动物细胞融合和单克隆抗体

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动物细胞融合和单克隆抗体(终极版)

1、在体外培养的条件下，一个B淋巴细胞有没有可能无限增殖？不可能 2、我们学过的什么细胞具有这样的能力？
癌细胞
3、你认为有什么办法让B淋巴细胞也具有这样的能力？
细胞融合
２、实验原理：
一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体骨髓瘤细胞（癌细胞）能无限增殖
柯勒
单克隆动物细胞培养技术杂种细胞动物细胞融合抗体既能产生特异性抗体，又能大量繁殖创始人：米尔斯坦
⑵.诱导方式：
二醇（PEG）
生物法：灭活的病毒例如：仙台病毒
3.意义和应用：
打破生殖隔离，使远缘杂交成为可能；
重要用途：制备单克隆抗体。
知识回顾
1、抗体是由何种细胞产生的？
三、单克隆抗体浆细胞（效应B细胞）
2、抗体是如何产生的？
B淋巴细胞抗原增殖分化成浆细胞
浆细胞骨髓瘤细胞选出能产生特定抗体的细胞群继续培养
细胞融合筛选
杂交瘤细胞
细胞培养
体外培养
从培养液或小鼠腹水中取出单克隆抗体
体内培养
练习：
1、动物细胞融合和植物原生质体融合比较，在动物细胞融合中有特殊性的是（ A、融合的原理 C、融合的诱导手段）
B、融合的优点 D、融合的过程
2.制备过程：
注射抗原的目的是什么
诱导其融合的方法有哪些？融合后培养液中有几种细胞怎样筛选出杂交瘤细胞，杂交瘤细胞有何优点为何要进行克隆化培养和专一抗体检测，多次筛选大量增殖杂交瘤细胞获得单抗的方法
1.在制备单克隆抗体的过程中，选用哪两种细胞进行融合？为什么选择这两种细胞？浆细胞和骨髓瘤细胞浆细胞能产生单一抗体，但不能无限增殖；骨髓瘤细胞能无限增殖，但不能产生单一抗体。

动物细胞融合与单克隆抗体(教案)

动物细胞融合与单克隆抗体(教案)第一章：动物细胞融合概述1.1 动物细胞融合的定义与意义1.2 动物细胞融合的方法1.3 动物细胞融合的应用第二章：细胞融合的诱导方法2.1 物理方法2.1.1 电融合法2.1.2 超声波融合法2.2 化学方法2.2.1 聚乙二醇(PEG)融合法2.2.2 灭活病毒融合法2.3 生物方法2.3.1 细胞表面分子的诱导2.3.2 细胞内信号传导途径的诱导第三章：单克隆抗体的制备与鉴定3.1 杂交瘤技术的原理及流程3.1.1 杂交瘤技术的原理3.1.2 杂交瘤细胞的筛选与克隆化3.1.3 单克隆抗体的生产与纯化3.2 单克隆抗体的性质鉴定3.2.1 抗体特异性鉴定3.2.2 抗体亲和力鉴定3.2.3 抗体效价测定第四章：单克隆抗体的应用4.1 诊断方面4.1.1 酶联免疫吸附试验(ELISA)4.1.2 免疫荧光技术4.1.3 免疫组化技术4.2 治疗方面4.2.1 抗体药物4.2.2 抗体介导的免疫治疗4.2.3 抗体工程第五章：动物细胞融合与单克隆抗体的研究进展5.1 重组抗体技术5.1.1 重组抗体的制备方法5.1.2 重组抗体的应用5.2 抗体的人源化5.2.1 人源化抗体的制备方法5.2.2 人源化抗体的优势及应用5.3 抗体生物制药的发展趋势5.3.1 抗体药物的联合应用5.3.2 纳米抗体技术5.3.3 抗体药物的个性化治疗第六章：细胞融合的效率与优化6.1 影响细胞融合效率的因素6.1.1 细胞类型与状态6.1.2 诱导方法的选择与优化6.1.3 融合条件与时间的控制6.2 提高细胞融合效率的策略6.2.1 细胞预处理技术6.2.2 融合诱导剂的浓度与处理时间6.2.3 融合过程中的物理和化学条件控制第七章：杂交瘤细胞的筛选与克隆化7.1 筛选杂交瘤细胞的方法7.1.1 选择性培养基的筛选7.1.2 HAT选择性培养基的原理与应用7.1.3 筛选过程中的计数与纯度评估7.2 克隆化培养技术7.2.1 有限稀释法7.2.2 显微镜手工分离法7.2.3 自动化克隆化技术第八章：单克隆抗体的生产与纯化8.1 单克隆抗体的生产8.1.1 体外培养体系的设计8.1.2 培养条件的优化8.1.3 细胞株的生产能力评估8.2 单克隆抗体的纯化8.2.1 纯化方法的选择8.2.2 蛋白质A/G纯化法8.2.3 离子交换色谱和凝胶过滤色谱第九章：单克隆抗体的特性分析与质量控制9.1 抗体特异性分析9.1.1 抗原结合实验9.1.2 交叉反应分析9.1.3 抗体竞争实验9.2 抗体亲和力测定9.2.1 生物素-亲和力实验9.2.2 酶联免疫吸附实验(ELISA)9.2.3 表面等离子共振(SPR)技术9.3 抗体质量控制9.3.1 抗体产量与纯度的控制9.3.2 抗体稳定性的评估9.3.3 抗体生物安全性检测第十章：实验操作指南与常见问题解析10.1 实验操作指南10.1.1 实验材料与设备准备10.1.2 实验步骤与操作流程10.1.3 实验结果记录与分析10.2 常见问题解析10.2.1 细胞融合失败的原因10.2.2 杂交瘤细胞筛选困难的原因10.2.3 单克隆抗体产量低的原因10.2.4 抗体质量问题的排查与解决第十一章：动物细胞融合与单克隆抗体的实验设计11.1 实验目的与意义的确定11.2 实验步骤的设计与优化11.3 实验条件的控制与调整11.4 实验数据的采集与分析第十二章：动物细胞融合与单克隆抗体的研究案例分析12.1 案例一：治疗性抗体的研发与应用12.1.1 案例背景与问题陈述12.1.2 实验设计与方法12.1.3 结果分析与讨论12.2 案例二：诊断用单克隆抗体的开发12.2.1 案例背景与问题陈述12.2.2 实验设计与方法12.2.3 结果分析与讨论第十三章：动物细胞融合与单克隆抗体技术的拓展应用13.1 抗体偶联药物(ADCs)13.1.1 ADCs的制备与性质13.1.2 ADCs的应用与挑战13.2 免疫调节剂的研究13.2.1 免疫调节剂的类型与作用机制13.2.2 免疫调节剂的应用前景13.3 疫苗研发与免疫预防13.3.1 疫苗设计与制备13.3.2 疫苗的临床试验与评价第十四章：动物细胞融合与单克隆抗体技术的未来趋势14.1 基因编辑技术在抗体研究中的应用14.1.1 CRISPR/Cas9技术在抗体基因克隆中的应用14.1.2 基因编辑技术在抗体亲和力增强中的应用14.2 与高通量技术在抗体发现中的应用14.2.1 在抗体设计中的应用14.2.2 高通量筛选技术在抗体筛选中的应用14.3 细胞治疗与组织工程中的应用14.3.1 利用抗体技术促进细胞治疗的发展14.3.2 抗体技术在组织工程中的应用第十五章：教学总结与评价15.1 教学目标的回顾与评估15.2 学生反馈与教学改进15.3 教学资源的整合与优化15.4 课程考核与评价标准重点和难点解析本文主要介绍了动物细胞融合与单克隆抗体的相关知识，重点包括细胞融合的方法、诱导手段、单克隆抗体的制备与鉴定、应用以及研究进展。

