DNA的粗提取与鉴定好实验流程图 PPT

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DNA的粗提取和鉴定PPT课件

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损失,最好使用塑料的烧杯和试管盛放鸡血细胞

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讨论:提取鸡血中的DNA时,为什么除去血液 中的上清液?
答:血液分为两部分,一部分是血浆,一部分 是血细胞,离心后除去的上清液是血浆
5、方法步骤
①提取鸡血细胞的细胞核物质
将制备好的鸡血细胞液5 mL~10mL,注入到
50 mL烧杯中。向烧杯中加入蒸馏水20 mL,
3.DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色,因此,二苯 胺可以作为鉴定DNA的试剂
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实验用具:铁架台;铁环;镊子;三角
架;酒精灯;石棉网;载玻片;玻璃棒; 滤纸;滴管;量筒(100ml,一个);烧 杯;(100ml,一个,50ml、500ml各 二个);试管(20ml,二个);漏斗;试 管夹;纱布。
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(四) DNA的析出与鉴定
1、DNA的析出
DNA的析出用的是与滤液体积相等的冷却的酒 精溶液(体积分数为95%),静置2-3min,溶 液中会出现白色丝状物,这就是粗提取DNA。 用玻璃棒沿一个方向搅拌,卷起丝状物,并用 滤纸吸取上面的水
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三、实验案例 (一)案例一:以鸡血为实验材料进行DNA的 粗提取 1、鸡血细胞做实验材料的原因
①鸡血细胞核的DNA含量丰富,材料易得
②用动物肝脏细胞作实验材料常常需要匀浆和 离心,对设备要求较高,操作繁琐,历时较长
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4、课前准备鸡血细胞液
①过程
取质量浓度为0.1g/ml的柠檬酸纳溶液(抗凝
③析出含DNA的粘稠物

专题DNA的粗提取与鉴定ppt

专题DNA的粗提取与鉴定ppt
刑事侦查
利用DNA粗提取技术,可对犯罪现场遗留的生物检材进行提取和分析,为刑事侦查提供重 要线索。
亲子鉴定
通过DNA粗提取和基因比对,能够准确地判定亲属关系,为家庭纠纷、遗产继承等问题的 解决提供科学依据。
dna粗提取在生物医学研究中的应用前景
01
疾病诊断与预测
通过DNA粗提取技术,可对疾病相关基因进行快速、准确的检测和分
解决方法
控制好温度、酸度以及机械搅拌程度,使用低温乙醇沉淀法等更稳定的提取方法 ,减少DNA降解的发生。
dna出现污染的原因与解决方法
原因
DNA出现污染可能是由于外界物质进入提取液中,如容器不 干净、试剂未纯化等。
解决方法
使用干净的容器和纯度高的试剂,对提取液进行过滤除杂, 减少污染物质对DNA提取的影响。
专题dna的粗提取与鉴定ppt
xx年xx月xx日
目 录
• 引言 • dna粗提取的基本步骤 • dna粗提取的实验操作流程 • dna粗提取过程中的问题与对策 • dna粗提取的优化方案 • dna粗提取的应用前景和发展方向
01
引言
什么是dna粗提取
从细胞或生物体内提取出DNA分子的过程。 不需要知道DNA的具体序列和结构。
dna提取效率低的原因与解决方法
原因
DNA提取效率低可能是由于多种因素导致,如细胞裂解不完全、蛋白去除不 彻底、方法操作不当等。
解决方法
采用更有效的细胞裂解方法、优化洗涤步骤、使用蛋白酶K处理细胞等措施, 提高DNA提取效率。
dna出现降解的原因与解决方法
原因
DNA出现降解可能是由于提取过程中高温、高酸度、过度机械搅拌等不利条件导 致。
析,为疾病的早期诊断和预测提供帮助。

