大黄的提取分离和鉴定

思 考
题
1.大黄中 种羟基蒽醌的酸性和极性大小应如何 大黄中5种羟基蒽醌的酸性和极性大小应如何 大黄中 排列？为什么？ 排列？为什么？ 2.pH梯度法的原理是什么？适用于哪些中药成 梯度法的原理是什么？ 梯度法的原理是什么 分的分离？ 分的分离？
实 验 内 容（二）
蒽醌苷元的分离和精制（ ） 蒽醌苷元的分离和精制（3）
柱层析法分离大黄酚、 柱层析法分离大黄酚、大黄素甲醚
装柱（湿法装柱） 装柱（湿法装柱） 上样（干法上样） 上样（干法上样）
洗脱剂1 石油醚-乙酸乙酯 乙酸乙酯（ ： ） 洗脱剂 石油醚 乙酸乙酯（98：2）
洗脱
洗脱剂2 石油醚-乙酸乙酯 乙酸乙酯（ ： ） 洗脱剂 石油醚 乙酸乙酯（95：5）
流份检查（合并相同流份） 流份检查（合并相同流份）
实 验 内 容（三）
大黄蒽醌类成分的鉴定
（1）化学鉴定 ） （2）色谱鉴识 ）
实 验 内 容（三）
大黄蒽醌类成分的鉴定（ ） 大黄蒽醌类成分的鉴定（1）
化学鉴定 碱液试验： ①碱液试验： 样品＋2%NaOH 样品＋ 颜色变化 醋酸镁试验： ②醋酸镁试验： 样品（乙醇溶解）＋ ）＋0.5％ 样品（乙醇溶解）＋ ％醋酸镁 颜色变化
实验内容
总蒽醌苷元的提取 蒽醌苷元的分离和精制 蒽醌类成分的鉴定
实验原理
提取： 提取： 蒽醌苷
酸 水 解 氯仿提取
苷元(溶于热氯仿 苷元 溶于热氯仿) 溶于热氯仿
总蒽醌苷元
实验原理
分离： 分离：
OH O OH
R1 O
R2
由于各羟基蒽醌结构上的不同所 表现的酸性不同， 表现的酸性不同，用pH梯度萃 梯度萃 取法分离他们 分离他们； 取法分离他们；大黄酚和大黄素 甲醚酸性相近， 甲醚酸性相近，利用其极性的差 异，用柱色谱分离之。 柱色谱分离之。 分离之
R2= CH3 R2= CH3 R2= CH3 R2=CH2OH R2=COOH
A大黄酚（chrysophanol） 大黄酚（ R1=H 大黄酚 ） B大黄素（emodin） 大黄素（ R1= OH 大黄素 ） C大黄素甲醚（physcion） 大黄素甲醚（ R1=OCH3 大黄素甲醚 ） D芦荟大黄素（aloe-emodin） R1=H 芦荟大黄素（ 芦荟大黄素 ） E大黄酸（rhein） 大黄酸（ R1=H 大黄酸 ）
酸性E>B>D>A≈C 酸性
实 验 内 容（一）
总蒽醌苷元的提取
大黄粗粉100g 大黄粗粉 +20%硫酸 硫酸200mL，湿润 硫酸 ， +氯仿 瓶，加热回流 氯仿1瓶 加热回流2h 氯仿 稍冷， 稍冷，过滤 药渣（ 药渣（弃） 氯仿提取液
实 验 Baidu Nhomakorabea 容（二）
蒽醌苷元的分离和精制（ ） 蒽醌苷元的分离和精制（1）
大黄氯仿提取液 +PH8.0缓冲液 缓冲液150mL，振摇 缓冲液 ， 碱水层 氯仿层 +20%HCl调PH3.0 +PH9.9缓冲液 缓冲液300mL，振摇 调 缓冲液 ， 静置，抽滤(*) 静置，抽滤 沉淀1 沉淀 碱水层 氯仿层 +5%Na2CO3: 冰醋酸精制 同* 沉淀2 5%NaOH(9:1)540mL 大黄酸 沉淀 丙酮精制 大黄素 碱水层 氯仿层 +3%NaOH300mL 同* 沉淀3 沉淀 乙酸乙酯精制 碱水层 氯仿层 芦荟大黄素 同* 沉淀4 沉淀
大黄中蒽醌类成分的提取、 大黄中蒽醌类成分的提取、 分离和鉴定
中药化学与分析教研室
实验目的
掌握蒽醌苷元的提取方法 掌握蒽醌苷元的提取方法——酸水解法 蒽醌苷元的提取方法 酸水解法 掌握PH梯度萃取法的原理和操作技术 掌握 梯度萃取法的原理和操作技术 掌握缓冲纸色谱的原理和基本操作技术 掌握缓冲纸色谱的原理和基本操作技术 通过大黄酚、大黄素甲醚的分离实验， 通过大黄酚、大黄素甲醚的分离实验，熟悉 柱层析的操作技术 熟悉蒽醌类化合物的鉴定方法 熟悉蒽醌类化合物的鉴定方法
实 验 内 容（三）
大黄蒽醌类成分的鉴定（ ） 大黄蒽醌类成分的鉴定（2） 色谱鉴识
薄层板：硅胶 板 薄层板：硅胶G板 提取的大黄酸、大黄素、 点 样：提取的大黄酸、大黄素、芦荟大黄素 大黄酚、 、大黄酚、大黄素甲醚及其对照品 展开剂：正己烷－乙酸乙酯－甲酸（30：10 展开剂：正己烷－乙酸乙酯－甲酸（ ： ：0.5） ） 展开方式： 展开方式：上行展开 可见光观察，浓氨水熏或5％ 显 色：可见光观察，浓氨水熏或 ％醋酸镁 显色后再观察
蒽醌类成分的缓冲纸色谱
层析材料：3×12㎝ 层析材料：3×12㎝滤纸 样 品：大黄氯仿提取液 氯仿（水饱和） 展 开 剂：氯仿（水饱和） 显 色：自然光下观察
3%NaOH 5%Na2CO3:5%NaOH(9:1) PH9.9 pH8 pH3
实 验 内 容（二）
蒽醌苷元的分离和精制（ ） 蒽醌苷元的分离和精制（2）