2020-2021学年生物人教版选修3学案：2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体

2．2.2 动物细胞融合与单克隆抗体知识点一动物细胞融合1．概念：两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，也称细胞杂交。

2．结果：形成单核杂交细胞。

3．原理：细胞膜的流动性。

4．过程：不同动物的两个或多个细胞――→灭活的病毒或PEG杂交细胞5．诱导方法物理法——离心、振动、电激；化学法——聚乙二醇(PEG)；生物方法——灭活的病毒。

注意：灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但是并不破坏这些病原体的抗原结构。

6．灭活病毒诱导细胞融合的原理病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞相互凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。

这一过程既能反映出糖蛋白在细胞识别中的重要作用，又能反映出细胞膜结构的流动性特点。

7．动物细胞融合的优点与应用(1)优点：突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能。

目前，已有种间、属间、科间，甚至动物与植物之间的细胞融合获得了成功。

(2)应用：是研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。

特别是利用细胞融合技术而发展起来的杂交瘤技术，为制造单克隆抗体开辟了新途径。

植物体细胞杂交和动物细胞融合的区别植物体细胞杂交动物细胞融合原理细胞膜的流动性和植物细胞的全能性细胞膜的流动性步骤酶解法去掉细胞壁后，诱导原生质体融合，形成杂种体细胞，再经过植物组织培养形成杂种植株分散成单个细胞后诱导细胞融合诱导方法物理方法、化学方法物理方法、化学方法、灭活病毒结果形成杂种植株形成杂种细胞【典题精练1】下列有关植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较，正确的是()A．两者应用的原理都是高度分化的细胞具有全能性B．两者都可用聚乙二醇(PEG)诱导细胞融合C．两者细胞融合成功的标志都是形成融合细胞核D．两者的目的都是用于大量生产分泌蛋白【解析】植物体细胞杂交的原理是细胞膜具有流动性和植物细胞具有全能性，动物细胞融合的原理是细胞膜具有流动性，A错误；聚乙二醇(PEG)既可诱导动物细胞融合，又可诱导植物原生质体融合，B正确；植物体细胞融合成功的标志是杂种细胞再生出细胞壁，动物细胞融合成功的标志是形成融合细胞核，C错误；植物体细胞杂交的目的是产生杂种植株，动物细胞融合可用于大量生产分泌蛋白，D错误。

