大黄的提取分离和鉴定
大黄中蒽醌类成分的提取分离与鉴定
大黄中蒽醌类成分的提取分离与鉴定大黄是一种广泛应用的中药材，含多种活性成分，其中最重要的是蒽醌类化合物。
这些化合物具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤等多种生物活性，因此成为广泛应用的化合物之一。
本文将介绍大黄中蒽醌类成分的提取分离与鉴定过程。
大黄通常通过醇提、水提、超声波提取等方式提取蒽醌类成分。
醇提法是最常用的提取方法之一。
一般可以采用乙醇、甲醇或酒精等有机溶剂进行提取。
以乙醇为例，其提取过程如下：（1）将大黄切碎，加入适量的96%的乙醇。
（2）加热回流提取1小时。
（3）过滤，滤去残渣。
（4）将过滤液浓缩至干燥。
（5）得到蒽醌类化合物粗提取物。
大黄中的蒽醌类成分通常需要通过柱层析、薄层层析、高效液相色谱等多种色谱技术进行分离。
其中，高效液相色谱技术最常用。
根据不同的色谱柱填料、移相系统、检测器等条件的不同，可以对获得的粗提取物进行进一步分离。
以高效液相色谱为例，其分离过程如下：（1）将粗提取物溶于少量甲醇中。
（2）进行反相或正相高效液相色谱分离。
大黄中蒽醌类成分的鉴定主要采用紫外分光光度法、质谱分析法和红外光谱法等技术。
其中，以紫外分光光度法为例，其鉴定过程如下：（1）使用UV特征峰进行鉴定。
（2）将标准品或纯品溶于适量的甲醇中，按比例稀释。
（3）将样品溶液置于紫外分光光度计检测器中。
（4）记录在特定波长下的吸光度。
（5）通过计算溶液中所含的蒽醌类成分的浓度来鉴定蒽醌类化合物。
总之，大黄中蒽醌类成分的提取、分离和鉴定可以采用多种技术进行。
通过这些技术的应用，可以得到单纯、纯度高的化合物，为下一步的药理、毒理研究提供了保障。
大黄中蒽醌类成分的提取、分离和鉴定
大黄中游离蒽醌类成分的提取、分离与鉴定一、实验目的1.掌握蒽醌苷元的提取方法--双相酸水减法2.掌握梯度PH萃取法提取分离大黄中各种蒽醌苷元的原理及操作方法3.掌握羟基蒽醌类化合物的颜色反应及薄层色谱鉴别方法二、实验原理1.提取原理双向酸水解法，为一相与酸水不相互溶的有机溶剂，另一相为酸水，加热回流水解的方法。
由于大黄中的羟基蒽醌类化合物多以苷的形式存在，所以首先要将苷水解成苷元，本实验选用硫酸和乙酸乙酯作为双向酸水解的溶剂，采用加热回流方法，提取大黄药材中的游离蒽醌类化合物。
根据苷元不溶于水，可溶于乙醚、乙酸乙酯等亲脂性有机溶剂的性质，即在加热回流提取过程中，稀硫酸可将蒽醌苷元水解成苷元，游离出来的蒽醌苷元随即溶于乙酸乙酯中，从而将蒽醌苷元提取出来。
2.分离原理pH梯度萃取法羟基蒽醌类化合物酸性强弱不同，用pH梯度法进行分离。
具有羧基或多个β位酚羟基的蒽醌可溶于5%碳酸氢钠溶液；具有一个β位酚羟基的蒽醌可溶于5%碳酸钠溶液；只具有α位酚羟基的蒽醌，酸性弱，只溶于氢氧化钠溶液。
以分离酸度不同的蒽醌苷元。
也可利用游离蒽醌的极性不同，采用硅胶柱色谱法进行分离。
（1）大黄中游离蒽醌的酸性强弱顺序大黄酸（-COOH）＞大黄素（β酚-OH）＞芦荟大黄素（醇-OH）＞大黄素甲醚（-OCH3）≈大黄酚（-CH3）（2）大黄中游离蒽醌的极性大小顺序大黄酸＞大黄素＞芦荟大黄素＞大黄素甲醚＞大黄酚大黄酚和大黄素甲醚酸性相近，但极性不同，可用硅胶柱色谱法进行分离。
三、实验方法四、 1.总蒽醌苷元的提取、分离工艺流程大黄药材（粗粉）50g乙酸乙酯提取液药渣去除下层酸水层，再用蒸馏水水洗2次（50ml/次）直至乙酸乙酯层pH值呈中性乙酸乙酯提取液碱水层乙酸乙酯层滴加浓盐酸，调节pH=2，放置 5%Na2CO3溶液萃取三次（40ml/次）沉淀物（黄色结晶或黄色絮状沉淀）碱水层沉淀过滤，冰醋酸精制滴加浓盐酸，调节溶液萃黄色结晶（大黄酸）沉淀物（橙色结晶或40ml/次）橙色絮状沉淀）沉淀过滤，碱水层丙酮精制橙色结晶（大黄素）节pH=2沉淀物（橙色絮状沉淀）黄色沉淀物乙酸乙酯层沉淀过滤，乙酸乙酯精制硅胶柱色谱黄色针晶洗脱剂为石油醚（60-90℃）（芦荟大黄素）-乙酸乙酯（15：1）大黄酚和大黄素甲醚混合物2.总蒽醌苷元的提取大黄粗粉50g，置500ml烧瓶中，加20%硫酸溶液100ml和乙酸乙酯250ml，水浴回流提取2h，放置，冷后过滤，残渣弃去，乙酸乙酯提取液置分液漏斗中，分出酸水层，乙酸乙酯提取液用蒸馏水洗2次（20ml/次），将乙酸乙酯放置在锥形瓶中，密封。
大黄中蒽醌类成分的提取分离和鉴定
大黄中蒽醌类成分的提取分离和鉴定
大黄中蒽醌类成分的提取分离和鉴定是一项重要的分析化学工作。
通常采用溶剂提取法将大黄中的蒽醌类成分分离。
首先将大黄粉末用60目筛过筛，然后用乙醇将大黄粉末浸泡2~3次，每次浸泡时间为1小时，离心分离液体，将沉淀收集并用肉桂酸重结晶法纯化获得大黄中的蒽醌类成分。
对所提取的大黄蒽醌类成分进行鉴定时，需采用高效液相色谱和质谱联用技术。
高效液相色谱条件为：色谱柱为C18（250mm×4.6mm，5μm），流速为1.0mL/min，检测波长为254nm，梯度洗脱方式：A相为甲醇，B相为水，梯度程序：0~12min，A相从30%逐渐升高到98%，12~15min，A相维持在98%。
通过高效液相色谱检测，可以得到大黄中蒽醌类成分的相对保留时间和峰面积，并使用质谱联用技术对其分子式进行鉴定。
同时，通过实验数据对大黄中蒽醌类成分的含量进行确定，并与国家药典规定的标准相比较，以确保其质量符合相应的药品标准。
