物具有明显的抗菌作用,可作为防腐剂添加于食物之中,其抗菌活性具有很好的稳定性[19-22].本试验也证实韭菜榨汁对大肠杆菌、肠道沙门菌、痢疾志贺菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、猪链球菌具有显著的抑菌作用,并发现连根韭菜的抑菌效果高于韭菜叶和韭菜根,可见叶和根所含有效成分具有协同相长作用.国内尚未见韭菜抗动物病原菌作用的相关研究,应继续对韭菜有效抑菌成分及其稳定性等进行研究,可为开发新型抗菌类药物药源植物提供科学依据. 参考文献[1] 狄永厚.中药与西药之我见[J].中外健康文摘(临床医药版),2008,5(5):31[2] 刘天强,何健东,庄剑彬.中医药在预防抗生素滥用及其引起病症中的应用[J].亚太传统医药,2008,4(5):87-89[3] 应永飞.滥用兽药是自毁养殖“长城”—畜禽产品的兽药残留问题及其解决对策[J].中国动物保健,2008,(109):21-26[4] 高薇薇,佟建民.中国中草药资源的科学利用与开发[J].饲料广角,2001,(21):29-31[5] 王昌利,范少敏,白吉庆.中药有效群体及有效成分提取分离方法研究进展[J].陕西中医学院学报,2001,24(6):60-61[6] 申维玺,陈飞松.是什么因素阻碍了中医药理论的现代化和国际化[J].中国基础科学,2005,(1):33-36[7] 陈晓青,蒋新宇.中草药成分分离分析技术与方法[M].北京:化学工业出版社,2006[8] 史秋梅,沈萍,汤生玲.抗菌中草药筛选试验方法研究[J].中国家禽,2004,8(1):45-47[9] 李铁汉.瑞香狼毒有效成分分离鉴定及其抗菌、灭虱活性测定[D].兰州:甘肃农业大学,2004[10] Werner B,Schumann U B,Krebs A,et al.Rapid method for detection of minimal bactericidal concentration of antibiotics[J].Journal of Microbiological Methods.2009,7:85-89[11] 何绍雄.时间药理学与时间治疗学[M].天津:天津科学技术出版社,1994[12] 李少基,陈武,陈足金.12种中草药的体外抑菌试验[J].中兽医医药杂志,2004,(1):41-42[13] 孙菊英,郭朝晖.十种马勃体外抑菌作用的实验研究[J].中药材,1994,17(4):37-38[14] Takemoto D J,Dunford C,Murray M.The cytotoxic and cytostatic effects of the bitter melon(Momordica charantia)on humanlymphocytes[J].Toxicon,1982,20(3):593-599[15] 刘秀河,赵祥忠.茶叶提取物抗菌效果的研究[J].山东轻工业学院学报,2000,14(1):59-63[16] 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12种中药的体外抑菌试验
12种中药的体外抑菌试验黄玲;林居纯;马驰;钟钦卿【摘要】研究不同中药对标准菌及临床分离菌的抗茵活性,为中药应用于临床,以及消除细菌耐药性的研究提供基础.来用管碟法,进行了12味中药对3种标准菌及30株临床分离菌的抑茵作用观察.结果显示,12味中药中的8味对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、沙门菌具有不同程度的抑制作用,其中乌梅、五倍子和黄连抑菌活性最强,木耳、穿心莲、白头翁、苦参无抑菌作用.【期刊名称】《动物医学进展》【年(卷),期】2010(031)006【总页数】3页(P50-52)【关键词】中药;体外抑菌;管碟法【作者】黄玲;林居纯;马驰;钟钦卿【作者单位】四川农业大学动物医学院,四川,雅安,625014;四川农业大学动物医学院,四川,雅安,625014;四川农业大学动物医学院,四川,雅安,625014;四川农业大学动物医学院,四川,雅安,625014【正文语种】中文【中图分类】S853.75一直以来,我国兽医临床主要使用抗菌药控制细菌感染。
