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bioxun
产品操作
一.准备工作
检测卡的准备
1.在18-25℃条件下平衡30分钟。
离心！
2.离心2-3分钟，均衡反应介质。
3.外观检查应无气泡、干胶和杂质。
4.要缓慢撕膜。防止膜面上的液滴凝结（因冷热交替产生的）污染邻孔。
bioxun
检测标本的准备
1.标本要求用EDTA抗凝管采集的新鲜血（如陈旧血需设阴性对照）。 2.抗凝血样标本要上清澄清。如有纤毛状、浑浊、乳糜、溶血、脂肪等状，应 再次洗涤离心。为防止纤维蛋白影响红细胞沉降，建议使用红细胞稀释液。 3.血辫血样须放置试管中离心处理，确保血清澄清微黄。必要时需洗涤。 4.在18-25℃条件下平衡30分钟，防止冷凝集。
3、Rh血型抗原检测卡（单克隆抗体）
操作步骤:
1）将准备好的检测卡做好标记；
2）将待检者0.8%红细胞悬液分别加入1—6管中，各50µl；
待检者0.8% 红细胞悬液
50µl 50µl 50µl 50µl 50µl 50µl
bioxun
3）离心5分钟（900rpm2分钟，1500rpm3分钟）； 4）结果判读。
微柱凝胶免疫检测技术
反应原理
微柱凝胶免疫反应的本质是红细胞凝集试验，也可称之微柱凝胶血凝试 验（Microcolumn Gel Heamagglutination Assay，MGHA）。
在微柱凝胶管中，红细胞和相应抗体结合后，形成红细胞凝集团块。在一定离心力下，该 凝集团块位于胶表面或胶中；而红细胞未和相应抗体结合，仍为分散的红细胞，在同样的离心力 下，红细胞沉降到微柱管尖底部。
bioxun
例如上图：1、3不配合；2 配合
交叉配血实验注意事项
1.应用直接抗人球蛋白微柱凝胶免疫试验检测病人红细胞时，一定要用适量EDTA 的试管采血液标本，该标本不能放入2℃-8℃冰箱保存，以避免红细胞在病人 体外致敏所致假阳性反应。
2.红细胞标本一定不能被细菌污染，否则出现假阳性反应。尽可能应用当日采集 的新鲜血做本试验。如不得不用过夜血或陈旧血，则必须首先用该标本做阴 性对照试验，以确定该标本是否可以做本实验。
bioxun
结果：RhD、C、e阳性
4、抗人球蛋白检测卡—不规则抗体筛检
操作步骤：
1）将准备好的检测卡做好标记；
0.8%Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ筛检红细胞
ⅠⅡ Ⅲ 2）将0.8%Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ筛检红细胞各50µl分别加
入对应的微管中;
50µl 50µl 50µl
bioxபைடு நூலகம்n
3）将待检者血浆各50µl分别加入Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ微管中；
4+
2+
-
bioxun
特点和优点
简单：不需洗涤，对阴性结果不需确证试验，适用于大量标本检测，解决了 Coombs试验因为程序复杂费时等原因未能在临床常规应用问题。
使不完全抗体检测理论“金标准”成为临床的“金标准”。 多份标本一次离心出结果，有利于临床大量标本检测。 另外还具备准确、敏感、标本用量少、结果保存时间长、易于标准化、 操作 更安全等优点。
2）将供血者0.8%红细胞悬液与受血者血浆各50µl先后加入主侧管中；
供血者红细胞悬液
受血者血浆
50µl
50µl
bioxun
3）将受血者0.8%红细胞悬液与供血者血浆各50µl先后加入次侧管中；
受血者红细胞悬液
50µl
供血者血浆
50µl
4）37℃孵育15分钟；
bioxun
5）离心5分钟（900rpm2分钟，1500rpm3分钟）； 6）结果判读。
？
bioxun
４＋
反应强度 4+ 3+ 2+ 1+ ± 完全溶血 不完全溶血 混合凝集
３＋ ２＋ ＋ ±
－
Ｈ
Ｈ
Ｍ
完全 不完全 混合凝集
现象及说明
红细胞复合物（凝集）位于凝胶表面 大部分红细胞复合物位于凝胶表面，少部分位于凝胶中部 大部分红细胞复合物位于凝胶中部，少部分位于凝胶中上部 红细胞复合物位于凝胶中下部 与同一卡中阴性管结果对照，如与阴性结果有差别，即为± 红细胞完全沉积在凝胶管尖底部 凝胶和液体无凝集或未凝集的红细胞，液体出现透明清澈红色 残留红细胞在胶表面、胶中或胶底部，液体出现透明清澈红色 红细胞复合物位于凝胶表面和凝胶底部
操作步骤： 1）将准备好的检测卡做好标记；
