玻璃器皿的清洗包扎和高压蒸汽灭菌(2)课件
实验九 玻璃器皿的清洗包扎、培养基的制备及灭菌PPT文档共31页
25、学习是劳动，是充满思想的劳动。——乌申斯基
谢谢！
实验九 玻璃器皿的清洗包扎、培养基 的制备及灭菌
36、“不可能”这个字(法语是一个字 )，只 在愚人 的字典 中找得 到。--拿 破仑。 37、不要生气要争气，不要看破要突 破，不 要嫉妒 要欣赏 ，不要 托延要 积极， 不要心 动要行 动。 38、勤奋，机会，乐观是成功的三要 素。(注 意：传 统观念 认为勤 奋和机 会是成 功的要 素，但 是经过 统计学 和成功 人士的 分析得 出，乐 观是成 功的第 三要素 。
39、没有不老的誓言，没有不变的承 诺，踏 上旅途 ，义无 反顾。 40、对时间的价值没有没有深切认识 的人， 决不会 坚韧勤 勉。
21、要知道对好事的称颂过于夸大，也会招来人们的反感轻蔑和嫉妒。——培根 22、业精于勤，荒于嬉；行成于思，毁于随。——韩愈
实验2 常用玻璃器皿的清洗和包扎
实验二常用玻璃器皿的清洗和包扎一、实验目的1.熟悉实验所需各种常用玻璃器皿的名称和规格2.掌握玻璃器皿等器材的清洗、包扎技术二、原理为确保实验顺利地进行，要求把实验所用的玻璃器皿清洗干净。
为保持灭菌后和无菌状态，需要对培养皿、吸管等进行包扎，对试管和三角瓶等加塞棉塞。
这些工作看起来很普通简单，但如操作不当或不安操作规定去做，则会影响实验结果，甚至会导致试验的失败。
三、试剂和仪器1.高压蒸汽灭菌锅、试管、三角瓶、培养皿和吸管、棉线、纱布、棉花、牛皮纸、报纸等2.洗涤工具、去污粉和相应洗涤液四、实验内容（一）玻璃器皿的清洗：●新购的玻璃器皿的洗涤将器皿放入２％盐酸溶液中浸泡数小时，以除去游离的碱性物质，最后用流水冲净。
对容量较大的器皿，如大烧瓶、量筒等，洗净后注入浓盐酸少许，转动容器使其内部表面均沾有盐酸，数分钟后倾去盐酸，再以流水冲净，倒置于洗涤架上晾干，即可使用。
●常用旧玻璃器皿的洗涤确实无病原菌或未被带菌物污染的器皿，使用前后，可按常规用洗衣粉水进行刷洗；吸取过化学试剂的吸管，先浸泡于清水中，待到一定数量后再集中进行清洗。
●带菌玻璃器皿的洗涤凡实验室用过的菌种以及带有活菌的各种玻璃器皿，必须经过高温灭菌或消毒后才能进行刷洗：1.带菌培养皿、试管、三角瓶等物品，做完实验后放入消毒桶内，用0.1MPa灭菌20～30 min后再刷洗。
含菌培养皿的灭菌，底盖要分开放入不同的桶中，再进行高压灭菌。
2.带菌的吸管、滴管，使用后不得放在桌子上，立即分别放入盛有3～5%来苏尔或5%石炭酸或0.25%新洁尔灭溶液的玻璃缸（筒）内消毒24h后，再经0.1MPa灭菌20 min后，取出冲洗。
3.带菌载玻片及盖玻片，使用后不得放在桌子上，立即分别放入盛有3～5%来苏尔或5%石炭酸或0.25%新洁尔灭溶液的玻璃缸（筒）内消毒24h后，用夹子取出经清水冲干净。
新购置的载片，先用2%盐酸浸泡数小时，冲去盐酸。
再放浓洗液中浸泡过液，用自来水冲净洗液，浸泡在蒸馏水中或擦干装盒备用。
玻璃器具等的清洗、烘干、包扎、灭菌实验
（3） 试管和三角瓶：试管和三角瓶都需要做合适的棉塞，棉塞可起过滤作用，避免空气中的微生物进入容器。制作棉塞时，要求棉花紧贴玻璃壁，没有皱纹和缝隙，松紧适宜。过紧易挤破管口和不易塞入；过松易掉落和污染。棉塞的长度不小于管口直径的2倍，约2/3塞进管口。
目前，国内已开始采用塑料试管塞，可根据所用的试管的规格和试验要求来选择和采用合适的塑料试管塞。
