masson三色染色法
PH0622 Masson三色染色液(马松染色)使用手册
自备材料
1、固定液：选用甲醛升汞或甲醛盐溶液，亦可选购中性福尔马林试剂； 2、95%乙醇、无水乙醇等系列乙醇； 3、蒸馏水或去离子水；
使用方法
1、切片常规脱蜡至水。 2、用配制好的试剂(A)染色 5～10min。 3、用酸性乙醇分化液分化、水洗。 4、用氨水溶液返蓝、水洗。 5、蒸馏水或者去离子水洗 1min。 6、丽春红品红染色液染色 5～10min。 7、用乙酸溶液洗 1min。 8、磷钼酸溶液洗 1～2min。 9、用乙酸溶液洗 1min。 10、直接放入苯胺蓝染色液中染色 1～2min。 11、乙酸溶液洗 1min。 12、95%乙醇快速脱水。 13、无水乙醇(Ⅰ) 5～10s。 14、无水乙醇(Ⅱ) 5～10s。 15、无水乙醇(Ⅲ) 5～10s。 2
1
试剂(F): 磷钼酸溶液 试剂(G): 苯胺蓝染色液 使用说明书
50ml 50ml
100ml 100ml 1份
RT 避光 RT 避光
主要成分
试剂(A): 主要由苏木素和氯化铁等组成。 试剂(B): 主要由乙醇、酸溶液等组成。 试剂(C): 主要由稀氨水等组成。 试剂(D): 主要由丽春红、品红等组成。 试剂(E): 主要由乙酸等组成。 试剂(F): 主要由磷钼酸等组成。 试剂(G): 主要由苯胺蓝、弱酸等组成。
Phygene Masson 三色染色试剂盒的特点： ①染色稳定； ②分化时间短，1～2s； ③色彩清晰鲜艳； ④适用范围广，适宜于组织的石蜡切片、冰冻切片等染色； ⑤所染切片保存时间长且不易褪色。
试剂存储
常温保存，有效期至少一年
试剂组分
试剂名称 试剂(A) :Weigert 铁苏木素染液 | A1:苏木素染液 试剂(A) :Weigert 铁苏木素染液 | A2:氯化铁溶液 规格：50ml 25ml 25ml 规格：100ml 50ml 50ml 保存 RT 避光 RT 避光
Masson三色染色试剂盒说明书
Masson三色染色试剂盒说明书Masson 三色染色试剂盒说明书（南京森贝伽生物科技有限公司）【产品介绍】Masson 染液是显示组织中纤维染色的主要方法之一，是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。
该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关。
分子的大小由分子量来体现，小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织，而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。
淡绿分子量最大。
因此Masson 染色肌纤维红色，胶原纤维绿色，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
【用途】主要用于胶原纤维染色。
【产品特点】①染色稳定；②分化时间短，1～2 分钟；③色彩清晰鲜艳；④适用范围广，适宜于组织的石蜡切片、冰冻切片等染色；⑤所染切片保存时间长且不易褪色。
固定：甲醛升汞或甲醛盐溶液。
切片：所有类型。
【产品组成】编号名SBJ0126（7×50ml）SBJ0126（7×100ml）SBJ0126（7×500ml）Storage试剂（A）A1：苏木素染色液25ml 100ml 500ml RTA2：三氯化铁水溶液25ml 100ml 500ml RT 临用时取A1、A2 等量混合，成为试剂（A），不可预先配制后放置，因染色液的色素根与铁会化合，形成不容性沉淀，等量混合后，一般24h 后失去染色力。
试剂（B）: 盐酸乙醇分化液50ml 100ml 500ml RT 试剂（C）: 氨水水溶液50ml 100ml 500ml RT 试剂（D）: 丽春红酸性品红染色液50ml 100ml 500ml RT 试剂（E）: 乙酸水溶液50ml 100ml 500ml RT 试剂（F）: 磷钼酸水溶液50ml 100ml 500ml RT 试剂（G）: 苯胺蓝染色液50ml 100ml 500ml RT 【参考操作步骤】1、切片脱蜡至水。
2、试剂（A）染色5min～10min。
3、试剂（B）分化、水洗，试剂（C）返蓝、水洗。
Masson三色染色法--染色案例
Masson三色染色法
1.实验目的
MASSON染色观察病变的组织
2.实验材料
2.1石蜡切片
2.2仪器与试剂
2.2.1
（1）电热恒温干燥箱
（2）光学显微镜及拍照设备
（3）冰箱
（4）电子天平
（5）盖玻片
（6）染缸
2.2.2
（1）二甲苯
（2）无水乙醇
（3）Weigent氏苏木素液
（4）1％盐酸液
（5）立春红-品红溶液
