Masson三色染色液G1006
Masson三色染色试剂盒说明书
Masson三色染色试剂盒说明书Masson 三色染色试剂盒说明书(南京森贝伽生物科技有限公司)【产品介绍】Masson 染液是显示组织中纤维染色的主要方法之一,是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。
该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关。
分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织,而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。
淡绿分子量最大。
因此Masson 染色肌纤维红色,胶原纤维绿色,主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
【用途】主要用于胶原纤维染色。
【产品特点】①染色稳定;②分化时间短,1~2 分钟;③色彩清晰鲜艳;④适用范围广,适宜于组织的石蜡切片、冰冻切片等染色;⑤所染切片保存时间长且不易褪色。
固定:甲醛升汞或甲醛盐溶液。
切片:所有类型。
【产品组成】编号名SBJ0126(7×50ml)SBJ0126(7×100ml)SBJ0126(7×500ml)Storage试剂(A)A1:苏木素染色液25ml 100ml 500ml RTA2:三氯化铁水溶液25ml 100ml 500ml RT 临用时取A1、A2 等量混合,成为试剂(A),不可预先配制后放置,因染色液的色素根与铁会化合,形成不容性沉淀,等量混合后,一般24h 后失去染色力。
试剂(B): 盐酸乙醇分化液50ml 100ml 500ml RT 试剂(C): 氨水水溶液50ml 100ml 500ml RT 试剂(D): 丽春红酸性品红染色液50ml 100ml 500ml RT 试剂(E): 乙酸水溶液50ml 100ml 500ml RT 试剂(F): 磷钼酸水溶液50ml 100ml 500ml RT 试剂(G): 苯胺蓝染色液50ml 100ml 500ml RT 【参考操作步骤】1、切片脱蜡至水。
2、试剂(A)染色5min~10min。
3、试剂(B)分化、水洗,试剂(C)返蓝、水洗。
masson三色染色法
Masson三色染色液说明书【产品名称】Masson三色染色液【包装规格】货号:DC0032套组包装规格:8×20ml/盒、8×100ml/盒、8×250ml/盒【预期用途】主要用于组织中结缔组织、肌肉和胶原纤维的组织细胞学染色。
【检验原理】Masson三色染色又称马松染色,是胶原纤维染色权威而经典的技术方法,所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。
该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关:分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织;而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织,苯胺蓝的分子量很大,染色后肌纤维呈红色,胶原纤维呈蓝色,主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
【主要组成成分】试剂组成主要成分1、Weigert铁苏木素A液苏木素2、Weigert铁苏木素B液三氯化铁3、酸性乙醇分化液乙醇4、蓝化液碳酸盐5、丽春红品红染色液丽春红、品红6、乙酸溶液乙酸7、磷钼酸溶液磷钼酸8、苯胺蓝染色液苯胺蓝【储存条件及有效期】5℃~35℃保存,原包装未开封染色液的有效期为l8个月,在有效期内的已开封染色液建议在开封后6个月内使用完,每次用后应及时拧紧瓶盖,以免挥发或变质。
【样本要求】组织片充分固定和脱蜡。
【检验方法】1、组织固定于Bouin氏固定液(另购)或Zenker氏固定液(另购)或10%中性福尔马林固定液(另购)等,流水冲洗,常规脱水包埋;2、切片常规脱蜡至水;3、取适量的Weigert铁苏木素A液和Weigert铁苏木素B液等量混合,即为Weigert铁苏木素染色液,用Weigert铁苏木素染色液染色,流水稍洗;4、酸性乙醇分化液分化数秒,流水冲洗数分钟;5、蓝化液返蓝数秒,流水冲洗数分钟;6、丽春红品红染色液染色数分钟,流水稍冲洗;7、将蒸馏水:乙酸溶液按一定的比例配制乙酸工作液,用乙酸工作液洗切片;8、磷钼酸溶液处理后,倾去玻片上磷钼酸溶液(不用水洗);9、苯胺蓝染色液复染,倾去玻片上染色液(不用水洗);10、用乙酸工作液处理切片,至切片无蓝色脱出(必要时镜下控制);11、95%乙醇迅速脱水,无水乙醇脱水数次后,二甲苯透明,中性树胶封固。
Masson三色法
Masson三色法(根据Masson,1929)一、试剂配制(一)Weigert氏铁苏木素液(可用Herris苏木素代替)甲液:苏木素1g无水酒精(或95%酒精)100ml乙液:29%三氯化铁水溶液4ml蒸馏水95ml (30%三氯化铁溶液则为100ml)盐酸1ml临用时,取甲、乙液等量混合即可应用。
