针对中药川乌的多成分同时检测并评价其药动学的分析进展
针对中药川乌的多成分同时检测并评价其药动学的分析进展
针对中药川乌的多成分同时检测并评价其药动学的分析进展摘要：中药川乌属于一种常见药物，其主要成分即为二萜生物碱。
文章主要从相关学者的研究报道中总结了中药川乌含量检测与药动学情况，现作以下的综述。
关键词：中药川乌；成分检测；药动学；进展1.前言川乌属于毛茛科植物乌头（AconitumcarmichaeliiDebx.）干燥的母根，大毒，主要功效是温经止痛与祛风除湿，在心腹冷痛、风寒湿痹与关节疼痛等病症中比较常用。
川乌的化学成分比较复杂，包含生物碱类的成分，而有效的成分为二萜生物碱，在中枢神经、抗炎、心血管、镇痛以及镇静方面有较好的作用。
近几年，越来越多学者开始研究二萜生物碱，并且发表了不少报道，为川乌的医学应用提供了参考。
2.川乌含量的测定液相色谱-质谱联用法（LC-MS）与高效液相色谱法（HPLC）在中药的质量控制之中应用越发广泛，而中药饮片与复方制剂之中的化学成分使得人们开始重视多指标与多成分的检测。
相关研究[1]中采取HPLC方法，经对新乌头碱、双酯型生物碱乌头碱以及次乌头碱总量限度进行控制，确保川乌药材质量，川乌制药主要经对苯甲酰次乌头原碱以及双酯型生物碱乌头碱等进行控制，确保川乌有效性以及安全性。
有学者[2]经HPLC方法构建乌头汤、川乌与制川乌三类双酯型新乌头碱、生物碱的乌头碱以及次乌头碱定量分析的方法，然而，使用容易损毁色谱柱固定相强碱性流动相的三乙胺与二乙胺，并且只可以定量分析双酯型的生物碱。
有学者[3]把A相[乙腈-四氢呋喃（25∶15）]-B相[0.1mol/L醋酸铵]当作流动相，实施梯度的洗脱，构建新乌头碱、乌头碱以及次乌头碱等定量分析的方法，这种方法可以防止三乙胺与二乙胺等强碱性的流动相损坏了流动相对色谱柱，同时可以同时测定单酯型与双酯型的生物碱。
3.评估二萜生物碱的药动学3.1生物样品前处理3.1.1液液的萃取方法乌头二萜生物碱属于脂溶性的生物碱，置于合适溶剂之中，其溶解度比水相之中溶解度要大，在尿样与血样等生物的样品之中，含有诸多内源性的杂质，并且是强极性水溶性的杂质，而采取适当有机溶剂能够将大部分的杂质去除。
川乌解毒
川乌解毒的研究进展摘要：川乌的化学成分中含有双酯型二萜类生物碱、单酯型二萜类生物碱和其他生物碱，其中双酯型二萜类生物碱是川乌中的主要毒性成分。
对川乌进行炮制，可以降低其毒性，保证其能充分发挥良好的镇痛、抗炎和免疫抑制作用。
关键词：川乌解毒研究进展川乌为毛茛科植物乌头(Aconitum carmichaeli Debx.)的干燥母根。
始载于《神农本草经》，列为下品。
其味苦、辛，大热，有大毒，功能祛风除湿、温经散寒、行淤止痛[1]。
研究表明川乌具有良好的镇痛、抗炎和免疫抑制作用，但因其毒性大，临床上常因用药不当而造成中毒甚至死亡。
现代对川乌的毒性和解毒方面做了广泛的研究，本文主要综述了近十年川乌解毒方面的实验研究进展和动态，旨为川乌今后更深入的研究以及更安全有效应用于临床提供一定的理论参考。
1、川乌的毒性研究川乌对健康动物毒性研究相对较多，而川乌对病证动物模型的毒性研究较少。
由于乌头类有毒中药的安全性研究中大量实验已证明，乌头类中药水煎液对疾病模型动物产生的毒性效应与健康动物有差异[2]。
有实验通过设定7个煎煮时间点和给药剂量，引入均匀设计法，研究川乌水煎液对痹证动物模型的长期毒性的影响。
模型对照组和各给药组于复制痹证动物模型后，按组给药30 d。
观测动物生长发育、血液学、血液生化学、脏器系数、病理组织学变化及停药15d后上述指标的变化。
将结果进行多元回归分析，结果表明，煎煮30min，给药剂量为临床用量120倍时，川乌水煎液对痹证动物产生的毒性最大，但同时药效最佳[3]。
张少华等[4]采用急性毒性实验方法，以川乌与防己配伍前后的水煎液分别给小鼠灌胃，观察防己对川乌急性毒性实验的影响。
结果说明，防己与川乌配伍能降低川乌的毒性；但是腹腔注射未出现上述结果。
2.川乌的解毒研究川乌主要含有乌头碱、中乌头碱、次乌头碱、川乌碱甲乙，塔拉第胺，杰斯乌头碱，异翠雀花碱、脂乌头碱、脂次乌头碱、脂中乌头碱等。
历代本草均标明其有剧毒。
川乌的研究进展探讨
川乌是 毛莨科植 物乌头 的干燥母 根 ． 性辛 温味 苦 ． 归 心肝脾 经 ， 主要产在 四川等地 。 生川 乌毒 性很大 ， 一般 需要炮制后 入药 。 川乌功 效 有祛风 湿 ， 散寒止痛 ． 所以在 临床 上也使用很广 泛。川 乌在 早些时 候 被 称为 “ 乌头 ” ． 据记 载 ． 是 因为 它 的形 状 像乌 鸦 的头部 ． 故 而得 名， 后来 ， 又 因为地理上 栽培种植 ， 才得 名“ 川 乌” 。本 文主要论 述Ｊ Ｉ Ｉ 乌 的化学 、 药理及 炮制 方 法各方 面 的研究 进展 ． 为 临床上 更好 地利 用提供理论 基础
科技论坛科技圈向导2014年09期川乌的研究进展探讨姜海黑龙江张颖哈尔滨黑龙江中医药大学150040摘要j1l乌是一种历史悠久的常用中药通过对其化学成分药理作用炮制沿革各方面的论述寻求最佳的炮常工艺也对川乌今后的开发利用有着极其重要的意义
◇ 科技论坛◇
科技 圈向导
２ ０ １ ４ 年０ ９ 期
２ ． 川乌药理学作用
川乌中的乌头碱型生物碱 和东莨菪碱成分具有镇 痛作 用 ． 能使醋 酸小鼠扭 体实验 的扭体 次数明显 减少 ：小 鼠扭体潜伏期延长， 小 鼠热 板 痛阈值 显著提高。通过 对大鼠足肿胀小 鼠耳 肿胀 的模 型给药 ， 表 明 Ｊ Ｉ Ｉ 乌具有明显的抗炎作用。 同时 ， 川乌对 心脏有影 响作用 ． 不 同剂量下 趋势也不同。此外 ， 川乌还有降血糖 、 抗 肿瘤 等作用 。
发现 ， 川 Ｉ 乌 中的有 效成分 就是生 物碱 ， 但 它也是有 毒成分 ， 其 中毒性 最 强 的成 分就是 二萜双 酯型生物碱 ．口服微 量 即可 中毒甚 至死 亡 ： 若 肌 肉注射 不足 口服十分 之一 的量便 可致死 。 ＿ 引 所以 ． 传统上 在使用 川 Ｉ 乌 时需 要炮制 。 如蜜煎 、 醋煮等多种方 法。 因为经过炮 制后其 中的 有毒成 分二萜 双酯型生 物碱成分 可 以发 生改变 ． 转变 为毒性较 低 的 乌头 次碱和乌 头原碱 但是 由于多方面 的原 因 ． 如药材 的产地 不 同 或炮 制过程 中火候 手法 的不 同 ． 都会 造成 药效 的差异 ． 毒 性减 弱 的 程度也会 不一样 。
中药川乌与草乌的鉴别比较及药理活性分析
中药川乌与草乌的鉴别比较及药理活性分析黄为飞(福建福州连江县医院药剂科,福建福州350500)摘要目的:分析中药川乌与草乌的鉴别比较及药理活性㊂方法:选择国内不同市售中药川乌与草乌,采用回顾式分析方法,按照检测方式不同,将其分为观察组与对照组,分析其药理活性㊂对照组采用U V进行测定,对照组采用T L C进行鉴定,将鉴定结果与药典结果进行比对,分析两组检测准确率㊂结果:中药川乌与草乌生物碱含量具有显著差异,在植物特征㊁性状特点㊁化学成分㊁毒性作用方面具有区别㊂观察组中药川乌与草乌检测准确率显著高于对照组,两组之间具有显著差异(P< 0.05)㊂结论:中药川乌与草乌均具有活血化瘀㊁祛风除湿的作用,但两者在药理活性上尤其是毒性上有比较大的差别,通过T L C可以有效鉴别两种中药的差别,提升用药的针对性与准确性㊂关键词薄层色谱检验法;川乌;草乌;生物碱中图分类号:R285文献标识码:B文章编号:1672-8351(2020)12-0010-02中药川乌为毛莨科植物乌头的干燥母根,草乌为毛莨科植物北乌头的干燥块根,在药理作用上均具有祛风除湿㊁温经止痛的效果,但是川乌㊁草乌制品具有大量的生物碱,因而具有明显的毒性,只有经过相应的系统加工,将乌头碱经水解之后,才能够减轻其毒性,应用在中成药的制作中㊂但是,临床中由于药品来源不一,制作周期较长,具有较高的经济价值,因而市场中常有假冒伪劣加工商,对材料进行伪装制作,甚至还有一些不良商家会采用红薯片等完全不具有相同药效的产品,对药物进行完全伪造㊂通过有效鉴定方式对药品的生物碱含量进行鉴别,可以显著提高制药的精准程度,现报道如下㊂1资料与方法1.1一般资料选择国内不同市售中药川乌与草乌,采用回顾式分析方法,按照检测方式不同,将其分为观察组与对照组,分析其药理活性㊂药品产地主要有北京㊁陕西西安㊁广西桂林㊁广西玉林㊁广西岑溪㊁广西梧州㊁广东湛江㊂按照产地与厂家分别标记为北京1号㊁西安1号㊁广西1号㊁广西2号㊁广西3号㊁广西4号㊁广东1号㊂可见分光光度法(U V)鉴定仪器采用岛津U V-2450可见分光光度计,薄层色谱检验法(T L C)采用天津斯利达生物鉴定仪器公司生产的G F254硅胶药品薄层色谱鉴定专用薄层板,对照品采用中国药品生物药品制品鉴定所12121111-2000324号脱水穿心莲内脂㊂1.2方法两组实验用品经采用生物碱游离方式对有机溶液进行制取㊂观察组所有采用试剂均为分析纯,通过乙醇㊁无水乙醇㊁丙酮㊁乙醚㊁环乙烷等,作为相关的提取溶液,对被检测的川乌㊁草乌进行超声提取和振荡提取,应用薄层板,对提取出的提纯剂进行相应的储存㊂并应用在后期的试品溶液制备过程中,比较获取样本的环乙烷成分㊁酚乙酸乙酯成分㊁二乙胺成分㊁石油醚成分㊁无水乙醇成分等,通过系统展开获得相应数值,观察主斑点清晰程度㊂并在薄层检测一下,通过紫外灯进行观察,样本观察距离调制在364n m,通过碘蒸气熏观察方式,进行相应的展开观察,进行喷乙烯碘稀释液之后再进行二次观察,对于记录到的主斑点清晰程度进行相应观测㊂对照组采用U V观测方式,对于所制备的一些后浦粉㊁盐酸小檗碱,与脱水穿心莲内脂等进行对照检验,利用红色斑点和样品含量进行相应分析㊂取川乌㊁草乌粉磨2g,放置在10m L含量的试液中进行摇匀静置,通过加入环己烷3m L进行摇匀,静置对比,另取脱水穿心莲内脂进行相应比对㊂按照U V检测方式对于川乌㊁草乌中的相应生物碱含量进行分析,测得对应斑点㊂1.3观察指标观察川乌㊁草乌经两种检测方法测得的斑点情况,以及生物碱的相关含量㊂正品斑点明显拥有红色明显斑块,非正品则无对应斑点㊂1.4统计学方法统计学软件为S P S S21.0㊂计量资料采用t检验,以( xʃs)表示;计数资料以χ2检验,以百分比(%)表示㊂P<0.05表示差异有统计学意义㊂2结果观察组检测准确率显著高于对照组,两组之间具有显著差异(P<0.05),如表1所示㊂表1 两组检测准确率对比组别例数(例)劣质品(例)伪品(例)红薯片(例)准确率(%)观察组6026197.12对照组6014180.00χ2-13.121P-<0.05 观察组整体检测斑块与生物碱含量情况显著好于对照组,两组之间具有显著差异(P <0.05)㊂表2 两组检测情况对比组别川乌草乌斑块数量(块)生物碱含量(%)斑块数量(块)生物碱含量(%)观察组22313230对照组32282221t 2.21114.65612.65614.341P>0.05<0.05>0.05<0.053 讨论中药材川乌和草乌,在中药配伍中,常将两种药材进行配伍治疗,用在各种麻痹症状的改善中,临床效果显著,对于风湿患者的综合治疗效果可超过40%㊂但由于二者的药理特征以及名字㊁药方存在的区别非常小,在临床中可能会出现配伍错误的风险㊂对二者进行有效的科学鉴定,可以显著提高川乌与草乌的分析精准程度,为后期制药提供数据参考[1]㊂在原植物特征的区别上,川乌属于毛莨科植物乌头干燥母根,草乌属于毛莨科植物的干燥块根,二者在高度上具有显著差别,川乌高度约为1.0~1.2m ,块茎个数通常为2个,而草乌高度达到1.4~1.5m ,块茎个数往往超过2个,甚至可以达到5个,在数量上可对二者进行区分,但是由于中成药材已经脱离了原生植物判断的范围,因而还需要对二者的外观进行后续的研究㊂川乌的外皮整个呈黑色,而草乌的外皮呈现出具有哑光性质的黑褐色,二者整体形状上都呈现纺锤形,川乌具有更加明显的圆锥形㊂在植物叶片上,川乌的植物叶片要明显长于草乌,约有15c m ,宽度最宽处约为4c m ,而草乌宽度最宽处可以达到9c m ,叶状稍短呈现卵圆形[2]㊂二者在性状上也有区别,川乌呈现不规则的圆锥形状,中间呈现比较明显的弯曲状态,长度约在4~7.5c m ,外皮呈现哑光灰褐色,相比之下,草乌的不规则情况更加明显,通常弯曲处在下端且非常弯曲尖锐,顶部和根部也存在不同程度的弯曲症状,大小约为1.8~5c m ,外皮呈现更加明显的灰色㊂在味觉上,川乌与草乌并没有明显的区别,横切面均表现为粉白和浅灰色,如浅尝可感到舌头发麻,这种生物性状上的一致也加大了草乌和川乌的鉴定难度㊂二者在化学成分上具有相似性,但在生物碱含量上,也有一定的区别,川乌的生物碱含量约为0.559%,显著高于草乌(0.42%)㊂此外,川乌中还具有草乌不具有的塔拉胺㊁新乌宁碱㊁异飞燕草碱等多种成分,而草乌中以3-去氧乌头碱㊁异乌头碱㊁北草乌碱以及毛翠雀亭这几种化学成分为主㊂在毒性上,二者由于生物碱含量均较高,因而中毒之后可伴随着不同程度的恶心㊁呕吐㊁肠胃不适㊁神经麻痹㊁神志不清㊁面色苍白㊁肢体温度下降㊁心率过慢或过快㊁瞳孔增大等现象㊂但是,也由于生物碱含量成分的不同,川乌的毒性远大于草乌,食用之后毒性更强㊂从药理活性来看,二者成分比较相似,都具有改善血液微循环的作用,应用在心血管疾病患者的治疗过程中,可增强左心室射血能力,达到强心作用,同时由于二者的塔拉胺㊁异塔拉定含量较高,草乌中还有北草乌碱等相关成分,可促进患者抗炎止痛㊁抵抗寒冷,对于心肌细胞也具有一定的保护作用㊂尤其是川乌中含有的新乌宁碱与草乌中含有的异乌头碱,具有一定的抗肿瘤效果㊂这两种药物配伍在一起,对于风湿患者的湿气之必效用具有良好的作用,尤其是相对于川乌来说,草乌中含有的北草乌碱和毛翠雀亭这两种化学成分,更具有止痹作用㊂在临床中属于一线麻醉药物,但是川乌相对于草乌性情更加温和,具有散寒止痛㊁治疗风湿麻痹的药理[3]㊂本文采用的T L C 以及U V ,可以对川乌与草乌中的生物碱含量进行有效的分析,T L C 对于生物碱的敏感性更高,可以对川乌与草乌中含有的去氧乌头碱㊁尿嘧啶㊁川乌碱等相关的化学物质进行更加有效的检测㊂并且利用T L C 操作比较简单,准确率更高,具有良好的重现性,因而对于一些川乌㊁草乌药品进行现场检定鉴定,可以具有良好效果,避免假冒伪劣产品冒充川乌㊁草乌,导致生物碱等有效成分严重流失,确保制药安全㊂有研究指出,通过T L C,对川乌㊁草乌制品检测有效率可达到95%~97%,这与本研究成果基本一致[4]㊂综上所述,川乌与草乌在药理方面活性相似,可活血化瘀㊁祛风止痛,具有显著的抗麻痹作用,临床中通过T L C ,可以显著提高检测准确率,提高用药的安全性,确保人民用药安全,值得借鉴与推广㊂参考文献[1]王丹.基于文献研究的中药草乌安全性综合评价[D ].北京:北京中医药大学,2019.[2]刘陆,安玉芳.中药川乌与草乌的研究进展[J ].黑龙江中医药,2019,48(2):175-177.[3]袁晓航.中药川乌与草乌的鉴别比较及药理活性探究[J ].内蒙古中医药,2017,36(18):137-138.[4]倪洁.H P L C 法测定中药饮片制川乌㊁制草乌中乌头碱㊁次乌头碱的含量[J ].亚太传统医药,2013,9(8):29-30.作者简介:黄为飞(1973-),男,汉,福建连江人,本科,副主任中药师,研究方向:中药学㊂。