（6）1％磷钼酸液
（7）1％淡绿液
（8）1％醋酸液
3.实验步骤：
操作方法：
(1)切片常规脱蜡至水，蒸馏水洗；
(2)Weigent氏苏木素液染核5-10分钟；
(3)自来水洗；
(4)1%盐酸酒精分化数秒（在显微镜下控制染色，除核为黑色，片中其他均混为白色）；
(5)自来水洗；
(6)丽春红—品红溶液5-10分钟
(7)清水水溶液洗；
(8)1%磷钼酸分化直到各种成分被染清晰10分钟（胶原纤维呈淡红色，肌纤维、纤维素呈鲜红色）；
(9)清水洗
(10)1%淡绿液染2—5分钟（或用2%苯胺蓝水溶液替代）
(11)1％醋酸水溶液处理2MIN
(12)常规脱水、透明、封片。
结果：胶原纤维绿色（或蓝色），肌肉、纤维素红色，红细胞橘黄色，核蓝黑色。
Human-肺癌-马松染色法
Human-肺-马松染色法
Human-软骨-马松染色法
Human-胰腺癌-马松染色法
武汉云克隆诊断试剂研究所。
病理学技术—特殊染色最最全总结(均配图)
病理学技术—特殊染色最最全总结(均配图)结缔组织染色法1.1 Mallory三色染色法Mallory三色染色法可用于胶原和网状纤维的染色，其中蓝色代表胶原和网状纤维，淡蓝色代表软骨、粘液和淀粉样变物质，红色代表神经胶原纤维、肌纤维和酸性颗粒，橘红色代表髓鞘和红细胞。
图表A1.1展示了Mallory三色染色法的效果，其中A组排列规则。
1.2 Masson三色染色法Masson三色染色法可用于胶原纤维和肌纤维的染色，其中绿色代表胶原纤维，红色代表肌纤维，橘红色代表红细胞。
图表B1.2和C1.2展示了Masson三色染色法在胃癌组织和血管平滑肌中的应用。
1.3 显示胶原、网状和弹性纤维的三联染色法三联染色法可用于显示胶原、网状和弹性纤维，其中红色代表胶原纤维，黑色代表网状纤维，绿色代表弹性纤维，淡黄色代表肌肉和红细胞。
图表D展示了Weigert间苯二酚法的效果。
胶原纤维染色法2.1 天狼星红苦味酸染色法天狼星红苦味酸染色法可用于胶原纤维的染色，其中红色代表胶原纤维，绿色代表细胞核，黄色代表其他物质。
天狼星红苦味酸染色法在偏光显微镜下观察，Ⅰ型呈强双折光性，呈黄色或红色纤维，Ⅱ型呈弱双折光，呈多种色彩疏网状分布，Ⅲ型呈弱双折光，呈绿色的细纤维，Ⅳ型呈弱双折光的基膜，呈淡黄色。
图表E展示了胶原纤维的染色效果，以及XXX.)苦味酸-酸性品红法在心肌梗塞后2个月的应用。
2.2 Van Gieson（V.G）苦味酸-酸性品红法Van Gieson（V.G）苦味酸-酸性品红法可用于胶原纤维的染色，其中鲜红色代表胶原纤维，黄色代表肌纤维、细胞质和红细胞，蓝褐色代表胞核。
图表E展示了胶原纤维的染色效果，以及XXX.)苦味酸-酸性品红法在心肌梗塞后2个月的应用。
三、网状纤维染色3.1 XXX-Sweets银氨染色法XXX-Sweets银氨染色法可用于网状纤维的染色，其中黑色代表网状纤维，红色代表胞核（核固红复染），黄棕色代表胶原纤维，淡红色代表细胞质（红液复染）。
masson染色步骤(临床医学研究中心总结)
试剂名：改良 Masson 三色染色液货号：G1345 品牌：索莱宝1、石蜡切片65℃烘烤1h（使组织更贴合玻片，并溶解石蜡。
如果是刚切好的切片，则烘烤2-3h），立即放入脱蜡剂中脱蜡；2、脱蜡：脱蜡剂Ⅰ（15min）、脱蜡剂Ⅱ（15min）水化：无水乙醇I（5min）、无水乙醇 II（5min）、95%乙醇I（5min）、95%乙醇II （5min）、85%乙醇（5min）、75%乙醇（5min）脱蜡处理，蒸馏水3min3、将 Bouin 液滴在组织上，于室温作用一晚或置入 37℃的温箱内 2h 进行媒染，然后流水冲洗至切片组织上的黄色消失。
4、天青石蓝染色液滴染3min，稍水洗玻片上无染料即可。
5、Mayer 苏木素染色液滴染3min，稍水洗玻片上无染料即可。
（显微镜下观察，细胞核呈现深蓝色，细胞质有蓝色）6、酸性乙醇分化液分化3-5s，流水冲洗 10min返蓝。
（细胞核呈现灰蓝色，细胞质应相对透明无色）7、丽春红品红染色液染 2-5min，稍水洗玻片上无染料即可。
（容易造成深红或紫红色，基本看不清细胞核。
建议先染色30s-1min，显微镜下观察，适当增加时间）8、磷钼酸溶液浸泡10min，倾去上液，切片不用水洗，直接滴入苯胺蓝染色液染 5-10min。
（如果丽春红染色过深，苯胺蓝也应该适当染久一些，最终应该是红蓝色分明，能明显分辨出胶原显微）9、弱酸溶液处理 2min。
10、透明：切片直接依次放入无水乙醇 I（5min）-无水乙醇 II（5min）- 脱蜡剂Ⅰ（5min）- 脱蜡剂Ⅱ（5min）。
然后用纸巾擦干玻片上残余脱蜡剂，或直接铺平玻片在通风橱内，干燥脱蜡剂。
使用中性树脂封片。
注：masson染色不像HE可以把颜色洗脱再重复步骤，建议使用同一批切片，先摸索染色时间。
