影响淀粉酶活性因素
影响淀粉酶酶活性的因素复习课程
影响淀粉酶酶活性的因素一、目的了解淀粉在水解过程中遇碘后溶液颜色的变化。
观察温度、pH、激活剂与抑制剂对淀粉酶活性的影响。
二、原理人唾液中淀粉酶为α—淀粉,在唾液腺细胞中合成。
在唾液淀粉酶的作用下,淀粉水解,经过一系列被称为糊精的中间产物,最后生成麦芽糖和葡萄糖。
淀粉→紫色糊精→红色糊精→麦芽糖、葡萄糖淀粉、紫色糊精、红色糊精遇碘后分别呈蓝色、紫色与红色,麦芽糖、葡萄糖遇碘不变色。
唾液淀粉酶的最适温度为37-40℃,最适pH为6.8。
偏离此最适环境时,酶的活性减弱。
低浓度的氯离子能增加淀粉酶的活性,是它的激活剂。
铜离子等金属离子能降低该酶的活性,是它的抑制剂。
三、试剂和仪器1.碘液:称取2g碘化钾溶于5ml蒸馏水中,再加1g碘。
待碘完全溶解后,加蒸馏水295ml,混合均匀后贮存于棕色瓶内。
2.1%淀粉溶液:称取1克可溶性淀粉放入小烧杯中,加少量蒸馏水做成悬浮液。
然后在搅拌下注入沸腾的蒸馏水中,继续煮沸1分钟,冷后再加蒸馏水定容至100ml。
3.0.4%的盐酸溶液4.0.1%的乳酸溶液。
5.1%的碳酸钠溶液。
6.%的氯化钠溶液。
7.%的硫酸铜溶液。
8.仪器:试管试管架吸管玻璃棒白磁板烧杯漏斗恒温水浴量筒冰浴四、操作步骤1.淀粉酶液的制备:实验者先用蒸馏水嗽口,然后含一口蒸馏水于口中,轻嗽一、二分钟,吐入小烧杯中,用脱脂棉过滤,除去稀释液中可能含有的食物残渣。
最后将数人的稀释液混合在一起,再进行过滤,以避免个体差异。
2.pH对酶活性的影响取4支试管,分别加入0.4%盐酸(pH=1),0.1%乳酸(pH=5),蒸馏水(pH=7),与1%碳酸钠(pH=9)各2毫升,再向以上四支试管中各加入2毫升淀粉溶液及淀粉酶液。
混合摇匀后置于37℃水浴中保温。
2分钟后,从蒸馏水试管中取出一滴溶液,置于白磁板上,用碘液检查淀粉的水解程度,待蒸馏水试管内的溶液遇碘不再变色后,取出所有的试管,各加碘液2滴,观察溶液颜色的变化。
淀粉酶测定实验报告
一、实验目的1. 掌握淀粉酶活性测定的原理和方法;2. 了解淀粉酶在生物体内的作用及其影响因素;3. 通过实验验证不同条件下淀粉酶活性的变化。
二、实验原理淀粉酶是一种能够水解淀粉的酶,主要分为α-淀粉酶和β-淀粉酶两种。
本实验采用α-淀粉酶作为研究对象,通过测定其在特定条件下催化淀粉水解的速率,来评价淀粉酶的活性。
实验原理如下:1. 淀粉酶能够将淀粉水解成葡萄糖,反应式如下:淀粉 + 水酶→ 葡萄糖2. 淀粉在碘存在下呈现蓝色,当淀粉被水解后,蓝色逐渐消失,通过测量蓝色消失的程度,可以判断淀粉酶的活性。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:淀粉酶、淀粉、碘液、蒸馏水、pH缓冲液、比色皿等;2. 实验仪器:恒温水浴锅、移液器、比色计、天平等。
四、实验步骤1. 准备淀粉酶溶液:将淀粉酶用pH缓冲液稀释至一定浓度;2. 准备淀粉溶液:将淀粉用蒸馏水配制成一定浓度的溶液;3. 配制碘液:将碘液用蒸馏水稀释至一定浓度;4. 设置实验组:将淀粉溶液和淀粉酶溶液按照一定比例混合,置于恒温水浴锅中,在一定温度下反应;5. 设置对照组:将淀粉溶液和蒸馏水按照一定比例混合,置于恒温水浴锅中,在一定温度下反应;6. 取样:在反应一定时间后,取出实验组和对照组的溶液,加入碘液;7. 比色:将实验组和对照组的溶液在比色计上测定吸光度;8. 计算淀粉酶活性:根据实验组和对照组的吸光度差值,计算淀粉酶活性。
五、实验结果与分析1. 实验结果:实验组吸光度:A1对照组吸光度:A22. 结果分析:根据实验结果,计算淀粉酶活性:淀粉酶活性 = (A1 - A2) / A2淀粉酶活性越高,表示淀粉酶的催化能力越强。
六、实验讨论与心得1. 实验过程中,需要注意温度、pH值等因素对淀粉酶活性的影响,以保证实验结果的准确性;2. 实验结果表明,淀粉酶活性受到多种因素的影响,如温度、pH值、底物浓度等;3. 通过本实验,加深了对淀粉酶活性的理解,为后续研究提供了实验基础。
环境条件对淀粉酶活性的影响
环境条件对淀粉酶活性的影响一、目的植物组织中存在有淀粉酶(分α—、β—两种),能将贮藏淀粉水解成麦芽糖。
从而影响种子的萌发或植物的生长。
本实验的目的在于测定淀粉酶活性并观察环境条件(如温度、pH)及某些化学物质对淀粉酶活性的影响。
二、原理淀粉酶的活性和其他酶一样,受环境条件的影响,尤其是对温度及pH 的变化非常敏感,表现有最适温度和最适pH的现象。
在最适温度及最适pH的环境中,酶的活性最强,酶促反应速度最高;低于或高于最适温度和最适pH,酶活性变弱,酶促反应速度降低。
除温度及pH外,某些化学物质可抑制或促进酶的活性。
可抑制酶活性的化学物质,称为酶的抑制剂,可促进酶活性的化学物质,称为酶的活化剂。
受环境条件影响后,淀粉酶活性的强弱可用碘试法来检查。
三、材料、仪器设备及试剂1. 材料:小麦种子;水稻种子。
2. 仪器设备:恒温水浴;恒温培养箱;试管;150ml三角瓶;研钵;烧杯;移液管;胶头滴管;试管架;温度计。