混合时应将乙液加人甲液内,染液呈紫黑色。
铁苏木素不能象明矾苏木素一样配制后可放置贮存备用,因铁与染色剂的色素根会化合生成不溶性沉淀,所以铁作媒染液时,必须与染液分别配制和分别保存,染片时临时混合应用。
由于这是一种铁苏木素,它将胞核染成黑色。
能抵抗在对比染色液中所含分色剂的脱色作用,且不会被光线退色,因此比钾矾苏木素染色较为持久。
(二)丽春红酸性品红液丽春红(Ponceau 2R)0.7g酸性品红(acid fuchsin)0.3g蒸馏水99ml冰醋酸(glacial acetic acid) 1ml(三)1%磷钼酸水溶液磷钼酸(phosphomolybdic acid)1g蒸馏水加至100ml(四)2%苯胺蓝液苯胺蓝(aniline blue)2g冰醋酸(glacial acetic acid )2ml蒸馏水加至100ml(五)亮绿液亮绿(light green)1g蒸馏水99ml冰醋酸(glacial acetic acid )1ml(六)Bouin氏液苦味酸饱和液(1.22%)75ml福尔马林25ml冰醋酸5ml此液一般在临用时配制,对皮肤及肌腱有软化作用。
二、操作方法1.组织固定于Bouin氏液,流水冲洗一晚,常规脱水包埋。
2.切片脱蜡至水:(1)二甲苯中脱蜡10分钟×3次,用吸水纸吸干液体;(2)100%乙醇5分钟×2次,用吸水纸吸干液体;(3)95%乙醇5分钟×2次,用吸水纸吸干液体;;(4)流水2分钟,用吸水纸吸干水分;3.Weiger氏铁苏木素染5-10分钟。
masson煤染液成分
masson煤染液成分
Masson's Trichrome染液是一种用于组织切片染色的方法,常用于研究胶原纤维和肌纤维的分布情况。
它由以下几个成分组成:
1. 胶原纤维染色剂(Collagen Stain):通常为酸性染料,如苏木精(Aniline Blue)或蓝莓素(Methyl Blue)。
这些染料可以与胶原纤维结合,使其呈现蓝色或绿色。
2. 肌纤维染色剂(Muscle Stain):通常为碱性染料,如酸性红(Acid Fuchsin)或伊红(Ponceau Xylidine)。
这些染料可以与肌纤维结合,使其呈现红色。
3. 细胞核染色剂(Nuclei Stain):通常为酸性染料,如快速石蕊红(Fast Red Violet LB),可以染色细胞核呈现红色。
4. 过渡液(Transition Solution):用于将组织从胶原纤维染色转移到肌纤维染色,以及从肌纤维染色转移到细胞核染色。
5. 酸性溶剂和脱水剂(Acidic Solvent and Dehydrating Agent):用于去除多余的染料,并使切片逐渐脱水。
这些成分的比例和具体配方可能会因实验目的和个人喜好而有所不
同。
masson三色法染色
Masson复合染色液的配制:酸性复红1 g丽春红2 g橘黄G 2 g0.25%醋酸300 ml混匀,过滤后备用。
亮绿染色液的配制:亮绿干粉0.1 g0.2%醋酸100 ml充分混匀,过滤后备用。
Masson染色(1)常规脱蜡至水:二甲苯Ⅰ10 min→二甲苯Ⅱ10 min→100%酒精Ⅰ5 min→100%酒精Ⅱ5 min→95%酒精3 min→90%酒精3 min→80%酒精3 min→70%酒精3 min→蒸馏水1 min(2)Masson染色:Masson复合液5 min→自来水过洗2次→0.2%醋酸Ⅰ1 min→0.2%醋酸Ⅱ1 min→自来水过洗1次→1%磷钨酸6 min→自来水过洗1次→亮绿15min→自来水过洗2次→0.2%醋酸Ⅰ1 min→0.2%醋酸Ⅱ1 min→自来水过洗1次(3)常规脱水透明:70%酒精30 s→80%酒精30 s→90%酒精30 s→95%酒精30 s→100%酒精Ⅰ5 min →100%酒精Ⅱ5 min→二甲苯Ⅰ5 min→二甲苯Ⅱ10 min→中性树胶封片至于操作要点的话觉得就是在masson复合液和亮绿的染色时间得摸索一下,还有就是70,80酒精时间尽量短,脱色很厉害,不过要是实在脱得严重的话,还可以倒回来重新染色附图一张,心肌梗死masson染色,肌纤维红色,胶原绿色,红细胞橘黄色高倍镜下•脱水4%多聚甲醛中固定,常规石蜡包埋切片;切片脱蜡至水后入重铬酸钾—醋酸液或3%升汞处理1小时;水洗后染Regaud氏苏木素10分钟;自来水充分洗后,用2%盐酸酒精分化;流水冲洗到蓝黑色;1%丽春红酸性品红液中染5分钟;蒸馏水洗;1%磷钼酸水溶液媒染5分钟;不经水洗入2%淡绿液3分钟;1%醋酸液分色1分钟;脱水、透明、中性树胶封固。
结果:细胞核染黑蓝色,胶原纤维呈绿色,神经胶质纤维、肌纤维、红细胞呈红色。
Masson三色法
Masson三色法(根据Masson,1929)一、试剂配制(一)Weigert氏铁苏木素液(可用Herris苏木素代替)甲液:苏木素1g无水酒精(或95%酒精)100ml乙液:29%三氯化铁水溶液4ml蒸馏水95ml (30%三氯化铁溶液则为100ml)盐酸1ml临用时,取甲、乙液等量混合即可应用。
混合时应将乙液加人甲液内,染液呈紫黑色。