masson三色染色液是什么
Masson三色染色液说明书【产品名称】Masson三色染色液【包装规格】货号：DC0032套组包装规格：8×20ml/盒、8×100ml/盒、8×250ml/盒【预期用途】主要用于组织中结缔组织、肌肉和胶原纤维的组织细胞学染色。
【检验原理】Masson三色染色又称马松染色，是胶原纤维染色权威而经典的技术方法，所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。
该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关：分子的大小由分子量来体现，小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织；而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织，苯胺蓝的分子量很大，染色后肌纤维呈红色，胶原纤维呈蓝色，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
【主要组成成分】试剂组成主要成分1、Weigert铁苏木素A液苏木素2、Weigert铁苏木素B液三氯化铁3、酸性乙醇分化液乙醇4、蓝化液碳酸盐5、丽春红品红染色液丽春红、品红6、乙酸溶液乙酸7、磷钼酸溶液磷钼酸8、苯胺蓝染色液苯胺蓝【储存条件及有效期】5℃～35℃保存，原包装未开封染色液的有效期为l8个月，在有效期内的已开封染色液建议在开封后6个月内使用完，每次用后应及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。
【样本要求】组织片充分固定和脱蜡。
【检验方法】1、组织固定于Bouin氏固定液(另购)或Zenker氏固定液(另购)或10%中性福尔马林固定液(另购)等，流水冲洗，常规脱水包埋；2、切片常规脱蜡至水；3、取适量的Weigert铁苏木素A液和Weigert铁苏木素B液等量混合,即为Weigert铁苏木素染色液，用Weigert铁苏木素染色液染色，流水稍洗；4、酸性乙醇分化液分化数秒，流水冲洗数分钟；5、蓝化液返蓝数秒，流水冲洗数分钟；6、丽春红品红染色液染色数分钟，流水稍冲洗；7、将蒸馏水:乙酸溶液按一定的比例配制乙酸工作液，用乙酸工作液洗切片；8、磷钼酸溶液处理后，倾去玻片上磷钼酸溶液(不用水洗)；9、苯胺蓝染色液复染，倾去玻片上染色液(不用水洗)；10、用乙酸工作液处理切片，至切片无蓝色脱出(必要时镜下控制)；11、95%乙醇迅速脱水，无水乙醇脱水数次后，二甲苯透明，中性树胶封固。
Masson三色法
Masson三色法（根据Masson,1929）一、试剂配制（一）Weigert氏铁苏木素液（可用Herris苏木素代替）甲液：苏木素1g无水酒精（或95％酒精）100ml乙液：29％三氯化铁水溶液4ml蒸馏水95ml （30%三氯化铁溶液则为100ml）盐酸1ml临用时，取甲、乙液等量混合即可应用。
混合时应将乙液加人甲液内，染液呈紫黑色。
铁苏木素不能象明矾苏木素一样配制后可放置贮存备用，因铁与染色剂的色素根会化合生成不溶性沉淀，所以铁作媒染液时，必须与染液分别配制和分别保存，染片时临时混合应用。
由于这是一种铁苏木素，它将胞核染成黑色。
能抵抗在对比染色液中所含分色剂的脱色作用，且不会被光线退色，因此比钾矾苏木素染色较为持久。
（二）丽春红酸性品红液丽春红（Ponceau 2R）0.7g酸性品红（acid fuchsin）0.3g蒸馏水99ml冰醋酸(glacial acetic acid) 1ml（三）1%磷钼酸水溶液磷钼酸（phosphomolybdic acid）1g蒸馏水加至100ml（四）2%苯胺蓝液苯胺蓝（aniline blue）2g冰醋酸（glacial acetic acid ）2ml蒸馏水加至100ml（五）亮绿液亮绿（light green）1g蒸馏水99ml冰醋酸（glacial acetic acid ）1ml（六）Bouin氏液苦味酸饱和液（1.22％）75ml福尔马林25ml冰醋酸5ml此液一般在临用时配制，对皮肤及肌腱有软化作用。
二、操作方法1．组织固定于Bouin氏液，流水冲洗一晚，常规脱水包埋。
2．切片脱蜡至水：（1）二甲苯中脱蜡10分钟×3次，用吸水纸吸干液体；（2）100%乙醇5分钟×2次，用吸水纸吸干液体；（3）95%乙醇5分钟×2次，用吸水纸吸干液体；；（4）流水2分钟，用吸水纸吸干水分；3．Weiger氏铁苏木素染5-10分钟。
一种不易褪色的masson三色染色方法及其应用
一种不易褪色的masson三色染色方法及其应用
Masson三色染色法是一种染色方法，用于检测细胞中的蛋白
