疑难血型分析鉴定及处理

漏加试剂 红细胞浓度过低或过高 试剂污染、失效 加样枪污染 离心机转速不达标 标本搞错 记录错误 结果判读错误
正反定型不合的三种情况
正定型被干扰 : 抗原“变多” 抗原“变少” 抗体“变多” 抗体“变少”
反定型被干扰:
正,反定型同时被干扰
正定型，抗原减弱或缺少 ABO亚型 年龄＜6月、老年
红细胞抗原“变少”
红细胞抗原“变多”
反定型、意外阴性
新生儿、老年
血清抗体“变少”
病理 情况
低蛋白血症 免疫抑制药物 血液病 先天性免疫缺乏 骨髓移植
处理：加大血清量， 降低温度
反定型、意外阳性
缗钱状形成 （多发性骨髓瘤）
血清抗体“变多”
不规 则抗 体
同种抗体 自身抗体
冷型自身抗体
常见问题处理方法
★了解患者一般情况。 ★在做进一步试验之前，先进行重复试验。 ★用试管法,洗涤细胞。 ★更换新的试剂。 ★灭活补体。
患者的疾病类型？（白血病，胃肠道肿瘤） 血样是否是输血后采集？
ABO正反定型不符思路整理
意 外
（—）
洗涤RBC，降 低温度，延长孵 育时间
用不同 来源的 抗体试 验，镜 检
正 定 型
意 外
（+）
洗涤 RBC
可能的亚 型;因为年 龄、诊断 或用药造 成的抗原 减弱
人源试剂，吸 收放散试验 （加对照）
冷抗体或缗钱状凝集
直抗（+）
用不同来源的抗体 试验，研究病人的 输血史和诊断
获得性B、多凝集
ABO正反定型不符思路整理
意 外
（—）
加大血清量，降 低温度，延长孵 育时间，镜检
与A(A1、A2)和 B细胞反应，加自 身对照（—）
因为年龄、诊 断或用药造成 的抗体减弱
反 定 型
意 外
（ +）
抗体筛选
自身对照

注意：细胞浓度、血清与细胞比例
ABO 正反定型结果
-A -B A细胞 B细胞 O细胞 自身对照
A型
B型 O型
4+
0 0
0
4+ 0
0
>1+ >1+
>1+
0 >1+
0
0 0
0
0 0
AB型
4+
4+
0
0
0
0
ABO正反定型相符：
“正反定型中有且只有2个强凝集反应管”
ABO正反不符
ABO亚型/抗 原抗体减弱
可能的解释
（1）患者或献血者的ABO定 型不正确 （2）患者血清中的同种抗 体与献血者红细胞上的抗原 发生反应，但在筛选细胞上 无此抗原存在。 （3）献血者细胞可能有DAT 阳 患者血清中的同种抗体与献 血者红细胞及筛选细胞上的 抗原发生反应
讨论解决
（1）重复ABO实验：查对抗体是否一致。 （2）增加抗体筛选和鉴定的细胞，进一步检查 病人血清中的抗体 （3）做献血者直抗，如阳性，此血不能用于临 床，废弃。
ABO正反定型不符合原因 • 试验因素
假阴性：未加试剂；红细胞与血清比例不当；试验温 度不当；离心速度不够；未判明结果为溶血；试验结果解 读不准确。 假阳性：试剂血清、红细胞或生理盐水污染；应用不 洁的器皿；离心过度；试验结果解读不准确。
• 患者本身
排除人为试验差错
• • • • • • • •
谢
谢
未达到两管强 凝集
不规则抗体？
除两管强凝集 之外还有其他 凝集
提示疑难血型
疑难血型的定义 • 疑难血型：是指一种血型难以判定的“现象”
实质不是一种独立的血型
• 在临床输血中,常规只要求查ABO和Rh（D）,不要求查其它 血型,因此,疑难血型只涉及ABO和RhD • ABO疑难血型一般是因为正、反定型不合而发现的
疑难血型鉴定分析及处理
昆明医科大学第一附属医院输血科 董伟群
输血前检查
输血申请
血样、信息
ABO、Rh定型
抗体筛选与鉴定
交叉配血
血液发放
红细胞血型系统简介
• 最重要的血型系统：ABO、Rh • 临床意义：输血安全、器官移植、新生儿溶血病
ABO血型临床意义 • 溶血性输血反应 • 新生儿溶血病
• 器官移植
实例分析和处理方法
实例分析（一）
1、病史 ：患者，女，37岁，子宫肌瘤，既往妊娠史： G2P1，无输血史。
-A 室温 ±
-B
0
-D
4+
自身c
0
Ac
0
Bc
4+
分析：A亚型？ A型（A抗原减弱）？其它可能
• 2、补充试验（人源抗A/B、抗H）
