托拉塞米注射液无菌方法学验证
药典无菌检查方法验证及操作要点
•
1、
功的路 。20.11.520.11.5Thursday, November 05, 2020
成功源于不懈的努力，人生最大的敌人是自己怯懦
•
2、
。0 8:28:32 08:28:3 208:281 1/5/20 20 8:28:32 AM
每天只看目标，别老想障碍
•
3、
。20.1 1.508:2 8:3208: 28Nov-205-Nov-20
(1) 无菌检查试验所用的设备及环境的微生物监控 结果不符合无菌检查法的要求；
(2) 回顾无菌试验过程，发现有可能引起微生物污 染的因素；
(3) 阴性对照管有菌生长；
（4）供试品管中生长的微生物经鉴定后，确证是因 无菌试验中所使用的物品和（或）无菌操作技术不当 引起的。
每一个成功者都有一个开始。勇于开始，才能找到成
。2 020年1 1月5日 星期四 上午8 时28分3 2秒08:2 8:3220. 11.5
人生就像骑单车，想保持平衡就得往前走
•
7、
。202 0年11 月上午8 时28分 20.11.5 08:28Novembe r 5, 2020
•
8、业余生活要有意义，不要越轨。20 20年11 月5日 星期四8 时28分 32秒08 :28:325 November 2020
4.5 结果判断
与对照管比较，如含供试品各容器中的 试验菌均生长良好，则供试品的该检验量在 该检验条件下无抑菌作用或其抑菌作用可以 忽略不计，照此检查法和检验条件进行供试 品的无菌检查。
如含供试品的任一容器中微生物生长微 弱、缓慢或不生长，则供试品的该检验量在 该检验条件下有抑菌作用，可采用1)增加冲 洗量，或增加培养基的用量，2)使用中和剂 ，或更换滤膜品种等方法，消除供试品的抑 菌作用，并重新进行方法验证。
注射液X验证
目录1. 概述2 验证目的3 验证小组成员及责任4 验证依据及采用文件5 产品介绍5.1 工艺流程图5.2 生产情况介绍6. 验证计划7 验证方法及要求8 送检及检测要求9. 验证数据汇总10. 注意事项11. 结果分析及评价1. 概述：根据国家局食药监办〔2008〕120号文件精神，F0小于8的注射剂类品种必须按照非最终灭菌的无菌制剂组织生产。
我公司XXXXX 注射液是多年生产的老品种，灭菌温度100℃，灭菌时间30分钟，从理论上达不到无菌保证的效果，但对该产品热稳定性问题未作详细研究，所以不能盲目提高灭菌条件，只能在生产过程中对微生物污染采取极为严格的监控措施来保证产品无菌。
我们的小容量注射剂生产线已于07年下半年再次通过GMP认证，空调、制水、过滤等各系统均经过验证。
本次注射剂无菌保证工艺的生产过程再验证，是在生产过程的洗瓶精洗机收盘口和灌装机安瓶入口及运行带上增设了单向流百级保护系统，过滤系统采用终端0.22µm滤膜滤过除菌的基础上，通过严格地、连续地在线监控措施，保证产品能达到无菌保证的工艺水平。
1.2 验证目的此次对XXXXX注射液生产过程无菌保证方法进行再验证，其目的是要证明在本企业现有生产条件下，在生产过程的洗瓶精洗机收盘口和灌装机安瓶入口及运行带上增设了单向流百级保护系统，过滤系统采用终端0.22µm滤膜除菌滤过的基础上，通过严格对生产过程微生物监控后，确实能降低微生物污染水平，保证被灭菌产品能达到无菌保证要求的能力。
3 验证小组组成及责任3.1 验证小组组成：3.2 验证小组人员职责：3.3 验证工作中各相关部门责任技术研发部：起草、审核验证方案、验证报告、提供无菌保证验证方法。
负责验证数据及结果的收集与汇总；负责保证验证人员的培训和指导。
设备动力部：负责保证验证过程中设备及空调净化各系统的正常运行；负责保证验证过程所需各种工器具。
质量保证部：负责组织验证方案、验证报告、验证结果的会审会签；负责验证方案的批准；负责验证小组有关验证的协调工作，负责验证过程的取样、检验、测试结果报告和过程监控。
注射液工艺验证方案
注射液工艺验证方案1.引言注射液是一种常见的给药方式，广泛应用于医院、诊所和家庭等场合。
为了确保注射液的质量和安全性，需要进行工艺验证。
本文档旨在提供一个注射液工艺验证方案，以确保生产过程中的一致性、可控性和有效性。
2.目的注射液工艺验证的主要目的是验证注射液的工艺参数和相关设备的性能是否符合规定的要求，以保证注射液的质量稳定和可控。
3.验证范围本工艺验证方案适用于所有注射液的生产过程，包括原料采购、生产操作、设备操作、质量控制和记录保存等环节。
4.验证计划4.1.验证目标本次注射液工艺验证的目标是验证生产过程中的关键工艺参数和设备性能，确保注射液的质量稳定和可控。
4.2.验证方法本次注射液工艺验证采用以下方法：•实验验证：通过实验验证关键工艺参数的合理性和可行性，例如温度、压力、pH值等。
•设备验证：通过设备的性能验证，包括设备的稳定性、准确性、可靠性等。
•质量控制验证：通过检查生产过程中的质量控制记录和相关文件，确保质量控制措施的有效性。
4.3.验证计划本次注射液工艺验证按照以下计划进行：1.准备工作：明确验证的目标、范围和方法，编制验证计划。