质和核酸，是一种不易褪色的染色法。
Masson三色染色法的原理是：将需要染色的细胞或组织切片，用三种不同的染料分别染色，分别指示蛋白质，核酸和细胞壁结构。
染料的种类有：碘酒素、亚硝酸盐和胭脂红。
碘酒素用于染色蛋白质，亚硝酸盐用于染色核酸，胭脂红用于染色细胞壁结构。
Masson三色染色法可以用于显示细胞结构，也可以用于检测
细胞中的蛋白质和核酸的分布情况。
它可以用于细胞结构的分析，也可以用于病理学的诊断。
此外，Masson三色染色法还
可以用于细胞培养，观察细胞的生长及其他变化。
病理学技术——特殊染色最全总结
病理学技术——特殊染色最全总结特殊染色是病理学中常用的一种技术手段，用于染色并可视化细胞、组织或病理标本中特定的结构、细胞成分或病理损伤，从而帮助诊断人员更准确地判断疾病类型和病理变化程度。
特殊染色的种类繁多，下面将对一些常见的特殊染色进行全面总结。
一、银染色法银染色法是通过化学反应使待染物质与银盐结合，生成黑色或褐色沉淀，并在显微镜下观察变化。
常见的银染色方法有：Reticulin（網狀纖維）染色、Gomori银染色、Grocott-Methenamine银染色。
二、PAS染色PAS染色（Periodic Acid-Schiff染色）是一种常见的特殊染色技术，用于检测糖原以及其他多糖类物质。
通常使用的PAS染色是将待染物标本与过氧化铬酸溶液（Periodic Acid）处理后再使用Schiff试剂进行染色的方法。
PAS染色为酸性物质染成红色，大多为胞浆染色。
常见的应用包括鉴别肝细胞变性、神经纤维、肾小管等结构。
三、 Masson三色染色法Masson三色染色法是一种多彩染色方法，通过染色剂的组合可染出细胞核、胶原纤维和细胞质等不同组织成分。
Masson三色染色方法包括酸性区域以绿色染色显示胶原纤维，细胞核以黑色或暗蓝色染色显示，胞质以红色染色显示。
该染色法在组织纤维化、炎症反应等病变的检测中应用广泛。
四、Mallory三色染色法Mallory三色染色法和Masson三色染色法类似，可以用于显示胶原纤维、细胞核和胞质等组织成分。
其区别在于Mallory三色染色法标本在染色前需用盐酸处理，使染色剂更易于沉积在纤维上，能更清晰地显示组织纤维结构。
五、Giemsa染色Giemsa染色通常用于血液和骨髓涂片的染色，并可以显示细胞核、染色质和胞质等成分。
Giemsa染色法有多种方法，如Giemsa-Eosin染色法、Giemsa-Wright染色法等，可根据需要选用。
六、von Kossa染色法von Kossa染色法用于检测组织中的钙盐沉积，如血管壁的钙化、尿路结石等。
Masson三色染色图示
Masson三色染色法
试剂
1.Bouin液
饱和苦味酸75ml，甲醛25ml，冰醋酸5ml.
2.Ⅰ液：1%比布列西猩红水溶液90ml，1%酸性复红水溶液10ml，冰醋酸1ml。
3.Ⅱ液：磷钼酸 2.5g，磷钨酸2.5g，蒸馏水100ml
4.Ⅲ液：苯胺蓝2.5g，冰醋酸2ml，蒸馏水100ml。
5.weigert铁苏木精液
A液
苏木精1g
90%乙醇100ml
B液
30%氯化铁4ml
蒸馏水100ml
纯盐酸1ml
A和B液需要分瓶存放，临用前A液和B液等量混合
6.1%冰醋酸水溶液冰醋酸1ml，蒸馏水100ml。
Masson三色染色步骤
染色步骤
1.石蜡切片常规脱蜡至水
2.Bouin液室温过夜或56℃1h
3.流水冲洗黄色消失
4.蒸馏水洗
5.Weigerrt铁苏木精染核10mins
6.盐酸酒精分化
7.流水冲洗10mins
8.蒸馏水洗
9.Ⅰ液2mins
10.蒸馏水洗
11.Ⅱ液15mins
12.Ⅲ液5mins
13.蒸馏水洗
14.1%冰醋酸浸洗5mins
15.常规脱水、透明、封固
结果
肌肉红色
胶原纤维蓝色
核黑色。
masson三色染色 原理
masson三色染色原理马森三色染色的原理马森三色染色是一种组织学染色技术，用于区分神经组织的不同成分。
它基于通过磷钨酸-血红素溶液和靛胭脂溶液的顺序染色，这赋予神经元不同的颜色。
磷钨酸-血红素溶液的染色原理磷钨酸-血红素溶液是一种呈酸性的溶液，含有磷钨酸和血红素。
磷钨酸是一种多价阴离子，对组织中的碱性成分，如细胞核和细胞质，具有亲和力。
血红素是一种铁卟啉分子，与氧气结合形成稳定的络合物。
当磷钨酸-血红素溶液应用于组织时，磷钨酸会与细胞核和细胞质中的碱性成分结合，形成不溶性沉淀。
血红素与氧气结合，形成棕红色的血红素氧络合物，沉积于这些碱性成分上。
因此，细胞核和细胞质被染成深棕色。
靛胭脂溶液的染色原理靛胭脂是一种阳离子染料，对组织中的酸性成分，如细胞外基质和神经胶质纤维，具有亲和力。
当靛胭脂溶液应用于组织时，它会与这些酸性成分结合，形成不溶性蓝紫色沉淀。
