免疫球蛋白M(IgM)测定标准操作程序SOP文件
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11临床意义:
IgM的分子结构含有10条重链（μ链）和10条轻链（κ、λ链）。通过J链将所有的μ链连接在一起。简单的说：与IgG相比IgM具有五聚体的结构。IgM的分子量在免疫球蛋白中最大，但其只占血浆中免疫球蛋白的6％。
在感染后，IgM是最早出现的特异性抗体，并且能激活补体系统来杀灭细菌，但是很快IgM水平就会降低而代之以IgG。所以临床上应用IgG及IgM的滴度来鉴别急性与慢性感染。如果免疫球蛋白以IgM为主，则是急性感染；如果以IgG为主，则为慢性感染。
准备:直接使用。
定标频率：A试剂批号更换
B由质控结果决定
ABCD医院
生化实验室
文件编号：
ABCD-SOP-04-45
免疫球蛋白M（IgM）测定
版序：ABCD
页码：第2页，共3页
4.3质控物
来源：Precinorm protein (罗氏蛋白正常值质控)
Precipath protein (罗氏蛋白病理值质控)
在细菌、病毒性感染及胰腺炎、肝炎、类风湿性关节炎等均会造成多克隆IgM水平的升高，单克隆IgM水平的升高多见于巨球蛋白血症。
IgM的合成减低见于获得性及先天性免疫缺陷综合征。
应用特异性抗体定量检测血清中的球蛋白已经成为非常具有价值的诊断指标。
Roche
mg/dl
g/l
mg/dl
g/l
40-230
0.4-2.3
男性:
50-320
女性:
60-370
0.5-3.2
0.6-3.7
8线性范围
本法线性范围为30-490mg/dl，不准确度允许范围 ±3SD，不精密度CV=2.9%，灵敏度为5mg/dl。
9注意事项
9.1血清标本出现溶血、脂血或黄疸的干扰情况参见抗干扰能力。
3标本
血清及肝素-Li、Na-肝素或EDTA抗凝血浆,处理方法见标本处理程序。
稳定性：20-25℃7天
4-8℃3个月
-20℃6个月
4试剂
4.1试剂
来源：ROCHE配套试剂（详见试剂说明书）。
贮存条件及稳定性：未打开试剂盒：2－8℃储存至效期末
R1：打开后机上稳定90天
R2：打开后机上稳定90天
准备：直接使用。
ABCD医院
生化实验室
文件编号：
ABCD-SOP-04-45
免疫球蛋白M（IgM）测定
版序：ABCD
页码：第1页，共3页
1测定方法
免疫比浊法。
2测定原理
抗IgM抗体与标本中的IgM抗原发生反应形成抗原-抗体复合物，为颗粒状，浊度变化与IgM的量成比例，因此，检测浊度可测得IgM的含量。
在反应中加入聚乙二醇可以使反应进程很快达到终点并且增加反应灵敏度，减少标本中的过量抗原参加反应形成假阴性的风险。
4.2校准物
来源：ROCHE配套校准物，符合WHO标准，CRM470,具体如下：
S1：0.9％的NaCl
S2-6:Preciset Serum protein
批特异的定标液的靶值乘以下列的转换因子，用来计算定标曲线。
S2:0.15
S3:0.30
S4:0.50
S5：1.00
S6:4.00
贮存条件：校准物在2-8℃保存可保存至有效期。
10.4乳糜：甘油三酯的浓度在1200mg/dl以下不会受到明显干扰。
10.5 IgM的浓度低于10000mg/dl时不会有HOOK效应。
10.6 IgA,IgG,IgM之间没有交叉反应。
ABCD医院
生化实验室
文件编Hale Waihona Puke Baidu：
ABCD-SOP-04-45
免疫球蛋白M（IgM）测定
版序：ABCD
页码：第3页，共3页
其它适合的质控品
贮存条件：置2-8℃冰箱至有效期。
准备：直接使用。
质控间隔时间及限制：应视不同地区及各自实验室情况而定。质控结果应在限定的范围之内，如果超出范围，实验室应根据情况采取措施。
5仪器
ROCHE MODULAR P或日立7060生化分析仪。
6操作
见R生化分析仪作业指导书。
7参考范围
IFCC/CRM470
9.2换算公式：mg/dl×0.01＝g/l
9.3仅应用于体外诊断。
10抗干扰能力：
10.1标准：回收率在90％－110％之间。
10.2黄疸：黄胆指数达到63时不会有明显干扰。（直接和间接胆红素浓度约为63mg/dl）
