第18章 全自动DNA测序仪和蛋白质自动测序仪习题
第18章 全自动DNA测序仪和蛋白质自动测序仪习题讲解
第十八章全自动DNA测序仪和蛋白质自动测序仪首页习题习题参考答案习题名词解释选择题简答题一、名词解释1．荧光标记引物法2．荧光标记终止底物法3．多色荧光标记引物法4．多色荧光标记终止底物法5．Edman降解法6．Sanger双脱氧链末端终止法7．平板电泳型DNA测序仪8．毛细管电泳型DNA测序仪9．缩微生物处理器二、选择题【A型题】在五个选项中选出一个最符合题意的答案（最佳答案）。
1. DNA的一级结构是指（）；A．DNA空间构象B．核苷酸序列C．碱基序列D．氨基酸序列E．DNA双螺旋结构2. 下列有关测序反应体系反应原理的叙述中，错误的是（）A．加入的核苷酸单体为2 -脱氧核苷三磷酸B．低温退火时，引物与模板形成双链区C．沿着3'-5'的方向形成新链D．DNA聚合酶结合到DNA双链区上启动DNA的合成E．形成的新生链与模板完全互补配对3. 双脱氧链末端终止法测序反应与普通体外合成DNA反应的主要区别是（）A．DNA聚合酶不同B．dNTP的种类不同C．dNTP的浓度不同D．引物不同E．双脱氧链末端终止法测序反应体系中还需加入ddNTP4. 下列荧光标记方法中，可以将A、C、G、T四个测序反应在同一管中完成而不影响测序结果的是（）A．单色荧光标记引物法B．单色荧光标记终止底物法C．多色荧光标记引物法D．多色荧光标记终止底物法E．多色荧光标记法5. 下列哪一荧光标记法，必需将A、T、C、G四个测序反应分管进行，但可以合并在一个泳道内电泳（）A．单色荧光标记引物法B．单色荧光标记终止底物法C．多色荧光标记引物法D．多色荧光标记终止底物法E．多色荧光标记法6. 毛细管电泳型测序仪电泳时仪器显示无电流，最常见的原因是由于（）A．电极弯曲B．电泳缓冲液蒸发使液面降低C．毛细管未浸入缓冲液中D．毛细管内有气泡E．测序样本未注入毛细管中7. 毛细管电泳型测序仪电泳时产生电弧，主要原因是（）A．电泳缓冲液漏出B．电泳缓冲液配有误C．电极、加热板或自动进样器上有灰尘沉积D．测序样本纯化不完全，含有盐性成份E．加热板温度过高8. 全自动DNA测序仪的主要应用范围，不包括（）A．人类遗传病、传染病和癌症的基因诊断B．法医的亲子鉴定和个体识别C．生物工程药物的筛选D．动植物杂交育种E．新蛋白质的鉴定9. 蛋白质测序仪的基本工作原理，主要是利用（）A．Edman降解法B．双脱氧链末端终止法C．化学降解法D．氧化－还原法E．水解法10. 蛋白质测序仪主要检测（）A．核苷酸序列B．核糖核酸序列C．碱基序列D．氨基酸序列E．脱氧核糖核酸序列11. 下列有关双脱氧链末端终止法测序原理的叙述中，不正确的是（）A．其基本原理是利用DNA的体外合成过程B．反应体系中需加入dNTP和ddNTPC．ddNTP可以形成磷酸二酯键而掺入到DNA链中D．dNTP掺入后可导致新合成链在不同的位置终止E．生成的反应产物是一系列长度不同的多核苷酸片段12. 下列有关多色荧光标记终止底物法的叙述中，不正确的是（）A．需将4种ddNTP分别用4种不同的荧光染料标记B．标记和终止过程在同一时间完成C．A、T、C、G四种反应可以在同一管中完成D．可在一个泳道内完成电泳测序E．荧光染料标记过程和延伸反应终止分别发生在同一DNA片段的两端13. 下列有关荧光标记DNA的检测原理的叙述中，不正确的是（）A．用于测序的产物绝大多数应为单链B．DNA片段上的荧光基团可吸收激光束提供的能量而发射出特征波长的荧光C．两极间的电势差推动DNA片段从正极向负级泳动并达到相互分离D．不同颜色的荧光与不同的碱基信息相对应E．测序结果中，纵轴表示荧光波长种类和强度14. 下列有关Edman降解法基本原理的叙述中，错误的是（）A．PTC－多肽的生成是在弱碱性条件下B．PTC－多肽的生成反应需用过量的试剂使有机反应完全C．在无水强碱的作用下，可使靠近PTC基的氨基酸环化，形成ATZ衍生物和一个失去末端氨基酸的剩余多肽D．剩余多肽链可以进行下一次以及后续的降解循环E．ATZ衍生物经水溶酸处理转化为PTH氨基酸15. 毛细管电泳型DNA测序仪电泳时仪器显示无电流，最常见的原因为（）A．缓冲液配制错误B．毛细管内有气泡C．电泳缓冲液蒸发使液面降低，而未能接触到毛细管的两端D．电极弯曲而无法浸入缓冲液中E．加热板温度过高16. 在单纯以测定DNA序列为目的的全自动DNA测序仪中，广泛应用的原理是（）A．Edman降解法B．双脱氧链末端终止法C．化学降解法D．氧化－还原法E．水解法17. 双脱氧链末端终止法测序的基本原理是利用（）A．RT-PCRB．PCRC．Western BlotD．Southern BlotE．水解法18. 测序反应体系中加入的酶为（）A．限制性内切酶B．RNA聚合酶C．DNA聚合酶D．DNA水解酶E．反转录酶19. 在普通的体外合成DNA反应体系中，加入的核苷酸单体为（）A．dAMP，dCMP，dGMP，dTMPB．dADP，dCDP，dGDP，dTDPC．dATP，dCTP，dGTP，dTTPD．ddATP，ddCTP，ddGTP，ddTTPE．ddADP，ddCDP，ddGDP，ddTDP20. 双脱氧链末端终止法测序反应中除PCR反应体系成份外，还加入了（）A．DNA聚合酶B．dNTPC．dNDPD．ddNTPE．ddNDP21. 在DNA自动测序中广泛应用的示踪物是（）A．色素染料B．同位素C．电化学发光物质D．酶E．荧光素22. 下列有关多色荧光标记引物法标记引物的特性的叙述中，正确的是（）A．四种标记引物的序列相同，但5'端标记的荧光染料颜色不同B．四种标记引物的序列相同，但3'端标记的荧光染料颜色不同C．四种标记引物的序列不同，其5'端标记的荧光染料颜色也不同D．四种标记引物的序列不同，其3'端标记的荧光染料颜色也不同E．四种标记引物的序列不同，其2'端标记的荧光染料颜色也不同23. 下列有关多色荧光标记引物法的叙述中，不正确的是（）A．需将荧光染料预先标记在测序反应所用引物的5'端B．四种引物的序列相同，但标记的荧光染料颜色不同C．A、T、C、G四个测序反应必需分管进行D．上样时需分别在不同泳道内电泳E．特定颜色荧光标记的引物则与特定的双脱氧核苷酸底物保持对应关系24. 一般来说，DNA测序图中，其横坐标和纵坐标的意义是（）A．横坐标代表荧光波长种类，纵坐标代表时间B．横坐标代表荧光波长种类和强度，纵坐标代表时间C．横坐标代表时间，纵坐标代表荧光波长种类D．横坐标代表时间，纵坐标代表荧光波长种类和强度E．横坐标代表荧光波长种类，纵坐标代表荧光波长强度25. 下列有关DNA自动测序仪自动进样器区功能的叙述中，不正确的是（）A．毛细管进入样品盘标本孔中进样依靠自动进样器的移动完成B．电极和毛细管一般均固定不动C．两级间极高的电势差可促进DNA分子在毛细管中很快泳动D．电极为电泳的正性电极E．样品盘有48孔和96孔两种，可一次性连续测试48或96个样本26. 下列有关DNA自动测序仪凝胶块区功能的叙述中，不正确的是（）A．电泳时缓冲液阀关闭B．电极为电泳的正性电极C．在分析每一个样品前，泵自动冲掉上一次分析用过的胶，灌入新胶D．注射器驱动杆可给注射器提供正压力，将注射器内的凝胶注入毛细管中E．玻璃注射器可储存凝胶高分子聚合物以及在填充毛细管时提供必要的压力27. 平板电泳型DNA测序仪的测序长度一般为（）A．600bp～900bpB．400bp～600bpC．200bp～400bpD．900bp～1000bpE．300bp～500bp28. 毛细管电泳型DNA测序仪的测序长度一般为（）A．600bp～900bpB．400bp～600bpC．200bp～400bpD．900bp～1000bpE．300bp～500bp【X型题】每题的备选答案中有两个或者两个以上正确答案。
dna自动测序基本原理概论试题及答案
dna自动测序基本原理概论试题及答案一、选择题1. DNA自动测序技术中，常用的测序方法是（）。