实验二 大黄中大黄素的提取
滤渣பைடு நூலகம்
③水洗至中性，干燥
水洗：有H2SO4 留在滤渣中，若不 除去，干燥过程水分减少， H2SO4 浓度增高，造成药材碳化。
滤饼
①
②
③
二、总羟基蒽醌苷元的提取
1. 实验仪器： 平底烧瓶、索氏提取器、冷凝管、滤纸 2. 实验试剂： 干燥滤饼、乙醚
3. 实验方法 干燥滤饼
①置索氏提取器中，加150 （100+50）乙醚，提取1.5h
实验二 大黄中大黄素的提 取、分离和鉴定
一、大黄的酸水解
1. 实验仪器： 圆底烧瓶、冷凝管、电炉、滤布 2. 实验试剂： 大黄粉、20%H2SO4
3. 实验方法 15g大黄粉
回流：防止水分蒸发使硫酸浓度增 加造成药粉碳化。
①120ml 20%H2SO4,直火回流加热1h， ②滤布抽滤
酸水提取：大黄的蒽醌类化合物多 以苷的形式存在，用酸水解可得总 蒽醌苷元，苷原极性弱，留在滤渣 中。
乙醚提取：苷元极性弱，用弱极性 乙醚提取。
乙醚提取液（总蒽醌苷元）
温度需控制在溶剂蒸汽至冷凝管 第二个球处：防止乙醚蒸汽逸出 造成污染且影响提取效率。
玻璃仪器必须干燥，若平底烧瓶 中有水，水将会改变提取试剂的 极性，影响提取效率，且可能与 乙醚混溶后改变溶剂沸点。
三、pH梯度萃取
1. 实验仪器： 锥形瓶、布氏漏斗、滤纸、pH试纸 2. 实验试剂： 乙醚提取液、NaHCO3 、Na2CO3、NaOH
①
②
④ ③
四、柱色谱分离大黄素
1. 实验仪器： 色谱柱、烧杯、烧杯 2. 实验试剂： 硅胶、脱脂棉、丙酮、石油醚-乙酸乙酯
3. 实验方法
用洗脱剂检漏，留2cm洗脱剂缓冲 且排除脱脂棉的气体
大黄的提取分离的实验报告
大黄的提取分离的实验报告大黄的提取分离的实验报告引言：大黄，又称黄连木，是一种常见的中草药，具有清热泻火、解毒等功效。
其中的有效成分主要为大黄素，因此提取和分离大黄素成为研究的重点之一。
本实验旨在通过提取分离的方法，获得纯度较高的大黄素。
实验步骤：1. 材料准备：准备好干燥的大黄根，乙醇、水、醋酸等溶剂。
2. 粉碎大黄根：将大黄根研磨成粉末状，以增加提取效果。
3. 提取溶剂的选择：根据大黄素的溶解性，选择适合的溶剂。
在本实验中，选用乙醇为主要溶剂。
4. 提取：将粉碎后的大黄根与乙醇混合，放置一段时间，利用乙醇的溶解性，将大黄素从大黄根中提取出来。
5. 过滤：将提取液过滤，去除大黄根的残渣。
6. 浓缩：将过滤后的提取液进行浓缩，以减少体积，提高大黄素的浓度。
7. 结晶：将浓缩后的提取液进行结晶，通过控制温度和溶剂的浓度，使大黄素结晶出来。
8. 分离：将结晶后的大黄素与溶剂进行分离，得到纯度较高的大黄素。
实验结果：经过以上步骤，成功从大黄根中提取分离出了纯度较高的大黄素。
通过对提取液的浓缩和结晶，得到了结晶良好的大黄素晶体。
通过分离过程，成功去除了其他杂质，获得了纯度较高的大黄素。
实验讨论：1. 提取溶剂的选择：乙醇是一种常用的提取溶剂，对大黄素具有较好的溶解性。
但是在实际操作中，也可以根据实验需要选择其他溶剂进行提取。
2. 结晶条件的控制：结晶是将溶液中的溶质转化为晶体的过程。
在本实验中，通过控制温度和溶剂浓度，成功得到了结晶良好的大黄素晶体。
温度和溶剂浓度的选择对结晶的效果有重要影响，需要根据实际情况进行调整。
3. 分离的重要性：分离是提取分离过程中不可或缺的一步，通过分离可以去除杂质，提高目标物的纯度。
在本实验中，通过分离过程，成功去除了大黄根中的其他成分，获得了纯度较高的大黄素。
实验结论：通过本实验的提取分离过程，成功获得了纯度较高的大黄素。
实验结果表明，提取溶剂的选择、结晶条件的控制以及分离的重要性对于提高大黄素的纯度具有重要意义。
大黄蒽醌类成分的提取分离与鉴定
大黄蒽醌类成分的提取分离与鉴定大黄蒽醌类成分是指一类存在于大黄根茎中的化学成分，主要成
分包括大黄素、大黄酸与大黄蒽醌等。
提取分离与鉴定这些化学成分
需要以下几个步骤：
1. 样品的准备：采集大黄根茎样品，削去外皮和细根，切碎成小
块或粉碎成粉末状。
2. 提取：将样品加入适量的有机溶剂中进行提取，常用的有机溶
剂有乙醇、乙醚、丙酮等。
提取可以采用不同的方法，比如浸泡提取、超声波提取等。
3. 结晶：将提取得到的药材颗粒溶解在有机蒸馏水中，然后用双
水浴器加热到一定温度，待溶液浓缩到一定程度时，停止加热，继续
搅拌至其冷却结晶。
4. 分离：用过滤或分离漏斗等方法将结晶物分离出来，再用洗涤
剂或其他方法对其进行提纯。
5. 鉴定：利用色谱法、红外光谱法、核磁共振法等手段对所提纯
的化合物进行鉴定，确定其结构和成分。
以上是大黄蒽醌类成分的提取分离与鉴定的基本步骤，可以根据
实际情况进行调整和优化。
大黄中大黄素的提取分离与鉴定精品PPT课件
学习总结
经常不断地学习,你就什么都知道。你知道得越多,你就越有力量 Study Constantly, And You Will Know Everything. The More
You Know, The More Powerful You Will Be
结束语
当你尽了自己的最大努力时，失败也是伟大的， 所以不要放弃，坚持就是正确的。Hale Waihona Puke 南中医 中药化学实验 大黄素
研碎装入纸筒
索氏提取器回流
南中医 中药化学实验 大黄素
三.PH梯度萃取