铁苏木素不能象明矾苏木素一样配制后可放置贮存备用,因铁与染色剂的色素根会化合生成不溶性沉淀,所以铁作媒染液时,必须与染液分别配制和分别保存,染片时临时混合应用。
由于这是一种铁苏木素,它将胞核染成黑色。
能抵抗在对比染色液中所含分色剂的脱色作用,且不会被光线退色,因此比钾矾苏木素染色较为持久。
(二)丽春红酸性品红液丽春红(Ponceau 2R)0.7g酸性品红(acid fuchsin)0.3g蒸馏水99ml冰醋酸(glacial acetic acid) 1ml(三)1%磷钼酸水溶液磷钼酸(phosphomolybdic acid)1g蒸馏水加至100ml(四)2%苯胺蓝液苯胺蓝(aniline blue)2g冰醋酸(glacial acetic acid )2ml蒸馏水加至100ml(五)亮绿液亮绿(light green)1g蒸馏水99ml冰醋酸(glacial acetic acid )1ml(六)Bouin氏液苦味酸饱和液(1.22%)75ml福尔马林25ml冰醋酸5ml此液一般在临用时配制,对皮肤及肌腱有软化作用。
二、操作方法1.组织固定于Bouin氏液,流水冲洗一晚,常规脱水包埋。
2.切片脱蜡至水:(1)二甲苯中脱蜡10分钟×3次,用吸水纸吸干液体;(2)100%乙醇5分钟×2次,用吸水纸吸干液体;(3)95%乙醇5分钟×2次,用吸水纸吸干液体;;(4)流水2分钟,用吸水纸吸干水分;3.Weiger氏铁苏木素染5-10分钟。
masson三色染色 原理
masson三色染色原理马森三色染色的原理马森三色染色是一种组织学染色技术,用于区分神经组织的不同成分。
它基于通过磷钨酸-血红素溶液和靛胭脂溶液的顺序染色,这赋予神经元不同的颜色。
磷钨酸-血红素溶液的染色原理磷钨酸-血红素溶液是一种呈酸性的溶液,含有磷钨酸和血红素。
磷钨酸是一种多价阴离子,对组织中的碱性成分,如细胞核和细胞质,具有亲和力。
血红素是一种铁卟啉分子,与氧气结合形成稳定的络合物。
当磷钨酸-血红素溶液应用于组织时,磷钨酸会与细胞核和细胞质中的碱性成分结合,形成不溶性沉淀。
血红素与氧气结合,形成棕红色的血红素氧络合物,沉积于这些碱性成分上。
因此,细胞核和细胞质被染成深棕色。
靛胭脂溶液的染色原理靛胭脂是一种阳离子染料,对组织中的酸性成分,如细胞外基质和神经胶质纤维,具有亲和力。
当靛胭脂溶液应用于组织时,它会与这些酸性成分结合,形成不溶性蓝紫色沉淀。
神经胶质纤维是神经胶质细胞产生的长而细的纤维,它们包裹着神经元并提供支持。
通过与靛胭脂结合,这些纤维被染成蓝色。
神经元的染色神经元的细胞体主要由细胞核和细胞质组成,它们富含碱性成分。
因此,它们在磷钨酸-血红素溶液中被染成深棕色。
神经元的轴突和树突是神经元的细胞突起,它们由神经胶质细胞包裹。
神经胶质细胞产生的神经胶质纤维含有酸性成分,因此它们在靛胭脂溶液中被染成蓝色。
通过磷钨酸-血红素溶液和靛胭脂溶液的顺序染色,马森三色染色可以区分神经元的不同成分:细胞核和细胞质呈深棕色,神经胶质纤维呈蓝色。
这种差异允许在显微镜下对神经组织进行详细的观察和分析。
马松三色染色原理masson
备注
1 Bouin氏液是常用的混合固定液
配方: 苦味酸饱和液(1.22%)75ml 制,对皮肤及肌腱有软化作用。
福尔马林25ml
冰醋酸5ml
此液一般在临床用时配
2 苦味酸-酸性品红法
一Weigert氏铁苏木素液
甲液 苏木素
1g
无水酒精(或 95%酒精) 100ml
乙液 29%三氯化铁水溶液
4ml
蒸馏水
二 Van Gieson氏染液
A液:1%酸性品红水溶液 B液:苦味酸饱和水溶液(约1.2%) A、 B两夜分瓶盛放。临用前取A液1份,B液9份混合后使用 操作方法 1 组织固定于10%甲醛液,常规脱水包埋 2 切片脱蜡至水 3 用Weigert氏铁苏木素染液5~10分钟 4 流水稍洗 5 1%盐酸酒精迅速分化 6 流水冲洗数分钟 7 用Van Gieson氏染液染1~2分钟 8 倾去染液,直接用95%酒精分化和脱水(可放入温箱烤干后,直接透明封片) 9 无水酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封固 结果:肌纤维,胞质及红细胞黄色,胞核蓝褐色
95ml 用时,取甲、乙液等量混合即可应用。混合时应将乙液加人甲液内,染液呈紫黑色。铁苏木素不能象明矾苏 木素一样配制后可放置贮存备用,因铁与染色剂的色素根会化合生成不溶性沉淀,所以铁作媒染液时,必须与染 液分别配制和分别保存,染片时临时混合应用。
由于这是一种铁苏木素,它将胞核染成黑色。能抵抗在对比染色液中所含分色剂的脱色作用,且不会被光线退 色,因此比钾矾苏木素染色较为持久。
临用前取a液1份b液9份混合后使用操作方法1组织固定于10甲醛液常规脱水包埋2切片脱蜡至水3用weigert氏铁苏木素染液510分钟4流水稍洗51盐酸酒精迅速分化6流水冲洗数分钟7用vangieson氏染液染12分钟8倾去染液直接用95酒精分化和脱水可放入温箱烤干后直接透明封片9无水酒精脱水二甲苯透明中性树胶封固结果肌纤维胞质及红细胞黄色胞核蓝褐色
马松三色染色原理masson.
