微生物检查室空气净化系统的验证讲解
手术室空气净化微生物监测
手术室管理与监测一、手术室空气净化微生物监测洁净手术室空气净化微生物监测包括静态〔空态〕空气采样和动态空气采样两种方法，采样可以选择平皿沉降法和空气样器法两种方法，我院采用平皿沉降法。
1、静态〔空态〕空气采样法（1）采样时间：新房验收、净化设备检修或更换后，在洁净系统自净后与从事医疗活动前采样。
（2）采样方法：①静态〔空态〕空气采样宜在其他项目检测完毕，对全室外表进行常规清洁消毒之后进行。
②当送风口集中布置时，应对手术区和周边区分别检测，当送风口分散布置时，全室统一检测。
采样点可布置在地面上或不高于地面0.8m的任意高度上。
空气采注：分布在集中送风面正投影区角的采样点距离邻近两边的距离位0.12米。
③当用平皿沉降法采样时，采样布点数既要不少于〔表1〕中的布点数，又应满足〔表2〕规定的最少培养皿数的要求表2 平皿沉降法最少培养皿数被测区域洁净度级别最少培养皿数〔Ø 9cm,以沉降30分钟计〕100级131000级 510000级 3100000级 2300000级 2④不管用何种方法检测细菌密度，都必须有2次空白对照。
第1次对用于检测的培养皿或培养基条做比照试验，每批1个对照皿。
第2次是在检测时，每室或每区1个对照皿，对操作过程做对照试验，模拟操作过程，但培养皿或培养基条打开后应又立即封盖。
两次对照结果都必须为阴性，整个操作应符合无菌操作的要求。
⑤采样后的培养基或培养皿，应立即置于36℃+1℃温箱培养48小时，计数生长的菌落数，菌落数的平均值均四舍五入进位到小数点后一位。
(3)结果判断：我国洁净手术室的等级标准以及主要洁净辅助用房等级标准分别见表3表3 洁净手术室的等级标准〔静态或空态〕等级手术室沉降法细菌最大平均密度外表最大空气洁净度级别名称手术区周边区染菌密度手术区周边区I 2 100级1000级手术室Ø9皿Ø9皿II2 1000级10000级手术室Ø9皿Ø9皿III一般洁净2个/30min 4个/30min 5个/cm2 10000级100000级手术室Ø9皿Ø9皿IV 准洁净5个/30min ·Ø9皿5个/cm2 300000级手术室注：I级眼科专用手术室周边区按10000级要求表4 洁净辅助用房的等级标准〔静态或空态〕等沉降法细菌最大平均密度外表最大染菌密度空气洁净度级别级〔个/ cm2〕I· Ø9皿 5 局部100级· Ø9皿其他区域1000级II· Ø9皿 5 10000级III4个/30min · Ø9皿 5 100000级IV5个/30min · Ø9皿 5 300000级注：细菌密度是直接所测的结果，不是沉降法和采样器法互相换算的结果。
空气微生物检测实验设计
空气微生物检测实验设计一、实验背景空气中存在着各种各样的微生物，包括细菌、真菌、病毒等。
这些微生物可能会对人类健康、环境质量和工业生产等方面产生重要影响。
例如，在医院、食品加工厂、实验室等场所，空气中的微生物污染可能导致疾病传播、食品变质和实验结果误差等问题。
因此，对空气微生物进行检测和监测具有重要的意义。
二、实验目的本实验的目的是检测空气中微生物的种类和数量，评估空气质量，并为采取相应的控制措施提供依据。
三、实验原理空气微生物检测通常采用培养法和非培养法。
培养法是将空气中的微生物采集到培养基上，在适宜的条件下培养，然后通过观察菌落形态、数量和特征来鉴定微生物的种类和数量。
非培养法包括基于分子生物学的方法（如 PCR 技术）、显微镜观察法等。
本实验采用培养法，利用空气采样器将空气中的微生物收集到琼脂培养基上，经过一定时间的培养，计算菌落形成单位（CFU）来表示微生物的数量。
四、实验材料和设备1、培养基营养琼脂培养基马铃薯葡萄糖琼脂培养基（用于真菌检测）2、采样器撞击式空气微生物采样器3、培养箱恒温培养箱（设定温度 37℃用于细菌培养，28℃用于真菌培养）4、无菌器材无菌平皿移液器无菌吸管5、其他器材酒精灯记号笔计数器五、实验步骤1、培养基的制备按照培养基的配方准确称取所需的成分，溶解于适量的蒸馏水中。
加热至完全溶解，调节 pH 值至合适范围。
分装到无菌平皿中，约 15-20ml 每皿，待冷却凝固后备用。
2、采样点的选择根据检测场所的特点和目的，选择具有代表性的采样点。
例如，在医院可以选择病房、手术室、走廊等；在食品加工厂可以选择加工车间、包装间、仓库等。
3、采样操作打开撞击式空气微生物采样器，将采样器放置在选定的采样点，距离地面约 15 米的高度。
设置采样时间和流量，通常采样时间为 5-15 分钟，流量为 100-200L/min。
启动采样器，让空气通过采样器撞击到培养基表面，完成微生物的采集。
洁净区空调验证方案
确认与验证方案文件编号版次共页制订人制订日期年月日审核人审核日期年月日审核人审核日期年月日审核人审核日期年月日批准人批准日期年月日颁发部门分发部门：生效日期年月日1.概述2.目的3.对象和围4.确认与验证计划5.系统风险评估6.职责7.验证容7.1 设计确认7.2 安装确认7.3 运行确认7.4 性能确认8.再验证周期9.确认与验证结果评定、偏差分析与结论10.确认与验证报告的出具11.确认与验证证书的签发12.偏差与变更处理则13.附件1.概述1.1 我公司的生产洁净区空气净化系统于 2022 年4 月项目竣工，按照《药品生产质量管理规》 (2022 版)的要求和《中国药典》 (2022 版)的要求，生产净化区洁净度应达到 D 级，所以此验证方案采用 D 级标准进行验证。