1.实验原理 根据大黄酸，大黄素，芦荟大黄素，大黄酚和大黄素 甲醚的酸性强弱不同，采用由弱到强加入不同碱液进 行萃取的方法，分离的单大黄素粗品。
南中医 中药化学实验 大黄素
2.流程图
Et20提取液
用6M HCl调pH3，抽滤。得到沉淀（大 黄素粗品）。
南中医 中药化学实验 大黄素
取大黄素粗品，进行点样。
南中医 中药化学实验 大黄素
四.柱色谱分离大黄素
1.实验原理 根据大黄酸，大黄素，芦荟大黄素，大黄酚，大黄 素甲醚等5种成分的极性大小不同，则与鬼叫吸附剂 产生的吸附能力不同而分离
2.实验方法 （1）.湿法装柱 （2）.干法上样 （3）.洗脱收集 （4）.合并浓缩 （5）.放置析晶
Et2O提取液（1）
NaHCO3液（大黄酸）
Et2O提取液（2）
NaCO3液
Et2O提取液（3）
NaCO3液（芦荟 沉淀（芦荟大黄素） 大黄素）
Et2O提取液（4） NaOH液(大黄素甲醚 和大黄酚)
南中医 中药化学实验 大黄素
南中医 中药化学实验 大黄素
SUCCESS
大黄中大黄素的提取
大黄中大黄素的提取、分离和鉴定一、实验目的与要求1．熟悉蒽醌类成分的提取分离方法。
2．掌握PH梯度提取法的原理和操作技术。
3．学习用硅胶柱色谱法分离精制大黄素。
4．学习羟基恩醌类化合物的鉴定方法。
二、实验方法（一）、基本原理大黄中羟基葸醌类化合物多数以苷的形式存在，故先用稀硫酸溶液把蒽醌苷水解成苷元，利用游离葸醌可溶于热氯仿的性质，用氯仿将它们提取出来。
由于各羟基葸醌结构上的不同所表现的酸性不同，用pH梯度萃取法分离它们；大黄酚和大黄素甲醚酸性相近，利用其极性的差别，用柱色谱分离之。
（二）操作步骤实验步骤实验操作实验现象和结果总羟基蒽醌苷元的提取1 称取大黄粉3.5g，用滤纸包裹，置索氏提取器中，圆底烧瓶中加入乙醚150ml，回流提取2h，得乙醚提取液。
乙醚提取液为黄色澄清溶液。
2 点板，展开，展开剂为石油醚-乙酸乙酯（7:3）。
硅胶板上可见四个斑点，从上往下依次为黄色斑点、橙色斑点、黄色斑点、黄色斑点。
pH梯度萃取分离1 大黄酸的分离和提纯：将提取液用5%NaHCO₃振荡提取数次，分出水层，重复提取数次后合并水层提取液，用盐酸酸化至pH3,得黄色沉淀。
抽滤，水洗沉淀，再用丙酮洗，干燥后待测。
水层提取液为呈紫红色。
盐酸酸化时有大量气泡生成。
酸化后得到黄色沉淀。
2 大黄素的分离和纯化：碳酸氢钠溶液提取后的乙醚层以5%Na2CO₃振荡提取数次，分出水层，合并水层提取液，加盐酸至酸性（pH6左右），得黄色沉淀，抽滤，水洗沉淀，再用丙酮洗，干燥后待测。
水层提取液呈红色。
盐酸酸化后得到黄色沉淀。
3 芦荟大黄素的分离和提纯：碳酸钠溶液提取后的乙醚层，用0.25％NaOH振荡提取数次，合并水层提取液，加盐酸至pH约为6，得橙色沉淀。
抽滤，水洗沉淀，干燥后待测。
水层提取液层红色。
盐酸酸化后得到橙色沉淀。
4 大黄酚和大黄素甲醚的分离和提纯：将步骤3得到的乙醚层用5％NaOH振荡提取数次至无色，合并水层提取液，加盐酸酸化，得黄色沉淀。
大黄素的提取、分离与鉴定
大黄中大黄素的提取、分离与鉴定一实验目的1）熟悉蒽醌类成分的提取分离方法2）掌握PH梯度提取法的原理和操作技术3）掌握蒽醌类化合物鉴定方法4）了解液液萃取法分离混合物的实验方法二实验原理大黄为蓼科植物,味苦,性寒,具有泻热通肠、凉血解毒、逐瘀通经等功效。
其主要有效成分为大黄素、芦荟大黄素、大黄素甲醚等蒽醌类化合物 ,其中大部分为结合的蒽醌,少量为游离的蒽醌。
结合的蒽醌类化合物由于其苷元具有酚羟基,故呈弱酸性,能溶于水、乙醇、碳酸氢钠溶液,但在有机溶剂中的溶解度很小。
游离的蒽醌易溶于氯仿、乙醚等有机溶剂而不溶于水。
其中，大黄酸具有羧基，酸性最强；大黄素具有β-酚羟基，酸性第二；芦荟大黄素连有羟甲基，酸性第三；大黄素甲醚和和大黄酚的酸性最弱。
根据以上化合物的酸度差异，可用碱性强弱不同的溶液进行梯度萃取分离。
大黄酸 R1=H R2=COOH大黄素 R1=CH3R2=OH芦荟大黄素 R1=CH2OH R2=H大黄素甲醚 R1=CH3R2=OCH3大黄酚 R1=CH3R2=H本实验主要用薄层层析法分离纯化大黄素，其Rf值由大到小分别为大黄酚和大黄素甲醚、大黄素、芦荟大黄素、大黄酸。
大黄酸：黄色针状结晶， mp.321—322 ℃（升华），不溶于水，能溶于吡啶、碳酸氢钠水溶液，微溶于乙醇、苯、氯仿、乙醚和石油醚。
大黄素：橙黄色针状结晶，mp.256—257 ℃（乙醇或冰醋酸），能升华。
其溶解度如下：四氯化碳0.01 %、氯仿0.07 %、二硫化碳0.009 %、乙醚0.14 %、苯0.041 %。
易溶于乙醇，可溶于稀氨水、碳酸钠水溶液，几乎不溶于水。
三实验器材1)试药：大黄粗粉、20 %硫酸溶液、5 %碳酸氢钠溶液、5 %碳酸钠溶液、盐酸、丙酮、乙酸乙酯、硅胶CMC-Na板、石油醚、大黄素标准品等2)仪器：回流装置一套、烧杯、层析槽、试管、梨形分液漏斗、水浴锅、电热套、旋转蒸发仪、循环水式多用真空泵、抽滤瓶、铁架台等四实验内容1)酸水解:用天平称取大黄粉10 g，置500 ml烧杯中，加20% H2SO4水溶液100 ml，直火加热1小时，用布氏漏斗抽滤，滤饼水洗后于70 ℃左右干燥。
大黄中蒽醌类化合物的提取分离和鉴定
大黄中蒽醌类化合物的提取分离和鉴定
大黄（Rhizoma Rhei）是一种常用中药，主要含有蒽醌类化合物，如大黄素、大黄酚、大黄酸等。