A. Sanger测序B. Maxam-Gilbert测序C. 质谱测序D. 所有选项答案：D2. 在Sanger测序法中，使用的终止核苷酸是（）。
A. dNTPsB. ddNTPsC. rNTPsD. aNTPs答案：B3. DNA测序中，用于标记DNA链的荧光染料通常附加在（）。
A. 引物B. 模板DNAC. 终止核苷酸D. 酶答案：C二、填空题1. DNA自动测序技术能够快速准确地测定DNA序列，其基本原理是通过使用带有不同荧光标记的终止核苷酸来确定DNA链的________。
答案：末端碱基2. 在自动测序过程中，DNA聚合酶在模板DNA上合成新的DNA链，当遇到终止核苷酸时，合成停止，此时的终止核苷酸对应的荧光标记会被________。
答案：检测三、简答题1. 简述Sanger测序法的测序原理。
答案：Sanger测序法的原理是利用DNA聚合酶在模板DNA上合成新的DNA链，同时使用四种不同荧光标记的终止核苷酸（ddNTPs），每种终止核苷酸对应一种碱基。
当DNA聚合酶遇到终止核苷酸时，合成停止，根据荧光标记的不同，可以确定该位置的碱基类型。
2. 在DNA测序中，为什么需要使用终止核苷酸？答案：使用终止核苷酸的目的是为了在DNA合成过程中，在特定的位置终止链的延伸，从而产生一系列长度不同的DNA片段。
这些片段的末端碱基由终止核苷酸决定，通过检测这些终止核苷酸的荧光标记，可以确定DNA序列。
四、论述题1. 论述DNA自动测序技术在生物医学研究中的应用。
答案：DNA自动测序技术在生物医学研究中有着广泛的应用。
首先，它可以用于基因组测序，帮助科学家了解生物体的遗传信息和基因结构。
其次，在疾病诊断和治疗方面，通过测序技术可以识别与疾病相关的基因突变，为个性化医疗提供依据。
此外，测序技术还可以用于遗传病的筛查、病原体的鉴定、以及药物靶点的发现等。
全自动dna测序仪的原理和应用
全自动DNA测序仪的原理和应用1. 前言DNA测序技术是现代生物学、医学研究中的重要工具之一。
随着技术的不断进步，全自动DNA测序仪在DNA测序领域占据重要地位。
本文将介绍全自动DNA测序仪的原理和应用。
2. 原理全自动DNA测序仪基于Sanger测序技术，通过离心分离、扩增和合成等步骤来获取DNA序列信息。
其原理主要包括以下几个步骤：2.1 模板制备全自动DNA测序仪需要将待测的DNA样品进行模板制备。
一般采用PCR（聚合酶链式反应）技术来扩增目标DNA片段，以增加其浓度和复制数目。
2.2 扩增产物净化PCR扩增产生的扩增产物中会包含引物和杂质，需要进行净化处理。
常用的方法是利用凝胶电泳分离扩增产物，并使用各类商业化学试剂盒进行提取和净化操作。
2.3 DNA片段测序将净化后的DNA片段进行测序。
全自动DNA测序仪采用Dye-termination测序方法，使用一系列特殊的引物，通过DNA链延伸过程中的不同颜色发光来标记每个碱基。
之后，仪器会通过激光扫描读取每个碱基的发光信号。
2.4 数据分析与测序结果全自动DNA测序仪会生成一系列的发光数据，这些数据需要进行分析和处理。
通常会使用相关软件进行碱基识别、序列拼接和测序结果的校正等步骤，从而获得准确的DNA序列信息。
3. 应用全自动DNA测序仪广泛应用于各个领域，例如：3.1 生物学研究在生物学研究中，全自动DNA测序仪可以用于基因组测序、转录组测序、蛋白质相互作用的研究等。
通过测序获得的DNA序列信息可以帮助研究者了解生物体的遗传信息、功能和相互关系。
3.2 医学领域在医学领域，全自动DNA测序仪可以用于诊断遗传性疾病、癌症等疾病的基因突变。
通过测序可以快速准确地分析患者的基因组信息，从而为临床医生提供准确的诊断和治疗方案。
3.3 农业和食品安全全自动DNA测序仪在农业和食品安全领域也有广泛的应用。
它可以用于鉴定转基因作物、检测食品中的基因改造成分、追溯食品来源，保证食品安全和品质。
临床分子生物学检验智慧树知到期末考试章节课后题库2024年湖南师范大学
临床分子生物学检验智慧树知到期末考试答案章节题库2024年湖南师范大学1.人类基因计划的大部分测序工作是利用YAC实现的。
（）答案:错2.线粒体病主要累及大脑和肌肉组织。
（）答案:对3.HER2可作为早期诊断乳腺癌的参考依据。
（）答案:对4.荧光原位杂交可同时检测多种靶序列。
（）答案:对5.TPMT与嘧啶类药物的疗效和毒副作用密切相关。
（）答案:错6.Northerm 杂交检测靶序列是RNA。
（）答案:对7.高通量表面增强激光解吸电离飞行时间质谱可获得“癌症指纹”信息。
（）答案:对8.葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症呈X染色体连锁不完全隐性遗传。
（）答案:错9.PCR是已知突变检测的“金标准”。
（）答案:错10.结核杆菌分子生物学检测包括特异性基因检测和耐药基因检测。
（）答案:对11.电喷雾质谱技术是一种软电离技术。
（）答案:对12.核糖体蛋白是基于MALDI-TOF-MS进行细菌鉴定的主要标志物。
（）答案:对13.实时荧光定量PCR引物的最适长度为15～30nt。
（）答案:错14.肺癌的诊断主要依靠分子生物学检验。
（）答案:错15.逆转录病毒的基因组是单倍体。
（）答案:错16.染色体的形态最典型和清晰的阶段是有丝分裂间期。
（）答案:错17.PCR 技术的本质是核酸重组技术。
（）答案:错18.双脱氧链终止法测序需要加入双脱氧核苷酸。
（）答案:对19.Tm 主要与 A-T 含量有关。
（）答案:错20.产前诊断的金标准是对羊水或脐带血细胞进行染色体核型分析。
（）答案:对21.16SrRNA基因作为细菌分类鉴定的靶基因的优点有（）答案:多信息###长度适中###多拷贝22.关于沙眼衣原体的分子生物学检验，正确的是（）答案:RAPD技术不适用于血清学分型###PCR扩增靶基因序列主要有外膜蛋白基因、隐蔽性质粒DNA和16S rRNA基因序列###PCR-RFLP可用于CT分型###LCR技术适合于高危人群普查时大批量标本的检测23.SELDI-TOF-MS中蛋白质芯片系统的组成主要包括（）答案:芯片###芯片阅读器###分析软件24.CYP450基因分型检测的分子生物学方法有（）答案:实时荧光定量PCR###等位基因特异性PCR###基因芯片###PCR-RFLP25.临床分子生物学实验室检测方法的选择原则包括（）答案:根据本地区患者的承受能力选择###根据实验室的技术特点选择###根据检测目的选择###根据实验室的实验条件选择26.PML-RARa融合基因常用的检测方法有（）答案:RT-PCR###荧光原位杂交###荧光定量PCR27.原癌基因激活的机制包括（）答案:易位激活###癌基因甲基化程度降低###原癌基因扩增###点突变28.法医物证学的主要内容有（）答案:种族和种属认定###性别鉴定###个体识别###亲子鉴定29.关于DHPLC技术的描述正确的是（）答案:灵敏度和特异性高###自动化程度高###是分析异质性突变的首选方法###可实现高通量检测30.理想的质控品应满足以下要求（）答案:稳定、价廉、同一批次可大量获得###无已知的生物传染危害性###基质与待测样本一致###阳性质控品所含待测物浓度接近试验的决定性水平###靶值或预期结果已知31.乙型肝炎病毒的核酸类型是（）答案:双股DNA32.TPMT是下列哪类药物在体内代谢的关键酶（）答案:嘌呤类33.采集用于PCR检测的血清样本时，不宜选择使用的抗凝剂是（）答案:肝素34.奥美拉唑在体内代谢主要受哪种药物代谢酶的影响？（）答案:CYP2C1935.PCR的退火温度通常比引物的Tm值（）答案:低约5℃36.HLAI类抗原的特异性取决于（）答案:α重链37.可以用来分辨16SrRNA基因不能鉴别的非常接近的菌种和种内菌株的是（）答案:16S-23S rRNA基因38.单细胞基因扩增一般采用下列哪项技术增加检测的敏感性和特异性（）答案:巢式PCR39.Southern 印迹杂交中常用的核酸变性剂是（）答案:氢氧化钠40.DNA指纹的分子遗传学基础是（）答案:DNA的多态性41.