净化系统采用直接蒸发式空调机组室机一次回风系统，送风方式采用顶送，下侧回风，回风统一由回风柱返回机组；洁净空气由洁净区流向非洁净区，由缓冲间流向室外；空调系统的加热和制冷均由直接蒸发式空调机组室外机进行供送。
并且通过对空调系统各区域的送风、回风大小的调节，使生产结洁净区能间达到规定的要求。
1.2 空调净化系统由送风管道、回风管道和分体式空调机组组成。
.1.3 空气净化系统流程：新风→初效过滤器→冷盘管→热盘管→蒸汽加湿段→风机→均流段→ 中效过滤器→高效过滤器→ 室1.4 基本情况1.4.1 直接蒸发式空调机组设备名称直接蒸发式空调机组室机型号BSC2022AH25-H 设备编号BIO—001—01 出厂编号00200090风量31000m3/h 出厂日期2022 年 02 月生产厂家安装完成日期2022 年 03 月.管理部门 1.4.2 直接蒸发式空调机组 设备名称设备编号 冷 量生产厂家管理部门1.4.3 直接蒸发式空调机组 设备名称设备编号 冷 量生产厂家管理部门1.4.4 净化布局及房间情况：生产洁净区总面积为 60.8 ㎡，其中净化区面积为 34.8 ㎡。
空气净化系统再验证方案
空气净化系统再验证方案颁发部门：质量管理部分发部门与数量：设备工程部.1，质量管理部.1，生产技术部.1，再验证立项申请表再验证方案审批表目录1.验证组织系统2.概述3.验证目旳4.有关文献5.验证范围6.人员培训7.验证内容7.1 HVAC系统测试仪器、仪表旳性能确定7.2 HVAC系统安装状况旳稳定性检查7.3 HVAC系统运行确认7.4 HVAC系统保养记录检查7.5 高效过滤器检漏7.6 HVAC系统性能确认8.特殊状况处理9.再验证成果评估与结论10.文献执行11.文献归档12.附表附表1：再验证方案变更申请表附表2：测试用仪器仪表校验状况附表3：HVAC系统机组上仪器仪表校验清单附件4：HVAC系统空调机组安装检查记录附表5：HVAC系统运行检查记录附表6：洁净区尘埃粒子数监测记录附表7：HVAC系统维护保养检查记录附表8：HVAC系统高效过滤器检漏检测记录附表9：HVAC系统风量测定及换气次数监测记录附表10：洁净室房间温湿度静压差监测记录附表11：尘埃粒子采样计划附表12：沉降菌采样计划附表13验证漏项与偏差记录1验证组织系统1.1.1验证委员会组员及其职责1.1.2验证委员会职责主任：负责验证方案、验证汇报旳同意；负责签发验证证书。
委员：审核验证方案、验证汇报，制定验证计划。
1.2验证小组组员及其职责1.2.1系统验证小组组员1.2.2各组员职责组长——负责验证明施全过程旳组织协调工作；组员——负责验证过程中旳详细工作，并做好记录工作。
1.2.3验证过程中各有关部门职责1.2.3.1质量管理部：负责组织验证方案、汇报与成果旳会审会签；负责对验证全过程实行监控；负责核查、汇总验证数据；负责建立验证档案，及时将同意实行旳验证资料收存归档。
1.2.3.2生产技术部负责指导车间有关人员做好验证记录。
1.2.3.3设备工程部负责提供设备有关文献；负责编制设备使用原则操作规程、维护原则操作规程及清洁规程。
空气净化系统验证方案
目的：通过对空气净化系统进行验证，验证该系统的各种控制系统功能与性能符合设计要求；确认在规定的范围内操作，系统能稳定地运行且保证各项指标能达到设计标准。
适用范围：适用于生产车间（三）提取生产线的空气净化系统运行消毒的验证过程及评估。
依据：《药品生产质量管理规范（2010年修订）》、《药品生产验证指南（2003）》、设备说明书、空气净化系统相应标准操作文件。
内容：1. 验证组织及职责验证组织见《验证总规划》。
由设备验证小组执行本验证方案。
2. 概述空气净化系统概述生产环境的洁净度是保证产品质量的前提，空气净化系统主要包括：空调机组、风管、除尘系统等几个主要部分。
本空气净化系统采用组合式空调箱及风道送风系统，新风经初效过滤器与回风混合再经表冷器、加热器、风机、中效过滤器、臭氧发生器、高效过滤器送至洁净区，气流组织顶送下侧回风或排风。
药品生产中使用空气洁净技术，是要控制室内空气悬浮粒子数、沉降菌数、温湿度及压差等，使室内生产环境的空气洁净度符合GMP及工艺要求，从而确保产品质量，为达到上述目的，采取了以下措施：空气滤过：利用初效、中效、高效滤过器将空气中的微粒和微生物滤除，得到洁净空气。
正压控制：使室内空气维持一定正压，防止污染物侵入洁净室内。
温度控制：通过蒸汽加热器升温或通过表冷段降温，使洁净区温度符合要求。
相对湿度控制：通过表冷段除湿或通过加湿器进行加湿使洁净区相对湿度符合要求。
空气净化系统示意图空调机组简介为确保空气净化质量达到生产要求，待厂房设施安装结束，使用的仪器仪表校验合格，且在校验有效期范围内，对空气净化系统进行验证，验证项目包括空气净化系统的预确认、安装确认、运行确认和性能确认及空调系统的监控和空气净化系统的日常监测。
3. 预确认目的：通过对空气净化系统设计资料及空调机组的设备技术指标适用性的审查，确认空气净化系统工艺布局及空调机组能否满足GMP及工艺要求。
确认的内容空调机组技术适用性确认，结果记录于附表1。
VD-HJ-QC-002微生物实验阳性菌室空气净化系统验证
