无内毒素质粒小量提取试剂盒使用说明
质粒小提试剂盒使用说明书
质粒小提试剂盒I简明步骤（PD1211）（详细内容请参考英文说明书）I.实验前准备II.注意事项RNase A: 使用前将提供的所有RNase A瞬时离心后加入Buffer A1, 使用后将Buffer A1/RNase A置于4o C保存。
质粒拷贝数:纯化中低拷贝的质粒时，使用2倍的菌液体积，2倍的Buffer A1,B1,N1, 相同体积的Wash Buffer和Elution Buffer.转化菌:若为-70o C甘油冻存的菌，请先涂布平板培养后，再重新挑选新的单个菌落进行培养。
切勿直接取冻存的菌种进行培养。
DNA Wash Buffer*: 使用前请将8 mL (PD1211-00)或48 mL(PD1211-01)或216 mL (PD1211-02) or 90 mL (PD1211-03) 96-100% 乙醇加入DNA Wash Buffer。
Buffer B1: 在低于室温时会沉淀，请于50o C左右水浴加热至沉淀完全溶解，溶液澄清，使用后保证Buffer B1瓶盖旋紧。
在室温下（22-25o C）进行所有离心操作。
III.操作步骤1.接种新鲜的单个菌落到1-5 mL的LB培养基（含适量抗生素），37o C震荡培养14-16小时。
室温下10,000 x g离心1分钟，收集菌体，并尽可能的吸去上清。
注：残留的液体培养基容易导致菌液裂解不充分，第5步离心后沉淀较松，不能有效吸取上清。
注：本说明书中的操作程序适用于标准LB （Luria Bertani）培养基培养12-16 小时后，OD600（细菌密度）在2.0-3.0之间的菌液。
若采用的是富集培养基，例如TB 或2×YT，请注意保证OD600不超过3.0。
2.加入250 µL Buffer A1（确保已加入RNase A），用移液枪或涡流震荡充分悬浮细菌细胞。
注：细菌细胞如果没有充分悬浮均匀，将导致菌体裂解不完全，从而降低产量。
(完整word版)质粒提取试剂盒说明书(word文档良心出品)
E.Z.N.A Plasmid Miniprep Protocol 质粒小规模提取试剂盒Product Number D6942 and D6943,D6944注意：1．使用之前，把试剂盒中的一小管RNA酶加入溶液Ⅰ. 4℃保存2．加60ml 100%乙醇到DNA Wash Buffer Concentrate中.室温保存除试剂盒外还需准备：可达到13000×g的离心机无核酸酶的离心管无菌去离子水或TE缓冲液纯乙醇操作规程：(提取过程在室温下进行)：1.在10-20ml试管中，将携带有所需质粒的E.coli接种到5ml LB培养基LB（含氨苄青霉素50μg/ml），37cº振荡培养12-16h。
需特别指出的是：endA阴性的E.coli菌株用于常规质粒提取，如DH5α和JM109.2. 取1.5~5ml菌液室温10000×g离心1min，去上清3. 加250µl溶液Ⅰ（含RNase A），涡漩振荡器震荡至菌体完全悬浮。
（用移液枪吹打进行重悬浮）4.加入250µl溶液Ⅱ，温和颠倒离心管4~6次，获得澄清的裂解液。
最好室温孵育2min，剧烈混合会使剪切染色体DNA，降低质粒纯度。
(储存溶液Ⅱ应拧紧瓶盖)5.加350µl溶液Ⅲ，温和颠倒数次混合，至出现白色絮状沉淀6.室温13000×g离心10min，紧凑的白色沉淀就会形成，迅速进行到下一个步骤7.特别小心吸取上清，移至洁净的装配好容积2ml离心管的吸收柱中。
要保证没有吸入沉淀和细胞碎片。
室温10000×g离心1min，至裂解物完全通过吸收柱8.弃滤过液，加500µl Buffer HB，10000×g离心1min，清洗吸收柱，除去残余蛋白质保证DNA的纯度以备后续试验使用。
如果接下来的步骤对质粒纯度要求不高，如酶消化法等其它筛选方法，此步可省略9.弃滤过液，再用100%乙醇稀释的750µl Wash Buffer清洗吸收柱，10000×g离心1min，弃过滤液。
OMEGA小提试剂盒提取质粒步骤(无内毒)
OMEGA小提试剂盒提取质粒步骤(中文翻译版)1、将携带目的质粒的大肠杆菌接种于含10~15ul基础培养基/氨苄西林培养介质的50ml培养瓶中。
2、室温下500×g离心10min。
3、弃去上清，剩余沉淀物中加入500ul的SolutionⅠ/RNase A，彻底混匀。
4、将混悬液移至新的2ml离心管中，加入500ul SolutionⅡ，轻柔彻底混匀，可得清亮的细菌裂解物，室温下孵育2min（混匀时用力过大，可破碎出染色体DNA，使目的质粒纯度下降）。
5、向4中液体加入250ul预冷的Buffer N3，轻柔、彻底混匀，直到出现白色絮状沉淀，4℃≥12000×g离心10min（可室温，最好4℃）（Buffer应彻底混匀，若混合物粘稠呈棕色或呈球状，应多混匀几次以中和溶液，溶液的彻底中和对于获得好的产出是必要的）。
6、小心吸取并将上清液转移进新的1.5ml离心管1：0.1的比例向上清液中加入ETR Solution 混匀溶液并于冰上孵育10min，孵育过程中颠倒几次以混匀（加入ETR Solution后，细菌裂解物将出现浑浊，但冰上孵育后将变澄清）（勿用2ml离心管收集上清，因为2ml离心管中有太多液体时，ETR Solution将悬浮于溶液中）。
7、将6中液体于42℃孵育5min，溶液将再次变浑。
室温下12000×g离心3min，ETR Solution 将于离心管底部形成蓝色层。
8、将上层水相转移入新的2ml离心管中，按1：0.5的比例加入无水乙醇（室温，96~100％），轻柔混匀，室温下孵育1~2min。
9、将8中的溶液取700ul到柱子中，组装收集管，室温下1000×g离心1min，弃去收集管中通过柱子的液体，柱子和收集管重复利用。
10、重复9中步骤，直到收集的细菌裂解物全部用完。
11、将500ul Buffer HB加入柱子中，室温下1000×g离心1min，弃去收集管中废液（目的：将残存的蛋白污染物除去，是获得高质量DNA所必需的）。
质粒小量制备试剂盒
质粒小量制备试剂盒（离心柱型）1. 取1~2 ml 2YT或LB培养基过夜培养的菌液，8000 rpm离心1 min，弃尽上清。
注意：对于低拷贝数的质粒，请用4~6 ml菌液，适当增加Solution Ⅰ，Ⅱ和Ⅲ的用量，或分几个离心管处理，最后通过多次离心将上清液收集到一个吸附柱中。
2. 加入200 μl Solution Ⅰ，用枪头或振荡器充分悬浮细菌。