马松三色染色原理masson.Masson染色(2010-09-02 14:43:20转载标签:杂谈分类:实验日志masson 染色原理Masson三色法(根据Masson,1929试剂配制(一Weigert氏铁苏木素液(见苦味酸——酸性品红法(二丽春红酸性品红液丽春红(Ponceau 2R 0.7g酸性品红(acid fuchsin 0.3g蒸馏水 99ml冰醋酸(glacial acetic acid 1ml(三 1%磷钼酸水溶液磷钼酸(phosphomolybdic acid 1g蒸馏水加至 100ml(四 2%苯胺蓝液苯胺蓝(aniline blue 2g冰醋酸(glacial acetic acid 2ml蒸馏水加至 100ml(五亮绿液亮绿(light green 1g蒸馏水 99ml冰醋酸(glacial acetic acid 1ml操作方法1. 组织固定于Bouin氏液或Zenker氏液,流水冲洗一晚,常规脱水包埋。
2. 切片脱蜡至水。
如用Zenker氏液固定者,应进行除汞处理,其步骤如下:(1 切片脱蜡后于0.5%碘酒精作用10分钟。
(2 稍水洗(3 5%硫代硫酸钠作用5分钟。
(4 流水冲洗10分钟3. Weiger氏铁苏木素染5-10分钟。
4. 流水稍洗。
5. 1%盐酸酒精分化。
6. 流水冲洗数分钟。
7. 丽春红酸性品红液染5-10分钟。
8. 蒸馏水稍冲洗。
9. 1%磷钼酸水溶液处理约5分钟。
10.不用水洗,直接用苯胺蓝液或绿液复染5分钟。
11.1%冰醋酸处理1分钟。
12.95%酒精脱水多次。
13.无水酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封固结果:胶原纤维虽蓝色(用苯胶蓝液复染或绿色(用亮绿复染。
胞质、肌纤维和红细胞红色。
胞核蓝褐色。
注意事项:1.组织用Bouin氏液或Zenker氏液固定为佳。
如已用10%甲酸液固定,切片可在脱蜡至水后.再放入Bouin氏液作用一晚或置37。
C温箱内1-2小时,然后流水冲洗切片至黄色消失再进行染色。
马松三色染色原理masson.
Masson染色(2010-09-02 14:43:20转载标签:杂谈分类:实验日志masson 染色原理Masson三色法(根据Masson,1929试剂配制(一 Weigert氏铁苏木素液(见苦味酸——酸性品红法(二丽春红酸性品红液丽春红(Ponceau 2R 0.7g酸性品红(acid fuchsin 0.3g蒸馏水 99ml冰醋酸(glacial acetic acid 1ml(三 1%磷钼酸水溶液磷钼酸(phosphomolybdic acid 1g蒸馏水加至 100ml(四 2%苯胺蓝液苯胺蓝(aniline blue 2g冰醋酸(glacial acetic acid 2ml蒸馏水加至 100ml(五亮绿液亮绿(light green 1g蒸馏水 99ml冰醋酸(glacial acetic acid 1ml操作方法1. 组织固定于Bouin氏液或Zenker氏液,流水冲洗一晚,常规脱水包埋。
2. 切片脱蜡至水。
如用Zenker氏液固定者,应进行除汞处理,其步骤如下:(1 切片脱蜡后于0.5%碘酒精作用10分钟。
(2 稍水洗(3 5%硫代硫酸钠作用5分钟。
(4 流水冲洗10分钟3. Weiger氏铁苏木素染5-10分钟。
4. 流水稍洗。
5. 1%盐酸酒精分化。
6. 流水冲洗数分钟。
7. 丽春红酸性品红液染5-10分钟。
8. 蒸馏水稍冲洗。
9. 1%磷钼酸水溶液处理约5分钟。
10.不用水洗,直接用苯胺蓝液或绿液复染5分钟。
11.1%冰醋酸处理1分钟。
12.95%酒精脱水多次。
13.无水酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封固结果:胶原纤维虽蓝色(用苯胶蓝液复染或绿色(用亮绿复染。
胞质、肌纤维和红细胞红色。
胞核蓝褐色。
注意事项:1.组织用Bouin氏液或Zenker氏液固定为佳。
如已用10%甲酸液固定,切片可在脱蜡至水后.再放入Bouin氏液作用一晚或置37。
C温箱内1-2小时,然后流水冲洗切片至黄色消失再进行染色。
MASSONS三色
胶原纤维- MASSON'S 三色(TRI)目的:用于鉴别胶原纤维和平滑肌肿瘤,肝硬化的胶原纤维增生。
肝肾活检组织的常规染色。
原理:与名称暗示的一样,三种染料分别着染肌肉、胶原纤维、纤维蛋白和红细胞。
三色染色的基本原理是孔隙较小的组织被最小的染料分子着染。
只要大分子的染料能够穿透组织,而损失的总是较小的染料分子。
建议染色时首先染酸性染料。