2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体

2．2.2动物细胞融合与单克隆抗体理一理判一判1.常用于诱导动物细胞融合的手段有：聚乙二醇、灭活的病毒、电激、紫外线照射。

(×)2．杂交瘤细胞进行体内培养，是为了获得能产生单克隆抗体的胚胎。

(×)3．在动物细胞融合过程中，使用胰蛋白酶处理有利于杂交瘤细胞的形成。

(×)4．将抗原注入小鼠体内，以获得相应的B淋巴细胞。

(√) 5．细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，创造出了许多动物、植物的新物种。

(×)6．筛选能产生特定抗体的杂交瘤细胞时，需要运用到抗原—抗体杂交的方法。

(√)7．经选择性培养基筛选出来的杂交瘤细胞即可用于单克隆抗体的生产。

(×)8．生物导弹是指将单克隆抗体与放射性同位素、化学药物或细胞毒素相结合。

(√)悟一悟1.动物细胞融合的过程包括细胞膜融合、细胞质融合和细胞核融合。

其中细胞膜融合是细胞融合的先导，细胞核融合是细胞融合的实质。

2．融合处理后的细胞不可以直接用于培养，还需要筛选。

因为诱导融合的手段只是促使细胞间的融合，不能保证所有的细胞都发生融合，形成的融合细胞也有多种，因此需要进行筛选。

3．细胞融合技术与有性杂交不同。

有性杂交有着十分严格的时空关系和物种界限；动物细胞融合则不同，它通过人工的方法克服了存在于物种之间的遗传屏障，从而能够按照人们的意愿，把不同物种的不同组织类型的细胞融合在一起。

4．对动物进行免疫的原因：B淋巴细胞要经过免疫过程，即接触抗原，增殖分化为有特异性免疫功能的B淋巴细胞，才能产生相应的抗体，所以，与骨髓瘤细胞融合的B淋巴细胞实际上是浆细胞。

5．融合过程中，有同种细胞间的融合和不同种细胞间的融合，还有未融合的细胞。

6．杂交瘤细胞的特点：既能无限增殖，又能产生专一性抗体。

7．能产生特定抗体的杂交瘤细胞在小鼠腹腔内培养与体外培养相比，优点是不需特定的培养基，不需严格的外界环境条件。

感悟体会：练一练1.[2019·江苏卷](多选)如图为细胞融合的示意图，下列叙述正确的是()A．若a细胞和b细胞是植物细胞，需先去(脱)分化再诱导融合B．a细胞和b细胞之间的融合需要促融处理后才能实现C．c细胞的形成与a、b细胞膜的流动性都有关D．c细胞将同时表达a细胞和b细胞中的所有基因解析：若a细胞和b细胞是植物细胞，应先用酶解法去掉它们的细胞壁再诱导融合，A错误；无论是动物细胞还是植物细胞，两个细胞的融合都需要促融处理后才能实现，B正确；两个细胞融合成一个细胞，利用了细胞膜的流动性，C正确；c细胞同时具备了a细胞和b细胞中的所有基因，但是基因是选择性表达的，因此c细胞中基因不一定都能够表达，D错误。

动物细胞融合与单克隆抗体PPT

跟踪训练
(2011年滦县高二检测)能使动物细胞融 )
合的特有的诱导因素是( A．离心
B．灭活的病毒
C．电激
答案：B
D．振动
单克隆抗体的制备 1．关键思路及操作依据 (1)关键思路
①克隆单一的B淋巴细胞，形成细胞群。
②将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，获得杂交瘤细胞。 (2)用B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的原因
)
动物细胞工程动物细胞培养和融合，单克隆抗体的制备胰蛋白酶处理，制作细胞悬液物理方法、化学方法、生物方法单克隆抗体的制备动物血清不可缺少
A.1 C．3
B．2 D． 4
【尝试解答】
【解析】
B
选B。植物细胞工程常采用的技术手段
有植物组织培养和植物体细胞杂交。动物细胞工程
常采用的技术手段有动物细胞培养、细胞融合、单克隆抗体的制备，还有胚胎移植、核移植等。动、
细胞。
远缘杂交的不亲合性，成为研 4．意义：克服了______ 遗传、_________ 细胞免疫、肿瘤和生物_______ 新品种培究细胞_____
育的重要手段。
二、单克隆抗体
1．传统抗体的获得
抗原，使动 (1)方法：①向动物体内反复注射某种_____ 抗体；②从动物_____ 血清中分离所需抗体。物产生_____ 产量低、纯度低、_______ 特异性差。 (2)特点：_______
动物细胞融合 1．原理：膜的流动性。 2．诱导方法：物理法——离心、振动、电激；化学法——聚乙二醇；生物方法——灭活的病毒。
3．动物细胞融合的过程
4．优点：动物细胞融合技术突破了有性杂交方法
的局限性，使远缘杂交成为可能。特别提醒灭活是指用物理或化学的手段使病毒或细菌失去感染能力，但是并不破坏这些病原体的抗原结构。

动物细胞融合与单克隆抗体(说课教案)

动物细胞融合与单克隆抗体（说课教案）黄冈中学屈泽兵各位评委、各位老师：你们好！我叫屈泽兵，来自黄冈中学。

我说课的内容是：人教版生物选修3专题2中的《动物细胞融合与单克隆抗体》。

我将从说教学理念、说教材及学情、说教学目标、说教法及学法、说教学过程、说课后反思等六个方面对本节课进行分析说明，请各位专家老师批评指正！一、教学理念新教材要求培养学生的探究能力及独立学习能力，同时在教学内容上也突出体现了这一点。