微生物实验阳性菌室空气净化系统验证系统名称微生物实验阳性菌室空气净化系统系统编号：制造单位：苏州世纪鑫益净化实验室设备有限公司安装单位：苏州世纪鑫益净化实验室设备有限公司安装地点：质控中心空调机房浙江圣博康药业有限公司归档日期：年月日目录1 验证方案审批表2 验证方案3 验证实施报告4 验证结论5 验证证书微生物实验阳性菌室空气净化系统验证方案审批起草：审核：批准：方案目录1概述2验证目的3验证范围4责任与分工5验证进度安排6验证内容（含风险评估和可接受标准）7验证结果8 评价与建议9 再验证周期10 附件11 变更历史微生物实验阳性菌室空气净化系统验证方案1 概述浙江圣博康药业有限公司质控中心微生物实验阳性菌室空气净化系由苏州世纪鑫益净化空调设备室有限公司依据净化行业技术标准及GMP要求设计，空调机组由苏州世纪鑫益净化实验室设备有限公司提供，机组所有零部件按设计图纸和工艺文件制造，整机按国家GB/T14294-93和企业标准检验，按ISO9002质量保证体系标准要求进行质量控制。
空气净化系统的空调机组由苏州世纪鑫益净化实验室设备有限公司制造并负责安装、施工和调试。
由苏州世纪鑫益净化空调设备有限公司负责安装空气净化系统。
质控中心阳性菌检查室空气净化系安装在质控中心空调机房，净化区域等级为C级，净化区域面积12.1 m2。
1.2空气净化系统设备情况：1.2.1空气化系统设备一览表：质控中心微生物实验阳性菌室空气净化系统对C级区域进行空气净化处理，并有相对应的洁净室（区），由洁净送风、回风管道和直排风管道组成，由主控柜进行控制，形成了一套完整独立的空气净化系统。
其中阳性菌室采用直排方式，其它辅助间采用回风方式。
1.2.3系统工作原理：质控中心微生物实验阳性菌室空气净化系统的工作原理：新风经初过滤新风段进入回风混合段，与回风混合后再经初效过滤器进入表冷加热段，将空气温度调节到18～26℃，湿度调节到45%～65%，然后经中效段的过滤器进入送风段，经洁净风管将洁净空气送至各区域房间的高效过滤器前，最后经高效过滤器获得高度洁净的空气进入各房间中，以供给使用需要。
无菌医疗器械空气净化系统再验证方案
无菌医疗器械空气净化系统再验证方案（输液器车间）1.验证目的和范围1.1.我公司为了确保生产车间空气净化系统的安装、运行、性能符合《医疗器械生产管理规范无菌医疗器械实施细则和检查评定标准（试行）》的规定，对本系统进行验证并特此制定本验证方案。
本方案规定了该系统的安装、运行和性能验证范围、方法、文件和参考资料，验证结果用于证实确认空气净化系统的安装、运行、性能以及相关服务设施的连接是否符合设计图纸技术标准及《医疗器械生产管理规范无菌医疗器械实施细则和检查评定标准（试行）》的规定。
1.2.本方案适用于生产车间空气净化系统的安装、运行和性能确认。
安装确认是对该系统各设备、风管、风口、调节阀等部件安装及有关辅助设施（电、气等）连接的确认；运行确认是在运行状态下，对该系统各单元设备及辅助设施和控制系统的测试检查；性能确认是在运行状态下，对洁净区内悬浮粒子、温湿度、静压差、沉降菌进行测试检查。
1.3.本方案及结果为确认空气净化系统是否提供了完善的服务设施，所有安装施工及运行是否符合《医疗器械生产管理规范无菌医疗器械实施细则和检查评定标准（试行）》的规定，所有仪器、仪表是否已经校验，以及操作、运行、维修、保养的净化系统是否完备。
1.4.本方案包括送风空调机组、风管、排风滤尘机及服务设施配套的管道阀门等。
本方案验证其安装及主附机与服务设施间的连接是否正确，管道、阀门的安装是否符合要求，其检查要形成文件。
.对所用的温湿度计、压差计、风速仪、尘埃粒子计数器等仪器、仪表须经检定合格。
2.系统概述2.1.生产车间洁净厂房面积为1200㎡，均为10万级洁净区。
2.2.生产车间洁净区域的空气净化系统由送风空调机组、防火调节阀、多页调节阀、风管、亚高效送风口、排风滤尘机组等组成。
2.3.送风空调机组（2号）安装于净化控制中心，空调机壳采用专用铝合金框架，面板采用聚苯乙烯夹心板，夹心板保温芯材采用自熄聚苯乙烯泡沫塑料、密度为16㎏/ｍ3，导热系数≤0.042W/M.K，抗压强度≥0.8N/㎜2，自熄性2秒钟，50㎜板隔声性能36（ｄｂａ），风机型号为DW16-5N015，送风量为10000ｍ3/h，额定供冷20KW，额定供热50KW，余压为950Pａ，功率为80KW，用于一车间洁净区域空气净化系统。
空气净化系统清洁验证方案
空气净化系统清洁验证方案空气净化系统清洁验证方案验证编号:验证方案制定部门：签名：日期：工程部：生产部：质控部：验证方案批准：总经理：质控部经理：1、概述：粉散剂车间生产环境为一般控制区，取样车、口服液车间洁净室净化级别为十万级，水针车间净化级别为十万级和万级，化验室洁净室净化级别为十万级和万级和局部百级。
药品生产和检验环境直接影响药品质量，根据GMP要求，要认真按清洁规程，每天生产后进行日常消毒，维护保养后或定期进行彻底消毒，一年进行一次彻底清洁消毒。
2、验证目的：设备清洁验证是采用理、化学和微生物检测方法来检测空气净化系统按设备清洁规程清洁后，系统能稳定地运行且保证各项指标能达到设计标准。
确认该空气净化系统按规定的清洁程序清洁后，使用该系统时没有清洁过程所带来污染的风险，确保洁净室符合要求。
3、设备清洁规程：3.1空气累计运行2-3个月时间，需对初效、中效过滤器和回风窗清洗一次。
拆下初效过滤器，在室外先拍打掉浮土，再用低泡洗涤剂浸泡半个小时，用清水冲净，凉干装好。
同样程序完成中效过滤器的清洗。
注意，初中效过滤器不能混淆。
初、中效过滤器一般重复使用一次，需更新。
清洁除尘一般在停风机后，打开初效段门，穿鞋套进入初效段，用吸尘器吸净初效过滤器上浮土，再用洁布擦净箱体。
然后，对中效过滤器进行同样的清洁过程。
对新风进口每周清洁一次。
高效过滤器按要求—年更换一次，以保证达到规定要求。
高效过滤器在出现下列任何一种情况时应立即更换：气流速度降到最小限度，更换预过滤器以后气流速度也不增大时；全部过滤器的阻力超过风机能力时；高效过滤器出现无法修补的泄漏时。