中药川乌多成分同时检测及药动学评价研究进展
中药川乌多成分同时检测及药动学评价研究进展
程丽丽;许妍妍;张艳军
【期刊名称】《天津中医药大学学报》
【年(卷),期】2014(33)1
【摘要】川乌为毛莨科植物乌头（Aconitum carmichaelii Debx．）的干燥母根，有大毒，具有祛风除湿、温经止痛之功效，常用于风寒湿痹、关节疼痛、心腹冷痛等疾病的治疗[1]。
川乌化学成分复杂，主要含有生物碱类成分，其中，二萜生物
碱是川乌的特征有效成分，具有抗炎、镇痛、镇静、心血管及中枢神经等方面的作用[2-7]。
近年来，对二萜生物碱的国内外研究报道较多，现主要从多种二萜生物
碱成分的同时检测、药动学研究进展等方面对其作一综述。
【总页数】5页(P56-60)
【关键词】川乌;多成分;质量控制;药动学
【作者】程丽丽;许妍妍;张艳军
【作者单位】天津中医药大学
【正文语种】中文
【中图分类】R284
【相关文献】
1.多成分环境对中药口服吸收影响的评价方法研究 [J], 朱佳军
2.基于药动学研究中药多成分相互作用概述 [J], 李庆;戴岳
3.多成分环境对中药口服吸收影响的评价方法 [J], 蒲显强
4.中药复方多成分多靶点协同增效药理药效评价体系 [J], 王勇;李春;仇琪;郭淑贞;韩静;吴晏;柴欣楼;赵慧辉;陈建新;王伟;
5.多成分环境对中药口服吸收影响的评价方法研究 [J], 朱佳军;
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
川乌煎煮时间和给药剂量与毒性的相关性研究
目录（一）川乌的概述1.川乌的化学成分及药理作用2.川乌的毒理作用（二）川乌煎煮时间、给药剂量的影响1.川乌煎煮时间、给药剂量与药效的相关性2.川乌煎煮时间、给药剂量与毒性的相关性（三）问题与展望（四）结束语摘要通过探讨川乌的煎煮时间和药效与毒性的关联，而归纳出此药的最佳煎煮时间，怎样发挥药效而把毒性降为最低。
归分析和验证试验表明,川乌抗炎镇痛功效与煎煮时间、给药剂量具有显著的相关性,发挥抗炎功效的最佳煎煮时间为6小时,最佳给药剂量为2.4g/kg;镇痛功效的最佳煎煮时间为6小时,最佳给药剂量为2.4g/kg。
关键词川乌，毒性，煎煮时间，药效（一）川乌的概述川乌，别名：鹅儿花、铁花、五毒；被子植物门，毛茛科，乌头属。
英文名Aconite Root，生于山地草坡或灌丛中。
栽培于平地肥沃的砂质土壤，主要栽培于四川。
分布于长江中下游，北至秦岭和山东东部，南至广西北部。
为毛茛科植物卡氏乌头AconitumcarmichaeliDebx.的母根。
6月下旬至8月上旬采挖，除去子根、须根及泥沙，晒干。
一般于栽培第二年6月中旬采挖，除去地上茎叶，吸取泥沙，将母根与子根分开，母根晒干后称为“川乌”。
性状特征：根呈不规则圆锥形，稍弯曲，顶端常有残茎，中部多向一侧膨大，长2～7.5cm，直径1.2～2.5cm。
表面棕褐色或灰棕色，有小瘤状侧根及子根脱离后的痕迹。
质坚实，断面类白色或浅灰黄色，形成层环纹呈多角形。
气微，味辛、麻舌1.川乌的化学成分及药理作用【化学成分】总生物碱含量 2.3%，酯 1.0%，乌头碱0.3%。
主要含乌头碱（aconitine）、中乌头碱（mesaconitine）、塔技乌头胺（talatisamine）、杰斯乌头胺（jasaconitine）、苯甲酰乌头胺（benzoylaconine）、苯甲酰中乌头胺（benzoylmesaconine）和苯甲酰下乌头胺（benzoylhypaconine）等。
中药川乌的药理作用与主要成分
中药川乌的药理作用与主要成分1．化学成分。
含乌头碱、次乌头碱、中乌头碱、塔拉胺、消旋去甲基衡州乌药碱、并塔拉定、新乌宁碱、去甲猪毛菜碱、川乌碱甲、川乌碱乙等多种生物碱。
另含尿嘧啶，乌头多糖A、B、C、D等。
2．药理作用。
川乌头有抗炎、镇痛、镇静、局部麻醉等作用。
川乌头生品及炮制品水煎剂对离体蛙心有强心作用，但剂量加大则引起心律失常，终致心脏抑制。
煎剂可引起麻醉犬血压呈迅速而短暂下降，但心脏无明显变化，降压作用可被阿托品或苯海拉明所拮抗。
乌头多糖A有降血糖作用，其降糖机制不是通过对胰岛素水平的影响，而在于增强了机体对葡萄糖的利用。
有抗癌作用，乌头注射液于200mg/ml 浓度对胃癌细胞有抑制作用，并随生长增加而增强。
对小鼠肝癌实体瘤的抑制率为47.8%-57.4%，对小鼠抑制率为26%-46%。
六大新技术实现高效提取中草药有效成分
六大新技术实现高效提取中草药有效成分中草药所含成分十分复杂，既有有效成分，又有无效成分和有毒成分。
为了提高中草药的治疗效果，就要尽最大限度提取有效成分，去除无效成分及有毒成分。
因此，中草药提取对于提高中药制剂的内在质量和临床疗效最为重要。
但常用的提取方法（如煎煮法、回流法、浸渍法、渗漉法等）在保留有效成分，去除无效成分方面，存在着有效成分损失大、周期长、工序多。
提取率不高等缺点。
近10年来，在中药提取方面出现了许多新技术、新方法，些新技术和方法的应用，使得中草药提取既符合传统的中医理论，又能达到提高有效成分的收率和纯度的目的。
本文就这方面作一综述。
1.超临界流体萃取技术超临界流体萃取（简称SCFEFE）是以超临界流体（简称SCF）代替常规有机溶剂对中草药有效成分进行革取和分离的新型技术，其原理是利用流体（溶剂）在临界点附近某区域（超临界区）内与待分离混合物中的溶质具有异常相平衡行为和传递性能，且对溶质的溶解能力随压力和温度的改变而在相当宽的范围内变动，利用这种SCF作溶剂，可以从多种液态或固态混合物中萃取出待分离组分。
常用的SCF为CO。
，因为CO。
无毒，不易燃易爆，价廉，有较低的临界压力和温度，易于安全地从混合物中分离出来。
超临界CO。
萃取法与传统提取方法相比，最大的优点是可以在近常温的条件下提取分离，几乎保留产品中全部有效成分，无有机溶剂残留，产品纯度高，操作简单，节能。
廖周坤等用不同浓度的乙醇作夹带剂，对藏药雪灵芝进行了总皂苷粗品及多糖的苹取试验，与传统溶剂萃取工艺相比较，收率分别提高至旧1．9倍和1．62倍。
何春茂、梁忠云利用超临界CO。
卒取技术从黄花蒿中革取所得的萃取物中杂质（蜡状物）含量低，青蒿素提纯精制简单，收率高产品质量好。
雷正杰等利用超临界CO。
流体萃取技术，对厚朴的有效成分进行萃取和分离，革取物为淡黄色膏状物，经分析该萃取物由厚朴酚等11化学成分组成，其中厚朴酚和厚朴酚的相对含量高达46．81％和45．00％。
川乌毒理作用研究进展
川乌毒理作用研究进展标签：川乌；毒理作用；综述川乌是毛茛科植物乌头的干燥母根，气微，味辛、麻舌[1]，主要化学成分是双酯型二萜类生物碱，包括乌头碱、次乌头碱、杰斯乌头碱、异翠雀碱等[2]。
研究表明，川乌有抗炎、麻醉镇痛、扩血管降压、强心、降血糖、抑制肿瘤细胞生长等药理作用[3]，其功效是由乌头生物碱类物质决定，但其毒副作用亦是乌头生物碱类物质造成。
由于川乌的药用剂量与中毒剂量很接近，因此，用药必须谨慎，以避免发生不良反应。
笔者现通过总结川乌毒理学作用及影响毒理学作用因素的研究动态，为深入研究川乌提供参考并对川乌的临床应用提供理论支持。
1 毒理作用1.1 心脏毒性心脏毒性一直被认为是川乌的主要毒性。
李氏等[4]对1997-2006年10年间乌头类中药中毒临床文献进行了统计分析，在收集的355篇临床文献中有139篇是关于川乌中毒。
乌头类中毒的大部分患者出现心律失常，其中室性早搏者占心律失常的比例高达60%，约10%的患者出现心脏骤停或阿-斯综合征，另外也有血压下降、心悸、中毒性心肌炎等情况发生。
有文献报道，乌头碱类中药致心律失常的特点是多样易变，以频发室性早搏最常见[5]。
川乌的主要成分乌头碱导致心律失常的心电图异常率可达80.1%～88.0%，呈多形性改变，称紊乱性心律失常，其中以室性心律失常最常见，表现为房性、交界性和室性期前收缩、心动过速、心房颤动，严重的患者可能出现室性心动过速和心室颤动。
缓慢型心律失常也比较容易发生，如窦性心动过缓、房室传导阻滞等，还可在心电图上表现为ST段变化和QT间期延长等。
乌头碱急性中毒致严重室性心律失常通常表现为频发多源性室性早搏，其中以伴发多形性、单形性室性心动过速或尖端扭转型室性心动过速多见[6]。
川乌导致心脏毒性的机理研究大多集中在乌头碱，其作用和机制有以下几方面。
1.1.1 影响Na+通道与细胞膜电压门控型Na+通道结合，抑制其关闭失活，导致Na+持续内流，影响细胞膜电位的正常，导致细胞膜持续去极化，从而引发严重的心律失常[7]。
川乌生物碱类成分及药理作用研究进展
川乌生物碱类成分及药理作用研究进展摘要目的：分析了川乌生物碱药物的化学成分与药理作用。
方法：经过文献研究法总结相应的文献资料，检索川乌生物碱类成分及药理作用相关的文献资料，总结归纳资料的观点与结论。
结果：近几年，越来越多学者开始研究二萜生物碱，并且发表了不少报道，为川乌的医学应用提供了参考。
川乌两类药品具备去寒、止疼、去风、清湿等功用，其还是临床中普遍运用的药材。
结论：研究得出川乌生物碱药理作用主要包含抗抑郁作用、抗肿瘤作用、镇痛作用、抗炎作用等，为了提高川乌生物碱应用效果，需要针对药物药理作用用药。
关键词：川乌；生物碱类；成分；药理作用1 绪论1.1选题意义/背景及目的川乌是一种毛茛科植物，是乌头（AconitumcarmichaeliiDebx.）干燥的母根，是多年生的草本植物。
川乌的外形较高，高度为60～120厘米之间，宽度在5～12cm。
川乌的形态明显，块根通常是2个连生，叶互生，茎比较直，具柄，叶片呈现卵圆形，掌状3深裂，两侧裂片再2裂，边缘具粗齿或缺刻。
其外在颜色各有分层，颜色不同。
其花序长度在不同的植物表皮长度不同，且呈现出来的颜色也不相同，具有不同的外形特征。
川乌的花期一般在6～7月，果期在7～8月。
川乌这种药物有大毒，主要功效是温经止痛与祛风除湿，可以有效的治疗风湿疾病和关节疼痛等。
川乌中含有许多有效的化合物，其中的活性成分主要是各种碱类，具有良好的药理作用，可以有效的抗抑郁、抗肿瘤、镇痛、抗炎等。
川乌主要生长在四川地区[1]，因此也被称之为乌头，不同地区的人有不同的叫法，它还有众多别名。
川乌是种带毒的草药，中毒以后，会出现发热、头昏、恶心等症状，它会使中毒者身体虚弱无力，呼吸不畅，心律失常等，中了川乌毒以后，其身体内在和外在的表现都比较明显。
但是，川乌不仅是一种毒草，如果加以利用，发掘它的其他药理药效价值，它还可以被应用于临床医学的治疗当中。
古代关于川乌的记载有很多，《普济本事方》中有关川乌的记载写到，生川乌可用于治风寒湿痹，麻木不仁[2]。
川乌的临床应用进展
【 关键词 】 川乌 ；临床应用 ；进展 【 中图分类号】Ｒ ２ ８ ５ ． ６ 【 文献标识码】Ａ 【 文章编号 】１ ０ ０ ７ — ８ ５ １ ７（ ２ ０ １ ３ ）１ １ — ０ １ ３ ６— ０ ２
川乌 为草 本 植物 乌 头 的干燥 母 根 。主产 四川 ，陕西 、
中 国 民 族 民 间 医 药
・
经 验 交 流
Ｅｘ ｐ ｅ ｒ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ Ｃｏ ｍｍｕ ｎ ｉ ｃ ａ ｔ ｅ
１ ３ ６・