新一代测序技术最显著的特点是（）答案:高通量42.微卫星异常的检测方法有（）答案:DNA测序43.PCR的引物Tm值的计算公式为（）答案:Tm= 2(A+T)+4(G+C)44.PCR循环中的延伸时间取决于（）答案:扩增产物的长度45.线粒体基因组22个tRNA可转录几种tRNA （）答案:20种46.保证结果准确可靠的先决条件是（）答案:分析前质量控制47.肿瘤的分子诊断策略有（）答案:检测肿瘤相关基因48.在PGD中诊断单基因疾病的主要手段是（）答案:单细胞PCR技术49.焦磷酸测序法突出的优势是（）答案:较长的读长50.寡核苷酸探针的最大优势是（）答案:可以区分仅仅一个碱基差别的靶序列51.非整倍体筛选的诊断方法主要借助于下列哪项技术（）答案:FISH52.乙型肝炎病毒可分为多少个基因型？（）答案:853.TaqMan 探针技术要求扩增片段应为（）答案:50～150bp54.目前对肺癌遗传易感性主要集中在如下哪几个领域（）答案:DNA修复能力55.临床分子生物学检验的核心技术是（）答案:核酸扩增技术56.临床分子生物学检验标准化的前提是（）答案:标准品57.临床基因扩增检验实验室设计的原则主要包括（）答案:分区设置###控制空气流向58.质量管理体系文件具有法规性、唯一性和时效性三大特性。
临床医学检验：临床检验仪器真题
临床医学检验：临床检验仪器真题1、问答题常用的离心方法分几类？正确答案：常用的离心方法大致可分为平衡离心法、等密度离心法、经典式沉降平衡离心法等三类。
2、问答题简述蛋白质测序仪的主要应用。
正确答案：蛋白质测序仪（江南博哥）获得的蛋白质序列信息主要应用在以下三个方面。
（1）新蛋白质的鉴定：在凝胶电泳中出现的未知条带可以利用蛋白质测序仪来测定其序列，为探索蛋白质的功能提供线索。
（2）分子克隆探针的设计：是蛋白质序列信息的基本用途之一。
用蛋白质序列信息设计PCR引物和寡核甘酸探针。
可以利用这些探针进行cDNA文库或基因组文库的筛选。
（3）抗原的人工多肽合成：由合成多肽免疫产生的抗体常用来证实和纯化新发现的蛋白质。
此外，合成的多肽类似物能够揭示蛋白质重要结构特征和提示蛋白质的功能特性。
3、问答题第三代自动血培养仪有哪些性能特点？正确答案：（1）培养基营养丰富；（2）以连续、恒温、振荡方式培养，细菌易于生长；（3）培养瓶多采用不易碎材料制成，提高了使用的安全性；（4）采用封闭式非侵入性的瓶外监测方式，避免标本交叉感染，且无放射性污染；（5）自动连续监测，缩短了检测时间，阳性标本检测可快速、准确；（6）结果报告及时，85%以上的阳性标本能在48小时内被检出；（7）培养瓶多采用双条形码技术，只需用电脑上的条码阅读器扫描报告单上的条码，就可直接查询到病人的结果及生长曲线；（8）培养瓶可随时放入培养系统，并进行追踪检测；（9）数据处理功能较强，数据管理系统随时监测感应器的读数，依据数据的变化来判定标本的阳性或阴性，并可进行流行病学的统计分析；（10）设有内部质控系统，可保证仪器的正常运转；（11）可进行血液及所有无菌体液的细菌培养检测。
4、单选库尔特原理中血细胞的电阻与电解质溶液电阻的关系是OoA.相等B.大于C.小于D.大于或等于E.小于或等于正确答案：B5、问答题电泳技术根据分离原理如何分类？正确答案：根据分离原理可分为移界电泳、区带电泳、等速电泳、等电聚焦、免疫电泳等。
《国内外医疗器械原理图解与操作标准及维修技术实用全书》
《国内外医疗器械原理图解与操作标准及维修技术实用全书》 本书作者:中国医科大学医学工程教授 图书册数:1380 出 版 社:中国知识出版社 定 现 价:1380 元 价:690 元《国内外医疗器械原理图解与操作标准及维修技术实用全书》 本店是实体店，坚决抵制各类盗版、劣质图书及附件，严格控 制图书进货渠道，遵守国家新闻出版、发行的相关规定，直接 从经过国家出版发行行政部门审核批准的出版社进货，与国图、 中华书局、三联书店、商务印书馆、人民文学、上海古籍、上 海世纪出版集团、中国社科、社科文献、电子工业、机械工业、 化学工业、科学、法律、上海外教、北大、清华、人大、复旦、 武大、南大、广西师大、北京出版集团、浙江少儿、江苏少儿、 21 世纪、作家、春风文艺、长江文艺、接力、漓江等全国知名 的 300 余家出版社建立了良好的合作关系，所采购的图书均经 所在地图书市场审读办公室审读合格后， 方上市发行， 100%正 版、优质，订购速度快，数据提供及时，加工全方位，能全面1 / 13符合客户的需求。
公司经营的图书科目品种齐全，涉及学科面广，涵盖文学、文 化、教育、体育、科技、历史、工具图书、艺术、哲学、语言、 政治、经济、学术专著、工具书及其它社科综合类图书等。
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DNA测序模板的制备和测序引物设计中的相关问题
DNA测序模板的制备和测序引物设计中的相关问题王虎王晓健甄一松邹玉宝郑维越张芊核酸序列测定是基因研究的重要手段,本世纪60年代和70年代,科学家们一直致力于研究测定核酸序列的方法。
最初使用的方法只能测定RN A,主要是tRNA,一则因为它的链较短,通常只有74295个核苷酸,二则有可能分离单个tRNA分子。
而D NA的情况却大相径庭,人的染色体有大有小,每条染色体约含5千5百万到2亿5千万个碱基对,远远大于RNA 分子,如何将其切割并分离成500bp以下的片段成了D NA序列测定问题的关键。
基因克隆(gene cloning)和多聚酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术使从染色体中分离特定D N A片段的难题迎刃而解,快速高效的测序技术因此产生。
1977年,基于链终止和化学降解的D N A测序法研究成功,略经改善后很快就被推广到世界各国的分子生物学实验室,成为80年代和90年代序列测定革命的基础。
但此种测序法的缺点也是显而易见的,一方面操作步骤繁琐,可测样本量小,另一方面同位素的使用也明显限制了该方法的应用。
八十年代末期,美国加州一位科学家发明了世界上第一台D N A全自动测序仪,随着此后技术的不断成熟与完善,D NA的测序已经实现了高通量、产业化。
由美、英、日、德、法、中六国参与的人类基因组计划(Human Genome Project,HGP),是人类文明史上最伟大的科学创举之一,其核心内容是人类基因组序列图的绘制)))测定人类基因组的全部D NA序列,该计划启动于1990年,原定15年完成,由于技术的成熟与基因组测序的规模化运作,人类基因组工作框架图构建已于2001年6月全部完成。
一、测序的原理D NA测序方法主要有双脱氧链终止法(Sanger法)和化学降解法(M axa m2Gilbert法)。
目前,传统的手工测序方法及仪器自动测序方法均使用双脱氧链终止法。
测序常见问题解答
1．为什么需要新鲜的菌液？首先，新鲜的菌液易于培养，可以获得更多的DNA，同时最大限度地保证菌种的纯度.2．如何提供菌液？如果您提供新鲜菌液，用封口膜封口以免泄漏；也可以将培养好的4—5ml菌液沉淀下来，倒去上清以方便邮寄。
同时邮寄时最好用盒子以免邮寄过程中压破.3．如何制作穿刺菌？用灭菌过1.5ml或2ml离心管加入LB琼脂(7g/L)斜面凝固，用接种针挑取分散良好的单菌落穿过琼脂直达管底，不完全盖紧管盖适当温度培养过夜，然后盖紧盖子加封口膜，室温或4度保存。
4．PCR产物直接测序有什么要求？1)．扩增产物必须特异性扩增，条带单一.如果扩增产物中存在非特异性扩增产物，一般难以得到好的测序结果；.2）必须进行胶回收纯化；3）DNA纯度在16—2.0之间.浓度50ng/ul以上.5．为什么PCR产物直接测序必须进行Agarose胶纯化？如果不进行胶纯化而直接用试剂盒回收，经常会导致测序出现双峰甚至乱峰。
这主要是非特异性扩增产物或者原来的PCR引物去除不干净所导致。
大多所谓的PCR"纯化试剂盒"实际上只是回收产物而不能起到纯化的作用的。
