sds尿蛋白及本周氏电泳的意义

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简述SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理和应用

简述SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理和应用

简述SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理和应用1. 原理SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(Sodium Dodecyl Sulfate-Polyacrylamide Gel Electrophoresis,简称SDS-PAGE)是一种常用的蛋白质分离和分析技术。

它基于蛋白质的分子量和电荷差异,通过电场作用将蛋白质分离成不同的带。

SDS-PAGE的原理基于以下几个方面:1.SDS的作用:SDS是一种阴离子表面活性剂,可以使蛋白质分子迅速与其结合,并赋予蛋白质大量的负电荷,使得蛋白质在电场中按照大小和形状进行分离。

2.聚丙烯酰胺凝胶:聚丙烯酰胺凝胶是一种聚合物,可以形成一种网状结构,这种结构具有孔隙,可以通过孔隙大小筛选不同大小和形状的蛋白质分子。

3.电场作用:在电泳槽中施加电场后,带负电荷的蛋白质会向阳极迁移,迁移速度取决于蛋白质分子的质量和形状。

通过以上原理,可以将蛋白质样品加载在聚丙烯酰胺凝胶的孔隙中,然后施加电场,蛋白质按照其分子量的大小和形状进行分离,最终形成不同的蛋白质带。

2. 应用SDS-PAGE广泛应用于生物医学和生命科学的各个领域,以下是SDS-PAGE的几个主要应用:2.1 蛋白质分离与纯化SDS-PAGE是一种常用的蛋白质分离和纯化技术。

通过SDS-PAGE,可以将混合蛋白质样品根据其分子量进行分离,得到纯化的蛋白质。

这对于研究蛋白质的结构、功能以及相互作用具有重要意义。

2.2 亚细胞结构研究通过SDS-PAGE,可以将细胞或亚细胞结构中的蛋白质分离出来,进一步研究其在细胞内的定位、功能以及与其他分子的相互作用。

这有助于揭示细胞和亚细胞结构的功能机制。

2.3 蛋白质质量测定通过SDS-PAGE,可以通过与已知分子量的蛋白质标准品进行比较,估计未知蛋白质的分子量。

这对于研究蛋白质的结构、功能以及其在生物过程中的变化具有重要意义。

2.4 蛋白质组学研究SDS-PAGE结合质谱技术可以进行蛋白质组学研究。

sds page电泳的原理

sds page电泳的原理

sds page电泳的原理SDS-PAGE(Sodium Dodecyl Sulfate Polyacrylamide Gel Electrophoresis)是一种常用的蛋白质电泳方法,用于分离和分析复杂蛋白质混合物。

它是基于蛋白质的分子质量、电荷和形态的不同,在电场作用下通过凝胶基质的孔隙来实现分离的。

SDS是一种阴离子表面活性剂,具有蛋白质解聚的能力。

在SDS-PAGE中,将待测蛋白样品与SDS混合,并进行加热,使蛋白质完全解聚为单体。

此时,SDS与蛋白质按照1:1的比例结合,通过带负电荷的SDS包裹蛋白质,使蛋白质在电场中带有均一的负电荷。

因此,蛋白质分子在电泳过程中的迁移速率主要取决于其分子质量。

在SDS-PAGE中,通常使用聚丙烯酰胺凝胶作为电泳介质。

凝胶状的聚丙烯酰胺由两种不同浓度的单体构成,一种是浓度较低的,称为分离凝胶(separating gel),另一种是浓度较高的,称为浓缩凝胶(stacking gel)。

分离凝胶具有较大的孔隙,用来分离蛋白质,浓缩凝胶则具有较小的孔隙,用来聚焦蛋白质在进样时形成匀称的小带。

在进行SDS-PAGE时,将待测蛋白样品与一个标准蛋白混合物加载到凝胶孔隙的顶部,并施加电场。

由于浓缩凝胶造成的聚焦效应,蛋白质在进样时被集中成窄而锐利的带。

之后,电场通过凝胶中的分离凝胶,蛋白质分子依据其分子质量的不同逐渐迁移。

较小的蛋白质分子能够顺利地通过分离凝胶,迁移较快;而较大的蛋白质分子由于孔隙的限制,迁移速率较慢。

最终,在分离凝胶上形成了分子质量递增的蛋白质带。

为了可视化分离的蛋白质,SDS-PAGE通常使用染色剂,如Coomassie Blue或银染液对蛋白质进行染色。

染色后,带状的蛋白质可以通过图像分析软件进行定量分析,包括测量带的相对强度和计算蛋白质相对分子质量。

总之,SDS-PAGE利用蛋白质分子在电场作用下的迁移速率不同,通过凝胶基质的孔隙大小,实现了蛋白质的分离和分析。

尿蛋白电泳及尿本周蛋白检测在肾病中的应用

尿蛋白电泳及尿本周蛋白检测在肾病中的应用
3• 特异的白细胞 (lymphocytes B) 转化为浆 细胞
4• 浆细胞 合成抗体蛋白,即免疫球蛋白.
Immunoglobulin
5• 免疫球蛋白 在免疫系统中被用来识别和消 灭如细菌或病毒等外源物
正常浆细胞
正常免疫球蛋白的合成 骨髓瘤或其他恶性浆细胞增生
Normal Immunoglobulin
• 电泳技术就是利用在电场的 作用下, 由于待分离样品中 各种分子带电性质以及分子 本身大小, 形状等性质的差 异, 使带电分子产生不同的 迁移速度, 从而对样品进行 分离, 鉴定或提纯的技术.
• 在生化检测中, 主要用于分 离各类蛋白分子.
正常的电泳图谱
经过毛细管电泳后, 血清蛋白将会被分离成6个条带并同时标注出检测结果
低免疫球蛋白血症
如果血清中未见异常,建议 做尿本周氏蛋白检测
原因: 先天免疫缺陷, 免疫抑制治疗过程中, 游离轻链病)
通过对血清蛋白电泳结果中出现的单克隆免疫球蛋白检测, 对免疫球蛋白疾病进行诊断
有症状型性免疫球蛋白疾病: - 多发性骨髓瘤 - 巨球蛋白血症 - 非霍奇金淋巴瘤 - 慢性淋巴细胞白血病 - 重链病 - 淀粉样病变
出现的单克隆M蛋白
正常免疫球蛋白 的电泳结果图谱 Normal Proteinogram
单克隆免疫球蛋 白的电泳图谱
Proteinogram showing Monoclonal peak
多发性骨髓瘤
人群分布:
多发性骨髓瘤仅次于白血病, 是目前发病率排第二位 的恶性血液肿瘤
占所有肿瘤的1% (每年超过15 000人死于该疾病) 欧洲目前有60 000患者, 世界范围有250 000 因浆细胞过度增殖,继而影响骨髓