Ｃ ｈ ｉ ｎ ｅ ｓ ｅ ｊ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ ｌ ｏ ｆ ｅ ｔ ｈ ｎ ｏ ｍ ｅ ｄ ｉ ｃ ｉ ｎ ｅ ａ ｎ ｄ ｅ ｔ ｈ ｎ ｏ ｐ ｈ ａ ｒ ｍ ａ ｃ ｙ
运用 中医药治疗类 风关 节炎 １ ３ ０例 ，方 法 根 据 中医辨证施
治原则 ，将类风 湿关 节炎分 成湿 毒型 、寒 湿型 和 阳虚痰凝 型 ，运用祛湿 散寒 、温 阳益 气药 物为基 本 方 （ 北 细辛 、防
１ ． １ 内用法
唐小儒 运用加减乌头汤治疗 腰椎 问盘突 出
风 、羌 活 、川 芎 、黄芪 、防 己 、淫羊 霍 、制 川 乌等 组成 ） ，
１ ８ 例 ，总有效率 ８ ６ ％。朱宏燕 运用 中医 中药 治疗类风湿
性关 节炎 ３ ０例 ，治 疗 方 法 ：重 用 川 乌 、草 乌 ，再 随证 加
碱等 ，均是双脂 类 ，易被 水 解 。本 品有 明 显 的抗 炎 作 用 ，
能显著抑制角又菜胶 、蛋清 、组胺 和 ５一 Ｔ Ｈ所致大 鼠跖足 肿胀 ，还能显著抑制 角又 菜胶 所致 大 鼠胸 腔渗 液及 白细 胞 向炎症病 灶 内的 聚集 ，明显 减少 渗 出液 中的 白细 胞 总数 。 对于大 鼠佐剂性 关节 炎也有 一定 的抑 制作 用。川乌 总碱 能
川乌的中药药理学研究
川乌的中药药理学研究摘要：川乌为临床常用中药,具有祛风除湿、温经止痛之功效,用于风寒湿痹、关节疼痛、心腹冷痛、寒疝作痛、麻醉止痛,药用历史悠久,药用价值高。
现代药理学研究表明,川乌对类风湿性关节炎、神经性疼痛、高血压等疾病具有良好的治疗作用。
川乌作为一味著名有毒中药,其主要药效和毒性成分皆为生物碱类成分,在发挥抗炎、镇痛、抗肿瘤等药效同时,也可导致神经毒性和心脏毒性,因此,临床使用时常通过炮制降低其毒性,或与白芍、防己等药味配伍达到减毒增效的目的。
关键词：川乌; 化学成分; 药理作用; 毒理; 配伍;Abstract: Chuanwu is a commonly used traditional Chinese medicine in clinic. It has the effects of dispelling wind and dehumidification, warming meridians and relieving pain. It is used for wind cold and dampness arthralgia, joint pain, cold abdominal pain, cold hernia pain, anesthesia and analgesia. It has a long medicinal history and high medicinal value. Modern pharmacological research shows that Chuanwu has a good therapeutic effect on rheumatoid arthritis, neuropathic pain, hypertension and other diseases. As a famous toxic traditional Chinese medicine, the main efficacy and toxic components of Chuanwu are alkaloids, which can not only exert the effects of anti-inflammatory, analgesic and anti-tumor, but also lead to neurotoxicity and cardiotoxicity. Therefore, in clinical use, its toxicity is often reduced by processing, or combined with the flavors of white peony, Fangji and other drugs to achieve the purpose of reducing toxicity and increasing efficiency.Key words:Radix Aconiti; Chemical composition; Pharmacological action; Toxicology; Compatibility;川乌是毛茛科植物乌头Aconitum carmichaelii Debx的干燥母根，分布于四川、陕西、云南、湖北、湖南、河南等地，但从古至今一直以四川江油产者最优[1],其味辛、苦，性热，略有麻舌感，主归心、肝、肾、脾经，具有祛风除湿，温经止痛的功效，常用于治疗风寒湿痹、关节疼痛、寒疝作痛等[2]。
乌头类中药化学成分及其生物碱含量测定方法的研究概况
ｌ 乌 头类中药化学成分 的研 究概 况 附 子 来 源 于 毛 莨 科 乌 头 属 植 物 乌 头 Ａ ｏｒ ｍ ｃｎｔ ｕ ｃ ｒ ｉ ａ ｌ ｅ ｘ的侧 生子根及加工 ， ａｍ ｃ ｅ ｉ ｂ ． ｈ ｉＤ 是众 多乌头类 中药中最 常用 的一类 ；川乌 为毛茛科植物乌头 Ａ ｏ ｒ ｍ ｃｎｔ ｕ ｃ ｒ ｉ ａｌ ｅｘ的干燥 母根 ；草乌 为毛茛科植物北乌 ａｍｃ ｅ ｉＤ ｂ ． ｈ ｉ 头 Ａ ｏ ｉ ｍｋ ｓｅｏ ｉ ｅｃｂ的干燥块根Ｌ。 ｃｎｔ ｎｚ ｉ ． ｕ ｕ ｉ ｆ Ｒ ｈ ２ Ｊ 附子 、川乌及草乌 中共同的化学成分有：双酯型生物 碱 ，如乌头碱 （ ｏｉｎ ） Ａｃｎｔ ｅ 、新乌头碱 （ ｓ ｏｉｎ ） ｉ Ｍｅａ ｎｔ ｅ 、次 ｃ ｉ 乌头碱（ ｙ ａｏｉｎ）胺醇类生物碱 ， Ｈ ｐｃｎｔ ｅ； ｉ 如尼奥灵（ 新乌宁碱 ， Ｎ ｏｉ ） ｅｌ ｅ、塔拉乌头胺 （ ａ ｔ ａ ｎ ） ｎ Ｔ ｌｉ ｍｉ ；二萜类生物碱 ，如 ａｚ ｅ 北乌碱 （ ｅ ｕｉ ） Ｂ ｉ ｔ ｅ 、去氧乌头碱 （ ｏｙ ｃｎ ｉ ） ｗ ｎ Ｄｅｘａｏ ｉ ｅ 。 ｔ ｎ 从毒性角度来看 ，乌头类 中药 中的主 要毒性成分为 双酯 型生物碱 ，单酯型生物碱和胺基 醇型生物碱 。其 中 双酯 型生物碱的毒性最大 ，主要有 乌头碱 、新乌头碱和 次乌 头碱 三种 ，属 于难溶于水 的脂溶 性成分 ；单酯型生 物碱 是双 酯型生物碱 ｃ ８位上的 乙酰基水解 失去一分子 乙酸后 的产 物 。属 于亲水性成分 ，毒性较 小 ，为双酯型 生物碱 的 １ ０ ；胺 基醇型生物碱 是酯型生物碱 Ｃ１ ／ ００ ２ ４ 位上苯 甲酯 酰基水解失去一 分子苯 甲酸后 的产物 ，属强 亲水性成分 ，毒性甚微 ， 是双酯型 生物碱 的 １ ０ 仅 ／０ ０ ２ １ ０ 。 常认为这三类 生物碱 既是乌头类 中药 的有效 ／００ 通 ４ 成分 ，也是 它们 的毒性成分 。 Ｊ ２ 乌头总生物碱含量测定方法的研究概况 ２１ 酸碱 中和 法 原理：利用生物碱 的碱性 ，用酸直接 ． 滴定或加入定量酸液及指 示剂 ，用氢氧化钠液 回滴定 ， 根据 消耗 碱液 的 体积计 算 出乌 头类 总 生物碱 的含量 。 １９ 年版 、１９ ９０ ９ ５年版、２ ０ ０ ０年版 、２ ０ 年版 、２ １ ０５ ０ ０年 版 《 中国药典 》一 部中对 制川乌、制草乌 中乌头类 总生 物碱 的含量测定均采用此方法 。 方法：取本品中粉 １ｇ ０ ，精密称定 ，加 乙醚． 三氯 甲 烷 （ ：）的混合液 ５ ｍｌ ３１ ０ 与氨试液 ４ ，密塞 ，摇 匀 ， ｍｌ 放 置过夜 ，滤过 ，药渣加 乙醚一 三氯 甲烷 ５ ｍｌ ０ ，连续振摇 ｌ， ｈ 滤过 ， 药渣用 乙醚一 三氯 甲烷洗涤 ３ ～４次， 每次 １ｍｌ ５ ， 滤过 ，洗 液与滤 液合并 ，低温 蒸干 。残 渣加 乙醇 ５ ｍｌ ０ 使溶解， 精密加入硫酸滴定液 （ ．１ ｌ １ｍｌ水 １ｍｌ ０ ｍｏ Ｌ） ５ ， ５ ０ ／
中药川乌毒性研究
中药川乌毒性研究通过对中药川乌药理作用及临床疗效、毒性、炮制研究、配伍研究、毒性预防及救治等方面进行概述，为川乌深入研究提供参考并对其临床应用提供理论支持。
标签：川乌；毒性研究；药理作用；临床疗效川乌为毛茛科多年生草本植物乌头的干燥块根，含多种生物碱，主要为乌头碱、异乌头碱、次乌头碱，素馨乌头碱及这些物质的苯甲酰类成分。
因其成分结构中羟基的乙酰化和芳酰化，因而呈现强烈的毒性。
因其毒性强，在治疗过程中，往往因服药过量，导致中毒。
本文将对中药川乌药理作用及临床疗效、毒性、毒性预防及救治等方面进行概述，为川乌深入研究提供参考并对其临床应用提供理论支持。
1川乌药理作用及临床疗效乌头碱类是川乌镇痛的主要成份，有明显的抗感染、镇痛作用，可用于临床多种疼痛。
以附子续命汤加减治疗重症风湿寒性关节痛6O例。
结果治愈52例而总有效率100%。
在抗炎作用方面，川乌总碱显著抑制角叉菜腔、蛋清t组胺和5-HT所致大鼠足肿胀，抑制二甲苯所致小鼠耳肿胀，抑制组胺、5HT所致大鼠皮肤毛细血管通透性亢进，抑制巴豆油所致肉芽囊的渗出和增生。
另外，川乌有降血糖、扩血管、降压等作用，亦可影响中枢神经系统并对癌细胞有一定抑制作用。
2毒性研究2.1毒理作用川乌的毒理作用主要表现在以下几个方面：心脏毒性主要表现为影响Na 通道、诱导Cx43蛋白脱磷酸、抑制呼吸酶的活性、促进心肌细胞膜脂质过氧化反、损害心肌细胞超微结构、诱导心肌细胞凋亡等[3]；神经系统毒性主要表现为头晕、视物不清、昏迷等；消化系统毒性主要表现为恶心、呕吐、胃部烧灼感、流涎及腹痛、腹泻等症状；呼吸系统毒性临床上有中毒者因为位于延髓的呼吸运动中枢麻痹，导致呼吸抑制的病例。
2.2毒性产生机制目前因川乌中毒死亡的事件在临床屡见不鲜，其中以水煎服最常见，川乌中的乌头碱对心脏有极强的毒性作用。
乌头碱中毒亦产生心室纤维颤动、口服0.2mg既能使人中毒，3～5mg即可致死。
乌头碱中毒后最严重的是对心臟的损害，以室性早搏最为常见，室性早搏重者可发展为心室纤颤，其发生机制为：①兴奋心脏迷走神经，引起窦房结自律性降低，而发生冲动起源上的障碍，产生被动性心率失常；②乌头碱直接作用于心肌，使心肌应激性增高，心室内异位节律点兴奋性增强，而发生主动性心率失常。
一测多评法同时测定制川乌中9种生物碱的含量
药学与临床研究Pharmaceutical and Clinical Research 药学研究一测多评法同时测定制川乌中9种生物碱的含量*陈洪岩\孙晓2,张小龙i，3,姚晨旭\姜燕1连云港市食品药品检验检测中心，连云港222006;2连云港市第一人民医院，连云港222002;3南京中医药大学，南京210023摘要目的：建立一测多评法同时测定制川乌中9种乌头类生物碱含量。
方法：采用高效液 相色谱四级杆飞行时间串联质谱(HPLC-Q TO F-M S)法。
色谱柱为Agilent ZO RBAX Extend-C18 R R H T(2.1mm x50mm，1.8|x m);甲醇为流动相A,以水（含0.1°%甲酸和2.5 mmol.L-1醋酸铵溶液）为流动相B,梯度洗脱；流速为0.21 mL.mm-1;柱温为30 °C。
以乌头碱为内参物，测定次乌头碱、新乌头碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱、乌头原碱、次乌头原碱、新乌 头原碱对于其的相对校正因子，并对相对校正因子进行重现性考察。
利用相对校正因子计算其它 8种生物碱成分的含量，同时利用外标法测定这9种成分，比较两种测定方法的差异，验证一测多 评法的准确性和可行性。
结果：建立Q A M S法测定乌头类中药材9种生物碱的含量，其测定值与 计算值无显著差异。
结论：经方法学验证，本方法可用于制川乌药材中9种生物碱的含量测定。
关键词制川乌；一测多评法；乌头类生物碱;相对校正因子；外标法；含量测定中图分类号 R927.2 文献标志码 A文章编号 1673-7806(2017)02-113-05毛茛科乌头属是一类非常重要的药用植物。
乌头属植物常见人药的约有40种。
《中国药典》2015 年版中收载了草乌（北乌头干燥块根）、草乌叶（北 乌头干燥叶）、制草乌（草乌的炮制加工品）、川乌 (乌头的干燥母根）、附子（乌头的干燥子根）和制川 乌（川乌的炮制加工品）。
不同产地川乌炮制前后差异性成分研究