10.3溶血：溶血指数达到1000时不会有明显干扰。（血红素浓度约1000mg/dl）
IgM的分子结构含有10条重链（μ链）和10条轻链（κ、λ链）。通过J链将所有的μ链连接在一起。简单的说：与IgG相比IgM具有五聚体的结构。IgM的分子量在免疫球蛋白中最大，但其只占血浆中免疫球蛋白的6％。
在感染后，IgM是最早出现的特异性抗体，并且能激活补体系统来杀灭细菌，但是很快IgM水平就会降低而代之以IgG。所以临床上应用IgG及IgM的滴度来鉴别急性与慢性感染。如果免疫球蛋白以IgM为主，则是急性感染；如果以IgG为主，则为慢性感染。
准备:直接使用。
定标频率：A试剂批号更换
B由质控结果决定
ABCD医院
生化实验室
文件编号：
ABCD-SOP-04-45
免疫球蛋白M（IgM）测定
版序：ABCD
页码：第2页，共3页
4.3质控物
来源：Precinorm protein (罗氏蛋白正常值质控)
Precipath protein (罗氏蛋白病理值质控)
在细菌、病毒性感染及胰腺炎、肝炎、类风湿性关节炎等均会造成多克隆IgM水平的升高，单克隆IgM水平的升高多见于巨球蛋白血症。
IgM的合成减低见于获得性及先天性免疫缺陷综合征。
应用特异性抗体定量检测血清中的球蛋白已经成为非常具有价值的诊断指标。
Roche
mg/dl
g/l
mg/dl
g/l
40-230
0.4-2.3
男性:
50-320
女性:
60-370
0.5-3.2
0.6-3.7
8线性范围
本法线性范围为30-490mg/dl，不准确度允许范围 ±3SD，不精密度CV=2.9%，灵敏度为5mg/dl。
9注意事项
9.1血清标本出现溶血、脂血或黄疸的干扰情况参见抗干扰能力。
3标本
血清及肝素-Li、Na-肝素或EDTA抗凝血浆,处理方法见标本处理程序。
稳定性：20-25℃7天
4-8℃3个月
-20℃6个月
4试剂
4.1试剂
来源：ROCHE配套试剂（详见试剂说明书）。
贮存条件及稳定性：未打开试剂盒：2－8℃储存至效期末
R1：打开后机上稳定90天
R2：打开后机上稳定90天
准备：直接使用。
ABCD医院
生化实验室
文件编号：
ABCD-SOP-04-45
免疫球蛋白M（IgM）测定
版序：ABCD
页码：第1页，共3页
1测定方法
免疫比浊法。
2测定原理
抗IgM抗体与标本中的IgM抗原发生反应形成抗原-抗体复合物，为颗粒状，浊度变化与IgM的量成比例，因此，检测浊度可测得IgM的含量。
在反应中加入聚乙二醇可以使反应进程很快达到终点并且增加反应灵敏度，减少标本中的过量抗原参加反应形成假阴性的风险。
4.2校准物
来源：ROCHE配套校准物，符合WHO标准，CRM470,具体如下：
S1：0.9％的NaCl
S2-6:Preciset Serum protein
批特异的定标液的靶值乘以下列的转换因子，用来计算定标曲线。
S2:0.15
S3:0.30
S4:0.50
S5：1.00
S6:4.00
贮存条件：校准物在2-8℃保存可保存至有效期。
10.4乳糜：甘油三酯的浓度在1200mg/dl以下不会受到明显干扰。
10.5 IgM的浓度低于10000mg/dl时不会有HOOK效应。
10.6 IgA,IgG,IgM之间没有交叉反应。
ABCD医院
生化实验室
文件编Hale Waihona Puke Baidu：
ABCD-SOP-04-45
免疫球蛋白M（IgM）测定
版序：ABCD
页码：第3页，共3页
其它适合的质控品
贮存条件：置2-8℃冰箱至有效期。
准备：直接使用。
质控间隔时间及限制：应视不同地区及各自实验室情况而定。质控结果应在限定的范围之内，如果超出范围，实验室应根据情况采取措施。
5仪器
ROCHE MODULAR P或日立7060生化分析仪。
6操作
见R生化分析仪作业指导书。
7参考范围
IFCC/CRM470
9.2换算公式：mg/dl×0.01＝g/l
9.3仅应用于体外诊断。
10抗干扰能力：
10.1标准：回收率在90％－110％之间。
10.2黄疸：黄胆指数达到63时不会有明显干扰。（直接和间接胆红素浓度约为63mg/dl）
10.3溶血：溶血指数达到1000时不会有明显干扰。（血红素浓度约1000mg/dl）