提取、分离和鉴定大黄中的蒽醌类化合物的常用方法如下：
1. 提取：将大黄粉末与适量的乙醇或乙醚等有机溶剂进行浸泡提取，较常用的是乙醚提取。
在恒温搅拌的条件下，将大黄与乙醚按一定比例混合30分钟以上，然后进行过滤，过滤液即为提取液。
2. 分离：提取液中含有大黄中的多种化合物，其中包括蒽醌类化合物。
为了分离和纯化蒽醌类化合物，通常采用柱层析、薄层层析等技术。
柱层析是将提取液通过填料（如硅胶、活性炭等）柱进行洗脱，根据化合物在柱上的亲疏性和相互间作用力的差异，逐步分离目标化合物。
薄层层析则是将提取液涂抹在硅胶或其他载体上的薄层，再通过浸泡，将化合物分离开。
3. 鉴定：分离到目标化合物后，可以通过理化性质和光谱分析进行鉴定。
常用的鉴定方法有红外光谱（IR）、质谱（MS）和核磁共振（NMR）等。
红外光谱可以用于确定化合物的官能团，质谱可以用于分析分子的质量和结构信息，核磁共振则可以提供化合物的详细结构信息。
以上是大黄中蒽醌类化合物的提取、分离和鉴定的常用方法，通过这些方法可以对大黄中的蒽醌类化合物进行有效地提取、分离和鉴定。
设计大黄实验报告
一、实验目的1. 了解大黄的化学成分和药理作用。
2. 掌握大黄提取、分离和鉴定方法。
3. 学习利用现代分析技术对大黄进行鉴定。
二、实验原理大黄（Rheum palmatum L.）是蓼科大黄属植物，具有泻下、清热、解毒、活血等功效。
大黄的主要活性成分是蒽醌类化合物，包括大黄酸、大黄素、大黄酚等。
本实验采用溶剂提取法、薄层色谱法、紫外光谱法等方法对大黄进行提取、分离和鉴定。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：大黄药材、硅胶、石油醚、甲醇、氯仿、正己烷、氨水、氢氧化钠、碳酸钠等。
2. 实验仪器：电子天平、回流提取器、旋转蒸发仪、薄层色谱仪、紫外可见分光光度计、层析缸、显微镜等。
四、实验步骤1. 大黄药材的预处理（1）将大黄药材洗净，晾干，粉碎成粉末。
（2）称取一定量大黄粉末，置于回流提取器中。
（3）加入适量石油醚，加热回流提取1小时。
（4）过滤，取滤液，减压浓缩至干，得到大黄石油醚提取物。
2. 大黄提取物的分离（1）将大黄石油醚提取物用甲醇溶解，制成甲醇溶液。
（2）取适量甲醇溶液，加入氯仿，搅拌，静置分层。
（3）取氯仿层，用正己烷稀释，制成正己烷溶液。
（4）取正己烷溶液，进行薄层色谱（TLC）分析，观察大黄酸、大黄素等成分的斑点。
3. 大黄成分的鉴定（1）取TLC分离得到的斑点，刮下，置于试管中。
（2）加入氨水，观察颜色变化，确认大黄酸、大黄素等成分。
（3）取TLC分离得到的斑点，用甲醇溶解，制成甲醇溶液。
（4）用紫外可见分光光度计测定甲醇溶液的吸光度，确定大黄成分的浓度。
4. 结果与分析（1）通过TLC分析，观察到大黄酸、大黄素等成分的斑点，说明大黄中存在这些成分。
（2）通过氨水反应，确认大黄酸、大黄素等成分的存在。
（3）通过紫外可见分光光度计测定，得到大黄酸、大黄素等成分的浓度。
五、实验结论本实验成功提取、分离和鉴定了大黄中的大黄酸、大黄素等成分。
结果表明，大黄具有泻下、清热、解毒、活血等功效，为临床应用提供了科学依据。
大黄中大黄素的提取分离与鉴定
H COOH
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2.流程
10g大黄粉 100ml 20% H2SO4直火回流加热1h，滤布抽滤
滤 渣
水洗至中性，干燥
滤饼
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10g大黄粉
直火回流加热
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滤布抽滤
滤渣
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二.总羟基蒽醌苷元的提取
1.实验原理 大黄中总蒽醌苷元为亲脂性成分，故可用乙醚提取，连续回 流提取法在溶剂提取法中效率最高
2.流程图 干燥滤饼
置索氏提取器中，加150ml（100+50）Et2O 提取2.5h（至提取液近无色）
Et2O 提取液(总蒽醌苷元)
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研碎装入纸筒
索氏提取器回流
最新课件7ຫໍສະໝຸດ 三.PH梯度萃取1.实验原理 根据大黄酸，大黄素，芦荟大黄素，大黄酚和大黄素 甲醚的酸性强弱不同，采用由弱到强加入不同碱液进 行萃取的方法，分离的单大黄素粗品。
实验原理大黄的蒽醌类化合物大多以苷的形式存在如大黄酚葡萄糖苷大黄素葡萄糖苷大黄酸葡萄糖苷芦荟大黄素葡萄糖苷一些双葡萄糖链苷及少量的番泻苷abcd等其主要成分的结构如下
实验二 大黄中大黄素的提取，分离和鉴定
一.大黄的水解 二.总羟基蒽醌苷元的提取 三.PH梯度的萃取 四.柱色谱分离大黄素 五.大黄素的鉴定
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2.流程图
Et20提取液
Et2O提取液（1）
NaHCO3液（大黄酸）
Et2O提取液（2）
NaCO3液
Et2O提取液（3）
NaCO3液（芦荟 沉淀（芦荟大黄素） 大黄素）
Et2O提取液（4） NaOH液(大黄素甲醚
和大黄酚)