灭菌原理：高压蒸汽灭菌是将待灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅隔套间的水沸腾而产生蒸汽。待水蒸汽急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽，然后关闭排气阀，继续加热，此时由于蒸汽不能溢出，而增加了灭菌器内的压力，从而使沸点增高，得到高于100℃的温度。导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。适用于一般培养基、玻璃器皿、无菌水、金属用具。一般培养基在121．3℃灭菌20分钟即可。干热灭菌是利用高温使微生物细胞内的蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。细胞内的蛋白质凝固性与其本身的含水量有关，在菌体受热时，当环境和细胞内含水量越大，则蛋白质凝固就越快，反之含水量越小，凝固缓慢。因此，与湿热灭菌相比，干热灭菌所需温度高（160—170℃），时间长（1—2小时）。但干热灭菌温度不能超过180℃，否则，包器皿的纸或棉塞就会烤焦，甚至引起燃烧，因而一般塑料制品不能用干热灭菌。
3、 带菌载玻片及盖玻片，使用后不得放在桌子上，立即分别放入盛有3～5%来苏尔或5%石炭酸或0.25%新洁尔灭溶液的玻璃缸（筒）内消毒24h后，用夹子取出经清水冲干净。
器皿的洗涤包扎灭菌
玻璃器皿的洗涤、 玻璃器皿的洗涤、包扎和灭菌
指导教师： 指导教师：袁勇军 张捷 管峰
一、实验目的
1、掌握玻璃器皿的洗涤和包扎方法； 2、了解玻璃器皿的灭菌方法和原理
二、实验原理
为确保实验顺利地进行，要求把实 为确保实验顺利地进行， 验所用的玻璃器皿清洗干净。 验所用的玻璃器皿清洗干净。 为保持灭菌后和无菌状态，需要对 为保持灭菌后和无菌状态， 培养皿、吸管等进行包扎， 培养皿、吸管等进行包扎，
2、旧玻璃器皿的洗涤 试管、培养皿、三角瓶：
洗衣粉和去污粉洗刷，自来水冲洗
装有固体培养基：
刮掉，洗涤
带病原菌培养物的器皿：
先高压蒸汽灭菌，倒去培养物后再洗涤
（二）玻璃器皿的包扎
培养皿的包扎 1、培养皿的包扎 一般以5 一般以5-8套培养皿做一包 吸管的包扎 2、吸管的包扎 准备好干燥的吸管，在距其粗头顶端约0.5cm处 准备好干燥的吸管，在距其粗头顶端约0.5cm处 0.5cm 塞一小段1.5cm长的棉花， 1.5cm长的棉花 ，塞一小段1.5cm长的棉花，然后将吸管尖端斜放 在旧报纸条的近左端，与报纸成30度角， 30度角 在旧报纸条的近左端，与报纸成30度角，并将左 端多余的一段纸覆折在吸管上， 端多余的一段纸覆折在吸管上，再将整根吸管卷 入报纸，右端多余的报纸打一小结。 入报纸，右端多余的报纸打一小结。
三、实验器材 高压蒸汽灭菌锅、试管、三角瓶、培养 高压蒸汽灭菌锅、试管、三角瓶、 皿和吸管、棉线、纱布、棉花、 皿和吸管、棉线、纱布、棉花、报纸等
四、操作步骤
）、玻璃器皿的洗涤方法 （一）、玻璃器皿的洗涤方法 1、新玻璃器皿的洗涤
在2%的盐酸溶液中浸泡数小时，用自来水冲洗干 2%的盐酸溶液中浸泡数小时 的盐酸溶液中浸泡数小时， 本次实验不要求） 净（本次实验不要求）
实验二玻璃器皿的清洗、包扎与灭菌
1、玻璃器皿的清洗方法 (1)、新购的玻璃器皿
首先浸泡于１～２％的盐酸或洗涤液
中数 小时，最后用流水冲净。
（2）、使用过的玻璃器皿的清洗方法
试管、培养皿、等 刷 洗然后自来水冲洗干净。 若内壁水均匀分布成一薄层而不出 现水珠， 为油污完全洗净。否则，再浸泡数 小时。 可用瓶刷及去污粉
装有固体培养基的器皿，应先将其刮去，再洗涤 带菌的先浸在2%煤酚皂溶液或0.25%新洁尔 灭消毒液内24h或煮沸0.5h，再洗涤 带病原菌的先高压蒸汽灭菌，然后将培养