3. 试剂:系列磷酸盐-柠檬酸缓冲液;pH5.0醋酸缓冲液(按附录二配制)。
I-KI溶液:称取2g KI溶于蒸馏水中,然后加入1g I2 ,待全部溶解后,用蒸馏水定容至300ml,贮存于棕色瓶备用。
0.5%淀粉溶液。
1%CuSO4溶液。
1%KI溶液。
0.1%HgCl2溶液。
1%NaCl溶液。
0.1%AgNO3溶液。
四、实验步骤1. 淀粉酶的提取取已发芽的水稻或小麦种子(幼芽长3~4cm)20粒,放在研钵中研磨,匀浆用100ml水分多次冲洗,集中于150ml三角瓶并充分搅拌、静置1小时后,过滤入另一三角瓶,滤液中即含有淀粉酶,若要短期保存时,可加甲苯数滴防腐,并放入冰箱中。
2. 温度对活性的影响淀粉酶取试管5支,分别作15、30、45、60、75℃温度标记,并注明“酶液管”,各加入酶提取液5ml;另取5支试管,也分别作15、30、45、60、75℃温度标记,并注明“淀粉液管”,各加入0.5��淀粉液5ml;然后各管分别置于相对应温度的水浴中,约5min后,待管内外温度一致,将酶液倒入相同温度的淀粉液管中,摇匀并记下时间,10min后取出(不同处理之间,时间要一致),放入冰水中冷却1min后,往每管加入I-KI溶液5滴,摇匀。
实验二、外界因素对唾液淀粉酶活性影响
唾液 现象 解释
1 2
3
2ml 2ml
2ml
1ml 0
0
0 1m l
0
0 0
1ml
1ml 1ml
1ml
2、将3支试管放入370C水浴中,并在白色 比色盘上用碘液检查第二管,待碘液不变 色时,向各管加碘液一滴,观察水解情况。
四、分析讨论
1 2 3
2ml 2ml 2ml
1ml 1ml 1ml
0 0C 370C
沸水浴
(3) 在比色盘上加 I2 液2滴于各孔中,每
隔一分钟,从第二管中取反映液1 滴与I2 液混合,观察颜色反应。 (4)待第二管中反应液遇I2,不发生颜色 变化,(即只呈碘的颜色),各管 中加入I2 液1滴,摇匀,观察并记录 各管颜色。
麦芽糖
加 碘
葡萄糖
变蓝
蓝、紫、褐、红
不变色
三、实验步骤
1、温度对酶活性的影响 (1)唾液淀粉酶制备:
每人用自来水漱口3次,然后取20ml 蒸馏水含于口中,半分钟后吐入烧杯 中,棉花过滤,取滤液供实验用 。 (2)取3支试管编号按表中数据加液,操 作按(表一)表一试管号源自0.5%淀唾液温度
现象
解释
粉
2.pH对酶活性的影响 表二
试管号
1
2 3
pH缓 0.5%淀 冲液 粉液 370 C PH5. 2ml 0 2ml 保 PH6. 82ml PH8. 0 2ml
唾液
现象
解释
2ml
2ml 2ml
2ml 2ml
温 3 分 钟
3.酶的激活剂及抑制剂对酶活性的影响 表三
试管号 0.5%淀 1%CuSO4 0.5 蒸馏水 %Na 粉液 Cl
谷物种子萌发时淀粉酶活性测定影响因素分析
a d g r n t n d y , u a c a i i e a e p o i . n emi ai a s b ts e h r y t o f me b h v d o p st e
Ke r s: wh a e y wo d e ts d;g r n t n;a ls ciiy e e mi ai o mya e a tvt
制备好 的酶溶液, 搅匀 , 立即记时间。分别在室温 l、 0 1 、Oc的条件 下 , 52 = 【 吸上述混 合 液各 1 于 白瓷 板上 , 滴 加 1 比色稀 碘液 , 滴 观察 颜 色 , 与标 准 糊 精 比较颜 色 ,
相 同即是 反应达 到终点 , 记录糖 化时 间 t 实验 重复 。每 3次 , 其均值 。 求
研究报告
徐
皓 等 : 物种子萌发时淀粉酶活性测定影 响因素分析 谷
谷 物种 子 萌发 时 淀粉 酶 活 性 测定 影 响 因素分 析
徐 皓
( 陕西理工学院生物科学与工程学院, 陕西 汉中 730 ) 20 1
摘要 : 用碘- 采 淀粉比 色法, 究不 同室温、 同水浴温度 、 研 不 不同萌发 天数 小麦种子萌发 时淀粉酶 活性 的大小。结果表 明 : 室温 2 0℃左右, 水浴 加 ℃, 萌发天数 5d时, 淀粉酶的 活性最强。在一定 范围 内, 随着室温、 水浴温度 的升 高, 萌发天数 的增长 , 糖化时间会 缩短 , 淀粉 酶的活性也会随之上升。 关键词 : 小麦种子 ;萌发 ; 淀粉酶活性 中图分类号 : Q8 4 1 文献标志码 : A 文章编号 : 10 — 7 5 2 1 ) 3 0 3 3 0 1 4 0 (0 0 0 - 1- 0 0
An lsso n u n e F co sAb u tr n t n Amya e Acii ay i n I f e c a tr o tDeemiai l o ls t t vy
【高中生物】高中生物必修1实验:探究影响酶活性的因素
【高中生物】高中生物必修1实验:探究影响酶活性的因素原理:淀粉遇碘后,形成蓝色的复合物。
淀粉酶可以可以使淀粉水解成麦芽糖,麦芽糖遇碘后,不形成蓝色的复合物。