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大黄的提取实验报告
大黄的提取实验报告一、实验目的本实验旨在探究从大黄中提取有效成分的方法，并对提取产物进行定性和定量分析，以了解大黄中活性成分的含量和性质。
二、实验原理大黄中含有多种化学成分，如蒽醌类化合物（大黄酸、大黄素、芦荟大黄素等）、鞣质、多糖等。
本次实验主要针对蒽醌类化合物进行提取，利用其在不同溶剂中的溶解性差异，通过溶剂萃取和柱层析等方法进行分离纯化。
三、实验材料与仪器1、材料大黄药材：干燥的大黄根茎。
试剂：乙醇、乙醚、盐酸、氢氧化钠、乙酸乙酯、硅胶等。
标准品：大黄酸、大黄素等标准对照品。
2、仪器粉碎机回流装置旋转蒸发仪层析柱紫外可见分光光度计高效液相色谱仪四、实验步骤1、大黄药材的预处理将干燥的大黄根茎用粉碎机粉碎，过 40 目筛，得到大黄粉末，备用。
2、提取称取一定量的大黄粉末，加入适量的乙醇，在回流装置中加热回流提取 2 小时。
提取液过滤，收集滤液，减压浓缩至无醇味，得到粗提物。
3、酸水解在粗提物中加入适量的盐酸溶液，加热水解 1 小时，使结合型蒽醌转化为游离型蒽醌。
水解液冷却后用氢氧化钠溶液中和至中性。
4、萃取将水解后的溶液用乙醚萃取多次，合并乙醚萃取液，减压浓缩至干，得到乙醚提取物。
5、柱层析分离将乙醚提取物用硅胶柱层析进行分离，以乙酸乙酯石油醚为洗脱剂，梯度洗脱，收集含有大黄酸、大黄素等成分的洗脱液。
6、浓缩与干燥将收集的洗脱液减压浓缩至干，得到纯化的大黄提取物。
五、实验结果与分析1、定性分析采用薄层色谱法（TLC）对提取物进行定性分析。
以大黄酸、大黄素等标准品为对照，在相同的展开条件下，观察提取物的斑点与标准品斑点的位置和颜色是否一致。
结果显示，提取物中含有与标准品相同的成分。
2、定量分析采用高效液相色谱法（HPLC）对提取物中的大黄酸、大黄素等成分进行定量分析。
根据标准曲线计算出提取物中各成分的含量。
六、实验讨论1、提取方法的选择本次实验采用乙醇回流提取法，该方法操作简单，提取效率较高。
大黄萃取的实验报告
一、实验目的1. 了解大黄的化学成分及其提取方法；2. 掌握液-液萃取法提取大黄中有效成分的原理及操作步骤；3. 评价不同萃取剂对大黄中有效成分的提取效果。
二、实验原理大黄是一种传统的中药材，主要成分为蒽醌类化合物。
液-液萃取法是一种常用的分离和提纯方法，其原理是利用两种互不相溶的溶剂，使待提取物质在两相之间分配，从而实现分离。
三、实验器材与药品1. 实验器材：分液漏斗、烧杯、移液管、玻璃棒、电子天平、烘箱等；2. 药品：大黄粉末、乙醇、乙酸乙酯、石油醚、氯仿、无水硫酸钠等。
四、实验步骤1. 准备大黄粉末：将大黄粉末过60目筛，备用；2. 样品制备：取一定量大黄粉末，加入适量乙醇，搅拌溶解，静置30分钟；3. 萃取：将上述溶液倒入分液漏斗中，加入等体积的乙酸乙酯，充分振荡，静置分层；4. 分离：将有机层与水层分离，收集有机层；5. 浓缩：将有机层倒入烧杯中，在水浴上加热蒸发，直至浓缩至一定体积；6. 干燥：将浓缩液转移至烘箱中，干燥至恒重；7. 称重：称取干燥后的大黄提取物，计算提取率。
五、实验现象1. 样品制备过程中，大黄粉末逐渐溶解；2. 萃取过程中，有机层与水层分层明显；3. 浓缩过程中，有机层体积逐渐减小；4. 干燥过程中，大黄提取物逐渐干燥。
六、实验结果与分析1. 大黄提取物的得率：根据实验结果，大黄提取物的得率为5.2%；2. 不同萃取剂对大黄中有效成分的提取效果：通过比较乙醇、乙酸乙酯、石油醚、氯仿等萃取剂对大黄中有效成分的提取效果，发现乙酸乙酯的提取效果最佳。
七、实验结论1. 液-液萃取法是一种有效的大黄提取方法，适用于提取大黄中的蒽醌类化合物；2. 乙酸乙酯是大黄中蒽醌类化合物提取的最佳溶剂；3. 本实验成功提取了大黄中的有效成分，为后续研究提供了基础。
八、实验注意事项1. 在实验过程中，注意安全操作，防止溶剂挥发和火灾；2. 萃取过程中，充分振荡，确保两相充分接触；3. 浓缩过程中，注意控制加热温度，防止溶剂过度挥发；4. 干燥过程中，注意烘箱温度，防止大黄提取物变质。
大黄提取分离实验报告
一、实验目的1. 熟悉大黄中蒽醌类成分的提取和分离方法。
2. 掌握pH梯度提取法的原理和操作技术。
3. 学习蒽醌类化合物的鉴定方法。
二、实验原理大黄是一种常用的中药材，具有清热解毒、活血化瘀、泻火凉血等多种功效。
大黄中的主要有效成分是蒽醌类化合物，包括游离蒽醌和蒽醌苷。
本实验采用pH梯度提取法，利用蒽醌类化合物在不同pH值下的溶解度差异进行分离。
三、实验材料1. 材料：大黄药材（掌叶大黄或唐古特大黄）2. 试剂：浓硫酸、NaHCO3、Na2CO3、NaOH、浓盐酸、浓硝酸、乙醚、石油醚、乙酸乙酯、硅胶G、CMC等3. 器械：粉碎机、索氏提取器、分液漏斗、烧杯、滴管、橡皮管、球形冷凝管、30cm层析缸、标本瓶、布氏漏斗、抽滤瓶、普通滤纸、薄层板、喷雾器、广泛pH试纸等四、实验步骤1. 粉碎：将大黄药材切片剪碎，用粉碎机粉碎得到大黄粗粉，经80目筛子过筛。
2. 酸解：取大黄粗粉50g，加入100ml浓硫酸，搅拌均匀，于索氏提取器中加热回流3小时，使蒽醌苷水解成苷元。
3. 水洗、抽滤、干燥：将酸解液过滤，用蒸馏水洗涤滤渣，抽滤，将滤液浓缩至约20ml，蒸干，得大黄蒽醌提取物。
4. 萃取结晶：将大黄蒽醌提取物用乙醚萃取，萃取液浓缩至干，得大黄蒽醌结晶。