养基的灭菌，也可用于玻璃器皿的灭菌
高 压 蒸 汽 消 毒 器
高 压 蒸 汽 消 毒 器
（干热灭菌）
(1)将培养皿、吸管等玻璃器皿洗净干燥
后，用报纸包好，或装入特制的铁筒中。
(2)将包装好的玻璃仪器摆入电热烘箱中， 彼此间留有一定的空隙以便流通空气。
(3)关紧箱门，打开排气孔接上电源。
(4)待箱内空气排出到一定程度时，关闭 上排气孔，继续加热至一定温度后，调
附：棉塞的制作
棉塞的作用
防止杂菌污染 保证通气良好
棉塞：加塞时，1／3在试管口外，2／3在试管 口内。如图2-2所示。做棉塞的棉花要选 纤维较长的，一般不用脱脂棉做棉塞 通气塞：几层纱布（一般8层）相互重叠，或两 层纱布间均匀铺一层棉花而成
3、消毒与灭菌
消毒：一般是消灭病原菌和有害微生物的
物倒去，再进行洗涤
玻璃吸管 立即浸泡在自来水中，免得干燥后难以冲洗 干净，待实验结束后集中冲洗 若吸管顶部塞有棉花，则先用水将棉花冲 出，再洗涤 吸过微生物培养物的吸管应立即浸泡在盛有 2%的煤酚皂溶液或 0.25%新洁尔灭消毒液 内，24h后方可取出冲洗 吸管内部如有油垢，同样应先在洗涤液中 浸泡数小时，然后冲洗
实训一常用玻璃器皿的清洗、包扎及干热灭菌
实训一常用玻璃器皿的清洗、包扎及干热灭菌实训一常用玻璃器皿的清洗、包扎及干热灭菌一、实验目的1、熟悉微生物实验常用玻璃器皿的名称、规格及配套使用物品；2、掌握实验室常用玻璃器皿的清洗和包扎方法；3、了解干热灭菌原理，掌握玻璃器皿干热灭菌操作技术。
二、实验原理（一）微生物常用器皿、物品微生物实验常用玻璃器皿的名称、规格及配套使用物品介绍，见表1-1。
表1-1微生物实验常用玻璃器皿的名称和规格名称烧杯常用规格及配套使用物品50mL，100mL，250mL，500mL，1000mL，2000mL，3000mL，5000mL配套烧杯刷：大号，中号，小号100mL，250mL，500mL，1000mL，2000mL，3000mL配套三角瓶刷：大号，中号，小号无色：25mL，50mL，100mL，250mL，500mL，1000mL，2000mL棕色：25mL，50mL，100mL，250mL，500mL，1000mL，2000mL5mL，10mL，25mL，50mL，100mL，250mL，500mL，1000mL，2000mL1mL（分度0.01mL），2mL（分度0.02mL），5mL（分度0.05mL），移液管10mL（分度0.1mL），20mL（分度0.1mL），50mL（分度0.5mL）配套洗耳球：大号，中号，小号培养皿35mm，75mm，90mm，120mm，150mm配套封口膜：12*12mm，16*16mm150mL配套：火柴60mL，80mL漏斗配套滤纸、漏斗架定性滤纸：7cm，9cm，11cm，12.5cm，15cm 定量滤纸：7cm，9cm，11cm，12.5cm，15cm三角瓶容量瓶量筒酒精灯接上表1-1称号酸式滴定管：50mL滴定管碱式滴定管：50mL配套滴定台、胡蝶夹滴瓶无色：30mL，60mL，120mL常用规格及配套使用物品（小口瓶）棕色：30mL，60mL，120mL广口瓶无色：125mL，250mL，500mL，1000mL，2000mL棕色：125mL，250mL，500mL，1000mL，2000mL10*100mm，12*100mm，15*100mm，15*150mm，18*180mm，20*200mm试管配套试管刷：大号，中号，小号配套试管架：12.5mm，15.5mm，18.5mm，20.5mm载玻片盖玻片温度计坩埚研钵25*75mm，30*60mm，100*100mm，500*500mm，900*600mm18*18mm，20*20mm，22*22mm，24*24mm，24*32mm，24*50mm0-100℃，0-200℃，0-300℃30mL，50mL配套坩埚钳80mm，100mm，120mm，150mm常用玻璃器皿用途：1、烧杯用于盛装、转移、配制、加热造就基及试剂。