2）将待检者0.8%红细胞悬液分别加入第1—3或 4—6管中，各50µl；
50µl 50µl 50µl
待检者的0.8% 红细胞悬液
bioxun
3）离心5分钟（900rpm2分钟，1500rpm3分钟）； 4）结果判读。
bioxun
结果：1.A型RhD阳性； 2.B型RhD阳性
50µl 50µl 50µl 50µl
4）取0.8%的ABO血型反定型红细胞试剂，分别加 入5-6管中，各50µl；
A细胞 B细胞
50µl 50µl
bioxun
5）离心5分钟（900rpm2分钟，1500rpm3分钟）； 6）结果判读。
bioxun
结果：A型RhD阳性
2、ABO、RhD血型检测卡（微柱凝胶）
待检者血浆
50µl 50µl 50µl 5l 0µl
50µl
5l 0µl
4）37℃孵育15分钟；
bioxun
5）离心5分钟（900rpm2分钟，1500rpm3分钟）； 6）结果判读。
根据当前使用的筛检红细胞的反应格局来判定
bioxun
5、抗人球蛋白检测卡—交叉配血试验
操作步骤：
1）将准备好的检测卡做好标记；
红细胞悬液的制备
1.将红细胞配制为0.8%的悬液，最高浓度不要超过1% 。如:取8μl 压积红细 胞，加入到1ml的红细胞稀释液（抗人球蛋白试验要求用低离子液配置红细胞 悬液）中，配制出的红细胞悬液浓度大约为0.8%。 2.外观检查呈均匀淡红色，无血块、无絮状物（如有纤维蛋白需去除）。
bioxun
二.结果判定
阳性结果：红细胞抗原与相应抗体在微柱凝胶中形成的特异性抗原抗体复 合物浮在凝胶表面或胶中，为阳性反应。 阴性结果：红细胞抗原无相应的抗体结合，不出现特异性抗原抗体复合物 ，红细胞沉于微柱凝胶的尖底部，为阴性反应。 反应强度：特异性红细胞抗原抗体复合物位于胶表面，为强阳性反应；复 合物在胶中，为弱阳性反应；愈靠近胶底部颗粒愈小，反应愈弱。
bioxun
三、标准操作规程
bioxun
1、ABO、RhD血型定型检测卡（单克隆抗体）
操作步骤： 1）将准备好的检测卡做好标记；
2）将待检者血浆分别加入5-6管中，各50µl；
待检者血浆
50µl 50µl
bioxun
3）将待检者0.8%红细胞悬液分别加入1-4管中， 各50µl；
待检者0.8% 红细胞悬液
产品操作
一.准备工作
检测卡的准备
1.在18-25℃条件下平衡30分钟。
离心！
2.离心2-3分钟，均衡反应介质。
3.外观检查应无气泡、干胶和杂质。
4.要缓慢撕膜。防止膜面上的液滴凝结（因冷热交替产生的）污染邻孔。
bioxun
检测标本的准备
1.标本要求用EDTA抗凝管采集的新鲜血（如陈旧血需设阴性对照）。 2.抗凝血样标本要上清澄清。如有纤毛状、浑浊、乳糜、溶血、脂肪等状，应 再次洗涤离心。为防止纤维蛋白影响红细胞沉降，建议使用红细胞稀释液。 3.血辫血样须放置试管中离心处理，确保血清澄清微黄。必要时需洗涤。 4.在18-25℃条件下平衡30分钟，防止冷凝集。
3、Rh血型抗原检测卡（单克隆抗体）
操作步骤:
1）将准备好的检测卡做好标记；
2）将待检者0.8%红细胞悬液分别加入1—6管中，各50µl；
待检者0.8% 红细胞悬液
50µl 50µl 50µl 50µl 50µl 50µl
bioxun
3）离心5分钟（900rpm2分钟，1500rpm3分钟）； 4）结果判读。
微柱凝胶免疫检测技术
反应原理
微柱凝胶免疫反应的本质是红细胞凝集试验，也可称之微柱凝胶血凝试 验（Microcolumn Gel Heamagglutination Assay，MGHA）。
在微柱凝胶管中，红细胞和相应抗体结合后，形成红细胞凝集团块。在一定离心力下，该 凝集团块位于胶表面或胶中；而红细胞未和相应抗体结合，仍为分散的红细胞，在同样的离心力 下，红细胞沉降到微柱管尖底部。
bioxun
例如上图：1、3不配合；2 配合
交叉配血实验注意事项
1.应用直接抗人球蛋白微柱凝胶免疫试验检测病人红细胞时，一定要用适量EDTA 的试管采血液标本，该标本不能放入2℃-8℃冰箱保存，以避免红细胞在病人 体外致敏所致假阳性反应。
2.红细胞标本一定不能被细菌污染，否则出现假阳性反应。尽可能应用当日采集 的新鲜血做本试验。如不得不用过夜血或陈旧血，则必须首先用该标本做阴 性对照试验，以确定该标本是否可以做本实验。
bioxun
结果：RhD、C、e阳性
4、抗人球蛋白检测卡—不规则抗体筛检
操作步骤：
1）将准备好的检测卡做好标记；
0.8%Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ筛检红细胞