5. 硅胶薄层层析：取大黄蒽醌结晶适量，加适量石油醚溶解，点于硅胶薄层板上，用苯-乙醚（8:2）为展开剂进行层析，晾干后观察斑点。
6. 纤维素柱层析：将硅胶薄层层析得到的大黄蒽醌结晶，用石油醚溶解，上柱，用苯-乙醚（8:2）为洗脱剂进行柱层析，收集各组分。
7. 鉴定：取各组分适量，加2%的氢氧化钠溶液1ml，观察颜色变化，鉴定游离蒽醌的种类。
五、实验结果1. 通过实验，成功提取出大黄中的蒽醌类化合物。
2. 通过硅胶薄层层析和纤维素柱层析，将大黄蒽醌类化合物分离为多个组分。
3. 通过鉴定，确定了大黄中游离蒽醌的种类，包括大黄酚、大黄素、大黄素甲醚、芦荟大黄素、大黄酸等。
大黄中大黄素的提取、分离和鉴定
大黄中大黄素的提取、分离与鉴定一、实验目的（1）熟悉蒽醌类成分的提取分离方法（2）掌握PH梯度提取法的原理和操作技术（3）掌握蒽醌类化合物鉴定方法（4）了解液液萃取法分离混合物的实验方法二、实验原理大黄为蓼科植物,味苦,性寒,具有泻热通肠、凉血解毒、逐瘀通经等功效。
其主要有效成分为大黄素、芦荟大黄素、大黄素甲醚等蒽醌类化合物,其中大部分为结合的蒽醌,少量为游离的蒽醌。
结合的蒽醌类化合物由于其苷元具有酚羟基,故呈弱酸性,能溶于水、乙醇、碳酸氢钠溶液,但在有机溶剂中的溶解度很小。
游离的蒽醌易溶于氯仿、乙醚等有机溶剂而不溶于水。
其中，大黄酸具有羧基，酸性最强；大黄素具有β-酚羟基，酸性第二；芦荟大黄素连有羟甲基，酸性第三；大黄素甲醚和和大黄酚的酸性最弱。
根据以上化合物的酸度差异，可用碱性强弱不同的溶液进行梯度萃取分离。
【1】本实验主要用薄层层析法分离纯化大黄素，其R f值由大到小分别为大黄酚和大黄素甲醚、大黄素、芦荟大黄素、大黄酸。
【2】大黄酸：黄色针状结晶mp.321—322℃（升华），不溶于水，能溶于吡啶、碳酸氢钠水溶液，微溶于乙醇、苯、氯仿、乙醚和石油醚。
大黄素：橙黄色针状结晶，mp.256—257℃（乙醇或冰醋酸），能升华。
其溶解度如下：四氯化碳0.01%、氯仿0.07%、二硫化碳0.009%、乙醚0.14%、苯0.041%。
易溶于乙醇，可溶于稀氨水、碳酸钠水溶液，几乎不溶于水。
【3】大黄酸R1=H R2=COOH大黄素R1=CH3R2=OH芦荟大黄素R1=CH2OH R2=H大黄素甲醚R1=CH3R2=OCH3大黄酚R1=CH3R2=H三、实验器材试药：大黄粗粉、20%硫酸溶液、5%碳酸氢钠溶液、5%碳酸钠溶液、盐酸、丙酮、乙酸乙酯、硅胶CMC-Na板、石油醚、大黄素标准品等仪器：回流装置一套、烧杯、层析槽、试管、梨形分液漏斗、水浴锅、电热套、旋转蒸发仪循环水式多用真空泵、抽滤瓶、铁架台等四、实验内容大黄素的提取、分离流程图大黄粗粉30g【4】20%H2SO4150ml加热1h,抽滤、干燥滤饼乙酸乙酯回流提取1h乙酸乙酯层5%NaHCO3萃取水层（紫红色）乙酸乙酯层5%Na2CO3水层（红色）乙酸乙酯层（弃掉）HCl黄色沉淀（粗品）水洗至中性，丙酮溶解，分离纯化大黄素结晶具体操作步骤：1.游离蒽醌的提取称取大黄粗粉30g，加20%H2SO4水溶液150mL，加热1小时，放冷，抽滤，同时滤饼水洗至近中性（除去H2SO4），于70℃干燥后，置回流装置中，加入乙酸乙酯300mL回流提取1小时，得到乙酸乙酯提取液。
大黄中大黄素的提取分离与鉴定
食品添加剂中的应用
天然色素
大黄素具有鲜艳的黄色，可以作为天然色素添加到食 品中，改善食品的色泽和感官品质。
抗氧化剂
大黄素具有抗氧化活性，可以作为食品抗氧化剂，延长 食品的保质期和保持食品的营养价值。
保健品及化妆品中的应用
保健品
大黄素具有多种生物活性，如抗炎、 抗菌、抗肿瘤等，可以作为保健品的 成分，提高保健品的功效。
型。
质谱鉴定
要点一
总结词
质谱鉴定是一种通过测量物质分子质量和碎片信息进行成 分分析的方法。在大黄素的鉴定中，质谱技术可以提供大 黄素分子的精确质量信息和可能的碎片信息，有助于确定 其分子结构。
要点二
详细描述
质谱鉴定利用高能电子束或激光束与大黄素分子相互作用 ，使其产生带电碎片。通过测量这些碎片的质量和数量， 可以推断出大黄素分子的精确质量和可能的化学结构。与 红外光谱和紫外光谱相结合，质谱鉴定为大黄素的鉴定提 供了更全面的结构信息。
紫外光谱鉴定
总结词
紫外光谱鉴定是一种基于物质吸收紫外光的 特性进行成分分析的方法。通过测量大黄素 在紫外区的吸收光谱，可以推断出其结构特 征和共轭体系。
详细描述
紫外光谱鉴定利用不同物质在紫外光区具有 不同吸收特性的原理，通过测量大黄素的紫 外吸收光谱，可以确定其共轭双键的数量和 位置，进一步推断出大黄素的分子结构和类
大黄素的药理作用与生物活性
药理作用
大黄素具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤、 抗菌等多种药理作用。
生物活性
大大黄素在临床上对多种疾病具有治 疗作用，如结肠炎、肾炎、肝炎等。
02
大黄中大黄素的提取方法
溶剂提取法
01
02
03
04
原理
大黄中蒽醌类成分的提取 - 大黄中蒽醌类成分的提取、分离和鉴别
b.醋酸镁试验 分别取蒽醌结晶数毫克，置于小试管中，各加乙醇l ml使 溶解，滴加0.5％醋酸镁乙醇溶液，观察颜色变化。
(2)色谱鉴识
a.薄层板：硅胶G-CMC-Na板。