更换高效过滤器时，过滤器的塑料袋只允许在安装时就地启封。
高效过滤器更换后，需重新打胶密封。
3.2 高效过滤器每年检漏一次。
3.3 风管每年清洁一次，清洁时间与更换高效过滤器同时进行。
3. 4 消毒方法：甲醛薰蒸法将甲醛溶液加入容器后放在车间，加高锰酸钾产生甲醛蒸汽，通过送风系统将甲醛输送到各个房间，让甲醛扩散30min后，启动空调运行20min，将室温控制在20℃以上，湿度70-90%，关闭空调送风系统薰蒸12h。
无菌、微生物限度检查及方法验证
此法为实验室工作用菌种的最常用的保藏方法，仅能用于工作用菌种的短期保藏。
8
琼脂斜面低温保藏法保藏法（厂家常用）
保藏芽胞液对
产芽胞的微生物宜制成芽胞菌悬液后再保藏， 无菌操作，取1ml孢子液接入茄形瓶或培养皿内，轻轻转动使菌液均匀分布于培养基表面。 将培养皿在适当的温度下培养。一般需要7天或更长时间 在层流台下，取3~5ml氯化钠磷酸盐缓冲液（pH7.0）加入培养皿内 用无菌玻璃L棒轻轻刮下菌苔，注意不要划破培养基。 用无菌注射器或无菌吸管吸取菌悬液，收集于试管中。 将收集的芽胞液放在80~90℃水浴中加热15分钟，冷却。 做好标记，放至2~8℃冰箱中保藏。原始芽胞液可保存1年。 每次使用前用平皿法重新标定其浓度。
微生物实验室的质量管理
设施—洁净室、净化工作台、生物安全柜。 设备—高压蒸汽灭菌器、电热恒温干烤箱、培养箱、冰箱。 实验仪器—全封闭薄膜过滤装置、电动匀浆仪、电热恒温水浴箱、离心机、显微镜，及刻度吸管、试管、三角烧瓶、培养皿等。 建立主要设施、设备、仪器的明细记录，内容包括名称、型号、生产厂家、购买日期。 质量保证档案：购买发票、安装验收或开箱验收记录、调试记录、计量检定或运行校验合格证、指定专人负责、制订标准操作规程（SOP）、建立使用登记册，维修、保养记录、改造或更新记录、直至报废记录。
记录温湿度是否在规定的范围内，每次实验时，对操作室和层流台做微生物沉降菌落计数并记录；如发现问题应找原因，及时报修和报告并将报修原因和结果记录归档。如遇停电，应立即停止实验，重新进入无菌室前，至少开启机房运转1小时以上。
实验室使用管理
微生物实验室的质量管理
平时实验室内应尽可能减少人员的走动或活动，通向洁净室的门要关闭或安装自动闭门器使其保持关闭状态。
枯草芽孢杆菌 [CMCC（B）63501] 金黄色葡萄球菌 [CMCC（B）26003] 生孢梭菌 [CMCC（B）64941] 铜绿假单胞菌 [CMCC（B）10104] 大肠埃希菌 [CMCC（B）44102] 乙型副伤寒沙门菌 [CMCC（B）50094] 白色念珠菌 [CMCC（B）98001] 黑曲霉 [CMCC（B）9 003]
微生物实验室厂房设施空气净化系统风险评估报告
微生物实验室厂房设施空气净化系统风险评估报告一、背景介绍微生物实验室是进行微生物研究和实验的场所，为了确保实验室环境的洁净和安全，常常需要安装空气净化系统。
本报告旨在对微生物实验室厂房设施空气净化系统进行风险评估，以确保系统的安全性和稳定性。
二、评估目的本次评估的目的是对微生物实验室厂房设施空气净化系统进行全面的风险评估，包括系统设计、设备选型、安装施工、运行维护等方面，以发现潜在的安全隐患和风险，并提出相应的改进建议，确保系统的正常运行和实验室环境的安全。
三、评估内容1. 系统设计评估评估空气净化系统的设计方案是否符合微生物实验室的需求，包括系统容量、过滤器类型和数量、风速控制等方面。
同时，评估系统的安装位置和布局是否合理，是否存在与其他设备或通风系统的冲突。
2. 设备选型评估评估空气净化系统所选用的设备是否符合相关标准和规范要求，包括过滤器的效能、风机的性能参数、控制系统的稳定性等方面。
同时，评估设备的供应商是否具备相关资质和经验。
3. 安装施工评估评估空气净化系统的安装施工质量，包括管道连接、电气接线、设备固定等方面。
检查是否存在漏气、漏电等安全隐患，评估施工过程中是否符合相关标准和规范要求。
4. 运行维护评估评估空气净化系统的运行和维护管理情况，包括设备的日常运行状态、过滤器更换周期、设备维护记录等方面。
检查是否存在设备故障、维护不及时等问题，评估运行维护是否符合相关标准和规范要求。
四、评估方法1. 文献资料收集收集微生物实验室厂房设施空气净化系统相关的设计文件、施工图纸、设备技术参数、运行维护记录等资料，以了解系统的设计和运行情况。
2. 现场勘察对微生物实验室厂房进行实地勘察，了解空气净化系统的安装位置、布局、管道连接、设备固定等情况，检查系统的运行状态和维护记录。
3. 设备检测对空气净化系统的设备进行检测，包括风机的风量、风速、噪音等参数测试，过滤器的效能测试，控制系统的稳定性测试等。
无菌室空气微生物检验的方法
无菌室空气微生物检验的方法无菌室是进行微生物研究和实验的重要场所，确保其空气质量达到无菌标准至关重要。
本文将详细介绍无菌室空气微生物检验的方法，以帮助相关研究人员和质量控制人员准确评估无菌室的空气质量。
一、采样方法1.选择合适的采样点：根据无菌室的布局和使用情况，选择具有代表性的采样点，包括室内四角、工作台面、操作区等。
2.采样时间：空气微生物检验应在无菌室使用前、中使用期间及使用后进行，以全面了解空气质量状况。
3.采样设备：使用无菌空气采样器，如撞击式空气微生物采样器。
4.采样操作：在采样点处，将采样器打开，使空气以一定流速通过采样器，收集空气中的微生物粒子。
二、检验方法1.培养基准备：选用适合空气微生物检验的培养基，如血琼脂平板、沙保弱平板等。
2.样品接种：将采集到的空气样品均匀涂布在培养基表面，进行倒置培养。