-A（人源） 室温 4℃ -B（人源） -AB（人源）
± 1+
0 0
± 1+
Oc 抗H 4+
Pc 4+
A1c ±
H抗原强弱：Oc > 大部分亚型> Ac
• 3、吸收放散试验： 1份Pc（生理盐水三洗后）+1份抗A 4℃吸收30-60min 4℃生理盐水洗6次 热放散后取上层放散液
放散液的检测：
Pc放散液 A细胞 IS 2+
Oc放散液 0
4℃
3+
0
通过吸收放散试验在Pc上检测出A抗原
常见问题处理方法
• • • • • • 初步检查：再取一份患者新鲜标本 红细胞洗涤后配成2～5%浓度 重复进行各项试验 直接抗人球蛋白试验 用O及自身细胞检测血清 判定结果之前，实验管至少在室温和4℃放置30分钟，阴 性者用显微镜观察结果
进一步实验
• • • • • • • 增加试剂血清：抗A1 、 抗H、 抗AB 增加细胞：自身、O细胞、脐血细胞 唾液血型物质鉴定 吸收试验 放散试验 直接抗球蛋白试验 分子生物学实验
主 侧 + 自身对照 抗体筛选 +
对患者血清进行抗体鉴定，筛选对应抗原阴性 的红细胞重做交叉配血。
主 侧 + 自身对照 + 抗体筛选 +
（1）患者血清内可能有自 身及同种抗体二者同时存在 （2）患者血清异常： ①A/G比例不平衡 ②污染物
（1)患者血清做自身吸受试验去除自身抗体 ，进行抗体鉴定试验并利用自身吸收的血清重做 交叉配血。 （2 ） ①如有缗钱状现象，用盐水处理 ②重取新标本,应用新盐水，新试剂，干净 试管重做试验。
ABO血型系统的血清学特点
• ABO系统主要的抗原、抗体
血型
抗原
抗体
A
B O AB
A
B A，B
抗B
抗A 抗A，抗B -
ABO血型系统的血清学特点
• • • •
A、B抗原的免疫性强 规则抗体：血清中规律性的存在抗A和/或抗B抗体 分泌型人的分泌液（血浆、唾液、羊水等）存在着A、B、H
血型物质
红细胞上的抗原与血清中的抗体存在相反的互补关系
----正反定型的理论基础
ABO血型系统的血清学特点
抗A、抗B抗体的特性 • • 主要为IgM、IgG
！
IgM抗体可被2-Me（2-巯基乙醇）破坏
•
IgG抗体分子量小，可通过胎盘屏障，造成新生儿溶血
新生儿溶血病
ABO正反定型试验方法
• • • • • 玻片法 试管法：经典 微量板法： 微柱凝胶法 PCR方法
• 4、结论
综上所述：可判断为A亚型，但还不能确定亚型的具体分型 • 输血：A型红细胞、血小板
ABO亚型的检测
人源抗 A/B 抗-H
ABO亚型
吸收放散
检测项目 抗-AB
抗A1
实例分析（二）
-A
室温 4+
-B
2+
-D
4+
自身c
2+
Ac
2+
Bc
4+
分析：患者的血型可能是A型。 巨球蛋白血症或部分多发性骨髓瘤患者，血液中异 常球蛋白升高，导致缗钱状凝集 对策：核对患者诊断和用药情况；盐水替代 ：A型 输血：A型红细胞、血小板
A1c（+） A2c和筛选 c自c(-)，
含抗A1的A或AB亚型
所有细胞呈（+）
包括自身对照 部分筛选（+） 自身（-）
自身抗体和同种 抗体
抗体鉴定
交叉配血
交叉配血中遇到的问题如果在血型鉴定中做 了反定型，在血型鉴定中就能发现问题，如果血 型鉴定中找到原因，配血问题自然能解决。
试验结果
主 侧 + 自身对照 抗体筛选 -
实例分析（三）
-A 室温 2+
-B 2+
-D 4+
自身c 0
Ac 0
Bc 0
患者是新生儿，抗体未出，反定无效 正定型未出现2管强凝集 血型可能是O型，脐带血中有Wharton胶。 洗涤被检细胞后正定型凝集消失：O型
输血：O型血
ABO正反定型不符需要关注的问题
ຫໍສະໝຸດ Baidu
患者的年龄？ 细胞是否三洗？
患者是否血浆蛋白浓度低？
白血病 输异型血 移植 输血反应 血型物质↑
正定型，意外抗原反应
1、获得性B抗原(类B) (临床提示感染) 2、多凝集红细胞 3、自身凝集素 (临床提示AIHA)直抗（+） 4、红细胞粘附大量蛋白 5、红细胞未洗涤,血清对 试剂反应 6、输异型血(输血史) 7、造血干细胞移植(病史) （混合视野）