蛋白胶中sds的作用

蛋白胶中sds的作用

蛋白胶中sds的作用蛋白胶是一种常用的实验试剂,广泛应用于生物学和生物化学研究中。

而其中的SDS(十二烷基硫酸钠)是蛋白胶中的重要成分,起着重要的作用。

本文将重点讨论SDS在蛋白胶中的作用。

SDS在蛋白胶中的主要作用是将蛋白质样品进行变性。

SDS是一种带有负电荷的表面活性剂,其疏水尾部与疏水性氨基酸残基相互作用,使蛋白质样品的三维结构变为线性结构。

这种线性结构使蛋白质在电泳过程中能够均匀地分布在凝胶中,从而保证了准确的分子量测定和分离效果。

SDS在凝胶电泳中还起到了界面活性剂的作用。

SDS的疏水性尾部与蛋白质样品中的疏水性氨基酸残基相互作用,使蛋白质样品溶于SDS溶液中,并在电泳过程中迁移至阳极。

由于SDS分子中的负电荷,使得蛋白质样品在电场中能够带负电荷,从而使蛋白质样品能够根据分子量的大小在凝胶中进行分离。

SDS还可以使蛋白质样品保持在线性状态。

蛋白质的线性化有助于其在电泳过程中的迁移速度一致,从而使分离结果更加准确。

同时,SDS的存在还可以消除蛋白质样品之间的电荷排斥作用,使蛋白质样品在凝胶中迁移速度与分子量成正比。

除了以上几点作用外,SDS还可以增加蛋白质样品的溶解度。

由于SDS是一种表面活性剂,它可以使蛋白质样品与水更好地混合,从而提高了蛋白质样品的溶解度和稳定性。

这对于蛋白质样品的制备和保存都具有重要意义。

总结起来,SDS在蛋白胶中起到了将蛋白质样品变性、增加蛋白质样品的溶解度、提高蛋白质样品在凝胶中的分离效果等作用。

它是蛋白胶中不可或缺的成分,对于蛋白质研究具有重要意义。

通过SDS的作用,我们能够更好地了解和研究蛋白质的结构和功能,为生物学和生物化学领域的研究提供了重要的实验手段和方法。

希望本文能够对读者了解蛋白胶中SDS的作用有所帮助,并对相关研究提供一定的指导和启示。

《中国药典》(2020版)SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳

《中国药典》(2020版)SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳

第五法SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE法)SDS-PAGE法是一种变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳方法。

本法分离蛋白质的原理是根据大多数蛋白质都能与阴离子表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)按重量比结合成复合物,使蛋白质分子所带的负电荷远远超过天然蛋白质分子的净电荷,消除了不同蛋白质分子的电荷效应,使蛋白质按分子大小分离。

本法用于蛋白质的定性鉴别、纯度和杂质控制以及定量测定。

1.仪器装置恒压或恒流电源、垂直板电泳槽和制胶模具。

2.试剂(1)水。

(2)分离胶缓冲液(4×,A液) 1.5moL/L三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液称取三羟甲基氨基甲烷18.15g,加适量水溶解,用盐酸调节pH值至8.8,加水稀释至100mL。

(3)30%丙烯酰胺溶液(B液)称取丙烯酰胺58.0g、N,N-亚甲基双丙烯酰胺2.0g,加温水溶解并稀释至200mL,滤纸过滤(避光保存)。

(4)10%SDS溶液(C液)称取十二烷基硫酸钠10g,加水溶解并稀释至100mL。

(5)四甲基乙二胺溶液(TEMED,D液)商品化试剂。

(6)10%过硫酸铵溶液(E液)称取过硫酸铵10g,加水溶解并稀释至100mL。

建议临用前配制,或分装于-20℃可贮存2周。

(7)浓缩胶缓冲液(4×,F液)0.5moL/L三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液称取三羟甲基氨基甲烷6.05g,加适量水使溶解,用盐酸调pH值至6.8,加水稀释至100mL。

(8)电极缓冲液(10×)称取三羟甲基氨基甲烷30g、甘氨酸144g、十二烷基硫酸钠10g,加水溶解并稀释至约800mL,用盐酸调节pH值至8.1~8.8之间,加水稀释至1000mL。

(9)非还原型供试品缓冲液(4×)称取三羟甲基氨基甲烷3.03g、溴酚蓝20mg、十二烷基硫酸钠8.0g,量取甘油40m1,加水溶解并稀释至约80mL,用盐酸调节pH值至6.8,加水稀释至100mL。

sds聚丙烯酰胺凝胶电泳标准曲线_概述及解释说明

sds聚丙烯酰胺凝胶电泳标准曲线_概述及解释说明

sds聚丙烯酰胺凝胶电泳标准曲线概述及解释说明1. 引言1.1 概述在生物化学研究领域中,SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳是一种常用的技术。

它被广泛应用于蛋白质分子量测定、鉴定和纯化等方面。

准确绘制和使用SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳标准曲线对于确定样品中蛋白质的相对分子量非常重要。

1.2 文章结构本文将围绕SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳标准曲线展开详细阐述与解释,主要包括以下几个部分:引言、SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳标准曲线概述、SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳方法与步骤解释、建立SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳标准曲线的实验步骤和要点解说明、结论与展望。

1.3 目的本文的目的是全面介绍和解释SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳标准曲线的概念、意义和用途。

同时,还将详细阐述如何进行样品制备与处理、凝胶制备与电泳条件的解释以及凝胶图谱分析方法的说明。

此外,本文还会详细描述实验步骤和要点,帮助读者建立SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳标准曲线,并对结果进行分析和解读。

最后,结论部分将总结研究目的、讨论研究结果的启示和展望未来的研究方向。

通过本文的阐述,读者将能够全面了解SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳标准曲线并正确应用于相关实验中。

2. SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳标准曲线概述2.1 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳简介SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳是一种常用的蛋白质分离和分析技术。

其基本原理是根据蛋白质的分子量差异,利用SDS(十二烷基硫酸钠)和聚丙烯酰胺凝胶的作用,将蛋白质样品分离成不同迁移距离的条带。

2.2 标准曲线意义与用途标准曲线是根据已知浓度的标准样品制备的一系列溶液,通过测定这些溶液在SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移距离和色谱峰面积得到。

标准曲线可以在定量分析时用于确定未知蛋白质样品的浓度。

2.3 研究背景与重要性在生物学、医学和生化等领域中,了解蛋白质样品的浓度是很重要的。

使用SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳标准曲线可以帮助我们准确计算样品中的蛋白质浓度。