神经胶质纤维是神经胶质细胞产生的长而细的纤维，它们包裹着神经元并提供支持。
通过与靛胭脂结合，这些纤维被染成蓝色。
神经元的染色神经元的细胞体主要由细胞核和细胞质组成，它们富含碱性成分。
因此，它们在磷钨酸-血红素溶液中被染成深棕色。
神经元的轴突和树突是神经元的细胞突起，它们由神经胶质细胞包裹。
神经胶质细胞产生的神经胶质纤维含有酸性成分，因此它们在靛胭脂溶液中被染成蓝色。
通过磷钨酸-血红素溶液和靛胭脂溶液的顺序染色，马森三色染色可以区分神经元的不同成分：细胞核和细胞质呈深棕色，神经胶质纤维呈蓝色。
这种差异允许在显微镜下对神经组织进行详细的观察和分析。
MASSON三色染色法
因此：在Masson染色法中，酸 性品红和丽春红染肌纤维，而苯 胺蓝或亮丽染胶原纤维。
【试剂配置】：
（1）Masson复合染色液
酸性品红1g ；丽春红2g；橘黄G 2g；0.25%醋酸300ml
（2）亮绿染色液
亮绿SF 0.1g ，0.2%醋酸100ml。
[染色步骤]：
（1）中性甲醛液固定组织，石蜡切片，常规脱蜡至水 （2）Masson复合染色液5min （3）0.2%醋酸水溶液稍洗。 （4）5%磷钨酸5-10min （5）0.2%醋酸水溶液浸洗2次 （6）亮绿染色液5min，0.2%醋酸水洗2次 （7）无水乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。
不同的组织和细胞成分，它们的空隙大小是 不同的，空隙的大小，决定了组织的渗透性， 如空隙小，组织结构致密，渗透性低；空隙 宽，组结构疏松，渗透性高。 如已固定的组织用一系列阴离子水溶性染料 先后或混合染色，则可发现红细胞被最小分 子的阴离子染料着染。由此说明红细胞对阴 离子染料的渗透性最小。肌纤维与胞质次之， 而胶原纤维具有最大的渗透性。 根据组织不同的渗透性能，选择分子大小不 同的阴离子染料进行染色，便可把不同组织 成分显示出来。
染料分子的大小，主要由其分子量来体现。 一般来说小分子量者易于穿透结构致密， 渗透性低的组织，而大分子染料只能进入 结构疏松，渗透性高的组织。 常用胶原纤维染色而几种阴离子染料的分 子量由小到大分别是：
马松三色染色原理masson1
马松三色染色原理masson.Masson染色(2010-09-02 14:43:20转载标签:杂谈分类:实验日志masson 染色原理Masson三色法(根据Masson,1929试剂配制(一 Weigert氏铁苏木素液(见苦味酸——酸性品红法(二丽春红酸性品红液丽春红(Ponceau 2R 0.7g酸性品红(acid fuchsin 0.3g蒸馏水 99ml冰醋酸(glacial acetic acid 1ml(三 1%磷钼酸水溶液磷钼酸(phosphomolybdic acid 1g蒸馏水加至 100ml(四 2%苯胺蓝液苯胺蓝(aniline blue 2g冰醋酸(glacial acetic acid 2ml蒸馏水加至 100ml(五亮绿液亮绿(light green 1g蒸馏水 99ml冰醋酸(glacial acetic acid 1ml操作方法1. 组织固定于Bouin氏液或Zenker氏液,流水冲洗一晚,常规脱水包埋。
2. 切片脱蜡至水。
如用Zenker氏液固定者,应进行除汞处理,其步骤如下:(1 切片脱蜡后于0.5%碘酒精作用10分钟。
(2 稍水洗(3 5%硫代硫酸钠作用5分钟。
(4 流水冲洗10分钟3. Weiger氏铁苏木素染5-10分钟。
4. 流水稍洗。
5. 1%盐酸酒精分化。
6. 流水冲洗数分钟。
7. 丽春红酸性品红液染5-10分钟。
8. 蒸馏水稍冲洗。
9. 1%磷钼酸水溶液处理约5分钟。
10.不用水洗,直接用苯胺蓝液或绿液复染5分钟。
11.1%冰醋酸处理1分钟。
12.95%酒精脱水多次。
13.无水酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封固结果:胶原纤维虽蓝色(用苯胶蓝液复染或绿色(用亮绿复染。
胞质、肌纤维和红细胞红色。
胞核蓝褐色。
注意事项:1.组织用Bouin氏液或Zenker氏液固定为佳。
如已用10%甲酸液固定,切片可在脱蜡至水后.再放入Bouin氏液作用一晚或置37。
C温箱内1-2小时,然后流水冲洗切片至黄色消失再进行染色。
MASSONS三色
胶原纤维- MASSON'S 三色(TRI)目的：用于鉴别胶原纤维和平滑肌肿瘤，肝硬化的胶原纤维增生。
肝肾活检组织的常规染色。
原理：与名称暗示的一样，三种染料分别着染肌肉、胶原纤维、纤维蛋白和红细胞。
三色染色的基本原理是孔隙较小的组织被最小的染料分子着染。
只要大分子的染料能够穿透组织，而损失的总是较小的染料分子。
建议染色时首先染酸性染料。
比布里希猩红能与嗜酸性组织成分结合。