㊀Ｇｕｉｈａｉａ㊀Ｍａｙ２０２２ꎬ４２(５):８２０－８３２ｈｔｔｐ://ｗｗｗ.ｇｕｉｈａｉａ－ｊｏｕｒｎａｌ.ｃｏｍＤＯＩ:１０.１１９３１/ｇｕｉｈａｉａ.ｇｘｚｗ２０２１０９０５６吴丹丹ꎬ刘艳ꎬ郭鹏飞ꎬ等.不同产地川乌炮制前后差异性成分研究[Ｊ].广西植物ꎬ２０２２ꎬ４２(５):８２０－８３２.ＷＵＤＤꎬＬＩＵＹꎬＧＵＯＰＦꎬｅｔａｌ.ＤｉｆｆｅｒｅｎｔｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｂｅｔｗｅｅｎＡｃｏｎｉｔｉＲａｄｉｘａｎｄｉｔｓｐｒｏｃｅｓｓｅｄｐｒｏｄｕｃｔｆｒｏｍｄｉｆｆｅｒｅｎｔｒｅｇｉｏｎｓ[Ｊ].Ｇｕｉｈａｉａꎬ２０２２ꎬ４２(５):８２０－８３２.不同产地川乌炮制前后差异性成分研究吴丹丹ꎬ刘㊀艳ꎬ郭鹏飞ꎬ匡海学ꎬ杨炳友∗(黑龙江中医药大学教育部北药基础与应用研究重点实验室ꎬ哈尔滨１５００４０)摘㊀要:为建立川乌及制川乌的高效液相色谱(ＨＰＬＣ)指纹图谱ꎬ并结合化学计量学方法和主成分含量测定和比较３个不同产地川乌炮制前后的差异成分ꎮ该文采用ＨＰＬＣ法ꎬ利用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(２０１２版)计算相似度ꎬ并结合聚类分析(ＨＣＡ)㊁主成分分析(ＰＣＡ)㊁偏最小二乘判别分析(ＰＬＳ￣ＤＡ)㊁正交偏最小二乘判别分析(ＯＰＬＳ￣ＤＡ)及主成分含量测定结果进行综合分析ꎮ结果表明:(１)建立了３个产地１５批川乌炮制前后的ＨＰＬＣ指纹图谱ꎬ分别标定了２５个和１４个共有峰ꎬ并通过对照品指认出６个共有峰ꎬ分别为苯甲酰新乌头原碱(峰１６)㊁苯甲酰乌头原碱(峰１７)㊁苯甲酰次乌头原碱(峰１８)㊁新乌头碱(峰２１)㊁次乌头碱(峰２２)㊁乌头碱(峰２３)ꎮ(２)化学计量学方法分析显示ꎬ川乌炮制前后的３０批样品被明显分为２类ꎬ１５批川乌被分为３类ꎬ１５批制川乌被分为３类ꎬ新乌头碱㊁次乌头碱等６个成分可能是不同产地川乌炮制前后的潜在差异成分ꎮ(３)炮制前后主成分含量测定结果均有不同程度的变化ꎬ四川江油所产川乌炮制前后部分成分含量明显高于另外两个产地所产川乌ꎮ该研究建立的指纹图谱精密度㊁重复性㊁稳定性均较好ꎬ结合化学计量学分析方法和主成分含量测定分析ꎬ可为不同产地川乌炮制前后质量控制提供参考ꎮ关键词:川乌ꎬ高效液相色谱(ＨＰＬＣ)ꎬ指纹图谱ꎬ化学计量学方法ꎬ含量测定ꎬ质量控制中图分类号:Ｑ９４６㊀㊀文献标识码:Ａ㊀㊀文章编号:１０００￣３１４２(２０２２)０５￣０８２０￣１３ＤｉｆｆｅｒｅｎｔｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｂｅｔｗｅｅｎＡｃｏｎｉｔｉＲａｄｉｘａｎｄｉｔｓｐｒｏｃｅｓｓｅｄｐｒｏｄｕｃｔｆｒｏｍｄｉｆｆｅｒｅｎｔｒｅｇｉｏｎｓＷＵＤａｎｄａｎꎬＬＩＵＹａｎꎬＧＵＯＰｅｎｇｆｅｉꎬＫＵＡＮＧＨａｉｘｕｅꎬＹＡＮＧＢｉｎｇｙｏｕ∗(ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＢａｓｉｃａｎｄＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎＲｅｓｅａｒｃｈｏｆＢｅｉｙａｏ(ＨｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ)ꎬＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＥｄｕｃａｔｉｏｎꎬＨｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅꎬＨａｒｂｉｎ１５００４０ꎬＣｈｉｎａ)Ａｂｓｔｒａｃｔ:ＴｏｅｖａｌｕａｔｅｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｏｆＡｃｏｎｉｔｉＲａｄｉｘａｎｄＡｃｏｎｉｔｉＲａｄｉｘＰｒｅｐａｒａｔａｆｒｏｍｔｈｒｅｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｒｅｇｉｏｎｓｂｙｃｈｅｍｏｍｅｔｒｉｃｓａｎｄｐｒｉｎｃｉｐａｌｃｏｍｐｏｎｅｎｔｃｏｎｔｅｎｔｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｓ.Ｔｈｅｈｉｇｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ(ＨＰＬＣ)ｍｅｔｈｏｄｗａｓｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄｏｎａＷａｔｅｒｓＳｕｎＦｉｒｅＣ１８(４.６ｍｍˑ１５０ｍｍꎬ５μｍ)ꎬａｎｄａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ￣ｇｌａｃｉａｌａｃｅｔｉｃａｃｉｄ(０.２％)ｓｏｌｕｔｉｏｎ(ｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅａｄｊｕｓｔｅｄｐＨｔｏ６.２０)ｗａｓａｄｏｐｔｅｄａｓｔｈｅｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅｆｏｒｇｒａｄｉｅｎｔｅｌｕｔｉｏｎꎬｗｉｔｈｔｈｅｆｌｏｗｒａｔｅｏｆ１.０ｍＬ ｍｉｎ￣１ａｎｄｔｈｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｗａｖｅｌｅｎｇｔｈｏｆ２３５ｎｍ.Ｔｈｅｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｓｗｅｒｅａｎａｌｙｚｅｄｂｙｔｈｅｓｏｆｔｗａｒｅｏｆ Ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ收稿日期:２０２２－０１－２８基金项目:国家重点研发计划项目(２０１８ＹＦＣ１７０７１０３)ꎻ黑龙江省 头雁 团队项目[ＳｕｐｐｏｒｔｅｄｂｙＮａｔｉｏｎａｌＫｅｙＲｅｓｅａｒｃｈａｎｄＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔＰｒｏｊｅｃｔ(２０１８ＹＦＣ１７０７１０３)ꎻＨｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇＴｏｕｙａｎＩｎｎｏｖａｔｉｏｎＴｅａｍＰｒｏｇｒａｍ]ꎮ第一作者:吴丹丹(１９９０－)ꎬ硕士研究生ꎬ研究方向为中药药效物质基础及作用机制ꎬ(Ｅ￣ｍａｉｌ)ｄｌｗｕｄｄ＠１６３.ｃｏｍꎮ∗通信作者:杨炳友ꎬ博士ꎬ教授ꎬ研究方向为中药药效物质基础及作用机制ꎬ(Ｅ￣ｍａｉｌ)ｙｂｙｗａｔｅｒ＠１６３.ｃｏｍꎮＥｖａｌｕａｔｉｏｎＳｙｓｔｅｍｆｏｒＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃＦｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ(２０１２) .Ｔｈｅｄｉｓｃｒｉｍｉｎａｎｔａｎａｌｙｓｉｓｏｆｈｉｅｒａｒｃｈｉｃａｌｃｌｕｓｔｅｒａｎａｌｙｓｉｓ(ＨＣＡ)ꎬｐｒｉｎｃｉｐａｌｃｏｍｐｏｎｅｎｔａｎａｌｙｓｉｓ(ＰＣＡ)ꎬｏｒｔｈｏｇｏｎａｌｐａｒｔｉａｌｌｅａｓｔｓｑｕａｒｅｓ￣ｄｉｓｃｒｉｍｉｎａｎｔａｎａｌｙｓｉｓ(ＯＰＬＳ￣ＤＡ)ａｎｄｐａｒｔｉａｌｌｅａｓｔｓｑｕａｒｅｓ￣ｄｉｓｃｒｉｍｉｎａｎｔａｎａｌｙｓｉｓ(ＰＬＳ￣ＤＡ)ｗｅｒｅｅｍｐｌｏｙｅｄꎬｃｏｍｂｉｎｅｄｗｉｔｈｃｈｅｍｏｍｅｔｒｉｃｓａｎｄｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｒｅｓｕｌｔｓｏｆｐｒｉｎｃｉｐａｌｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ.Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｗｅｒｅａｓｆｏｌｌｏｗｓ:(１)ＨＰＬＣｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｓｏｆ１５ｂａｔｃｈｅｓｏｆＡｃｏｎｉｔｉＲａｄｉｘａｎｄｉｔｓｐｒｏｃｅｓｓｅｄｐｒｏｄｕｃｔｓｆｒｏｍｔｈｒｅｅａｒｅａｓｗｅｒｅｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄꎬ２５ａｎｄ１４ｃｏｍｍｏｎｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｐｅａｋｓｗｅｒｅｃａｌｉｂｒａｔｅｄｉｎ１５ｂａｔｃｈｅｓｏｆｒａｗａｎｄｐｒｏｃｅｓｓｅｄꎬｓｉｘｐｅａｋｓｗｅｒｅｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄｂｙｔｈｅｍｉｘｅｄｒｅｆｅｒｅｎｃｅｐｒｏｄｕｃｔ.Ｔｈｅｙｗｅｒｅｂｅｎｚｏｙｌｍｅｓａｃｏｎｉｔｉｎｅ(ｐｅａｋ１６)ꎬｂｅｎｚｏｙｌａｃｏｎｉｔｉｎｅ(ｐｅａｋ１７)ꎬｂｅｎｚｏｙｌｈｙｐａｃｏｎｉｔｉｎｅ(ｐｅａｋ１８)ꎬｍｅｓａｃｏｎｉｔｉｎｅ(ｐｅａｋ２１)ꎬｈｙｐａｃｏｎｉｔｉｎｅ(ｐｅａｋ２２)ꎬａｃｏｎｉｔｉｎｅ(ｐｅａｋ２３).(２)Ｃｈｅｍｏｍｅｔｒｉｃｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔ３０ｂａｔｃｈｅｓｏｆｓａｍｐｌｅｓｗｅｒｅｃｌｕｓｔｅｒｅｄｉｎｔｏｔｗｏｃａｔｅｇｏｒｉｅｓꎬ１５ｂａｔｃｈｅｓｏｆＡｃｏｎｉｔｉＲａｄｉｘｗｅｒｅｃｌａｓｓｉｆｉｅｄｉｎｔｏｔｈｒｅｅｃｌａｓｓｅｓꎬ１５ｂａｔｃｈｅｓｏｆＡｃｏｎｉｔｉＲａｄｉｘＰｒｅｐａｒａｔａｗｅｒｅｃｌａｓｓｉｆｉｅｄｉｎｔｏｔｈｒｅｅｃｌａｓｓｅｓ.ＳｉｘｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｍｅｓａｃｏｎｉｔｉｎｅａｎｄｈｙｐａｃｏｎｉｔｉｎｅｍａｙｂｅｔｈｅｐｏｔｅｎｔｉａｌｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｏｆＡｃｏｎｉｔｉＲａｄｉｘｆｒｏｍｄｉｆｆｅｒｅｎｔｒｅｇｉｏｎｓｂｅｆｏｒｅａｎｄａｆｔｅｒｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ.(３)ＴｈｅｃｏｎｔｅｎｔｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｒｅｓｕｌｔｓｏｆｐｒｉｎｃｉｐａｌｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｃｈａｎｇｅｄｉｎｖａｒｙｉｎｇｄｅｇｒｅｅｓｂｅｆｏｒｅａｎｄａｆｔｅｒｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇꎬａｎｄｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｒｅｓｕｌｔｓｏｆｓｏｍｅｐｒｉｎｃｉｐａｌｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｉｎＪｉａｎｇｙｏｕｏｆＳｉｃｈｕａｎｐｒｏｄｕｃｉｎｇａｒｅａｂｅｆｏｒｅａｎｄａｆｔｅｒｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈｏｓｅｉｎｔｈｅｏｔｈｅｒｔｗｏｐｒｏｄｕｃｉｎｇａｒｅａｓ.Ｔｈｅｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｍｅｔｈｏｄｗｈｉｃｈｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄｉｎｔｈｅｓｔｕｄｙｉｓａｃｃｕｒａｔｅꎬｒｅｐｅａｔａｂｌｅꎬａｎｄｒｅｌｉａｂｌｅ.ＦｕｒｔｈｅｒｍｏｒｅꎬｃｏｍｂｉｎｅｄｗｉｔｈｃｈｅｍｏｍｅｔｒｉｃｓａｎｄｐｒｉｎｃｉｐａｌｃｏｍｐｏｎｅｎｔｃｏｎｔｅｎｔｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎꎬｉｔｃｏｕｌｄｂｅｕｓｅｄｆｏｒｔｈｅｑｕａｌｉｔｙｃｏｎｔｒｏｌｏｆＡｃｏｎｉｔｉＲａｄｉｘａｎｄｉｔｓｐｒｏｃｅｓｓｅｄｐｒｏｄｕｃｔｆｒｏｍｄｉｆｆｅｒｅｎｔｒｅｇｉｏｎｓ.Ｋｅｙｗｏｒｄｓ:ＡｃｏｎｉｔｉＲａｄｉｘꎬｈｉｇｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ(ＨＰＬＣ)ꎬｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｓꎬｃｈｅｍｏｍｅｔｒｉｃｍｅｔｈｏｄꎬｃｏｎｔｅｎｔｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎꎬｑｕａｌｉｔｙｃｏｎｔｒｏｌ㊀㊀川乌味辛㊁苦ꎬ性热ꎬ有大毒ꎬ一般炮制后用(唐梅等ꎬ２０１７ꎻ中华人民共和国药典ꎬ２０２０ꎻ叶协滔等ꎬ２０２０)ꎬ主产于四川㊁陕西㊁云南等地ꎬ其道地产区为四川江油ꎬ多以栽培品为主ꎮ由于各地种植程度不等及栽培环境不同ꎬ对川乌质量产生了极大的影响(林华和邓广海ꎬ２０１１ꎻ赵军宁等ꎬ２０２０)ꎮ现代医学研究表明ꎬ川乌具有抗炎(Ｙｕｅｔａｌ.ꎬ２０１９)㊁镇痛(Ｗａｎｇｅｔａｌ.ꎬ２０１５ꎻＮｙｉｒｉｍｉｇａｂｏｅｔａｌ.ꎬ２０１５)㊁抗肿瘤(Ｗａｎｇ＆Ｃｈｅｎꎬ２０１０)等作用ꎬ同时也对心脏(Ｌｉｕｅｔａｌ.ꎬ２０１９ꎻＬｉｅｔａｌ.ꎬ２０２０)和中枢(Ｑｉｎｅｔａｌ.ꎬ２０１２ꎻＬｉｕｅｔａｌ.ꎬ２０１７)等有毒性作用ꎮ川乌中所含的双酯型生物碱既是其有效成分同时又是其毒性成分(Ｑｉｎｅｔａｌ.ꎬ２０１２)ꎬ炮制后可将其水解为单酯型生物碱ꎬ从而降低毒性(Ｌｉｕｅｔａｌ.ꎬ２０１７)ꎮ但是ꎬ由于炮制不当或错误使用等问题ꎬ常导致中毒事件发生ꎬ因此严格控制川乌炮制前后的质量尤为重要(Ｓｈａｗꎬ２０１０)ꎮ目前ꎬ中药材质量控制的方法以含量测定为主(Ｓｈａｗꎬ２０１０ꎻＬｕｏｅｔａｌ.