2.实验验证：准备相关样品和设备，进行实验验证关键工艺参数的合理性和可行性。
3.设备验证：对相关设备进行性能验证，包括稳定性、准确性和可靠性等。
4.质量控制验证：检查生产过程中的质量控制记录和相关文件，确保质量控制措施的有效性。
5.结果分析：对验证结果进行分析和总结，评估工艺参数和设备是否符合要求。
6.结论和建议：根据验证结果，给出相应的结论和建议，包括改进工艺参数、设备调整和质量控制改进等。
5.验证执行5.1.验证实验验证实验应按照验证计划进行，确保实验过程的准确性和可重复性。
实验过程中应注意以下要点：•实验条件控制：确保实验条件符合要求，例如温度、湿度、洁净度等。
•样品选择：选择代表性样品进行验证实验，确保实验结果的可靠性和代表性。
•数据收集：准确记录实验数据，包括工艺参数、设备性能和质量控制数据等。
托拉塞米片溶出度的方法学研究
托拉塞米片溶出度的方法学研究赵洪霞【摘要】目的:建立紫外可见分光光度法测定托拉塞米片溶出度方法,并进行方法学考察.方法:采用紫外可见分光光度法,以0.1 mol/L盐酸溶液900 ml为溶出介质,转速为50 r/min,进行溶出度测定,在285 nm波长处测定吸收度,计算溶出度.结果:线性范围为4～20 μg/ml(r=0.9995),回收率为99.5 %,RSD为0.42%.结论:紫外可见分光光度法操作简便,准确度高,重现性好,与高效液相色谱法比较无明显差异,可作为托拉塞米片溶出度测定的检测方法.【期刊名称】《天津药学》【年(卷),期】2011(023)004【总页数】3页(P22-24)【关键词】托拉塞米;溶出度;紫外可见分光光度法【作者】赵洪霞【作者单位】天津安捷伦药业有限公司,天津,300410【正文语种】中文【中图分类】R927.11托拉塞米是新一代高效髓袢利尿剂。
多年临床应用证实,托拉塞米适应证广,利尿作用迅速强大且持久,不良反应发生率低,是临床上值得推广的一类高效利尿剂。
参照托拉塞米标准(试行)YBH00682004，依照《中国药典》溶出度测定法[1]，为了操作简便，进行了适当改进，采用紫外可见分光光度法(UV)测定本品的溶出度。
1 试验材料1.1 仪器 Waters 2487紫外分光光度计，ZRS-8G智能溶出试验仪(天津大学无线电厂)，日本岛津LC-10A系列高效液相色谱仪，XS204型电子天平(瑞士梅特勒-托利多公司)。
1.2 试药托拉塞米对照品(本公司自制，批号100206，纯度：99.5%)，托拉塞米片(本公司自制，批号100301、100302、100303)。
盐酸(天津市申泰科密欧化学试剂有限公司分析纯)，磷酸二氢钾(天津市医药公司分析纯)，冰乙酸(天津市赢达稀贵化学试剂厂分析纯)。
2 试验和结果2.1 溶出介质的选择取托拉塞米片6片，照溶出度测定法(《中国药典》2010年版二部附录Ⅹ C第二法)分别以0.1 mol/L盐酸溶液、水、磷酸盐缓冲液(pH=6.8)各900 ml为溶出介质,转速为50 r/min，分别在5、10、15、20、30 min取溶液适量，滤过，取续滤液照紫外-可见分光光度法(《中国药典》2010年版附录二部Ⅳ A)，在285 nm的波长处测定吸光度；另精密称取托拉塞米对照品适量，加冰乙酸2 ml,振摇使溶解，再加溶出介质制成每1 ml中约含10 μg的溶液，同法测定，计算每片的溶出量，绘制不同溶出介质的溶出曲线，见图1。
注射液无菌检查的方法学验证方案
注射液无菌检查方法（中国药典2010版）验证方案验证方案编号：2010•MEF•041•05•004起草单位(Composed by)：质检部(QC Department)起草人(Composer)：日期(Date)：审核人(Reviewed by QC)：日期(Date)：审核人(Reviewed by QA)：日期(Date)：批准人(Approved by)：日期(Date)：目录1. 验证目的2. 验证人员3. 验证依据及参考文件4. 仪器与设备5. 验证过程5.1 培养基及稀释液5.2 菌液的培养与制备5.3 方法验证试验6. 验证总结1. 验证目的：本试验是注射液的抑细菌、抑真菌活性及所用的无菌检查方法的可靠性进行验证，以确认该产品在该检验量、该检验条件下无抑菌活性或其抑菌活性已被充分消除至可以忽略。
即：保证所用的无菌检验方法能对该产品进行准确、可靠的检验。
2. 验证人员：验证小组组长：刘长宏验证小组副组长：宋芳良验证小组成员：曲晓燕、常西胜3. 验证依据及参考文件：验证依据：中华人民共和国药典2010版二部参考文件：2010年版中国药典无菌检查方法、验证操作学习班讲稿汇编（中国药品检验所）4. 仪器与设备XG1.DM-0.36B型机动门脉冲真空灭菌器细菌培养箱霉菌培养箱净化工作台5. 验证过程：5.1 培养基及稀释液5.1.1 培养基及稀释液的配制按“中国药典2010版二部附录Ⅺ H无菌检查法”中，有关规定配制本验证所需培养基:5.1.2培养基的适用性检验5.1.2.1 培养基无菌性检查从以上培养基及稀释液中，每批随机取5支（瓶），培养14天，应无菌生长。