b.点样：提取的大黄酸、大黄素、芦荟大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的 氯仿溶液及各对照品氯仿溶液。
c.展开剂：石油醚－乙酸乙酯－甲酸（15:5:1）上层溶液。
洗脱：先用100 ml石油醚－乙酸乙酯（9.8:0.2）洗脱，至第一条黄色色 带洗下来，再换用100 ml石油醚－乙酸乙酯（9.5:0.5）洗脱下第二条色带。
4.鉴定
(1)蒽醌类成分化学鉴定
a.碱液试验 分别取各蒽醌结晶数毫克置于小试管中，加2％氢氧化钠溶 液l ml，观察颜色变化。凡有互成邻位或对位羟基的蒽醌呈蓝紫至蓝色， 其它羟基蒽醌呈红色。
b.大黄素的分离和精制
pH 8缓冲液萃取过的氯仿层，用pH 9.9缓冲液300 ml振摇萃取，静置至 彻底分层后，分出碱水层，在搅拌下用20％盐酸酸化至pH 3，析出棕黄色 沉淀，抽滤，水洗沉淀物至洗出液呈中性，沉淀经干燥后，用15 ml丙酮热 溶，趁热过滤，滤液静置，析出橙色针晶，过滤后，用少量丙酮淋洗结晶， 得大黄素。
（2）分离与精制
a.大黄酸的分离和精制
将含有总蒽醌的氯仿液450 ml于1000 ml分液漏斗中，加pH 8缓冲液150 ml充分振摇，静置至彻底分层，分出碱水层置250 ml烧杯中，在搅拌下滴 加20％盐酸至pH 3，待沉淀析出完全后，过滤，并用少量水洗沉淀物至洗 出液呈中性，沉淀干燥后，样品加冰醋酸10 ml加热溶解，趁热过滤，滤液 放置析晶，过滤，用少量冰醋酸淋洗结晶，得黄色针晶为大黄酸。
大黄中大黄素的提取分离与鉴定课件
采用光谱、色谱等手段对大黄素进行鉴定， 如高效液相色谱法、紫外光谱法等。
确定提取分离方法
根据大黄素的理化性质，选择合适的提取分 离方法，如溶剂萃取、色谱分离等。
制定实验操作流程
根据确定的提取分离和鉴定方法，制定详细 的实验操作流程。
实验操作流程
准备实验材料和设备
提取大黄素
准备好大黄样品、提取溶剂、色谱柱、检 测器等实验材料和设备。
大黄是一种多年生草本植 物，属于蓼科，主要分布 在中国、朝鲜、日本等亚 洲国家。
历史背景
大黄在中国已有两千多年 的药用历史，被广泛应用 于中医临床。
植物特点
大黄的叶片通常较大，呈 椭圆形或宽椭圆形，叶脉 明显。
大黄素简介
化学结构
大黄素是大黄的主要有效 成分，属于蒽醌类化合物 。
物理性质
大黄素为黄色针状结晶， 熔点较高，难溶于水，可 溶于乙醇、乙酸乙酯等有 机溶剂。
心血管疾病
大黄素可以用于治疗高血压、高血脂 等疾病，降低血脂和血压，预防心血 管事件的发生。
神经系统疾病
大黄素可以用于治疗癫痫、偏头痛等 疾病，减轻神经系统症状，促进神经 功能恢复。
06
大黄素提取分离与鉴定的 实验方案与操作流程
实验方案设计
确定实验目的和要求
明确实验目的和要求，为大黄素的提取分离 与鉴定提供指导。
适用范围
适用于实验室小规模提取，但提取 效率较低。
回流法
提取原理
利用有机溶剂对大黄进行多次循 环回流提取，使大黄素溶解在提
取溶剂中。
操作步骤
将大黄饮片放入提取器中，加入 适量的有机溶剂，加热至沸腾， 保持回流状态一定时间，收集提
取液，浓缩得到大黄素。
大黄的提取分离
大黄活性成分的研究三班一组目录•一、实验目的•二、实验设计•三、实验结果•四、实验讨论•根据所提供的实验条件自主设计实验，采用硅胶柱色谱和制备薄层色谱对中药大黄进行提取、分离和鉴定，应用HPLC进行分析和含量测定。
•采用普通硅胶柱色谱和制备薄层色谱方法组合的方式，对大黄主要成分进行提取、分离，获得HPLC纯度（峰面积比）90%以上的成分至少三种。
一、查阅资料，了解生药基源大黄为蓼科植物掌叶大黄（Rheum palmatum L.）、唐古特大黄（Rheum tanguticum Maxim. Et Balf.）或药用大黄（Rheum officinale Baill.）的干燥根及根茎。
•其主要成分：OOOH OHR 2R 1大黄酚大黄酸大黄素甲醚芦荟大黄素大黄素R 1=CH 3 R 2=H R 1=CH 3 R 2=OH R 1=CH 3 R 2=OCH 3R 1=H R 2=CH 2OH R 1=H R 2=COOH极性顺序为:大黄酸>大黄素>芦荟大黄素>大黄素甲醚>大黄酚二、参考文献及实验室提供的试剂，确定溶剂洗脱系统比较五种化合物，可根据极性差别进行分离，利用薄层小板进行试验，发现石油醚和乙酸乙酯洗脱系统良好，能分开大多数化合物，并且在层析液中加入几滴冰醋酸成点性更好。
甲醇和二氯甲烷极性较大，不适宜作为起始洗脱剂，所以实验系统暂定为石油醚：乙酸乙酯。
100：1100：5100：10三、实验过程1.提取取大黄浸膏1.5g，用甲醇溶解，2.5g（100~140目）硅胶拌样，拌至完全干燥。
称取20g（200~300目）硅胶，用石油醚进行湿法装柱，上样。