随着抗生素的广泛使用,所带来的毒性反应、兽药残留及耐药性等问题日显突出。
针对抗生素所带来的问题,兽医临床急需寻找低毒有效的抗菌药物替代品,以控制疾病的发生。
国内外的研究显示[1-2],中药或天然植物提取物,可发挥对病原菌直接杀灭作用或提高机体免疫力达到防治疾病效果。
本试验选用蒲公英等12味中药,对大肠埃希菌等3种标准菌,以及30株不同临床分离菌进行了体外抑菌作用研究,旨在筛选出对临床耐药菌株有抑菌作用的药物,为指导临床用药和进一步进行中药逆转细菌耐药性研究提供基础工作。
1 材料与方法1.1 材料1.1.1 中药蒲公英、五倍子、乌梅、黄连、黄芩、金银花、大黄、秦皮、穿心莲、白头翁及苦参,购自四川省雅安市惠民堂药店;木耳购自雅安市苍坪山农贸市场。
1.1.2 供试菌株标准菌株:金黄色葡萄球菌ATCC25923,大肠埃希菌ATCC25922,沙门菌C79-13;临床分离菌株:金黄色葡萄球菌(耐磺胺类药物)10株(SA 1~SA 10)、大肠埃希菌(耐阿莫西林和耐四环素)10株(E1~E10)、沙门菌(耐喹诺酮类药物)10株(S1~S10),由四川农业大学药学实验室保存提供。
中草药对大肠杆菌的体外抑菌试验
养殖与饲料2019年第07期饲料营养•29•中草药对大肠杆菌的体外抑菌试验董晓龙1孙越1张立永2赵月平$李子平2刘海斌21.华北理工大学药学院,河北唐山063210;2.河北北方学院牧业研究所,河北宣化075131摘要选取28种中草药,研究其对4种大肠杆菌菌株(血清型0^、血清型0机、血清型0込血清型0计0翅)的体外抑菌效果,抑菌圈的直径越大,抑菌效果越好。
本试验筛选了抑菌效果较好的10种中草药,分别是秦皮、厚朴、黄苓、苦参、黄连、穿心莲、马齿觅、鱼腥草、白头翁和大青叶。
关键词中草药;鸡;慢性呼吸道病中草药含有丰富的维生素、矿物质以及皂昔、多糖、生物碱等成分,具有一定抗菌消炎作用,因此,生产绿色、安全、性能稳定的中药制剂来预防、治疗大肠杆菌疾病已是一种趋势。
本试验选择单味中草药对大肠杆菌进行体外抑菌试验,以期为治疗大肠杆菌的中药制剂的配制提供理论参考。
1材料1.1中草药的选购中草药黄苓、黄连、穿心莲、大青叶、厚朴、秦皮、金银花、白术、木香、甘草、黄茯、黄柏、茯苓、白芍、当归、马齿觅、鱼腥草、梔子、大黄、赤芍、白头翁、知母、苍术、葛根、石榴皮、板蓝根、蒲公英和苦参,均购自张家口医药公司。
1.2试验菌株坝上长尾鸡鸡源大肠杆菌株1号(血清型0(、2号(血清型OJ、3号(血清型0Q、4号(血清型01+0148)o 2方法2.1单味中药药敏片试纸条的制备取黄苓、黄连、穿心莲、大青叶、厚朴、秦皮、金银花、白术、木香、甘草、黄茯、黄柏、茯苓、白芍、当归、马齿觅、鱼腥草、梔子、大黄、赤芍、白头翁、知母、苍术、葛根、石榴皮、板蓝根、蒲公英和苦参采用水煎煮法进行提取,制成含生药量为1g/mL的药敏片试纸条,4七冰箱中保存备用。
2.2培养基的制备将60七无菌麦康凯琼脂倒入无菌平皿中,制成平板,然后将平皿置121覽蒸汽高压20min灭菌,4七冰箱中保存备用。
2.3单味中药对大肠杆菌的体外抑制活性试验取宜径为0.5cm的灭菌滤纸片在单味中药的原药液中浸泡1h,取出备用。
11种植物提取物对4种病原细菌的抑菌活性筛选
11种植物提取物对4种病原细菌的抑菌活性筛选植物源杀菌剂具有选择性高、环境友好、对非靶标生物安全、低毒、低残留等优点,从植物中寻找抑菌活性物质,是研发新型杀菌剂的热点之一。
目前,中国开发与应用的植物源杀菌剂主要有苦参碱、黄岑苷、小檗碱、丁子香酚、香芹酚、儿茶素、大蒜素、乙蒜素、大黄素甲醚等。
但前述产品多集中于对植物真菌病害的防治,对植物源杀细菌剂的研究大多侧重于食品污染菌的控制,且大多数还处于室内筛选阶段。
魏希颖等研究发现泡桐花提取液对金黄色葡萄球菌有很强的抑制作用。
叶舟测定了木麻黄(Casuarina equisetifolia Forst)小枝提取液的抑菌活性,发现对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌表现出较强的抑制活性。
崔彦等的研究证明五倍子、丁香、地榆对黄瓜细菌角斑病菌表现出显著的抑制作用,其中五倍子提取物的活體防效可达60%,具有一定的开发潜力。