对于非特异性扩增产物肯定无法去除，而且通常他们不能够完全去除所有的PCR引物，这会造成残留的引物在测序反应过程中参与反应而导致乱峰。
6．如何进行PCR产物纯化？PCR产物首先必须用Agarose胶电泳，将特异扩增的条带切割下，然后纯化。
使用凝胶回收试剂盒回收.产物用ddH2O溶解。
7．PCR产物直接测序的好处？A) PCR产物直接测序可以反映模板的真实情况.B) 省去克隆的实验费用和时间.C) PCR产物测序正确的片段进行下一步克隆实验使结果更有保障.D) 混合模板进行PCR的产物直接测序可以发现其中的点突变.8．对用于测序的质粒DNA的要求有哪些？对测序模板DNA的一般要求：1).DNA纯度要求高，1.6—2.0之间，不能有混合模板，也不能含有RNA，染色体DNA，蛋白质等；2).溶于ddH2O中，溶液不能含杂质，如盐类，或EDTA等螯合剂，将干扰测序反应正常进行。
《临床检验仪器学》教学大纲
3.一般介绍全自动DNA测序仪、蛋白质测序仪的应用及研究进展
五、实验教学目标与内容
（一） 可见分光光度计的使用和调校
目标
1.掌握可见分光光度计常见故障产生的原因的分析及检修
2.熟悉各种分光光度计的原理与结构，学会分光光度计的正确使用方法和调校方法
3.一般介绍生物安全柜的安装注意事项
第十单元 培养箱及相关技术
目标
1.掌握电热恒温培养箱和二氧化碳培养箱的结构、原理及正确使用方法
2.熟悉厌氧培养箱的结构及工作方式
3.了解其他类型培养箱的结构及工作原理
内容
1.重点阐述电热恒温培养箱和二氧化碳培养箱的结构原理及使用方法
2.详细讲解厌氧培养箱的结构原理及使用
3.一般介绍流式细胞仪的临床应用实例
第十六单元 全自动DNA测序仪和蛋白质测序仪及相关技术
目标
1.掌握全自动DNA测序仪、蛋白质测序仪的工作原理、结构及功能
2.了解测序仪主要应用、常见故障及维护
3.了解全自动DNA测序仪、蛋白质测序仪研究进展
内容
1.重点阐述全自动DNA测序仪、蛋白质测序仪的工作原理
（二）基本技能
通过理论学习和实验，掌握临床常见检验仪器的基本原理和结构，从理论到实践的转换和结合，学会一般仪器的正确使用方法、日常保养维护和简单故障的排除。
（三）本素质
本课程为医学检验专业学生开设的一门应用性很强的专业课，通过理论课程的讲授，使学生掌握常见临床检验仪器的工作原理、仪器结构、性能指标的评价方法，学会正确地选择与使用仪器；通过实验，让学生了解构成仪器的基本元件、简单电路的识别，学会正确地调试仪器，能够正确地进行日常维护、保养，掌握常见故障的处理方法。使学生能够理论联系实际，增强动手、动脑能力。
临床医学检验：临床检验仪器必看题库知识点真题
临床医学检验：临床检验仪器必看题库知识点真题1、名词解释常液洗脱正确答案：是在样品的分离过程中从始至终采用相同的流动相和相同的流量来帮助样品的分离。
2、多选采用葡萄糖氧化酶生物传感器技术的手持式血糖仪所使用的（江南博哥）试纸顶层，由亲水层、粘附层、酶层、绝缘层、碳层、塑料支撑层等组成，其中关于各层的主要作用，下面的说法中正确的是（）。
A.酶层内含葡萄糖氧化酶B.绝缘层可以限定电极的大小C.碳层内包括工作电极和参考电极D.顶层是透明的，便于确认血量E.亲水层和粘附层则有助于控制和引导小样品的血样正确答案：A, B, C, D, E3、问答题简述毛细管等速电泳的工作原理。
正确答案：同等电聚焦电泳一样，等速电泳在毛细管中的电渗流为零，缓冲系统由前后两种不同浓度的电解质组成。
毛细管内首先导入具有比被分离各组分高电泳淌度的前导电解质，然后进样，随后再导入比各分离组份低电泳淌度的尾随电解质，在强电场的作用下，各被分离组分在前导电解质与尾随电解质之间的空隙中发生分离。
4、多选红外和远红外分光光度技术用于制作多种无创检测仪器，包括（）。
A.无创伤自测血糖仪B.血红蛋白检测仪C.无创（经皮）胆红素检测仪D.血小板聚集仪E.无创全血细胞测定仪正确答案：A, B, C, E5、单选离子选择性电极法测得的是血清样本中离子的（）。
A.电位差B.浓度C.电量D.数量E.电流正确答案：B6、单选密度梯度离心法又称为（）。
A.分离离心法B.组份分离法C.区带离心法D.低速离心法E.高速离心法正确答案：C7、多选下列有关DNA自动测序仪自动进样器区功能的叙述中，正确的是（）。
A.毛细管进入样品盘标本孔中进样依靠自动进样器的移动完成B.电极和毛细管一般均固定不动C.DNA分子在毛细管中泳动的动力来自于两级间极高的压力差D.电极为电泳的正性电极E.样品盘有48孔和96孔两种，可一次性连续测试48或96个样本正确答案：A, B, E8、单选生物安全柜内的空气需经HEPA过滤器过滤后再排放到大气中，其主要目的是（）。
临床医学检验：临床检验仪器试题预测真题
临床医学检验：临床检验仪器试题预测真题1、单选电解质分析仪长期使用后，电极内充液下降最严重、需要经常调整内充液浓度的电极是OOA.钠电极B.钾电极C.氯电极D.钙电极E.参比电极正确答案：A2、羲（江南博哥）尿干化学试剂带测定尿酮体，下列说法中错误的是OOA.本法对酮体各组分的灵敏度相同B.测定时硬是用新鲜尿液C.试剂带受潮，可使尿酮体检测出现假阳性结果D.尿中苯丙酮可出现假阳性结果E.干化学尿酮检测采用硝基铁氟化钠法正确答案：A3、多选原子吸收光谱仪在工作过程中出现分析结果偏低的故障时，常见的原因有OOA.试样挥发不完全，细雾颗粒大，在火焰中未完全离解B.被测试样浓度太高，仪器工作在非线性部分C.标准溶液变质D.试样污染E.假吸收正确答案：A,B,C,D4、问答题简述血沉自动分析仪的安装注意事项。
正确答案：仪器的安装：一般血沉分析仪的安装都比较简单，严格按照说明书安装即可。
仪器安装的条件如下：避免安装在有水分、潮湿的地方，应安装在清洁、通风处，（室内温度应在15°C~32°C,相对湿度应W85%）的地方。
应安装在稳定的水平实验台上（最好是水泥台），禁止安装在高温、阳光直接照射处；远离高频、电磁波干扰源的地方。
5、单选按照美国NSF49标准，一般将11级生物安全柜划分成的等级是OoA3个B.4个C.5个D.2个E6个正确答案：B6、多选采用化学多层涂膜技术制成的干片组成包括OoA.参比层B.支持层C.试剂层D.指示剂层E.分布层正确答案：B,C,D,E7、单选瑞典科学家ATiSeIiUS首先利用U形管建立移界电泳法的时间是OOA.1920年B.1930年C.1937年D.1940年E.1948年正确答案：C8、判断题离心转头参数K值越大，离心效率越高。
正确答案：错9、单选光路与流路校正的主要目是确保OoA.激光光路稳定B.样品流稳定C.激光光路与样品流处于正交状态D.荧光光光路与样品流处于正交状态E.散射光光路与样品流处于正交状态正确答案：C10、问答题简述尿液分析仪的结构。
检验仪器学,问答题18
二、选择题【A型题】1．B 2．C． 3．E 4．D 5．C． 6．B 7．C． 8．E 9．A 10．D11．D 12．E 13．C． 14．C． 15．C 16．B 17．B 18．C． 19．C． 20．D21．E 22．A 23．D 24．D 25．D 26．A 27．A 28．E【X型题】1．BC． 2．BCE 3．ABC． 4．ABCD 5．ABCD6．ABCD 7．ABCD 8．ACD 9．ABCD 10．BCDE11．BDE 12．ABDE 13．ABE 14．ACDE 15．BCDE三、问答题1．简述双脱氧链末端终止法测序原理。
答：双脱氧链末端终止法测序原理是利用DNA的体外合成过程。
反应体系中的核苷酸单体除了4种dNTP外，还有ddNTP。
反应过程中ddNTP虽然可以与正在延伸的DNA链的末端形成磷酸二酯键而掺入到DNA链中，但它们本身没有3'-OH，不能同后续的dNTP形成磷酸二酯键，从而使正在延伸的DNA链在此终止。
据此原理分别设计四个反应，每一反应中存在相同的DNA模板、引物、四种dNTP和一种ddNTP(如ddATP)，则新合成的DNA链在可能掺入正常dNTP的位置都有可能掺入ddNTP而导致新合成链在不同的位置终止。