实验一玻璃器皿的洗涤、包扎、干燥及灭菌
实验一、玻璃器皿的洗涤、包扎、干燥及灭菌一、目的要求1、掌握实验室常用玻璃器皿的清洗、干燥和包扎方法。
2、了解湿热和干热灭菌的原理并掌握有关的操作技术。
二、原理为确保实验顺利地进行要求把实验所用的玻璃器皿清洗干净并干燥，微生物实验还要进行灭菌。
为保持灭菌后和无菌状态，需要对培养皿，吸管等进行包扎，对试管和三角瓶等加塞棉塞。
这些工作看起来很普通简单，但如操作不当或不安操作规定去做，则会影响实验结果，甚至会导致试验的失败。
1、玻璃器皿的清洗①不能用有腐蚀作用的化学试剂，也不能使用比玻璃硬度大的物品来擦拭玻璃器皿；新的玻璃器皿应用2的盐酸溶液浸泡数小时，用水充分洗干净。
②用过的器皿应立即洗涤。
③强酸，强碱，琼脂等能腐蚀，阻塞管道的物质不能直接倒在洗涤槽内，必须到在废物缸内。
一般的器皿都可用去污粉，肥皂或配成5的热肥皂水来清洗。
油脂很重的器皿应先将油脂擦去。
沾有煤膏，焦油及树脂一类物质，可用浓硫酸或40氢氧化钠或用洗液浸泡；沾有蜡或油漆物，可加热使之熔融后揩去，或用有机溶剂苯，二甲苯，汽油，丙酮，松节油等揩去。
④洗涤后的器皿应达到玻璃壁能被水均匀湿润而无条纹和水珠。
2、器皿包扎为了灭菌后仍保持无菌状态，各种玻璃器皿均需包扎。
3、干燥做实验应经常要用到的仪器应在每次实验完毕后洗净干燥备用。
用于不同实验对干燥有不同的要求，一般定量分析用的烧杯、锥形瓶等仪器细净即可使用，而用于精密分析的仪器很多要求是干燥的，有的要求无水痕，有的要求无水。
应根据不同要求进行干燥仪器。
（1）、烘干洗净的仪器控去水分，放在烘箱内烘干，烘箱温度为105110℃烘1 小时左右。
也可放在红外灯干燥箱中烘干。
此法适用于一般仪器。
称量瓶等在烘干后要放在干燥器中冷却和保存。
带实心玻璃塞的及厚壁仪器烘干时要注意慢慢升温并且温度不可过高，以免破裂。
量器不可放于烘箱中烘。
硬质试管可用酒精灯加热烘干，要从底部烤起，把管口向下，以免水珠倒流把试管炸裂，烘到无水珠后把试管口向上赶净水气。
实验九 玻璃器皿的清洗包扎、培养基的制备及灭菌共31页PPT
END
实验九 玻璃器皿的清洗包扎、培养基 的制备及灭菌
Hale Waihona Puke 21、静念园林好，人间良可辞。 22、步步寻往迹，有处特依依。 23、望云惭高鸟，临木愧游鱼。 24、结庐在人境，而无车马喧；问君 何能尔 ？心远 地自偏 。 25、人生归有道，衣食固其端。
16、业余生活要有意义，不要越轨。——华盛顿 17、一个人即使已登上顶峰，也仍要自强不息。——罗素·贝克 18、最大的挑战和突破在于用人，而用人最大的突破在于信任人。——马云 19、自己活着，就是为了使别人过得更美好。——雷锋 20、要掌握书，莫被书掌握；要为生而读，莫为读而生。——布尔沃
玻璃器皿的清洗包扎及高压蒸汽灭菌课件
准备工具
准备清洗工具，如刷子、 洗涤剂、水桶等。
手工清洗步骤
01
02
03
04
浸泡
将玻璃器皿放入装满洗涤剂和 水的混合液中浸泡一段时间，
以松解残留物。
刷洗
使用刷子轻轻刷洗玻璃器皿表 面，注意不要划伤器皿。
冲洗
用清水彻底冲洗玻璃器皿，确 保洗涤剂和残留物被完全冲走
。
晾干