李玉玲发现竹焦油对甘蓝黑腐病菌、番茄细菌性斑点病菌、茄青枯病菌等多种供试细菌都有不同程度的抑制活性。
为了获得对植物细菌病害有广泛抑菌谱的植物源物质,本研究选取已报道过的具有广泛抑菌活性的11种植物提取物,对魔芋软腐病菌、猕猴桃溃疡病菌、核桃黑斑病菌、白菜软腐病菌4种常见的病原细菌进行室内抑菌活性筛选,旨在为新型植物源杀细菌剂的开发研究提供线索。
1 材料与方法1.1 材料1.1.1 供试菌种魔芋软腐病菌(Erwinia carotovora pv. carotovora)、猕猴桃溃疡病菌(Pseudomonas syringae pv. actinidiae)、白菜软腐病菌(Erwinia carotorora)均由西北农林科技大学无公害农药研究服务中心提供;核桃细菌性黑斑病菌(Xanthomonas campestris pv. juglandis)由西北农林科技大学林学院提供。
1.1.2 供试植物源物质及试剂大黄提取物(其中大黄素含量为0.30%)、博落回提取物(其中血根碱含量为0.57%)、狼毒提取物(其中狼毒素含量为1.90%)、皂荚提取物(其中皂荚素含量为6.90%)、苦参提取物(其中苦参碱含量为2.15%)均由山西德威生化有限公司提供。
中草药对奶牛乳房炎致病菌的体外抑菌效果试验
Disease Prevention中草药对奶牛乳房炎致病菌的体外抑菌效果试验何显杰清丰县农业农村局,河南清丰 457300摘 要:[目的]为研究中草药对奶牛乳房炎主要致病菌体外抑菌效果。
[方法]试验选取金银花等10 味中草药,采用试管二倍稀释法测定其对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和无乳链球菌的最低抑菌浓度(MIC)。
[结果]中草药对主要致病菌有不同程度的抑菌效果。
连翘对金黄色葡萄球菌的抑菌效果最好,MIC为15.63 mg/ mL;板蓝根、蒲公英和黄芩对大肠杆菌抑菌效果最好,MIC为62.5 mg/mL;紫花丁对无乳链球菌抑菌效果最好,MIC为15.63 mg/mL。
[结论]试验为临床研制乳房炎中草药制剂提供了技术参考。
关键词:中草药;奶牛乳房炎;致病菌;抑菌试验文章编号:1671-4393(2022)09-0044-04 DOI:10.12377/1671-4393.22.09.100 引言奶牛乳房炎是奶牛乳腺组织发生病理机能变化的防御应答反应[1],大多数病例由病原微生物侵染奶牛机体内部而引发,对奶牛泌乳性能、乳汁理化特性和生理繁殖机能等造成不利影响,成为奶牛疾病防控的重要内容。
致病性细菌是奶牛乳房炎的主要致病因子,种类较多,尽管奶牛乳房炎致病菌存在区域差别,但金黄色葡萄球菌、无乳链球菌和大肠杆菌是引起奶牛乳房炎的主要致病菌,约占细菌性乳房炎的70%以上[2]。
在长期兽医临床治疗中,抗生素在防控细菌性奶牛乳房炎方面发挥了重要作用,但也带来了牛奶抗生素残留超标、耐药菌株不断增多等严重问题。
中草药来源广泛,存在于动植物和矿石等中,具有无毒或低毒、无污染、无残留和无耐药性等诸多优势[3]。
很多中草药表现抗毒素和抑菌的药物功效,能够提高动物免疫力和机体的抗病能力,是很好的抗生素替代品。
本试验根据中兽药理论,结合乳房炎致病机制,按照“清热解毒、抗菌消炎、消肿止疼和通经利乳”的配伍原则,选取10 种中草药应用于奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌、无乳链球菌和大肠杆菌的体外抑菌试验,旨在筛选抑菌效果显著的中草药,为临床防治奶牛乳房炎的中草药研制和应用提供技术支持。
8种中草药临床常见菌株体外抑菌活性分析
8种中草药临床常见菌株体外抑菌活性分析赵英妹; 乔昀【期刊名称】《《检验医学》》【年(卷),期】2019(034)011【总页数】4页(P987-990)【关键词】中草药; 耐药菌株; 非耐药菌株; 抑菌活性【作者】赵英妹; 乔昀【作者单位】上海中医药大学附属曙光医院检验科上海 200021【正文语种】中文【中图分类】R284抗菌中草药具有副作用小、不易残留和较少出现细菌耐药等优点,具有良好的应用前景[1]。
