尿蛋白免疫电泳
尿蛋白电泳正常值
尿蛋白电泳正常值
尿蛋白电泳是一种用于分析尿液中蛋白质成分的实验室技术。
它可以帮助医生了解肾脏疾病的类型和严重程度。
尿蛋白电泳的正常值通常是根据实验室的具体检测方法和设备而定的,以下是一般情况下的参考范围:
1. 白蛋白:尿蛋白电泳中,白蛋白的正常值通常在 0-30%之间。
白蛋白是尿液中最常见的蛋白质,正常情况下,尿液中的白蛋白含量较低。
2. 球蛋白:球蛋白的正常值通常在 0-15%之间。
球蛋白包括多种类型,如免疫球蛋白等。
正常情况下,尿液中的球蛋白含量也较低。
3. 肾小管性蛋白:肾小管性蛋白的正常值通常小于 1%。
肾小管性蛋白是由肾脏肾小管细胞分泌的蛋白质,正常情况下,其在尿液中的含量很低。
需要注意的是,这些参考范围可能会因不同的实验室和检测方法而有所差异。
因此,具体的正常值应该参考你所在实验室提供的参考范围。
如果尿蛋白电泳结果超出正常范围,可能提示存在肾脏疾病或其他相关疾病。
医生会结合其他临床表现和检查结果进行综合评估,并制定相应的治疗方案。
如果你对自己的尿蛋白电泳结果有疑问或担忧,建议咨询医生或实验室专业人员,他们可以为你提供更详细和准确的解释。
非浓缩尿蛋白电泳法和免疫散射比浊法测定尿免疫球蛋白G的比较
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蛋白尿检测方法有什么【健康小知识】
蛋白尿检测方法有什么文章导读蛋白尿其实是肾病的主要症状,肾病给人体带来的伤害是很大的,患者在进行常规治疗的同时,最好还要在饮食上多加注意,这样才可以让疾病更快的恢复,对于一些病情比较严重的患者,最好是吃一些高质量的低蛋白食物,这样就可以有效的缓解症状,从而还会让患者的机体抵抗力得到提高,那么蛋白尿检测方法有什么呢?第一,蛋白尿检测方法有什么?临床上常用的方法有以下3种:尿蛋白定性试验:通常采用蛋白试纸法、磺基柳酸法、加热醋酸法3种方法。
正常情况下,尿蛋白定性试验呈阴性。
但此种检查方法易受一些因素的影响,可致假性结果,如尿酸盐含量高时,尿呈酸性反应,蛋白试纸法结果较实际情况低,磺基柳酸法易呈假阳性;大量使用青霉素时,磺基柳酸法易呈假阳性反应;使用磺造影剂时,磺基柳酸法、加热醋酸法均可出现假阳性反应;当尿呈强碱性时,假性结果更多,或出现蛋白试纸法假阴性反应,或出现磺基柳酸法和加热醋酸法的假阴性反应。
当尿蛋白仅为一些特殊蛋白质时,蛋白试纸法和磺基柳酸法均不敏感。
因此,在进行尿蛋白定性时,应综合各种因素,具体情况具体分析,选择适宜的方法。
尽管定性试验比较方便,但有时难以反应蛋白尿的实际情况,有条件时,最好进行定量检查。
第二,尿蛋白定量测定:一般进行ECTkey=24小时尿蛋白定量 target=_blank>24小时尿蛋白定量检测。
使用的方法比较多,有些方法虽然比较精确,如凯氏定氮法、双缩脲法等,但操作很复杂。
目前临床多采用简易的半定量法,如艾司巴赫氏定量法、磺基柳酸比浊定量法。
24小时尿蛋白定量在0.15~0.5克之间为微量蛋白尿,在0.5~1克之间为轻度蛋白尿,在1~4克之间为中度蛋白尿,大于4克(有学者定为3.5克)为重度蛋白尿。
蛋白尿检测方法有什么?尿蛋白电泳分析:常用的方法有醋酸纤维薄膜电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、尿蛋白免疫电泳等方法。
该方法主要从确定尿中蛋白质的种类出发,通过区分不同尿蛋白的种类,对某些疑难病症如多发性骨髓瘤、重链病等有诊断和鉴别诊断的意义。
尿蛋白电泳范围
尿蛋白电泳范围
尿蛋白电泳可以显示尿蛋白中,白蛋白占60%左右甚至更多,其他小分子蛋白,例如β2微球蛋白、溶菌酶和组织蛋白占的不到30%-40%。
如果超过了40%,说明这个尿蛋白不是由于肾小球引起的,也就是它的主角不是肾小球损伤造成的,而是由于其它原因造成的,例如肾小管损伤造成的尿蛋白阳性,它是以β2微球蛋白为主,可以超过50%以上。
如果某些多发性骨髓瘤或者单克隆免疫球蛋白血症在尿液中出现异常,那么尿蛋白分析可以显示小分子量蛋白占主角,而不是白蛋白占主角。
尿蛋白电泳及尿本周蛋白检测在肾病中的应用
4• 浆细胞 合成抗体蛋白,即免疫球蛋白.