1、材料:新配置的淀粉酶溶液,新鲜肝脏研磨液,可溶性淀粉溶液,过氧化氢溶液等。
2、步骤:(1)探究温度对酶活性的影响温度对酶活性的影响在温度对酶活性的影响的实验中高中生物,三支试管的条件,除温度外均相同。
3号试管处在60℃的温度条件下,酶活性最大,试管中的淀粉被分解,滴入碘液后不会变蓝。
2号试管的温度条件是100℃,这样高温度条件下,淀粉酶已失去活性,1号试管的温度条件是o℃,低温抑制淀粉酶的活性。
所以2号和1号试管中的淀粉都没有被分解,滴上碘液后都会变蓝,此实验可以证明;酶的催化作用需要适宜的温度条件,温度过高和过低都将影响酶的活性。
(2)探究ph对酶活性的影响2号试管内加入了盐酸,溶液的ph较低,3号试管内加入了氢氧化钠,溶液的ph较高,在过低或过高ph环境中,过氧化氢酶失去活性,不能使过氧化氢分解,没有氧气产生而1号试管没有加入酸或碱,溶液近似中性,过氧化氢酶将过氧化氢分解成水和氧气,使木条复燃。
实验2实验现象记录如下:1号试管有砖红色沉淀生成,2号试管无砖红色沉淀生成,3号试管无砖红色沉淀生成。
2号试管内重新加入了盐酸,溶液的ph较低,3号试管内重新加入了氢氧化钠,溶液的ph较低,在这样的ph环境中,淀粉酶丧失活性,无法并使淀粉水解,所以试管中加人斐林试剂后并并无砖红色结晶分解成。
1号试管内没重新加入酸或碱,溶液对数中性,这样的ph适合淀粉酶充分发挥催化作用,所以淀粉被水解并与斐林试剂反应,分解成砖红色结晶。
以上实验可以证明,酶的催化作用须要适合的ph,ph相对较低或偏高都能够影响酶的活性例、①酶浓度对酶促反应的影响:在底物足够,其它条件固定的条件下,反应系统中不含有抑制酶活性的物质及其它不利于酶发挥作用的因素时,酶促反应的速度与酶浓度成正比,如下图①所示。
测定淀粉酶活性实验报告
一、实验目的1. 了解淀粉酶的生物学特性及其在生物体内的作用。
2. 掌握淀粉酶活性的测定方法。
3. 分析淀粉酶活性受温度、pH值等因素的影响。
二、实验原理淀粉酶是一种水解淀粉的酶,可以将淀粉分解为麦芽糖和葡萄糖。
淀粉酶活性是指单位时间内淀粉酶催化淀粉分解的速率。
本实验采用DNS法测定淀粉酶活性,DNS 法是一种灵敏、准确、精确度高的测定方法,适用于测定小样品淀粉酶活性。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:淀粉酶、淀粉、DNS试剂、标准葡萄糖溶液、pH缓冲液、蒸馏水、试管、恒温水浴锅、移液器、量筒、滴定管等。
2. 实验仪器:pH计、电子天平、电子显微镜、分光光度计等。
四、实验步骤1. 配制淀粉酶溶液:称取适量淀粉酶,用蒸馏水溶解,配制成一定浓度的淀粉酶溶液。
2. 配制淀粉溶液:称取适量淀粉,用蒸馏水溶解,配制成一定浓度的淀粉溶液。
3. 测定淀粉酶活性:取一定量的淀粉溶液于试管中,加入适量淀粉酶溶液,置于恒温水浴锅中,在一定温度下反应一定时间。
4. 测定DNS反应液:取一定量的反应液,加入DNS试剂,置于沸水浴中反应一定时间。
5. 比色:用分光光度计在特定波长下测定DNS反应液的吸光度。
6. 计算淀粉酶活性:根据标准葡萄糖溶液的吸光度值,绘制标准曲线,计算反应液中葡萄糖的浓度,进而计算淀粉酶活性。
五、结果与分析1. 淀粉酶活性随温度升高而增加,在一定温度范围内达到最大值,之后随温度升高而降低。
2. 淀粉酶活性随pH值升高而增加,在一定pH范围内达到最大值,之后随pH值升高而降低。
3. 淀粉酶活性受激活剂和抑制剂的影响,其中激活剂可以增强淀粉酶活性,抑制剂可以抑制淀粉酶活性。
六、实验结论1. 淀粉酶是一种水解淀粉的酶,在生物体内具有重要作用。
2. DNS法是一种灵敏、准确、精确度高的测定淀粉酶活性的方法。
3. 淀粉酶活性受温度、pH值、激活剂和抑制剂等因素的影响。
七、实验讨论1. 实验过程中,淀粉酶溶液和淀粉溶液的浓度对实验结果有较大影响,需要严格控制浓度。
影响酶活性的因素实验报告
一、实验目的1. 探究影响酶活性的主要因素。
2. 分析不同因素对酶活性的影响规律。
3. 掌握酶活性测定的方法。
二、实验原理酶是一种具有催化功能的蛋白质,具有高效性和专一性。
酶活性受多种因素的影响,如温度、pH值、底物浓度、酶浓度等。
本实验主要探究温度、pH值和底物浓度对酶活性的影响。
三、实验材料与仪器1. 材料:淀粉酶、淀粉、蔗糖、葡萄糖、盐酸、氢氧化钠、蒸馏水等。
2. 仪器:恒温水浴锅、移液器、试管、试管架、烧杯、滴定管、酸度计等。
四、实验方法1. 温度对酶活性的影响(1)将淀粉酶溶液分别置于不同温度(如0℃、20℃、40℃、60℃、80℃)的水浴锅中预热。
(2)取等量淀粉溶液,分别加入等量的酶溶液,观察并记录反应时间。
(3)重复实验,计算不同温度下酶的活性。
2. pH值对酶活性的影响(1)将淀粉酶溶液分别用盐酸和氢氧化钠调节至不同pH值(如3、4、5、6、7、8、9、10)。
(2)取等量淀粉溶液,分别加入等量的酶溶液,观察并记录反应时间。
(3)重复实验,计算不同pH值下酶的活性。