将玻璃器皿放置在干净的地方 晾干，避免直接阳光照射。
情况应及时处理。
灭菌完成后，应先关闭灭菌器 ，再打开排气阀，避免蒸汽喷
出烫伤操作人员。
灭菌过程中的防护措施
操作人员应穿戴防护服、手套 、口罩等个人防护用品。
在灭菌过程中，应保持室内通 风良好，避免室内温度过高。
对于易燃、易爆、易腐蚀的物 品，应单独存放并采取相应的 安全措施。
意外情况的应急处理
如发生意外情况，如灭菌器故障、泄漏等，应立即停止使用，并采取相应的应急措 施。
根据物品的形状、大 小和重量选择合适的 包扎材料和方法。
03
高压蒸汽灭菌原理
微生物的耐热性
微生物的耐热性
不同微生物对热的敏感程度不同，有些微生物在高温下容 易死亡，而有些则具有较高的耐热性。了解微生物的耐热 性对于确定高压蒸汽灭菌的条件非常重要。
微生物的致死温度
在一定的时间内，高于某个温度微生物会死亡。致死温度 是杀灭90%微生物所需达到的温度。
包扎玻璃器皿
为了避免在灭菌过程中破裂和污染，需要对玻璃器皿进行适当的包 扎。
装载物品
将清洗干净的玻璃器皿放入灭菌器内 ，尽量将大小不同的器皿分开摆放， 以免小的器皿被大的器皿遮挡而影响 灭菌效果。
将装有玻璃器皿的灭菌篮或灭菌盘放 入灭菌器内，并确保其放置稳定。
食品微生物—常用玻璃器皿的清洗、干燥和包扎
玻璃器皿的包扎
• 微生物学实验用的玻璃器皿大多数需要灭菌后才能使用，玻 璃器皿在灭菌前要先用牛皮纸或报纸包扎起来，以保护玻璃器皿 在灭菌后一段时间内仍能保持无菌状态。否则，玻璃器皿灭菌后 暴露在空气中，空气的微生物很容易进入玻璃器皿内，造成染菌 ，影响实验效果甚至导致实验失败。
玻璃器皿的包扎
1. 培养皿：洗净的培养皿烘干后每6-8套（或根据需要而定） 叠在一起，用牢固的纸卷成一筒，或装入特制的铁桶中，然后 进行灭菌。
2.移液管：
塞入棉花的作用：以免使用时将杂菌吹入其中，或不 慎将微生物吸出管外。
3.试管和锥形瓶：试管和三角瓶都需要做合适的棉塞， 棉塞可起过滤作用，避免空气中的微生物进入容器。
棉塞制作
1、注意所有包好的器皿，只有灭菌后使用时才可 打开包装，以免被空气中的杂菌污染。 2、如使用干热灭菌，温度不可高于180℃，以防纸 张和棉花烤焦。
为什么玻璃器皿要塞棉花？
实验二 玻璃器皿的清洗、包扎及灭菌课件
高 压 蒸 汽 消 毒 器
（干热灭菌）
(1)将培养皿、吸管等玻璃器皿洗净干燥后，用报纸包好， 或装入特制的铁筒中。
(2)将包装好的玻璃仪器摆入电热烘箱中，彼此间留有一 定的空隙以便流通空气。
(3)关紧箱门，打开排气孔接上电源。 (4)待箱内空气排出到一定程度时，关闭上排气孔，继续
加热至一定温度后，调节温度控制旋钮固定温度，在 160℃～165℃保持2小时即可。 (5)待自然降温冷却后(60℃以下)才能开门取出玻璃器皿。
通气塞：几层纱布（一般8层）相互重叠，或两 层纱布间均匀铺一层棉花而成
3、消毒与灭菌
消毒：一般是消灭病原菌和有害微生物的
营养体而言
灭菌：则是消灭一切微生物的营养体，芽
孢和孢子
分类： 加热法—干热灭菌，湿热灭菌 过滤除菌 辐射灭菌 化学药品灭菌
掌握各类灭菌原理
步骤：高压蒸汽灭菌
此法是将物品放在密闭的高压蒸汽锅内0.1MPa， 121℃保持15～30min进行灭菌。时间长短可根据 灭菌物品和数量的不同而有所不同，以达到彻底 灭菌为准。这种方法适用于工作服﹑橡胶物品﹑ 培养基的灭菌，也可用于玻璃器皿的灭菌。
实验二 玻璃器皿的清洗，包扎及灭菌
一、目的要求
1、学习并掌握玻璃器皿的清洗，包扎方法 2ห้องสมุดไป่ตู้学习并掌握玻璃器皿灭菌的方法。
二、实验原理及操作