ꎬ２０１６)ꎬ但由于中药成分复杂且不明确ꎬ仅以单个或几个成分的含量进行质量控制ꎬ不能全面地反映药材的质量ꎬ因此能够实现多成分㊁多指标质量控制的指纹图谱技术开始受到广泛的关注(Ｚｈｕｅｔａｌ.ꎬ２０１３ꎻ赵翡翠等ꎬ２０１４ꎻＺｈｅｎｇｅｔａｌ.ꎬ２０１４ꎻ马丽娟等ꎬ２０１６ꎻＬｕｏｅｔａｌ.ꎬ２０１８ꎻＭｉａｏｅｔａｌ.ꎬ２０１９)ꎮ然而ꎬ对川乌的高效液相色谱(ＨＰＬＣ)指纹图谱研究仅为不同产地的川乌差异比较(熊江等ꎬ２００５ꎻ林华和邓广海ꎬ２０１１ꎻ司欣鑫ꎬ２０１９ꎻ魏惠珍等ꎬ２０２０ꎻ杨磊ꎬ２０２０)和炮制前后差异比较(于永军等ꎬ２００９ꎻ黄志芳等ꎬ２０１１ꎻ邓广海ꎬ２０１１ꎻ秦语欣ꎬ２０１６)ꎬ共有峰标定均较少ꎬ对差异性成分的研究不明确且没有将ＨＰＬＣ指纹图谱与多元统计分析和含量测定的方法相结合ꎬ综合考察产地因素对川乌炮制前后差异成分的影响ꎮ因此ꎬ本实验选取川乌３个主要产地炮制前后的川乌样品ꎬ建立ＨＰＬＣ指纹图谱并结合化学计量学方法及主成分含量测定ꎬ筛选３个不同产地川乌炮制前后的潜在差异成分ꎬ为川乌与制川乌质量控制提供参考ꎮ１㊀材料与方法１.１材料和仪器乙腈和冰醋酸为色谱纯ꎬ其余试剂均为分析纯ꎻ实验用水为屈臣氏蒸馏水ꎻ新乌头碱(以下简称Ｍｅｓꎬ批号ＣＨＢ１８０３１１)㊁乌头碱(以下简称Ａｃｏꎬ批号ＣＨＢ１８０４０８)㊁次乌头碱(以下简称Ｈｙｐꎬ批号ＣＨＢ１８０５２４)㊁苯甲酰新乌头原碱(以下简称ＢＭＡꎬ批号ＣＨＢ１８０３１０)㊁苯甲酰乌头原碱(以下１２８５期吴丹丹等:不同产地川乌炮制前后差异性成分研究简称ＢＡＣꎬ批号ＣＨＢ１８０３０９)㊁苯甲酰次乌头原碱(以下简称ＢＨＡꎬ批号ＣＨＢ１８０３０７)均购自成都克洛玛生物科技有限公司ꎬ纯度均ȡ９８％ꎮ川乌药材采自于陕西省汉中市城固县三合镇龙王庙村２组㊁四川省江油市太平镇普照村２组㊁四川省绵阳市平武代坝村３个产地各５批ꎬ共１５批川乌样品ꎬ已均被黑龙江中医药大学药学院樊锐锋副教授鉴定均为毛茛科植物乌头(Ａｃｏｎｉｔｕｍｃａｒｍｉｃｈａｅｌｉｉ)的干燥母根ꎬ保存于黑龙江中医药大学中药化学实验室ꎮ制川乌的炮制方法采用２０２０版«中国药典»方法蒸制(中华人民共和国药典ꎬ２０２０)ꎮ高效液相色谱仪(ｅ２６９５ꎬ美国Ｗａｔｅｒｓ公司)ꎻ色谱柱为ＷａｔｅｒｓＳｕｎＦｉｒｅＣ１８(１５０ｍｍˑ４.６ｍｍꎬ５μｍ)ꎻ旋转蒸发仪(ＯＳＢ￣２１００ꎬ日本ＥＹＥＬＡ公司)ꎮ１.２方法１.２.１色谱条件㊀ＷａｔｅｒｓＳｕｎＦｉｒｅＣ１８(４.６ｍｍˑ１５０ｍｍꎬ５μｍ)色谱柱ꎬ流动相为乙腈(Ａ)－０.２％冰醋酸水溶液(Ｂꎬ三乙胺调ｐＨ值６.２０)ꎬ梯度洗脱(０~８ｍｉｎꎬ５％~１３％Ａꎻ８~１３ｍｉｎꎬ１３％~２１％Ａꎻ１３~２５ｍｉｎꎬ２１％~２６％Ａꎻ２５~５０ｍｉｎꎬ２６％~２６％Ａꎻ５０~５３ｍｉｎꎬ２６％~２９％Ａꎻ５３~５８ｍｉｎꎬ２９％~３７％Ａꎻ５８~６３ｍｉｎꎬ３７％~４０％Ａꎻ６３~７３ｍｉｎꎬ４０％~８０％Ａ)ꎻ体积流量１.０ｍＬ ｍｉｎ￣１ꎻ检测波长２３５ｎｍꎻ柱温３５ħꎻ进样量２０μＬꎮ１.２.２对照品溶液的制备㊀分别取对照品适量ꎬ用０.０１％盐酸甲醇溶液定容ꎬ配制成含Ｍｅｓ０.０６ｍｇ ｍＬ￣１㊁Ａｃｏ０.０６ｍｇ ｍＬ￣１㊁Ｈｙｐ０.０５ｍｇ ｍＬ￣１㊁ＢＭＡ０.０５ｍｇ ｍＬ￣１㊁ＢＡＣ０.０６ｍｇ ｍＬ￣１㊁ＢＨＡ０.０６ｍｇ ｍＬ￣１的混合对照品溶液ꎬ备用ꎮ１.２.３供试品溶液制备㊀分别取川乌和制川乌粉末(过三号筛)适量置于具塞锥形瓶中ꎬ依次加入氨试液２.０ｍＬ㊁异丙醇２５ｍＬ和乙酸乙酯２５ｍＬꎬ超声提取２次(３００Ｗꎬ４０ｋＨｚꎬ２５ħ以下)ꎬ每次３０ｍｉｎꎬ静置过夜ꎬ过滤ꎬ合并滤液ꎮ减压浓缩(４０ħ以下)ꎬ０.０１％盐酸甲醇溶液定容至５.０ｍＬꎬ进样前离心ꎬ取上清液过０.２２μｍ微孔滤膜ꎬ备用ꎮ１.２.４含量测定㊀取对照品适量ꎬ用０.０１％盐酸甲醇溶液定容ꎬ配制成含Ｍｅｓ３.１７ｍｇ ｍＬ￣１㊁Ａｃｏ３.１８ｍｇ ｍＬ￣１㊁Ｈｙｐ３.００ｍｇ ｍＬ￣１㊁ＢＭＡ０.６１ｍｇ ｍＬ￣１㊁ＢＡＣ０.１０ｍｇ ｍＬ￣１㊁ＢＨＡ０.１３ｍｇ ｍＬ￣１的混合对照品储备液ꎬ备用ꎮ按 １.２.３ 项下 供试品溶液制备 方法制备供试品溶液ꎬ并按 １.２.１ 项下 色谱条件 重复测定３次ꎮ１.２.５方法学考察１.２.５.１线性关系考察㊀取 １.２.２ 项下混合对照品储备液ꎬ梯度稀释ꎬ并按 １.２.１ 项下 色谱条件 进样检测ꎬ记录峰面积ꎮ横坐标(Ｘ)为质量浓度㊁纵坐标(Ｙ)为峰面积ꎬ进行线性回归ꎬ分别得到线性回归方程ꎮ１.２.５.２精密度考察㊀取 １.２.２ 项下混合对照品储备液ꎬ按 １.２.１ 项下 色谱条件 重复测定５次ꎬ记录峰面积ꎮ１.２.５.３稳定性考察㊀取川乌样品(Ｓ１)适量ꎬ按 １.２.３ 项下 供试品溶液制备 方法制备供试品溶液ꎬ并按 １.２.１ 项下 色谱条件 分别于室温在０㊁２㊁４㊁８㊁１２㊁２４ｈ进样检测ꎬ记录峰面积ꎮ１.２.５.４重复性考察㊀取川乌样品(Ｓ１)５份ꎬ按 １.２.３ 项下 供试品溶液制备 方法制备供试品溶液ꎬ并按 １.２.１ 项下 色谱条件 进样检测ꎬ记录峰面积ꎮ１.２.５.５加样回收率考察㊀取已知含量的川乌样品(Ｓ１)适量ꎬ按一定比例(５０％㊁１００％㊁１５０％)加入混合对照品储备液(Ｍｅｓ㊁Ａｃｏ㊁Ｈｙｐ㊁ＢＭＡ㊁ＢＡＣ㊁ＢＨＡ)ꎬ按 １.２.３ 项下 供试品溶液制备 方法制备供试品溶液ꎬ并按 １.２.１ 项下 色谱条件 重复测定３次ꎬ记录各峰面积ꎮ１.２.６指纹图谱的建立㊀分别取混合对照品溶液㊁１５批川乌和１５批制川乌制备的供试品溶液ꎬ按 １.２.１ 项下 色谱条件 进样检测ꎬ记录色谱图ꎮ其混合对照品色谱图见图１ꎮ将所得１５批川乌及１５批制川乌的图谱导入到 中药色谱指纹图谱相似度评价系统(２０１２版) 中ꎬ设Ｓ１样品的图谱为参照图谱ꎬ时间窗宽度设为０.１ｍｉｎꎬ选用中位数法ꎬ进行多点校正ꎬ以全谱峰进行峰匹配ꎬ生成对照指纹图谱ꎬ分别得到１５批川乌与１５批制川乌样品的指纹图谱及其对照指纹图谱ꎬ见图２与图３ꎮ２㊀结果与分析２.１相似度分析川乌样品Ｓ１~Ｓ１５与参照指纹图谱的相似度结果分别为０.９４９㊁０.９４８㊁０.９５１㊁０.７７６㊁０.９５２㊁０.９０２㊁０.９２６㊁０.９２５㊁０.９２３㊁０.９０８㊁０.９６９㊁０.９７０㊁０.９５５㊁０.９５６㊁０.９５５ꎬ除样品Ｓ４与参照图谱的相似度为０.７７６外ꎬ其余样品与参照图谱的相似度均ȡ０.９０２ꎬ可知除陕西汉中产地外其余产地川乌相似２２８广㊀西㊀植㊀物４２卷图１㊀混合对照品色谱图Ｆｉｇ.１㊀Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｏｆｍｉｘｅｄｓｔａｎｄａｒｄ图２㊀１５批川乌指纹图谱及对照指纹图谱(Ｒ)Ｆｉｇ.２㊀Ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｆｏｒ１５ｂａｔｃｈｅｓｏｆＡｃｏｎｉｔｉＲａｄｉｘａｎｄｉｔｓｒｅｆｅｒｅｎｃｅｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔ(Ｒ)３２８５期吴丹丹等:不同产地川乌炮制前后差异性成分研究图３㊀１５批制川乌指纹图谱及对照指纹图谱(Ｒᶄ)Ｆｉｇ.３㊀Ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｆｏｒ１５ｂａｔｃｈｅｓｏｆＡｃｏｎｉｔｉＲａｄｉｘＰｒｅｐａｒａｔａａｎｄｉｔｓｒｅｆｅｒｅｎｃｅｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔ(Ｒᶄ)度较好ꎻ制川乌样品ＳＳ１~ＳＳ１５与参照指纹图谱的相似度结果分别为０.８１２㊁０.８７０㊁０.７５６㊁０.７３８㊁０.９２５㊁０.９１４㊁０.９１３㊁０.９００㊁０.８９８㊁０.８６２㊁０.８３６㊁０.９２４㊁０.９０３㊁０.９１２㊁０.９０４ꎬ除样品ＳＳ３和ＳＳ４与参照图谱的相似度为０.７５６和０.７３８外ꎬ其余样品与参照图谱的相似度均ȡ０.８１２ꎬ可知除陕西汉中产地ꎬ另外两个产地相似度均较好ꎬ但也存在一定差异ꎮ２.２化学计量法分析２.２.１聚类分析(ＨＣＡ)㊀采用ＭｅｔａｂｏＡｎａｌｙｓｔ５.０(ｈｔｔｐｓ://ｗｗｗ.ｍｅｔａｂｏａｎａｌｙｓｔ.ｃａ/ＭｅｔａｂｏＡｎａｌｙｓｔ/ｈｏｍｅ.ｘｈｔｍｌ)统计学网站对１５批川乌和１５批制川乌指纹图谱的３４个特征峰峰面积进行聚类热图分析ꎮ由图４可知ꎬ３０批样品被明显聚为两类ꎬ川乌(Ｓ１~Ｓ５为陕西汉中川乌的五个批次ꎬＳ６~Ｓ１０为四川江油川乌的五个批次ꎬＳ１１~Ｓ１５为四川绵阳川乌的五个批次)聚为一类ꎬ制川乌(ＳＳ１~ＳＳ５为陕西汉中制川乌的五个批次ꎬＳＳ６~ＳＳ１０为四川江油制川乌的五个批次ꎬＳＳ１１~ＳＳ１５为四川绵阳制川乌的五个批次)聚为一类ꎮ即川乌和制川乌能被明显区分ꎬ说明川乌炮制前后化学成分４２８广㊀西㊀植㊀物４２卷图４㊀３个产地川乌炮制前后聚类热图结果Ｆｉｇ.４㊀ＲｅｓｕｌｔｓｏｆｈｅａｔｍａｐｃｌｕｓｔｅｒｉｎｇｏｆＡｃｏｎｉｔｉＲａｄｉｘａｎｄｉｔｓｐｒｏｃｅｓｓｅｄｐｒｏｄｕｃｔｆｒｏｍｔｈｒｅｅｒｅｇｉｏｎｓ有一定差异ꎬ可通过指纹图谱的聚类分析将其分类ꎮ根据热图分析可判断制川乌中峰２㊁３㊁５㊁７㊁９㊁１６(ＢＭＡ)㊁１７(ＢＡＣ)㊁１８(ＢＨＡ)㊁２５㊁２８㊁２９代表的化学成分明显高于川乌ꎻ川乌中峰１０㊁１１㊁１２㊁１３㊁１５㊁１９㊁２０㊁２１(Ｍｅｓ)㊁２２(Ｈｙｐ)㊁２３(Ａｃｏ)㊁２４㊁２６㊁２７㊁３０㊁３１㊁３２㊁３４代表的化学成分明显高于制川乌ꎻ四川江油的川乌中峰１０㊁１１㊁１２㊁１３㊁１９㊁２０㊁２１(Ｍｅｓ)㊁２３(Ａｃｏ)㊁２４㊁３０㊁３４代表的化学成分明显高于另外两个产地ꎮ２.２.２主成分分析(ＰＣＡ)㊀采用ＳＩＭＣＡ１４.１统计学软件对１５批川乌和１５批制川乌指纹图谱的３４个特征峰峰面积进行主成分分析ꎬ得分矩阵图见５２８５期吴丹丹等:不同产地川乌炮制前后差异性成分研究图５㊀３个产地川乌炮制前后主成分分析Ｆｉｇ.５㊀ＰｒｉｎｃｉｐａｌｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓａｎａｌｙｓｉｓｏｆＡｃｏｎｉｔｉＲａｄｉｘａｎｄｉｔｓｐｒｏｃｅｓｓｅｄｐｒｏｄｕｃｔｆｒｏｍｔｈｒｅｅｒｅｇｉｏｎｓ图５ꎬ模型参数Ｒ２Ｘ值及预测能力参数Ｑ２值分别为０.７５１和０.５４１ꎮ结果显示３０批样品可被分为两组ꎬ其中川乌(Ｓ１~Ｓ１５)为一组ꎬ制川乌(ＳＳ１~ＳＳ１５)为一组ꎬ此分组与ＨＣＡ结果基本一致ꎮ此外批次Ｓ１０位于得分图范围外ꎬ推测这一批样品与其他批质量差异较大ꎮ２.２.３偏最小二乘判别分析(ＰＬＳ￣ＤＡ)㊀采用ＳＩＭＣＡ１４.１分析软件ꎬ分别对１５批川乌和１５批制川乌指纹图谱的３４个特征峰峰面积进行ＰＬＳ￣ＤＡ分析ꎬ得分图见图６和图７ꎮ模型参数Ｒ２Ｘ值㊁稳定性参数Ｒ２Ｙ值及预测能力参数Ｑ２值分别为０.９９６㊁０.９９９㊁０.９７７ꎬ说明所建ＰＬＳ￣ＤＡ模型稳定性良好ꎮ结果显示在得分散点图中３个产地的川乌明显被分为３类ꎬ该分析结果与ＨＣＡ和ＰＣＡ结果基本一致ꎮ从３个产地１５批川乌中共提取得到图６㊀３个产地川乌ＰＬＳ￣ＤＡ得分及ＶＩＰ分析Ｆｉｇ.６㊀ＰＬＳ￣ＤＡｓｃｏｒｅｓｃａｔｔｅｒａｎｄＶＩＰａｎａｌｙｓｉｓｏｆＡｃｏｎｉｔｉＲａｄｉｘｂｙＰＬＳ￣ＤＡｆｒｏｍｔｈｒｅｅｒｅｇｉｏｎｓ１６个主成分[变量投影重要性指标(ｖａｒｉａｂｌｅｉｍｐｏｒｔａｎｃｅｉｎｐｒｏｊｅｃｔｉｏｎꎬＶＩＰ)ꎬＶＩＰ>１.０]ꎬ其中峰３２㊁２７㊁３３㊁１６(ＢＭＡ)㊁９㊁２１(Ｍｅｓ)㊁１１㊁２０㊁２３(Ａｃｏ)㊁３４㊁２４㊁２８㊁１９㊁３１㊁１３和１８(ＢＨＡ)的变化对不同产地川乌的区分贡献较大ꎻ同样对３个产地１５批制川乌进行ＰＬＳ￣ＤＡ分析ꎬ共提取８个主成分(ＶＩＰ>１.１)ꎬ模型参数Ｒ２Ｘ值㊁Ｒ２Ｙ值及Ｑ２值分别为０.９７３㊁０.９９９㊁０.９１２ꎬ结果显示在得分散点图中３个产地的制川乌明显被分为３类ꎬ峰３４㊁３０㊁２８㊁１６(ＢＭＡ)㊁１７(ＢＡＣ)㊁５㊁２９㊁１８(ＢＨＡ)㊁２５㊁１４的变化对不同产地制川乌的区分贡献较大ꎬ该分析结果与ＨＣＡ和ＰＣＡ结果基本一致ꎮ２.２.４正交偏最小二乘判别分析(ＯＰＬＳ￣ＤＡ)㊀采用ＳＩＭＣＡ１４.１软件ꎬ对１５批川乌和１５批制川乌指纹图谱的３４个特征峰峰面积进行ＯＰＬＳ￣ＤＡ分析ꎬ提取得到８个主成分(ＶＩＰ>１.０)ꎬ模型参数Ｒ２Ｘ值㊁Ｒ２Ｙ值及Ｑ２值分别为０.７２１㊁０.９６０㊁０.９４１ꎬ在得分散点图中炮制前后的川乌明显被分为２类ꎬ峰２２(Ｈｙｐ)㊁２㊁１㊁２１(Ｍｅｓ)㊁１９㊁３㊁７和１０的变化对炮制前后的区分贡献较大ꎬ该分析结果与ＨＣＡ和ＰＣＡ结果基本一致ꎬ具体见图８ꎮ采用置换检验(ｎ＝２００)对当前模型进行验证ꎬ检验参数Ｒ２＝(０.０ꎬ０.１４３)ꎬＱ２＝(０.０ꎬ－０.３９６)ꎬ结果见图９ꎬ左侧随机排列产生的Ｒ２及Ｑ２的值均小于右侧的原始值ꎬ表明所建立的ＯＰＬＳ￣ＤＡ模型拟合良好ꎬ能够用于川乌与制川乌的判别分析ꎮ对陕西汉中产地１０批炮制前后川乌进行ＯＰＬＳ￣ＤＡ分析ꎬ共提取得到９个主成分(ＶＩＰ>１.１)ꎬ６２８广㊀西㊀植㊀物４２卷图７㊀３个产地制川乌ＰＬＳ￣ＤＡ得分及ＶＩＰ分析Ｆｉｇ.