ⅠⅡ Ⅲ 2）将0.8%Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ筛检红细胞各50µl分别加
入对应的微管中;
50µl 50µl 50µl
bioxபைடு நூலகம்n
3）将待检者血浆各50µl分别加入Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ微管中；
4+
2+
-
bioxun
特点和优点
简单：不需洗涤，对阴性结果不需确证试验，适用于大量标本检测，解决了 Coombs试验因为程序复杂费时等原因未能在临床常规应用问题。
使不完全抗体检测理论“金标准”成为临床的“金标准”。 多份标本一次离心出结果，有利于临床大量标本检测。 另外还具备准确、敏感、标本用量少、结果保存时间长、易于标准化、 操作 更安全等优点。
2）将供血者0.8%红细胞悬液与受血者血浆各50µl先后加入主侧管中；
供血者红细胞悬液
受血者血浆
50µl
50µl
bioxun
3）将受血者0.8%红细胞悬液与供血者血浆各50µl先后加入次侧管中；
受血者红细胞悬液
50µl
供血者血浆
50µl
4）37℃孵育15分钟；
bioxun
5）离心5分钟（900rpm2分钟，1500rpm3分钟）； 6）结果判读。
？
bioxun
４＋
反应强度 4+ 3+ 2+ 1+ ± 完全溶血 不完全溶血 混合凝集
３＋ ２＋ ＋ ±
－
Ｈ
Ｈ
Ｍ
完全 不完全 混合凝集
现象及说明
红细胞复合物（凝集）位于凝胶表面 大部分红细胞复合物位于凝胶表面，少部分位于凝胶中部 大部分红细胞复合物位于凝胶中部，少部分位于凝胶中上部 红细胞复合物位于凝胶中下部 与同一卡中阴性管结果对照，如与阴性结果有差别，即为± 红细胞完全沉积在凝胶管尖底部 凝胶和液体无凝集或未凝集的红细胞，液体出现透明清澈红色 残留红细胞在胶表面、胶中或胶底部，液体出现透明清澈红色 红细胞复合物位于凝胶表面和凝胶底部
操作步骤： 1）将准备好的检测卡做好标记；
2）将待检者0.8%红细胞悬液分别加入第1—3或 4—6管中，各50µl；
50µl 50µl 50µl
待检者的0.8% 红细胞悬液
bioxun
3）离心5分钟（900rpm2分钟，1500rpm3分钟）； 4）结果判读。
bioxun
结果：1.A型RhD阳性； 2.B型RhD阳性
50µl 50µl 50µl 50µl
4）取0.8%的ABO血型反定型红细胞试剂，分别加 入5-6管中，各50µl；
A细胞 B细胞
50µl 50µl
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5）离心5分钟（900rpm2分钟，1500rpm3分钟）； 6）结果判读。
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结果：A型RhD阳性
2、ABO、RhD血型检测卡（微柱凝胶）
待检者血浆
50µl 50µl 50µl 5l 0µl
50µl
5l 0µl
4）37℃孵育15分钟；
bioxun
5）离心5分钟（900rpm2分钟，1500rpm3分钟）； 6）结果判读。
根据当前使用的筛检红细胞的反应格局来判定
bioxun
5、抗人球蛋白检测卡—交叉配血试验
操作步骤：
1）将准备好的检测卡做好标记；
红细胞悬液的制备
1.将红细胞配制为0.8%的悬液，最高浓度不要超过1% 。如:取8μl 压积红细 胞，加入到1ml的红细胞稀释液（抗人球蛋白试验要求用低离子液配置红细胞 悬液）中，配制出的红细胞悬液浓度大约为0.8%。 2.外观检查呈均匀淡红色，无血块、无絮状物（如有纤维蛋白需去除）。
bioxun
二.结果判定
阳性结果：红细胞抗原与相应抗体在微柱凝胶中形成的特异性抗原抗体复 合物浮在凝胶表面或胶中，为阳性反应。 阴性结果：红细胞抗原无相应的抗体结合，不出现特异性抗原抗体复合物 ，红细胞沉于微柱凝胶的尖底部，为阴性反应。 反应强度：特异性红细胞抗原抗体复合物位于胶表面，为强阳性反应；复 合物在胶中，为弱阳性反应；愈靠近胶底部颗粒愈小，反应愈弱。
bioxun
三、标准操作规程
bioxun
1、ABO、RhD血型定型检测卡（单克隆抗体）
操作步骤： 1）将准备好的检测卡做好标记；
2）将待检者血浆分别加入5-6管中，各50µl；
待检者血浆
50µl 50µl
bioxun
3）将待检者0.8%红细胞悬液分别加入1-4管中， 各50µl；
待检者0.8% 红细胞悬液