玻璃器皿一般要求硬质玻璃，才能承受 高温和短暂灼烧而不致破裂； 玻璃器皿的游离碱含量要少，否则会影 响培养基的酸碱度； 玻璃器皿的形状和包装方法要求能防止 污染杂菌为准； 洗涤玻璃器皿方法不当会影响实验结果
（3） 、试管和三角烧瓶的包装 洗净干燥后的试管和三角烧瓶，管口和
瓶口塞棉花塞。许多试管装入铁丝筐内， 再用大张报纸或牛皮纸捆扎，干热或湿热 灭菌。三角烧瓶再用报纸或牛皮纸包扎， 细线捆之
常用玻璃器皿的洗涤包装及灭菌25页PPT
25、学习是劳动，是充满思想的劳动。——乌申斯基
谢谢！பைடு நூலகம்
常用玻璃器皿的洗涤包装及灭菌
51、山气日夕佳，飞鸟相与还。 52、木欣欣以向荣，泉涓涓而始流。
53、富贵非吾愿，帝乡不可期。 54、雄发指危冠，猛气冲长缨。 55、土地平旷，屋舍俨然，有良田美 池桑竹 之属， 阡陌交 通，鸡 犬相闻 。
21、要知道对好事的称颂过于夸大，也会招来人们的反感轻蔑和嫉妒。——培根 22、业精于勤，荒于嬉；行成于思，毁于随。——韩愈
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2、吸管应在管口约0.5厘米
以下的地方塞入少许长约 1.5厘米的棉花，以拉直的 曲别针一端放在棉花的中 心，轻轻捅入管口，松紧 必须适中，松紧程度以吹 气时通气顺畅而不致下滑 为准，管口外露的棉花纤 维统一通过火焰烧去。然 后，将吸管尖端放在4-5厘 米宽的长条纸的一端约与 纸条成45°角，折叠纸条， 包住吸管尖端，然后将吸 管卷入纸条内，末端剩余 纸条折叠打结，待灭菌。
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（2）高压蒸汽灭菌开始之前，为什么要将锅内冷空气排尽 ？灭菌完毕后，为什么要待压力降到0时才能打开排气阀 ，开盖取物？
• 其他：牛皮纸或报纸，酒精灯，棉花，高压蒸汽 菌锅，电烘箱，线绳,毛刷等
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四、操作方法
（一）、玻璃器皿的清洗包扎
• 玻璃器皿在灭菌前必 须经正确包裹和加塞 ，以保证玻璃器皿于 灭菌后不被外界杂菌 所污染。
1. 将平皿用纸包扎好， 以5～8个为一包；
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（3）干热灭菌法：通过使用干热空气杀灭微 生物的方法叫干热灭菌。一般是把待灭菌 的物品包装就绪后，放入电烘箱中烘烤， 即加热至160～170℃维持1～2h。
（4）火焰灭菌：直接用火焰灼烧灭菌，迅速 彻底。对于接种环，接种针或其它金属用 具，可直接在酒精灯火焰上烧至红热进行 灭菌。此外，在接种过程中，试管或三角 瓶口，也采用通过火焰而达到灭菌的目的 。
五、思考题 文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系本人改正。
（1）吸管在灭菌前应如何处理？
答：吸管应在管口约0.5厘米以下的地方塞入别针一端放在棉花的中心， 轻轻捅入管口，松紧必须适中，松紧程度以吹气时通气顺 畅而不致下滑为准，管口外露的棉花纤维统一通过火焰烧 去。然后，将吸管尖端放在4-5厘米宽的长条纸的一端约 与纸条成45°角，折叠纸条，包住吸管尖端，然后将吸管 卷入纸条内，末端剩余纸条折叠打结，待灭菌。
• 3、三角瓶在棉塞与瓶 口外再包以厚纸，用 棉绳以活结扎紧，以 防灭菌后瓶口被外部 杂菌所污染；
• 4、试管塞上棉花塞， 多支扎成一捆外用牛 皮纸或两层旧报纸与 细线包。
高压蒸汽灭菌锅