７㊀ＰＬＳ￣ＤＡｓｃｏｒｅｓｃａｔｔｅｒａｎｄＶＩＰａｎａｌｙｓｉｓｏｆＡｃｏｎｉｔｉＲａｄｉｘＰｒｅｐａｒａｔａｂｙＰＬＳ￣ＤＡｆｒｏｍｔｈｒｅｅｒｅｇｉｏｎｓ图８㊀３个产地川乌炮制前后ＯＰＬＳ￣ＤＡ得分及ＶＩＰ分析Ｆｉｇ.８㊀ＯＰＬＳ￣ＤＡｓｃｏｒｅｓｃａｔｔｅｒａｎｄＶＩＰａｎａｌｙｓｉｓｏｆＡｃｏｎｉｔｉＲａｄｉｘａｎｄｉｔｓｐｒｏｃｅｓｓｅｄｐｒｏｄｕｃｔｆｒｏｍｔｈｒｅｅｒｅｇｉｏｎｓ图９㊀３个产地川乌炮制前后ＯＰＬＳ￣ＤＡ模型的置换检验Ｆｉｇ.９㊀ＯＰＬＳ￣ＤＡｐｅｒｍｕｔａｔｉｏｎｔｅｓｔｏｆＡｃｏｎｉｔｉＲａｄｉｘａｎｄｉｔｓｐｒｏｃｅｓｓｅｄｐｒｏｄｕｃｔｆｒｏｍｔｈｒｅｅｒｅｇｉｏｎｓ模型参数Ｒ２Ｘ值㊁Ｒ２Ｙ值及Ｑ２值分别为０.９９１㊁０.９９９㊁０.９９５ꎬ结果显示在得分散点图中炮制前后的川乌明显被分为２类ꎬ峰２２(Ｈｙｐ)㊁１㊁２㊁３㊁７㊁２１(Ｍｅｓ)㊁６㊁５㊁１９的变化对陕西汉中产地炮制前后川乌的区分贡献较大ꎬ推测次乌头碱(Ｈｙｐ)可能为陕西汉中产地川乌炮制前后的差异成分ꎬ该分析结果与ＨＣＡ和ＰＣＡ结果基本一致ꎬ见图１０ꎮ对四川江油产地１０批炮制前后川乌进行ＯＰＬＳ￣ＤＡ分析ꎬ共提取得到１５个主成分(ＶＩＰ>１.１)ꎬ模型参数Ｒ２Ｘ值㊁Ｒ２Ｙ值及Ｑ２值分别为０.７９２㊁０.９９８㊁０.９９４ꎬ结果显示在得分散点图中炮制前后的川乌明显被分为２类ꎬ峰２３(Ａｃｏ)㊁２２(Ｈｙｐ)㊁２６㊁２４㊁３２㊁６㊁１９㊁２１(Ｍｅｓ)㊁３４㊁３１㊁１０㊁１㊁１５㊁３０㊁２７的变化对四川江油产地炮制前后川乌的区分贡献较大ꎬ推测乌头碱(Ａｃｏ)可能为四川江油产地川乌炮制前后的差异成分ꎬ该分析结果与ＨＣＡ和ＰＣＡ结果基本一致ꎬ见图１１ꎮ７２８５期吴丹丹等:不同产地川乌炮制前后差异性成分研究图１０㊀陕西汉中川乌炮制前后ＯＰＬＳ￣ＤＡ得分及ＶＩＰ分析Ｆｉｇ.１０㊀ＯＰＬＳ￣ＤＡｓｃｏｒｅｓｃａｔｔｅｒａｎｄＶＩＰａｎａｌｙｓｉｓｏｆＡｃｏｎｉｔｉＲａｄｉｘａｎｄｉｔｓｐｒｏｃｅｓｓｅｄｐｒｏｄｕｃｔｂｙＯＰＬＳ￣ＤＡｉｎＨａｎｚｈｏｎｇꎬＳｈａａｎｘｉＰｒｏｖｉｎｃｅ图１１㊀四川江油川乌炮制前后ＯＰＬＳ￣ＤＡ得分及ＶＩＰ分析Ｆｉｇ.１１㊀ＯＰＬＳ￣ＤＡｓｃｏｒｅｓｃａｔｔｅｒａｎｄＶＩＰａｎａｌｙｓｉｓｏｆＡｃｏｎｉｔｉＲａｄｉｘａｎｄｉｔｓｐｒｏｃｅｓｓｅｄｐｒｏｄｕｃｔｂｙＯＰＬＳ￣ＤＡｉｎＪｉａｎｇｙｏｕꎬＳｉｃｈｕａｎＰｒｏｖｉｎｃｅ图１２㊀四川绵阳川乌炮制前后ＯＰＬＳ￣ＤＡ得分及ＶＩＰ分析Ｆｉｇ.１２㊀ＯＰＬＳ￣ＤＡｓｃｏｒｅｓｃａｔｔｅｒａｎｄＶＩＰａｎａｌｙｓｉｓｏｆＡｃｏｎｉｔｉＲａｄｉｘａｎｄｉｔｓｐｒｏｃｅｓｓｅｄｐｒｏｄｕｃｔｂｙＯＰＬＳ￣ＤＡｉｎＭｉａｎｙａｎｇꎬＳｉｃｈｕａｎＰｒｏｖｉｎｃｅ８２８广㊀西㊀植㊀物４２卷㊀㊀对四川绵阳产地１０批炮制前后川乌进行ＯＰＬＳ￣ＤＡ分析ꎬ共提取得到９个主成分(ＶＩＰ>１.０)ꎬ模型参数Ｒ２Ｘ值㊁Ｒ２Ｙ值及Ｑ２值分别为０.９６４㊁０.９９９㊁０.９９５ꎬ结果显示在得分散点图中炮制前后的川乌明显被分为２类ꎬ峰２㊁２２(ＢＡＣ)㊁１㊁７㊁１９㊁３㊁２１(ＢＭＡ)㊁１７(ＢＨＡ)㊁１０的变化对四川绵阳产地炮制前后川乌的区分贡献较大ꎬ推测苯甲酰乌头原碱(ＢＡＣ)可能为四川绵阳产地川乌炮制前后的差异成分ꎬ该分析结果与ＨＣＡ和ＰＣＡ结果基本一致ꎬ见图１２ꎮ通过上述化学计量学方法分别对３个不同产地各１０批川乌炮制前后的差异成分与所有产地３０批川乌炮制前后的差异性成分进行筛选与比对ꎬ得出４个共有的差异成分ꎬ分别为峰１㊁１９㊁２１(Ｍｅｓ)和２２(Ｈｙｐ)ꎬ与于永军等(２００９)报道的基本一致ꎬ被指认的新乌头碱(Ｍｅｓ)和次乌头碱(Ｈｙｐ)可能为川乌炮制前后潜在差异成分ꎮ川乌３个不同产地的１１个主要潜在差异成分ꎬ分别为峰１１㊁１３㊁１９㊁２０㊁２１(Ｍｅｓ)㊁２３(Ａｃｏ)㊁２４㊁２７㊁３１㊁３２和３４ꎬ结合文献(魏惠珍等ꎬ２０２０)认为被指认的新乌头碱(Ｍｅｓ)可能为不同产地川乌潜在差异成分ꎻ制川乌３个不同产地的６个主要潜在差异成分ꎬ分别为峰５㊁１６(ＢＭＡ)㊁１７(ＢＡＣ)㊁１８(ＢＨＡ)㊁２５和２９ꎬ被指认的苯甲酰新乌头原碱(ＢＭＡ)㊁苯甲酰乌头原碱(ＢＡＣ)和苯甲酰次乌头原碱(ＢＨＡ)可能为不同产地制川乌的潜在差异成分ꎮ２.３方法学考察结果２.３.１线性关系考察㊀分别以质量浓度为横坐标(Ｘ)与峰面积为纵坐标(Ｙ)ꎬ进行线性回归ꎬ得到Ｍｅｓ㊁Ａｃｏ㊁Ｈｙｐ㊁ＢＭＡ㊁ＢＡＣ㊁ＢＨＡ的线性回归方程分别为Ｙ＝１４３０９９８１７２Ｘ＋２０３３２６.３５９(ｒ＝０.９９９０)㊁Ｙ＝１４６７９３４６.９６１８Ｘ－３７１４４.５２２８(ｒ＝０.９９９７)㊁Ｙ＝１６１０４４６７.１１６６Ｘ－５０８８２.６０６４(ｒ＝０.９９９７)㊁Ｙ＝１６１４３８９４.８１１５Ｘ－２７１７６５.７６６７(ｒ＝０.９９９６)㊁Ｙ＝２６２２４７３８.８８８２Ｘ－１２１９６５.４１(ｒ＝０.９９９５)㊁Ｙ＝２８５３７６４６.８８１８Ｘ－４５４７６４６７(ｒ＝０.９９８７)ꎬ线性范围分别为０.０１２７~０.３１７０ｍｇ ｍＬ￣１㊁０.０１２７~０.３１８０ｍｇ ｍＬ￣１㊁０.０１２０~０.３０００ｍｇ ｍＬ￣１㊁０.０７８０~０.９０００ｍｇ ｍＬ￣１㊁０.０１３０~０.１５００ｍｇ ｍＬ￣１㊁０.０１６９~０.１９５０ｍｇ ｍＬ￣１ꎮ２.３.２精密度考察㊀计算Ｍｅｓ㊁Ａｃｏ㊁Ｈｙｐ㊁ＢＭＡ㊁ＢＡＣ㊁ＢＨＡ峰面积的相对标准偏差(ｒｅｌａｔｉｖｅｓｔａｎｄａｒｄｄｅｖｉａｔｉｏｎꎬＲＳＤ)分别为１.６９％㊁２.３１％㊁２.０２％㊁３.０５％㊁２.９８％㊁３.６６％(ｎ＝５)ꎬ表明仪器精密度较好ꎮ２.３.３稳定性考察㊀计算Ｍｅｓ㊁Ａｃｏ㊁Ｈｙｐ㊁ＢＭＡ㊁ＢＡＣ㊁ＢＨＡ峰面积的ＲＳＤ分别为３.６４％㊁２.９２％㊁３.８１％㊁２.５８％㊁１.６９％㊁３.９９％(ｎ＝６)ꎬ表明该供试品溶液在室温条件下２４ｈ内稳定ꎮ２.３.４重复性考察㊀计算Ｍｅｓ㊁Ａｃｏ㊁Ｈｙｐ㊁ＢＭＡ㊁ＢＡＣ㊁ＢＨＡ峰面积的ＲＳＤ分别为３.７５％㊁３.８８％㊁３.０８％㊁３.１９％㊁２.９６％㊁２.０１％(ｎ＝５)ꎬ表明该方法重复性较好ꎮ２.３.５加样回收率考察㊀计算Ｍｅｓ㊁Ａｃｏ㊁Ｈｙｐ㊁ＢＭＡ㊁ＢＡＣ㊁ＢＨＡ的平均加样回收率分别为９７.９７％㊁９８.６５％㊁９７.９１％㊁９８.２０％㊁９７.０２％㊁１００.０１％ꎬＲＳＤ分别为４.７５％㊁４.０８％㊁３.２８％㊁３.９９％㊁４.０６％㊁２.９１％(ｎ＝３)ꎮ２.４含量测定结果３０批炮制前后的川乌含量测定结果见表１及表２ꎬ本实验中制川乌样品的双酯型生物碱可能由于含量极低均未检出ꎬ故未列在表格中ꎮ由含量测定结果可知ꎬ３个产地川乌中四川江油所产川乌的新乌头碱(Ｍｅｓ)和乌头碱(Ａｃｏ)含量明显高于另外两个产地ꎬ其中新乌头碱含量最高ꎬ与熊江等(２００５)研究结果一致ꎬ另外两个产地川乌中的次乌头碱(Ｈｙｐ)含量最高ꎬ这可能与四川江油的地理环境有关(林华和邓广海ꎬ２０１１ꎻＬｕｏｅｔａｌ.ꎬ２０１８ꎻ魏惠珍等ꎬ２０２０)ꎮ炮制后单酯型乌头碱含量均增加ꎬ双酯型乌头碱含量显著减少ꎬ与于永军等(２００９)研究结果一致ꎬ其中四川江油产川乌炮制后苯甲酰新乌头原碱(ＢＭＡ)含量升高且明显高于另外两个产地ꎬ而另外两产地川乌炮制后苯甲酰次乌头原碱(ＢＨＡ)含量升高地更显著ꎬ以上含测结果与化学计量学分析结果相互佐证ꎮ３㊀讨论与结论本实验分别选用无水乙醇㊁９５％乙醇㊁异丙醇－乙酸乙酯(１ʒ１)３种溶剂对供试品进行超声提取ꎬ结果表明ꎬ采用异丙醇－乙酸乙酯(１ʒ１)提取得到的供试品溶液ꎬ经ＨＰＬＣ检测所得的色谱峰较多且峰形较好ꎻ另外本课题组还考察了乙腈－四氢呋喃(２５ʒ１５)－０.１ｍｏｌ Ｌ￣１醋酸铵溶液(每１０００ｍＬ加冰醋酸０.５ｍＬ)㊁乙腈－０.１ｍｏｌ Ｌ￣１醋酸铵溶液㊁乙腈－冰醋酸(０.２％)水溶液(三乙胺调ｐＨ值６.２０)３个流动相系统ꎬ最终选择乙腈－冰醋９２８５期吴丹丹等:不同产地川乌炮制前后差异性成分研究表１㊀川乌炮制前后的３０批样品中单酯型生物碱含量测定结果(％ꎬｎ＝３)Ｔａｂｌｅ１㊀Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｍｏｎｏｅｓｔｅｒａｌｋａｌｏｉｄｓｃｏｎｔｅｎｔｓｉｎ３０ｂａｔｃｈｅｓｏｆ表２㊀川乌１５批样品中双酯型生物碱含量测定结果(％ꎬｎ＝３)酸(０.２％)水溶液(三乙胺调ｐＨ值６.２０)作为流动相系统ꎬ分离度及峰形均较好ꎬ且基线较平稳ꎬ有利于指纹图谱分析ꎮ相似度分析结果显示四川省两个产地的川乌与制川乌相似度均高于陕西汉中ꎻ化学计量法分析结果显示新乌头碱和次乌头碱可能为川乌炮制前后潜在差异成分ꎬ结合魏惠珍等(２０２０)推测新乌头碱可能为不同产地川乌的潜在差异成分ꎬ苯甲酰新乌头原碱㊁苯甲酰乌头原碱和苯甲酰次乌头原碱可能为不同产地制川乌的潜在差异成分ꎻ０３８广㊀西㊀植㊀物４２卷含量测定结果显示３个产地川乌中四川江油的新乌头碱含量最高ꎬ与熊江等(２００５)研究结果一致ꎬ且明显高于另外两个产地ꎬ３个产地制川乌中四川江油的苯甲酰新乌头碱含量明显高于另外两个产地ꎮ结合上述结果分析ꎬ新乌头碱和苯甲酰新乌头碱可能分别为四川江油道地产川乌与制川乌的差异性成分ꎬ且本实验通过对比化学计量学结果发现ꎬ不同产地川乌及制川乌潜在差异成分不存在交集ꎬ对比于永军等(２００９)研究发现炮制前后化学成分差异较明显ꎬ因此川乌生品及炮制品应分别建立产地差异质量控制标准ꎮ综上所述ꎬ建立川乌与制川乌的ＨＰＬＣ指纹图谱可较为全面地反映３个产地川乌炮制前后的化学成分信息ꎬ结合化学计量学及主成分含量测定ꎬ使分析结果更科学和全面ꎬ可为完善川乌与制川乌的质量控制标准提供实验依据ꎮ参考文献:ＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａＣｏｍｍｉｓｓｉｏｎꎬ２０２０.ＰｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａｏｆｔｈｅＰｅｏｐｌｅ ｓＲｅｐｕｂｌｉｃｏｆＣｈｉｎａ:ＶｅｒｓｉｏｎⅠ[Ｍ].Ｂｅｉｊｉｎｇ:ＣｈｉｎａＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅＰｒｅｓｓ:４０－４３.[国家药典委员会ꎬ２０２０.中华人民共和国药典:一部[Ｍ].北京:中国医药科技出版社:４０－４３.]ＤＥＮＧＧＨꎬ２０１１.ＴｈｅｓｔｕｄｙｏｆｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙａｎｄｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｏｆＡｃｏｎｉｔｉＲａｄｉｘａｎｄＡｃｏｎｉｔｉＫｕｓｎｅｚｏｆｆｉｉＲａｄｉｘ[Ｄ].Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ:ＧｕａｎｇｚｈｏｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅｍｅｄｉｃｉｎｅ.[邓广海ꎬ２０１１.川乌㊁草乌炮制工艺及指纹图谱的研究[Ｄ].广州:广州中医药大学.]ＨＵＡＮＧＺＦꎬＹＩＪＨꎬＣＨＥＮＤＡꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１１.ＨＰＬＣｓｐｅｃｉｆｉｃｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｏｆＲａｄｉｘＡｃｏｎｉｔｉＰｒａｅｐａｒａｔａａｎｄｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｓｉｘｅｓｔｅｒｉｃａｌｋａｌｏｉｄｓ[Ｊ].ＣｈｉｎＪＰｈａｒｍＡｎａｌꎬ３１(２):２１７－２２１.[黄志芳ꎬ易进海ꎬ陈东安ꎬ等ꎬ２０１１.制川乌ＨＰＬＣ特征图谱研究和６种酯型生物碱的含量测定[Ｊ].药物分析杂志ꎬ３１(２):２１７－２２１.]ＬＩＭＴꎬＸＩＥＸＦꎬＣＨＥＮＨＭꎬｅｔａｌ.ꎬ２０２０.ＡｃｏｎｉｔｉｎｅｉｎｄｕｃｅｓｃａｒｄｉｏｔｏｘｉｃｉｔｙｔｈｒｏｕｇｈｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｃａｌｃｉｕｍｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙｉｎｚｅｂｒａｆｉｓｈｅｍｂｒｙｏｓａｎｄｉｎＨ９ｃ２ｃｅｌｌｓ[Ｊ].ＪＡｐｐｌＴｏｘｉｃｏｌꎬ４０(６):１－１４.ＬＩＮＨꎬＤＥＮＧＧＨꎬ２０１１.ＨＰＬＣｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｏｆＲａｄｉｘＡｃｏｎｉｔｉ[Ｊ].ＣｈｉｎＪＥｘｐＴｒａｄＭｅｄＦｏｒｍꎬ１７(３):７３－７６.[林华ꎬ邓广海ꎬ２０１１.川乌ＨＰＬＣ指纹图谱的研究[Ｊ].中国实验方剂学杂志ꎬ１７(３):７３－７６.]ＬＩＵＦꎬＨＡＮＸꎬＬＩＮꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１９.Ａｃｏｎｉｔｕｍａｌｋａｌｏｉｄｓｉｎｄｕｃｅｃａｒｄｉｏｔｏｘｉｃｉｔｙａｎｄａｐｏｐｔｏｓｉｓｉｎｅｍｂｒｙｏｎｉｃｚｅｂｒａｆｉｓｈｂｙｉｎｆｌｕｅｎｃｉｎｇｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒｒｅｌａｔｉｖｅｇｅｎｅｓ[Ｊ].