这种改变，对高中阶段的生物学习带来了一定的影响，教学内容变得更多，高考考查变得更加灵活。

如何应对这一改变，黄冈中学申请开展了省级课题《高中生物高效兴趣课堂的构建》。

课题的目标是教师教的轻松、高效，学生学的愉快、高效。

从学生对生物学的兴趣设计教学，使学生最有效地获取知识，并提升学习能力，提高教与学的效率，最终实现学生有主动学习的兴趣，也有主动学习的能力。

今天，我的说课，就是向各位专家老师汇报一下，目前我们生物老师探讨的进展。

二、说教材及学情（1）本课地位单抗的制备是动物细胞工程中一个重点，也是一个难点，在高考中也经常出现。

同时它也是一个学科内的综合内容，综合了免疫及动物细胞工程的相关知识。

（2）学情分析高二年级的学生，新课内容基本快要结束，但是都还没有将学科内容系统化，而本节内容则是一个典型的学科内综合。

实际调查中发现，很多同学难以将免疫与本节内容联系起来，以及难以将制备过程中的筛选准确理解，也容易在应用中错误理解抗体的作用。

三、说教学目标1．知识目标（1）细胞融合的概念及原理（2）单克隆抗体的制备过程及原理（3）单克隆抗体在实际生活中的应用2．能力目标建立良好的自主学习能力，以及理论实际应用能力3．教学重难点重点：单抗的制备过程难点：准确理解两次筛选的作用四、说教法与学法本节内容与我们的生活实际联系较少，可以采取问题教学法，通过阅读课文，设置问题引导学生学习、分析、探究，完成本节内容的教学。

五、教学过程1．导入从植物细胞融合引入，引起学生对所学内容回顾，与本节对比、印证巩固所学知识，也可以减轻本节内容的讲解负担。

动物细胞融合技术与单克隆抗体

《第2章细胞工程》第2节动物细胞工程二动物细胞融合技术与单克隆抗体必会知识考点梳理拓展延伸易错警示必会知识一动物细胞融合技术1．动物细胞融合技术：是使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。

融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。

细胞融合的实质是核融合。

2．原理：动物细胞融合的基本原理为细胞膜的流动性。

3．诱导融合的方法(1)化学方法：PEG融合法。

(2)物理方法：电融合法。

(3)生物方法：灭活病毒诱导法。

4．过程：具有不同遗传信息的两个或多个细胞杂交。

5．结果：形成单核杂交细胞，具有原来两个或多个细胞的遗传信息，可表现出两个或多个亲本的特点。

6．意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。

这一技术成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段。

如利用动物细胞融合技术而发展起来的杂交瘤技术，为制造单克隆抗体开辟了新途径。

必会知识二单克隆抗体及其应用1．传统抗体的获得(1)方法：向动物体内反复注射某种抗原，使动物产生抗体，然后从动物血清中分离所需抗体。

(2)缺陷：制备的抗体产量低、纯度低以及特异性差。

2．单克隆抗体的制备：单克隆抗体是由单一杂交瘤细胞增殖产生的高度专一的抗体。

(1)制备原理①B淋巴细胞的特点：每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体，B淋巴细胞在体外不能无限增殖。

②骨髓瘤细胞的特点：在体外能大量增殖，但不能产生抗体。

③杂交瘤细胞的特点：B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合得到的杂交瘤细胞，既能迅速大量增殖，又能产生专一的抗体。

(2)制备过程①制备产生特定抗体的B淋巴细胞：用特定的抗原对小鼠进行免疫处理，并从该小鼠的脾中得到能产生特定抗体的B淋巴细胞。

②培养骨髓瘤细胞。

③将小鼠的骨髓瘤细胞与从脾中得到的B淋巴细胞融合。

④用特定的选择培养基进行筛选：在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有杂交瘤细胞才能生长。

⑤克隆化培养和抗体检测：对上述经选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。

动物细胞融合和与单克隆抗体教案--张雪兰

动物细胞融合与单克隆抗体张雪兰动物细胞融合与单克隆抗体一。

动物细胞融合1.概念：动物细胞融合（cell fusion）也称细胞杂交（cell hybridization），是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞（hybrid cell）2.方法：诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的方法类似，常用的诱导因素有聚乙二醇（PEG）、灭活的病毒、电激等。

二。

单克隆抗体杂交瘤技术（ hybridoma ）抗体是机体受抗原刺激产生的、并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。

浆细胞产生抗体。

1.单克隆抗体的制备单克隆抗体技术-----动物细胞融合技术最重要的用途正常淋巴细胞（如小鼠脾细胞），具有分泌抗体的能力，但不能长期培养瘤细胞（如骨髓瘤）可以在体外长期培养，但不分泌抗体1975年英国人Kohler和Milstein 将两种细胞杂交而创立了单克隆抗体技术，获1984年诺贝尔奖单克隆抗体制备单：一个杂交瘤细胞克隆：该细胞增殖分化为相同的细胞群抗体：该细胞群产生的抗体。