3.培养条件：根据微生物的生长特性，选择合适的培养温度和湿度。
4.观察与计数：培养一定时间后，观察培养基上的菌落生长情况，进行菌落计数。
5.微生物鉴定：对菌落进行形态特征观察，结合生理生化试验，对微生物进行鉴定。
三、结果判定1.菌落总数：以每立方米空气中的菌落数表示，参考我国相关标准，如GB 50073-2013《洁净室及相关受控环境》等。
2.菌种鉴定：根据微生物的形态特征和生理生化特性，确定无菌室空气中的微生物种类。
3.结果分析：结合无菌室的使用情况，分析空气质量是否达到要求，如有问题，及时查找原因并采取措施。
四、注意事项1.采样和检验过程应严格遵循无菌操作原则，避免污染。
2.采样器和培养基的选择应根据微生物的特性进行，确保检验结果的准确性。
3.定期对无菌室空气微生物进行检验，掌握空气质量状况，确保实验安全。
总结：无菌室空气微生物检验是保证实验安全、提高实验质量的重要环节。
通过以上方法，可以有效评估无菌室的空气质量，为微生物研究和实验提供可靠保障。
空气净化系统验证
5、空气净化系统常用电工仪表
1）转速表，用来测量风机、电机等设 备的旋转速度；
5、空气净化系统常用电工仪表
2）空调调试常用的电工仪表： ——万用表
——电压表 ——电流表
6、直接测量风量的仪器
用来测量送风口及回风口风量的仪器 （风量测定罩）。
7、层流罩等设备上使用的微压表
度、相对湿度、空气的气流速度，空气净化系统就是将空气处理成要求的状态后送 入房间内，以满足上述要求。所以空气净化系统是由空气处理装置（包括热原）、 空气输送和分配设备等组成的一个完整的系统，该系统能够对空气进行冷却、加热、 加湿、干燥和净化处理，还能对空气进行消毒处理，能消除传入房间的噪声；空气 净化系统的运行应能进行自动控制和检测。对10万级以上洁净度的房间，均需在风 管末端安装高效空气过滤器或亚高效空气过滤器。
1、空气净化系统安装确认(IQ)所需的文件
①由质量部门及技术部门认可、批准 的环境控制区平面布置图及空气流 向图，包括各房间的洁净度(含100 级层流罩)、气流流向、压差、温 度及湿度要求、人流和物流流向。
②受控环境空气净化系统划分的描述 及设计说明。
③测试记录和操作规程，包括：
a．空调设备及风管的清洁规程和记 录
我们知道，空气净化处理的对象是粒径≥0.3μm 或0.5μm以上的悬浮粒子以及附在上面的微生物。 这些悬浮粒子或活生物性粒子肉眼看不到，小得足 以通过高效过滤器及安装处的缝隙流入洁净室，缝 隙较粒子的尺寸来说要大得多，但通常针孔大的孔 洞及不规则的狭缝也是凭肉眼看不见的。这样就提 出了一个问题：我们如何知道高效过滤器及安装处 是否泄漏?漏在何处?泄漏量是否影响房间的洁净度?
洁净室竣工以后和投产以后都需要进行性能测定 及验收，在系统大修或更新时也要进行测定。在测 定之前对洁净室的概况必须全面了解，主要内容包 括：净化空调系统和工艺布置的平面图、剖面图及 系统图；对空气环境条件(洁净度级别、温度、湿度、 风速等)的要求；空气处理方案；送回风、排风量及 气流组织；人、物净化方案；洁净室的使用情况； 厂区及其周围污染情况等，以资测定后分析影响环 境条件的因素。
化验室空调净化系统验证方案
1概述化验室空调净化系统工程由江西省医药设计院设计和苏州振药净化工程有限公司承建，由净化空调系统、局部排风系统组成。
化验室的洁净室主要为微生物检验室、阳性对照室，二室各自拥有一个独立的小型空调机组。
微生物限度检测室为更衣一室、更衣二室、缓冲间、操作间。
阳性对照室为更衣一室、更衣二室、缓冲间、操作间。
其中微生物检验室的面积为8.5m2,阳性对照室的面积为8.68m2,共计31.5m2。
微生物检验室与阳性对照室平面图见附件1。
2验证目的检查并确认化验室空气净化调节系统（HVAC）符合GMP标准及设计要求，所制定的标准及文件符合GMP 要求。
通过安装确认、运行确认、性能确认一系列说明及试验提供的数据证明该系统在生产中的可靠性和稳定性，满足生产需要。
3验证范围本验证方案适用于化验室的微生物检验室、阳性对照室空调净化系统的验证。
4验证小组成员及责任；4.1验证小组成员验证小组成员4.2验证小组责任验证小组组长-负责验证方案起草、验证方案实施及验证全过程的组织和完成验证报告；负责验证协调工作,及偏差的处理工作，以保证本验证方案按预定的规定项目顺利实施。
验证副组长-负责配合组长完成验证工作，负责方案实施中各参数的确认，负责收集各项验证记录,负责偏差的处理工作，最终完成空调方案的实施工作。
4.3验证工作中各部门及验证小组成员的责任验证委员会-负责空调验证方案的批准;负责验证数据及结果的审核;负责验证报告的审批;负责验证证书的发放。
工程设备部成员-参加验证方案、验证报告、验证结果的会审会签；负责保证验证过程中设备的运行和调试符合验证方案要求。
质量部成员-负责协助验证小组进行有关验证协调工作，负责设备开箱验收，负责对验证全过程实施监控及检验工作；负责建立验证档案，及时将批准实施的验证资料收存归档。
负责组织验证方案、验证报告、验证结果的会审会签；5验证文件及合格标准5.2验证合格标准药品检验所需的洁净区可分为以下2个级别： A 级通常用超净工作台来维持该区的环境状态。
药品车间和微生物实验室D级净化空调验证方案