注意：不要残留细小菌块，否则会影响裂解，导致提取质粒量低和质量下降。
3. 加入200 μl Solution Ⅱ，立即温和并充分地上下翻转混合4~6次，使菌体充分裂解，直至形成透亮的蛋清状溶液，此步骤不宜超过5 min。
4. 加入350 μl Solution Ⅲ，温和并充分地上下翻转混合8~10次，室温放置2~5 min。
12000 rpm，离心5~10 min。
5. 将步骤4中的上清转移到套放于2 ml收集管内的GenClean Column中，室温6000 rpm离心1 min，取出GenClean Column，倒掉收集管中废液。
6. 将GenClean Column重新放回收集中，加入500 μl Wash Solution，12000 rpm，室温离心1 min，倒掉收集管中废液。
7. 重复步骤6一次。
8. 倒掉收集管中废液，12000 rpm，室温离心1 min，彻底去除Wash Solution。
注意：此步骤不可省略。
9. 将GenClean Column放入干净的1.5 ml离心管中，在GenClean Column膜中央加入50~70 μl Elution Buffer，37 ℃放置2 min。
10. 12000 rpm，室温离心1 min，离心管中的液体即为包含目的质粒的溶液。
11. 取2~5 μl（视质粒浓度定）进行琼脂糖凝胶电泳检测，纯化好的DNA可立即用于后续实验或-20 ℃冻存。
小提质粒说明书
小提质粒说明书tiangen质粒小型提取试剂盒说明书（离心柱目录号dp103）（版本号dp121221）本试剂盒采用碱裂解法裂解细胞，再通过离心吸附柱在高盐状态下特异性地结合溶液中的dna。
离心吸附柱中采用的硅基质材料为新型材料，高效、专一吸附dna。
质粒提取得率和质量与宿主菌的种类和培养条件，细胞的裂解，质粒拷贝数，质粒的稳定性，抗生素等因素有关。
使用前注意：1.使用前将RNaseA加入溶液P1中（加入试剂盒中提供的所有RNaseA），搅拌均匀，并储存在2-8℃下。
2第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在漂洗液pw中加入无水乙醇。
3.使用前请检查平衡液BL、P2、P3是否混浊。
如果有任何混浊，可以在37℃的水浴中加热几分钟，以恢复澄清。
4.注意不要直接接触溶液p2和p3，使用后应立即盖紧盖子。
5.所有离心步骤均为使用常规台式离心机室温下进行离心，速度为12,000rpm(~13,400×g)。
6.提取的质粒量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。
7.实验前，吸附柱的平衡液BL处理能最大程度地活化硅基膜，提高产率。
8.平衡液BL处理过的柱应在同一天使用，放置时间过长会影响效果。
9.去蛋白液pd可以有效去除残留的蛋白污染，当宿主菌为enda+（tg1、bl21、hb101、et12567、jm系列）等核酸酶含量较高的菌株时，强烈推荐使用去蛋白液pd。
操作步骤：1.柱平衡：吸附柱cp3500μLBL，12000rpm，离心1min，将收集管中的废液倒出，将吸附柱放回回收集管。
（使用当天处理的柱）2.取1ml过夜培养的菌液，加入离心管，12,000rpm，离心1min，尽量吸除上清（多次离心将菌体沉淀收集到一个离心管中）。
3.向离心管中加入250，用于细菌沉淀μL溶液P1、悬浮液、混合和沉淀。
（如果存在未充分混合的细菌，将影响裂解，导致萃取量和纯度低）4.加入250μl溶液p2，温和的上下翻转6-8次，使菌体充分裂解。
GENMED 无内毒素小量质粒抽提试剂盒 产品说明书(中文版)
GENMED SCIENTIFICS INC. U.S.A GMS60007.3 v.A GENMED无内毒素小量质粒抽提试剂盒产品说明书（中文版）主要用途GENMED无内毒素小量质粒抽提试剂是一种旨在通过化学和生物裂解细胞、 沉淀、亲和树脂过滤、萃取来达到脱盐、去内毒素、去蛋白、去杂质小分子的纯化无内毒素质粒DNA的权威而经典的技术方法。
该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。
其适用于各种质粒/柯斯质粒DNA样品的制备，OD260/280在1.8-2.0之间。
产物可用于各种后续分子生物学操作。
产品即到即用，性能稳定，操作方便迅速，提取效率和纯化程度高。
技术背景内毒素（Endotoxin）是一种脂多糖（Lipopolysaccharides；LPS），革兰氏阴性细菌细胞膜的组成成分。
在质粒纯化过程中，细菌裂解释放出内毒素，伴随着质粒，严重干扰后续真核细胞的转染，尤其对于敏感的细胞株。
GENMED无内毒素小量质粒DNA制备技术综合了酶解、碱裂、煮沸等优势元素，融入了特异亲和树脂充分有效地使细菌中核酶、PCR反应抑制剂失活，并清除内毒素（低达<0.1 EU/微克）以及非DNA 分子，其效率和纯度都出乎其上。
产品内容GENMED混匀液（Reagent A）毫升GENMED裂解液（Reagent B）毫升GENMED平衡液（Reagent C）毫升GENMED去毒液（Reagent D）毫升GENMED去干扰剂（Reagent E）微升GENMED沉淀液（Reagent F）毫升GENMED清理液（Reagent G）毫升GENMED保存液（Reagent H）毫升产品说明书1份保存方式保存GENMED混匀液（Reagent A）和GENMED去干扰剂（Reagent E）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里，有效保证6月用户自备1.5和2毫升离心管：用于样品操作的容器微型台式离心机：用于沉淀核酸涡旋震荡仪：用于混匀反应物37℃恒温水槽：用于孵育反应物1．加入毫升含质粒的细菌到毫升离心管（注意：确保细菌量OD600＝ ;如果细菌量不足，影响质粒提取）2．放进微型台式离心机离心秒，速度为g（例如eppendorf 5415D，RPM）3．小心抽去上清液4．加入微升GENMED混匀液（Reagent A），涡旋震荡少许，使细菌颗粒混匀5．加入微升GENMED裂解液（Reagent B），轻轻混匀6．加入微升GENMED平衡液（Reagent C），强力涡旋震荡秒7．放进微型台式离心机离心分钟，速度为g（例如eppendorf 5415D，RPM）8．小心移取微升上清液到新的毫升离心管，避免絮状物9．同时移取微升GENMED去毒液（Reagent D）到另一个新的毫升离心管（注意：参见注意事项3和4）10．