DNA的粗提取与鉴定好实验流程图

DNA的粗提取与鉴定好实验流程图
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鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图
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2mol/L
鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图
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鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图
5、过滤→取纱布上的滤物 纱布过滤
6、再次溶解DNA
取滤物
2mol/LNaCl溶液
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鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图
选择适宜材料
破碎细胞
DNA的纯化
DNA的溶解和析出
与二苯胺混合,沸水浴,呈现蓝色反应
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1. 下列关于DNA粗提取与鉴定的说法正确的是
A.氯化钠的浓度越低,对DNA的溶解度越大
B.人血也可代替鸡血进行实验
C.柠檬酸钠的主要作用是加速血细胞破裂
D.DNA不能溶于酒精
2. 在破碎鸡血细胞时,要先加入20ml的蒸馏水,其作用是
7、加冷酒精使DNA析出(纯化) 冷酒精
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DNA的鉴定
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总结:
实验原理
DNA




DNA粗提取



鉴定DNA
DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同 DNA与其他细胞成分在酒精中溶解度不同 DNA和蛋白质对酶、高温和洗涤剂耐受性不同 DNA与二苯胺呈现蓝色反应
A. DNA溶解于水
B. 血细胞破裂,DNA释放
C.稀释血液,防止凝固
D. 有利于搅拌
3. 若选择的实验材料为植物细胞,破碎细胞时要加入一定量的洗
涤剂和食盐,加入食盐的目的是

专题DNA的粗提取与鉴定ppt

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优劣分析
各种方法均有优缺点,应根据实际 情况选择合适的方法,或结合多种 方法提高鉴定准确性。
04
DNA粗提取实验结果分析与解读
实验结果展示
DNA粗提取结果
通过在显微镜下观察,可以看到细胞中的DNA呈现为细长的丝状,有时甚至可以看到 DNA的螺旋结构。
电泳结果
通过电泳技术,可以看到DNA在凝胶中的迁移情况。纯DNA应该呈现一条明亮的带状, 而杂质则会影响带状的形成。
紫外光谱分析
通过紫外光谱分析,可以确定DNA的纯度和浓度。纯DNA应该在260nm和280nm处有强 烈的吸收峰。
结果差异分析
01
DNA纯度差异
不同样品间的DNA纯度存在差异。有些样品的DNA纯度较高,而有
些则较低。这可能与样品的来源、提取方法等因素有关。
02 03
DNA浓度差异
不同样品间的DNA浓度也存在差异。有些样品的DNA浓度较高,而 有些则较低。这可能与样品中细胞的数目、细胞中DNA的含量等因素 有关。
。通过OD260/OD280 的比值来判断DNA的纯 度。
3. 将DNA溶液进行凝胶 电泳检测,观察DNA条 带的亮度、完整度和分 子量大小来判断DNA的 质量。
03
DNA粗提取中的关键步骤及注意事 项
细胞破碎方法的选择与优化
物理破碎
使用研磨杵、珠磨机、匀浆器等方 法破碎细胞。
化学破碎
使用溶菌酶、EDTA、SDS、Triton X-100等化学物质溶解细胞壁。
THANKS
谢谢您的观看
DNA粗提取涉及从生物样品中分离出细胞,破碎细胞并释放 出其中的DNA,接着通过一系列的洗涤和沉淀步骤将DNA分 子纯化出来。
DNA粗提取的重要性

DNA的粗提取与鉴定(优秀课件)

DNA的粗提取与鉴定(优秀课件)