这对于研究蛋白质功能、进行药物研发以及诊断和治疗疾病等具有重要意义。

蛋白胶中sds的作用

蛋白胶中sds的作用

蛋白胶中sds的作用SDS(Sodium Dodecyl Sulfate),即十二烷基硫酸钠,是一种常用的表面活性剂,广泛应用于生物化学和分子生物学研究中。

在蛋白质分析中,SDS扮演着重要的角色。

它具有许多作用,包括溶解蛋白质、改变蛋白质的电荷、使蛋白质变性等。

本文将详细介绍SDS在蛋白胶中的作用。

SDS在蛋白胶中起到溶解蛋白质的作用。

蛋白质是一种复杂的有机物质,其溶解度常常较低。

SDS具有良好的溶解性,能够与蛋白质发生相互作用,使蛋白质分子解离,并形成SDS蛋白质复合物。

这种复合物具有较高的溶解度,可以更好地在电泳中迁移。

SDS能够改变蛋白质的电荷。

蛋白质是由氨基酸组成的,不同氨基酸具有不同的电荷性质。

在蛋白胶电泳中,SDS与蛋白质结合后,使蛋白质分子带有负电荷。

由于SDS与蛋白质的比例是恒定的,蛋白质在电场作用下会根据其分子量的大小,以一定的速率向阳极迁移。

因此,SDS能够使蛋白质在电泳过程中呈线性迁移,实现蛋白质的分离。

SDS还能够使蛋白质变性。

SDS与蛋白质结合后,通过破坏蛋白质的三级结构,使蛋白质分子变性。

SDS与蛋白质的结合是非常紧密的,不会受到其他条件的影响,如温度、离子浓度等。

这种变性作用使得蛋白质在电泳过程中保持线性结构,从而更好地实现蛋白质的分离和检测。

除了在蛋白质电泳中的应用外,SDS还广泛用于蛋白质的提取和纯化过程中。

在蛋白质提取中,SDS可以破坏细胞膜和细胞器膜,使蛋白质释放出来。

在蛋白质纯化中,SDS可以与蛋白质结合形成复合物,通过电泳或其他分离方法将蛋白质与其他污染物分离开来。

总的来说,SDS在蛋白胶中的作用主要包括溶解蛋白质、改变蛋白质的电荷和使蛋白质变性。

这些作用使得蛋白质能够在电泳过程中以线性方式迁移,并实现蛋白质的分离和检测。

此外,SDS还在蛋白质提取和纯化中发挥着重要的作用。

因此,SDS在蛋白质分析中是不可或缺的重要试剂。

SDS-PAGE电泳的基本原理和应用

SDS-PAGE电泳的基本原理和应用

SDS-PAGE电泳的基本原理和应用1. SDS-PAGE电泳的基本原理1.1 电泳原理SDS-PAGE是一种基于凝胶电泳的蛋白质分析技术。

其中SDS是十二烷基硫酸钠(Sodium Dodecyl Sulfate)的缩写,是一种表面活性剂,能够使蛋白质样品中的蛋白质在电场作用下带负电荷,同时也能够给蛋白质提供线性结构。

1.2 凝胶电泳凝胶电泳是一种利用膠體凝膠將生物物质分开的电泳技术。

在SDS-PAGE中,常使用聚丙烯酰胺凝胶(Polyacrylamide gel)作为电泳介质。

聚丙烯酰胺凝胶是一种聚合物凝胶,通过调整聚丙烯酰胺单体和交联剂的比例,可以调整凝胶的孔径。

1.3 SDS-PAGE的步骤SDS-PAGE主要包括以下几个步骤:•准备样品:将待测蛋白质样品添加SDS、还原剂和草酸,使蛋白质样品变性和解离。

•准备凝胶:制备聚丙烯酰胺凝胶,将之倒入电泳槽中,插入电泳板。

•加载样品:将准备好的样品加入凝胶双孔板中,注意标记样品位置。

•电泳:将准备好的样品盖在电泳槽上,接上电源进行电泳分离。

•显色染色:将分离出的蛋白质进行显色染色,以观察结果。

•图像分析:利用成像仪或凝胶图像分析系统对染色的凝胶图像进行定量分析。

2. SDS-PAGE电泳的应用2.1 蛋白质分析SDS-PAGE电泳是蛋白质分析的基础技术,通过对蛋白质样品进行电泳分离,可以获得蛋白质的表观分子质量、纯度和组成信息。

这对于研究蛋白质结构、功能以及与疾病的关系等具有重要意义。

2.2 分子生物学研究SDS-PAGE电泳在分子生物学研究中有多种应用。

例如,可以用于检测基因表达的变化,比较不同条件下的蛋白质组分等。

此外,SDS-PAGE也可以用于鉴定蛋白质的亚细胞定位、研究蛋白质与其他分子(如核酸、小分子化合物等)的相互作用等方面。

2.3 药物研发SDS-PAGE电泳在药物研发领域也有广泛应用。

例如,可以用于药物候选化合物与蛋白质之间的相互作用研究,评估药物的结合能力和亲合力。

SDS尿蛋白及本周氏电泳的意义

SDS尿蛋白及本周氏电泳的意义
• 该种蛋白40-60℃发生沉淀,加热煮沸时溶解,冷 却后又沉淀。后被证明是单克隆的免疫球蛋白轻链 二聚体。
室温
90~100℃
50~60℃
• 大多数骨髓瘤患者尿中有本周氏蛋白
本周氏蛋白
起因 结果
浆细胞增生症
血液中出现游离轻链 尿液中出现
影响
骨髓瘤 巨球蛋白血症 CLL慢性白血病 MGUS .....
• 溶菌酶 见于局部急性粒细胞白血病
• 血红蛋白 溶血性疾病,血型不合输血
• α1酸性糖蛋白 见于支气管肺癌
• 肌红蛋白
– ……
挤压伤,心肌梗死
• 肾小球性蛋白尿
肾小球滤过膜因炎症、免疫、代谢等因素损伤后滤过膜孔 径增大、断裂和〔或〕静电屏障作用减弱。
根据滤过膜损伤程度及尿蛋白的组分,尿蛋白分为2类:
定量分析蛋白尿
• 筛查
- 溴酚蓝试纸条检测〔> 150 - 200 mg/L 〕:蛋白尿阳性变 蓝,本周氏蛋白时会产生假阴性
• 定量检测方法
- 比浊法〔不建议使用〕 - 建议采用比色法〔焦性没食子酚红,考马斯蓝〕
尿中总蛋白的定量分析 无法检测到
低浓度的本周氏蛋白
特异蛋白测定
• 免疫法定量测定
▪ 肾小球性标志蛋白:
SDS尿蛋白电泳
Sebia
肾脏疾病:慢性隐匿,发病率急剧上升,早期就诊率2030%,局部患者首诊即终末期肾功能衰竭 慢性肾功能衰竭〔CRF〕是各种慢性肾脏病〔CKD〕的最 终结果
CRF并发症严重,死亡率高
严重危害人类健康的全球性的公共卫生问题
肾单位的生理结构和各类生理蛋白
2百万个肾单位
每天过滤180升 的血浆
polymerization