药品车间及微生物实验室空调净化系统验证方案系统编号：xxxxxxxx验证类型：公用设施验证方案制定方案审核方案批准分发部门：工程设备部、质量部、生产部、药品车间目录1.概述 (4)1.1系统工艺流程图 (4)1.2主机设备基本情况 (5)1.3参考文件清单 (6)2.验证目的 (6)3.验证范围 (6)4.验证小组成员及职责 (7)5.验证方案的起草、审批及培训 (7)5.1 验证方案的起草及审批 (7)5.2 验证方案的培训 (7)6.验证前提条件及进度计划 (7)6.1验证前提条件 (7)6.2风险评估 (8)6.3 进度计划 (9)7.验证 (9)7.1 设计确认 (9)7.2 安装确认 (9)7.3 运行确认 (11)7.4 性能确认 (15)8 偏差与异常情况处理 (16)9 变更与再验证周期 (16)9.1 变更管理 (16)9.2 再验证周期 (16)10 验证结果评定及结论 (16)11 附件 (17)1、概述本公司药品生产车间空调净化系统是由JK-1、JK-2和JK-3三套独立净化空调系统控制其洁净度，而微生物实验室洁净区空调系统是由微生物室空调系统和阳性室空调系统两套独立的净化空调系统控制其洁净度。
药品车间D级洁净区域面积为xxxx平方米，微生物实验室洁净区域面积为XXXX平方米。
空调净化系统是由制冷/制热装置(水冷式冷水机组、蒸汽锅炉）、空气净化处理装置（组合式空调器）、空气输送管道和分配设施及回风、排风装置等组成。
D级净化空调系统工作流程为：①首先新风与回风在空调器的混合段混合后，经初效过滤，在表冷/表热段调节好温、湿度（由水冷式冷水机组提供冷源，蒸汽锅炉提供热源）、再经增压风机加压、中效过滤处理后利用送风管进行风量分配和调节，最后经安装在顶端的高效过滤器过滤后送入洁净室；②洁净室的风由侧面的回风窗（回风窗上安装中效过滤网防止空气倒流）通过回风管回到空调器的混合段，如此循环达到净化目的；③本系统中产尘量较大或易生成水汽的房间（具体情况参见空调系统图）采用独立的排风管进行全排，不使用回风。
无菌医疗器械空气净化系统再验证方案
无菌医疗器械空气净化系统再验证方案（输液器车间）1.验证目的和范围1.1.我公司为了确保生产车间空气净化系统的安装、运行、性能符合《医疗器械生产管理规范无菌医疗器械实施细则和检查评定标准（试行）》的规定，对本系统进行验证并特此制定本验证方案。
本方案规定了该系统的安装、运行和性能验证范围、方法、文件和参考资料，验证结果用于证实确认空气净化系统的安装、运行、性能以及相关服务设施的连接是否符合设计图纸技术标准及《医疗器械生产管理规范无菌医疗器械实施细则和检查评定标准（试行）》的规定。
1.2.本方案适用于生产车间空气净化系统的安装、运行和性能确认。
安装确认是对该系统各设备、风管、风口、调节阀等部件安装及有关辅助设施（电、气等）连接的确认；运行确认是在运行状态下，对该系统各单元设备及辅助设施和控制系统的测试检查；性能确认是在运行状态下，对洁净区内悬浮粒子、温湿度、静压差、沉降菌进行测试检查。
1.3.本方案及结果为确认空气净化系统是否提供了完善的服务设施，所有安装施工及运行是否符合《医疗器械生产管理规范无菌医疗器械实施细则和检查评定标准（试行）》的规定，所有仪器、仪表是否已经校验，以及操作、运行、维修、保养的净化系统是否完备。
1.4.本方案包括送风空调机组、风管、排风滤尘机及服务设施配套的管道阀门等。
本方案验证其安装及主附机与服务设施间的连接是否正确，管道、阀门的安装是否符合要求，其检查要形成文件。
.对所用的温湿度计、压差计、风速仪、尘埃粒子计数器等仪器、仪表须经检定合格。
2.系统概述2.1.生产车间洁净厂房面积为1200㎡，均为10万级洁净区。
2.2.生产车间洁净区域的空气净化系统由送风空调机组、防火调节阀、多页调节阀、风管、亚高效送风口、排风滤尘机组等组成。
2.3.送风空调机组（2号）安装于净化控制中心，空调机壳采用专用铝合金框架，面板采用聚苯乙烯夹心板，夹心板保温芯材采用自熄聚苯乙烯泡沫塑料、密度为16㎏/ｍ3，导热系数≤0.042W/M.K，抗压强度≥0.8N/㎜2，自熄性2秒钟，50㎜板隔声性能36（ｄｂａ），风机型号为DW16-5N015，送风量为10000ｍ3/h，额定供冷20KW，额定供热50KW，余压为950Pａ，功率为80KW，用于一车间洁净区域空气净化系统。
薄膜过滤法微生物限度检查操作要点
薄膜过滤法微生物限度检查操作要点1. 设备、仪器1.1 无菌室微生物限度检查应有单独的无菌室，每个无菌室应有独立的净化空气系统。
1.1.1 操作间操作间应安装空气除菌过滤层流装置。
环境洁净度不应低于10000级，局部洁净度为100级（或放置同等级净化工作台）。
操作间或净化工作台的洁净空气应保持对环境形成正压，不低于4.9Pa。
操作台上备有电子天平，乙醇灯，火柴，乙醇棉球，大、小橡皮乳头等。
1.1.2 缓冲间缓冲间内应有洗手盆，无菌衣、帽、口罩、拖鞋等。
缓冲间内不得放置培养箱和其他杂物。
1.1.3 在每次操作前、后，用75%乙醇溶液或其他消毒液擦拭操作台及可能污染的死角。
然后启动层流净化装置，同时用紫外杀菌灯照射30min。
1.1.4 无菌室操作台消毒擦拭后，先启动层流净化装置30min，将备妥的营养琼脂平板3个（经30～350C预培养48h，证明无菌落生长），以无菌方式移入操作间，置净化台左、中、右各1个，开盖，暴露30min 后将盖盖上。
在30～350C培养箱内倒置培养48h，取出检查。
3个平板生长的平均菌落数不超过1个。
1.2 仪器1.2.1 恒温培养箱（30～350C）、生化培养箱（23～280C）、电冰箱、蒸汽灭菌器。
1.2.2 玻璃器皿烧杯、培养皿、量筒、试管及塞、吸管。
玻璃器皿用前应洗涤干净，吸管、量筒不挂水滴，无残留抗菌物质。
玻璃器皿均应用牛皮纸（或双层报纸）严密包裹置蒸汽灭菌器高压蒸汽121℃灭菌30min，烘干。