由于存在ddNTP与dNTP的竞争，生成的反应产物是一系列长度不同的多核苷酸片段。
通过PAGE对长度不等的新生链进行分离后，就可根据片段大小直接读出新生DNA链的序列。
2. 简述多色荧光标记引物法的原理。
答：荧光标记引物法是指将荧光染料预先标记在测序反应所用引物的5'端。
当相同碱基排列的寡核苷酸链作为骨架分别被4种荧光染料标记后，便形成了一组（4种）标记引物。
这四种引物的序列相同，但5'端标记的荧光染料颜色不同。
在测序反应中，模板、反应底物、DNA聚合酶及标记引物等按A、T、C、G编号被置于4支微量离心管中，A、T、C、G四个测序反应分管进行，上样时合并在一个泳道内电泳。
现代分子生物学
1.全自动测序仪：原理：在DNA片段中加入4种被荧光分别标记的ddNTP做为引物，ddNTP的作用是链终止剂，当进行PCR时，遇到ddNTP便会停止，因此会形成链长度不一的一系列片段，由于每个片段末端标记的荧光不同用激光探头扫描电泳后形成的按大小顺序跑出的条带，即可读出核苷酸序列。
①在片段中需加入4种不同的ddNTP②加入PCR 需要的模板，Tap聚合酶，缓冲液，及dNTP，进行单向PCR，产生长度不同的一系列片段。
③将PCR扩增出的片段进行PAGE电泳，其电泳后只跑出一个带④用激光探头扫描条带，即可读出相应序列。
2.（blue-white screening）蓝白斑筛选：是一种可以在同一转化板上完成重组质粒的筛选方法。
次方法涉及基因的插入失活，利用一种蓝色化合物的形成作为指示剂，在这种情况下失活的基因是lacZ，该基因编码β-半乳糖甘酶，受到启动子的调控，当大肠杆菌菌株表达lac阻抑物，则载体那个的lacZ基因由IPTG诱导表达，表达形成的酶可以利用底物X-gal形成蓝色化合物，重组质粒中lacZ的插入失活导致不能形成蓝色菌落而形成白色菌落。
色氨酸操纵子转录的衰减作用：色氨酸与色氨酸阻抑物结合形成复合物才能结合到操纵子基因上。
该阻抑物转录的起始减少了大约70杯，色氨酸操纵子的RNA序列含有4个互补区，1、2、3、4，通常情况下形成1：2，3：4的互补，在色氨酸含量高时，核糖体迅速在两个色氨酸密码子处插入色氨酸，这样翻译可以直达前导肽末端，当RNA聚合酶到达终止序列时，核糖体封闭了2，3：4形成弱化发夹结构，转录终止。
当色氨酸含量低时，缺乏氨酰tRNA，核糖体将在两个色氨酸密码子滞留封闭1，形成2：3抗终止子，使3：4弱化子不能形成，转鹿得以延续到其下游。
3.五种重要的工具酶：①碱性磷酸酶：从DNA或RNA的5`端去除磷酸基。
②DNA连接酶：5`-磷酸与3`-羟基相结合。
③DNA聚合酶1：沿5 `至3`的方向合成与DNA模板互补的DNA。
《临床检验仪器学》教学大纲
《临床检验仪器学》教学大纲课程类别：专业核心课程课程性质：必修英文名称：Clinical Laboratory Instruments总学时：36 讲授学时：28 见习学时：8学分：2先修课程：临床生物化学检验、临床免疫学检验、临床基础检验、临床病原生物学检验、临床血液学检验适用专业：医学检验技术开课单位：医学院一、课程简介临床检验仪器学主要介绍临床检验常规仪器的基本构造、原理、功能和应用。
通过学习本课程，使学生掌握临床检验主要仪器的原理和应用，了解临床检验主要仪器的基本结构和性能及常见故障的排除。
二、教学内容及基本要求第一章概论（2学时）教学内容：1.1 学习临床检验仪器课程的目的1.2 临床检验仪器的特点、分类和常用性能指标1.3 临床检验仪器的主要部件、维护和选用标准1.4 临床检验仪器的进展和发展趋势教学要求：1.了解临床检验仪器的特点、分类和常用性能指标。
2.了解临床检验仪器的主要部件、维护和选用标准。
3.了解临床检验仪器的进展和发展趋势。
授课方式：讲授第二章显微镜技术和显微镜（2学时）教学内容：2.1光学显微镜2.2光学显微镜的分类及其应用2.3电子显微镜2.4显微镜的维护、常见故障及排除2.5 时间分辨荧光免疫分析仪显微摄影术教学要求：1.掌握显微镜的应用。
2.了解显微镜的基本结构和性能。
授课方式：讲授第三章微生物检测技术和相关仪器（2学时）教学内容：3.1自动血培养仪3.2 微生物自动鉴定及药敏分析系统教学要求：1.掌握微自动血培养仪和微生物自动鉴定及药敏分析系统的应用。
2.了解微自动血培养仪和微生物自动鉴定及药敏分析系统的基本结构和性能。
授课方式：讲授第四章生物安全柜（1学时）4.1生物安全柜的工作原理和分类4.2 生物安全柜的结构与功能4.3 生物安全柜的实际应用教学要求：1.掌握的生物安全柜的应用。
2.了解生物安全柜的基本结构和性能。
授课方式：讲授第五章细胞培养技术和培养箱（1学时）教学内容：5.1细胞培养技术5.2 培养箱的分类、结构和使用教学要求：1.掌握培养箱的应用。
DNA测序技术考试试题及答案
DNA测序技术考试试题及答案一、选择题（每题5分，共20题）1. DNA测序是指确定DNA序列的方法和过程。
以下哪种技术不属于DNA测序技术？A. Sanger测序法B. Illumina测序法C. 聚合酶链式反应（PCR）D. 单分子测序技术（SMRT）2. 下列哪项是DNA测序的主要应用领域？A. 遗传病诊断B. 个体免疫系统分析C. 病原体鉴定D. 肿瘤分子机制研究3. DNA测序技术中，测序反应所需的引物是什么？A. RNA引物B. DNA引物C. 蛋白质引物D. 合成引物4. DNA测序中的“序列装载”是指什么过程？A. 将待测DNA片段插入质粒或向量B. 对DNA片段进行链延伸C. 分离DNA片段并纯化D. 通过PCR扩增DNA片段5. 下列哪种测序技术可以同时测序多个DNA片段？A. Illumina测序法B. Sanger测序法C. SMRT测序技术D. Nanopore测序技术6. DNA测序中的“序列装载”是指什么过程？A. 将待测DNA片段插入质粒或向量B. 对DNA片段进行链延伸C. 分离DNA片段并纯化D. 通过PCR扩增DNA片段7. DNA测序技术中，测序反应所需的引物是什么？A. RNA引物B. DNA引物C. 蛋白质引物D. 合成引物8. 下列哪项是DNA测序的主要应用领域？A. 遗传病诊断B. 个体免疫系统分析C. 病原体鉴定D. 肿瘤分子机制研究9. DNA测序是指确定DNA序列的方法和过程。
以下哪种技术不属于DNA测序技术？A. Sanger测序法B. Illumina测序法C. 聚合酶链式反应（PCR）D. 单分子测序技术（SMRT）10. DNA测序中的“序列装载”是指什么过程？A. 将待测DNA片段插入质粒或向量B. 对DNA片段进行链延伸C. 分离DNA片段并纯化D. 通过PCR扩增DNA片段11. 下列哪种测序技术可以同时测序多个DNA片段？A. Illumina测序法B. Sanger测序法C. SMRT测序技术D. Nanopore测序技术12. DNA测序技术中，测序反应所需的引物是什么？A. RNA引物B. DNA引物C. 蛋白质引物D. 合成引物13. 下列哪项是DNA测序的主要应用领域？A. 遗传病诊断B. 个体免疫系统分析C. 病原体鉴定D. 肿瘤分子机制研究14. DNA测序是指确定DNA序列的方法和过程。
蛋白质测序
程中丢失，使用试剂的纯度要求相对不十分高。
缺点：蛋白质中的Glu, 因- 羧基结合在载体上, 使之无法
检测到, Asp 也会妨碍进一步降解反应
3.3气相蛋白质序列仪
气相蛋白质序列仪是在1978年由Hunkapiller M.W.和Hood L.E.等人
设计的一种仪器, 利用polybrene 作为蛋白质的载体,高效液相层析为 分离系统。1980年由美国应用生物系统公司(Applied Biosystems, ABI)推出了470A型气相蛋白质序列仪。
液相蛋白质序列仪根据Edman降解原理自动旋转杯式测定法而建立
的，所以也称之为旋转杯蛋白质序列仪。如 Beckman公司在1969年 生产的890型蛋白质序列仪, 是最早推出的一种型号。随后又先后推 出了890C, 890M.型.