中药材中有许多药物都有抗菌消炎的作用,虽然其作用机制尚不十分明确,但是可以肯定的是具有一定的临床应用价值。
本研究通过检测8种常用的清热解毒抗菌类中草药——黄连、金银花、野菊花、连翘、大黄、鱼腥草、芦根和穿心莲对标准菌株金黄色葡萄球菌(ATCC 29213)、大肠埃希菌(ATCC 25922)、产超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum beta-lactamase,ESBL)大肠埃希菌(ATCC 35218)和临床标本中分离出的甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(methicillinsensitive Staphylococcus aureus,MSSA)、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)、ESBL(-)大肠埃希菌、ESBL(+)大肠埃希菌的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)和最小杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC),了解中草药对耐药与非耐药菌株的体外抑菌活性。
1 材料和方法1.1研究对象收集分离自临床标本的MSSA、MRSA、ESBL(-)大肠埃希菌和ESBL(+)大肠埃希菌各10株;标准菌株金黄色葡萄球菌(ATCC 29213)、大肠埃希菌(ATCC 29522)、大肠埃希菌(ATCC 35218)购自上海市临床检验中心。
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适量 纯化 水按 上法再 煎 煮一 次 , 并 两 次滤 液 静 置 合 后 3 0 rmi 0 0/ n离 心 2 ri , 上 清 液 加 热 浓 缩 至 0 n 取 a 3m , 0 l调节 P H至 7 5 8 a 菌 2 r n后 4 . ,MP 灭 0i a ℃保 存 备用 , 时药液浓 度相 当于 1 升含 1 此 毫 g生药 。
摘
要 : 目的 探 讨 黄 连 、 芩 、 边 莲 、 公英 、 心 莲 、 菊 花 、 翘 、 叶 、 枯 草 、 味 子 、 银 花 等 l 种 中药 对金 黄 色 葡 黄 半 蒲 穿 野 连 艾 夏 五 金 1
萄球 菌 、 肠 杆 菌 、 脓 杆 菌 、 形 杆 菌 、 草 杆 菌 、 疾 杆 菌 、 寒杆 菌 、 大 绿 变 枯 痢 伤 白色 念 珠 菌等 8种 临床 常见 细 菌 的体 外 抑 菌 效 果 。方 法 制备 l 中药 提 取 物 , 用 试 管 对 倍 稀 释 法 对 金 黄 色 葡 萄 球 菌 等 8种 受 试 菌 进 行 体 外 抑 菌 试 验 , 定 最 小 抑 菌 浓 度 1种 采 测
( I) M C 。结 果 与 结论 l 种 中 药 对受 试 菌 均 有 不 同 程 度 的抑 菌 效 果 , 中 以黄 连 的 效 果 最 好 , 对 8种 受 试 菌 的 MI 介 于 1 其 它 C均 7 8 g m 一 12 g m 之 间 , 芩 、 枯 草 、 味子 次 之 。 .m / l 3.m / l 黄 夏 五 关键 词 : 中药 ; 菌 试 验 ; 抑 最小 抑 菌 浓 度 (MI ) C 文章 编 号 :10 -6 7 2 0 )50 6 -3 中 图 分 类 号 :R 8. 1 文 献 标 识 码 :B 0539 【08 0 -4 6 0 2 27
液 的 浓 度 分 别 相 当 于 2 0 g m , 15 / l 5 m / l 2 mg m ,
6 . mg ml 1 2 / ,1 . mg ml . mg ml 2 5 / ,3 . mg ml 5 6 / ,7 8 / 生
药浓 度 , 1号管作 阳性对 照管 , 8号管作 阴性 对照 管 。
后选 择 了黄连 等 1 种 中药 , 1 就它们 对 8种 临床 常见 细菌 的体外抑 菌效果 进行 了 比较 和探讨 。
1 实验 材料与 实验 方法
15×1。 m ) 用试 管密 闭封装 备用 。 . 0 个/ 1 ,
15 实 验方法 .