ＴｏｘｉｃｏｌＬｅｔｔꎬ３０５(２):１０－１８.ＬＩＵＳꎬＬＩＦꎬＬＩＹꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１７.ＡｒｅｖｉｅｗｏｆｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌａｎｄｃｕｒｒｅｎｔｍｅｔｈｏｄｓｕｓｅｄｔｏｐｏｔｅｎｔｉａｌｌｙｒｅｄｕｃｅｔｏｘｉｃｉｔｙｏｆＡｃｏｎｉｔｕｍｒｏｏｔｓｉｎＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ[Ｊ].ＪＥｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌꎬ２０７:２３７－２５０.ＬＵＯＨꎬＨＵＡＮＧＺＦꎬＴＡＮＧＸＬꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１６.ＤｙｎａｍｉｃｖａｒｉａｔｉｏｎｐａｔｔｅｒｎｓｏｆａｃｏｎｉｔｕｍａｌｋａｌｏｉｄｓｉｎｄａｕｇｈｔｅｒｒｏｏｔｏｆＡｃｏｎｉｔｕｍｃａｒｍｉｃｈａｅｌｉｉ(Ｆｕｚｉ)ｉｎｔｈｅｄｅｃｏｃｔｉｏｎｐｒｏｃｅｓｓｂａｓｅｄｏｎｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｃｈａｎｇｅｓｏｆｎｉｎｅａｃｏｎｉｔｕｍａｌｋａｌｏｉｄｓｂｙＨＰＬＣ－ＭＳ－ＭＳ[Ｊ].ＩｒａｎＪＰｈａｒｍＲｅｓꎬ１５(１):２６３－２７３.ＬＵＯＣＭꎬＹＩＦＬꎬＸＩＡＹＬꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１８.ＣｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅｑｕａｌｉｔｙｅｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｌａｔｅｒａｌｒｏｏｔｏｆＡｃｏｎｉｔｕｍｃａｒｍｉｃｈａｅｌｉｉＤｅｂｘ.(Ｆｕｚｉ):ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｎｉｎｅａｌｋａｌｏｉｄｓａｎｄｃｈｅｍｉｃａｌｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｉｎｇｃｏｕｐｌｅｄｗｉｔｈｃｈｅｍｏｍｅｔｒｉｃａｎａｌｙｓｉｓ[Ｊ].ＪＳｅｐＳｃｉꎬ４２(５):９８０－９９０.ＭＡＬＪꎬＣＨＥＮＱＸꎬＨＡＮＬꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１６.ＳｔｕｄｙｏｎＨＰＣＥ－ＤＡＤｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｏｆａｃｏｎｉｔｕｍａｎｄａｃｏｎｉｔｅ[Ｊ].ＩｎｎＭｏｎｇｏｌＴｒａｄＣｈｉｎＭｅｄꎬ３５(１５):５.[马丽娟ꎬ陈巧霞ꎬ韩乐ꎬ等ꎬ２０１６.乌头附子类药材ＨＰＣＥ－ＤＡＤ指纹图谱的研究[Ｊ].内蒙古中医药ꎬ３５(１５):５.]ＭＩＡＯＬＬꎬＺＨＯＵＱＭꎬＰＥＮＧＣꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１９.ＤｉｓｃｒｉｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｇｅｏｇｒａｐｈｉｃａｌｏｒｉｇｉｎｏｆｔｈｅｌａｔｅｒａｌｒｏｏｔｓｏｆＡｃｏｎｉｔｕｍｃａｒｍｉｃｈａｅｌｉｉｕｓｉｎｇｔｈｅｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔꎬｍｕｌｔｉｃｏｍｐｏｎｅｎｔｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎꎬａｎｄｃｈｅｍｏｍｅｔｒｉｃｍｅｔｈｏｄｓ[Ｊ].Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓꎬ２４(２２):４１２４.ＮＹＩＲＩＭＩＧＡＢＯＥꎬＸＵＹＹꎬＬＩＹＢꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１５.ＡｒｅｖｉｅｗｏｎｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙꎬｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙａｎｄｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙｓｔｕｄｉｅｓｏｆＡｃｏｎｉｔｕｍ[Ｊ].ＪＰｈａｒｍＰｈａｒｍａｃｏｌꎬ６７(１):１－１９.ＱＩＮＹꎬＷＡＮＧＪＢꎬＺＨＡＯＹＬꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１２.ＥｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔｏｆａｂｉｏａｓｓａｙｆｏｒｔｈｅｔｏｘｉｃｉｔｙｅｖａｌｕａｔｉｏｎａｎｄｑｕａｌｉｔｙｃｏｎｔｒｏｌｏｆＡｃｏｎｉｔｕｍｈｅｒｂｓ[Ｊ].ＪＨａｚａｒｄＭａｔꎬ１９９－２００(１５):３５０－３５７.ＱＩＮＹＸꎬ２０１６.ＳｔｕｄｙｏｎｆａｃｔｏｒｓａｆｆｅｃｔｉｎｇｑｕａｌｉｔｙａｎｄｑｕａｌｉｔｙｃｏｎｔｒｏｌｉｎｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇｏｆＲａｄｉｘＡｃｏｎｉｔｉ[Ｄ].Ｂｅｉｊｉｎｇ:ＢｅｉｊｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ.[秦语欣ꎬ２０１６.川乌炮制过程中影响质量的因素分析及质量控制研究[Ｄ].北京:北京中医药大学.]ＳＨＡＷＤꎬ２０１０.ＴｏｘｉｃｏｌｏｇｉｃａｌｒｉｓｋｓｏｆＣｈｉｎｅｓｅｈｅｒｂｓ[Ｊ].ＰｌａｎｔａＭｅｄꎬ７６(１７):２０１２－２０１８.ＳＩＸＸꎬ２０１９.ＳｔｕｄｙｏｎｔｈｅｑｕａｌｉｔｙｅｖａｌｕａｔｉｏｎａｎｄｇｒａｄｅｓｔａｎｄａｒｄｏｆＡｃｏｎｉｔｉＲａｄｉｘ[Ｄ].Ｙａ ａｎ:ＳｉｃｈｕａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ.[司欣鑫ꎬ２０１９.川乌质量评价及等级标准研究[Ｄ].雅安:四川农业大学.]ＴＡＮＧＭꎬＺＨＡＯＬＣꎬＸＵＭꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１７.ＣｈｅｍｉｃａｌｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓａｎｄｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆＡｃｏｎｉｔｉｌａｔｅｒａｌｉｓＲａｄｉｘＰｒａｅｐａｒａｔａ[Ｊ].Ｇｕｉｈａｉａꎬ３７(１２):１６１４－１６２７.[唐梅ꎬ赵立春ꎬ徐敏ꎬ等ꎬ２０１７.附子化学成分和药理作用研究进展[Ｊ].广西植物ꎬ３７(１２):１６１４－１６２７.]ＷＡＮＧＣꎬＳＵＮＤＮꎬＬＩＵＣＦꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１５.Ｍｏｔｈｅｒｒｏｏｔｏｆ１３８５期吴丹丹等:不同产地川乌炮制前后差异性成分研究ＡｃｏｎｉｔｕｍｃａｒｍｉｃｈａｅｌｉｉＤｅｂｅａｕｘｅｘｅｒｔｓａｎｔｉｎｏｃｉｃｅｐｔｉｖｅｅｆｆｅｃｔｉｎＣｏｍｐｌｅｔＦｒｅｕｎｄ ｓＡｄｊｕｖａｎｔ￣ｉｎｄｕｃｅｄｍｉｃｅ:ｒｏｌｅｓｏｆｄｙｎｏｒｐｉｎ/ｋａｐｐａ￣ｏｐｉｏｉｄｓｙｓｔｅｍａｎｄｔｒａｎｓｉｅｎｔｒｅｃｅｐｔｏｒｐｏｔｅｎｔｉａｌｖａｎｉｌｌｏｉｄｔｙｐｅ￣１ｉｏｎｃｈａｎｎｅｌ[Ｊ].ＪＴｒａｎｓｌＭｅｄꎬ１３(１):２８４.ＷＡＮＧＦＰꎬＣＨＥＮＱＨꎬ２０１０.ＴｈｅＣ１９－ｄｉｔｅｒｐｅｎｏｉｄａｌｋａｌｏｉｄｓ[Ｊ].ＴｈｅＡｌｋａｌｏｉｄｓＣｈｅｍＢｉｏｌꎬ６９:１－５７７.ＷＥＩＨＺꎬＹＡＮＧＬꎬＳＯＮＧＸＺꎬｅｔａｌ.ꎬ２０２０.ＳｔｕｄｙｏｎｑｕａｌｉｔｙｍａｒｋｅｒｏｆＡｃｏｎｉｔｉＲａｄｉｘｂａｓｅｄｏｎｍｕｌｔｉｖａｒｉａｔｅｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌａｎａｌｙｓｉｓ[Ｊ].ＣｈｉｎＭｅｄＭａｔꎬ４３(７):１６５８－１６６２.[魏惠珍ꎬ杨磊ꎬ宋细忠ꎬ等ꎬ２０２０.基于多元统计分析的川乌质量标志物研究[Ｊ].中药材ꎬ４３(７):１６５８－１６６２.]ＸＩＯＮＧＪꎬＴＡＮＮＨꎬＺＨＯＵＪꎬ２００５.ＦｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔａｎｄａｌｋａｌｏｉｄｃｏｎｔｅｎｔｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＲａｄｉｘＡｃｏｎｉｔｉ[Ｃ].Ｗｕｈａｎ:Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓｏｆｔｈｅ８ｔｈＮａｔｉｏｎａｌＳｙｍｐｏｓｉｕｍｏｎｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅｍｅｄｉｃｉｎｅａｎｄｎａｔｕｒａｌｍｅｄｉｃｉｎｅａｎｄｔｈｅ５ｔｈＮａｔｉｏｎａｌＳｙｍｐｏｓｉｕｍｏｎｍｅｄｉｃｉｎａｌｐｌａｎｔｓａｎｄｐｌａｎｔｐｈａｒｍａｃｙ:３４３.[熊江ꎬ谭宁华ꎬ周俊ꎬ２００５.川乌的指纹图谱及生物碱含量测定[Ｃ].武汉:第八届全国中药和天然药物学术研讨会与第五届全国药用植物和植物药学学术研讨会论文集:３４３.]ＹＡＮＧＬꎬ２０２０.ＳｔｕｄｙｏｆｑｕａｌｉｔｙｓｔａｎｄａｒｄｏｆＡｃｏｎｉｔｉＲａｄｉｘ￣ｑｕａｌｉｔｙｅｖａｌｕａｔｉｏｎａｎｄｇｒａｄｅｓｔａｎｄａｒｄｒｅｓｅａｒｃｈ[Ｄ].Ｎａｎｃｈａｎｇ:ＪｉａｎｇｘｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ.[杨磊ꎬ２０２０.川乌质量标准化研究－质量评价和等级标准研究[Ｄ].南昌:江西中医药大学.]ＹＥＸＴꎬＺＨＯＮＧＬＹꎬＺＨＡＮＧＤＹꎬｅｔａｌ.ꎬ２０２０.Ｒｅｓｅａｒｃｈｐｒｏｇｒｅｓｓｏｎｍｕｌｔｉ￣ｍａｔｅｒｉａｌａｎｄｍｕｌｔｉ￣ｐｒｏｃｅｓｓｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇｏｆＡｃｏｎｉｔｉＲａｄｉｘ[Ｊ].ＣｈｉｎＪＥｘｐＴｒａｄＭｅｄＦｏｒｍꎬ２６(１８):２０２－２０９.[叶协滔ꎬ钟凌云ꎬ张大永ꎬ等ꎬ２０２０.川乌的多物料ꎬ多流程炮制研究进展[Ｊ].中国实验方剂学杂志ꎬ２６(１８):２０２－２０９.]ＹＵＨＨꎬＬＩＭꎬＬＩＹＢꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１９.ＢｅｎｚｏｙｌａｃｏｎｉｔｉｎｅｉｎｈｉｂｉｔｓｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆＩＬ￣６ａｎｄＩＬ￣８ｖｉａＭＡＰＫꎬＡｋｔꎬＮＦ￣κＢｓｉｇｎａｌｉｎｇｉｎＩＬ￣１β￣ｉｎｄｕｃｅｄｈｕｍａｎｓｙｎｏｖｉａｌｃｅｌｌｓ[Ｊ].ＢｉｏｌＰｈａｒｍＢｕｌｌꎬ４３(２):３３４－３３９.ＹＵＹＪꎬＬＩＪＳꎬＣＡＩＨꎬｅｔａｌ.ꎬ２００９.ＴｈｅｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅｓｔｕｄｙｏｆＨＰＬＣｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｂｅｔｗｅｅｎＲａｄｉｘＡｃｏｎｉｔｉａｎｄＲａｄｉｘＡｃｏｎｉｔｉＰｒｅｐａｒａｔａ[Ｊ].ＣｈｉｎＡｒｃｈＴｒａｄＣｈｉｎＭｅｄꎬ２７(１１):２４５６－２４５８.[于永军ꎬ李俊松ꎬ蔡皓ꎬ等ꎬ２００９.川乌炮制前后高效液相色谱指纹图谱比较研究[Ｊ].中华中医药学刊ꎬ２７(１１):２４５６－２４５８.]ＺＨＡＯＦＣꎬＮＩＥＪＨꎬＷＡＮＧＷꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１４.ＨＰＬＣｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔａｎａｌｙｓｉｓｏｆＡｃｏｎｉｔｕｍＨｅｒｂａｌｓｉｎＸｉｎｊｉａｎｇ[Ｊ].ＪＣｈｉｎＰｈａｒｍＳｃｉꎬ４９(２４):２１５９－２１６４.[赵翡翠ꎬ聂继红ꎬ王伟ꎬ等ꎬ２０１４.基于ＨＰＬＣ指纹图谱的准噶尔乌头化学亲缘关系研究[Ｊ].中国药学杂志ꎬ４９(２４):２１５９－２１６４.]ＺＨＡＯＪＮꎬＨＵＡＨꎬＤＡＩＹꎬｅｔａｌ.ꎬ２０２０.