或于160℃干热灭菌2h，备用。
2培养基及其制备方法2.1 营养琼脂培养基：取营养琼脂培养基34g，加1000ml蒸馏水，加热溶解，分装，121℃高压灭菌15分钟。
2.2 玫瑰红钠琼脂培养基：取玫瑰红钠琼脂培养基30.5g，加1000ml蒸馏水，加热溶解，分装，121℃高压灭菌15分钟。
2.3 胆盐乳糖培养基：取胆盐乳糖培养基36g，加1000ml蒸馏水，加热溶解，分装，121℃高压灭菌15分钟。
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公用工程系统验证文件*************有限公司验证方案的审批引言验证小组成员及其职责12、验证小组、验证人员、设备使用单位的职责、权利和义务2.1 验证小组2.1.1 负责验证方案的审批；2.1.2 负责验证的协调工作，以保证本验证方案规定项目的顺利实施；2.1.3 负责验证数据及结果的审核；2.1.4 负责验证报告的审批；2.1.5 负责发放验证证书；2.1.6 负责设备验证周期的确认。
2.2 设备使用单位2.2.1 提供必要现场及测试条件：如设备安装调试及记录、仪器仪表校正及校验记录。
2.2.2 负责设备正常运行，对验证测试过程中发现的不符合标准之处进行调整和纠正。
2.2.3 拟定药品工艺参数和药品包装规格，报验证小组审核。
2.2.4 指定设备专门的操作人员。
2.2.5 负责抽样品种质量的测试工作，出具检测报告。
2.2.6 收集各项验证和记录交验证小组审核。
2.2.7 确定再验证周期。
2.3 现场测试组现场测试组由验证小组各专业人员及使用单位的领导、设备安全部、生产技术部、质量管理部等部门的相关专业人员组成。
分别负责本设备设施相关内容的现场测试。
测试结果填入相关记录表。
主检人和测试组长签字确认，交验证小组审核。
3 验证时间于2013年6月20日至2013年7月1日对该系统进行验证。
微生物检查室空气净化系统的验证方案1. 概述：*******微生物检查室区域空调净化系统由山东省医药设计院设计，济南宝林空调净化设备有限公司施工完成，本区域净化面积12.66m2，具有温湿度调节、空气除尘除菌的功能性系统，洁净区的空气经处理后达到空气质量C级的标准。
由本空调净化系统送风的房间有一更、二更、缓冲间、微生物检查间。
空气净化过程为：新风→初效过滤器→表冷器→加热器→风机→中效过滤器→高效过滤器→室内→正压风量排至室外（回风经过回风管进入组合式空气处理机组初效过滤器前再循环）。
灭菌性：使用紫外线进行灭菌，彻底破坏机组内细菌的生存环境。
防止二次染菌。
经均流段最后将净化空调机组产生的新风送入车间的送风管道，送到每个操作间的高效过滤器，经散流板送至生产房间。
净化空调系统的部分房间设压差计，用以检测房间之间相对压力的变化情况，通过对系统内各区域的送风、回风及排风量的控制、调节来达到各个不同洁净级别之间及室内外的压差要求。
新空气经过空调净化系统后能够保证洁净车间的空气尘埃粒子、空气浮游菌、沉降菌及环境温湿度达到产品生产要求。
设计参数空调机组风机风量500m³/h，冷量18kw，热量10kw，加湿量13kg/h，功率3kw。
洁净区温度18~26℃，湿度范围45%-65%，换气次数≥25次，净化等级C级。
主要操作区照度大于300LUX，辅助区域照度大于200LUX。
2．验证目的：确认系统的各种仪器、仪表经过校正合格；确认系统的各种控制系统功能与性能符合设计要求；确认在规定的范围内操作，系统能稳定地运行且保证各项指标能达到设计标准。
检查并确认系统的洁净度测试符合C级净化标准。
检查并确认紫外线灭菌效果符合要求。
3.验证范围：本验证方案适用于质量控制中心微生物检查室C级洁净厂房空气净化系统HV AC 系统的验证。
4.验证内容：4.1设计确认通过审核设计文件和招标文件，确认质量控制中心微生物检查室C级洁净厂房和空气净化系统的设计符合GMP要求，能达到使用要求标准。
4.1.1 对空调系统的各项设计参数（洁净级别、温湿度、压差、送风量、换气次数、安全要求、环保要求等）与设备的实际制造参数进行确认，并与生产工艺及新版GMP 的要求进行确认，确认设备的各项参数能够满足生产工艺及GMP的要求。
4.1.2 功能方面的要求：对空调系统的可用公用系统（水、电、汽等）、可用的能源配置、自动控制过程、电气或机械锁、电气保护、压力保护等进行确认，确认设备的设计符合生产工艺及GMP的要求。
4.1.3文件方面的要求：对设备的使用说明书、维护手册、备件清单、技术图纸等进行确认，确认设备的设计符合生产工艺及GMP的要求。
4.1.4 设计确认结果记录于附件1、附件2。
4.2安装确认4.2.1 空气净化系统空调机组的安装确认：空调系统安装完成后由设备安全部对空调系统的安装及各种管路的连接情况对照设计图及供应厂提供的技术资料检查安装是否符合设计及安装规范，以确保其安装和连接符合生产工艺及GMP的要求，将安装检查结果记录在附件34.2.2洁净厂房的安装确认：根据生产药品的剂型要求，生产用厂房、辅助区域的要求而设置不同的洁净区级别以及相适应的地面装饰。
检查情况如下：4.2.3 风管制作及安装的确认：风管制作及安装的确认主要是对照设计图、流程图检查风管的材料、保温材料、安装紧密程度、管道走向、等。
空调净化系统通风管道安装完成后，在安装保温层之前必须进行漏风检查。
测试装置：灯泡电压不大于36V，功率100W以上，带保护罩；可接受标准不漏光，检查及评价结果记录附件44.2.4 风管及空调设备清洁的确认：内外管及空调设备清洁确认是在安装过程中完成的。