Immunoglobulin
5• 免疫球蛋白 在免疫系统中被用来识别和消 灭如细菌或病毒等外源物
正常浆细胞
正常免疫球蛋白的合成 骨髓瘤或其他恶性浆细胞增生
Normal Immunoglobulin
• 电泳技术就是利用在电场的 作用下, 由于待分离样品中 各种分子带电性质以及分子 本身大小, 形状等性质的差 异, 使带电分子产生不同的 迁移速度, 从而对样品进行 分离, 鉴定或提纯的技术.
• 在生化检测中, 主要用于分 离各类蛋白分子.
正常的电泳图谱
经过毛细管电泳后, 血清蛋白将会被分离成6个条带并同时标注出检测结果
低免疫球蛋白血症
如果血清中未见异常,建议 做尿本周氏蛋白检测
原因: 先天免疫缺陷, 免疫抑制治疗过程中, 游离轻链病)
通过对血清蛋白电泳结果中出现的单克隆免疫球蛋白检测, 对免疫球蛋白疾病进行诊断
有症状型性免疫球蛋白疾病: - 多发性骨髓瘤 - 巨球蛋白血症 - 非霍奇金淋巴瘤 - 慢性淋巴细胞白血病 - 重链病 - 淀粉样病变
出现的单克隆M蛋白
正常免疫球蛋白 的电泳结果图谱 Normal Proteinogram
单克隆免疫球蛋 白的电泳图谱
Proteinogram showing Monoclonal peak
多发性骨髓瘤
人群分布:
多发性骨髓瘤仅次于白血病, 是目前发病率排第二位 的恶性血液肿瘤
占所有肿瘤的1% (每年超过15 000人死于该疾病) 欧洲目前有60 000患者, 世界范围有250 000 因浆细胞过度增殖,继而影响骨髓
固定电泳法检测尿本—周蛋白免疫的临床价值
固定电泳法检测尿本—周蛋白免疫的临床价值目的采用固定电泳法检测非浓缩尿中的本-周氏蛋白(BJP),对比传统的热沉淀检测法以探讨固定电泳法的临床价值。
方法分别以固定电泳法和热沉淀法对126例申请进行本-周氏蛋白检测的临床晨尿标本进行检测,对于固定电泳法检测呈阳性的标本还须进行尿蛋白定性分型。
结果固定电泳法检测结果显示,126例标本中有22例(17.46%)呈阳性,其中κ型10例,λ型12例,蛋白定性介于-~++之间;热沉淀法检测8例呈阳性。
结论免疫固定电泳法检测本-周氏蛋白特异性和灵敏度较高,应当作为检测本-周氏蛋白的主要方法;热沉淀法由于检测过程影响因素较多而因应减少使用。
标签:本-周氏蛋白;固定电泳法;热沉淀法尿本-周氏蛋白(Bence Jones Protein,BJP)是一种单克隆游离免疫球蛋白,其通常是由恶性浆细胞通过无性繁殖得方式合成,临床上可以作为检测浆细胞和淋巴细胞增殖性疾病的重要指标[1-2]。
浆细胞恶性繁殖时合成大量本-周氏蛋白,实质上是蛋白轻链的合成过程出现紊乱。
BJP由约214个氨基酸分子组成,结构类似于正常的蛋白轻链,具有κ、λ两种轻链。
由于其具有特殊的日沉淀性质,临床上多用热沉淀反和血清蛋白电泳作为尿标本BJP检测的主要手段,但该方法影响因素较多,不具有理想的特异性和灵敏度。
本研究采用固定电泳法检测非浓缩尿标本的BJP,并与传统热沉淀法相对比,探讨固定电泳法的临床应用价值。
1 资料与方法1.1检测标本选取我院2013年6月~12月申请本-周氏蛋白检测的126例尿标本,男71例,女55例,年龄16~78岁,平均年龄(56.2±10.4)岁。
标本均为晨尿,留取于尿杯中置于-20°C环境下保存。
1.2 检测仪器和试剂主要试剂:琼脂糖凝胶板、醋酸盐缓冲液、巴比妥-巴比妥钠缓冲液等。
主要仪器:尿蛋白电泳试剂盒、免疫固定电泳试剂盒、全自动电泳仪、全自动生化分析仪。
尿微量总蛋白 测定原理
尿微量总蛋白测定原理尿微量总蛋白(urine microalbumin)是指尿液中微量存在的白蛋白,通常用于评估肾脏疾病的早期诊断和监测疾病进展情况。
测定尿微量总蛋白的原理主要是利用免疫学方法,通过特定的试剂与蛋白质发生免疫相应,从而定量测定尿液中微量蛋白的浓度。
本文将从测定尿微量总蛋白的原理、常用的测定方法和临床应用等方面进行详细介绍。
一、测定原理尿微量总蛋白的测定原理主要是利用免疫学方法,即抗原与抗体的免疫相应原理。
通常采用免疫层析、免疫电泳、免疫荧光检测、免疫比浊法等方法进行测定。
1.免疫层析法免疫层析法是通过将尿样添加特定的抗体或抗原,使之与待测蛋白进行特异性结合,然后通过一系列步骤来分离和测定目标蛋白。
其原理是将试样通过一定具有特异性的固相支持介质,使之与固定的抗体或抗原结合,并随着尿样中存在的微量总蛋白一起被分离出来。