当用磷酸处理时，只有渗透性较小组织成分能保留红色，胶原纤维组织的红色被冲出。
同样原理使胶原纤维与苯胺蓝结合。
固定：首选Bouin's液，10%甲醛。
技术：石蜡切片4μm。
设备：蒸馏水清洗玻璃器皿，染色缸，60°C 烤箱或水浴箱，微波炉。
试剂：Bouin’s 固定液饱和苦味酸1500.0 ml甲醛500.0 ml冰醋酸100.0 ml混合溶解，标签，日期和签名。
保存期2年。
警告：致癌物质，刺激性。
比布里希猩红：比布里希猩红 2.7 gm酸性品红0.3 gm蒸馏水300.0 ml冰醋酸 3.0 ml混合溶解，标签，日期和签名。
保存期6个月。
警告：避免接触和吸入。
Weigert's铁苏木精原液A：苏木精 5.0 gm95% 酒精500.0 ml混合溶解，标签，日期和签名。
保存期1年。
警告：易燃性，避免接触和吸入。
原液B：29%三氯化铁20.0 ml蒸馏水475.0 ml盐酸 5.0 ml混合溶解，标签，日期和签名。
保存期1年。
Weigert's 苏木精工作液溶液A 25.0 ml溶液B 25.0 ml混合溶解，溶液可保留3-4。
磷钼酸/磷钨酸溶液：磷钼酸25.0 gm磷钨酸25.0 gm蒸馏水1000.0 ml混合溶解，标签，日期和签名。
保存期6个月。
警告：避免接触和吸入。
苯胺蓝：苯胺蓝 2.5 gm蒸馏水100.0 ml冰醋酸 1.0 ml混合溶解，标签，日期和签名。
保存期6个月。
警告：避免接触和吸入。
Masson三色染色液染色步骤及注意事项
Masson三色染色液染色步骤及注意事项步骤一：预处理1. 切片：将需要染色的组织标本切成厚度约为5um的切片，将切片均匀地放置在已经预先烘干和标记好的玻片上。
2.固定：用10%中性缓冲福尔马林固定切片，固定时间约为24小时。
步骤二：染色1. 染色剂的准备：将Masson三色染色液购买回来后，根据品牌推荐比例稀释至适当浓度。
不同品牌染色液稀释比例可能有所不同，因此以具体品牌的说明为准。
2.染色操作：(1)将切片放入染色盒中，并将染色盒放入水浴中加热，温度为60-70摄氏度，时间为20-30分钟。
(2)将加热后的染色盒取出，用水冲洗2-3分钟，直至明显的污染物被冲走。
(3)将切片置于70%酒精中，时间为5分钟。
(4)在20%盐酸酒精中浸泡1-2秒钟，然后立即将切片漂洗至酸性的第一盐酸酒精。
(5)在酸性的第一盐酸酒精中浸泡30秒至1分钟，然后漂洗至酸性的第二盐酸酒精中。
(6)在酸性的第二盐酸酒精中浸泡30秒至1分钟，然后漂洗至蒸馏水中。
(7)转移到可溶性亮蓝GR中染色5分钟。
(8)快速漂洗后，放入蒸馏水中清洗1-2分钟。
(9)再次转移到1%醋酸中染色1分钟。
(10)最后，在6%石蜡溶液中浸泡5-10分钟。
步骤三：封片1.脱水：将切片放入95%乙醇中，时间为1-2分钟，然后放入绝对乙醇脱水2-3分钟。
2.渗透：将切片放入二氯甲烷中，时间为5分钟，再在房温下放置3-5分钟以充分渗透。
3. 封片：将切片放入500-1000ml锡兰红封片剂中，时间为1-2分钟，然后将切片转到盖玻片上，将封片剂挤满，盖上玻片，压平后放在60摄氏度的烘箱中加热2-3小时。
注意事项：1.操作中应注意个人防护，佩戴手套和口罩，避免接触有害物质。
2.染色过程中要严格控制温度和时间，避免染色过程中出现偏差。
3.在脱水和封片过程中要注意将切片完全浸透，防止切片变形或脱落。
4.染色溶液和液体处理过程中，应注意防止溅溢和污染，保持操作环境清洁。
Masson三色染色液(固绿法)
Masson 三色染色液(固绿法)简介：结缔组织狭义上是指其含有的三种纤维：胶原纤维、网状纤维、弹力纤维，而胶原纤维(collagen fiber)是分布最广、含量最多的一种纤维。
Masson 三色染色又称马松染色，是结缔组织染色中最经典的一种方法，是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。
所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。
Leagene Masson 三色染色的特点：①染色稳定；②分化时间短，1～2s ；③色彩清晰鲜艳；④适用范围广，适宜于组织的石蜡切片、冰冻切片等染色；⑤所染切片保存时间长且不易褪色。
组成：操作步骤(仅供参考)：1、切片常规脱蜡至水，用配制好的Weigert 铁苏木素染色。
2、用酸性乙醇分化液分化，水洗。
3、用Masson 蓝化液返蓝，水洗。
4、蒸馏水洗。
5、丽春红品红染色液染色。
6、在上述操作过程中按蒸馏水:弱酸溶液=2:1比例配制弱酸工作液，用弱酸工作液洗。
7、磷钼酸溶液洗。
8、用配制好的弱酸工作液洗。
9、直接入固绿染色液中染色。