特点：特异性强灵敏度高2。

单克隆抗体的应用与常规抗体相比，单克隆抗体产量高，特异性强，灵敏度高，优越性十分明显。

主要应用有：1）临床诊断2）作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹”治疗肿瘤思考1、本过程利用了哪些原理？免疫原理，细胞融合原理和动物细胞培养原理2、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合？这样融合成的杂交瘤细胞，继承了双亲细胞的遗传物质，不仅具有B细胞分泌抗体的能力，而且还有无限增殖的本领，因而可以获得大量单克隆抗体。

【典例分析】1.（2005·浙江）人体神经细胞与肝细胞的形态结构和功能不同，其根本原因是这两种细胞的DA、DNA碱基排列顺序不同B、核糖体不同C、转运RNA不同D、信使RNA不同2.（2005·广东）关于单克隆抗体，下列叙述不正确的是DA、可以制成诊断盒．用于疾病的诊断B、可以与药物结合，用于病变细胞的定向治疗C、可以利用基因工程技术生产D、可以在生物体内生产，不能体外生产3.（2004·广东）人体中具有生长激素基因和血红蛋白基因，两者DA. 分别存在于不同组织的细胞中B．均在细胞分裂前期按照碱基互补配对原则复制C. 均在细胞核内转录和翻译D．转录的信使RNA上相同的密码子翻译成相同的氨基酸4.（2004·上海）下列关于细胞工程的叙述中，错误的是CA．植物细胞融合必须先制备原生质体B．试管婴儿技术包括人工受精和胚胎移植两方面C．经细胞核移植培育出的新个体只具有一个亲本的遗传性状D．用于培养的植物器官或组织属于外植体5．在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是（B）A．结果是相同的B．杂种细胞的形成过程基本相同C．操作过程中酶的作用相同D．诱导融合的手段相同。

2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体

学习目标二：单克隆抗体
B淋巴细胞
受抗原刺激增殖分化
强调：效应B淋巴细胞是效应B细胞记忆B细胞能够产生抗体的B淋巴细 (浆细胞）胞，下文将其简称为B淋巴细胞抗体：能够与抗原发生特异
性结合的免疫球蛋白。
能产生抗体的细胞是浆细胞（即效应B细胞）。
抗体的传统生产方法:
抗原反复注射动物该法制备抗体的缺点：
用途
获得杂种植株
小结:
动物细胞培养过程三个重点过程细胞核移植过程单克隆抗体制备过程一个诱导动物细胞融合的新方法 —— 灭活病毒三个“一” 一个新细胞 —— 杂交瘤细胞一个优势—— 单克隆抗体特异性强、灵敏度高、可大量制备的优势
P55：1、植物体细胞杂交技术与动物细胞
融合技术有什么不同？
3、单克隆抗体的应用：
单克隆抗体的优点：特异性强、灵敏度高、可大量制备
①作为诊断试剂（最广泛的用途）：
准ห้องสมุดไป่ตู้识别各种抗原物质，并特异性结合
优点：准确、高效、简易、快速
②应用于治疗疾病：主要用于癌症治疗运载药物：制成“生物导弹”
“生物导弹” ＝单克隆抗体＋药物
既不损伤正常细胞，又减少了用药剂量。
2、结果：形成单核的杂交细胞 3、原理：细胞膜的流动性物理法：离心、振动、电激 4、诱导方法化学法：聚乙二醇（PEG)
生物法：灭活的病毒（最常用）
思考：为什么细胞融合过程中使用的病毒
需要灭活？不灭活行吗？因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合，不灭活的话病毒会感染细胞，导致疾病。灭活丧失感染性，但保留融合活性。
胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是：

【高中生物】动物细胞融合技术与单克隆抗体+课件+高二下学期生物人教版选择性必修3 - 副本

2、单克隆抗体的制备过程
杂交瘤细胞(多种)
克隆化培养
第二次筛选抗体检测 (抗原-抗体杂交技术)
阳性细胞
能分泌所需抗体的杂交瘤细胞
二单克隆抗体及其应用
2、单克隆抗体的制备过程能分泌所需抗体的杂交瘤细胞
体内或体外培养
注射到小鼠腹腔
体外培养单克隆抗体
二单克隆抗体及其应用
筛选原理：
①细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。 ②人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但不能分裂增殖。 ③鼠骨髓瘤细胞中只有D途径，没有S途径，但能不断分裂增殖。
张林琦教授团队
二单克隆抗体及其应用
3、单克隆抗体的应用
3、运载药物 ADC通常由抗体、接头和药物（如细胞毒素）三部分组成。阅读教材50页
思考：ADC的抗体和药物各具有什么作用？抗体主要发挥靶向运输作用；药物发挥治疗效应，如杀伤靶细胞。
二单克隆抗体及其应用
3、单克隆抗体的应用
对点训练
下列有关动物细胞融合与植物体细胞杂交比较的叙述，错误的是（） A. 它们的原理都涉及细胞膜的流动性 B. 都可以用电融合法或PEG融合法诱导融合
克服远缘杂交不亲和障碍
物理方法、化学方法、灭活病毒形成杂种细胞
二单克隆抗体及其应用
抗体
1.定义：机体受抗原刺激后产生的，能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。
12）.抗每体个的B分淋布巴：细胞只分泌一种特异性的抗体
1）血清（主要） 22））体组内织产液生及的外特分异泌性液抗（体如种乳类汁多中达）百万种以上
二单克隆抗体及其应用
2、单克隆抗体的制备过程注射特定抗原
多种已免疫 B淋巴细胞