空调净化系统通风管道吊装前，先用清洁剂或酒精将内壁擦拭干净，并在风管两端用干净的塑料膜封住，等待吊装。
静压箱也应清洗后安装。
空调器的拼装结束后，内部先要清洗再安装初效及中效过滤器，操作及评价确认记录见附件5。
4.2.5 防鼠防蝇设施洁净厂房和空气净化系统应有能防止外界生物进入的附属设施并能正常使用。
4.2.6 仪器、仪表检查：检查与空气净化系统和洁净厂房配套仪器、仪表安装牢固与设备设计要求相符合，本次验证所使用仪器、仪表校验合格且在有效期内，检查结果见附录6仪器仪表校验记录。
4.2.7 文件资料检查：设备安装完毕后根据供应商提供资料编写操作规程，并检查确认系统相关的文件资料是否齐全，并在规定的存放地点。
检查情况见下表：4.2 运行确认4.2.1 系统无生产负荷联动试运转及调试系统联动试运转及调试应在系统单机试运转和风管系统漏风检查合格后进行。
系统联动运转时，设备及主要部件的联动必须正常、稳定、平衡、无异常现象。
空调水系统、风系统联动试运转及调试检查项目及要求见下表：净化空调系统联动试运转及调试记录表4.2.2 高效过滤器安装、检漏确认检查前洁净区全面清扫，系统连续通风24小时后检查。
按照《高效过滤器检漏标准操作程序》的规定要求检查每个高效过滤器有无泄漏，并将结果记录于附件7高效过滤器泄漏测试记录。
4.2.3 风速风量测定：4.2.3.1 高效过滤器风速的测定在洁净厂房全面清扫、安装确认完成后，可进行运行确认。
开启所有的空调设备及与空调系统有关的工艺排风机。
对整个空调系统进行风量平衡，调节各房间送回风的风量大小及各房间的风压，然后进行风速风量的测定，风量测定主要通过风速仪测定送风口的风速，再乘以风口的截面积而得，风速应测5点，取其平均值。
房间的换气次数为房间的送风量除以房间容积。
风口测点分布如下：计算方法：风口的平均风速V 按下式计算V=V 1＋V 2＋V 3＋V 4＋V 5m/sN其中V 1 V 2…V 5—各测定的风速（m/s ） n —测点总数（个） 风口风量L 计算L=3600×F×V （m 3/h ） 式中F —风口通风面积（m 2） 房间换气次数n式中L 1 L 2…L n 为房间各送风口的风量m 3/h A —房间面积（m 2） H —房间高度（m ） 可接受标准：风速、风量及换气次数测定及评价结果记录于附件8。
4.2.4 洁净室风压温度、相对湿度测定：4.2.4.1 风压应在风量测定之后进行。
测量前应将所有的门都关闭，测量时不允许有人穿越房间。
4.2.4.2 温度、相对湿度：温、湿度测定应在风量风压调整后进行。
测点应放在洁净室有代表性的工作区或洁净室中心。
n=L 1＋L 2＋L 3＋…＋L n次/hA×H4.2.4.3 可接受标准：将压差、温、湿度监测及评价结果分别记录于附件9、104.2.5 照度测试将洁净室照明灯点亮30min后，用数字照度计测量房间的照度，每个房间测量点不少于3个，将结果记录于附件11。
可接受标准：操作区照度不低于300LUX，辅助区照度不低于200LUX。
4.3 性能确认：4.3.1 悬浮粒子数测定：洁净室（区）净化空气调节系统已处于正常运行状态，工艺设备已安装，洁净室（区）应没有生产人员的情况下进行测试。
用CLJ-BⅡ型激光粒子计数器测量≥0.5μm 粒子浓度，≥5μm粒子浓度。
测量时分别采用静态测试动态测试，静态测试时HV AC系统至少运行30分钟，开始采样，采样点应在房间内均匀分布，每个房间采样点不少于2个，总采样次数不得少于5次。
测采样点距地面0.8米处。
动态测试时HV AC系统至少运行30分钟，然后人员进入工作30分钟后开始采样，采样点应在房间内均匀分布，每个房间采样点不少于2个，总采样次数不得少于5次。
测采样点距地面0.8米处。
4.3.2 沉降菌测定：在HV AC系统至少运行30分钟，房间的温湿度及相对压力达到要求后，可进行沉降菌测定。
用φ90mm玻璃培养皿和普通肉汤琼脂培养基，在采样点放置，打开平皿盖，使培养基表面暴露4h后，将平皿盖盖上，然后在30-35℃条件下培养48小时后计数。
采样点的位置可以同悬浮粒子测试点。
具体采样计划见表—1。
4.3.3 浮游菌测定测试方法：采用静态测试，在悬浮粒子测定结束，洁净区进行紫外线杀菌后由质量管理部化验人员质量控制实验室，对洁净区内的各个房间进行浮游菌测定，用浮游菌采样器采集浮游菌，然后用φ90mm玻璃培养皿和普通肉汤琼脂培养基在30-35℃条件下培养48小时后计数。
测试频次：每个周期测试一次，共测试三次。
可接受标准将悬浮粒子数和微生物数监测结果分别记录于附件12、13、14、15。
4.3.4 紫外线灭菌效果的测试4.3.4.1 在紫外线杀菌灯开启之前30min，将直径90mm的培养平皿放置好，经过4h 沉降集菌，把采集的培养皿放入35℃的培养箱进行48小时细菌培养计数，将结果记录于附件16。
4.3.4.2 在紫外线杀菌灯开启之前30min，用浮游菌采集器采集浮游菌，然后用直径90mm的培养平皿装普通肉汤琼脂培养基培养，把采集的培养皿放入35℃的培养箱进行48小时细菌培养计数，将结果记录于附件18。
4.3.4.3 开启紫外线杀菌灯进行灭菌，灭菌时间30分钟后关闭紫外线杀菌灯，在4.3.4.2.1 采集点放入一批培养皿，经4h沉降集菌，送入培养箱培养48小时后菌落计数，将结果记录于附件17。
4.3.4. 4 开启紫外线杀菌灯进行灭菌，灭菌时间30分钟后关闭紫外线杀菌灯，在4.3.4.2.2采集点采集浮游菌，送入培养箱培养48小时后菌落计数，将结果记录于附件19。