【实验总结】
此实验过程中有几次使用蒸馏水?几次过滤? 几次析出?几次搅拌?分别在哪一步? 两次蒸馏水: 三次过滤: 答:整个实验共 两次析出: 六次搅拌: 两次蒸馏水: 第1次: 步骤1.细胞吸水胀破 第2次: 步骤3.使 DNA黏稠物析出
三次过滤:
第1次:步骤1. DNA存在于滤液里 第2次:步骤4. DNA被留在纱布上 第3次:步骤6. DNA存在于滤液里
讨论: (1)比较两个试管中溶液的颜色有什么不同? 答:有丝状物的试管变成蓝色,另一试管还是 原来颜色 (2)这一鉴定结果说明什么问题?
答:提取出的丝状物是DNA
(3) DNA的直径约为20×10-10 m,实验中出 现的丝状物的粗细是否表示1个DNA分子直径的 大小?
答: DNA分子直径只有2 nm。丝状物是多 个DNA子聚在一起形成的
讨论:加入蒸馏水的目的? 降低NaCl溶液浓度到使DNA溶解度最低点,使 DNA从NaCl溶液中析出 注意事项: 将溶液中的DNA与其他杂质分离,这一步骤是 实验成败的关键。实验中应该缓慢贴壁加入蒸 馏水,并轻轻地沿一个方向不停地均匀搅拌, 以利于DNA分子的附着和缠绕
④滤取含DNA的粘稠物
用放有多层纱布的漏斗,过滤步骤3中的溶液 至 500mL的烧杯中,含 DNA的粘稠物被留在 纱布上 ⑤将DNA的粘稠物再溶解 取 1个 50 mL烧杯,向烧杯内注入氯化钠的物 质的量浓度为 2 mol/L的溶液 20mL。用钝头 镊子将纱布上的粘稠物夹至氯化钠溶液中,用玻 璃择不停地搅拌,使粘稠物尽可能多地溶解于溶 液中
A.随着NaCl溶液浓度的增大,DNA在NaCl溶液中的 溶解度也增大 B.随着NaCl溶液浓度的减小,DNA在NaCl溶液中的 溶解度也减小 C.DNA在NaCl溶液中的溶解度与NaCl溶液的浓度无 关 D.当NaCl溶液的浓度为0.14M时,DNA的溶解度最低

DNA的粗提取与鉴定(优秀课件)

DNA的粗提取与鉴定(优秀课件)

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讨论:加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么?
答:洗涤剂是一些离子去污剂,能溶解细胞膜, 有利于DNA的释放;食盐的主要成分是NaCl, 有利于DNA的溶解
②实例:提取洋葱DNA时,在切碎的洋葱中加 入一定的洗涤剂和食盐,进行充分的搅拌和研 磨,过滤后收集研磨液
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讨论:如果研磨不充分,会对实验结果产生怎样 的影响? 答:研磨不充分会使细胞核内的DNA释放不完全, 提取的DNA量变少,影响实验结果,导致看不到 丝状沉淀物、用二苯胺鉴定不显示蓝色等
氯化纳溶液;二苯胺试剂。铁架台;铁环;镊子;
三角架;酒精灯;石棉网;载玻片;玻璃棒;滤 纸;滴管;量筒(100ml,一个);烧杯; (100ml,一个,50ml、500ml各二个);试 管(20ml,二个);漏斗;试管夹;纱布。
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4、课前准备鸡血细胞液
①过程
取质量浓度为0.1g/ml的柠檬酸纳溶液(抗凝
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提取DNA的实验步骤 选取实验材料
破碎细胞,获取含DNA的滤液
Hale Waihona Puke 去除滤液中的杂质 析出DNA
鉴定DNA
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二、DNA的粗提取与鉴定的实验设计
(一)实验材料的选取
材料:鱼卵、猪肝、菜花、香蕉、鸡血、哺乳 动物的红细胞、猕猴桃、洋葱、豌豆、菠菜、在 液体培养基中培养的大肠杆菌。(从中选取2~3 种实验材料)
去离心管上部的澄清液,就可以得到鸡血细胞
液。)
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②柠檬酸钠作用 防止血液凝固
③作用机理
柠檬酸钠能与血浆中的Ca2+发生反应,生成柠 檬酸钙络合物,血浆中游离的Ca2+大大减少, 血液就不会凝固