3. 底物浓度对酶活性的影响(1)将淀粉酶溶液置于恒温水浴锅中预热。
(2)分别配制不同浓度的淀粉溶液(如0.1g/mL、0.2g/mL、0.4g/mL、0.6g/mL、0.8g/mL、1.0g/mL)。
(3)取等量淀粉溶液,分别加入等量的酶溶液,观察并记录反应时间。
(4)重复实验,计算不同底物浓度下酶的活性。
五、实验结果与分析1. 温度对酶活性的影响实验结果显示,酶活性随温度升高而增加,但在一定范围内(如20℃-60℃)达到最大值后,随温度继续升高而降低。
这表明酶活性受温度的影响,且存在最适温度。
2. pH值对酶活性的影响实验结果显示,酶活性随pH值的变化而变化。
在一定的pH值范围内(如5-7),酶活性较高,而在酸性或碱性条件下,酶活性降低。
这表明酶活性受pH值的影响,且存在最适pH值。
3. 底物浓度对酶活性的影响实验结果显示,酶活性随底物浓度的增加而增加,但在一定范围内(如0.2g/mL-0.8g/mL)达到最大值后,随底物浓度继续增加而降低。
淀粉酶活性测定实验报告
一、实验目的1. 了解淀粉酶的生物学特性及其在生物体内的重要作用;2. 掌握淀粉酶活性测定的原理和方法;3. 通过实验,探究温度、pH值等因素对淀粉酶活性的影响。
二、实验原理淀粉酶是一种能够水解淀粉的酶,其活性高低可以反映酶的催化能力。
本实验采用DNS 法测定淀粉酶活性,DNS 法是利用淀粉酶催化淀粉水解生成还原糖,还原糖与DNS 试剂发生反应,产生黄色化合物,通过比色法测定还原糖的浓度,从而间接反映淀粉酶的活性。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:- 淀粉酶(市售)- 淀粉溶液- DNS 试剂- 碘液- 酚酞指示剂- 蒸馏水- pH 试纸- 温度计2. 实验仪器:- 721分光光度计- 磁力搅拌器- 电子天平- 试管- 移液器四、实验步骤1. 配制淀粉酶溶液:将市售淀粉酶按照说明书配制一定浓度的淀粉酶溶液。
2. 设置实验组:- 温度实验组:分别设置30℃、40℃、50℃、60℃、70℃ 的温度梯度,每组加入相同量的淀粉酶溶液和淀粉溶液,搅拌反应 10 分钟。
- pH 值实验组:分别设置 pH 3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0 的 pH 值梯度,每组加入相同量的淀粉酶溶液和淀粉溶液,搅拌反应 10 分钟。
3. DNS 反应:- 取反应后的溶液,加入 DNS 试剂,沸水浴加热 5 分钟。
- 取出后,加入 1 滴酚酞指示剂,继续沸水浴加热 5 分钟。
4. 比色:- 使用 721 分光光度计在 540 nm 波长下测定溶液的吸光度值。
5. 数据处理:- 根据标准曲线,计算各组反应生成的还原糖浓度。
- 比较各组实验结果,分析温度、pH 值等因素对淀粉酶活性的影响。
五、实验结果与分析1. 温度对淀粉酶活性的影响:- 从实验结果可以看出,淀粉酶活性随着温度的升高而增加,在60℃ 时达到峰值,之后随着温度的继续升高,淀粉酶活性逐渐降低。
2. pH 值对淀粉酶活性的影响:- 从实验结果可以看出,淀粉酶活性在 pH 6.0 时达到峰值,之后随着 pH 值的继续升高或降低,淀粉酶活性逐渐降低。
淀粉酶活性测定实验报告
淀粉酶活性测定实验报告2 淀粉酶活性测定实验报告一、实验目的1. 学习使用淀粉酶活性测定方法来评估淀粉酶的活性。
2. 了解淀粉酶在不同条件下的活性变化规律。
3. 探究影响淀粉酶活性的因素。
二、实验原理淀粉酶是一种水解淀粉的酶,可将淀粉水解为糖。
淀粉酶活性的测定方法是通过测定淀粉酶作用下淀粉水解产生的糖的含量来评估淀粉酶的活性。
实验中使用碘液来检测淀粉的含量,通过比色法测定样品中碘与淀粉结合生成的淀粉-碘复合物的光吸收值,进而计算淀粉酶的活性。
三、实验步骤1. 准备工作(1)将淀粉酶溶液和淀粉溶液放置在室温下适应30分钟。
(2)调整分光光度计波长为550nm。
(3)用0.1mol/L HCl稀释0.1mol/L NaOH。
2. 样品处理(1)分别取10ml淀粉酶溶液和10ml淀粉溶液分别放入两个试管中作为对照组。
(2)取10ml淀粉酶溶液和10ml淀粉溶液混合放入一个试管中作为实验组。
(3)将试管放入37℃恒温水浴中反应10分钟。
3. 反应终止(1)将样品分别取出,加入5ml稀释后的HCl。
(2)用1%淀粉溶液稀释碘液。
(3)向每个试管中加入1ml稀释后的碘液。
4. 比色测定(1)将试管放入分光光度计中,设置波长为550nm。
(2)调零分光光度计,记录对照组和实验组的吸光度值。
5. 计算淀粉酶活性(1)计算对照组的吸光度平均值,并减去实验组的吸光度值。
(2)根据标准曲线,计算实验组中淀粉的含量。
(3)根据淀粉-碘复合物生成的酶解糖的量,计算淀粉酶的活性。
四、实验结果对照组吸光度平均值为0.3,实验组吸光度值为0.6,经过计算,实验组中淀粉的含量为2mg。
根据淀粉-碘复合物生成的酶解糖的量,计算得到淀粉酶的活性为20U。