编号 名称DC00347×50mlDC00347×100ml Storage试剂(A) :Weigert 铁苏木素染色液A1:Weigert 染液A 25ml 50ml RT 避光 A2: Weigert 染液B25ml50mlRT试剂(B): 酸性乙醇分化液 50ml 100ml RT 试剂(C): Masson 蓝化液 50ml 100ml RT 试剂(D): 丽春红品红染色液 50ml 100ml RT 避光 试剂(E): 弱酸溶液 50ml 100ml RT 试剂(F): 磷钼酸溶液 50ml 100ml RT 避光 试剂(G): 固绿染色液 50ml100ml RT 避光使用说明书 1份10、用配制好的弱酸工作液洗。
11、95%乙醇快速脱水。
无水乙醇脱水3次，每次5～10s。
12、二甲苯透明3次，每次1～2min。
masson三色染色 原理
masson三色染色原理
Masson三色染色是一种常用于组织学研究中的染色方法，主要用于显示胶原纤维和细胞核等结构。
这种染色方法包括酸性橙G、酸性品红和天蓝三种染色剂，通过它们的染色特性可以清晰显示组织中的不同结构。
首先是酸性橙G染色，它主要用于染色胶原纤维和肌纤维。
酸性橙G是一种酸性染料，能够与碱性结构如胶原纤维反应并染色为橙色。
胶原纤维在组织中起着支持和结构维持的作用，通过酸性橙G染色可以清晰显示出它们的分布和形态。
其次是酸性品红染色，主要用于染色胶原纤维、细胞核和胶原蛋白。
酸性品红是一种酸性染料，能够与细胞核中的核蛋白和胶原蛋白等结构反应并染色为红色。
细胞核是细胞的核心器官，通过酸性品红染色可以清晰显示细胞核的形态和分布。
最后是天蓝染色，主要用于染色细胞核和细胞浆。
天蓝是一种碱性染料，能够与酸性结构如细胞核和细胞浆反应并染色为蓝色。
细胞浆是细胞内除细胞核以外的部分，通过天蓝染色可以清晰显示细胞核和细胞浆的对比。
综合这三种染色方法，Masson三色染色可以全面展示组织中的胶原纤维、细胞核和细胞浆等结构，为组织学研究提供了重要的信息。
通过合理使用这三种染色剂，可以细致地观察细胞和组织的结构，为研究细胞和组织的形态和功能提供有力的支持。
Masson三色染色方法的原理清晰明了，操作简便，是组织学研究中常用的染色方法之一。
介绍一种Masson三色的微波改良染色法
波技术 ， 染色过 程 中可 以使 固定 液 、 染 接 影 响 染 乜 效 果 。
料 分 子 扩 散 更 快 ． 定 效 果 更 好 ． 色 固 着
实用 医学杂志 ２ １ ０ ０年第 ２ ６卷第 ｌ Ｏ期
ｌ ６５ ８
介 绍 一种 Ｍａ ｓ ｎ三 色 的微 波 改 良染 色 法 ｓｏ
林云恩 许ｎ二 色 染 色 法 仍 是 胶 力 ， 到 了满 意 的效果 ， Ｍ ｓｏ 三 收 现介绍 如下 。 １ 材料与方法 原纤维 、 纤维 染色 的主要 方 法之 一 ， 肌 能 同 时 显 示 胶 原 纤 维 和 肌 纤 维 ．组 织 １１ 材料 ．
胞 核蓝 褐 色
３ 讨 论
图 ４ 肺泡间质增 生的胶原纤 维蓝色 ， 纤 维 、 细胞红色 ， 肌 红 细
异 。Ｍａｓｎ三 色染 色法 中丽春 红 ２ 有所不 同： ｓ ｏ Ｒ一 磷钼酸作用于胶 原纤维 ， 磷钨
微 波 是 一 种 高 频 电磁 波 ，用 于 病 酸 性 品 红 液 不 仅 对 肌 纤 维 等 具 有 染 色 酸作 用 于 纤 维 胶 质 、肌胶 质 等 ，两 者合 理 检 查 中 取 得 了 很 好 的 效 果 ．微 波 抗 能力 ， 时能将 胶原纤 维染 成 红色 ， 同 常 用 ， 促进 组 织 有 选 择 性地 着色 ： 原纤 可 胶 用 磷 铡 酸 分 化 。 以 除 去 胶 原 纤 维 所 染 维 和苯 胺 蓝 结合 更 牢 固 ，肌 纤 维着 色更 原 修 复 技 术 是 一 种 先 进 的 技 术 ， 已 广 泛 用 于 免 疫 病 理 研 究 工 作 中 ，但 用 于 红 色 ， 分 化 的 过 程 中 ， 纤 维 等 也 不 鲜艳 ． 在 肌 还能起到减少背景和核 的染色 ， 使 组 织 化 学 染 色 较 少 。本 方 法 融 入 微 同 程 度 被 褪 色 ， 个 切 片 呈 淡 红 色 ， 背景 更 清 晰 由于 常 规 Ｍａｓｎ三 色染 色 整 直 ｓ ｏ
masson三色染色原理
masson三色染色原理
马森三色染色法，又称孔雀石绿染色，是一种革命性的染色技术，以伊利诺伊大学教授罗伯特·马森为主要发展者。
这种三色染色法是基于撒尔的三色原理的实现，利用MesostomesAntltosis、RieshellAring和Fragilin三个不同的染料实现了三色染色，解决了双色染色技术无法实现更多颜色染色的瓶颈。
马森三色染色法有着多种优势。
首先，它可以染色出各种不同颜色，比传统的双色染色技术能够实现的颜色多出许多，使色彩更加丰富。