动物体细胞融合与单克隆抗体

）
D．离心
骨髓造血干 1.淋巴细胞是由动物体---------------------中的---------------------细胞分化发育而来的。主动运输 2.杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是---------------------
三.思考与探究 1.植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术有什么不同？
4.下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌的实验方案
A
制备单克隆抗体 (1).该实验方案的目的是：________________ (2).该方案能达到预期效果吗？为什么？不能，没有将抗原注入小鼠体内，无法获得产生单一抗体的B淋巴细胞。 (3).A是从小鼠的脾脏中取得__________ 该细胞能 B淋巴细胞抗体够产生______ 。细胞融合 (4).图中B为________________过程，常用灭活的病毒 _________________作为诱导剂，该细胞继承 ___________的遗传特性，既能__________,又能双亲细胞分泌抗体无限增殖 ___________。
教学反馈
1.动物细胞融合技术最重要的用途是（ B A.克服远源杂交不亲和 B.制备单克隆抗体 C.培育新物种 D.生产杂种细胞
2.单克隆抗体是由下列哪种细胞产生的（ A.B淋巴细胞 B.T淋巴细胞 C.骨髓瘤细胞 D.杂交瘤细胞）
）
D
3.（多选）1975年米尔斯坦和柯勒成功地获得了单克隆抗体。下列细胞中与单克隆抗体的制备有关的是（ A B C D） A.效应B细胞 C.骨髓瘤细胞 B．T淋巴细胞 D．杂交瘤细胞
免疫小鼠
培养骨髓瘤细胞
注射特定抗原蛋白
单克隆抗体制备过程示意图

高中生物高考考点84 动物细胞融合与单克隆抗体-备战2022年高考生物考点一遍过

1．动物细胞融合（1）原理：细胞膜的流动性。

（2）融合方法：聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒、电激等。

（3）意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能，也为制造单克隆抗体开辟了新途径。

2．单克隆抗体（1）制备过程（2）优点：特异性强、灵敏度高，可大量制备。

（3）用途：作为诊断试剂；用于治疗疾病和运载药物。

学科&网考向单克隆抗体的制备过程分析1．如图是单克隆抗体制备过程示意图，相关叙述错误的是A．过程①注射一种灭活病毒可使小鼠体内产生浆细胞B．过程②形成的两两融合细胞只有图中的3种类型C．过程③采用抗原—抗体反应进行特定杂交瘤细胞的筛选D．过程④获得的全部杂交瘤细胞都只能产生同一种抗体【参考答案】B【时候解析】A、灭活病毒可作为抗原刺激小鼠产生浆细胞，A正确；B、过程②形成的融合细胞包括同种细胞融合和异种细胞融合，即过程②还可以形成浆细胞与浆细胞、瘤细胞与瘤细胞间的融合细胞，B 错误；C、可借助抗原-抗体间特异性结合反应进行特定杂交瘤细胞的筛选，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞，C正确；D、通过抗原-抗体反应筛选出的杂交瘤细胞只能产生同一种抗体，D正确。

解题技巧制备单克隆抗体过程中两次筛选的方法及目的项目第一次筛选第二次筛选筛选原因诱导融合后得到多种杂交细胞，另外还有未融合的细胞由于小鼠在生活中还受到其他抗原的刺激，所以经选择性培养获得的杂交瘤细胞中有能产生其他抗体的细胞筛选方法用特定的选择培养基筛选：未融合的细胞和同种细胞融合后形成的细胞(“BB”细胞、“瘤瘤”细胞)都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞(“B瘤”细胞)能生长用多孔培养皿培养，在每个孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始克隆化培养和抗体检测，经多次筛选得到能产生特异性抗体的细胞群筛选目的得到杂交瘤细胞得到能分泌所需抗体的杂交瘤细胞2．单克隆抗体的特点是特异性强、灵敏度高、可以大量制备，已被广泛应用于疾病的诊断和治疗。