2.免疫电泳法免疫电泳法是将待测尿样加入到具有孔隙性的凝胶中,然后加上特异性的抗体或抗原,使之与待检蛋白结合,再通过电泳方法分离并测定蛋白的浓度。
3.免疫荧光检测法免疫荧光检测法是利用荧光标记的抗体或抗原与待测样品中的蛋白质特异结合,然后通过使用激光或紫外光源来激发荧光染料的发光信号,最后测定光信号的强度来计算出蛋白质的浓度。
4.免疫比浊法免疫比浊法是将待测尿样与特定的抗体或抗原结合,形成抗原-抗体复合物,然后通过测定溶液的浑浊度来计算蛋白质的浓度。
通过上述免疫学方法,可以快速、准确地测定尿液中微量总蛋白的浓度,具有较高的敏感性和特异性,能够有效的评估肾脏损伤的程度,为临床诊断和治疗提供重要依据。
二、常用的测定方法尿微量总蛋白的测定方法主要包括半定量法和定量法两种,其中定量法的测定结果更为准确。
1.半定量法半定量法通常采用尿液尿蛋白/肌酐比值进行测定,这是一种简便快速的半定量测定方法。
可以通过免疫比浊法或免疫电泳法等进行半定量分析,但由于其测定结果受尿液稀释度的影响较大,准确性较差。
尿蛋白电泳
尿蛋白电泳Document serial number【KKGB-LBS98YT-BS8CB-BSUT-BST108】尿蛋白电泳-临床意义尿蛋白电泳是指是将尿蛋白按其分子量大小、顺序分为不同组分,应用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳的一种试验。
用尿蛋白类型按分子量分为低分子蛋白、中分子蛋白、高分子蛋白及混合性蛋白四种,此项检查,可以大致推断尿蛋白的来源(是溢出性蛋白尿还是组织破坏性蛋白尿);并可了解肾脏程度的情况,如仅有中分子量尿蛋白,病变较轻。
如低中高分子量尿蛋白均有,说明病变较重。
结论:SDS-AGE尿蛋白电泳技术对患者无创伤,电泳结果有助于判断尿蛋白的来源,分析肾脏损伤的部位以及程度,对临床诊断肾脏疾病具有重要的意义。
(注意:本试验仅表示尿蛋白的来源,与免疫功能检查无关,本院已有尿十项检查,尿电泳可以不做。
强烈建议都做血清蛋白电泳,并了解电泳图样及其意义:记住三个人的形象(潘长江、王玥波、姚明),这是托儿所的教学方法,对于这些年轻、精神正常的人再听不懂、不理解、记不住,真是智商问题。
1.6M 1.85M2.26M尿蛋白圆盘电泳(即尿蛋白电泳)尿蛋白圆盘电泳又称为SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳。
2尿蛋白圆盘电泳临床意义区别尿蛋白的分子量,从而了解尿蛋白的形成原因和病变部位。
中分子和大分子的尿蛋白主要由肾小球损伤所致;小分子量尿蛋白为肾小管及其间质病变导致,混合性蛋白尿病变累及肾小管、肾小球和间质。
4尿蛋白圆盘电泳测定的意义是什么( l )正常类型:在白蛋白区带上下两侧,白蛋白为单独组成成分。
( 2 )低分子蛋白尿:主要区带在白蛋白及白蛋白以下,提示肾小管及间质病变或溢出性蛋白尿,如急、慢性肾孟肾炎,间质性肾炎,肾小管酸中毒,中毒性肾病等。
( 3 )中分子蛋白尿、高分子蛋白尿:前者蛋白区带在白蛋白上下附近,后者在白蛋白及以上。
主要反映肾小球病变,如急、慢性肾小球肾炎,肾病综合征,糖尿病肾病和妊娠高血压疾症等。
免疫固定电泳法检测尿本-周蛋白的临床应用
免疫固定电泳法检测尿本-周蛋白的临床应用曾祝伦;张司兰;熊曼【摘要】目的探讨免疫固定电泳检测尿本-周蛋白(BJP)的临床价值.方法采用免疫固定电泳及热沉淀反应法检测尿液BJP,并比较二者的灵敏度和特异性.结果 140例晨尿样本用免疫固定电泳检测,检出尿BJP阳性42例,其中IgG κ型BJP 26例,IgM λ型BJP 16例;用热沉淀反应法检测,检出尿BJP阳性24例.76例十二烷基硫酸钠-琼脂糖凝胶电泳(SDS-AGE)提示尿蛋白异常的样本经免疫固定电泳的BJP 检出率为55.3%,热沉淀反应法的检出率为31.6%.结论免疫固定电泳检测尿BJP 具有较高的灵敏度和特异性.