结果记录：结论：5.1.2.2 培养基灵敏度检查取每管装量为12ml的硫乙醇酸盐流体培养基9支，分别接种小于100cfu的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、生孢梭菌各2支，另1支不接种作为空白对照，培养3天，逐日观察结果。
2种注射液的无菌检查法的建立与验证
2种注射液的无菌检查法的建立与验证摘要】目的：建立2种注射液的无菌检查法。
方法：按《中华人民共和国药典》2015年版四部要求，采用薄膜过滤法，确定2种注射液是否存在抑菌性，确定阳性对照菌，选择合适的无菌试验方法确保药品的质量要求。
结果：2种注射用均存在抑菌性，不能直接进行薄膜过滤法检查，需要采用稀释剂冲洗的方法消除两种注射液的抑菌性。
结论：2种注射液均可采用薄膜过滤法进行无菌检查，以金黄色葡萄球菌为阳性对照茵，需用100ml/膜稀释液冲洗，以消除其抑菌活性。
【关键词】注射液；无菌检查法；方法学验证【中图分类号】R927.33 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2018）11-0184-03注射液的无菌检查是保证药品使用安全的一个重要方面，选择合适的试验方法，才能保证药品的质量要求。
呋塞米注射液为利尿剂，异烟肼注射液是抗结核药，同作为本单位第二季度的基本药物品种，由于生产企业未提供无菌检验适用性试验的方法，为保证无菌检验结果的准确可靠，确认采用的方法适合于各供试品的无菌检查[2]，笔者对2种注射液的无菌检查法分别进行了方法适用性验证，以保证所采用的方法适合于该2种注射液的无菌检查。
1.仪器与试药1.1 试验仪器GJ-204A型洁净工作台（江苏无锡市威达净化空调电气设备厂）、一次性全封闭集菌培养器、Htysteritest601型智能集菌仪（杭州泰林生物技术设备有限公司）、SPX-250型生化培养箱（上海跃进医疗器械有限公司）、SPX-150型生化培养箱（惠科电子有限公司）。
1.2 试验样品呋塞米注射液（遂成药业股份有限公司：批号：1702172；上海禾丰制药有限公司：批号：34161102）；异烟肼注射液（西南药业股份有限公司：批号：170411，170413）。
1.3 试验试剂胰酪大豆胨液体培养基（批号 20150914）、沙氏葡萄糖液体培养基（批号20150722）、硫乙醇酸盐硫体培养基（批号 20150104）、pH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液（批号 20160715），以上培养基均由青岛高科园海博生物制品购买。
高效液相色谱法测定托拉塞米片中托拉塞米及其有关物质的含量
托拉塞米 ( torasem ide)是由德国贝林格 2曼海姆 (Boehringer M annhein)开发的新一代磺酰脲类髓袢 利尿药 ,作用于髓襻升支粗段 ,有利尿 、排钠和排氯 作用 。临床上主要用于治疗充血性心力衰竭 、肾脏 或肝脏疾病等引起的各种水肿及各种高血压 ,是呋 塞米 ( furosem ide)的更新换代产品 [ 1, 2 ] ,为此我们开 发了托拉塞米原料及其制剂 (片剂 、胶囊剂 、注射剂 及冻干粉针 ) 。本研究在参考文献 [ 3 ]的基础上 ,建 立了托拉塞米片剂及其有关物质的含量测定的高效 液相色谱 (HPLC)法 。 药品与试剂 托拉塞米对照品 (纯度为 99. 99 % , 南京泽辰科技有限公司提供 ) ;托拉塞米片 (中国药 科 大 学 制 药 有 限 公 司 , 批 号 000217, 000218, 000219) ,甲醇色谱纯 ,磷酸二氢钾为分析纯 。 仪器 岛津 LC210AT型高效液相色谱仪 (日本岛 津 ) ; WDL 295色谱工作站 。 色谱 条 件 色 谱 柱 : 岛 津 Shimpack CLC (M ) C18
·556·
中国新药与临床杂志 (Chin J New D rugs Clin Rem ) , 2005年 7月 ,第 24卷 第 7期 E2mail: xyylc@ shyyxx. com http: / / xyyl. chinajournal. net. cn http: / / zgxyylczz. periodicals. com. cn
[关键词 ] 托拉塞米 ; 片剂 ; 色谱法 ,高压液相 ; 有关物质
[摘要 ] 目的 : 建立高效液相色谱法测定托拉塞米 片中托拉塞米及其有关物质的含量。方法 :以岛津 Shimpack CLC (M ) C18 (250 mm ×4. 6 mm , 5μm ) 为 色谱柱 ;以甲醇 - 0. 02 mol·L - 1磷酸二氢钾溶液 (用 磷酸调节 pH至 3. 0) (65 ∶35)为流动相 ; UV 检测波 长 291 nm;流速 0. 9 mL ·m in- 1。结果 :托拉塞米在 2～24 mg ·L - 1 范 围 内 具 有 良 好 线 性 关 系 ( r = 0. 999 9) , 平 均 加 样 回 收 率 为 99. 73 % , RSD 为 0. 17 % ( n = 9) ; 3批样品的标示百分含量 ( % )分别 为 99. 80, 100. 10, 100. 40,有关物质的百分含量分别 为 0. 58, 0. 45, 0. 39。结论 :本方法准确 、灵敏 ,重现性 好 ,可用于托拉塞米片及其有关物质的含量测定 。