15 1 中药液 制备 :分别 称取 各种 药材 3 g 成粗 .. 0碎 1 1菌种 :大肠 杆 菌 、 黄 色葡 萄球 菌 、 脓 杆 菌 、 . 金 绿
10 0 0倍至浓 度 为 15×1 个/ l分 别在 1至 7号 . 0 m,
管 每 管 加 0 5 l 对 照 组 则 分 别 在 1至 7号 管 中 加 .m (
本实验 参 照 同类 实验 的 标准 作 为判 断标 准 。 即
当 M C< . 1 g ml 药 浓 度 时 为 高 度 敏 感 ; 当 I 7 8 / 生 m
变形杆 菌 、 草杆 菌 、 枯 痢疾 杆菌 、 伤寒杆 菌 、 白色念珠 末, 置于烧 杯 中 , 适 量 纯 化水 浸 泡 3 m n后 煎 煮 , 加 0 i 沸后 用文 火再 煎 3 r n 滤 出 煎 液 后 向烧 杯 中加 入 0 i, a
菌均 由川北 医学 院病原 中心鉴定 提供 。
1 种 中草药 提取 物对供试 菌的 MI 1 C值见 表 1 。
一 + + 一 一
表 1 1 1种 中草 药 提 取 物 对 供 试 菌 的 MI C值
药物 大肠 杆 菌 金 葡 萄 球 菌 绿 脓 杆 菌 变形 杆 菌 枯草 杆 菌 痢 疾 杆 菌 伤寒 杆 菌 白 色念 珠 菌
管对 比稀释至 0 5麦 氏 浊度 ( . . 15×1 。 m1 ,  ̄ 0 个/ ) 4C
保 存备 用 。
15 3 最小 抑 菌浓度 ( C 的测 定 :采 用对倍 稀 释 .. MI )
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第2 3卷
第 5期
川 北 医 I
学
院
学
管 至第 7管 中加 入 0 5 l . m 制好 的混 合 培养 基 , 微 用
量加样 器从第 3管 开始 对倍 稀 释 至第 7管 , 7管 第 中移 去 0 5 l液 体 。 在 第 一 管 中 加 混 合 培 养 基 .m
15 l第 2 至 第 7 管 中 各 加 10 l 第 8 管 加 .m , .m , 2 0 l 2 用 制 备 好 的 混 合 培 养 基 将 菌 液 稀 释 . m 。( )
注 的是 黄 连 对 白 色 念 珠 菌 也 表 现 出 较 强 的 抑 菌 活 性
本实验查 阅了相 关 的著 作 和文献 。 后 选择 了 黄连 等 1 种有显 著 抑 抑 菌效 果 中药 对 金 黄色 葡 萄 1
( MI 其 C为 7 8 g m ) 值 得推 广 。黄 芩 与 黄 连 对 .m/ 1, 受试 菌的抗 菌谱 基本相 同 , 但抑菌 活性较 黄连稍弱 。 夏枯草 、 味子 的抗 菌谱 较黄连 和黄芩窄 , 五 但夏枯 草
通 讯 作 者 :杨宗 琪 , - i ynznq 6 2 ht a .o Ema :agogi 0 @ om i cr l 0 l n 收 稿 日期 :2 0 o 0 8一 4—1 O
1 5 2 菌液 制 备 :将 各 种 细 菌 接 种 至 固体 培 养 基 ..