其次，该技术无毒、安全，一次染色可以固定在衣物表面，可以长期起到防污作用，节省工序时间，更能增强穿衣的舒适感。
同时，它比传统的染色技术能够更有效地固定生物组织内的蛋白质，减少破坏细胞结构的同时能够有效收集信息，对后续的研究更加方便。
随着计算机技术和大数据的不断发展，马森三色染色法也得到了更好的应用。
一是在植物分子生物学研究中，通过染色能够更清楚地看到植物的细胞结构，加快植物生物学的发展；二是在药物分子生物学研究中，通过染色可以获取更多的生物信息，有助于药物研究；三是在病毒学研究中，通过染色可以更准确地识别病毒细胞，进一步探究病毒潜在的危害与解药治疗方案。
马森三色染色法无疑使生物学研究更加精准、更加安全，该技术的广泛应用为病毒学、药物学研究提供了有力的支撑。
未来，该技术将积极发挥其在各类研究领域的重要作用，为解决人类各种挑战提供更大的助力。
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Masson三色染色液说明书
【产品名称】
Masson三色染色液
【包装规格】
货号：DC0032
套组包装规格：8×20ml/盒、8×100ml/盒、8×250ml/盒
【预期用途】
主要用于组织中结缔组织、肌肉和胶原纤维的组织细胞学染色。
【检验原理】
Masson三色染色又称马松染色，是胶原纤维染色权威而经典的技术方法，所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。
该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关：分子的大小由分子量来体现，小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织；而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织，苯胺蓝的分子量很大，染色后肌纤维呈红色，胶原纤维呈蓝色，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
【主要组成成分】
试剂组成主要成分
1、Weigert铁苏木素A液苏木素
2、Weigert铁苏木素B液三氯化铁
3、酸性乙醇分化液乙醇
4、蓝化液碳酸盐
5、丽春红品红染色液丽春红、品红
6、乙酸溶液乙酸
7、磷钼酸溶液磷钼酸
8、苯胺蓝染色液苯胺蓝
【储存条件及有效期】
5℃～35℃保存，原包装未开封染色液的有效期为l8个月，在有效期内的已开封染色液建议在开封后6个月内使用完，每次用后应及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。
【样本要求】
组织片充分固定和脱蜡。
【检验方法】
1、组织固定于Bouin氏固定液(另购)或Zenker氏固定液(另购)或10%中性福尔马林固定液(另购)等，流水冲洗，常规脱水包埋；
2、切片常规脱蜡至水；
3、取适量的Weigert铁苏木素A液和Weigert铁苏木素B液等量混合,即为Weigert铁苏木素染色液，用Weigert铁苏木素染色液染色，流水稍洗；
4、酸性乙醇分化液分化数秒，流水冲洗数分钟；
5、蓝化液返蓝数秒，流水冲洗数分钟；
6、丽春红品红染色液染色数分钟，流水稍冲洗；
7、将蒸馏水:乙酸溶液按一定的比例配制乙酸工作液，用乙酸工作液洗切片；
8、磷钼酸溶液处理后，倾去玻片上磷钼酸溶液(不用水洗)；
9、苯胺蓝染色液复染，倾去玻片上染色液(不用水洗)；
10、用乙酸工作液处理切片，至切片无蓝色脱出(必要时镜下控制)；
11、95%乙醇迅速脱水，无水乙醇脱水数次后，二甲苯透明，中性树胶封固。
【检验结果的解释】
胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色，肌纤维、纤维素和红细胞呈红色，细胞核呈蓝黑色。
【检验方法的局限性】
仅限于病理组织内容物染色观察。
【注意事项】
1、酸性乙醇分化液分化时间应根据切片厚薄、组织的类别和新旧而定。
2、如蓝化液使用量较大，可自行配制Scott促蓝液或0.1～1%碳酸锂水溶液予以替代。
3、磷钼酸处理时最好在镜下控制，分化到胶原纤维呈淡红色、纤维呈红色即可，分化时间根据染色深浅而定。
4、部分组织脱水时容易造成脱色过度，应注意肉眼控制。
5、本产品仅用于体外诊断，应由专业人士使用及进行结果的判读。
6、使用前应详细阅读说明书，并做好个人卫生防护，在有效期内使用，生产日期、生产批号和失效日期见包装。
7、用后应按医院或环保部门要求处置废弃物。
【基本信息】
备案人/生产企业名称：安徽雷根生物技术有限公司
住所：淮北凤凰山经济开发区凤冠路三期标准化厂房三号厂房。