注射剂工艺验证方案
注射剂工艺验证方案依照注射用头孢西丁钠的工艺规程及岗位标准操作规程，制定工艺验证方案以评判注射用头孢西丁钠工艺的各要素及生产全过程可能显现阻碍到该产品质量的各种生产工艺变化因素，通过工艺验证结果，以确定本工艺是否可行，确保在正常的生产条件下，生产出质量能符合注射用头孢西丁钠质量标准的产品。
2．适用范畴适用于注射用头孢西丁钠生产工艺验证的全过程。
3．责任范畴公司验证委员会、注射用头孢西丁钠生产工艺验证小组。
4．内容4.1引言4.1.1背景注射用头孢西丁钠生产用设备、设施及公用系统已进行了全面的验证，验证报告由相应的验证小组整理完成。
随后又进行了三次培养基灌装试验，〝培养基灌装试验报告〞也由相应的验证小组整理完成。
注射用头孢西丁钠是第一次在本公司生产的无菌粉针剂，此验证方案的设计有助于证明注射用头孢西丁钠产品生产过程的稳固性及生产系统的可靠性。
4.1.2方案目标本产品工艺验证方案的目的在于为评判该产品生产系统要素和生产过程中可能阻碍产品质量的各种生产工艺变化因素提供系统的验证打算，以保证实现在正常的生产条件下，生产出符合产品质量标准及局颁标准的注射用头孢西丁钠无菌粉针剂的宗旨。
4.1.3方案概要本产品工艺验证方案打算在注射用头孢西丁钠无菌粉针剂在本公司最初生产的前3批产品的生产过程中实施。
本方案的第一部分是对本方案的介绍，其中包括必要的相关资料的介绍以助于对本方案的明白得及本方案的实施。
第二部分包括阐述无菌生产预备、无菌粉针分装及包装生产工艺工艺流程并说明关键的生产步骤。
第三部分为注射用头孢西丁钠无菌粉针剂的生产文件包括生产处方和生产工艺规程。
第四部分为质量检验标准，其中包括产品质量标准即注射用头孢西丁钠无菌粉针剂成品质量检验内控标准、原料质量、包装材料质量标准及它们的检验操作规程。
第五部分阐述工艺过程的评判方法，具体分为3个生产过程。
（1）无菌生产预备和灭菌过程；（2）无菌分装过程；（3）包装过程。
注射用托拉塞米
• 82 •中国药甜标准 Drug Standards of China 2019, 20( 1 )主峰面积的峰忽略不计（0. 05% ）。
含量均匀度 取本品一粒，将内容物倾入50 mL 量瓶中，加甲醇9 mL 使托拉塞米溶解，再加0. 1%三乙 胺溶液11 mL,用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，照含量测定项下的方法测定，应符合规定（中国药典2015 年版四部通则0941 ）0溶出度 取本品，照溶出度与释放度测定法（中国药典2015年版四部通则0931第二法），以0. 1 moI/L 盐酸溶液500 mL 为溶出介质，转速为每分钟50转，依法操作，经30分钟时，取溶液适量，滤过， 取续滤液作为供试品溶液；另取托拉塞米对照品适量，精密称定，加溶出介质溶解并定量稀释制成每1 mL 中约含20 （Jig 的溶液，作为对照品溶液；取上述两种溶液，照紫外-可见分光光度法（中国药典2015 年版四部通则0401）,在286 nm 的波长处分别测定吸光度，计算每片的溶出量。
限度为标示量的 80%，应符合规定。
其他 应符合胶囊剂项下有关的各项规定（中国药典2015年版四部通则0103 ）o【含量测定】照高效液相色谱法（中国药典2015年版四部通则0512）测定。
色谱条件与系统适用性试验用端基封尾十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇4 1%三乙胺溶液 （用磷酸调节pH 值至3.5）（45:55）为流动相，检测波长为291 nm 。
取托拉塞米与杂质I 对照品适量，加甲 醇适量使溶解，并用流动相稀释制成每1 mL 中分别约含0. 1 mg 与0.01 mg 的溶液，量取20 |xL 注入液相色 谱仪，记录色谱图，托拉塞米峰与杂质I 峰的分离度应大于5。
测定法 取本品20粒，精密称定，取内容物混合均匀，精密称取适量（约相当于托拉塞米20 mg ）,置100 mL 量瓶中，加甲醇18 mL 使托拉塞米溶解，再加0. 1%三乙胺溶液22 mL,摇匀后，用流动相稀释至刻度，摇 匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液，精密量取20 jxL 注入液相色谱仪,记录色谱图。
注射剂无菌检验标准操作规程
注射剂无菌检验标准操作规程目的：制定无菌检验标准操作规程，确保检验操作正确。
范围：本标准适用于本公司大容量注射剂无菌检验操作。
责任者：质管部、化验室主任、QC检验员内容：1、标准依据：制定本规范参考了下列文件中的一些信息，但没有直接引用里面的条文。
凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
