东北制药辽宁生物生物分子诊断试剂培训材料资料

产品优势
➢通 过 磁 珠 法 获 得 高 纯 度 核 酸 ， 加 大 检 测 样 本 量 (200µl)，提高检测灵敏度和精确度； ➢通过检测内标来监测样本中是否具有PCR 抑制物， 避免假阴性； ➢通过优化PCR体系中的UNG酶+dUTP措施，高效降 解可能的污染产物，避免假阳性。
产品性能
灵敏度 线性范围 基因型检测 样本量 出结果时间 内标 操作优势
某公司 能 部分能 部分能 是 是 否
罗氏公司 能 能 能 否 否 是
东药生物 能 能 能 否 否 是
最终判断结果 与罗氏试剂等效性判断
失败 严重偏差
成功 ——
成功 等效
目前，东药生物建立的内对照系统，是国内唯一一个能够真正对样 本检测全程起到质控作用的高效系统，达到美国罗氏试剂的同级水平。
东药生物
RNA 假病毒（Armored RNA） 质控系统介绍
东药生物
RNA假病毒的重要性
由于裸露的RNA标准品和质控品极不稳定。而使用病原体颗粒或 细胞作为标准品和质控品，则有传染的危险性。因此美国罗氏公司开 发了耐核糖核酸酶病毒样颗粒-MS2噬菌体样颗粒，又称RNA假病毒 颗粒，解决了上述RNA标准品和质控品的长期储存的问题。本公司借 鉴罗氏公司的技术，开发了适合本公司产品特点的假病毒制备技术。 目前该技术已经成功的应用在丙肝，艾滋病等RNA病毒核酸定量检测 试剂中。
东药生物
产品特点4
• 假阴性控制：设置高效的内对 照系统，内标探针与HBV目标 基因探针采用不同的荧光报告 基团标记，通过内标来检测 PCR检测的全过程，避免PCR假 阴性。
目的基因
内标
HEX:555nm
洗涤
1次完成
核酸洗脱 无需加热
更换离心管 无需更换
核酸回收率 高
核酸纯度 高
耗时
20-30分钟
常规磁珠法 备 注
需要
简化操作，降低成本，节省时间。
55-65℃
洗涤 3-4次 加热洗脱
加热增大交叉污染概率，同时导致核酸降解，降低 了检测灵敏度。
简化操作，提高操作效率，减少污染。
简化操作，降低交叉污染概率。
更换2-3次 简化操作，降低成本，减少污染
低
操作过程少，无热损耗，核酸损失率低
低
灵敏度好，重复性好
40-60分钟 24个样本
东药生物
内对照分子监测系 统介绍
东药生物
内对照系统的重要性
1. 真实反应扩增效率避免假阴性，假阴性是目前PCR方 法诊断试剂体系中最重视的问题之一，是检测结果可靠 性的重要标示。 2. 内对照能够对整个实验流程，包括样品提取、分装、 PCR热循环仪孔间差、PCR抑制元素等等可能的影响因 素进行监控，能够提高检测系统的安全性。
6.转移核酸
东药生物
常规磁珠核酸纯化基本过程
1.加入裂解液
2.高温裂解病毒 3.磁珠吸附
4.一次清洗
5.磁珠吸附
6.二次清洗
7.磁珠吸附
8.三次清洗
9.磁珠吸附
10.洗脱ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ酸
11.高温助洗脱
12.转移核酸
国内现有试剂操作过程
东药生物
东药生物磁珠核酸纯化平台技术优势
比较项目 酶促裂解 裂解温度
东药生物 不需要 室温
准确定量线性范围为:3x108~3x101IU/ml
东药生物
• 灵敏度高：
产品特点2
25份10 IU/ml 的灵敏度检测结果图，检出率为100%。
东药生物
产品特点3
• HBV基因型检测范围广：可检 测HBV A、B、C、D、E、F、 G、H已有所有基因型。
检测的基因型血清盘来源于Seracare Life Sciences。
完成。设有符合GMP要求的生产车间，研发中心和质检中心。
➢公司有6个分子诊断试剂产品投入生产，可以年产3000万人份诊断试剂。 ➢公司积极引进国内外高技术人才，不断提升研发能力和生产技术水平，在生物
医药领域为客户提供高品质产品和优质服务，是国内一流的临床诊断试剂和生物 医药产品的生产和供应商。
分子精确检测技术平台
东药生物
内对照系统监控流程
1.内标监控核酸提取全程
2.内标监控PCR扩增全程
3.内标监控PCR仪器孔间差异
东药生物
内对照系统有效性的比较
比较项目 是否能够监测核酸提取过程？ 是否能够监测PCR抑制物质？ 是否能监测PCR扩增空间差异？ 是否对靶基因扩增产生抑制效应？ 是否干扰灵敏度？ 是否对95%以上的阳性样本起到监测作用？
10 IU/ml 30-3×108 IU/ml HIV-1型的10个亚型 200 µl 100 min 有 简便，精确，稳定
磁珠法 提取核酸
30 min
PCR反应液准备 30µl样本+
20µlPCR混合液
10 min
PCR扩增 结果
70 min
上机检测
东药生物
产品特点1
• 线性范围宽：每个样本重复2次检测
分子检测产品简介
公 司 简 介
➢东北制药集团辽宁生物医药有限公司建于2010年2月，是由东北制药集团与国外
先进技术团队共同创办的高科技合资企业。
➢公司以重大传染病分子诊断试剂作为先导产品，陆续推出其他系列分子诊断试剂
，同时开展保健品和基因工程药物等产品的研发和生产。
➢公司位于辽宁本溪经济开发区医药产业园，项目计划投资2.52亿元，分两期建设
公司引进国外原创技术，创建了分子精确检 测技术平台，开发了系列重大传染病病原体 （如乙肝，丙肝和艾滋病病毒等）荧光定量 检测试剂。其检测灵敏度，精确性和稳定性 达到国际同类产品的先进水平，同时检测程 序简单，容易操作，更具有产品优势。
技术平台建立
纳米磁珠核酸提取技术 平台介绍
东药生物
磁珠核酸提取基本原理
第一步：细胞的裂解， 释放核酸
第二步：磁珠选择性的与核酸结合
第三步：用洗涤液将杂质清洗。
第四步：用洗脱液将核酸洗脱下来。
东药生物
东药生物磁珠法介绍
全分散高科技纳米磁珠（显微照片）
磁珠分离器
东药生物磁珠样品
东药生物
东药生物磁珠核酸纯化过程
1.常温裂解
2.磁珠吸附
3.一次清洗
4.磁珠吸附
5.常温洗脱
东药生物
东药生物假病毒制备过程
噬菌体RNA
噬菌体改造的表达载体
表达的假病毒颗粒
假病毒RT-PCR Real time PCR 检测
东药生物
产品介绍
• 乙型肝炎(HBV)核酸（DNA）定量检测试剂盒 （荧光探针法）
• 人免疫缺陷病毒(HIV)核酸（RNA）定量检测试 剂盒（荧光探针法）
东药生物
乙型肝炎(HBV)核酸（DNA）定量检测试剂盒（荧光探针法）