用H7N9病毒制备单克隆抗体的流程如下图所示：（1）过程③常用的方法是_________________________。

专题动物细胞融合与单克隆抗体

细胞A、B ↓融合
杂交细胞
↓ 杂种细胞
↓有丝分裂多个相同杂交细胞
↓植物组,织培养杂种植株
植物体细胞杂交
动物细胞融合
相关酶
纤维素酶和果胶酶
胰蛋白酶或胶原蛋白酶
融合方物理法：离心、电激、振动；除物理法和化学法外还
法化学法：聚乙二醇等试剂诱导可以用灭活的病毒诱导
结果
杂种植株
杂交细胞
意义
突破了有性杂交方法的克服了远缘杂交的不亲和性，
提示：(1)每一个B淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体，但不能无限增殖；骨髓瘤细胞可大量快速增殖，却不能产生抗体。若将两种细胞融合在一起，既能产生一种特异性抗体又能快速增殖。
(2)未融合的B淋巴细胞、未融合的骨髓瘤细胞、B－B融合细胞、瘤－瘤融合细胞、B－瘤融合细胞。
(3)第一步筛选的目的是获得杂交瘤细胞；第二步筛选的目的是获得能产生所需单一抗体的杂交瘤细胞。
[跟随名师·解疑难] 1．血清抗体与单克隆抗体的比较
名称产生特点 Nhomakorabea一般从血清中分离，产量血清抗体由B淋巴细胞分泌
低、纯度低、特异性差
特异性强、灵敏度高，能单克隆抗体由杂交瘤细胞分泌
大量制备
2．制备单克隆抗体过程中两次筛选的目的不同 (1)第一次筛选是将未融合的B淋巴细胞、骨髓瘤细胞以及 B—B融合、瘤—瘤融合的细胞通过选择培养基淘汰，筛选出杂交瘤细胞。 (2)第二次筛选是将产生特定抗体的B—瘤细胞通过细胞培养用相应抗原检测的办法筛选出来。因为从体内取免疫过的B 淋巴细胞时会取出很多种，形成的杂交瘤细胞有很多种，所以需筛选出产生特定抗体的杂交瘤细胞。
细胞融合的过程包括细胞膜融合、细胞质融合和细胞核融合，其中细胞膜融合是细胞融合的先导，在细胞膜融合中体现出细胞膜具有一定的流动性。

高二生物动物细胞融合与单克隆抗体测试题(带参考答案)

高二生物动物细胞融合与单克隆抗体测试题〔带参考答案〕1.动物细胞融合的目的中 ,最重要的是()A.克服远缘杂交不亲和的障碍B.制备单克隆抗体C.培育新物种D.生产杂交细胞解析：选B。

植物体细胞杂交 ,主要是为了克服远缘杂交不亲和的障碍 ,以培育新品种。

另外 ,植物体细胞杂交还应用了植物细胞的全能性。

动物细胞作为整体 ,它的全能性受到限制 ,目前只见到高度分化的细胞核在去核卵细胞中表现全能性 ,还未见到融合细胞核表现出全能性的例子 ,因此动物细胞融合不能用来培育新的物种。

生产杂交细胞 ,也不是细胞融合的主要目的。

2.动物细胞融合和植物体细胞杂交技术的比拟中 ,正确的选项是()A.诱导融合的方法完全相同B.所用的技术手段根本相同C.培养基成分相同D.都能形成杂种细胞解析：选D。

动物细胞融合和植物体细胞杂交这两项细胞工程技术中 ,都包含有细胞融合的过程 ,都能形成杂种细胞。

对于诱导方法来说 ,除动物细胞的融合还可用灭活的病毒作诱导剂外 ,其他的根本相同。

植物体细胞杂交前需先去掉细胞壁 ,在完成细胞融合后 ,还要将杂种细胞培育成植株 ,所以 ,它们所应用的技术手段是有差异的。

植物细胞培养用的是固体培养基 ,动物细胞培养用的是液体培养基 ,其成分中还有动物血清 ,培养基成分有一定的差异。

3.(2019年高考江苏卷)关于现代生物技术应用的表达 ,错误的选项是()A.蛋白质工程可合成自然界中不存在的蛋白质B.体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体C.植物细胞培养技术可用于植物茎尖脱毒D.动物细胞培养技术可用于转基因动物的培育解析：选B。

蛋白质工程与基因工程不同 ,基因工程产生的是自然界中原有的蛋白质 ,而蛋白质工程可合成自然界中不存在的蛋白质 ,A项正确。

体细胞杂交技术是植物细胞工程中培养杂种植株的一项技术 ,动物细胞工程中克隆动物常利用细胞核移植技术 ,而制备单克隆抗体常利用动物细胞融合技术 ,B项错误。

第2章第2节动物细胞融合技术与单克隆抗体讲义【新教材】人教版(2019)高中生物选择性必修3

第2课时动物细胞融合技术与单克隆抗体课标内容要求核心素养对接1.阐明动物细胞融合是指通过物理、化学或生物学等手段，使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。

2．概述细胞融合技术是单克隆抗体制备的重要技术。

1.生命观念：以细胞结构与功能为基础，理解动物细胞融合的内涵。

2．科学思维：结合具体实例，以流程图的形式表示单克隆抗体的制备过程。

3．社会责任：说明单克隆抗体的特点及应用。

一、动物细胞融合技术1．概念使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。

2．诱导原理和结果(1)诱导原理：细胞膜的流动性。

(2)诱导结果：形成杂交细胞。

3．诱导方法：PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等。

4．意义：突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能。

5．动物细胞融合技术的应用(1)成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段。

(2)用于制备单克隆抗体。

二、单克隆抗体1．制备原理(1)B淋巴细胞特点：一种B淋巴细胞分泌一种特异性抗体。

(2)骨髓瘤细胞特点：能在体外大量增殖。

(3)杂交瘤细胞特点：B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合得到的杂交瘤细胞，既能无限增殖又能产生大量特定抗体。