放进微型台式离心机离心分钟，速度为g（例如eppendorf 5415D，RPM）11．小心抽去上清液12．加入微升实验步骤的上清液13．涡旋震荡秒14．平放在平式摇荡仪上孵育分钟，速度为RPM15．放进微型台式离心机离心分钟，速度为g（例如eppendorf 5415D，RPM）16．小心移取微升上清液到新的毫升离心管，避免黑色小粒17．加入微升GENMED去干扰剂（Reagent E），混匀18．放进℃恒温水槽孵育分钟19．加入微升GENMED沉淀液（Reagent F）20．涡旋震荡秒21．放进微型台式离心机离心分钟，速度为g（例如eppendorf 5415D，RPM）22．小心抽去上清液23．加入微升GENMED清理液（Reagent G）24．放进微型台式离心机离心分钟，速度为0g（例如eppendorf 5415D，RPM）25．小心抽去上清液26．空气中晾干27．加入0微升GENMED保存液（Reagent H）28．放进℃冰箱里备用注意事项1．本产品为20次操作2．本产品采用特殊树脂法3．使用GENMED去毒液（Reagent D）前，充分混匀4．使用1毫升枪头，将枪头尖端部分剪去，用于移取GENMED去毒液（Reagent D）5．细菌量是个重要因素：通常1毫升细菌可获得1－5微克无内毒素质粒6．如果需要制备各种数量的细菌质粒/柯斯质粒，可订购中量和大量规格7．本公司提供GENMED RNA清除试剂盒（GMS20059）和GENMED去内毒素试剂盒（GMS20067）8．本公司提供系列质粒提取试剂产品1．本产品经鉴定性能稳定2．本产品经鉴定去内毒素和纯化程度高使用承诺杰美基因秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。
质粒小提试剂盒使用说明书
质粒小提试剂盒 Mini Plasmid Kit(目录号：HS0101)产品包装（注意：使用前将全部RNase A 溶液加到Buffer P1中混合均匀，2 ~ 8℃保存）保存条件本试剂盒在室温(15 ~ 25℃)干燥条件下，可保存12个月；更长时间的保存可置于2 ~ 8℃。
若溶液产生沉淀，应在使用前置于37℃下溶解沉淀。
单独包装的RNase A 在室温可稳定保存12个月。
加入RNase A 后的Buffer P1应置于2 ~ 8℃保存，可稳定保存6个月。
产品简介本试剂盒用于质粒DNA 的小量制备与纯化。
菌体经碱裂解、高盐、低pH 处理，质粒可从菌体中释放出来，并特异、高效地被离心柱硅胶膜吸附。
通过漂洗液PW 的清洗可去除杂质，在低盐、高pH 条件下洗脱，最后得到纯度较高的质粒DNA 。
使用本试剂盒可从1 ~ 5 ml 过夜培养的菌液中纯化得到高达20 ug 的高纯度质粒DNA ，在30 min 之内完成提取任务。
所得质粒可直接用于酶切、转化、PCR 、测序等各种常规分子生物学操作。
北京厚生博泰科技有限公司Beijing Hooseen Biotech Co., Ltd.产品特点1. 快速：步骤少，操作简便，节约时间。
2. 简便：离心吸附柱不需要预平衡，漂洗液不需要另加乙醇，即开即用。
3. 高质：OD260/280在1.7 ~ 1.9之间。
4. 稳定：正确保存条件下一年内提取效果不发生变化。
操作步骤1. 取1 ~ 5 ml过夜培养的菌液，室温12,000 rpm离心1 min，尽量将上清去除干净。
（注意：根据菌液的浓度决定取液量，浓度高时取1 ml菌液离心即可，浓度低时可多收集一次）2. 加入250 ul Buffer P1，用枪头充分吹打使菌体重悬均匀。
（注意：是否将RNase A溶液加到Buffer P1中并混合均匀；菌体沉淀是否悬浮充分，如有未彻底悬浮的菌块会影响裂解，导致提取的质粒浓度及纯度降低）3. 加入250 ul Buffer P2，温和颠倒混匀6 ~ 8次，直到溶液变得清亮粘稠。
质粒小量提取试剂盒说明书
质粒小量提取试剂盒说明书货号：D1100规格：50T/100T保存：常温保存，复检期一年。
（注：RNase A以附件形式发货，收到未使用前请-20℃保存）试剂盒内容：试剂盒组成D1100-50T D1100-100TRNase A300ul500ul溶液Ⅰ15ml30ml溶液Ⅱ15ml30ml溶液Ⅲ20ml40ml漂洗液15ml15ml×2洗脱液15ml30ml吸附柱50个100个收集管50个100个说明书1份1份产品说明：本试剂盒采用碱裂解法裂解细胞，根据离心吸附柱在高盐状态下特异性地结合溶液中的DNA的原理特异性提取质粒DNA。
离心吸附柱中采用的硅基质材料能高效、专一地吸附DNA，可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。
使用本试剂盒提取的质粒DNA可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、测序、连接和转化等试验。
使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶体上的标签。
溶液Ⅰ在使用前先加入RNaseA （将试剂盒中提供的RNaseA全部加入），混匀，置于2-8℃保存。
如非指明，所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
操作步骤:1、取1-5ml细菌培养物，12000rpm离心1min，尽量吸除上清（菌液较多时可以通过多次离心将菌体沉淀收集到一个离心管中）。
2、向留有菌体沉淀的离心管中加入250ul溶液Ⅰ(请先检查是否已加入RNaseA），使用移液器或旋涡振荡器彻底悬浮细菌细胞沉淀。
注意：如果菌块未彻底混匀，会影响裂解导致质粒提取量和纯度偏低。
3、向离心管中加入250ul溶液Ⅱ，温和地上下翻转6-8次使菌体充分裂解。
注意：混匀一定要温和，以免污染细菌基因组DNA，此时菌液应变得清亮粘稠，作用时间不要超过5min，以免质粒受到破坏。
4、向离心管中加入350ul溶液Ⅲ，立即温和地上下翻转6-8次，充分混匀，此时会出现白色絮状沉淀。
12000rpm离心10min，用移液器小心地将上清转移到另一个干净的离心管中，尽量不要吸出沉淀。
质粒小提试剂盒提取质粒
质粒小提试剂盒提取质粒
（1）柱平衡步骤：向吸附柱CP3中（吸附柱放入收集管中）加入500μL的平衡液BL，12,000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中；