比布里希猩红能与嗜酸性组织成分结合。
当用磷酸处理时,只有渗透性较小组织成分能保留红色,胶原纤维组织的红色被冲出。
同样原理使胶原纤维与苯胺蓝结合。
固定:首选Bouin's液,10%甲醛。
技术:石蜡切片4μm。
设备:蒸馏水清洗玻璃器皿,染色缸,60°C 烤箱或水浴箱,微波炉。
试剂:Bouin’s 固定液饱和苦味酸1500.0 ml甲醛500.0 ml冰醋酸100.0 ml混合溶解,标签,日期和签名。
保存期2年。
警告:致癌物质,刺激性。
比布里希猩红:比布里希猩红 2.7 gm酸性品红0.3 gm蒸馏水300.0 ml冰醋酸 3.0 ml混合溶解,标签,日期和签名。
保存期6个月。
警告:避免接触和吸入。
Weigert's铁苏木精原液A:苏木精 5.0 gm95% 酒精500.0 ml混合溶解,标签,日期和签名。
保存期1年。
警告:易燃性,避免接触和吸入。
原液B:29%三氯化铁20.0 ml蒸馏水475.0 ml盐酸 5.0 ml混合溶解,标签,日期和签名。
保存期1年。
Weigert's 苏木精工作液溶液A 25.0 ml溶液B 25.0 ml混合溶解,溶液可保留3-4。
磷钼酸/磷钨酸溶液:磷钼酸25.0 gm磷钨酸25.0 gm蒸馏水1000.0 ml混合溶解,标签,日期和签名。
保存期6个月。
警告:避免接触和吸入。
苯胺蓝:苯胺蓝 2.5 gm蒸馏水100.0 ml冰醋酸 1.0 ml混合溶解,标签,日期和签名。
保存期6个月。
警告:避免接触和吸入。
masson三色染色原理
masson三色染色原理
马森三色染色法,又称孔雀石绿染色,是一种革命性的染色技术,以伊利诺伊大学教授罗伯特·马森为主要发展者。
这种三色染色法是基于撒尔的三色原理的实现,利用MesostomesAntltosis、RieshellAring和Fragilin三个不同的染料实现了三色染色,解决了双色染色技术无法实现更多颜色染色的瓶颈。
马森三色染色法有着多种优势。
首先,它可以染色出各种不同颜色,比传统的双色染色技术能够实现的颜色多出许多,使色彩更加丰富。
其次,该技术无毒、安全,一次染色可以固定在衣物表面,可以长期起到防污作用,节省工序时间,更能增强穿衣的舒适感。
同时,它比传统的染色技术能够更有效地固定生物组织内的蛋白质,减少破坏细胞结构的同时能够有效收集信息,对后续的研究更加方便。
随着计算机技术和大数据的不断发展,马森三色染色法也得到了更好的应用。
一是在植物分子生物学研究中,通过染色能够更清楚地看到植物的细胞结构,加快植物生物学的发展;二是在药物分子生物学研究中,通过染色可以获取更多的生物信息,有助于药物研究;三是在病毒学研究中,通过染色可以更准确地识别病毒细胞,进一步探究病毒潜在的危害与解药治疗方案。
马森三色染色法无疑使生物学研究更加精准、更加安全,该技术的广泛应用为病毒学、药物学研究提供了有力的支撑。
未来,该技术将积极发挥其在各类研究领域的重要作用,为解决人类各种挑战提供更大的助力。
Masson三色染色液(固绿法)
Masson 三色染色液(固绿法)简介:结缔组织狭义上是指其含有的三种纤维:胶原纤维、网状纤维、弹力纤维,而胶原纤维(collagen fiber)是分布最广、含量最多的一种纤维。
Masson 三色染色又称马松染色,是结缔组织染色中最经典的一种方法,是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。
所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。
Leagene Masson 三色染色的特点:①染色稳定;②分化时间短,1~2s ;③色彩清晰鲜艳;④适用范围广,适宜于组织的石蜡切片、冰冻切片等染色;⑤所染切片保存时间长且不易褪色。
组成:操作步骤(仅供参考):1、切片常规脱蜡至水,用配制好的Weigert 铁苏木素染色。
2、用酸性乙醇分化液分化,水洗。
3、用Masson 蓝化液返蓝,水洗。
4、蒸馏水洗。
5、丽春红品红染色液染色。
6、在上述操作过程中按蒸馏水:弱酸溶液=2:1比例配制弱酸工作液,用弱酸工作液洗。
7、磷钼酸溶液洗。
8、用配制好的弱酸工作液洗。
9、直接入固绿染色液中染色。
编号 名称DC00347×50mlDC00347×100ml Storage试剂(A) :Weigert 铁苏木素染色液A1:Weigert 染液A 25ml 50ml RT 避光 A2: Weigert 染液B25ml50mlRT试剂(B): 酸性乙醇分化液 50ml 100ml RT 试剂(C): Masson 蓝化液 50ml 100ml RT 试剂(D): 丽春红品红染色液 50ml 100ml RT 避光 试剂(E): 弱酸溶液 50ml 100ml RT 试剂(F): 磷钼酸溶液 50ml 100ml RT 避光 试剂(G): 固绿染色液 50ml100ml RT 避光使用说明书 1份10、用配制好的弱酸工作液洗。