2．制备过程3．单克隆抗体的优点能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备。

4．单克隆抗体的应用(1)作为诊断试剂，具有准确、高效、简易、快速的优点。

(2)用于治疗疾病和运载药物。

判断对错(正确的打“√”，错误的打“×”)1．动物细胞融合过程中既有细胞膜融合也有核的融合。

(√) 2．与植物原生质体融合相比，动物细胞融合特有的诱导因素有聚乙二醇、灭活的病毒。

(×) 提示：动物细胞融合特有的诱导因素为灭活的病毒。

3．用特定的抗原对小鼠进行免疫后，从小鼠脾脏中只能得到一种B淋巴细胞。

(×) 提示：免疫后的小鼠从脾脏中获取的是多种B淋巴细胞。

4．单克隆抗体是单个B淋巴细胞增殖并产生的抗体。

《动物细胞融合与单克隆抗体》教案(第三课时)

（4）动物细胞融合技术的目的、原理、优点、最有价值的应用是什么？动物细胞融合完成的标志是什么？
1、概念：是指（在一定的条件下）两个或多个细胞融合形成一个细胞的过程。
[强调要点]“2个或多个动物细胞”→“1”、“杂交单核细胞”
2、动物细胞融合的方法：物理法（如电场法）、化学法（如聚
乙二醇法）、生物法（如仙台病毒法）
（3）利用酶的什么特性？
（4）诱导融合的方法有哪些？
（5）植物细胞融合完成的标志是什么？
（6）植物体细胞杂交技术的目的是什么？
（7）动植物细胞在结构上有何区别？
师：既然动物细胞与植物细胞不同，那么动物细胞是否可以融合或杂交？如果可以，两者的方法、过程相同吗？......[引入学生思考，激发兴趣]
下面就让我们一起来看看有关动物细胞融合的基础知识。
能力
目标
让学生尝试设计单克隆抗体的制备过程，指导学生掌握获取知识和探索生物科学的基本方法，使学生了解生物科学认识模式以发展学生的创造性能力。
情感
目标
通过向学生介绍动物细胞融合与单克隆抗体技术的发展动态及一些新的研究成果，使学生明确人们对生命奥秘的揭示愈加广泛和深入，知识不断更新并向前发展，认识到学无止境，形成终生学习的意识。
注意：应用物理法进行细胞融合的效率高，且对细胞伤害小，易操作、控制和观察。
3、过程：
师：当我们把2个动物细胞放到一起时，还需要做什么呢？
生：诱导
师：在诱导方法上，动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的方法是否相同？
生：相类似，可以用物理法、化学法，但动物细胞融合时可用灭活的病毒作为诱导剂。
细胞A 细胞B
（学生边写边讲，不足的地方进行补充，教师精讲点拨）
4、应用：诊断试剂；治疗疾病和运载药物。

生物-动物细胞融合技术与单克隆抗体

动物细胞融合技术与单克隆抗体[高中生物]　1.阐明动物细胞融合技术的概念，举例说出诱导动物细胞融合的方法。

2.概述单克隆抗体的制备过程。

一、动物细胞融合技术1．概念：使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。

2．原理：细胞膜的流动性。

3．诱导融合的方法Error!4．意义：细胞融合技术突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能。

5．应用(1)成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段。

(2)用于制造单克隆抗体。

判断正误(1)与植物原生质体融合相比，动物细胞融合特有的诱导因素有聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒( ) (2)灭活的含义是用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但并不破坏它们的抗原结构( ) (3)二倍体动物细胞融合后的杂交细胞仍然是二倍体细胞( )答案　(1)×　(2)√　(3)×探讨点　动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较1．19世纪30年代，科学家曾在患肺结核、天花和麻疹等疾病的病人的病理组织中，观察到多核细胞。

如何解释这一现象？提示　病人体内的病毒等诱导多个体细胞融合形成了多核细胞。

2．比较动物细胞融合技术和植物体细胞杂交技术(1)动物细胞融合和植物体细胞杂交技术的原理分别是什么？提示　动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性；植物体细胞杂交技术的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。

(2)两者在方法上有什么异同？提示　都可用聚乙二醇(PEG)融合法和电融合法诱导融合；但动物细胞还可用灭活病毒诱导法诱导细胞融合。

(3)两者在最终结果上有什么不同？提示　动物细胞融合最终得到的是杂交细胞，而植物体细胞杂交技术最终得到的是杂种植株。

核心归纳　动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合原理细胞膜的流动性、细胞的全能性细胞膜的流动性步骤酶解法去掉细胞壁后，诱导原生质体融合，形成杂种细胞，再经植物组织培养形成杂种植株分散成单个细胞后诱导细胞融合，形成杂交细胞方法聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca 2＋—高pH 融合法、电融合法、离心法PEG 融合法、电融合法、灭活病毒诱导法结果形成杂种植株形成杂交细胞，以生产细胞产品意义打破生殖隔离，实现远缘杂交育种突破有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能1．下列关于动物细胞融合的说法，不正确的是( )A ．常用于诱导动物细胞融合的方法有PEG 融合法、灭活病毒诱导法、电融合法、紫外线照射等B ．动物细胞融合后形成的具有原来两个或多个动物细胞遗传信息的细胞称为杂交细胞C ．动物细胞融合就是使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程D ．细胞融合技术突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能答案　A解析　常用于诱导动物细胞融合的方法有PEG 融合法、灭活病毒诱导法、电融合法等，紫外线照射不是诱导动物细胞融合的方法，A 错误。

动物细胞融合和单克隆抗体