（2）取1-5ml过夜培养的菌液，加入离心管中，使用常规台式离心机，12,000rpm离心1分钟，尽量吸除上清；
（3）向留有菌体沉淀的离心管中加入250μL溶液P1（先检查是否已加入RNaseA），使用移液器或涡旋振荡器彻底悬浮细菌沉淀；
（4）向离心管中加入250μL溶液P2，温和地上下翻转6-8次使菌体充分裂解；
（5）向离心管中加入350μL溶液P3，立即温和地上下翻转6-8次，充分混匀，此时将出现白色絮状沉淀。
12,000rpm离心10分钟，此时在离心管中底部形成沉淀；
（6）将上一步收集的上清液用移液器转移到吸附柱CP3中，注意尽量不要吸出沉淀。
12,000rpm离心30-60秒，倒掉收集管中的废液，将吸附柱CP3放入收集管中；
（7）向吸附柱CP3中加入600μL漂洗液PW（先检查是否已加入无水乙醇），12,000rpm离心30-60秒，倒掉收集管中的废液，将吸附柱CP3放入收集管中；
（8）重复操作步骤（8）；
（9）将吸附柱CP3放入收集管中，12,000rpm离心2分钟，目的是将吸附柱中残余的漂洗液除去；
（10）将吸附柱CP3置于一个干净的离心管中，向吸附膜的中间部位滴加50-100μL洗脱缓冲液EB，室温放置2分钟，12,000rpm离心2分钟将质粒溶液收集到离心管中。
质粒DNA小量提取试剂盒说明书
质粒DNA 小量提取试剂盒一、产品简介采用SDS碱裂解法，结合硅胶膜选择性吸附DNA的方法，适合1-4ml细菌培养物中提取多至20 μg质粒DNA。
纯化的质粒DNA适合用于酶切、PCR、测序、转化和转染等分子生物学实验。
二、试剂盒组成和储存组成内容DK301-01 (50次) DK301-02 (200次)RNase A1＊30 μl 120 μlBuffer BL 15 ml 60 mlBuffer P1 15 ml 60 mlBuffer P2 15 ml 60 mlBuffer P3 20 ml 90 mlBuffer WA§19 ml 75 mlBuffer WB§16 ml 65 mlDNA吸附柱-B 50套200套1.5 ml离心管50个200个TE※15 ml 30 ml说明书1份1份＊RNase A1: 50 mg/ml, -20℃长期保存；第一次使用前将RNase A1全部加入Buffer P1中，于4℃保存。
§Buffer WA和Buffer WB，使用前按试剂瓶所示体积加入无水乙醇或者95%乙醇，混合均匀。
※TE：10 mM Tris-HCl, 0.1 mM EDTA, pH 8.0(25°C)。
除RNase A1和Buffer P1(已加入RNase A1)外，其他组成成分于室温储存。
三、注意事项1.Buffer P3和Buffer WA含刺激性化合物，避免沾染皮肤、眼睛和衣服、谨防吸入口鼻。
若沾染皮肤、眼睛，立即使用大量水或生理盐水冲洗沾染处，必要时寻求医疗咨询。
2. 使用后应及时盖紧试剂瓶盖子，以免影响下次使用效果。
3. 操作步骤A2和B2，充分悬浮细菌，无可见的块状菌团，不然会影响裂解效果。
4. 操作步骤A3和B3，缓慢翻转离心管，以免机械力打断基因组DNA而导致最后纯化的质粒DNA中有基因组DNA污染，同时避免打断质粒DNA，保持其完整性。
质粒小量提取质粒小量提取试剂盒
质粒小质粒小量提取量提取量提取试剂盒试剂盒（Plasmid Miniprep Kit ）目录号目录号：：ZP101 版本版本：：2014-10-15 试剂盒内容： 试剂盒组成ZP101-1 (50次) ZP101-2 (100次) ZP101-3 (200次) RNaseA (10 mg/ml) 150 μl 300 μl 600 μl 溶液1 15 ml 30 ml 60ml 溶液2 15 ml 30 ml 60 ml 溶液3 20 ml 40 ml 80 ml去蛋白液W1 30 ml 60 ml 120 ml 漂洗液W2 15 ml 2X15 ml 2X30 ml 洗脱缓冲液TE 15 ml 15 ml 30ml 吸附柱 50个 100个 200个 收集管(2 ml) 50个 100个 200个 说明书 1份 1份 1份 储存条件： 本试剂盒在室温(15-25℃)干燥条件下，可保存1年；更长时间的保存可置于2-8℃。
若溶液产生沉淀，应在使用前置于37℃下溶解沉淀。
单独包装的RNase A 在-20℃可稳定保存1年以上。
加入RNase A 后的溶液1应置于2–8℃保存，可稳定保存半年。
产品简介： 本试剂盒采用碱裂解法裂解细菌，再通过离心吸附柱在高盐状态下特异性地结合溶液中的DNA。
离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司特有新型材料，高效、专一吸附DNA。
本说明书操作步骤适用于从1-5 ml过夜培养的大肠杆菌LB(Luria-Bertani) 培养液中，快速提取多至40 μg纯净的高拷贝质粒DNA。
使用本试剂盒提取的质粒DNA 可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、测序、连接、转化、文库筛选、体外翻译等。
注意事项：请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。
1． 按1：100的比例向溶液1中加入RNaseA，混匀，置于2–8℃保存。
2． 第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在漂洗液W2中加入无水乙醇。
GTpure 质粒小量提取试剂盒
GTpure TM质粒小量提取试剂盒一、 试剂盒组成Cat.NO. 246-050包装 50次离心柱C107 50个收集管 50个BRS Buffer 15mlLS Buffer 15mlNE Buffer 25mlWA Buffer 10mlDE Buffer 15mlRNase A solution 30μl说明书 1二、 试剂盒贮存试剂盒所有组分可在室温（15-25度）干燥条件下保存2年，BRS Buffer加入RNase A后应在2-8度保存。
三、 产品说明类型离心柱型处理时间 12分钟/单次制备离心柱最大载量800μl离心柱最大吸附量20μg最小洗脱体积30μl建议使用培养液的体积：高拷贝质粒低拷贝质粒2-3ml 5ml下游应用测序、克隆、连接、转化、限制性酶切和扩增等四、使用前注意事项1．将全部RNase A solution加入BRS Buffer中，混匀后置于4度保存，并在试剂瓶的标签上做好标记。