2、简述：无菌检查方法系用于检查药品是否无菌的一种方法。
检查项目包括需气菌、厌气菌及真菌检查。
若供试品符合该项检查方法的有关规定，仅表明了在该检验条件下未发现微生物污染。
3、环境要求：该项检查应在环境洁净度万级（C级）背景下的局部百级（A级）的单向流区域内或隔离系统中进行。
其全过程必须严格遵守无菌操作。
防止微生物污染，但所采取的措施不得影响供试品中微生物的检出。
操作前环境洁净度应经验证。
日常检验需对试验环境进行监控。
5、方法验证：进行该项检查前应按照《无菌检查方法验证规程》确认该方法的适用性。
4、人员要求：无菌检查人员必须具备微生物专业知识，并经过无菌技术培训。
6、检验数量及检验量：6.1、接种每种培养基所需的最少检验数量:2%或10个（取较少者），供试品无菌检查若采用薄膜过滤法，应增加1/2的最小检验数量作阳性对照用；若采用直接过滤法，应增加供试品无菌检查时每个培养基容器接种的样品量作阳性对照用。
6.2、每支供试品接入每种培养基的最少量:半量（100ml≤V≤500ml），采用薄膜过滤法时，检验量应不少于直接接种的供试品总接种量，只要供试品特性允许，应将所有容器内的全部内容物过滤。
7、细菌培养温度为30～35℃，真菌培养温度为23～28℃。
8、仪器用具：垂直层流超净工作台、生化培养箱、电热恒温水浴箱、显微镜、手提灭菌器、离心机、双碟、试管、三角瓶、刻度离心管、注射器（针头）、剪刀、镊子、注射器盒、75％酒精棉球、紫外光灯365nm、真空泵、HTY智能全封闭集菌仪、一次性使用集菌培养器。
托拉塞米治疗心力衰竭疗效观察
降低死亡率
研究表明，托拉塞米在心力衰竭治疗中可降 低患者死亡率。
03
托拉塞米治疗心力衰竭的临床 研究
研究方法
选取90例原发性高血压老年患者，等量随机分为两组。对照组给予常规护理联合常规治疗，定时记录 患者情况。定时记录两组护理前后护理前后护理效果各指标对应的评价量表进行评价，分数越高，护 理效果越好。
对临床实践的建议
1
在心力衰竭患者的治疗中，应优先考虑使用托拉 塞米，以改善患者心功能和生活质量。
2
对于病情较重的患者，托拉塞米可与其他药物联 合使用，以达到更好的治疗效果。
3
在使用托拉塞米过程中，应注意监测患者的电解 质平衡和肾功能，避免出现不良反应。
对未来研究的展望
01
进一步研究托拉塞米在心力衰竭治疗中的长期疗效 和安全性，以及与其他药物的相互作用机制。
治疗效果
患者心功能明显改善，呼吸 困难等症状显著减轻，生活 质量提高。
病例二：不良反应处理
01
患者情况
治疗过程
02
03
不良反应处理
患者为70岁女性，因急性心力衰 竭入院治疗。
采用常规药物治疗联合托拉塞米 40mg/d，治疗1周后出现恶心、 呕吐等不良反应。
调整托拉塞米剂量为20mg/d， 同时给予止吐药物治疗，不良反 应得到缓解。
疗效总结
01
托拉塞米在改善心力衰竭患者 心功能方面表现出显著疗效， 能够降低患者的心脏负担，提 高生活质量。
02
托拉塞米能够显著降低心力衰 竭患者的死亡率和再住院率， 对患者的长期预后具有积极影 响。
03
托拉塞米治疗心力衰竭的疗效 在不同年龄、性别和病情严重 程度的患者中均得到验证，具 有广泛适用性。
无菌检查法方法验证(妥布霉素滴眼液)
妥布霉素滴眼液无菌检查法方法验证一、验证目的根据中国药典2010年版（二部）附录XI H 无菌检查法方法验证，对妥布霉素滴眼液无菌检查方法进行验证，确定在设定的条件下能满足该产品的无菌检查需求，保证检验结果的可靠性。
二、供试品妥布霉素滴眼液规格：0.4ml/支。
批号：三、培养基硫乙醇酸盐流体培养基批号：中国药品生物制品检定所改良马丁培养基批号：中国药品生物制品检定所营养肉汤培养基批号：中国药品生物制品检定所改良马丁琼脂培养基批号：中国药品生物制品检定所营养琼脂培养基批号：中国药品生物制品检定所玫瑰红钠琼脂培养基批号：中国药品生物制品检定所营养琼脂对照培养基批号：中国药品生物制品检定所玫瑰红钠琼脂对照培养基批号：中国药品生物制品检定所四、试剂：蛋白胨批号：氯化钠（AR）批号：磷酸二氢钾（AR）批号：磷酸氢二钠（AR）批号：聚山梨酯80 批号：五、仪器HTY-2000A型集菌仪，一次性使用全封闭集菌培养器型号KDGB330批号20100602 均由杭州泰林生物技术设备有限公司。
立式压力蒸汽灭菌器：YXQ-LS-50SII，上海博讯实业有限公司医疗设备厂；霉菌培养箱：MJX-160B-Z型，上海博迅实业有限公司生化培养箱：MJX-160B-Z型，上海博迅实业有限公司电热恒温鼓风干燥箱：GZX-9076 MBE，上海博讯实业有限公司医疗设备厂百级超净工作台：SW-CJ-1F，苏州佳宝净化工程设备有限公司六、冲洗液pH7.0 无菌氯化钠蛋白胨缓冲液，自制，根据《中国药典》2010版二部附录XI H 稀释液，冲洗液配置方法：取磷酸二氢钾3.56g、磷酸氢二钠7.23g、氯化钠4.30g、蛋白胨1.0g，加水1000ml，微热溶解，滤清，分装，灭菌。
灭菌条件：121°C高压蒸汽灭菌20min。