%Objective To investigate the clinical value of immunofixation electrophoresis detection of urine Bence-Jones protein (BJP). Methods Immunofixation electrophoresis and thermal precipitation reaction were utilized to detect urine BJP,and their sensitivity and specificity were compared. Results 140 samples of morning urine were detected by immunofixation electrophoresis,42 samples of them were found to be BJP positive, with 26 cases of IgG κ type BJP and 16 cases of IgM λ type BJP. The same 140 samples were detected by thermal precipitation reaction,and 24 samples of them were found to be BJP positive. 76 samples with abnormal urine protein indicated by sodium dodecyl sulfate-agarose gel electrophoresis(SDS-AGE) were subjected to immunofixation e-lectrophoresis and thermal precipitation reaction, respectively, and their BJP detection rate was 55. 3% and 31. 6% , respectively. Conclusion Immunofixation electrophoresis possesses higher sensitivity and specificity for urine BJP detection.【期刊名称】《重庆医学》【年(卷),期】2012(041)008【总页数】2页(P762-763)【关键词】本周蛋白;免疫电泳;免疫球蛋白类【作者】曾祝伦;张司兰;熊曼【作者单位】重庆医科大学附属第二医院检验科,400010;重庆市璧山县人民医院心血管内科,402760;重庆医科大学附属第二医院检验科,400010【正文语种】中文尿本-周蛋白(Bence-Jones protein,BJP)是监测浆细胞病和B淋巴细胞增殖性疾病的一个重要指标,其阳性结果与多发性骨髓瘤的发病密切相关。
尿蛋白的检测方法?
尿蛋白的检测方法?发表时间:2019-07-01T11:20:37.883Z 来源:《医师在线》2019年4月7期作者:李瑞珍[导读] 对于有些人而言,许多疾病发生时无法被提前察觉,只有出现某些疾病症状时,才会后知后觉,但是产生疾病的具体原因我们却无从得知。
李瑞珍(都江堰市人民医院检验科;四川成都611830)对于有些人而言,许多疾病发生时无法被提前察觉,只有出现某些疾病症状时,才会后知后觉,但是产生疾病的具体原因我们却无从得知。
这时就需要我们通过专业性的检查才能知道具体的病症。
通过对尿蛋白的有效检查,可以明确检测患者肾脏损伤的具体情况,进而采取有效治疗措施来降低肾脏损失所带来的危害。
基于此,本文针对尿蛋白的检测方法进行分析研究。
什么是尿蛋白?所谓尿蛋白,是指人体尿液经过加热酸化变浑浊而被检测的物质。
在通常情况下,正常人每次随机尿液中蛋白质含量为0至80mg/L,这也被称之为生理性尿蛋白,而在常规检验中结果为阴性。
当其含量超过150mg/24h或超过100mg/L,此时尿常规检验尿蛋白阳性,称之为蛋白尿。
此外,人体在情绪激动、剧烈运动、寒冷、炎热等状态下,尿蛋白的含量会略有提升,这时被称之为一过性尿蛋白,这种情况下,尿蛋白含量会在数个小时或者几天后恢复到正常状态。
那么尿蛋白检测到底有多重要?有人认为尿检中持续有蛋白质也无关紧要,没有感觉身体出现不适或者是不良反应,就算尿液中含有蛋白质,认为根本不需要治疗,这种观念是错误的。
在正常情况下,普通人尿液中式不会出现蛋白质的,因为肾脏具备蛋白质过滤功能,只有小分子物质才能通过,如α2-微球蛋白、β2-微球蛋白、溶菌酶等,所以当尿液中出现蛋白质时,这代表着人体存在蛋白质的流失,并且人体肾小球可能受到不同程度的损害。
而如若尿蛋白长期流失,则会导致肾脏超负荷运作,进而造成严重的损害。
据相关研究表明,尿蛋白的产生是引发尿毒症产生的主要危险因素之一,对人体肾脏造成严重的毒害。
血清蛋白电泳和免疫固定电泳