2．检查LS Buffer和NE Buffer中是否有沉淀（请不要剧烈振摇LS Buffer，使用后应立即旋紧瓶盖），若有沉淀请置于37度水浴充分溶解.3．向WA Buffer中加入40ml无水乙醇，混匀后室温密闭保存。
4．所有操作在室温下进行。
5．请将DE Buffer 70度预热，预热的DE Buffer有助于提高DNA洗脱效率。
五、操作步骤Page 1 of 2Page 2 of 21．加入250μl UP Buffer 至离心柱C107，16,000 × g 离心60sec 弃废液。
＊此步有助于增强离心柱对DNA 的吸附作用，请在24h 内使用该离心柱。
2．收集菌体，将培养物加入1.5ml 或2ml 离心管中，16,000 × g 离心30sec 。
＊高拷贝和低拷贝质粒分别建议取2-3ml 和5ml 过夜培养的菌液。
建议培养的细菌浓度在OD 6002.0-3.0之间。
无内毒素质粒小量提取试剂盒使用说明
10、 向 吸 附 柱 中 加 入 500ul 漂 洗 液 ， 12000rpm 离 心 1min， 弃 废 液 ， 将吸附柱放入收集管中。
3、向 离 心 管 中 加 入 200ul 溶 液 P2，温 和 地 上 下 翻 转 6-8 次 使 菌 体 充 分 裂 解 。 注 意 ： 混 匀 一 定 要 温 和 ， 以 免 污 染 细 菌 基 因 组 DNA， 此 时 菌 液 应 变 得 清 亮 粘 稠 ， 作 用 时 间 不 要 超 过 5 min， 以 免 质 粒 受 到 破 坏 。
2. 洗 脱 缓 冲 液 体 积 不 应 少 于 50ul， 体 积 过 小 影 响 回 收 效 率 ； 洗 脱 液 的
pH 值 对 洗 脱 效 率 也 有 影 晌 ，若 需 要 用 水 做 洗 脱 液 应 保 证 其 pH 值 在 8.0 左 右 (可 用 NaOH 将 水 的 pH 值 调 至 此 范 围 )， pH 值 低 于 7. 0 会 降 低 洗 脱 效 率。
由于质粒dna本身的性质清除过程可导致部分质粒dna丢失但内毒素却能得到最大限度清所有溶液应用无内毒素的高纯水配制所有器械材料均应不含内毒素玻璃器皿可高温烘烤非挥发性水溶液可高压处理
无内毒素质粒小量提取试剂盒使用说明 货 号 ： D1140 规 格 ： 50T/100T 保存：常温干燥保存，复检期为一年。 试剂盒内容：
有 机 化 合 物 。 内 毒 素 清 除 剂 可 最 大 限 度 地 除 去 内 毒 素。 从 1-5ml 大 肠 杆 菌 LB 培 养 液 中 ，可 快 速 提 取 5-15μ g 高 纯 度 质 粒 DNA，提 取 率 达 85-90%。使 用 本 试 剂 盒 提 取 的 质 粒 DNA 纯 度 高 ，可 直 接 用 于 细 胞 转 染 等 要 求 较 高 的 实 验 ， 以 及 其 他 各 种 常 规 操 作 ， 包 括 酶 切 、 PCR、 测 序 、 连 接 和 转 化 等 试 验 。
质粒提取试剂盒说明书
1使用前，在试剂盒中加入一小管核糖核酸酶到溶液一中。
保存在4°C2向dnawas缓冲液浓缩液中添加60 ml 100%乙醇，并在室温下储存除此之外，还需要一台容量为13000×G的离心机无核酸酶离心管无菌去离子水或te缓冲液纯乙醇操作步骤：（萃取过程在室温下进行）1在10-20ml试管中，将携带所需质粒的大肠杆菌接种于5mllb培养基lb（含50μg/ml 氨苄西林）中，37℃≤0.2培养12-16h，需要注意的是，常规的质粒提取使用的是Enda 阴性的大肠杆菌，如DH5α和JM109。
2取1.5～5ml常温菌液10000×g，离心1分钟，除去上清液。
三。
加入250.0.8l溶液I（含RNase A），用旋涡振荡器摇匀，直至细胞完全悬浮。
（用移液管再消耗）4加入250.0.8l溶液II，轻轻转动离心管4-6次，得到澄清的热解溶液。
最好在室温下孵育2分钟。
剧烈的混合会切断染色体DNA，降低质粒的纯度。
（储存溶液II时应拧紧盖子）5加入350.0.8l溶液III，轻轻倒置并混合几次，直到出现白色絮状沉淀6在室温下以13000×g离心10分钟后，会形成白色沉淀并迅速进入下一步7小心处理上清液，并用2ml离心管转移到干净的吸收柱中。
确保没有沉淀物和细胞碎片被吸入。
在10000×g室温下离心1分钟，直至裂解液完全通过吸收柱8取纯化后的蛋白质，在离心条件下，取剩余蛋白1.500×1.0，进行离心分离。
如果下一步不需要高纯度质粒，如酶消化等筛选方法，这一步可以省略9滤液弃去，用100%乙醇稀释的750.0.8l洗涤缓冲液冲洗吸收柱，在10000×g离心1分钟，滤液丢弃。
注意：浓缩前必须用纯乙醇稀释洗涤液。
参见标签中的方法如果结冰，使用前必须恢复到室温10此步骤可选：加入750.0.8l洗涤缓冲液清洗吸收柱1113000×g吸收柱必须离心2分钟，以确保去除乙醇。
质粒小量提取试剂盒磁珠法说明书
质粒小量提取试剂盒（磁珠法）说明书货号：DM1100规格：50T/100T保存：磁珠可以在室温下（15-25℃）运输，但请在4℃冰箱中保存。
RNase A 需-20℃保存，以保证其活性。
其余试剂可以室温保存，更长时间的保存可置于2-8℃。
试剂盒内容：产品说明：本试剂盒采用碱裂解法裂解细胞，再通过具有独特分离作用的磁珠和缓冲液系统在高盐状态下特异性地结合溶液中的质粒DNA。
使用本试剂盒提取的质粒DNA可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、测序、连接、转化、文库筛选、体外翻译、转染一些常规的传代细胞等。
使用前请先在漂洗液中配置70%乙醇。
若溶液产生沉淀，使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间，必要时可在37℃水浴中预热10min溶解沉淀，摇匀后使用。
操作步骤：1. 裂解取1～5 mL菌液至EP管中，12000 rpm离心2分钟，尽量吸净上清。
在菌体沉淀中加入250 μl裂解液R1和2.5μl RNase A，吸打或振荡至彻底悬浮菌体；加入250 μl裂解液R2，立即温和颠倒离心管5-10次混匀，室温静置2-4 min；加入350 μl裂解液R3，立即温和颠倒离心管5-10次充分混匀（此时底部可能会出现大量白色絮状沉淀属于正常现象）。
置于离心机12000rpm，4℃离心5-10 min。
2. 结合尽量取净上清于新的1.5 mL EP管中，加入等量异丙醇以及振荡混匀的50 μL磁珠，颠倒混匀1 min，静置3 min。