11、95%乙醇快速脱水。
无水乙醇脱水3次,每次5~10s。
12、二甲苯透明3次,每次1~2min。
Masson染色
Masson染色Masson染色,用于显示组织中纤维的染色方法之一。
试剂:Regaud 氏苏木精:苏木精1g,95%酒精10ml,甘油10ml,蒸馏水80ml。
将苏木精加入蒸馏水内加温溶解,冷却后加入酒精和甘油,放数日后即可应用。
Masson丽春红酸性复红液:丽春红0.7g,酸性复红0.3g,蒸馏水99ml,冰醋酸1ml。
0.2%冰醋酸水溶液:冰醋酸0.2 ml,蒸馏水100 ml。
1%磷钼酸水溶液:磷钼酸1g,蒸馏水100 ml。
苯胺蓝水溶液:苯胺蓝2g,蒸馏水98 ml,冰醋酸2 ml。
1%光绿水溶液:光绿 1g,蒸馏水100 ml。
Masson三色法步骤1、石蜡切片脱蜡至水。
2、铬化处理或去汞盐沉淀(甲醛固定的组织此步可略)。
3、依次自来水和蒸馏水洗。
4、用Regaud苏木精染液或Weigert苏木精液染核5-10min。
5、充分水洗,如过染可盐酸酒精分化。
6、蒸馏水洗。
7、用Masson 丽春红酸性复红液5-10min。
8、以2%冰醋酸水溶液浸洗片刻。
9、1%磷钼酸水溶液分化3-5min。
10、不经水洗,直接用苯胺蓝或光绿液染5min。
11、以0.2%冰醋酸水溶液浸洗片刻。
12、95%酒精、无水酒精、二甲苯透明、中性树胶封固。
结果:胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色(如光绿液染色为绿色),胞浆、肌肉、纤维素、神经胶质呈红色,胞核黑蓝色。
体会与说明:1、控制好染色步骤。
2、组织固定起着很重要的作用,根据不同的固定液可延长或缩短染色时间。
3、0.2%冰醋酸水溶液洗,可使色调清晰鲜艳。
4、磷钼酸水溶液对丽春红、酸性复红有分化作用,分化时镜下控制,肌纤维和纤维素呈红色,胶原纤维呈淡粉红色即可。
masson染色结果分析
Masson三色染色液说明书【产品名称】Masson三色染色液【包装规格】货号:DC0032套组包装规格:8×20ml/盒、8×100ml/盒、8×250ml/盒【预期用途】主要用于组织中结缔组织、肌肉和胶原纤维的组织细胞学染色。
【检验原理】Masson三色染色又称马松染色,是胶原纤维染色权威而经典的技术方法,所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。
该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关:分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织;而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织,苯胺蓝的分子量很大,染色后肌纤维呈红色,胶原纤维呈蓝色,主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
【主要组成成分】试剂组成主要成分1、Weigert铁苏木素A液苏木素2、Weigert铁苏木素B液三氯化铁3、酸性乙醇分化液乙醇4、蓝化液碳酸盐5、丽春红品红染色液丽春红、品红6、乙酸溶液乙酸7、磷钼酸溶液磷钼酸8、苯胺蓝染色液苯胺蓝【储存条件及有效期】5℃~35℃保存,原包装未开封染色液的有效期为l8个月,在有效期内的已开封染色液建议在开封后6个月内使用完,每次用后应及时拧紧瓶盖,以免挥发或变质。
【样本要求】组织片充分固定和脱蜡。
【检验方法】1、组织固定于Bouin氏固定液(另购)或Zenker氏固定液(另购)或10%中性福尔马林固定液(另购)等,流水冲洗,常规脱水包埋;2、切片常规脱蜡至水;3、取适量的Weigert铁苏木素A液和Weigert铁苏木素B液等量混合,即为Weigert铁苏木素染色液,用Weigert铁苏木素染色液染色,流水稍洗;4、酸性乙醇分化液分化数秒,流水冲洗数分钟;5、蓝化液返蓝数秒,流水冲洗数分钟;6、丽春红品红染色液染色数分钟,流水稍冲洗;7、将蒸馏水:乙酸溶液按一定的比例配制乙酸工作液,用乙酸工作液洗切片;8、磷钼酸溶液处理后,倾去玻片上磷钼酸溶液(不用水洗);9、苯胺蓝染色液复染,倾去玻片上染色液(不用水洗);10、用乙酸工作液处理切片,至切片无蓝色脱出(必要时镜下控制);11、95%乙醇迅速脱水,无水乙醇脱水数次后,二甲苯透明,中性树胶封固。