每次测定的样品用量从最初的250nmol到二十世纪九十年 代只需几十pmol左右。仪器工作的基本原理主要经过以下 几步：
(5) 高效液相层析分离鉴定。除去氯丁烷，将ATZ—氨基 酸转化成PTH—氨基，通过高效液相层析进行分析 (6) N—末端氨基酸确定：将从蛋白质N—末端断裂下来的 PTH—氨基在高效液相层析的保留值与标准氨基酸的保留 值比较，便可确定是什麽氨基酸。该氨基酸就是蛋白质的 N—末端氨基酸。 优点：操作简单，每一个氨基酸残基需要60分钟。 缺点：对小分子肽及疏水性较强的肽容易在氯丁烷抽提过 程中损失。
蛋白质N-末端氨基酸序列分析
1概述 2蛋白质N-末端氨基酸序列分析的基本原理 3 蛋白质N-末端氨基酸测定序列仪 4影响序列测定的因素 5蛋白质C-末端氨基酸测定序列仪
1 概述 1.1蛋白质序列分析的发展过程 蛋白质N-末端氨基酸序列测定( Protein N-Terminal Sequences ),也称为氨基酸序列分析。由于蛋白质和肽的一 级结构是以氨基酸以肽键的形式连接而成的生物大分子。 测定蛋白质序列是通过测定蛋白质分子中氨基酸排列顺序 的一种分析方法，所以也称为蛋白质的一级结构测定。
高中生物5 DNA和蛋白质技术精选题
化钝市安居阳光实验学校高中生物专题5 DNA 和蛋白质技术精选题（含解析）(时间：90分钟满分：100分)一、选择题(本题包括13小题，每小题4分，共52分)1．在做DNA的粗提取与鉴定实验时，玻璃棒搅拌出的较纯净的DNA的颜色以及DNA遇二苯胺(沸水浴)染成的颜色分别是( )A．黄色、紫色B．白色、砖红色C．白色、蓝色D．蓝色、砖红色2．鉴定DNA的试剂是( ) A．斐林试剂B．苏丹Ⅲ染液C．双缩脲试剂D．二苯胺试剂3．在利用鸡血进行“DNA的粗提取与鉴定”的实验中，相关叙述正确的是( )A．用蒸馏水将NaCl溶液浓度调至0.14 mol/L，滤去析出物B．调节NaCl溶液浓度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部分杂质C．将丝状物溶解在2 mol/L的NaCl溶液中，加入二苯胺试剂即呈蓝色D．用菜花替代允鸡血作为实验材料，其实验操作步骤相同4．在DNA的粗提取实验中，加入与滤液体积相等的、冷却的A溶液，静置2～3 min，溶液中会出现白色丝状物。
上面的A溶液是指( )A．0.9%的NaCl溶液B．0.14 mol/L的NaCl溶液C．质量分数为15%的HCl D．体积分数为95%的酒精溶液5．PCR仪实质上是一台自动调控温度的仪器，下列关于它调控不同温度的目的叙述错误的是( )A．95 ℃，使DNA分子变性，解开螺旋B．55 ℃，使DNA分子两条单链与两种引物结合C．72 ℃，使DNA分子开始复制，延伸D．72 ℃，使DNA分子恢复双螺旋结构，恢复活性6．在PCR的实验操作中，下列说法正确的是( )①在微量离心管中添加各种试剂时，只需要一个枪头②离心管的盖子一定要盖严③用手指轻弹离心管壁④离心的目的是使反应液集中在离心管的底部A．①②③B．①②④C．②③④D．①③④7．关于DNA聚合酶催化合成DNA子链的说法中，正确的是( )A．以DNA为模板，使DNA子链从5′端延伸到3′端的一种酶B．Taq DNA聚合酶必须在每次高温变性处理后再添加C．DNA聚合酶能特异性地复制整个DNA的全部序列D．Taq DNA聚合酶是从深海生态系统中发现的8．PCR实验中用到微量离心管、缓冲液和蒸馏水，使用前必须进行的关键步骤是 ( )A．反复洗涤B．用酒精擦洗C．高压灭菌D．在－20 ℃保存9．下列有关提取和分离血红蛋白的叙述，错误的是( )A．样品的处理就是通过一系列操作收集到血红蛋白溶液B．通过透析可以去除样品中分子质量较大的杂质，此为样品的粗提取C．可通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去，即样品的纯化D．可通过SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定血红蛋白的纯度10．在血红蛋白的整个提取过程中，不断用磷酸缓冲液处理的目的是( )A．防止血红蛋白被氧化B．血红蛋白是一种物质，需要酸中和C．磷酸缓冲液会加速血红蛋白的提取过程D．让血红蛋白处在稳定的pH范围内，维持其结构和功能11．使用凝胶色谱法分离蛋白质时，洗涤红细胞、释放血红蛋白和透析过程中，分别使用下列哪些试剂( )①蒸馏水②生理盐水③20 mmol/L的磷酸缓冲液④清水⑤柠檬酸钠A．①③⑤B．①②③C．②①③D．④①③12．将释放出的血红蛋白以2 000 r/min的速度离心10 min后，可以看到试管中的溶液分为4层，其中哪一层是血红蛋白的水溶液( )A．第一层无色透明B．第二层白色C．第三层红色透明D．第四层暗红色13．SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳法中加入SDS的作用是( )A．增大蛋白质的相对分子质量B．改变蛋白质分子的形状C．掩盖不同蛋白质分子间的电荷差别D．减小蛋白质分子的相对分子质量二、非选择题(本题包括3小题，共48分)14．(14分)回答下列有关“DNA的粗提取和鉴定”实验的问题。
生物高考蛋白质和DNA技术专题测试题和答案
生物2021高考蛋白质和DNA技术专题测试题和答案聪明出于勤奋，天才在于积累。
我们要振作精神，下苦功学习。
查字典生物网编辑蛋白质和DNA技术专题测试题，以备借鉴。
1.我们通常选用猪、牛、羊等动物的血液进展实验，来提取和别离血清蛋白。
请答复以下有关问题：(1)实验前取新颖血液，静置凝固后会析出淡黄色的液体血清，其中含有的蛋白质有________、________等。
(2)血清蛋白提取和别离的活动程序为：___________________________________________________ ________________________________________________________________________ _____________________，在染色和脱色步骤中，所用试剂分别为__________________、____________________。
(3)能利用电泳技术别离血清蛋白的原理是___________________________________________________ ________________________________________________________________________ _____________________。
解析：此题考察提取和别离血清蛋白的相关知识。
(1)血清中含有两种球蛋白、凝集素等多种蛋白质。
(2)血清蛋白的提取和别离步骤为：点样电泳染色脱色制干胶板，其中染色、脱色所用试剂分别为质量分数为0.05%的考马斯亮蓝R250染色液、体积分数为7%的醋酸溶液。
(3)血清蛋白为两性电解质，在一定条件下带有电荷，可在电场中挪动，故可用电泳技术进展别离。
答案：(1)两种球蛋白凝集素 (2)点样电泳电泳染色脱色制干胶板质量分数为0.05%的考马斯亮蓝R250染色液体积分数为7%的醋酸溶液 (3)血清蛋白为两性电解质，在一定条件下带有电荷，可在电场中挪动2.血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分，负责血液中O2和局部CO2的运输。