将EP管置于磁铁上进行磁分离，吸弃废液（吸净管盖及管底残液）。
3. 洗涤加入600 μL 漂洗液（使用前请预先配置70%乙醇），轻柔混匀1-2 min，然后磁分离，吸净管盖及管底的残液；重复本步骤一次。
4. 洗脱室温晾干5～10 min至乙醇挥发完全，加入50～100 μL洗脱液，缓慢抽吸混匀，56℃水浴10 min。
每隔2～3 min轻摇EP管几下混匀。
然后磁分离，小心吸取上清液至新的EP管中，进行下步实验。
质粒小量提取纯化试剂盒 说明书
质粒小量提取纯化试剂盒使用说明书产品简介GBpure Plasmid试剂盒是质粒DNA提取领域中的突破性进展，它有效结合了细胞裂解，杂质去除，及质粒纯化等功能。
无需过柱，不用酚氯仿抽提，直接获得高质量的质粒DNA。
我们独特的试剂系统能确保所提质粒DNA高产量，高质量。
本试剂纯度高，采用人性化设计，可按用户需求灵活制定容量大小。
产品特色●简单:添加GBpure Plasmid使细胞裂解，释放DNA，及杂质去除有效结合起来。
●方便:无需过柱，无需过滤，无需高效液相色谱法，无需超速离心机，无需特殊设备。
●无毒性:无酚、氯仿，无饱和正丁醇，无溴化乙锭，无氯化铯，无盐酸胍。
●快速:一分钟完成菌体沉淀，五分钟完成颗粒细菌碎片，10分钟完成沉淀质粒DNA，从培养细菌到提取质粒DNA只需30分钟。
●高纯度:A260/A280 = 1.7-1.8. 所得质粒DNA无任何抑制剂，可应用于所有分子生物学的操作。
●延展性: 一盒GBpure Plasmid试剂盒可以进行：miniprep, midiprep,或maxiprep;无需购买额外的试剂盒。
●高产量: 您可以从1 (mini), 10 (midi), 100 (maxi) ml的过夜培养基中获得大约5μg, 50 μg, 500 μg的DNA质粒。
●实惠：一盒GBpure Plasmid 售价 RMB 500/ 50 minipreps，即 RMB10/miniprep ，质优价廉。
产品内容与储存条件室温保存。
有效期12个月。
操作方法1.取1 ml过夜培养菌液，装入1.5 ml离心管中，室温12,000 × g离心1 min沉淀菌体，完全弃除上清。
2.加入300 μl Buffer P1，充分混匀震荡菌体沉淀10-15 sec，使其完全分散开，至无絮块存在。
3.加入300 μl Buffer P2，轻轻颠倒离心管3-5次，室温放置1 min，使细菌完全裂解，此时溶液应呈透明。
质粒小提
去内毒素质粒小提试剂盒使用说明书
1、过夜培养10-15ml菌液（抗生素抗性筛选）。
2、将菌液5000g离心10min，弃掉上清液，加入500ul Solution I（已添加RNase A），将沉
淀充分悬浮起来并转入新的2ml EP管。
3、加入500ul Solution II，轻轻颠倒7-10次，室温放置2min；加入250 ul 冰浴处理的Buffer
N3，轻轻颠倒数次。
12000g 离心10min。
4、将上清液转入新的1.5ml EP管，加入0.1倍体积的ETR Buffer，轻轻颠倒混匀后放入冰浴
中10min，在此期间需颠倒混合液数次。
此步后EP管中的液体会变澄清。
5、将冰浴后的液体放入42℃水浴锅中，维持5min；12000g 离心3min。
6、吸取上清液转入新的2ml EP管中，加入0.5倍的无水乙醇。
颠倒混匀后室温放置1-2min。
7、吸取700ul 乙醇混合液转入吸附柱中，10000g 离心1min。
此步需分三次将混合液转入
吸附柱中。
8、加500ul Buffer HB，10000g 离心1min。
9、加700ul DNA Wash Buffer ，10000g 离心1min。
重复此步骤一次。
10、将吸附柱放入收集管中，13000g 离心3min。
11、将吸附柱放入新的1.5ml EP管中，室温放置5min；加入80-100ul 去离子水，室温
放置2min，13000g 离心1min。
吸附柱平衡：向吸附柱加入200ul 的GPS Buffer，室温放置2min，12000g 离心2min。
无内毒素质粒小量制备试剂盒(离心柱型)
上海捷瑞生物工程有限公司 Shanghai Generay Biotech Co., Ltd.无内毒素质粒小量制备试剂盒（离心柱型）目录号：GK2007-20（20次）用于小规模无内毒素质粒制备（mini preparations ）一、试剂盒组成、储存△：第一次使用前按说明加指定量乙醇注意事项1． 第一次使用时，将试剂盒所带全部的RNase A 加入溶液P1后（终浓度100ug/ml ）置于4℃保存。
如果溶液P1中RNase A 失活，提取的质粒可能会混杂有微量RNA 残留， 这时可在溶液P1中补加RNase A 即可。
2． 第一次使用前请先在15ml 漂洗液WB 中加入45ml 无水乙醇，充分混匀，加入后请及时在方框打钩标记已加入乙醇，以免多次加入!3． 环境温度低时溶液P2中SDS 可能会析出浑浊或者沉淀，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清，不要剧烈摇晃，以免形成过量的泡沫。
4． 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH 值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
二、原理简介本试剂盒采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞，离心吸附柱内的硅基质膜在高盐、低PH 值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA ，再通过去蛋白液和漂洗液将杂质和其它细菌成分去除，最后低盐、高PH 值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA 从硅基质膜上洗脱。
三、试剂盒特点1. 离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。
克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2. 独有的去蛋白液配方，可以高效去除残留的核酸酶，即使是核酸酶含量丰富的菌株如JM 系列、HB101也可以轻松去除。
有效防止了质粒被残留的核酸酶降解。