七、缓冲液0.9%无菌氯化钠溶液，自制，根据《中国药典》2010版二部附录XIH 稀释液，冲洗液配置方法：取氯化钠9.0g，加水溶解使成1000ml，过滤，分装，灭菌。
托拉塞米注射液使用说明书
托拉塞米注射液使用说明书【药品名称】通用名：托拉塞米注射液商品名：特苏尼™英文名：Torsemide Injection汉语拼音：Tuolasaimi Zhusheye本品主要成分为托拉塞米，其化学名为：1－异丙基－3－［（4－间甲苯氨基－3－吡啶基）磺酰基］脲化学结构如下：分子式：C16H20N4O3S分子量：348.43【性状】本品为无色或几乎无色的澄明液体【药理毒理】作用机理本品为磺酰脲吡啶类利尿药，其作用于亨利氏髓袢升支粗段，抑制Na＋／K＋／2CL－载体系统，使尿中Na＋，CL－和水的排泄增加，但对肾小球滤过率，肾血浆流量或体内酸碱平衡无显著影响。
药效学本品对大鼠和狗都有强的利尿作用，在这两种动物中，尿量，尿电解质排泄与剂量的对数呈线性关系。
大鼠口服本品的最小有效剂量为0.2mg ／kg，狗为小于0.1 mg／kg，最大作用剂量约为10 mg／kg。
以药理重量计，本品对大鼠的利尿作用为速尿的9～40倍，对狗为10倍，利尿作用大鼠持续约2小时，而狗持续8小时以上，大鼠每日口服本品10 mg／kg共15天其利尿作用并不减弱。
狗静脉注射托拉塞米1、3、10 mg／kg，收缩压、舒张压、平均压、心率、呼吸频率、呼吸压、心电图均无明显影响。
致癌性大鼠和小鼠终生致癌实验给予本品分别为9 mg／kg／日和32mg ／kg／日未见肿瘤增加。
基于体重，该剂量为人服剂量20mg的27～96倍；基于体表面积为5～8倍。
致突变性托拉塞米及其主要代谢物经细菌Ames实验，染色体畸变和人淋巴姊妹染色单体互换实验，仓鼠和鼠的骨髓细胞核异常实验，小鼠和大鼠非常规DNA合成实验等，体内体外实验结果均无致突变性。
生殖毒性雌、雄大鼠剂量为25 mg／kg／日时对生殖性能没有不良影响。
大鼠剂量为5 mg／kg／日或兔剂量为1.6 mg／kg／日时无胎毒或致畸作用。
大鼠和兔剂量分别大于5倍和4倍时，胎儿和母体平均体重有所下降，胎儿吸收和骨化延迟有所增加。
托拉塞米静脉注射的临床观察
观察周期与数据收集
观察周期
从患者接受药物治疗开始，至出院前最后 一次用药后24小时为止。
VS
数据收集
在给药前、给药后6小时、12小时和24小 时收集患者的相关数据，包括心功能指标 、尿量、血压、心率等生理参数，以及临 床症状和体征的改善情况。同时记录患者 的不良反应发生情况和其他相关信息。
04
观察结果
患者耐受性好。
托拉塞米在心力衰竭治疗中的应用
适应症
托拉塞米可用于治疗心力衰竭，特别是对于伴有水肿的 患者。
作用机制
通过抑制髓袢升支粗段Na⁺-K⁺-2Cl⁻同向转运子，抑制 NaCl重吸收，降低循环血容量，降低心脏前负荷，减轻 心力衰竭症状。
临床效果
多项临床研究显示，托拉塞米在心力衰竭治疗中能够明 显减轻患者的症状，改善患者的生活质量，且不良反应 较少，患者耐受性好。
托拉塞米静脉注射的临床观 察
2023-11-06
目 录
• 引言 • 托拉塞米概述 • 临床观察 • 观察结果 • 临床应用与效果分析 • 结论与展望 • 参考文献
01
引言
研究背景与意义
托拉塞米是一种常用的利尿剂，广泛应用于治疗各种原因引起的水肿和心力衰竭 。
托拉塞米静脉注射可以快速发挥利尿作用，对于急性或严重性水肿具有很好的疗 效。
托拉塞米在肾功能保护中的作用
适应症
托拉塞米可用于保护肾功能，减轻肾脏负担。
作用机制
通过抑制髓袢升支粗段Na⁺-K⁺-2Cl⁻同向转运子，抑制NaCl重吸 收，降低循环血容量，减轻肾脏负担，保护肾功能。
临床效果
多项临床研究显示，托拉塞米在肾功能保护中具有显著的作用，能 够明显减轻肾脏负担，保护肾功能，且不良反应较少，患者耐受性 好。
托拉塞米注射液无菌方法学验证_0
托拉塞米注射液无菌方法学验证目的：建立托拉塞米注射液无菌检查法。
方法：采用薄膜过滤法，探索此药物的无菌检查法。
结果：在该实验条件下6种菌株均能够正常生长。
结论：本品可采用薄膜过滤法进行无菌检验且结果准确可靠。
标签：托拉塞米注射液；无菌检查法；方法学验证托拉塞米为磺酰脲吡啶类利尿药，其作用于亨利氏髓袢升支粗段，抑制Na+/K+/2Cl-载体系统，使尿中Na+/K+/2Cl-和水的排泄增加，但对肾小球滤过率，肾血浆流量或体内酸碱平衡无显著影响。
当建立药品的无菌检查时应进行方法的验证，以证明所采用的方法适合于该药品的无菌检查。
1 材料与仪器1.1 试验样品托拉塞米注射液（规格：2ml：10mg，批号：20110212，数量：160支/批，浙江诚意药业有限公司）1.2试验用菌株金黄色葡萄球菌[CMCC（B）26003]、大肠埃希菌[CMCC（B）44102]、枯草芽孢杆菌[CMCC（B）63501]、生孢梭菌[CMCC（B）64941]、白色念珠菌[CMCC （F）98001]、黑曲霉[CMCC（F）98003]，以上均由中检所提供。