血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳的临床意义

血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳的临床意义

血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳的临床意义
首先,我们需要明确的是,血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳(SDS-PAGE)是一种常用的电泳技术,用于分析血清中不同蛋白质的浓度,从而了解血清中某些特定的蛋白质的变化情况。

它主要用于检测血清中球蛋白,如血清白蛋白,球蛋白,糖蛋白,凝血酶原,凝血抑制因子,C-反应蛋白等。

血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳的临床意义在于,可以帮助医生快速准确地诊断患者的疾病。

例如,血清中白蛋白和球蛋白的浓度可以帮助诊断肝病,糖蛋白的浓度可以帮助诊断糖尿病,而C-反应蛋白的浓度可以帮助诊断肺炎等疾病。

此外,血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳还可以作为一种检测患者身体状况的工具,可以检测患者身体是否发生了某种变化。

这对于监测患者的身体状况和治疗效果非常重要,因为它可以检测出患者身体的细微变化,从而及时调整治疗方案,以改善患者的病情。

总之,血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳的临床意义非常重要,可以帮助医生准确快速的诊断患者的疾病,并作为一种检测患者身体状况的工具,从而及时调整治疗方案,以改善患者的病情。

尿蛋白电泳

尿蛋白电泳

尿蛋白电泳Document number:PBGCG-0857-BTDO-0089-PTT1998尿蛋白电泳-临床意义尿蛋白电泳是指是将尿蛋白按其分子量大小、顺序分为不同组分,应用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳的一种试验。

用尿蛋白类型按分子量分为低分子蛋白、中分子蛋白、高分子蛋白及混合性蛋白四种,此项检查,可以大致推断尿蛋白的来源(是溢出性蛋白尿还是组织破坏性蛋白尿);并可了解肾脏程度的情况,如仅有中分子量尿蛋白,病变较轻。

如低中高分子量尿蛋白均有,说明病变较重。

结论:SDS-AGE尿蛋白电泳技术对患者无创伤,电泳结果有助于判断尿蛋白的来源,分析肾脏损伤的部位以及程度,对临床诊断肾脏疾病具有重要的意义。

(注意:本试验仅表示尿蛋白的来源,与免疫功能检查无关,本院已有尿十项检查,尿电泳可以不做。

强烈建议都做血清蛋白电泳,并了解电泳图样及其意义:记住三个人的形象(潘长江、王玥波、姚明),这是托儿所的教学方法,对于这些年轻、精神正常的人再听不懂、不理解、记不住,真是智商问题。

尿蛋白圆盘电泳(即尿蛋白电泳)尿蛋白圆盘电泳又称为SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳。