五、实验讨论根据实验结果,淀粉酶的活性为20U。
通过对照组和实验组的吸光度值的比较,可以看出淀粉酶在实验组中得到了激活,使淀粉水解为糖的速度加快。
这表明淀粉酶在37℃的条件下具有较高的活性。
探究影响酶活性的因素实验报告
探究影响酶活性的因素实验报告一、实验介绍本次实验是为了探究影响酶活性的因素,以淀粉酶为对象进行研究。
淀粉酶是一种消化淀粉的酶,分泌于胰腺和口腔两个部位。
在口腔中,淀粉酶可以分解淀粉质为葡萄糖,并改善口腔健康。
实验中我们分别以不同的酶液浓度、pH值、温度等参数对淀粉酶酶活进行观察和测量,以期研究影响酶活性的因素。
二、实验方法1、制备淀粉酶酶液将5g淀粉酶粉末加入100mL色谱纯水中,60℃加热,搅拌溶解,待完全溶解并滤除杂质后使用。
2、制备淀粉溶液将10g淀粉粉末加入100mL色谱纯水中,50℃加热,搅拌溶解,待淀粉完全溶解后,加入色谱纯水稀释至1L,即制备出淀粉溶液。
3、制备不同酶液浓度将50mL淀粉酶液分别加入50mL、40mL、30mL、20mL、10mL色谱纯水中,并标记为50倍、40倍、30倍、20倍、10倍浓度的酶液。
4、测量酶活性分别取1mL不同浓度的淀粉酶液加入试管中,再加入4mL 淀粉溶液,以50℃加热,10min后停止反应。
后加入硫酸钠溶液,恒定时间后使用紫外分光光度计测定程序中指定波长下的吸光度值(A值),以此计算出淀粉酶活性。
5、探究影响酶活性的因素- 不同浓度淀粉酶液测量酶活性- 在不同pH值下测量淀粉酶酶活性,分别以pH4、pH5、pH6、pH7、pH8、pH9为条件进行实验。
- 在不同温度下测量淀粉酶酶活性,分别以10℃、20℃、30℃、40℃、50℃、60℃为条件进行实验。
实验条件:使用同一批淀粉酶液和淀粉溶液,保证实验条件一致。
三、实验结果1、不同浓度淀粉酶液测量酶活性浓度(倍)A490值酶活性50 1.03 281.139U/mL 40 0.88 240.681U/mL 30 0.69188.493U/mL 20 0.44 119.865U/mL 10 0.18 49.180U/mL2、在不同pH值下测量淀粉酶酶活性pH值A490值酶活性4 0.58 158.470U/mL5 1.01 275.099U/mL6 1.12305.458U/mL 7 1.26 342.466U/mL 8 0.86 234.426U/mL 9 0.62 168.904U/mL3、在不同温度下测量淀粉酶酶活性温度(℃)A490值酶活性10 0.18 49.180U/mL 20 0.53 144.503U/mL 30 0.93253.924U/mL 40 1.23 334.852U/mL 50 1.42 386.578U/mL 60 1.26 342.466U/mL四、实验分析根据实验结果可以得出如下结论:1、淀粉酶酶活受浓度影响的趋势为:酶活性随着浓度的升高而增加,且不同浓度之间的酶活性有明显差异,浓度越高,酶活性越大。
实验七探索影响淀粉酶活性的条件
实验七(2) 探索影响淀粉酶活性的条件执笔:审阅:审批:一.实验原理:淀粉遇碘后,形成色的复合物。
淀粉酶可以使淀粉逐步,它们遇碘后,不形成的复合物,但能够与斐林试剂发生氧化还原反应,生成砖红色的沉淀。
二.目的要求:1.初步学会探索影响的方法。
2.探索淀粉酶在水解的情况。
三.材料用具:质量分数为新鲜淀粉酶溶液,质量分数为淀粉溶液,质量分数为的盐酸,质量分数为的氢氧化钠溶液,热水,蒸馏水,冰块,碘液,斐林试剂。
四.方法步骤:(一)温度对酶活性的影响1.取3支洁净的试管,编上号,并且分别注入2mL 淀粉溶液。
2.将3支试管分别放入、沸水和中,维持各自的温度。
3.在3支试管中各注入1mL新鲜的溶液,摇匀后,维持。
4.在3支试管中各滴入1滴,然后摇匀。
5.观察这3支试管中溶液颜色的变化是。
(二)PH对酶活性的影响1.取3支洁净的试管,编上号,并且分别按下表中序号l至序号5的要求操作。
2.这3支试管,使试管内的液体混合均匀。
然后,将3支试管的下半部浸到的热水中,保温。
3.在3支试管中各加入2mL ,边加边试管,以便使试管内的物质。
4.将3支试管的放进盛有热水的大烧杯中,用酒精灯加热,煮沸。
5.观察这3支试管中溶液颜色的变化情况,观察结果。
结论:讨论:1.在温度对酶活性影响的实验中,为什么要在加入淀粉酶溶液之前控制好各自的温度?2.在pH对酶活性影响的实验中,能不能按照表格中序号1、5、2、3、4的步骤操作?为什么?例题解析:[例题1]为验证pH对唾液淀粉酶活性的影响,实验如下:1)操作步骤:①在1—5号试管中分别加入0.5%淀粉液2mL。
②加完淀粉液后,向各试管中加入相应的缓冲液3mL,使各试管中反应液的pH依次稳定在5.00、6.20、6.80、7.40、8.00。
③分别向1—5号试管中加入0.5%唾液1 mL,然后进行37℃恒温水浴。
④反应过程中,每隔1min从第3号试管中取出一滴反应液,滴在比色板上,加1滴碘液显色,待呈橙黄色时,立即取出5支试管,加碘液显色并比色,记录结果。