1.3试验用培养基营养琼脂培养基（批号120503）、玫瑰红钠琼脂（批号120412）、硫乙醇酸盐硫体培养基（批号1202222）、改良马丁培养基（批号120131），0.1%蛋白胨水溶液（批号120118），以上培养基均由中国药品生物制品检定所提供。
1.4仪器SW-CJ-1CU型洁净工作台（苏州泰安空气技术有限公司）、HTY-2000A型智能集菌仪（杭州泰林生物技术设备有限公司）、一次性全封闭集菌培养器（杭州泰林生物技术设备有限公司）、301-1型电热培养箱（上海浦东跃欣科学仪器有限公司）、MJ-180B型霉菌培养箱（上海跃进医疗器械厂）、SPX-150B型生化培养箱（上海跃进医疗器械厂）。
2方法2.1菌液制备取经30～35℃培养18～24h的金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌、生孢梭菌液体培养物各1ml分别加入到9ml0.9%无菌氯化钠溶液中，依次10倍稀释，金黄色葡萄球菌至10-6，大肠埃希菌至10-7，枯草芽孢杆菌至10-5，生孢梭菌至10-7。
新型利尿剂托拉塞米临床研究进展
2023新型利尿剂托拉塞米临床研究进展•托拉塞米概述•托拉塞米的研究现状•托拉塞米在各领域的应用及效果•托拉塞米的不良反应及禁忌症目•托拉塞米的未来研究方向及前景展望•参考文献录01托拉塞米概述托拉塞米是一种高效、安全的新型利尿剂，自2000年进入市场以来，已在多个国家和地区广泛应用。
托拉塞米适用于多种疾病引起的水肿和尿潴留，如心力衰竭、肝硬化腹水、肾病综合征等。
药物简介1药理作用23托拉塞米主要作用于髓袢升支粗段，抑制Na+/K+/2Cl-同向转运子，从而抑制NaCl的重吸收。
托拉塞米还可以抑制前列腺素E2(PGE2)的合成，从而发挥扩张血管的作用，减轻心脏负荷。
托拉塞米可降低血液黏滞度，改善微循环，并有一定的降压作用。
临床应用对于肝肾功能不全的患者，托拉塞米的安全性和有效性均较高。
托拉塞米在临床应用中，疗效显著，耐受性好，优于传统的利尿剂。
托拉塞米在老年患者中的药代动力学特征与青年相近，适用于老年患者。
02托拉塞米的研究现状国内医学界对托拉塞米的研究主要集中在药效学、药动学、安全性等方面。
研究者们通过实验和临床试验，探讨了托拉塞米在治疗心衰、肝硬化腹水、肾病综合征等疾病中的疗效和安全性。
国内研究者们还积极探索托拉塞米在肿瘤、神经系统疾病等领域的应用，为拓展其临床适应症提供了新的思路。
国内研究现状VS国外对托拉塞米的研究涉及药效学、药动学、临床应用等多个方面，研究深度和广度均超过国内。
国外研究者们不仅关注托拉塞米在治疗心衰、肝硬化腹水等传统适应症的效果，还探索了其在高血压、糖尿病、风湿性疾病等慢性病治疗中的应用。
此外，国外研究者们还从基因组学、蛋白质组学等多个角度研究托拉塞米的药效机制，为开发更有效的利尿剂提供了理论支持。
国外研究现状研究趋势分析随着医药技术的不断发展，对托拉塞米的研究将更加深入和广泛。
未来研究将更加注重其在不同疾病治疗中的疗效和安全性，以进一步拓展其临床适应症。
随着大数据和人工智能技术的应用，对托拉塞米的治疗效果和不良反应的预测将更加精确，有助于提高临床治疗水平。
注射用托拉塞米有关物质方法建立
注射用托拉塞米有关物质方法建立2 再维药业（海南）有限公司，海南海口 5711003 海南赛立克药业有限公司，海南海口 571100摘要：建立高效液相色谱法测定注射用托拉塞米的有关物质方法，使用碳十八柱,规格（5μm，4.6*250mm），检测波长291nm，流动相为甲醇-0.02mol/L磷酸二氢钾溶液（用磷酸调节pH值至3.0）（45:55），柱温箱温度为室温，流速1.0m L·min-1。
结果表明，托拉塞米主峰与与相邻色谱峰分离度大于2；杂质A 色谱峰与其对照品溶液保留时间一致，与相邻峰分离度大于1.5，托拉塞米在0.20～4.0μg/ml范围内，峰面积与浓度呈线性关系；杂质A在0.10～2.0μg/ml（相当于有关物质供试品的0.05%～1.0%）浓度范围内，浓度与峰面积呈线性关系，限度50%、100%、150%各浓度下的平均回收率均在80%～120%内，9份样品回收率RSD值小于5.0%，表明方法准确度良好，具有较好的准确度和精密度，同时托拉塞米及其已知杂质A的检测限、定量限与溶液稳定性均符合要求，因此，该方法适用于注射用托拉塞米的质量控制。
关键词：高效液相色谱法、注射用托拉塞米、有关物质、质量控制1试验部分1.1试药信息注射用托拉塞米供试品：来源于我公司冻干车间，批号为2109015（规格10mg）、托拉塞米对照品：来源于中国食品药品检定研究院，批号为100605-201402；托拉塞米杂质A对照品：来源于中国食品药品检定研究院，批号为100786-202002；空白辅料：海南斯达制药有限公司冻干车间，批号为2109023（相当于10mg）。
1.2仪器与试剂主要仪器高：岛津LC-20A高效液相色谱仪（二极管阵列检测器）；岛津LC-2010C高效液相色谱仪；主要试剂：甲醇、磷酸二氢钾。