2尿蛋白圆盘电泳临床意义区别尿蛋白的分子量,从而了解尿蛋白的形成原因和病变部位。

中分子和大分子的尿蛋白主要由肾小球损伤所致;小分子量尿蛋白为肾小管及其间质病变导致,混合性蛋白尿病变累及肾小管、肾小球和间质。

4尿蛋白圆盘电泳测定的意义是什么( l )正常类型:在白蛋白区带上下两侧,白蛋白为单独组成成分。

( 2 )低分子蛋白尿:主要区带在白蛋白及白蛋白以下,提示肾小管及间质病变或溢出性蛋白尿,如急、慢性肾孟肾炎,间质性肾炎,肾小管酸中毒,中毒性肾病等。

( 3 )中分子蛋白尿、高分子蛋白尿:前者蛋白区带在白蛋白上下附近,后者在白蛋白及以上。

主要反映肾小球病变,如急、慢性肾小球肾炎,肾病综合征,糖尿病肾病和妊娠高血压疾症等。

( 4 )混合性蛋白尿:特征为低分子与高分子蛋白质同时存在,白蛋白为主要区带。

蛋白质sdspage电泳实验报告

蛋白质sdspage电泳实验报告

蛋白质sdspage电泳实验报告蛋白质SDS-PAGE电泳实验报告引言:蛋白质是生命体中最基本的分子之一,它们在细胞的结构和功能中起着重要的作用。

为了研究蛋白质的性质和功能,科学家们开发了许多技术和方法。

其中,SDS-PAGE电泳是一种常用的蛋白质分析方法,它通过电泳的方式将蛋白质按照其分子量大小进行分离和定量。

实验目的:本实验旨在通过SDS-PAGE电泳技术对不同来源的蛋白质进行分析,了解其分子量和纯度,并探讨其应用于蛋白质研究中的意义。

实验步骤:1. 样品制备:收集不同来源的蛋白质样品,如乳清蛋白、鸡蛋清蛋白等。

将样品加入SDS-PAGE样品缓冲液中,加热至100摄氏度,使蛋白质完全变性。

2. 准备电泳胶:根据实验需要,配制相应浓度的聚丙烯酰胺凝胶,加入TEMED和过硫酸铵使其聚合。

3. 装载样品:将变性后的蛋白质样品注入电泳胶槽中,注意不要产生气泡。

4. 电泳:将电泳胶槽连接至电源,设置合适的电压和时间,进行电泳分离。

5. 凝胶染色:将电泳胶取出,用凝胶染色剂染色,使蛋白质带可见。

6. 图像分析:使用分子量标准品作为参照,通过图像分析软件测量蛋白质带的迁移距离,计算其分子量。

实验结果:通过SDS-PAGE电泳实验,我们成功地将不同来源的蛋白质样品分离出来,并得到了清晰的蛋白质带。

根据分子量标准品的迁移距离,我们计算出了各个蛋白质样品的分子量。

讨论:1. 分子量测定:通过SDS-PAGE电泳实验,我们可以准确地测定蛋白质的分子量。

这对于研究蛋白质的结构和功能非常重要,因为不同分子量的蛋白质可能具有不同的生物活性和相互作用方式。

2. 纯度分析:通过观察电泳胶上的蛋白质带的清晰度和数量,我们可以初步评估样品的纯度。

纯度高的样品通常只有一个清晰的蛋白质带,而纯度低的样品则可能有多个模糊的带。

因此,SDS-PAGE电泳可以帮助我们选择纯度较高的蛋白质样品进行后续实验。

3. 应用前景:SDS-PAGE电泳技术在生物医学研究中有着广泛的应用前景。

固定电泳法检测尿本—周蛋白免疫的临床价值

固定电泳法检测尿本—周蛋白免疫的临床价值

固定电泳法检测尿本—周蛋白免疫的临床价值目的采用固定电泳法检测非浓缩尿中的本-周氏蛋白(BJP),对比传统的热沉淀检测法以探讨固定电泳法的临床价值。

方法分别以固定电泳法和热沉淀法对126例申请进行本-周氏蛋白检测的临床晨尿标本进行检测,对于固定电泳法检测呈阳性的标本还须进行尿蛋白定性分型。

结果固定电泳法检测结果显示,126例标本中有22例(17.46%)呈阳性,其中κ型10例,λ型12例,蛋白定性介于-~++之间;热沉淀法检测8例呈阳性。

结论免疫固定电泳法检测本-周氏蛋白特异性和灵敏度较高,应当作为检测本-周氏蛋白的主要方法;热沉淀法由于检测过程影响因素较多而因应减少使用。

标签:本-周氏蛋白;固定电泳法;热沉淀法尿本-周氏蛋白(Bence Jones Protein,BJP)是一种单克隆游离免疫球蛋白,其通常是由恶性浆细胞通过无性繁殖得方式合成,临床上可以作为检测浆细胞和淋巴细胞增殖性疾病的重要指标[1-2]。

浆细胞恶性繁殖时合成大量本-周氏蛋白,实质上是蛋白轻链的合成过程出现紊乱。

BJP由约214个氨基酸分子组成,结构类似于正常的蛋白轻链,具有κ、λ两种轻链。

由于其具有特殊的日沉淀性质,临床上多用热沉淀反和血清蛋白电泳作为尿标本BJP检测的主要手段,但该方法影响因素较多,不具有理想的特异性和灵敏度。

本研究采用固定电泳法检测非浓缩尿标本的BJP,并与传统热沉淀法相对比,探讨固定电泳法的临床应用价值。

1 资料与方法1.1检测标本选取我院2013年6月~12月申请本-周氏蛋白检测的126例尿标本,男71例,女55例,年龄16~78岁,平均年龄(56.2±10.4)岁。

标本均为晨尿,留取于尿杯中置于-20°C环境下保存。

1.2 检测仪器和试剂主要试剂:琼脂糖凝胶板、醋酸盐缓冲液、巴比妥-巴比妥钠缓冲液等。

主要仪器:尿蛋白电泳试剂盒、免疫固定电泳试剂盒、全自动电泳仪、全自动生化分析仪。

电泳中sds的作用

电泳中sds的作用

电泳中sds的作用电泳是一种在生物学和化学实验中常用的分离和分析技术,而十二烷基硫酸钠(SDS)则是电泳过程中不可或缺的一部分。

SDS具有许多重要的作用,包括溶解样品、分离蛋白质、提供质量标准和减少不均一性。

下面将详细介绍SDS在电泳中的作用及其原理。

首先,SDS在电泳中的一个重要作用是溶解样品。

电泳技术往往需要在水溶液中处理样品,而SDS是一种表面活性剂,可以有效地将溶液中的蛋白质分子包裹起来,并使其具有良好的溶解性。

SDS具有疏水性的烷烃尾部和亲水性的二十碳酸酯头部,这使得它能够与蛋白质结合并在水溶液中形成稳定的复合物。

通过与SDS相结合,溶解样品的蛋白质能够在电泳过程中更均匀地分布,并且可以被有效地输送到电泳凝胶中。

其次,SDS在电泳中起到分离蛋白质的作用。

在电泳过程中,SDS 会与蛋白质发生静电相斥的作用,使蛋白质带负电荷。

这样,当电场施加在电泳凝胶上时,带负电荷的蛋白质会朝着阳极迁移。

由于不同蛋白质的分子质量不同,它们在电场下的迁移速率也会不同,从而实现蛋白质的分离。

通过SDS电泳,可以将复杂的混合物中的蛋白质分离并测定其相对分子质量。

此外,SDS也是电泳中提供质量标准的重要组成部分。

为了准确测定蛋白质的相对分子质量,必须使用已知相对分子质量的标准品进行校正。

SDS-PAGE(聚丙烯酰胺凝胶电泳)是一种常用的电泳技术,使用SDS来提供这种质量标准。

在SDS-PAGE中,已知质量的蛋白质标准品被加入到电泳样品中。

通过与标准品一起进行电泳,可以通过相对迁移距离的比较来确定未知样品的相对分子质量。

SDS起到标准化样品迁移速率和提供质量标准的作用,确保了蛋白质测量结果的准确性和可重复性。

最后,SDS还能够减少样品不均一性。

样品中的蛋白质在电泳过程中常常会受到空间限制和电场效应的影响,导致蛋白质迁移的不均匀性。

而SDS的作用是使蛋白质带有相同的电荷密度,从而平衡迁移速率,减少迁移的不均匀性。

这种均匀迁移的效果使得蛋白质能够在电泳过程中更加准确地分离。

sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳 名词解释

sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳 名词解释

sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳是一种常用的蛋白质分离和分析技术,该技术通过在凝胶电泳过程中使用一种带有离子表面活性剂SDS(十二烷基硫酸钠)的聚丙烯酰胺凝胶,可以将蛋白质分子进行线性化处理,从而使其在电场中按照分子质量大小进行迁移,最终实现对蛋白质的分离和分析。

sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术是生物化学和分子生物学领域中最重要的实验技术之一。

它被广泛应用于蛋白质的分离、鉴定和定量分析,并且对于蛋白质的结构和功能研究具有不可替代的作用。

在科学研究、医学诊断和生物工程领域中都有着重要的应用价值。

本篇文章将从以下几个方面来介绍sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,包括其原理、应用、实验操作步骤以及相关的意义和发展趋势。

一、原理sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术的原理主要包括以下几个方面:1. SDS线性化蛋白质:SDS是一种带有强烈负电荷的表面活性剂,在凝胶电泳过程中,SDS可以与蛋白质分子中的亲水残基相结合,并使蛋白质分子呈线性状态,从而使蛋白质的电泳迁移速率与其分子质量成正比。

2. 分子质量分析:在电泳过程中,由于SDS的作用,所有蛋白质分子都被线性化处理,并且蛋白质分子的迁移速率只与其分子质量大小有关,因此可以根据蛋白质在凝胶中的迁移距离来推断其分子质量。