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（二）、干热灭菌
• 将包扎好的试管、平皿、三角锥瓶放入干燥烘箱 内，注意不要摆放太密，以免妨碍空气流通；不 得使器皿与烘箱的内层底板直接接触。将烘箱的 温度升至160～170℃并恒温1～2h，注意勿使温 度过高，超过170℃，器皿外包裹的纸张、棉花 会被烤焦燃烧。如果是为了烤干玻璃器皿，温度 为120℃持续30分钟即可。温度降至60～70℃时 方可打开箱门，取出物品，否则玻璃器皿会因骤 冷而爆裂。
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（三）、高压蒸汽灭菌
• 加水：打开灭菌锅盖，向锅内加水到水位线。立式消毒锅 最好用已煮开过的水，以便减少水垢在锅内的积存。注意 水要加够，防止灭菌过程中干锅。
• 装料、加盖 ：将待灭菌物品放好后，关闭灭菌器盖，采用 对角式均匀拧紧锅盖上的螺旋，使蒸汽锅密闭，勿使漏气 。
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（2）高压蒸汽灭菌法：高压蒸汽灭菌用途广 ，效率高，是微生物学实验中最常用的灭 菌方法。这种灭菌方法是基于水的沸点随 着蒸汽压力的升高而升高的原理设计的。 当蒸汽压力达到1.05kg/cm2时，水蒸气的 温度升高到121℃，经15～30min，可全部 杀死锅内物品上的各种微生物和它们的孢 子或芽孢。一般培养基、玻璃器皿以及传 染性标本和工作服等都可应用此法灭菌。
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包扎试管 文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系本人改正。
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包扎完成
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三、实验器材
• 器皿：平皿（10个/组），1ml吸管（9支/组）， 试管18×180（10支/组），试管（15×150）（12/ 组），三角锥瓶500ml（3个/组）、三角锥瓶 500ml（内装蒸馏水250ml），10ml吸管
• 排气：打开排气口(也叫放气阀)。用电炉加热，待水煮沸 后，水蒸气和空气一起从排气孔排出，当有大量蒸汽排出 时，维持5min，使锅内冷空气完全排净。
• 升压、保压和降压 ：当锅内冷空气排净时，即可关闭排气 阀，压力开始上升。当压力上升至所需压力时，控制电压 以维持恒温，并开始计算灭菌时间，待时间达到要求（一 般培养基和器皿灭菌控制在121℃，20min）后，停止加热 ，待压力降至接近“0”时，打开放气阀。注意不能过早 过急地排气，否则会由于瓶内压力下降的速度比锅内慢而 造成瓶内液体冲出容器之外。
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二、实验原理
（1）灭菌是指杀死或消灭一定环境中的所有微生 物，灭菌的方法分物理和化学灭菌法两大类。本实 验主要介绍物理方法的一种，即加热灭菌。 加热灭菌包括湿热和干热灭菌两种。通过加热使菌 体内 蛋白质凝固变性，从而达到杀菌目的。蛋白 质的凝固变性与其自身含水量有关，含水量越高， 其凝固所需要的温度越低。在同一温度下，湿热的 杀菌效力比干热大，因为在湿热情况下菌体吸收水 分，使蛋白质易于凝固；同时湿热的穿透力强，可 增加灭菌效力。