细菌培养标本的_采集、运送与处理

保护性毛刷标本的处理

取完后加入1ml无菌生理盐水立即送检。 震荡、离心、涂片染色。 接种培养基同痰 接种划线方法同尿培养
粪便培养

社区感染标本：社区感染性腹泻，多由志贺菌、沙门菌、弧
菌、耶尔森菌等肠道致病菌感染所引起。将标本接种在相应的选 择性分离培养基上即可，弧菌、耶尔森菌应先增菌后培养以提高 检出率。
检出。可用10-20ml无菌生理盐水洗两三次，最后 将剩余的脓痰继续处理。 痰液的均质化：向痰液内加等量约 pH7.6 的 10g/L 胰酶溶液，放置35℃90min，即能使痰液均质化， 而对细菌培养无明显影响。
痰标本的处理

判断标本是否合格
洗过的痰液革兰染色后用低倍镜检鳞状上皮细胞数
量 鳞状上皮细胞数 >10/lp，则要求重新留取标本， 不宜做培养；
细菌培养标本的 采集、运送与处理（需氧）
内容简介
细菌培养基本原则 常见临床标本的采集、运送与处理


细菌检验从正确取材开始


正确的采集、运送与处理细菌培养标本是临床 细菌检验成功的关键。没有好质量的标本，实 验室采取任何先进的分离、鉴定和药敏技术都 是无济于事的,并有可能误导临床医生。 微生物学检验的标准化首先应从标本采取,运 送和处理的规范化开始。 细菌室工作人员、临床医生和护士必须明白保 证标本质量的重要性。
前列腺液标本: 应由医师按摩前列腺,以无菌操做自尿道
口采取前列腺液放在无菌杯内送检。
生殖道、尿道标本采集

女性患者:
成年患者:
应在扩阴器的支持下,以无菌棉拭子擦去 分泌物，再用新的无菌拭子紧贴宫颈内道采样送检。 未成年患者: 不应使用扩阴器, 应以无菌拭子在阴道 口处采取分泌物送检。 尿道：2h不排尿，拭去尿道口渗出物，再插入尿 道口1-2cm旋转采取分泌物立即送检。

霍乱弧菌培养：

记录收到标本时间和病人电话 碱性蛋白胨水35℃培养 6-8小时后转种4号平板（四区划线） 继续35 ℃培养
生殖道、尿道标本采集

男性患者:
尿道标本:


2h不排尿 清洗龟头后,用碘伏等消毒后,挤出分泌物或以专用细拭子 插入尿道口1-2cm旋转采取分泌物立即送检。

咽拭子及口腔拭子


采集前患者应用冷开水反复漱口， 拭子的选择：要求无菌、不含抑制剂； 预先沾湿拭子（非常重要）； 由检查者将舌向外拉，使腭垂尽可能向外牵引，将棉 拭子通过舌根到咽后壁或腭垂的后侧，涂抹数次以取 得标本。 对化脓性扁桃体炎或口腔念珠菌病，直取病灶部位， 拭子要避免接触口腔及舌粘膜。减少污染。 立即送检。室温保存。 接种同痰
生殖道、尿道标本处理

立即送检 普通培养和淋球菌培养：室温 支原体、衣原体：4℃保存
生殖道标本处理

普通培养：

血琼脂 三区划线 35℃培养 淋球菌巧克力平板预温后立即接种三区划线 35℃ 5-10%CO2培养 嗜血杆菌巧克力平板 立即接种三区划线 35℃ 5-10%CO2培养

尿液标本

标本采集时间:
应在用药前或停药5天后留取标本
以晨起第一次尿为宜
使尿液在膀胱内停留6-8h以上(给细菌足够的繁殖
时间)。
尿液标本采集方法

中段尿：


女性采样前应先用肥皂水或0.1%高锰酸钾溶液冲洗外阴部及尿道口。 男性须翻转包皮冲洗，用0.1%新洁尔灭消毒尿道口，灭菌纱布擦干。 弃前段尿，无菌杯收集中段尿。 无菌操作进行导尿可减少尿道污染。 对留置导尿者，可用碘酒消毒尿道口处的导尿管壁，用联空针筒的 细针斜穿管壁抽吸尿液；或拔去闭式引流的集尿袋，弃去导尿管前 段尿液，留无污染的膀胱内尿液数毫升送检。 不可从集尿袋的下端管口留取标本。 长期留置导尿管者，应在更换新导尿管后留取尿标本 。
标本采集的普遍原则

避免自身菌群的污染，只要可能的话，应该确定一个代表感染过 程的标本。 选择正确的解剖部位，采用适当的技术和设备采集标本。 选择合适的部位采集用于厌氧菌培养的标本。 收集标本量要足够，量少可能导致假阴性结果。 每份标本上注明姓名，标本来源，采集部位，时间和日期。 将标本放在设计用于提高可能病原体的生存、无漏、无菌、无潜 在安全性问题的容器内。