3. 分离效果:由于SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对蛋白质进行了线性化处理,因此不同分子质量大小的蛋白质分子可以在凝胶中得到有效分离,形成清晰的电泳带。

二、应用sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术主要应用于以下几个方面:1. 蛋白质分离与鉴定:通过sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,可以将混合蛋白质样品有效地分离并形成清晰的电泳带,便于后续的蛋白质鉴定和分析。

2. 蛋白质定量:在实验室中,可以利用sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对蛋白质样品进行定量分析,根据样品中的蛋白质含量来确定实验结果。

3. 蛋白质结构和功能研究:通过sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术可以实现对不同蛋白质的分子量测定,为进一步的结构和功能研究提供重要数据支持。

2024尿液本周蛋白检测的临床意义

2024尿液本周蛋白检测的临床意义

2024尿液本周蛋白检测的临床意义骨髓瘤细胞所合成的异常免疫球蛋白,其轻链与重链合成不平衡,因轻链产生过多,使游离Ig轻链(1e)过剩。

1C能自由通过肾小球滤过膜,当浓度超过近曲小管重吸收极限时,可自尿中排出,即本周蛋白尿或轻链尿。

此轻链即本周蛋白(BJP),有怀口人两种。

本周蛋白在pH4.9±0.1条件下,加热至40~60℃时可发生凝固,温度升至90~100°C时溶解,而温度降低至56℃左右,又可重新凝固故称凝溶蛋白。

检测方法1.热沉淀-溶解法:基于本周蛋白在56。

C凝固,100°C溶解的特性,本法灵敏度不高,致使假阴性率高。

2.对甲苯磺酸法(TSA):基于对-甲苯磺酸能沉淀本周蛋白,而不与清蛋白和球蛋白起反应的原理而测定,本法操作简便、灵敏度高,是较敏感的筛检试验方法。

3.蛋白电泳法:经乙酸纤维素膜电泳分离的检测原理,本周蛋白可在球蛋白区带间出现'M"带。

4.免疫电泳:样品用量少、分辨率高、特异性强5.免疫固定电泳:比区带电泳和免疫电泳更敏感。

检测尿游离1C最佳方法是电泳法和免疫固定电泳法,可以判断出1C是K型还是入型或两者均存在。

6.免疫速率散射浊度法:检测速度快、灵敏度高精确度高、稳定好,是目前免疫学分析中比较先进的方法。

注意事项1.使用新鲜尿液标本,尿液浑浊时需离心取上清液。

使用热沉淀-溶解法时,若遇蛋白尿,须先用加热乙酸法沉淀普通蛋白质,然后趁热过滤,取上清液检查。

使用电泳法,需预先浓缩尿液10~50倍。

2.凝溶法应严格控制PH在4.5~5.5范围最适pH4.9±0.1电泳法操作时需同时检测患者及健康人,以正确判断区带位置。

3.本周蛋白过多时在90。

C以上不易完全溶解,需设置对照管进行比较(或将尿液稀释后再测)。

4.摄人如氨基水杨酸、氯丙嗪化学、大剂量青霉素等药物可出现假阳性。

碱性尿、严重尿道感染等可出现假阴性。

5.肌红蛋白、溶菌酶、游离重链等也可出现类似于M蛋白的区带,因此,当乙酸纤维素膜上出现波峰或怀疑有相关疾病时,应进行免疫电泳。

sds聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理方法及应用

sds聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理方法及应用

SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理方法及应用简介SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)是一种常用的蛋白质分离技术,广泛应用于生物化学和分子生物学实验中。

本文将介绍SDS-PAGE的原理、方法以及主要应用领域。

原理SDS-PAGE基于凝胶电泳原理,利用聚丙烯酰胺凝胶作为分离载体,通过电场作用使样品中的蛋白质分子按照分子量大小进行迁移,实现分离。

1.聚丙烯酰胺凝胶:聚丙烯酰胺是一种无色、透明的高分子化合物,它可以形成含有孔隙结构的凝胶。

凝胶中的孔隙大小可以调节,从而实现对不同分子量的蛋白质进行分离。

2.SDS:SDS是一种表面活性剂,具有较强的蛋白质变性能力。

在SDS-PAGE中,SDS能够使蛋白质变性,并赋予蛋白质均等的电荷密度,使其在电场作用下按照分子量进行迁移。

方法下面是SDS-PAGE实验的步骤:1.制备凝胶:将聚丙烯酰胺粉末溶解在缓冲液中,加入过硫酸铵或TEMED催化剂,混合均匀后倒入模具中。

待凝胶凝固后,将其置于凝胶槽中。

2.加载样品:将要分析的蛋白质样品添加至样品孔中。

通常将待测样品与相应的分子量标记物混合,标记物用于估计待测样品的分子量。

3.进行电泳:连接电源,将电流通入凝胶槽。

经过一段时间的电泳,蛋白质开始在凝胶中迁移。

4.染色和可视化:凝胶结束电泳后,可以使用染色剂如Coomassie蓝染色剂对蛋白质进行染色。

然后,使用成像设备或者透光扫描仪对凝胶进行可视化和分析。

应用SDS-PAGE在生物化学和分子生物学领域有广泛的应用:1.蛋白质分离与纯化:通过SDS-PAGE可以将复杂的蛋白质混合物分离为单个蛋白质,从而方便后续的纯化和进一步研究。

2.确定蛋白质相对分子质量:通过将待测样品与分子量标记物一起进行SDS-PAGE分析,可以估计待测样品的相对分子质量。

3.蛋白质定量:通过测量蛋白质在凝胶上的强度可以定量分析蛋白质的含量。

4.蛋白质结构和功能研究:SDS-PAGE可以用于研究蛋白质的亚单位组成、聚合态以及蛋白质之间的相互作用。

sds聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质实验报告

sds聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质实验报告

sds聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质实验报告实验报告:SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质1. 实验目的:本实验旨在使用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对蛋白质进行分离和测定,并研究样品中蛋白质的分子量。

2. 实验原理: SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳是一种常用的蛋白质分离和测定方法。

在此方法中,蛋白质样品首先与SDS(十二烷基硫酸钠)反应,使蛋白质在电泳过程中带有负电荷。

然后,蛋白质样品被加载到聚丙烯酰胺凝胶中,经过电泳分离。

由于SDS的作用,蛋白质在凝胶中的迁移速度与其分子量成反比。

最后,通过染色或蛋白质标记物检测,可以确定蛋白质的相对分子量。

3. 实验步骤: a. 准备SDS聚丙烯酰胺凝胶:按照制备凝胶的方法制备所需的聚丙烯酰胺凝胶,包括配制凝胶溶液、注射样品孔和负载样品等步骤。

b. 样品制备:将待测蛋白质样品加入SDS缓冲液,并加热至高温,使蛋白质与SDS反应,使其带负电荷。

c. 电泳操作:将样品加载到凝胶中,连接电源进行电泳,设定合适的电压和时间进行分离。

d. 染色和可视化:电泳完成后,将凝胶染色以可视化蛋白质条带,常用的染色方法包括银染、共染等。

e. 分析和测定:根据标准蛋白质的移动距离和相对分子量,通过比较和分析样品中蛋白质的相对分子量。

4. 实验结果:在实验中,通过SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分离和染色,观察到样品中的蛋白质条带。