DNA的粗提取与鉴定ppt课件

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(三)去除滤液中的杂质
为了纯化提取的DNA需要将滤液作进一步处理
讨论:此步骤获得的滤液中可能含有哪些细胞 成分?
答:可能含有核蛋白pp、t课件多. 糖和RNA等杂质 11
讨论:为什么反复地溶解与析出DNA,能够去 除杂质
答:用高盐浓度的溶液溶解DNA,能除去在高
盐中不能溶解的杂质;用低盐浓度使DNA析出,
DNA的粗提取与鉴定
ppt课件.
1
DNA从哪 儿提取?
DNA的提取和鉴定
怎样将DNA与 细胞中的其他
物质分离?
ppt课件.
怎样鉴定 我们提取 的DNA?
2
基础知识
内容解析
DNA的物理化学性质
化学性质
在沸水浴条件下,DNA与二苯胺反应呈 蓝色
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溶解性:
Ø 在0.14mol/L NaCl溶液中溶解度最小 Ø 不溶于酒精
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(二)破碎细胞,获取含DNA的滤液
动物细胞:
无细胞壁,将其加入蒸馏水中 定的洗涤剂
和食盐溶解细胞膜,进行充分的搅拌 和研磨,才能使其破裂释放DNA
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讨论:加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么?
答:洗涤剂是一些离子去污剂,能溶解细胞膜, 有利于DNA的释放;食盐的主要成分是NaCl, 有利于DNA的溶解
②实例:提取洋葱DNA时,在切碎的洋葱中加 入一定的洗涤剂和食盐,进行充分的搅拌和研 磨,过滤后收集研磨液
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讨论:如果研磨不充分,会对实验结果产生怎样 的影响? 答:研磨不充分会使细胞核内的DNA释放不完全, 提取的DNA量变少,影响实验结果,导致看不到 丝状沉淀物、用二苯胺鉴定不显示蓝色等