血清蛋白电泳和免疫固定电泳1. 什么是血清蛋白电泳?血清蛋白电泳,这个名字听起来就像是一门高深的科学,其实它就像是我们用显微镜去看看血液中的“秘密”。
简单来说,血清蛋白电泳是一种实验室检测方法,能够帮助医生了解你血液中蛋白质的组成。
就像一场大型的蛋白质派对,不同的蛋白质在这里各显神通。
通过这个检测,医生可以识别出你身体里哪些蛋白质在欢呼雀跃,哪些又可能在偷偷藏着不发声。
1.1 蛋白质的角色在我们的身体里,蛋白质可是个“大人物”。
它们负责运输营养、维持免疫、修复组织等重要工作。
想象一下,如果一个城市里没有警察、医生和运输工人,那可真是乱成一团。
蛋白质的作用就像这些角色一样,缺一不可。
1.2 电泳的原理那么,电泳是怎么回事呢?其实,它就像在跑道上比赛,蛋白质根据自己的“性格”分成不同的组。
有些蛋白质爱往前冲,有些则慢悠悠地走。
电泳的过程,就是在电场的“拉扯”下,让这些蛋白质在胶体里排成队,最终形成一幅“蛋白质的风景画”。
这样,医生就能通过这些“风景”,看出蛋白质的种类和数量。
2. 免疫固定电泳的妙用接下来,咱们说说免疫固定电泳。
听起来是不是又复杂又高大上?别担心,这也是个很有意思的检测方法。
它主要用来查找某些特定的抗体和抗原,帮我们了解免疫系统的情况。
简单来说,就像是在搜寻一位失踪的明星,免疫固定电泳就是我们的“侦探”。
2.1 抗体和抗原的故事抗体和抗原可是一对“欢喜冤家”。
抗原就像是外来的“入侵者”,而抗体则是我们的“保护者”。
当抗原进入身体,抗体就会赶来帮忙。
这种相互作用就像是打了一场“攻防战”。
免疫固定电泳就是要看这场战斗的结果,找到那些表现突出的抗体。
2.2 临床应用在临床上,免疫固定电泳可以帮助诊断一些疾病,比如多发性骨髓瘤或淋巴瘤等。
通过这项检测,医生能够清楚地看到你的免疫系统在干什么,是否在积极应对外来的挑战。
换句话说,免疫固定电泳就像给你的免疫系统做了一次全面的“体检”。
3. 二者的关系与区别虽然血清蛋白电泳和免疫固定电泳看起来差不多,但它们其实各有千秋。
免疫蛋白电泳临床意义
免疫蛋白电泳临床意义免疫蛋白电泳是一种通过电泳法来检测体内免疫蛋白的方法。
它主要适用于诊断多种免疫性疾病和肝病等,具有重要的临床意义。
下面我将从以下几个方面来分步骤阐述免疫蛋白电泳的临床意义。
一、发现多种免疫性疾病免疫蛋白电泳经常用于发现多种免疫性疾病。
免疫蛋白分为五种类型,分别是IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。
每种抗体都是一种免疫球蛋白,免疫球蛋白是免疫系统在抵御疾病时产生的关键组成部分。
当人体产生了免疫球蛋白,免疫蛋白电泳可以帮助确定其种类和浓度,有助于诊断免疫球蛋白缺失的疾病,如多发性骨髓瘤等。
二、评估肝病免疫蛋白电泳还可以评估肝病的状况。
肝脏是体内免疫球蛋白的主要合成部位,一些与免疫球蛋白相关的肝病(如免疫性肝炎)可能通过免疫蛋白电泳来检测。
通过免疫蛋白电泳,临床医师可以评估患者肝脏功能的状况和风险,以此来制定更好的治疗方案。
三、跟踪病人的治疗状况免疫蛋白电泳可以用于跟踪病人的治疗状况。
在某些免疫性疾病的治疗期间,患者体内免疫球蛋白的种类和数量可能会发生变化。
通过免疫蛋白电泳,临床医生可以监测患者治疗后免疫球蛋白水平的变化,并确定治疗是否有效。
四、指导疾病的预防免疫球蛋白是我们身体的主要防御机制,它可以帮助我们抵御各种疾病的入侵。
通过免疫蛋白电泳,临床医生可以帮助病人决定什么时候应该接种某些疫苗,以最大程度地保护他们不受疾病的侵害。
总之,免疫蛋白电泳可以帮助临床医师确定免疫球蛋白的种类、浓度和分布,对于诊断多种免疫性疾病和肝脏疾病具有非常重要的意义。
此外,它还可以用于帮助跟踪病人治疗状况和指导疾病的预防。
因此,免疫蛋白电泳在临床中得到广泛应用,在保护患者健康和治疗疾病方面发挥了重要作用。
sds尿蛋白及本周氏电泳的意义
– 伴随轻链 – 单一轻链
本周氏蛋白免疫固定电泳方法
仪器: Sebia 琼脂糖凝胶电泳仪 试剂:本周氏蛋白电泳试剂
方法: 点样,电泳,加抗体反应, 条带检测
ELP 泳道: 固定液 GAM 泳道: 抗IgG .A.M重链抗血清 K 泳道: 抗 轻链抗血清 L 泳道: 抗 轻链抗血清 Kfree 泳道: 抗游离 轻链抗血清 L free 泳道: 抗 游离轻链抗血清
99% 的在肾小球内被过滤的蛋白, 都将会被重新吸收利 用. 例如, 18 g/24-h 白蛋白将会被过滤掉;
30 mg/24-h 白蛋白在人的尿液中被发现.