尿液标本处理



2小时内处理完毕 培养基：血琼脂和麦康凯琼脂。 接种方法：10ul接种环垂直插入充分混匀的样品中取 一环尿液，划线方法为从上到下划一条直线，再画一 条垂直线，反复划线呈棋盘状。 35℃培养18-24h，观察结果。
呼吸道标本

标本留取质量的好坏直接影响到对下呼吸道病原学的 诊断。 标本留取不当会导致抗菌治疗失败,以及造成耐药菌的 出现。
采血时机


在出现临床症状后应尽快抽血作培养，最好在 发热初期和高峰或寒战时。 原则上应选择在抗菌药物应用之前，对已应用 药物而病情不允许停药的患者也应在下一次用 药前采血。
采血部位


通常采血部位为肘静脉。
疑似细菌性心内膜炎时，以肘动脉或股动脉采 血为宜。 多次采血时, 应在不同部位进行。 不要从血管插管内采血。 切忌在静滴抗菌药物的静脉处采取 血标本。
培养条件
视患者的感染、用药情况选用不同的培养瓶。真菌培 养可和普通培养共用一需氧瓶。 不需要每个血培养都作厌氧培养。若同一次抽血既做 需氧也做厌氧，应先厌氧再需氧。 黄色——小儿瓶 蓝色——未用抗生素需氧 绿色——已用抗生素需氧（√） 紫色——未用抗生素厌氧 橙色——已用抗生素厌氧（√）

胸腹水及脑脊液标本
标本转运的原则


所有标本必须立即送交实验室，最好不要超过 2小时，如标本处理不得不延迟，应在合适的 条件下储存，但不超过24小时。 对环境敏感的微生物包括志贺氏菌（应立即处 理）、淋球菌、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌 （对低温敏感）。脑脊液、生殖器、眼或内耳 标本不要冷冻。
哪些情况需要使用运送培养基?
痰标本采集方法



自然咳痰：清水反复漱口后用力咳痰，从呼吸道深部咳出新鲜痰液于 无菌容器送检。痰量极少者可用45℃10%氯化钠溶液雾化吸入导痰。 气管穿刺法: 适用于昏迷和咳嗽乏力患者。 纤维支气管镜抽取法: 适用于纤维支气管镜检查或治疗的患者。用纤维 支气管镜可直接在病灶部位采集高浓度的感染病原菌，但不能完全避 免咽喉部正常菌群感染。 小儿取痰法：用弯压舌板向后压舌，用棉拭子伸入咽部，小儿因压舌 刺激咳嗽时，可喷出肺部或气管分泌物粘在拭子上，从而获得标本。 双侧肺部感染伴人工气道如气管切开或气管插管患者，可用吸痰管经 人工气道估插至叶支气管水平吸引痰液。
在病人家里采集的标本 外检标本 标本从医院送实验室过程
运送培养基原则

来自百度文库
需氧菌、厌氧菌、苛氧菌

运送所有细菌
细菌不生长 非营养培养基 保持细菌存活: 标本采集后超过24 h不应增加或减少活菌数量

标本的拒绝接收原则





未贴或错贴标签 送检延迟 不正确的转运温度和转运工具 不合适或泄漏的容器 有明显污染的标本 干涸的拭子标本 标本量不足 同一天内同一个检测条件的重复标本（血培养除外）
采血次数与间隔

急性感染患者： 从两臂分别采2份血样。 感染性心内膜炎患者: 24h内采血3次, 每次间 隔不少于30分钟。 发热原因不明患者: 24-48h后可再采血2次,间 隔不少于60分钟。
采血方法


采血部位的局部皮肤应严格消毒。将采集的血 液注入血培养瓶前，应更换针头或过火消毒针 头。 血培养瓶口也要消毒，并待酒精挥发后（建议 用酒精灯烧灼瓶口）再注入血样, 。

证实标本来自下呼吸道后，用油镜观察细菌的 着色、形态及排列，做出初步病原学诊断。发 现任何白细胞内的细菌，均须报告。
痰标本的处理



培养基：血琼脂、麦康凯琼脂、嗜血杆菌巧克 力琼脂和沙保弱琼脂。 划线方法：分四区划线，每次划下一区前都要 烧灼接种环，待冷却后再划。下一区与上一区 要相交4-6次。 35℃5%-10%二氧化碳中培养24-48h。

导尿管导尿


尿液标本采集方法


膀胱穿刺法: 是收集尿液的最好方法, 尤其对厌氧菌检查,但由于是 侵入损伤性操作,临床常少用,收集的标本可直接注 入血培养瓶中。 肾盂尿采集法: 应请泌尿科医生采取, 左右侧的标本要标明,收集的标 本可直接注入血培养瓶中。
尿液标本运送和保存