MASSON三色染色液
Masson三色染色液【产品名称】Masson三色染色液【包装规格】货号:DC0032套组包装规格:8×20ml/盒、8×100ml/盒、8×250ml/盒【预期用途】主要用于组织中结缔组织、肌肉和胶原纤维的组织细胞学染色。
【检验原理】Masson三色染色又称马松染色,是胶原纤维染色权威而经典的技术方法,所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。
该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关:分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织;而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织,苯胺蓝的分子量很大,染色后肌纤维呈红色,胶原纤维呈蓝色,主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
【主要组成成分】试剂组成主要成分1、Weigert铁苏木素A液苏木素2、Weigert铁苏木素B液三氯化铁3、酸性乙醇分化液乙醇4、蓝化液碳酸盐5、丽春红品红染色液丽春红、品红6、乙酸溶液乙酸7、磷钼酸溶液磷钼酸8、苯胺蓝染色液苯胺蓝【储存条件及有效期】5℃~35℃保存,原包装未开封染色液的有效期为l8个月,在有效期内的已开封染色液建议在开封后6个月内使用完,每次用后应及时拧紧瓶盖,以免挥发或变质。
【样本要求】组织片充分固定和脱蜡。
【检验方法】1、组织固定于Bouin氏固定液(另购)或Zenker氏固定液(另购)或10%中性福尔马林固定液(另购)等,流水冲洗,常规脱水包埋;2、切片常规脱蜡至水;3、取适量的Weigert铁苏木素A液和Weigert铁苏木素B液等量混合,即为Weigert铁苏木素染色液,用Weigert铁苏木素染色液染色,流水稍洗;4、酸性乙醇分化液分化数秒,流水冲洗数分钟;5、蓝化液返蓝数秒,流水冲洗数分钟;6、丽春红品红染色液染色,流水稍冲洗;7、按蒸馏水和乙酸溶液按比例配制乙酸工作液,用乙酸工作液洗切片;8、磷钼酸溶液处理,倾去玻片上磷钼酸溶液(不用水洗);9、苯胺蓝染色液复染,倾去玻片上染色液(不用水洗);10、用乙酸工作液处理切片,至切片无蓝色脱出(必要时镜下控制);11、95%乙醇迅速脱水,无水乙醇脱水3次,二甲苯透明,中性树胶封固。
masson三色染色 原理
masson三色染色原理
Masson三色染色是一种常用于组织学研究中的染色方法,主要用于显示胶原纤维和细胞核等结构。
这种染色方法包括酸性橙G、酸性品红和天蓝三种染色剂,通过它们的染色特性可以清晰显示组织中的不同结构。
首先是酸性橙G染色,它主要用于染色胶原纤维和肌纤维。
酸性橙G是一种酸性染料,能够与碱性结构如胶原纤维反应并染色为橙色。
胶原纤维在组织中起着支持和结构维持的作用,通过酸性橙G染色可以清晰显示出它们的分布和形态。
其次是酸性品红染色,主要用于染色胶原纤维、细胞核和胶原蛋白。
酸性品红是一种酸性染料,能够与细胞核中的核蛋白和胶原蛋白等结构反应并染色为红色。
细胞核是细胞的核心器官,通过酸性品红染色可以清晰显示细胞核的形态和分布。
最后是天蓝染色,主要用于染色细胞核和细胞浆。
天蓝是一种碱性染料,能够与酸性结构如细胞核和细胞浆反应并染色为蓝色。
细胞浆是细胞内除细胞核以外的部分,通过天蓝染色可以清晰显示细胞核和细胞浆的对比。
综合这三种染色方法,Masson三色染色可以全面展示组织中的胶原纤维、细胞核和细胞浆等结构,为组织学研究提供了重要的信息。
通过合理使用这三种染色剂,可以细致地观察细胞和组织的结构,为研究细胞和组织的形态和功能提供有力的支持。
Masson三色染色方法的原理清晰明了,操作简便,是组织学研究中常用的染色方法之一。
病理学技术特殊染色Masson三色染色法
病理学技术特殊染色Masson三色染色法
试剂:
①Regaud苏木精:苏木精1克溶于蒸馏水80毫升,加温溶解,冷却;加95%酒精和甘油各10毫升,数日后使用
②丽春红G酸性品红液:丽春红G 0.7克,酸性品红0.3克,蒸馏水 99毫升,冰醋酸1毫升
③0.2%醋酸水溶液:冰醋酸1毫升,蒸馏水200毫升
④1%磷钼酸水溶液:磷钼酸1克,蒸馏水100毫升
⑤蓝水溶液:苯胺蓝2克,蒸馏水98毫升,冰醋酸2毫升