DNA的粗提取与鉴定_实验报告.ppt

DNA的粗提取与鉴定_实验报告.ppt
2.DNA在氯化钠溶液中的溶解度,是随着氯化钠的浓度 的变化而改变的。DNA在物质的量浓度为0.14 mol/L 的氯化钠溶液中的溶解度最低,利用这一原理,可以使 溶解在氯化钠溶液中的DNA析出。
3.DNA不溶于酒精溶液,但细胞中的某些物质则可以溶 于酒精。利用这一原理,可以进一步提取出含杂质较少 的DNA。 4.DNA遇二苯胺(沸水浴)会变成蓝色,因此,二苯胺 可以作为鉴定DNA的试剂。
2.提取鸡血细胞细胞核物质 20 m1 蒸馏水
3.溶解细胞核内的DNA
2 mo1/L 的 NaCl 溶液 40 mL
4.析出含DNA 的黏稠物
蒸馏水
5.滤取含DNA 的黏稠物
6.将 DNA 的黏稠物再溶解 2 mol/L 的 NaCl 溶液 20 mL
7.过滤含DNA 的 NaCl 溶液
8.提取含有杂质较少的DNA 9.DNA 的鉴定
二、方法与过程
1.制鸡血细胞液(活鸡鲜血经分离或沉淀获得)
0.1g/mL柠檬酸钠100mL 500mL烧杯中,玻棒搅拌,
活鸡鲜血180mL
离心、分离或静置沉淀。
2.提取DNA
⑴.提取血细胞核物质:
①取血细胞5-10mL+20mL蒸馏水,用玻棒沿一个方向 快速搅拌。
②纱布过滤:滤液中含DNA和其他核物质,如蛋白质。 ③原理:血细胞的细胞膜、核摸吸水胀破,玻璃棒快速 搅拌,机械加速血细胞破裂。
练习
1、请解释提取DNA的实验操作中主要的步骤的目的。
.答:提取DNA的第一步是材料的选取,其目的 是一定要选取DNA含量较高的生物材料,否则会 由于实验过程中或多或少的损失而造成检测的困难; 第二步是DNA的释放和溶解,这一步是实验成功 与否的关键,要尽可能使细胞内的DNA全部溶解; 第三步是DNA的纯化,即根据DNA的溶解特性、 对酶及高温的耐受性的不同等特性,最大限度地将 DNA与杂质分开;最后一步是对DNA进行鉴定, 这是对整个实验的结果的检测。
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1、鸡血细胞做实验材料,一是因为鸡血细胞核DNA 含量丰富,材料易得;二是鸡血细胞极易吸水胀破。
2、DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同, 3、嫩肉粉的主要成分是木瓜蛋白酶,其作用是分解 蛋白质,使提取出的DNA纯度较高 4、预冷的乙醇溶液具有以下优点:一是抑制核酸水 解酶活性,防止DNA降解,二是降低分子运动,易 于形成沉淀析出,三是低温有利于增加DNA分子柔 韧性,减少断裂;
选择适宜材料
破碎细胞
DNA的纯化
DNA的溶解和析出
与二苯胺混合,沸水浴,呈现蓝色反应
1. 下列关于DNA粗提取与鉴定的说法正确的是
A.氯化钠的浓度越低,对DNA的溶解度越大
B.人血也可代替鸡血进行实验
C.柠檬酸钠的主要作用是加速血细胞破裂
D.DNA不能溶于酒精
2. 在破碎鸡血细胞时,要先加入20ml的蒸馏水,其作用是
两种材料的DNA粗提取与鉴定过程
①释放组织细胞中的DNA, ②粗提取DNA, ③将粗提取的DNA进一步纯化, ④鉴定提取物是DNA
以鸡血为材料 以花菜为材料
鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图
2mol/L
鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图
鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
5、过滤→取纱布上的滤物 纱布过滤
知识目标 1、通过尝试对植物或动物组织中的DNA 进行粗提取,了解DNA的物理化学性质 。 2、理解DNA粗提取与鉴定的原理。
掌握DNA粗提取及鉴定方法,能利用 DNA的性质进行实验设计和操作。 态度观念目标 通过对DNA的粗提取的实验过程的设计 及操作,锻炼科学的思维方法,培养实 事求是的科学态度。
A. DNA溶解于水
B. 血细胞破裂,DNA释放
C.稀释血液,防止凝固
D. 有利于搅拌
3. 若选择的实验材料为植物细胞,破碎细胞时要加入一定量的洗
涤剂和食盐,加入食盐的目的是
A. 利于DNA的溶解
B. 分离DNA和蛋白质
C. 溶解细胞膜
D. 溶解蛋白质
4. 在DNA粗提取实验中,向在溶解DNA的NaCl溶液中,不断加
5、洗涤剂等去污剂可以溶解细胞的细胞壁,破坏细 胞膜,同时也能使蛋白质变性;
6、在60—75度条件下加温处理,蛋白质变性,而 DNA结构不会受到破坏,提取纯度较高的DNA 7、二苯胺的沸水浴能使DNA染成蓝色
根据以上原理可设计提取和纯化DNA的方案:
方案一:30mL含DNA的滤液+2mol/L NaCl→同方向搅拌,DNA溶解→加入蒸 馏水→DNA析出→过滤得到过滤物→放到 2mol/LNaCl溶液中溶解→DNA-NaCl溶 解液 方案二:30mL滤液+嫩肉粉(木瓜蛋白 酶)→静置10~15分钟→DNA滤液 方案三:30mL滤液→60~75℃恒温保温 10~15分钟→过滤获得DNA滤液
6、再次溶解DNA
取滤物
2mol/LNaCl溶液
大家有疑问的,可以询问和交流
可以互相讨论下,但要小声点
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鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图
7、加冷酒精使DNA析出(纯化) 冷酒精
DNA的鉴定
DNA
总结:
实验原理


提 取
DNA粗提取



鉴定DNA
DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同 DNA与其他细胞成分在酒精中溶解度不同 DNA和蛋白质对酶、高温和洗涤剂耐受性不同 DNA与二苯胺呈现蓝色反应
入蒸馏水的目的是
A.有利于溶解DNA
B.有利于溶解杂质
C.减少DNA的溶解度
D.减少杂质的溶解度
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