无菌杯立即送检 室温下尿标本担搁稍久可导致尿内细菌数量明 显增加而影响病原菌与污染菌的区分和细菌定 量。 不能立即送检者，可暂存4℃冰箱。
粪便标本运送

卡波氏管：普通培养 碱性蛋白胨水：霍乱弧菌培养 难辨梭菌培养：
及时送检，用厌氧输送培养基。
粪便标本处理

普通培养∶

MAC、SS、10%绵羊血的弯曲杆菌培养基（暂无) 四区划线（同痰标本） MAC、SS 35℃培养 10%绵羊血的弯曲杆菌培养基42℃ 5%-10%二氧化碳培养

标本采集时间


痰液：以晨痰为好。多数患者晨痰较多，即使 对痰量少的患者，也以清晨采集最为容易。对 支气管扩张症或与支气管相通的肺空洞患者， 清晨起床后进行体位引流，可采集大量痰液。 最好在应用抗菌药物之前或停药1天后采集标 本。 鼻咽拭子 ： 应于抗菌药物治疗前采集为好。 咽部又是呼吸和食物的通路，因此亦以晨起后 采集为宜。
问题标本的处理


与送检医生或护士联系。对非损伤方法取得的 标本，再送新标本。对经损伤程序取得的标本， 和临床联系后可以处理，但要在申请单上注明 问题。 特殊情况下，即使标本质量有损害，也必须处 理。
疑难病症 罕见病例 传染性疾病的会诊
血液细菌培养


临床上疑为败血症、脓毒血症或其他血流感染 的患者，需做血液细菌培养以明确病原。 及时、准确地从患者血液中分离出病原菌，才 能正确实施有效地抗菌治疗，从而有助于提高 治愈率和降低医疗费用。
淋球菌培养


杜克雷嗜血杆菌培养


手术创口、烧伤创面与脓液处理


无菌生理盐水擦洗病灶表面后，用棉拭子采取病灶深 部的脓液和分泌物，置运送培养基内送检。采2个拭 子，一个培养，一个涂片。 开放性脓肿：尽可能抽吸或将拭子深入伤口，紧贴伤 口前沿取样。从脓肿底部或脓肿壁取样最好。 封闭性脓肿：宜用碘酒、酒精消毒皮肤后，无菌注射 器抽取脓液送检，最好做厌氧培养。 采样前病灶局部应避免用抗菌药物或消毒剂。
采集: 以无菌操作穿刺抽取，直接注入培养瓶内。量少注入小 儿瓶，量多的注入成人瓶。 运送: 若床边没有接种，用带盖的无菌容器送检。

血液和无菌体液的处理

血液或无菌体液抽取后应立即放入血培养瓶,立即送检 或室温保存,不能放冰箱! 实验室接到标本应立即放入血培养仪。中夜班收到标 本放置室温,不用放置35℃温箱 。 对急诊室送来或室温久置的标本，应先检查瓶底有无 变化，如变黄，应先涂片并盲传，以防漏检。
痰标本运送和保存


从病人留痰后应在1h内送至实验室 不能及时送检者，可暂存4℃冰箱。室温下担搁数小时定植于口 咽部的非致病菌呈过度生长而肺炎链球菌、葡萄球菌和流感嗜血 杆菌检出率明显降低 未用运送培养基的标本送到实验室后应在30分钟内接种到相应培 养基
痰标本的处理

培养前的处理：
痰液的洗净：痰液含有许多正常菌群而影响病原菌
采血量


每次采血量成人 5 ～ 10ml，婴幼儿 1 ～ 2ml， 培养基与血液之比以10：1为宜，以稀释血液 中的抗生素。 每增加1ml血量平均提高阳性率3.2%。
抗凝剂


0.025-0.05%聚茴香脑磺酸钠(sodium polyanethol sulfonate, SPS) 。 SPS具有抗凝抗吞噬抗补体及拮抗某些抗生素 的作用。

住院患者腹泻标本：

多为大量使用广谱抗生素后导致菌群失调引起。 住院超过3天或入院诊断不是肠胃炎的不做常规粪便培养。应考虑梭 状芽胞杆菌培养或毒素测定。 常见病原菌有艰难梭菌、弯曲菌、葡萄球菌、肠球菌、念珠菌等。 选择培养基应根据涂片结果而定。
粪便标本采集



应在发病早期并且尽量在用抗生素治疗前采集。 排便后，挑取有脓血、黏液部分的粪便（液状粪便则 取絮状物），稀便不少于1ml，固体便不少于1克，无 便患者可用直肠拭子。 对不易获取粪便者或婴幼儿，可用肛拭采集。将拭子 前端用无菌甘油水湿润。然后插入肛门约4～5cm（ 幼儿约2～3cm）处，轻轻旋转擦取直肠表面黏液后 退出，置运送培养基内送检。 除婴儿和有活动性腹泻症状的患者外不推荐用拭子做 常规病源检查。