根据标准蛋白质的移动距离和相对分子量,可以推断样品中蛋白质的相对分子量。

实验结果可以用图表形式展示,包括蛋白质条带的位置和相对分子量的估计。

1/ 25. 结果分析与讨论:分析实验结果,比较样品中蛋白质的相对分子量与已知标准蛋白质的相对分子量之间的差异。

根据条带的位置和相对分子量的估计,可以推断样品中的蛋白质组成和含量。

讨论实验中可能出现的误差和不确定性,并提出改进的建议。

6. 结论:根据实验结果,可以得出关于样品中蛋白质的相对分子量和组成的结论。

总结实验的目的、方法和结果,并指出实验的局限性和未来的研究方向。

④法国西比亚电泳临床意义

④法国西比亚电泳临床意义

④法国西比亚电泳临床意义④法国西比亚电泳临床意义法国西比亚全自动HYDRASYS 琼脂糖凝胶电泳仪使用的临床意义一、血清蛋白电泳:主要分为白蛋白、α1、α2、β、γ五个条带,较准确地提示肝病综合症、肾病综合症、单株丙球血症、感染综合症、肿瘤及营养不良。

二、免疫固定蛋白电泳:能确定IgG 、IgM 、IgA 、Kappa 、Lambda ,从而指导临床用药。

该方法速度快,是免疫分析仪的良好互补。

三、本周氏蛋白电泳:能确定Kappa 、Lambda 及游离轻链,是实验室对该种蛋白测试最直观的方法,对多发性骨髓瘤诊断有重大意义。

四、脑脊液电泳:单克隆抗体分析,可对脑内或血脑屏障破坏性疾病有提示,并对多发性硬化症、Tau蛋白、老年性痴呆、寡克隆抗体疾病等有诊断意义。

五、非浓缩性尿蛋白电泳:无须预浓缩,3小时出结果。

根据蛋白质分子量大小判定尿蛋白来源,协助临床明确肾脏损伤部位(肾小球及肾小管),是检查肾脏早期损害很好的实验手段,可用于(鉴别)诊断肾病综合症、高血压、糖尿病、骨髓瘤等。

六、高分辨率尿蛋白电泳较高灵敏度,可提示出尿液中各种蛋白组分的出现,作为尿蛋白筛选的试验。

七、高分辨率脑脊液电泳对脑脊液电泳局部合成的CSF Ig 在高分辨率脑脊液电泳中呈现出“寡克隆区带”作进一步的分析。

八、乳酸脱氢酶同功酶电泳LDH :九、碱性磷酸酶同功酶电泳ALP :十、肌酸激酶同功酶电泳CK :可分MM 、MB 、BB 三个亚型诊断心肌梗死(M1)有助于诊断组织损伤,如肺、肾及肝病患者等。

可分骨型、肝型、肠型、胎盘型,并可提示这些部位的恶性病变。

十一、肌酸激酶亚型同功酶电泳CKII :将CK-MM 分为MM1、MM2、MM3、巨CK (1型)、线粒体巨型CK (2型)等亚型,CK-BB 分为BB1、BB2等亚型,可为临床提供心梗及恶性肿瘤等信息。