肾小管损伤
• 肾小管损伤将会改变其对小蛋白 分子的重新吸收能力 (小于67 kDa 的蛋白)
• 产生原因
– 遗传原因 (Fanconi syndrome) – 代谢性疾病 (糖尿病, 草酸中毒) – 免疫球蛋白单克隆扩增(myeloma,
本周氏蛋白(Bence-Jones
• Henry Bence JPonreost于ei1n8s4,4B年JP在)一个骨髓瘤患者
尿中发现的一种具有特殊凝溶性质的蛋白
• 该种蛋白40-60℃发生沉淀,加热煮沸时溶解, 冷却后又沉淀。后被证明是单克隆的免疫球蛋白轻 链二聚体。
室温
90~100℃
50~60℃
尿蛋白检测
初级分析是否有蛋白增加
-直接进行总尿蛋白浓度测定
进一步分析:
蛋白尿类型 本周氏蛋白类型 特异蛋白定量
定量分析蛋白尿
• 筛查
- 溴酚蓝试纸条检测(> 150 - 200 mg/L ):蛋白尿阳性变蓝, 本周氏蛋白时会产生假阴性
• 定量检测方法
尿蛋白电泳操作规程
尿蛋白电泳操作规程一.项目名称尿蛋白电泳(HYDRAGEL PROTEINURIE)二.检验方法名称SDS-琼脂糖凝胶区带电泳三.方法学原理在含有多量的阴离子去垢剂十二烷基磺酸钠(SDS)液体中,蛋白质可与其连接,形成SDS —蛋白质复合物。
这种复合物蛋白本身的构造已经破坏,他们都表现出相同的构造和相同的负电荷。
当这种SDS—蛋白质复合物在具有适当筛选功能的介质中电泳时,如在含高浓度琼脂糖的HYDRAGEL 5 PROTEINURIE凝胶上电泳时,蛋白质按它们的分子量大小进行分离。
在HYDRAGEL 5 PROTEINURIE凝胶上能清楚分离来源于肾小管(分子量<65—70Kda)还是来源于肾小球(分子量>65-70KDa)的蛋白质,因此尿蛋白不仅能被检测到,而且能对蛋白来源进行分类(肾小球,肾小管性和混合性)。
四.方法学溯源自1930年由Tiselius发现了移界电泳(moving boundary eectrophoresis),而后,这种技术的各种局限性已逐渐被区带电泳(zone elecrrophoresis)所克服,区带电泳的条件和支持介质的选择是电泳成败的关键。
五.仪器(一)型号:SEBIA HYDRASYS (PN1210)(二)分析和计算参数:1.处理量:约14个样本/小时2.所需样本量:5ul3.检验时间:约50分钟4.重复性:有良好的批内和批间重复性5.电泳参数:电压0-300V(可选至3000V)电流0-500mA功率0-100W六.试剂及配套品(一)试剂1.HYDRAGEL 5 PROTEINURIE试剂盒(1)商标:SEBIA(2)包装规格:50测试(3)货号:PN41152.脱色液(1) 商标:SEBIA(2)包装规格:Pack for 10×100ml(3) 货号:PN4540(4)成分:柠檬酸3.洗涤液(1)商标:SEBIA(2)包装规格:Pack for 10×80ml(3)货号:PN4541(4)成分:叠氮钠(二)配套品尿蛋白质控(1) 商标:SEBIA(2)包装规格:Pack for 5×1ml(3)货号:PN4781七.操作步骤㈠开机,启动电泳仪.㈡打开密闭的凝胶片盒,取出凝胶片并放在关闭的凝胶片盒上,用滤纸条轻柔、迅速地吸去凝胶片槽孔中的多余水分,在每一槽孔内加入5ul已处理的尿样本,注意不能有气泡,在每次加样前应擦拭移液器尖端,在整个加样过程千万不可触及槽孔的底部。
固定电泳法检测尿本-周蛋白的应用分析
固定电泳法检测尿本-周蛋白的应用分析摘要】目的:探究固定电泳法在尿本-周蛋白(BJP)检测中的应用价值。
方法:选择2017年3月—2018年5月在我院进行住院治疗的125例患者晨尿样本,分别应用免疫固定电泳及热沉淀反应法对尿液中BJP进行检测,比较两种检测方法的灵敏度与特异性。
结果:免疫固定电泳检测结果提示BJP阳性35例;热沉淀反应法检测提示尿中BJP阳性19例;63例十二烷基硫酸钠-琼脂糖凝胶电泳(SDS-AGE)提示尿蛋白异常的样本经免疫固定电泳的BJP检出率为54.28%,热沉淀反应法的检出率为30.16%。