Ｄａｏ￣ｄｉｈｅｒｂｓｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙａｎｄｎｅｗｉｄｅａｓｏｆＤａｏ￣ｄｉｈｅｒｂｓｓｔａｎｄａｒｄｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ[Ｊ].ＣｈｉｎＪＣｈｉｎＭａｔＭｅｄꎬ４５(４):７－１２.[赵军宁ꎬ华桦ꎬ戴瑛ꎬ等ꎬ２０２０.道地药材药理学与道地药材标准构建新思路[Ｊ].中国中药杂志ꎬ４５(４):７－１２.]ＺＨＥＮＧＱＦꎬＺＨＡＯＹＬꎬＷＡＮＧＪＢꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１４.Ｓｐｅｃｔｒｕｍ－ｅｆｆｅｃｔｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓｂｅｔｗｅｅｎＵＰＬＣｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｓａｎｄｂｉｏａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆｃｒｕｄｅｓｅｃｏｎｄａｒｙｒｏｏｔｓｏｆＡｃｏｎｉｔｕｍｃａｒｍｉｃｈａｅｌｉｉＤｅｂｅａｕｘ(Ｆｕｚｉ)ａｎｄｉｔｓｔｈｒｅｅｐｒｏｃｅｓｓｅｄｐｒｏｄｕｃｔｓｏｎｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌｇｒｏｗｔｈｃｏｕｐｌｅｄｗｉｔｈｃａｎｏｎｉｃａｌｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎａｎａｌｙｓｉｓ[Ｊ].ＪＥｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌꎬ１５３(３):６１５－６２３.ＺＨＵＨＢꎬＷＡＮＧＣＹꎬＱＩＹꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１３.ＦｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔａｎａｌｙｓｉｓｏｆＲａｄｉｘＡｃｏｎｉｔｉｕｓｉｎｇｕｌｔｒａ￣ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ￣ｅｌｅｃｔｒｏｓｐｒａｙｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ/ｔａｎｄｅｍｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ(ＵＰＬＣ￣ＥＳＩ/ＭＳｎ)ｃｏｍｂｉｎｅｄｗｉｔｈｓｔｏｉｃｈｉｏｍｅｔｒｙ[Ｊ].Ｔａｌａｎｔａꎬ１０３:５６－６５.(责任编辑㊀周翠鸣)２３８广㊀西㊀植㊀物４２卷。
制川乌高压蒸法炮制工艺优化研究
制川乌高压蒸法炮制工艺优化研究【摘要】制川乌是一种重要的中药材，其炮制工艺对其药效具有重要影响。
本文通过研究制川乌高压蒸法炮制工艺优化，旨在提高其药效和品质。
首先介绍了制川乌高压蒸法的概述，然后探讨了炮制工艺优化的方法，包括温度、压力等因素的优化。
通过实验设计和操作流程，验证了优化方法的有效性，并分析了实验结果。
最后给出了工艺优化建议，强调了制川乌高压蒸法炮制工艺优化的重要性。
未来研究可以进一步优化工艺参数，提高制川乌的药效。
本研究为制川乌的炮制工艺优化提供了理论基础和实践指导，对中药材的质量提升具有积极意义。
【关键词】制川乌、高压蒸法、炮制工艺、优化研究、实验设计、实验结果、工艺建议、重要性、未来展望、结论总结1. 引言1.1 研究背景制川乌是一种中药材，具有补血益气、活血化瘀等功效，被广泛应用于中医临床。
而其中的川乌高压蒸法炮制工艺是一种常用的加工方法。
目前存在着一些问题，如炮制时间长、成本高、炮制效果不稳定等。
对制川乌高压蒸法炮制工艺进行优化研究具有积极的实际意义。
研究背景中，我们需要明确指出目前存在的问题以及对研究的重要性进行合理解释。
根据现有文献资料显示，川乌的质量与药效息息相关，而炮制工艺是影响川乌质量的重要因素之一。
目前对于制川乌高压蒸法工艺优化的研究还较少，缺乏系统性和深入性。
通过对该工艺进行优化研究，可以提高川乌的药效，降低生产成本，促进中药材的质量控制与现代化生产。
本研究旨在探究制川乌高压蒸法炮制工艺的优化方法，为中药材炮制工艺的提升提供理论与实践支持。
1.2 研究意义制川乌是一种常用的中药材，具有活血化瘀、理气止痛的功效。
传统的材料炮制方式存在一些问题，如生产效率低、药效不稳定等。
对制川乌高压蒸法炮制工艺进行优化研究具有重要意义。
优化工艺可以提高药材的质量和药效稳定性。
通过优化炮制工艺，可以使得制川乌的药效更加稳定，保证药材质量的一致性，使得其在临床应用中效果更加可靠。
研究制川乌高压蒸法炮制工艺的优化，对于推动中药炮制技术的创新和发展具有重要意义。
市场上制川乌的质量评价
市场上制川乌的质量评价摘要】目的对市场上的制川乌进行质量评价，为中药生产提供质量标准。
方法采用HPLC法检测市场上的制川乌的生物碱含量，对其进行质量评价。
结果除沈阳地区外，安徽、南京、山东地区的制川乌均为合格品。
结论市场上的制川乌不都是合格品，因此应加强管制，保证质量。
【关键词】制川乌 HPLC【中图分类号】R2 【文献标识码】B 【文章编号】2095-1752（2014）20-0375-02Quality evaluation of on the market of aconiti radix【Abstract】 Objective study on the quality of radix aconite on the market for Chinese traditional medicine production of quality standards. Method Use HPLC method to detect the alkaloid content of radix aconite for quality evaluation. Result In addition to the shenyang , anhui, nanjing,, shandong area of radix aconiti are qualified products. Conclusion On the market of radix aconiti are all not qualified, so it should be strengthen controlled ensuring the quality.【Key words】 Aconiti Radix HPLC中国药典中记载乌头有大毒，目前人们对制川乌的有效成分[1]研究较多，为检测市场上的制川乌是否合格，本实验利用HPLC技术对沈阳等四个地区的制川乌进行含量测定。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
针对中药川乌的多成分同时检测并评价其药动学的分析进展
发表时间：2018-11-07T12:02:17.627Z 来源：《中国误诊学杂志》2018年第26期作者：陆一一[导读] 文章主要从相关学者的研究报道中总结了中药川乌含量检测与药动学情况，现作以下的综述。
北京中医药大学附属护国寺中医医院药剂科 100035 摘要：中药川乌属于一种常见药物，其主要成分即为二萜生物碱。
文章主要从相关学者的研究报道中总结了中药川乌含量检测与药动学情况，现作以下的综述。
关键词：中药川乌；成分检测；药动学；进展 1.前言
川乌属于毛茛科植物乌头（AconitumcarmichaeliiDebx.）干燥的母根，大毒，主要功效是温经止痛与祛风除湿，在心腹冷痛、风寒湿痹与关节疼痛等病症中比较常用。
川乌的化学成分比较复杂，包含生物碱类的成分，而有效的成分为二萜生物碱，在中枢神经、抗炎、心血管、镇痛以及镇静方面有较好的作用。
近几年，越来越多学者开始研究二萜生物碱，并且发表了不少报道，为川乌的医学应用提供了参考。
2.川乌含量的测定
液相色谱-质谱联用法（LC-MS）与高效液相色谱法（HPLC）在中药的质量控制之中应用越发广泛，而中药饮片与复方制剂之中的化学成分使得人们开始重视多指标与多成分的检测。
相关研究[1]中采取HPLC方法，经对新乌头碱、双酯型生物碱乌头碱以及次乌头碱总量限度进行控制，确保川乌药材质量，川乌制药主要经对苯甲酰次乌头原碱以及双酯型生物碱乌头碱等进行控制，确保川乌有效性以及安全性。
有学者[2]经HPLC方法构建乌头汤、川乌与制川乌三类双酯型新乌头碱、生物碱的乌头碱以及次乌头碱定量分析的方法，然而，使用容易损毁色谱柱固定相强碱性流动相的三乙胺与二乙胺，并且只可以定量分析双酯型的生物碱。
有学者[3]把A相[乙腈-四氢呋喃（25∶15）]-B相[0.1mol/L醋酸铵]当作流动相，实施梯度的洗脱，构建新乌头碱、乌头碱以及次乌头碱等定量分析的方法，这种方法可以防止三乙胺与二乙胺等强碱性的流动相损坏了流动相对色谱柱，同时可以同时测定单酯型与双酯型的生物碱。
3.评估二萜生物碱的药动学 3.1生物样品前处理
3.1.1液液的萃取方法
乌头二萜生物碱属于脂溶性的生物碱，置于合适溶剂之中，其溶解度比水相之中溶解度要大，在尿样与血样等生物的样品之中，含有诸多内源性的杂质，并且是强极性水溶性的杂质，而采取适当有机溶剂能够将大部分的杂质去除。
这种发光法广泛应用于乌头类二萜生物碱生物样品的测定中，经常会应用乙酸乙酯、乙醚以及氯仿有机类试剂萃取样品，主要优势是费用低廉与操作简单，但是容易出现乳化的现象，造成药物损失，降低了回收率。
3.1.2固相的萃取方法
近几年，在生物样品的纯化中开始广泛应用固相萃取方法，可以把有离子交换、吸附与分配等性质担体当作萃取剂，填入到小柱之中，通过溶剂淋洗以后，通过生物样品，在担体上保留杂质或是药物，采取适当的溶剂将杂质洗去，经适当的溶剂洗脱药物。
经固相萃取方法处理含乌头类的二萜生物碱尿样以及血样，研究结果得出，这种方法的速度比较快，没有乳化的现象，可以同时提取中药的多种成分，有较高的提取率。
3.1.3沉淀蛋白方法
早生物样品之中非必要的成分去除时常用方法即为沉淀蛋白方法，这种方法是降低杂质对于待测成分干扰。
尿沉淀的蛋白法主要包含等电点的沉淀法、盐析法以及有机溶剂的沉淀法等，若溶剂中含有丙酮、乙腈以及甲醇等，可以采取沉淀蛋白方法，这种方法主要优势是操作比较简单，并且检测的用量比较少，无需使用较多溶剂，可以降成本降低，缩小溶剂危害，并且有较高的可靠性与灵敏度。
3.2分析体中二萜生物碱药动学的行为特征
现阶段，研究川乌二萜生物碱药动学方面，主要集中新乌头碱、在双酯型的生物碱乌头碱以及次乌头碱。
经研究[4]虚寒大鼠、正常大鼠以及虚热大鼠体中药动学的研究可知，在虚热的大鼠体中次乌头碱达峰值的速度要比虚寒大鼠、正常大鼠快，说明各种状态大鼠的体中次乌头碱药动学存在差异，并且在虚寒状态中次乌头碱可以对症进行治疗，对虚热状态属于反证，正常状态的作用强烈时表现出毒性，给对症下药与辨证论治奠定了基础。
有学者[5]按照大鼠体重尾静脉注射1.8g/kg四逆汤的制剂，研究表明在大鼠的体中，四逆汤的制剂中乌头生物碱呈现出一级动力学的消除，与静脉注射以后开放房室的模型相符，其半衰期是0.93201小时。
有学者[6]采取液质的联用技术研究新乌头碱、乌头碱以及次乌头碱在大鼠体中药动学，得出这三种生物碱的吸收比较迅速，且半衰期与达峰值时间差异不够显著，说明大鼠体中这三种生物碱消除速率、吸收速率没有显著差异。
4.结语
总之，研究中药质量的控制以及中药的药动学，主要目的就是确保用药有效性以及安全性。
现阶段，不同批次或是不同产地川乌药材之中含有的化学成分存在显著差异，并且质量不一。
在体中，川乌化学的成分药动学研究相对复杂，经过研究新乌头碱、双酯型的生物碱乌头碱以及次乌头碱得出，在体中乌头碱类的生物碱可以迅速吸收，并且含有川乌复方之中，经配伍组的药材能够影响到新乌头碱的生物碱吸收情况。
所以在研究复方中的川乌成分药动学时，需要对配伍比例以及配伍药材进行充分考虑，防止影响了川乌的化学成分，继而给临床的治疗奠定基础。
参考文献：
[1]杨华生，闻丽珍，黎晓丽等.基于经皮给药研究制川乌与白芍配伍对大鼠皮肤及肝微粒体中CYP450活性的影响[J].中国医院药学杂志，2018，38（01）：5-9，13.
[2]黎晓丽，吴璐，吴维刚等.在体皮肤微透析法研究制川乌白芍配伍对6种酯型生物碱局部药动学的影响[J].中国中药杂志，2016，41（05）：948-954.
[3]王涛，林静，狄舒男等.乌头汤及其拆方对60例寒湿型类风湿性关节炎TNF－α、IL－6的临床疗效观察[J].中医药学报，2016，44（01）：85-87.
[4]杨坤宝，尹长江，赵淑敏等.生川乌水浸液对大鼠肾超微结构的影响及其与配伍生半夏比例的关系[J].解剖学杂志，2016，39（05）：557-560.
[5]巩晓宇，陆燕萍，邱凤邹等.近红外漫反射光谱结合相关系数法快速检测制川乌中双酯型生物碱的限量[J].中国医院用药评价与分析，2017，17（08）：1036-1038.
[6]张晓朦，张冰，李凡等.川草乌复方联合西药治疗类风湿性关节炎的有效性与安全性Meta分析[J].中国中药杂志，2018，43（02）：227-233.。