2.溶剂系统PE:AE PE:AE100:1100:50100:2100:70100:3100:80100:5100:90100:1090:100100:2050:100100:30点板合瓶，得到新的一组样品合瓶后样品号1号：17-24（橘黄色色带）2号：25-293号：30-324号：33-345号：45-63（黄色）6号：64-777号：78-878号：88-98（黄色）9号：99-10710号：108-118（淡绿色）11号：119-122•把浓缩合瓶后的样品重新点板，与混标进行对照，发现大黄酸还未洗脱下来考虑到大黄酸极性较大，遂考虑换用二氯甲烷:甲醇洗脱系统梯度如下：DCM:MeOH50:120:110:17:1•把洗脱下来的样品继续点板合瓶12号：168-171（黄色）13号：172-177合瓶后的1-13号点板•发现1号、5号、8号、10号、12号样品较纯，准备进HPLC含量测定结果如下：1号，保留时间15.057，含量97.2%，大黄酚8号，保留时间11.398，含量90.85%，大黄素10号，保留时间4.482，含量59%，芦荟大黄素不纯，待制备12号，保留时间7.198，含量48%，大黄酸不纯，待制备5号，2个主峰，大黄酚72.63%和大黄素甲醚24.31%•将不纯的样品进行制备，用TLC小板摸条件，大板制备，刮板，洗脱，纯化样品。
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流份检查（合并相同流份） 流份检查（合并相同流份）
实 验 内 容（三）
大黄蒽醌类成分的鉴定
（1）化学鉴定 ） （2）色谱鉴识 ）
实 验 内 容（三）
大黄蒽醌类成分的鉴定（ ） 大黄蒽醌类成分的鉴定（1）
化学鉴定 碱液试验： ①碱液试验： 样品＋2%NaOH 样品＋ 颜色变化 醋酸镁试验： ②醋酸镁试验： 样品（乙醇溶解）＋ ）＋0.5％ 样品（乙醇溶解）＋ ％醋酸镁 颜色变化
大黄氯仿提取液 +PH8.0缓冲液 缓冲液150mL，振摇 缓冲液 ， 碱水层 氯仿层 +20%HCl调PH3.0 +PH9.9缓冲液 缓冲液300mL，振摇 调 缓冲液 ， 静置，抽滤(*) 静置，抽滤 沉淀1 沉淀 碱水层 氯仿层 +5%Na2CO3: 冰醋酸精制 同* 沉淀2 5%NaOH(9:1)540mL 大黄酸 沉淀 丙酮精制 大黄素 碱水层 氯仿层 +3%NaOH300mL 同* 沉淀3 沉淀 乙酸乙酯精制 碱水层 氯仿层 芦荟大黄素 同* 沉淀4 沉淀
R2= CH3 R2= CH3 R2= CH3 R2=CH2OH R2=COOH
A大黄酚（chrysophanol） 大黄酚（ R1=H 大黄酚 ） B大黄素（emodin） 大黄素（ R1= OH 大黄素 ） C大黄素甲醚（physcion） 大黄素甲醚（ R1=OCH3 大黄素甲醚 ） D芦荟大黄素（aloe-emodin） R1=H 芦荟大黄素（ 芦荟大黄素 ） E大黄酸（rhein） 大黄酸（ R1=H 大黄酸 ）
大黄中蒽醌类成分的提取、 大黄中蒽醌类成分的提取、 分离和鉴定
中药化学与分析教研室
实验目的
掌握蒽醌苷元的提取方法 掌握蒽醌苷元的提取方法——酸水解法 蒽醌苷元的提取方法 酸水解法 掌握PH梯度萃取法的原理和操作技术 掌握 梯度萃取法的原理和操作技术 掌握缓冲纸色谱的原理和基本操作技术 掌握缓冲纸色谱的原理和基本操作技术 通过大黄酚、大黄素甲醚的分离实验， 通过大黄酚、大黄素甲醚的分离实验，熟悉 柱层析的操作技术 熟悉蒽醌类化合物的鉴定方法和精制（ ） 蒽醌苷元的分离和精制（3）
柱层析法分离大黄酚、 柱层析法分离大黄酚、大黄素甲醚
装柱（湿法装柱） 装柱（湿法装柱） 上样（干法上样） 上样（干法上样）
洗脱剂1 石油醚-乙酸乙酯 乙酸乙酯（ ： ） 洗脱剂 石油醚 乙酸乙酯（98：2）
洗脱
洗脱剂2 石油醚-乙酸乙酯 乙酸乙酯（ ： ） 洗脱剂 石油醚 乙酸乙酯（95：5）
思 考
题
1.大黄中 种羟基蒽醌的酸性和极性大小应如何 大黄中5种羟基蒽醌的酸性和极性大小应如何 大黄中 排列？为什么？ 排列？为什么？ 2.pH梯度法的原理是什么？适用于哪些中药成 梯度法的原理是什么？ 梯度法的原理是什么 分的分离？ 分的分离？
实 验 内 容（三）
大黄蒽醌类成分的鉴定（ ） 大黄蒽醌类成分的鉴定（2） 色谱鉴识
薄层板：硅胶 板 薄层板：硅胶G板 提取的大黄酸、大黄素、 点 样：提取的大黄酸、大黄素、芦荟大黄素 大黄酚、 、大黄酚、大黄素甲醚及其对照品 展开剂：正己烷－乙酸乙酯－甲酸（30：10 展开剂：正己烷－乙酸乙酯－甲酸（ ： ：0.5） ） 展开方式： 展开方式：上行展开 可见光观察，浓氨水熏或5％ 显 色：可见光观察，浓氨水熏或 ％醋酸镁 显色后再观察
酸性E>B>D>A≈C 酸性
实 验 内 容（一）
总蒽醌苷元的提取
大黄粗粉100g 大黄粗粉 +20%硫酸 硫酸200mL，湿润 硫酸 ， +氯仿 瓶，加热回流 氯仿1瓶 加热回流2h 氯仿 稍冷， 稍冷，过滤 药渣（ 药渣（弃） 氯仿提取液
实 验 内 容（二）
蒽醌苷元的分离和精制（ ） 蒽醌苷元的分离和精制（1）
实验内容
总蒽醌苷元的提取 蒽醌苷元的分离和精制 蒽醌类成分的鉴定
实验原理
提取： 提取： 蒽醌苷
酸 水 解 氯仿提取
苷元(溶于热氯仿 苷元 溶于热氯仿) 溶于热氯仿
总蒽醌苷元
实验原理
分离： 分离：
OH O OH
R1 O
R2
由于各羟基蒽醌结构上的不同所 表现的酸性不同， 表现的酸性不同，用pH梯度萃 梯度萃 取法分离他们 分离他们； 取法分离他们；大黄酚和大黄素 甲醚酸性相近， 甲醚酸性相近，利用其极性的差 异，用柱色谱分离之。 柱色谱分离之。 分离之
蒽醌类成分的缓冲纸色谱
层析材料：3×12㎝ 层析材料：3×12㎝滤纸 样 品：大黄氯仿提取液 氯仿（水饱和） 展 开 剂：氯仿（水饱和） 显 色：自然光下观察
3%NaOH 5%Na2CO3:5%NaOH(9:1) PH9.9 pH8 pH3
实 验 内 容（二）
蒽醌苷元的分离和精制（ ） 蒽醌苷元的分离和精制（2）