影响淀粉酶活性的因素的实验报告
影响淀粉酶活性的因素的实验报告实验报告-不同因素对酶的影响实验报告课程名称:生物化学实验(甲)指导老师:成绩:实验名称:酶的基本性质实验——底物专一性剂、激活剂和抑制、最适温度实验类型:分离鉴定实验同组学生姓名:一、实验目的和要求(必填)三、主要仪器设备(必填)五、实验数据记录和处理七、讨论、心得二、实验内容和原理(必填)四、操作方法和实验步骤六、实验结果与分析(必填)Ⅰ.酶的基本性质——底物专一性一、实验目的和要求1. 了解酶的专一性。
2. 掌握验证酶的专一性的基本原理及方法。
3. 学会排除干扰因素,设计酶学实验。
二、实验基本原理酶是一种具有催化功能的蛋白质。
酶蛋白结构决定了酶的功能——酶的高效性,酶催化的反应(酶促反应)要比相应的没有催化剂的反应快103-1017 倍。
酶催化作用的一个重要特点是具有高度的底物专一性,即一种酶只能对某一种底物或一类底物起催化作用,对其他底物无催化反应。
根据各种酶对底物的选择程度不同,它们的专一性可以分为下列几种:1.相对专一性一种酶能够催化一类具有相同化学键或基团的物质进行某种类型的反应。
2.绝对专一性:有些酶对底物的要求非常严格只作用于一种底物,而不作用于任何其他物质。
如脲酶只能催化尿素进行水解而生成二氧化碳和氨。
如麦芽糖酶只作用于麦芽糖而不作用其它双糖,淀粉酶只作用于淀粉,而不作用于纤维素。
3.立体异构专一性有些酶只有作用于底物的立体异构物中的一种,而对另一种则全无作用。
如酵母中的糖酶类只作用于D-型糖而不能作用于L-型的糖。
本实验以唾液淀粉酶、蔗糖酶对淀粉、蔗糖水解反应的催化作用来观察酶的专一性。
采用Benedict 试剂检测反应产物。
Benedict试剂是碱性硫酸铜溶液,具有一定的氧化能力,能与还原性糖的半缩醛羟基发生氧化还原反应,生成砖红色氧化亚铜沉淀。
Na2CO3+ 2H2O2NaOH + H2CO3 CuSO4+2+ Na2SO4 还原糖(—CHO or —C=O)+ 2Cu(OH)2 Cu2O(砖红色或黄色) + 2H2与Benedict试剂无呈色反应。
影响淀粉酶活性因素
由于酶对热是不稳定的,所以在不同的温度下,酶的活度是不同的。
低温时,酶的活度很低,随着温度的升高,酶的活度逐渐增加,在某一温度下,酶的活度表现最高,此温度称为这种酶的最佳温度。
所谓稳定温度是指酶在该温度范围内是稳定的,不发生或极少发生失活现象。
每种酶都有它的稳定温度和作用最佳温度。
酶退浆应选择所用酶的最佳温度,以使酶的活性及活性的稳定性都具有较大的数值。
胰酶的耐热性较差,稳定温度若低于35℃,高于55℃,则即失活,它的最佳温度为40~55℃,而BF-7658淀粉酶的耐热性高,40~85℃活性较高,20℃时也有较高的活性,当温度为100℃时,其活性尚未完全消失。
酶的最佳温度可因加入某些活化剂而提高。
同时可因与淀粉作用的时间不同而不同。
表BF-7658淀粉酶的最佳温度与作用时间的关系与淀粉作用时间(min)作用最佳温度(℃)60 7030 8015 902-3 100由表可知,BF-7658淀粉酶的最佳温度随反应时间的缩短而提高。
在实际生产中,经常采用短时间高温的处理工艺。
如BF-7658淀粉酶在55~60℃轧酶后,再用汽蒸或热浴处理来求得快速退浆,使生产连续化,其机理是酶的破坏瞬间也是酶发挥最大作用的时间。
pH值对酶的活性影响很大,不同PH值下测得酶的活度及稳定性是不同的。
酶具有最大活性与最大稳定性所需的PH值是不同的,但适当选择可兼顾活度与稳定性。
BF-7658淀粉酶在~范围内,其活度与稳定性可以兼顾。
胰酶在PH为~范围内,其活度与稳定性可兼顾。
③活化剂与抑制剂:淀粉酶对淀粉的消化作用常受到一些药品的影响而变得活泼或迟钝,这种现象叫活化(激化)或阻化(抑制),这种化学药品称为活化(激化)剂或阻化(抑制)剂。
例如一些轻金属盐类,都是活化剂,其中较常用的是氯化钠和氯化钙。
所以为了提高酶的活性,酶退浆时可用适当的硬水(含有一定量的Ca+、Mg1+等离子),而不必加软水剂。
而一些重金属盐类如Fe3+、Cu2+、Hg2+、Ag+、Zn2+等离子的盐类能使活化作用减弱,所以称为抑制剂。
淀粉酶_实验报告
一、实验目的1. 了解淀粉酶的基本性质和作用。
2. 掌握淀粉酶活性测定的原理和方法。
3. 分析影响淀粉酶活性的因素。
二、实验原理淀粉酶是一种能够水解淀粉的酶,其作用是将淀粉分解成较小的糖类分子。
淀粉酶活性是指单位时间内淀粉被水解的量,通常以淀粉酶活力单位(U)表示。
淀粉酶活性受多种因素影响,如温度、pH值、底物浓度等。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:淀粉酶、淀粉溶液、碘液、蒸馏水、pH缓冲液等。
2. 实验仪器:恒温水浴锅、移液器、试管、量筒、烧杯、比色计等。
四、实验方法1. 淀粉酶活性测定原理:淀粉酶催化淀粉水解,生成葡萄糖。
葡萄糖与碘液反应,产生蓝色复合物。
在一定条件下,淀粉酶活性越高,蓝色复合物颜色越深,可通过比色法测定。
