masson三色法染色

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Masson复合染色液的配制:

酸性复红1 g

丽春红2 g

橘黄G 2 g

0.25%醋酸300 ml

混匀,过滤后备用。

亮绿染色液的配制:

亮绿干粉0.1 g

0.2%醋酸100 ml

充分混匀,过滤后备用。

Masson染色

(1)常规脱蜡至水:二甲苯Ⅰ10 min→二甲苯Ⅱ10 min→100%酒精Ⅰ5 min→100%酒精Ⅱ5 min→95%酒精3 min→90%酒精3 min→80%酒精3 min→70%酒精3 min→蒸馏水1 min

(2)Masson染色:Masson复合液5 min→自来水过洗2次→0.2%醋酸Ⅰ1 min→0.2%醋酸Ⅱ1 min→自来水过洗1次→1%磷钨酸6 min→自来水过洗1次→亮绿15min→自来水过洗2次→0.2%醋酸Ⅰ1 min→0.2%醋酸Ⅱ1 min→自来水过洗1次

(3)常规脱水透明:70%酒精30 s→80%酒精30 s→90%酒精30 s→95%酒精30 s→100%酒精Ⅰ5 min →100%酒精Ⅱ5 min→二甲苯Ⅰ5 min→二甲苯Ⅱ10 min→中性树胶封片

至于操作要点的话觉得就是在masson复合液和亮绿的染色时间得摸索一下,还有就是70,80酒精时间尽量短,脱色很厉害,不过要是实在脱得严重的话,还可以倒回来重新染色

附图一张,心肌梗死masson染色,肌纤维红色,胶原绿色,红细胞橘黄色

高倍镜下

•脱水

4%多聚甲醛中固定,常规石蜡包埋切片;

切片脱蜡至水后入重铬酸钾—醋酸液或3%升汞处理1小时;

水洗后染Regaud氏苏木素10分钟;

自来水充分洗后,用2%盐酸酒精分化;

流水冲洗到蓝黑色;

1%丽春红酸性品红液中染5分钟;

蒸馏水洗;

1%磷钼酸水溶液媒染5分钟;

不经水洗入2%淡绿液3分钟;

1%醋酸液分色1分钟;

脱水、透明、中性树胶封固。

结果:细胞核染黑蓝色,胶原纤维呈绿色,神经胶质纤维、肌纤维、红细胞呈红色。

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