感冒清热颗粒
感冒清热颗粒对照品溶液的制备取盐酸小檗碱对照品适量，精密称 定，加甲醇制成每l m l含40舛的溶液，即得。
供试品溶液的制备取本品适量，研细，取约0.2g，精密 称定，置50m丨量瓶中，加人盐酸-甲醇（1••100)混合溶液约40ml，密塞，超声处理（320W,40kH z)40分钟，加混合溶液至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，蒸干，残渣用甲醇溶解并转移至5m l量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤 液，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10M1，注入液相色谱仪.测定•即得。
本品每l g含黄连以盐酸小檗碱（C2:H]:>：04• H C i)计，不得少于9, 0mgoB：«ir;【功能与主治】解肌透表，清热解毒，利湿止泻。
用于湿 热蕴结所致的泄泻腹痛、便黄而黏、肛门灼热；及风热感冒所致的发热恶风、头痛身痛。
【用法与用量】口服。
一次3g;小儿一次lg，一日3次;或遵医嘱。
【规格】每袋装]g【贮藏】密封。
感冒清热颗粒Ganmao Qingre Keli【处方】荆芥穗200g 薄荷60g防风I00g 柴胡100g紫苏叶60g 葛根100g桔梗60g 苦杏仁80g白芷60g 苦地丁 200g芦根160g【制法】以上十一味，取荆芥穗、薄荷、紫苏叶提取挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集;药渣与其余防风等八味加水煎 煮二次，合并煎液，滤过，滤液与上述水溶液合并。
合并液浓 缩成相对密度为1. 32〜：L 35(50°C)的清膏，取清膏，加蔗糖、糊精及乙醇适量，制成颗粒，干燥，加入上述挥发油，混匀，制 成1600g;或加人辅料适量，混勻，干燥，加入上述挥发油，混 勻，制成800g(无蔗糖）•，或将合并液减压浓缩至相对密度为1.08〜1. 10(55°C)的药液•喷雾干燥，制成干膏粉，取干膏粉，加乳糖适量，混合，加入上述挥发油，混匀，制成颗粒400g，即得（含乳糖）。
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第十八章全自动DNA测序仪和蛋白质自动测序仪首页习题习题参考答案习题名词解释选择题简答题一、名词解释1．荧光标记引物法2．荧光标记终止底物法3．多色荧光标记引物法4．多色荧光标记终止底物法5．Edman降解法6．Sanger双脱氧链末端终止法7．平板电泳型DNA测序仪8．毛细管电泳型DNA测序仪9．缩微生物处理器二、选择题【A型题】在五个选项中选出一个最符合题意的答案（最佳答案）。
1. DNA的一级结构是指（）；A．DNA空间构象B．核苷酸序列C．碱基序列D．氨基酸序列E．DNA双螺旋结构2. 下列有关测序反应体系反应原理的叙述中，错误的是（）A．加入的核苷酸单体为2 -脱氧核苷三磷酸B．低温退火时，引物与模板形成双链区C．沿着3'-5'的方向形成新链D．DNA聚合酶结合到DNA双链区上启动DNA的合成E．形成的新生链与模板完全互补配对3. 双脱氧链末端终止法测序反应与普通体外合成DNA反应的主要区别是（）A．DNA聚合酶不同B．dNTP的种类不同C．dNTP的浓度不同D．引物不同E．双脱氧链末端终止法测序反应体系中还需加入ddNTP4. 下列荧光标记方法中，可以将A、C、G、T四个测序反应在同一管中完成而不影响测序结果的是（）A．单色荧光标记引物法B．单色荧光标记终止底物法C．多色荧光标记引物法D．多色荧光标记终止底物法E．多色荧光标记法5. 下列哪一荧光标记法，必需将A、T、C、G四个测序反应分管进行，但可以合并在一个泳道内电泳（）A．单色荧光标记引物法B．单色荧光标记终止底物法C．多色荧光标记引物法D．多色荧光标记终止底物法E．多色荧光标记法6. 毛细管电泳型测序仪电泳时仪器显示无电流，最常见的原因是由于（）A．电极弯曲B．电泳缓冲液蒸发使液面降低C．毛细管未浸入缓冲液中D．毛细管内有气泡E．测序样本未注入毛细管中7. 毛细管电泳型测序仪电泳时产生电弧，主要原因是（）A．电泳缓冲液漏出B．电泳缓冲液配有误C．电极、加热板或自动进样器上有灰尘沉积D．测序样本纯化不完全，含有盐性成份E．加热板温度过高8. 全自动DNA测序仪的主要应用范围，不包括（）A．人类遗传病、传染病和癌症的基因诊断B．法医的亲子鉴定和个体识别C．生物工程药物的筛选D．动植物杂交育种E．新蛋白质的鉴定9. 蛋白质测序仪的基本工作原理，主要是利用（）A．Edman降解法B．双脱氧链末端终止法C．化学降解法D．氧化－还原法E．水解法10. 蛋白质测序仪主要检测（）A．核苷酸序列B．核糖核酸序列C．碱基序列D．氨基酸序列E．脱氧核糖核酸序列11. 下列有关双脱氧链末端终止法测序原理的叙述中，不正确的是（）A．其基本原理是利用DNA的体外合成过程B．反应体系中需加入dNTP和ddNTPC．ddNTP可以形成磷酸二酯键而掺入到DNA链中D．dNTP掺入后可导致新合成链在不同的位置终止E．生成的反应产物是一系列长度不同的多核苷酸片段12. 下列有关多色荧光标记终止底物法的叙述中，不正确的是（）A．需将4种ddNTP分别用4种不同的荧光染料标记B．标记和终止过程在同一时间完成C．A、T、C、G四种反应可以在同一管中完成D．可在一个泳道内完成电泳测序E．荧光染料标记过程和延伸反应终止分别发生在同一DNA片段的两端13. 下列有关荧光标记DNA的检测原理的叙述中，不正确的是（）A．用于测序的产物绝大多数应为单链B．DNA片段上的荧光基团可吸收激光束提供的能量而发射出特征波长的荧光C．两极间的电势差推动DNA片段从正极向负级泳动并达到相互分离D．不同颜色的荧光与不同的碱基信息相对应E．测序结果中，纵轴表示荧光波长种类和强度14. 下列有关Edman降解法基本原理的叙述中，错误的是（）A．PTC－多肽的生成是在弱碱性条件下B．PTC－多肽的生成反应需用过量的试剂使有机反应完全C．在无水强碱的作用下，可使靠近PTC基的氨基酸环化，形成ATZ衍生物和一个失去末端氨基酸的剩余多肽D．剩余多肽链可以进行下一次以及后续的降解循环E．ATZ衍生物经水溶酸处理转化为PTH氨基酸15. 毛细管电泳型DNA测序仪电泳时仪器显示无电流，最常见的原因为（）A．缓冲液配制错误B．毛细管内有气泡C．电泳缓冲液蒸发使液面降低，而未能接触到毛细管的两端D．电极弯曲而无法浸入缓冲液中E．加热板温度过高16. 在单纯以测定DNA序列为目的的全自动DNA测序仪中，广泛应用的原理是（）A．Edman降解法B．双脱氧链末端终止法C．化学降解法D．氧化－还原法E．水解法17. 双脱氧链末端终止法测序的基本原理是利用（）A．RT-PCRB．PCRC．Western BlotD．Southern BlotE．水解法18. 测序反应体系中加入的酶为（）A．限制性内切酶B．RNA聚合酶C．DNA聚合酶D．DNA水解酶E．反转录酶19. 在普通的体外合成DNA反应体系中，加入的核苷酸单体为（）A．