2. 实验步骤:(1)配置淀粉溶液:准确称取一定量的淀粉,用蒸馏水溶解,配制成一定浓度的淀粉溶液。
(2)配置淀粉酶溶液:准确称取一定量的淀粉酶,用蒸馏水溶解,配制成一定浓度的淀粉酶溶液。
(3)pH调节:将淀粉溶液和淀粉酶溶液分别用pH缓冲液调节至适宜pH值。
(4)反应:取一定量的淀粉溶液,加入等体积的淀粉酶溶液,混合均匀,放入恒温水浴锅中,在适宜温度下反应一定时间。
(5)终止反应:反应结束后,加入一定量的碘液,混匀,静置片刻。
(6)比色:用比色计测定蓝色复合物的吸光度,根据吸光度计算淀粉酶活性。
五、实验结果与分析1. 实验结果:根据比色法测定,淀粉酶活性为XX U/mL。
2. 分析:(1)温度对淀粉酶活性的影响:在实验过程中,观察到温度对淀粉酶活性有显著影响。
随着温度升高,淀粉酶活性逐渐增加,达到一定温度后,活性达到最高值,随后活性下降。
这说明温度是影响淀粉酶活性的重要因素。
(2)pH值对淀粉酶活性的影响:实验中发现,淀粉酶活性在不同pH值下有所差异。
在pH值6.0-7.0范围内,淀粉酶活性较高;而在pH值5.0以下或8.0以上,淀粉酶活性明显降低。
这说明pH值对淀粉酶活性有显著影响。
影响淀粉酶酶活性的因素
一、目的了解淀粉在水解过程中遇碘后溶液颜色的变化。
观察温度、pH、激活剂与抑制剂对淀粉酶活性的影响。
二、原理人唾液中淀粉酶为α—淀粉,在唾液腺细胞中合成。
在唾液淀粉酶的作用下,淀粉水解,经过一系列被称为糊精的中间产物,最后生成麦芽糖和葡萄糖。
淀粉→紫色糊精→红色糊精→麦芽糖、葡萄糖淀粉、紫色糊精、红色糊精遇碘后分别呈蓝色、紫色与红色,麦芽糖、葡萄糖遇碘不变色。
唾液淀粉酶的最适温度为37-40℃,最适pH为。
偏离此最适环境时,酶的活性减弱。
低浓度的氯离子能增加淀粉酶的活性,是它的激活剂。
铜离子等金属离子能降低该酶的活性,是它的抑制剂。
三、试剂和仪器1.碘液:称取2g碘化钾溶于5ml蒸馏水中,再加1g碘。
待碘完全溶解后,加蒸馏水295ml,混合均匀后贮存于棕色瓶内。
2.1%淀粉溶液:称取1克可溶性淀粉放入小烧杯中,加少量蒸馏水做成悬浮液。
然后在搅拌下注入沸腾的蒸馏水中,继续煮沸1分钟,冷后再加蒸馏水定容至100ml。
3.%的盐酸溶液4.%的乳酸溶液。
5.1%的碳酸钠溶液。
6.%的氯化钠溶液。
7.%的硫酸铜溶液。
8.仪器:试管试管架吸管玻璃棒白磁板烧杯漏斗恒温水浴量筒冰浴四、操作步骤1.淀粉酶液的制备:实验者先用蒸馏水嗽口,然后含一口蒸馏水于口中,轻嗽一、二分钟,吐入小烧杯中,用脱脂棉过滤,除去稀释液中可能含有的食物残渣。
最后将数人的稀释液混合在一起,再进行过滤,以避免个体差异。
2.pH对酶活性的影响取4支试管,分别加入%盐酸(pH=1),%乳酸(pH=5),蒸馏水(pH=7),与1%碳酸钠(pH=9)各2毫升,再向以上四支试管中各加入2毫升淀粉溶液及淀粉酶液。
混合摇匀后置于37℃水浴中保温。
2分钟后,从蒸馏水试管中取出一滴溶液,置于白磁板上,用碘液检查淀粉的水解程度,待蒸馏水试管内的溶液遇碘不再变色后,取出所有的试管,各加碘液2滴,观察溶液颜色的变化。
根据观察结果说明pH对酶活性的影响。
3.温度对酶活性的影响取3支试管各加入3毫升2%淀粉溶液,另取三支试管,各加入1毫升淀粉酶液。
生化实验四影响酶活性的因素
在不同的温度、pH、及添加激活剂和抑 制剂的条件下,将唾液淀粉酶加入到淀粉溶 液中,作用一定时间以后,取出反应液,加 入碘指示剂,比较各种条件下,反应液与碘 反应后颜色的差异,由此说明淀粉酶活力的 变化。
三、实验试剂及器材
1.试剂
1%淀粉溶液:1g淀粉和0.3g NaCl,用5ml蒸馏水悬浮,
4.激活剂和抑制剂对唾液淀粉酶活性的影响
取试管3支,按下表操作
操作
管号
1
2
3
1% NaCl(ml)
1
0
0
1% CuSO4(ml)
0
1
0
蒸馏水(ml)
0
0
1
唾液淀粉酶溶液(ml)
1
பைடு நூலகம்
1
1
1%淀粉溶液(ml)
1
1
1
摇匀,37℃水浴反应1min左右即可用碘液检查1号试管淀粉水 解程度,待1号试管的反应液不再变色时取出所有试管。分别向各 管滴加1滴碘液,观察比较各管颜色深浅,并解释。
四、实验操作
1. 唾液淀粉酶的制备
取干净的水杯,盛上蒸馏水。 用蒸馏水漱口。 口含约20ml蒸馏水,1-2分钟后,吐入一干净烧 杯中,棉花过滤。
2. 温度对唾液淀粉酶活力的影响
取3支试管,按下表操作:
操作项目
1%淀粉溶液(ml) pH6.8磷酸缓冲液(ml) 唾液淀粉酶溶液(ml)
温度处理(℃)
管号
1
2
1
1
0.5
0.5
1
1
0
37
3 1 0.5 1 沸水
各管在相应温度中水浴,每隔1分钟从第2号管吸取1滴反应液于白 瓷板上,用碘液检查反应进行情况,直至反应液不再变色(只有碘液的 颜色),立即取出所有试管,流水冷却2min,各加1滴碘液,混匀。观 察并记录各管反应现象,解释之。
淀粉酶活力很低的原因
淀粉酶活力很低的原因
淀粉酶是一种消化酶,主要作用是将淀粉和糖类分解为易于吸收的营养物质。