3. 独特内毒素清除配方，清除内毒素效果一般＜0.1EU/ug 。
4. 快速，方便，不需要使用有毒的苯酚、氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀。
获得的质粒产量高，纯度好， 可以直接用于酶切、转化、PCR 、体外转录、测序等各种分子生物学实验。
质粒小抽试剂盒
质粒小抽试剂盒产品简介：本试剂盒采用碱裂解法裂解细菌，再通过离心吸附柱在高盐状态下特异性地结合溶液中的DNA。
离心吸附柱中采用的硅基质材料，能高效、专一吸附DNA。
以下操作步骤适用于从1-5 ml过夜培养的大肠杆菌LB(Luria-Bertani) 培养液中，快速提取多至20μg纯净的高拷贝质粒DNA。
使用本试剂盒提取的质粒DNA 可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、测序、连接、转化、文库筛选等。
注意事项：请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。
1.溶液B1使用完毕后，请置于2 - 8℃保存。
(溶液B1 在使用前先加入RNaseA)2.第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在漂洗液W中加入3倍体积的无水乙醇。
（例如向15 mL的漂洗液中加入45 mL的无水乙醇）。
3.使用前请先检查溶液B2是否有是否出现浑浊的白色结晶。
若有白色沉淀物，请置于37℃水浴锅中至完全澄清。
4.溶液B2和B3用完之后需及时盖紧瓶盖，室温保存。
5.提取的质粒量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。
质粒抽提常见问题解答实验步骤1.取1-5 ml 过夜培养的菌液，12,000rpm离心1min收集2-4ml菌液于离心管中，尽量吸除上清。
（菌液较多时，可以多次离心收集菌体于一个离心管中。
）2.向留有菌体沉淀的离心管中加入200ul溶液B1，使用移液器或涡旋振荡器彻底悬浮细菌沉淀。
未彻底悬浮的菌块，会影响裂解，导致提取量和纯度偏低。
3.向离心管中加入250ul溶液B2，立即轻柔颠倒Array离心管5～7次，混匀溶液至溶液透明粘稠。
◆动作须温和，不可剧烈，每一管裂解时间不宜超过3min。
4.向离心管中加入350ul溶液B3，立即温和颠倒离心管数次至出现大量白色絮状沉淀后，12,000rpm离心15分钟。
◆B3 加入后应立即混合，避免产生局部沉淀。
上清中有微小白色沉淀，可再次离心后取上清。
5.小心将上清倒入或用移液器转移至吸附柱中（尽量不要吸入沉淀杂质），室温放置1 - 2分钟，10,000rpm离心1min。
promega 小提质粒提取说明书
Wizard○R Purefection Plasmid DNA Purification System protocol所用试剂盒为Promega公司的Wizard○R Purefection Plasmid DNA Purification System，能够去除对细胞有害的细菌内毒素。
具体操作步骤如下：（1）将5ml 培养过夜的阳性菌在室温(24℃)下10000×g离心10 min。
弃上清，将离心管倒置至吸水纸上去除剩余水分。
（2）加入250µl 重悬液，振荡至完全重悬。
（3）加入250µl细胞溶解液，颠倒离心管6～8次，彻底混匀。
室温孵育5min。
（4）加入350µl中和液，立即颠倒离心管6～8次，彻底混匀。
（5）室温下10000×g离心细菌溶解产物20min，上清移至新的1.5 ml 离心管，再次离心20 min，将上清移至新离心管。
（6）彻底摇匀除内毒素树脂，加50µl到离心管中，室温孵育10 min，在孵育过程中每隔3 min剧烈振荡5 sec。
（7）将离心管放置于磁珠分离架使溶液变清，颠倒磁珠分离架和离心管，去除附着在离心管壁和顶盖上的液体。
放置至液体澄清后30 sec，吸取上清至新离心管，弃去沉淀。
（8）加入200 µl GTC（5M/L），与上步分离的上清剧烈振荡混和。
如果GTC产生沉淀，37℃加温10min，冷却到25℃使用。
（9）彻底重悬磁珠，加150 µl至溶液中，剧烈振荡混和，室温孵育2～3 min。
（10）将离心管放置于磁珠分离架使溶液变清，颠倒磁珠分离架和离心管，去除附着在离心管壁和顶盖上的液体。
放置至液体澄清后30 sec，弃上清，离心管继续放置2～3min，去除剩余液体。
（11）将离心管从磁架上取出，加入200 µl 4/40洗脱液。
剧烈振荡15sec 重悬磁珠微粒。
4/40洗脱液可以去除无关蛋白，如核酸酶。
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6、37 ℃ 水 浴 5min, 不 时 振 荡 ，溶 液 又 变 浑 浊 。12000rpm 室 温 离 心 5min ， 溶 液 应 分 为 两 相 ， 上 层 水 相 含 质 粒 DNA， 下 层 油 相 含 内 毒 素 。
无内毒素质粒小量提取试剂盒使用说明 货 号 ： D1140 规 格 ： 50T/100T 保存：常温干燥保存，复检期为一年。 试剂盒内容：
试剂盒组成 RNase A
内毒素清除剂 溶 液 P1 溶 液 P2 溶 液 P3 结合液 漂洗液 洗脱液 吸附柱 收集管 说明书
7、 将 含 质 粒 DNA 的 上 层 水 相 转 移 至 新 管 ， 弃 下 层 油 相 ， 注 意 不 要 吸 入 油 状 相 。 重 复 步 骤 5-7 三 次 。
8、 加 入 600ul 的 结 合 液 ， 分 混 匀 后 加 入 吸 附 柱 中 ， 室 温 放 置 2min， 12000rpm 离 心 1min， 倒 掉 收 集 管 中 的 废 液 ， 将 吸 附 柱 重 新 放 回 收 集 管 中 。 如果溶液量多可分多次加入。
3、向 离 心 管 中 加 入 200ul 溶 液 P2，温 和 地 上 下 翻 转 6-8 次 使 菌 体 充 分 裂 解 。 注 意 ： 混 匀 一 定 要 温 和 ， 以 免 污 染 细 菌 基 因 组 DNA， 此 时 菌 液 应 变 得 清 亮 粘 稠 ， 作 用 时 间 不 要 超 过 5 min， 以 免 质 粒 受 到 破 坏 。
9、 向 吸 附 柱 中 加 入 700ul 漂 洗 液 (使 用 前 请 先 检 查 是 否 已 加 入 无 水 乙 醇 )， 12000rpm 离 心 1min， 弃 废 液 ， 将 吸 附 柱 放 入 收 集 管 中 。