结论:免疫固定电泳检测尿BJP,具有较高灵敏度与特异性。
【关键词】本-周蛋白;固定电泳法;灵敏度与特异性;价值分析【中图分类号】R446.12 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2018)29-0372-01临床医师多应用血清蛋白电泳、免疫球蛋白定量方法监测M蛋白,但在多种因素的作用下,其特异性与灵敏度相对较低,本文探讨免疫固定电泳法在尿BJP中的应用价值,本文做出如下详细论述。
1.材料与方法1.1 试剂和仪器乙酸缓冲液、磺基水杨酸、十二烷基硫酸钠-琼脂糖凝胶电泳(SDS-AGE)电泳试剂盒、免疫固定电泳试剂盒,仪器以Sebia全自动电泳仪、罗氏Cobas8000全自动生化分析仪等为主。
1.2 样本取2017年3月—2018年5月在我院进行住院治疗的125例患者晨尿样本,在3~8℃环境下保存,7d内统一先行检测十二烷基硫酸钠-琼脂糖凝胶(SDS-AGE)电泳,收集其中有异常区带的尿标本。
1.3 检测方法(1)固定电泳法的应用流程:取适量缓冲液,将蛋白质溶入其中,实现电泳分离处理。
取等量晨尿样本分别行免疫固定电泳于热沉淀反应试验。
对轻链2种血清进行免疫固定之前实施有效的分离处理干预,借用固定的条带将电泳后蛋白质的整个面貌呈现处理,并把其设为参考泳道。
沉淀后的蛋白质染色环节应用的染色剂为结晶紫后,利用酸性溶液把多余的染料冲洗掉,对最后获得的监测结果仅扫描处理。
免疫固定电泳结果解读
免疫固定电泳结果解读
免疫固定电泳是一种常用的蛋白质分析方法,它可以用于检测血清中
的抗体和其他免疫球蛋白。
在该方法中,蛋白质样品被电泳分离后,
与特定的抗体结合,然后用染色剂着色以观察样品中是否存在特定的
免疫球蛋白。
以下是对免疫固定电泳结果的解读。
在分析免疫固定电泳结果时,首先要注意每个电泳谱图上的“蛋白带”数量和密度。
蛋白带的数量代表样品中存在的免疫球蛋白的种类数目,而蛋白带的密度则反映了免疫球蛋白的浓度。
其次,要注重寻找与已知免疫球蛋白相符的蛋白带。
免疫固定电泳谱
图上的每个蛋白带代表一个特定的蛋白质分子,因此,与已知免疫球
蛋白相符的蛋白带通常具有与之相似的密度和位置。
最后,需要注意蛋白带的迁移速度和排列顺序。
不同种类的蛋白质具
有不同的电荷和大小,因此它们在电场中的迁移速度和顺序也不同。
免疫固定电泳结果可以通过比较不同样品的谱图来确定迁移速度和顺
序是否存在差异,这有助于识别免疫球蛋白的种类和数量。
总之,解读免疫固定电泳结果需要综合考虑蛋白带的数量、密度、迁
移速度和排列顺序等因素,以确定样品中存在的免疫球蛋白的特定种
类和数量。
同时,也需要结合临床病史和其他实验结果来进行综合分析和诊断。
尿蛋白电泳操作规程
尿蛋白电泳操作规程一.项目名称尿蛋白电泳(HYDRAGEL PROTEINURIE)二.检验方法名称SDS-琼脂糖凝胶区带电泳三.方法学原理在含有多量的阴离子去垢剂十二烷基磺酸钠(SDS)液体中,蛋白质可与其连接,形成SDS—蛋白质复合物。
这种复合物蛋白本身的构造已经破坏,他们都表现出相同的构造和相同的负电荷。
当这种SDS—蛋白质复合物在具有适当筛选功能的介质中电泳时,如在含高浓度琼脂糖的HYDRAGEL 5 PROTEINURIE凝胶上电泳时,蛋白质按它们的分子量大小进行分离。
在HYDRAGEL 5 PROTEINURIE凝胶上能清楚分离来源于肾小管(分子量<65-70Kda)还是来源于肾小球(分子量>65-70KDa)的蛋白质,因此尿蛋白不仅能被检测到,而且能对蛋白来源进行分类(肾小球,肾小管性和混合性)。
四.方法学溯源自1930年由Tiselius发现了移界电泳(moving boundaryeectrophoresis),而后,这种技术的各种局限性已逐渐被区带电泳(zoneelecrrophoresis)所克服,区带电泳的条件和支持介质的选择是电泳成败的关键。