如果淀粉酶活力很低,可能会导致以下原因:
1. 胰腺疾病:胰腺是产生淀粉酶的主要器官,如果胰腺受到损伤或疾病影响,会导致淀粉酶的分泌减少或完全停止。
2. 肠道疾病:肠道也是淀粉酶的重要来源之一,如果肠道受到损伤或疾病影响,也会影响淀粉酶的分泌和活性。
3. 药物影响:某些药物可能会抑制淀粉酶的活性,如抗生素、镇痛剂等。
4. 营养不良:营养不良可能导致身体缺乏必要的营养物质,从而影响淀粉酶的合成和活性。
淀粉酶活力很低可能是由多种原因引起的,需要根据具体情况进行诊断和治疗。
如果出现相关症状,应及时就医并接受专业医生的建议和治疗。
淀粉酶的组成元素
淀粉酶的组成元素淀粉酶是一类能够催化淀粉水解的酶,它主要由蛋白质组成,但蛋白质并不是淀粉酶的唯一组成元素。
除了蛋白质之外,淀粉酶还可能存在辅助性的非蛋白质组分,如酶助剂和金属离子等。
以下是淀粉酶的主要组成元素的详细介绍。
1.蛋白质:蛋白质是构成淀粉酶的主要成分,淀粉酶的酶活性和特异性主要由蛋白质决定。
蛋白质是由氨基酸经肽键连接形成的长链分子,其中氨基酸的序列决定了蛋白质的三维结构和功能。
淀粉酶的蛋白质结构对其活性和稳定性至关重要。
2.酶助剂:淀粉酶的活性可以受到一些非蛋白质酶助剂的影响。
酶助剂是能够与蛋白质酶形成复合物并增强酶的催化作用的小分子物质。
常见的淀粉酶酶助剂包括柠檬酸和脂质等。
它们通过与酶结合,使得酶的活性和稳定性得到提高。
3.金属离子:一些金属离子对淀粉酶的催化活性也起到了重要作用。
这些金属离子以金属蛋白形式存在,能够与淀粉酶中的特定位点结合,改变酶的构象或提供必要的电子转移环境,从而影响酶的催化活性。
常见的金属离子包括钙离子、锌离子和镁离子等。
4.辅基:淀粉酶中可能还存在一些与蛋白质共同构成酶分子的非氨基酸成分,称为辅基。
辅基可以为蛋白质提供必要的辅助功能,如催化反应、结合底物或调节活性。
辅基的种类和作用多样,如辅酶、金属离子、糖苷、酮糖等。
总之,淀粉酶的组成元素主要包括蛋白质、酶助剂、金属离子和辅基等。
蛋白质是淀粉酶的主要成分,影响酶的催化活性和特异性。
酶助剂和金属离子可以增强酶的催化活性和稳定性。
辅基则为蛋白质提供辅助功能。
以上这些成分的协同作用,使得淀粉酶能够高效催化淀粉的水解反应。
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温度、PH值、金属离子等均能影响酶的活度,具体表现在以下几个方面:
①温度:
由于酶对热是不稳定的,所以在不同的温度下,酶的活度是不同的。
低温时,酶的活度很低,随着温度的升高,酶的活度逐渐增加,在某一温度下,酶的活度表现最高,此温度称为这种酶的最佳温度。
所谓稳定温度是指酶在该温度范围内是稳定的,不发生或极少发生失活现象。
每种酶都有它的稳定温度和作用最佳温度。
酶退浆应选择所用酶的最佳温度,以使酶的活性及活性的稳定性都具有较大的数值。
胰酶的耐热性较差,稳定温度若低于35℃,高于55℃,则即失活,它的最佳温度为40~55℃,而BF-7658淀粉酶的耐热性高,40~85℃活性较高,20℃时也有较高的活性,当温度为100℃时,其活性尚未完全消失。
酶的最佳温度可因加入某些活化剂而提高。
同时可因与淀粉作用的时间不同而不同。
表BF-7658淀粉酶的最佳温度与作用时间的关系
与淀粉作用时间(min)作用最佳温度(℃)
60 70
30 80
15 90
2-3 100
由表可知,BF-7658淀粉酶的最佳温度随反应时间的缩短而提高。
在实际生产中,经常采用短时间高温的处理工艺。
如BF-7658淀粉酶在55~60℃轧酶后,再用汽蒸或热浴处理来求得快速退浆,使生产连续化,其机理是酶的破坏瞬间也是酶发挥最大作用的时间。
②pH值:
pH值对酶的活性影响很大,不同PH值下测得酶的活度及稳定性是不同的。
酶具有最大活性与最大稳定性所需的PH值是不同的,但适当选择可兼顾活度与稳定性。
BF-7658淀粉酶在PH6.0~6.5范围内,其活度与稳定性可以兼顾。
胰酶在PH为6.8~7.3范围内,其活度与稳定性可兼顾。
③活化剂与抑制剂:
淀粉酶对淀粉的消化作用常受到一些药品的影响而变得活泼或迟钝,这种现象叫活化(激化)或阻化(抑制),这种化学药品称为活化(激化)剂或阻化(抑制)剂。
例如一些轻金属盐类,都是活化剂,其中较常用的是氯化钠和氯化钙。
所以为了提高酶的活性,酶退浆时可用适当的硬水(含有一定量的Ca+、Mg1+等离子),而不必加软水剂。
而一些重金属盐类如Fe3+、Cu2+、Hg2+、Ag+、Zn2+等离子的盐类能使活化作用减弱,所以称为抑制剂。
另外,离子型的表面活性剂对酶也有抑制作用,因此,酶退浆液中若要使用表面活性剂时,只能用非离子型表面活性剂,如渗透剂JFC等。
pH值是影响酶活的主要因素。
它影响酶分子构象
的稳定性,影响酶分子极性基团的解离状态,也影响
底物的解离。
pH值不是酶的特定常数,它可随底物的
浓度和种类、酶的纯度、缓冲液的种类和浓度、温度、
反应时间长短以及抑制物的作用等而改变。