10、 向 吸 附 柱 中 加 入 500ul 漂 洗 液 ， 12000rpm 离 心 1min， 弃 废 液 ， 将吸附柱放入收集管中。
13、 为 了 增 加 质 粒 的 回 收 效 率 ， 可 将 得 到 的 洗 脱 液 重 新 加 入 吸 附 柱 中 ， 室 温 放 置 2min， 12000rpm 离 心 1min。
注意事项:
1. 使 用 前 请 先 检 查 溶 液 P2、 P3 和 结 合 液 是 否 出 现 混 浊 ， 如 有 混 浊 现 象 ， 可 在 37℃ 水 浴 中 加 热 几 分 钟 ， 待 溶 液 恢 复 澄 清 后 再 使 用 。
DNA 产 物 应 保 存 在 -20℃ ， 以 防 DNA 降 解 。
3. 质 粒 DNA 浓 度 ＞ 1mg/ml 时 清 除 内 毒 素 效 率 降 低 。 由 于 质 粒 DNA 本 身 的 性 质 ， 清 除 过 程 可 导 致 部 分 质 粒 DNA 丢 失 ，但 内 毒 素 却 能 得 到 最 大 限 度 清 除。
相关试剂：
M1070 D2000 plus DNA Ladder
D1010 6× DNA Loading Buffer
T1060 50× TAE 缓 冲 液
T1050 5× TBE 缓 冲 液
G8142 GoldView II 型 核 酸 染 色 剂 (5000× )
4、 向 离 心 管 中 加 入 200ul 溶 液 P3， 立 即 温 和 地 上 下 翻 转 6-8 次 ， 充 分 混 匀 ， 此 时 会 出 现 白 色 絮 状 沉 淀 。 12000rpm 离 心 10 min， 用 移 液 器 小心地将上清转移到另一个干净的离心管中，尽量不要吸出沉淀。注意：溶 液 P3 加 入 后 应 立 即 混 合 ， 避 免 产 生 局 部 沉 淀 。 如 果 上 清 中 还 有 微 小 白 色 沉 淀，可再次离心后取上清。
11、 12000rpm 离 心 2min， 将 吸 附 柱 敞 口 置 于 室 温 或 50℃ 温 箱 放 置 数 分钟，目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，否则漂洗液中的乙醇会影响后 续 的 实 验 如 酶 切 、 PCR 等 。
12 、 将 吸 附 柱 放 入 一 个 干 净 的 离 心 管 中 ， 向 吸 附 膜 中 央 悬 空 滴 加 50-200ul 经 65 ℃ 水 浴 预 热 的 洗 脱 液 ，室 温 放 置 2min ，12000 rpm 离 心 1min 。
4. 所 有 溶 液 应 用 无 内 毒 素 的 高 纯 水 配 制 ，所 有 器 械 材 料 均 应 不 含 内 毒 素 ， 玻璃器皿可高温烘烤，非挥发性水溶液可高压处理。
5. DNA 浓 度 及 纯 度 检 测 ： 得 到 的 质 粒 DNA 纯 度 与 样 品 保 存 时 间 、 操 作 过 程 中 的 剪 切 力 等 因 素 有 关 。 得 到 的 DNA 可 用 琼 脂 糖 疑 胶 电 泳 和 紫 外 分 光 光 度 计 检 测 浓 度 与 纯 度 。 DNA 应 在 OD 260 处 有 显 著 吸 收 峰 ，OD 260 值 为 1 相 当 于 大 约 50μ g/ml 双 链 DNA、 40μ g/ml 单 链 DNA。 OD 260 /OD 280 比 值 应 为 1.7-1.9， 如 果 洗 脱 时 不 使 用 洗 脱 缓 冲 液 ， 而 使 用 去 离 子 水 ， 比 值 会 偏 低 ， 因 为 pH 值 和 离 子 存 在 会 影 响 吸 光 值 ， 但 并 不 表 示 纯 度 低 。
2. 洗 脱 缓 冲 液 体 积 不 应 少 于 50ul， 体 积 过 小 影 响 回 收 效 率 ； 洗 脱 液 的
pH 值 对 洗 脱 效 率 也 有 影 晌 ，若 需 要 用 水 做 洗 脱 液 应 保 证 其 pH 值 在 8.0 左 右 (可 用 NaOH 将 水 的 pH 值 调 至 此 范 围 )， pH 值 低 于 7. 0 会 降 低 洗 脱 效 率。
有 机 化 合 物 。 内 毒 素 清 除 剂 可 最 大 限 度 地 除 去 内 毒 素。 从 1-5ml 大 肠 杆 菌 LB 培 养 液 中 ，可 快 速 提 取 5-15μ g 高 纯 度 质 粒 DNA，提 取 率 达 85-90%。使 用 本 试 剂 盒 提 取 的 质 粒 DNA 纯 度 高 ，可 直 接 用 于 细 胞 转 染 等 要 求 较 高 的 实 验 ， 以 及 其 他 各 种 常 规 操 作 ， 包 括 酶 切 、 PCR、 测 序 、 连 接 和 转 化 等 试 验 。
D1140-50T 300ul 20ml 10ml 10ml 10ml 30ml 15ml 10ml 50 个 50 个 1份
D1140-100T 500ul 40ml 20ml 20ml 20ml 60ml
15ml× 2 20ml
100 个 100 个
1份
产品说明：
本试剂盒采用碱裂解法裂解细胞，根据离心吸附柱在高盐状态下特异性 地 结 合 溶 液 中 的 DNA 的 原 理 特 异 性 提 取 质 粒 DNA。 离 心 吸 附 柱 中 采 用 的 硅 基 质 材 料 能 高 效 、 专 一 地 吸 附 DNA， 可 最 大 限 度 去 除 杂 质 蛋 白 及 细 胞 中 其 他
使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇， 加入体积请参照瓶体上的标签。 溶 液 P1 在 使 用 前 先 将 试 剂 盒 中 提 供 的 RNaseA 全 部 加 入 ， 混 匀 ， 置 于 2-8℃ 保 存 。 如 非 指 明 ， 所 有 离 心 步 骤 均 为 使 用 台 式 离 心 机 在 室 温 下 离 心 。
操作步骤:
1、取 1-5ml 细 菌 培 养 物 ，12000rpm 离 心 1min，吸 除 上 清（ 菌 液 浓 度 较 低 时 可 多 次 离 心 收 集 到 一 个 离 心 管 中 ）。
2、 向 留 有 菌 体 沉 淀 的 离 心 管 中 加 入 200μ l 溶 液 P1(请 先 检 查 是 否 已 加 入 RNaseA） ， 使 用 移 液 器 或 旋 涡 振 荡 器 彻 底 悬 浮 细 菌 细 胞 沉 淀 。 注 意 ： 如果菌块未彻底混匀，会影响裂解导致质粒提取量和纯度偏低。