五.仪器(一)型号:SEBIA HYDRASYS (PN1210)(二)分析和计算参数:1.处理量:约14个样本/小时2.所需样本量:5ul3.检验时间:约50分钟4.重复性:有良好的批内和批间重复性5.电泳参数:电压0-300V(可选至3000V)电流0-500mA功率0-100W六.试剂及配套品(一)试剂1.HYDRAGEL 5 PROTEINURIE试剂盒(1)商标:SEBIA(2)包装规格:50测试(3)货号:PN41152.脱色液(1) 商标:SEBIA(2) 包装规格:Pack for 10×100ml(3) 货号:PN4540(4) 成分:柠檬酸3.洗涤液(1)商标:SEBIA(2)包装规格:Pack for 10×80ml(3)货号:PN4541(4)成分:叠氮钠(二)配套品尿蛋白质控(1)商标:SEBIA(2)包装规格:Pack for 5×1ml(3)货号:PN4781七.操作步骤㈠开机,启动电泳仪。
小鼠尿蛋白检测方法
小鼠尿蛋白检测方法
小鼠尿蛋白检测是用于评估小鼠肾功能和肾疾病的一种常见方法。
常用的小鼠尿蛋白检测方法有以下几种:
1. 比色法:将小鼠尿液与特定试剂(如布鲁甘试剂)混合,通过比色法测定尿液中蛋白质含量的多少。
具体操作可参考试剂盒说明书。
2. 尿液电泳:将小鼠尿液进行电泳分离,然后通过染色或用尿液免疫印记法(Western Blot)分析尿液中蛋白质的种类和含量。
3. 免疫荧光法:使用荧光染色剂或标记蛋白特异性抗体,将其与小鼠尿液中的尿蛋白结合,然后观察荧光强度以评估尿液中尿蛋白的含量。
4. 尿液蛋白/肌酐比值法:通过测定尿液中的蛋白含量和肌酐含量,计算蛋白/肌酐比值。
通常蛋白/肌酐比值大于0.2被认为是异常的,并提示肾功能异常。
上述方法可以根据实验目的和实验条件来选择合适的方法进行尿蛋白检测。
同时,鉴于小鼠尿液容量较小,可以在多个时间点收集尿液进行分析,以获得更准确的结果。
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尿蛋白电泳
1、所有病人均留取新鲜晨尿送检。
2、检测方法:尿蛋白电泳方法均同于血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳法,尿蛋白定性采用磺基水杨酸法。
3、根据正常人血清醋纤膜电泳分离出来的区带来对照分析尿蛋白电泳区带。
血清蛋白电泳可分为A(白蛋白)、α1(球蛋白)、α2(球蛋白)、β(球蛋白)、γ(球蛋白)5条区带,根据尿蛋白电泳所出现的蛋白区带的位置,也可分别给定为以上5条区带,电泳薄膜上仅出现A、α1、β带称选择性蛋白尿,电泳薄膜上除有A、α1、β带外,还出现α2带者或A、α1、α2、β、γ等5条带均显示的为非选择性蛋白尿,尿蛋白定性根据形成的浑浊度以“+”表示蛋白含量的多少。
结果:肾炎组以中量蛋白尿为主,呈选择性。
定性多为“+~++”.
肾综组以大量蛋白尿为主,呈高选择性。
定性多为“++~+++”
肾衰组:初期以中~大量蛋白尿主国,呈非选择性。
终末期肾衰因肾小球大部分已毁坏,尿蛋白反而减少,甚至为阴性。
为选择性蛋白尿,定性为“-~+”
讨论:正常健康人,每24h尿中只有80-150mg蛋白排除体外,用磺基水杨酸尿蛋白定性检查法不可检出,尿蛋白电泳无区带显示,30例健康人尿蛋白定性均为阴性,尿蛋白电泳无区带显示,由结果出可以看出,随着肾小球基底膜损害不断加重,尿中排汇的蛋白量不断增加。
然而终末期肾衰患者肾小球绝大部分已毁坏,尿蛋白反而减少,说明尿蛋白含量的多少不一定能完全反映肾脏损害程度。
在这三组病例中显示尿蛋白电泳的选择性,肾综组高于肾炎组高于肾衰组,尿蛋白由选择性变为非选择性,终末期肾衰尿蛋白减少或无尿蛋白,当肾小球受到免疫反应损害后,肾小球基底膜滤孔变大,使肾小球对血浆蛋白的通透性增加,在疾病早期只有20万以下的小分子蛋白透过而排泄于尿中,这种蛋白尿称为“选择性蛋白尿”,病变进一步加重时,基底膜滤孔进一步增大,致使大、中分子的蛋白质也能滤出,即血浆中的所有蛋白质均无选择性的滤到尿中,称“非选择性蛋白尿”。
此尿蛋白的选择性变化可以反映病情的变化,我们认为利用尿蛋白电泳确定是否选择性蛋白尿有助于临床了解肾脏的损害程度,有助于对肾脏疾患的分类、治疗及判断预后。