十二、糖化血红蛋白电泳:HbA1c 可提示病人过去4~8周血糖水平,为指导用药、评价疗效和判断预后提供有力证据。

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• 大多数骨髓瘤患者尿中有本周氏蛋白
本周氏蛋白
起因 结果
浆细胞增生症
血液中出现游离轻链 尿液中出现
影响
骨髓瘤 巨球蛋白血症 CLL慢性白血病 MGUS .....
肾小管损伤 淀粉样病变 轻链沉淀病
本周氏蛋白阳性患者
• 多表现为肾脏损害 • 极易误诊为慢性肾炎 • 轻链有3种形式出现在血清或尿中
– 正常的轻链过剩
– 其他系统性疾病 (自动免 疫系统, 癌症,…)
– 中毒现象 (重金属, 药物 中毒,…)
• 此时, 我们可以在尿蛋白中发 现白蛋白和其他大分子量蛋白 (大于 67 kDa)。
肾小管的再次吸收功能
• 在肾小球中被过滤掉的小分子蛋白, 分子量小于 67 kDa, 将会在肾小管内被重新吸收 (内吞作用).
尿蛋白检测
初级分析是否有蛋白增加
-直接进行总尿蛋白浓度测定
进一步分析:
蛋白尿类型 本周氏蛋白类型 特异蛋白定量
定量分析蛋白尿
• 筛查
- 溴酚蓝试纸条检测(> 150 - 200 mg/L ):蛋白尿阳性变蓝, 本周氏蛋白时会产生假阴性
• 定量检测方法
- 比浊法(不建议使用) - 建议采用比色法(焦性没食子酚红,考马斯蓝)
99% 的在肾小球内被过滤的蛋白, 都将会被重新吸收利 用. 例如, 18 g/24-h 白蛋白将会被过滤掉;
30 mg/24-h 白蛋白在人的尿液中被发现.
肾小管损伤
• 肾小管损伤将会改变其对小蛋白 分子的重新吸收能力 (小于67 kDa 的蛋白)
• 产生原因
– 遗传原因 (Fanconi syndrome) – 代谢性疾病 (糖尿病, 草酸中毒) – 免疫球蛋白单克隆扩增(myeloma,
Waldenström) – 药物作用(氨基甙类抗生素 ) – 中毒 (金属中毒,氨基甙类)
• 白蛋白 (<30%) 及其它小分子蛋白 (小于 67 kDa) 都将会在尿液中被找 到。
> 67> 6k7Da
kDa
<<6677kDa
kDa
混合性损伤
• 混合性蛋白尿
> 67kDa
< 67kDa
• 肾脏病变同时或相继
累及肾小球和肾小管
时而产生的蛋白尿。
• 各组分所占比例因病 变损害部位不同而不 一致。
尿液的收集和保存
•尿液收集:
- 24小时尿
- 晨尿中段
•要注意是否为间歇性蛋白尿 •保存
- 新鲜尿液 - 4°C保存最多一周 - 注意防腐,避免反复冻融(导致IgG浓度降低) - 检测前离心(10min 3000 rpm)
本周氏蛋白电泳检测对象
• 肾病 • 不明原因水肿 • 尿蛋白阳性 • 血清蛋白电泳提示“M蛋白” • 尿SDS蛋白电泳提示“轻链”存在 • 骨髓瘤患者 • 其他淋巴系统恶性增殖性疾病
– 淋巴细胞白血病 – 浆细胞型白血病
kob-khun
寇布库恩
本周氏蛋白(Bence-Jones
• Henry Bence JPonreost于ei1n8s4,4B年JP在)一个骨髓瘤患者
尿中发现的一种具有特殊凝溶性质的蛋白
• 该种蛋白40-60℃发生沉淀,加热煮沸时溶解, 冷却后又沉淀。后被证明是单克隆的免疫球蛋白轻 链二聚体。
室温
90~100℃
50~60℃
参考泳道 重链 复合轻链
游离轻链
免疫球蛋白
• 免疫球蛋白是机体的正常生理成分
• 多克隆
• 分类
抗游离轻链抗血清结合位置,
不能与完整抗体的轻链结合
– 重链:IgG、IgA、IgM 、 IgD、IgE
– 轻链:κ、λ
– 10种类型
抗复合轻链抗血清结合位置
本周氏蛋白检测结果解析
游离kappa 复合kappa
r
r
肾小管性蛋白
( 67kDa<)
临床病例
MW
2 : Light chain myeloma轻链性骨髓瘤 4 : Macroscopic Hematuria肉眼血尿
5: Overload Proteinuria
with polymerised BJ 本周氏蛋白多聚体
非浓缩尿蛋白电泳的优点
本周氏Bence-Jones蛋白 检测
游离lambda
Lambda Bence Jones protein
(G, A or M) kappa kappa Bence Jones
2 different levels of polymerization
Bence Jones?
1. Bence Jones suspected 1. Bence Jones lambda (polymeri 2. No Bence Jones suspected 2. No Bence Jones 3. Bence Jones suspected 3. Bence Jones lambda 4. Bences Jones suspected 4. Bences Jones kappa (polymeri
溢出性蛋白尿
血浆中相对分子质量较小或阳 性电荷蛋白异常增多
经肾小球滤过,超过肾小管重 吸收能力 形成蛋白尿。
肾小球滤过、肾小管重吸收均 正常。
> 67kDa
< 67 kDa
肾前性(溢出)蛋白尿
常见蛋白种类及疾病
游离轻链
见于多发性骨髓瘤
ß2微球蛋白 见于淋巴组织增生综合征
溶菌酶 见于部分急性粒细胞白血病
注 : (Cystatin C),血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C
5 PROTEINURIE
14.3 KDa 26.6 KDa
67 KDa 150 KDa
肾小球性蛋白尿
血清
Glomerular proteins ( > 67kDa) 肾小球性蛋白
肾小管性蛋白尿
Se
Se
Tubular proteins
尿蛋白电泳 提供更全面的蛋白信息
在 HYDRAGEL 5 PROTEINURIE 凝胶上 主要的尿蛋白 电泳条带区域分析
起源于肾小管 的各类蛋白
(分子量 < 67 kDa)
白蛋白(分子量 : 67 kDa)
起源于肾小球 的各类蛋白
(分子量 > 67 kDa)
Cystatin (MW : 11 kDda) b2-微球蛋白 (MW :12 kDa) 溶菌酶 (MW : 15 kDa)
血红蛋白 溶血性疾病,血型不合输血
α1酸性糖蛋白 见于支气管肺癌
肌红蛋白
……
挤压伤,心肌梗死
7
肾后性蛋白尿
• 来源于肾小管代谢产生的、组织破坏分
解的、炎症或药物刺激泌尿系统分泌的蛋 白质,进入尿液而形成的蛋白尿。
肾性蛋白尿
• 肾小球性蛋白尿 肾小球滤过膜因炎症、免疫、代谢等因素损伤后滤过膜
孔径增大、断裂和(或)静电屏障作用减弱。 根据滤过膜损伤程度及尿蛋白的组分,尿蛋白分为2类:
肾小球过滤
• 大分子量蛋白(主要为>67kDa)无法透过肾小球进入 肾小管
• 其他决定各种蛋白被过滤的因素 : 分析形状, 带电量, 血 浆浓度.
• 还有一些血液动力学因素可影响蛋白的过滤.
肾小球损伤
• 原因
– 糖尿病
– 感染性损伤 (细菌感染, 乙肝患者, 水痘, 梅毒, 单 核白血球增多症 ,…)
(1)选择性蛋白尿(selective proteinuria):相对分子质量 中等的清蛋白为主
(2)非选择性蛋白尿(non-selective proteinuria):以相对 分子质量较大和中等的蛋白质同时存在为主。反映肾小球毛细 管壁有严重断裂和损伤。 • 肾小管性蛋白尿
肾小管在受到感染、中毒损伤或继发于肾小球疾病时, 因重吸收能力降低或抑制,而出现的以相对分子质量较小的蛋 白为主的蛋白尿。
• 慢性肝病、红斑狼疮等多克隆增殖ห้องสมุดไป่ตู้疾病
– 伴随轻链 – 单一轻链
本周氏蛋白免疫固定电泳方法
仪器: Sebia 琼脂糖凝胶电泳仪 试剂:本周氏蛋白电泳试剂
方法: 点样,电泳,加抗体反应, 条带检测
ELP 泳道: 固定液 GAM 泳道: 抗IgG .A.M重链抗血清 K 泳道: 抗 轻链抗血清 L 泳道: 抗 轻链抗血清 Kfree 泳道: 抗游离 轻链抗血清 L free 泳道: 抗 游离轻链抗血清
视黄醇结合蛋白(MW : 21 kDa)
游离轻链 (MW 25 kDa) a1-微球蛋白 (MW : 33 kDa) 游离轻链的二聚体
(MW 50 kDa)
转铁蛋白 (MW : 80 kDa)
Ig G (MW : 160 kDa) Ig A (MW : 165 kDa) 结合珠蛋白
a2-巨球蛋白 (MW :900 kDa) 加样位置
尿中总蛋白的定量分析 无法检测到
低浓度的本周氏蛋白
特异蛋白测定
•免疫法定量测定
▪ 肾小球性标志蛋白:
Albumin, IgG, Transferrin
▪ 肾小管性标志蛋白:
b 2 microglobulin, RBP, a1 microglobulin
如果需要更多的特异蛋白信息,需要 更多的测试
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