1.3色谱条件：在国家颁布的注射用托拉塞米标准（YBH24842005）中，本品有关物质与含量采用相同的高效液相法测定，其色谱条件为：用十八烷基键合硅胶为填充剂，以甲醇-0.02mol/L磷酸二氢钾溶液（用磷酸调节pH值至3.0）（65:35）为流动相，检测波长为291nm。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
托拉塞米注射液无菌方法学验证
作者：苏有艳
来源：《维吾尔医药》2013年第05期
摘要：目的：建立托拉塞米注射液无菌检查法。
方法：采用薄膜过滤法，探索此药物的无菌检查法。
结果：在该实验条件下6种菌株均能够正常生长。
结论：本品可采用薄膜过滤法进行无菌检验且结果准确可靠。
关键词：托拉塞米注射液；无菌检查法；方法学验证
托拉塞米为磺酰脲吡啶类利尿药，其作用于亨利氏髓袢升支粗段，抑制Na+/K+/2Cl-载体系统，使尿中Na+/K+/2Cl-和水的排泄增加，但对肾小球滤过率，肾血浆流量或体内酸碱平衡无显著影响。
当建立药品的无菌检查时应进行方法的验证，以证明所采用的方法适合于该药品的无菌检查。
1 材料与仪器
1.1 试验样品
托拉塞米注射液（规格：2ml：10mg，批号：20110211，20110212，20110213，数量：160支/批，浙江诚意药业有限公司）
1.2试验用菌株
金黄色葡萄球菌[CMCC（B）26003]、大肠埃希菌[CMCC（B）44102]、枯草芽孢杆菌[CMCC（B）63501]、生孢梭菌[CMCC（B）64941]、白色念珠菌[CMCC（F）98001]、黑曲霉[CMCC（F）98003]，以上均由中检所提供的第二代菌种。
1.3试验用培养基
营养琼脂培养基（批号 120503）、玫瑰红钠琼脂（批号 120412）、硫乙醇酸盐硫体培养基（批号 1202222）、改良马丁培养基（批号 120131），0.1%蛋白胨水溶液（批号120118），以上培养基均由中国药品生物制品检定所提供。
1.4仪器
SW-CJ-1CU型洁净工作台（苏州泰安空气技术有限公司）、HTY-2000A型智能集菌仪（杭州泰林生物技术设备有限公司）、一次性全封闭集菌培养器（杭州泰林生物技术设备有限公司）、301-1型电热培养箱（上海浦东跃欣科学仪器有限公司）、MJ-180B型霉菌培养箱（上海跃进医疗器械厂）。
2方法
2.1菌液制备
取经30～35℃培养18～24h的金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌、生孢梭菌液体培养物各1ml分别加入到9ml0.9%无菌氯化钠溶液中，依次10倍稀释，金黄色葡萄球菌至10-6，大肠埃希菌至10-7，枯草芽孢杆菌至10-5，生孢梭菌至10-7。
取经23～28℃培养24～48h的白色念珠菌液体培养物1ml，加入到9ml0.9%无菌氯化钠溶液中，依次10倍稀释至10-5。
取经培养5～7天的黑曲霉斜面培养物，加入3～5ml含0.05%（ml/ml）吐温80的0.9%无菌氯化钠溶液，将孢子洗脱转至另一试管，取1ml加至9ml含0.05%（ml/ml）吐温80的0.9%无菌氯化钠溶液中，依次10倍稀释至10-4。
2.2菌液计数
分别取金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌、生孢梭菌各1ml于培养皿中，每种菌做2皿，加营养琼脂培养基，取白色念珠菌、黑曲霉各1ml于培养皿中，每种菌做2皿，加玫瑰红纳琼脂培养基，按规定条件培养，结果计数见表1。
以上菌液均小于100cfu/ml，备用。
2.3方法学验证试验
2.3.1试验组：取供试品120支，每筒20支，共制备6个滤筒。
先用0.1%蛋白胨水溶液润湿滤膜，再向其中四个滤筒分别加入硫乙醇酸盐硫体培养基，然后再依次加入已制备好的金葡、大肠、枯草、生孢各1ml，培养3～5天。
剩余两筒加入改良马丁培养基后再加入白念、黑曲霉各1ml，培养3～5天，逐日观察。
2.3.2对照组：另取6个筒，先加入相应培养基，再加入1ml各试验菌按规定温度培养3～5天，逐日观察。
2.3.3供试品对照组：取供试品40支，每筒20支，共制备2个滤筒。
先用0.1%蛋白胨水溶液润湿滤膜，再分别加入100ml硫乙醇酸盐硫体培养基和100ml改良马丁培养基，按规定温度培养3～5天，逐日观察。
2.3.4阴性对照组：取0.1%蛋白胨水溶液适量，分别置2个滤筒内过滤，再分别加入
100ml硫乙醇酸盐硫体培养基和100ml改良马丁培养基，按规定温度培养3～5天，逐日观察。
3结果
培养结束后试验组和对照组微生物均生长良好，供试品对照组和阴性对照组均无微生物生长，观察结果见表2。
4结论
根据3批供试品试验结果，试验组中试验菌均生长良好，并与各对照组中相应的菌落生长情况相似，供试品对照组和阴性对照组均无菌落生长。
由此说明，托拉塞米注射液可采用薄膜过滤法检查，在此检验量和检验条件下无抑菌作用。
因此可按照此检查条件和检查方法对托拉塞米注射液进行无菌实验。
参考文献
>（2010年版）
复方利多卡因注射液无菌检查法验证，医药导报，2010，29（6）
注射用兰索拉唑无菌检查方法学研究，西北药学杂志，2008，23。