⑥1%亮绿水溶液:亮绿1克,蒸馏水100毫升,冰醋酸1毫升
方法:
⑴石蜡切片脱蜡至水
⑵含汞固定者须脱汞去碘
⑶自来水洗,蒸馏水洗
⑷Regaud苏木精或Weigert苏木精染细胞核5~10分钟,充分水洗
⑸过染用盐酸酒精分色,蒸馏水洗
⑹丽春红G酸性品红液染色5~10分钟
⑺0.2%醋酸水溶液分色短时
⑻1%磷钼酸水溶液1~3分钟
⑼直接用苯胺蓝或亮绿液染5分钟
⑽0.2%醋酸水溶液洗短时
⑾95%酒精及无水酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封片
结果:
胶原纤维、黏液、软骨蓝色或绿色(亮绿染色);
细胞质、肌肉、纤维素、神经胶质红色;
细胞核蓝黑色。
Masson三色染色
Masso n三色染色:主要用于胶原纤维和肌纤维的鉴别染色。
Mass on染色是最为常用的结
缔组织染色法,此法多用于观察病变组织中纤维结缔组织的增生和分布,纤维性肿瘤与肌源性肿瘤的鉴别。
对酒精性肝硬化/坏死后性肝硬化及各型肝炎导致的小叶汇管区纤维组织增
生程度的差别具有重要价值。
Masso n染色在肾穿刺活检中可以用于判别在肾小球毛细血管网的系膜氏和上皮下是否存
在嗜复红蛋白的沉积,对于肾脏疾病的病理诊断有重要意义。
天狼星红染色(Sirius red ):由于胶原呈碱性,与酸性染料起强烈反应。
天狼星红就是一种很强的酸性染料,它可以和胶原纤维反应使胶原纤维产生明显的双折光现象。
天狼星红染色胶原纤维呈红色,胞核呈绿色,余呈黄色。
偏光显微镜可以分辨不同的纤维类型,
HE染色:又称苏木素-伊红染色法,其中苏木素是Hematoxylin,简称H,伊红是Eosin,
简称E,这是是普通光学显微镜观察与鉴别细胞凋亡与细胞坏死的一种染色方法。
这种方法适用范围广泛,对组织细胞的各种成分都可着色,便于全面观察组织构造,而且适用于各种固定液固定的材料,染色后不易褪色可长期保存。
经过HE染色,细胞核被苏木素染成蓝紫色,细胞质被伊红染色呈粉红色,
油红0脂肪染色法:显示组织内的脂肪,油红0为脂溶性染料,在脂肪内能高度溶解,可特异性的使组织内甘油三酯等中性脂肪着色,。
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Masson 三色染色液30ml+20ml*5
RT
产品简介:
由Mallory 三色染色改造,利用两种或三种阴离子染料混合一起或先后作用完成染色,与阴离子染料分子的大小和组织的渗透性有关。
根据组织不同的渗透性能,选择分子大小不同的阴离子的染料进行染色,便可把不同组织成分显示出来。
包装内容:产品货号
产品名称规格G1006-1
重铬酸钾媒染剂30ml G1006-2
Weigert 铁苏木素A 液20ml G1006-3
Weigert 铁苏木素B 液20ml G1006-4
丽春红酸性品红染液20ml G1006-5
磷钼酸溶液20ml G1006-6苯胺蓝染液20ml
保存条件:室温保存,有效期1年。
操作说明:
1、石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min ,自来水洗。
2、重铬酸钾染色:切片入重铬酸钾浸泡过夜,自来水洗。
3、铁苏木素染色:铁苏木素A 液与B 液等比混合成铁苏木素染液,切片入铁苏木素3min ,自来水洗,盐酸酒精溶液分化,自来水冲洗。
4、丽春红酸性品红染色:切片入丽春红酸性品红浸染5-10min ,自来水漂洗。
5、磷钼酸染色:磷钼酸水溶液浸染1-3min 。
6、苯胺蓝染色:磷钼酸之后不用水洗,直接入苯胺蓝染液染3-6min 。
7、分化:切片用1%冰醋酸分化,两缸无水乙醇脱水。
8、透明封片:切片放入第三缸无水乙醇5min ,二甲苯5min 透明,中性树胶封片。
9、显微镜镜检,图像采集分析。
染色结果:
胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色。
弹力纤维呈棕色。
肌纤维、纤维素和红细胞染红色。
细胞核染蓝黑色。
G 1006
注意事项:
1、Weigert铁苏木素分A、B两液,临用前将两液等比例混合使用。
不宜预先混合,否则容易氧化沉淀而失去染色力。
2、重铬酸钾染完后水洗要稍快,切片洗干净即可。
3、根据切片的数量对铁苏木素染液进行更换,也可以现配现用;
4、丽春红的染色程度要控制好,胶原部分不能是红色或者太红,会影响后续苯胺蓝的着色;
5、冰醋酸分化苯胺蓝的过程中,若是分化过度,胶原蓝色太浅,若分化不足,易与丽春红
的颜色叠加呈紫蓝色。
图例:
心脏组织染masson,胶原纤维呈蓝色,肌纤维,红细胞呈红色。