dAMP，dCMP，dGMP，dTMPB．dADP，dCDP，dGDP，dTDPC．dATP，dCTP，dGTP，dTTPD．ddATP，ddCTP，ddGTP，ddTTPE．ddADP，ddCDP，ddGDP，ddTDP20. 双脱氧链末端终止法测序反应中除PCR反应体系成份外，还加入了（）A．DNA聚合酶B．dNTPC．dNDPD．ddNTPE．ddNDP21. 在DNA自动测序中广泛应用的示踪物是（）A．色素染料B．同位素C．电化学发光物质D．酶E．荧光素22. 下列有关多色荧光标记引物法标记引物的特性的叙述中，正确的是（）A．四种标记引物的序列相同，但5'端标记的荧光染料颜色不同B．四种标记引物的序列相同，但3'端标记的荧光染料颜色不同C．四种标记引物的序列不同，其5'端标记的荧光染料颜色也不同D．四种标记引物的序列不同，其3'端标记的荧光染料颜色也不同E．四种标记引物的序列不同，其2'端标记的荧光染料颜色也不同23. 下列有关多色荧光标记引物法的叙述中，不正确的是（）A．需将荧光染料预先标记在测序反应所用引物的5'端B．四种引物的序列相同，但标记的荧光染料颜色不同C．A、T、C、G四个测序反应必需分管进行D．上样时需分别在不同泳道内电泳E．特定颜色荧光标记的引物则与特定的双脱氧核苷酸底物保持对应关系24. 一般来说，DNA测序图中，其横坐标和纵坐标的意义是（）A．横坐标代表荧光波长种类，纵坐标代表时间B．横坐标代表荧光波长种类和强度，纵坐标代表时间C．横坐标代表时间，纵坐标代表荧光波长种类D．横坐标代表时间，纵坐标代表荧光波长种类和强度E．横坐标代表荧光波长种类，纵坐标代表荧光波长强度25. 下列有关DNA自动测序仪自动进样器区功能的叙述中，不正确的是（）A．毛细管进入样品盘标本孔中进样依靠自动进样器的移动完成B．电极和毛细管一般均固定不动C．两级间极高的电势差可促进DNA分子在毛细管中很快泳动D．电极为电泳的正性电极E．样品盘有48孔和96孔两种，可一次性连续测试48或96个样本26. 下列有关DNA自动测序仪凝胶块区功能的叙述中，不正确的是（）A．电泳时缓冲液阀关闭B．电极为电泳的正性电极C．在分析每一个样品前，泵自动冲掉上一次分析用过的胶，灌入新胶D．注射器驱动杆可给注射器提供正压力，将注射器内的凝胶注入毛细管中E．玻璃注射器可储存凝胶高分子聚合物以及在填充毛细管时提供必要的压力27. 平板电泳型DNA测序仪的测序长度一般为（）A．600bp～900bpB．400bp～600bpC．200bp～400bpD．900bp～1000bpE．300bp～500bp28. 毛细管电泳型DNA测序仪的测序长度一般为（）A．600bp～900bpB．400bp～600bpC．200bp～400bpD．900bp～1000bpE．300bp～500bp【X型题】每题的备选答案中有两个或者两个以上正确答案。
1. 目前DNA测序仪的工作原理，主要是利用（）A．Edman降解法B．双脱氧链末端终止法C．化学降解法D．氧化－还原法E．水解法2. 下列有关多色荧光标记引物法的叙述中，正确的是（）A．需将荧光染料预先标记在测序反应所用引物的3 端B．四种引物的序列相同，但标记的荧光染料颜色不同C．A、T、C、G四个测序反应必需分管进行D．上样时需分别在不同泳道内电泳E．特定颜色荧光标记的引物则与特定的双脱氧核苷酸底物保持对应关系3. 下列哪些荧光标记法必需将A、T、C、G四个测序反应分管进行（）A．单色荧光标记引物法B．单色荧光标记终止底物法C．多色荧光标记引物法D．多色荧光标记终止底物法E．多色荧光标记法4. 下列有关单色荧光标记法原理的叙述中，正确的是（）A．需将A、G、C、T四管反应分管进行B．上样时需在不同泳道电泳C．可用于标记ddNTP，也可用于标记引物D．有可能因泳道间迁移率不同而影响测序精度E．仅适用于标记ddNTP，而不能标记引物5. 平板电泳型DNA测序仪电泳时仪器显示无电流，可能原因有（）A．电极导线未接好或损坏B．电泳缓冲液配制不正确C．正极或负极铂金丝断裂D．正极或负极的胶面未浸入缓冲液中E．倒胶时有气泡形成6. 采用荧光标记终止底物法的测序反应体系中，包含（）A．DNA模板B．引物C．dNTPD．ddNTPE．水解酶7. 毛细管电泳型DNA测序仪电泳时仪器显示无电流，可能原因有（）A．电泳缓冲液蒸发使液面降低，而未能接触到毛细管的两端B．毛细管内有气泡C．毛细管未浸入缓冲液中D．电极弯曲而无法浸入缓冲液中E．加热板温度过高8. 导致毛细管电泳型DNA测序仪电极弯曲的原因有（）A．测序时未进行电极定标操作就直接执行电泳命令B．自动进样器上有灰尘沉积C．运行前未将样品盘归位D．进行电极定标操作时X/Y轴归位尚未结束就运行Z轴归位E．凝胶干燥而阻塞毛细管9. 平板电泳型DNA测序仪电泳时仪器显示无电流，可能原因有（）A．电泳缓冲液配制不正确B．电极导线未接好或损坏C．正极或负极铂金丝断裂D．正极或负极的胶面未浸入缓冲液中E．电泳缓冲液蒸发使液面降低，而未能接触到毛细管的两端10. Sanger双脱氧链末端终止法和Maxam-Gilbert化学降解法的共同点包括（）A．反应体系中均有ddNTPB．都是根据在某一固定的点开始核苷酸链的延伸，随机在某一个特定的碱基处终止C．均产生A、T、C、G四组不同长度的一系列核苷酸链D．均在变性聚丙烯酰胺凝胶上电泳进行片段的分离和检测E．均可检测DNA的一级结构11. 在Sanger双脱氧链末端终止法测序反应体系中，ddNTP与dNTP相比的异同点有（）A．ddNTP在脱氧核糖的5'位置上缺少一个羟基B．ddNTP在脱氧核糖的3'位置上缺少一个羟基C．DNA链在掺入dNTP的位置终止链的延伸D．均可与正在延伸的DNA链的末端脱氧核糖3'-OH发生反应E．ddNTP不能同后续的dNTP形成磷酸二酯键12. 下列有关Sanger双脱氧链末端终止法测序反应体系反应原理的叙述中，正确的是（）A．加入的核苷酸单体包括dNTP和ddNTPB．低温退火时，引物与模板形成双链区C．沿着3'-5'的方向形成新链D．DNA聚合酶结合到DNA双链区上启动DNA的合成E．形成的新生链与模板完全互补配对13. 下列有关DNA自动测序仪自动进样器区功能的叙述中，正确的是（）A．毛细管进入样品盘标本孔中进样依靠自动进样器的移动完成B．电极和毛细管一般均固定不动C．DNA分子在毛细管中泳动的动力来自于两级间极高的压力差D．电极为电泳的正性电极E．样品盘有48孔和96孔两种，可一次性连续测试48或96个样本14. 下列有关DNA自动测序仪凝胶块区功能的叙述中，正确的是（）A．电泳时缓冲液阀打开B．电极为电泳的负性电极C．在分析每一个样品前，泵自动冲掉上一次分析用过的胶，灌入新胶D．注射器驱动杆可给注射器提供正压力，将注射器内的凝胶注入毛细管中E．玻璃注射器可储存凝胶高分子聚合物以及在填充毛细管时提供必要的压力15. 下列有关缩微生物处理器结构和功能特点的叙述中，正确的是（）A．基本结构为2层玻璃薄片和2层聚二甲基硅氧烷薄片B．其形状为圆盘状，直径仅10厘米C．可完成纳升级标本的Sanger DNA测序D．微瓣膜的功能包括在热循环反应时封闭反应小室，为反应提供封闭的空间E．毛细管电泳通道由上下来回迂回的U型管道构成，总长度为30cm三、问答题1．简述双脱氧链末端终止法测序原理。