上 ,7 3 ℃培 养 2 h 用生理 盐 水 将 菌落 洗下 。用 比浊 4,
报
Vo . 1 23. .5 No
20 0 8年 l 月 0
J OURNAL OF NORTt I UAN EDI A L COL lS CH M C LEGE
O t2 0 c・ 0 8
4 7 6
法测定 最小 抑 菌浓 度 ( C , 作 全 部在 超 净 工 作 MI ) 操 台 内进 行 。 ( ) 加 塞 无 菌 小 试 管 1 1取 6支 , 为 两 分 组 , 组 8支 , 组 作 为 实验 组 , 一 组 为 对 照 组。 每 一 另 在每组 的 2 3号 管 中加 入 0 5 l 、 . m 中药 煎 剂 , 第 3 在
药 的特殊性 , 细菌较 少对 中药产 生耐 药性 , 并且 中药
1 3 培养基 :蛋 白胨水 培养 基 , . 营养 肉汤培养基 , 沙 保 弱培养基 , 养 琼 脂 培 养 基 均 购 自中 国医 药 ( 营 集 团) 上海化 学试 剂 公 司。 混合 培 养基 制 备 即在 蛋 白 胨 水培 养基 中加 入 1 0 葡 萄糖 和 16 溴 甲酚 紫 .% .%
( o e aC ies or 、 L bl hnni L u ) 黄芩 ( ctl r acl - i s Suel i b i e aa an
s er ) 蒲 公 英 ( aaau o gl u n - i G og 、 s i T r cm m noi m Had x c
抵御细 菌感染 的有 力 武 器 , 随着 抗 生素 的长 期 应 但
用甚至 滥用 , 来越 多 的 细 菌对 现有 的抗 生 素 产 生 越
了耐药 性 , 降低 了现 有抗 生 素 的 效率 。几 千 年 来 中 药是我 国防治 疾病 的 重要 武器 , 现 代 预 防和 控 制 在 细菌性 感染疾 病方 面也 发挥 了积极作 用 。而 由于 中
Maz 、 心 莲 ( n rgahsp ncl a( ur. z) 穿 A do r i a i a p u t B r £) o
N e ) 野 菊 花 ( e da te n iu ( .)D s es 、 D n rnhma idc m L e Mo1 、 u) 连翘 ( osti sses T u b V h 、 叶 F r ha u pne( h n ) a ) 艾 y
抗 生素从 发现 至今 的几 十年时 间里成 为了人 类
( r miaagi eie V n) 夏枯 草 ( rnl u- A t s r ̄ L v t at 、 e i . Pu e avl l gr . 、 味子 ( c i n r hnn i B i ) 金 银 ai L ) 五 s Shs dacie s a1 、 a s l 花 ( o i r a o i h n ) 由川 北 医 学 院 附 属 L nc aJp nc T u b 均 e a 医 院 中药 房提供 。
药 有明显 的抑 菌 效果 u , 经平 板 法 抑 菌试 验 筛 选
养 基均 为实验 前临 时配制 。
1 4 比浊 管 的 配 制 :取 0 5 浓 度 为 0 0 8 o L . . ml .4 m l / 的 B C2加 到 9 . m . 8 lL 2 O a1 9 5 L 0 1 mo H S 4中 配 置 成 / 0 5个 麦 氏 浊 度 的 比 浊 管 ( 当 于 细 菌 数 为 . 相
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第 2 3卷
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第 5期
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学
报
V1 3N . o 2 ,o5 .
Oc. 0 8 t2 0
20 0 8年 l O月
J OURNAL OF NORTH CHUAN SI MEDI CAL C0LLEGE
指 示剂 ,MP 8 a高压灭 菌 2 ri 0 n后冷藏 备用 。所 有培 a
具有毒 副作 用小 , 材方 便 , 取 经济 实 惠 的优 点 , 因此
研究 和开发 中药 抗生素 对解决 耐药 菌株 的问题具 有
重大 意义 , 也 受 到 了 众 多 学 者 的广 泛 关 注 ¨ 。 这 本 实验在查 阅 了相关 的著 作 和文 献后 , 现 多种 中 发