masson三色法染色
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Masson复合染色液的配制:
酸性复红1 g
丽春红2 g
橘黄G 2 g
0.25%醋酸300 ml
混匀,过滤后备用。
亮绿染色液的配制:
亮绿干粉0.1 g
0.2%醋酸100 ml
充分混匀,过滤后备用。
Masson染色
(1)常规脱蜡至水:二甲苯Ⅰ10 min→二甲苯Ⅱ10 min→100%酒精Ⅰ5 min→100%酒精Ⅱ5 min→95%酒精3 min→90%酒精3 min→80%酒精3 min→70%酒精3 min→蒸馏水1 min
(2)Masson染色:Masson复合液5 min→自来水过洗2次→0.2%醋酸Ⅰ1 min→0.2%醋酸Ⅱ1 min→自来水过洗1次→1%磷钨酸6 min→自来水过洗1次→亮绿15min→自来水过洗2次→0.2%醋酸Ⅰ1 min→0.2%醋酸Ⅱ1 min→自来水过洗1次
(3)常规脱水透明:70%酒精30 s→80%酒精30 s→90%酒精30 s→95%酒精30 s→100%酒精Ⅰ5 min →100%酒精Ⅱ5 min→二甲苯Ⅰ5 min→二甲苯Ⅱ10 min→中性树胶封片
至于操作要点的话觉得就是在masson复合液和亮绿的染色时间得摸索一下,还有就是70,80酒精时间尽量短,脱色很厉害,不过要是实在脱得严重的话,还可以倒回来重新染色
附图一张,心肌梗死masson染色,肌纤维红色,胶原绿色,红细胞橘黄色
高倍镜下
•脱水
4%多聚甲醛中固定,常规石蜡包埋切片;
切片脱蜡至水后入重铬酸钾—醋酸液或3%升汞处理1小时;
水洗后染Regaud氏苏木素10分钟;
自来水充分洗后,用2%盐酸酒精分化;
流水冲洗到蓝黑色;
1%丽春红酸性品红液中染5分钟;
蒸馏水洗;
1%磷钼酸水溶液媒染5分钟;
不经水洗入2%淡绿液3分钟;
1%醋酸液分色1分钟;
脱水、透明、中性树胶封固。
结果:细胞核染黑蓝色,胶原纤维呈绿色,神经胶质纤维、肌纤维、红细胞呈红色。