实验一：细胞质流动
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穿梭流动：穿梭流动是细胞质流动的另一种形式，它与环流
不同，是向相反方向来回穿梭。由于流动方向在一定时间内来回 交换，因此叫穿梭流动。
布朗运动：在活细胞中可以看到细胞质内的许多小颗粒在无
规则地跳动着，这在暗视野显微镜下观察更为明显，叫做布朗运 动。布朗运动的产生除了与微丝的存在有关外，还与微梁网格的 收缩有关。
1.绘制紫鸭趾草雄蕊花丝毛(或黑藻)细胞 质流动图 (标明流动方向) 。
2.记录各种因素对细胞质流动影响的结果 (如流动停止的时间与流动能否恢复)，并 分析原因(可以表格形式完成)。
14
三羧酸循环
细胞生物学实验
可编辑版
15
细胞生物学实验
2,4-二硝基酚（DNP）
结构式
DNP是氧化磷酸化的解偶联剂 ，解偶联剂使氧化和磷 酸化脱偶联，氧化仍可以进行，而磷酸化不能进行， 解偶联剂作用的本质是增大线粒体内膜对H+的通透性， 消除H+的跨膜梯度，因而无ATP生成，解偶联剂只影 响氧化磷酸化而不干扰底物水平磷酸化，解偶联剂的 作用使氧化释放出来的能量全部以热的形式散发。
细胞生物学实验
2008生物科学5班
可编辑版
1
细胞生物学实验
实验室守则
1、不迟到，不早退，更不能无故缺课； 2、进实验室要穿白大褂。实验室内禁止喧哗。 3、实验前必须认真预习，熟悉实验的内容。
4、实验中应严格按操作规程进行，认真操
作、仔细观察，及时记录实验现象及结果； 5、在实验的过程中制造的任何垃圾都要丢到垃
可编辑版
8
细胞生物学实验
引起细胞质流动的因素
内因
➢微丝束（肌动蛋白纤维）、肌球蛋白、ATP
外因
➢物理：温度、光、机械刺激 ➢化学： pH、电解质、非电解质、渗透压、
呼吸抑制剂
可编辑版
9
细胞生物学实验
细胞质流动的主要形式
细胞质环流：在液泡发达的植物(如黑藻、 轮藻、伊乐藻)细
胞中，细胞质成薄层沿着细胞膜以一定的速度和方向循环流动。 这种不断地循环流动称为细胞质环流。
8、保证安全 9、实验结束后认真分析和总结，实事求是、独
立地完成实验报告
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3
实验报告格式
细胞生物学实验
班级、姓名、学号、日期
实验项目
实验目的
实验原理
实验器材(实验材料,实验试剂,实验仪器)
实验步骤
实验结果（重点）
分析和讨论（重点）
参考文献
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4
细胞生物学实验安排 第2-9周36学时
实验仪器：显微镜，载玻片，盖玻片，尖头镊 子，刀片,吸水纸等
可编辑版
12
丙二酸钠
结构简式：NaooC-CH2-COONa
细胞生物学实验
丙二酸在结构上与琥珀酸（丁二酸）相似，可 与琥珀酸竞争和琥珀酸脱氢酶的活性中心结合。
若琥珀酸脱氢酶与丙二酸等结合，则不能再与 琥珀酸结合而使之脱氢，产生抑制作用，且抑 制程度取决于琥珀酸与抑制剂在反应体系中浓 度的相对比例，所以这种抑制是竞争性抑制。
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13
生物氧化的三个阶段
脂肪
多糖 蛋白质
脂肪酸、甘油 葡萄糖、 其它单糖
氨基酸
乙酰CoA
磷酸化
+Pi
电子传递 （氧化）
三羧酸 循环
可编辑版
细胞生物学实验
大分子降解成基本结构单位
小分子化合物分解成共同 的中间产物（如丙酮酸、 乙酰CoA等
共同中间产物进入三羧酸循 环,氧化脱下的氢由电子传递 链传递生成H2O，释放出大 量能量，其中一部分通过磷 酸化储存在ATP中。
2,4-二硝基苯酚(DNP)等药剂因阻碍磷酸化(形成高能磷 酸键)，会抑制或减慢细胞质流动
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16
实验步骤
细胞生物学实验
细胞质流动及其影响因素
➢载玻片，滴1~2滴蒸馏水 →紫鸭趾草雄蕊花 丝(黑藻嫩叶)→装片→低倍物镜(10×)观察 →高倍物镜(40×)观察→吸水纸吸干水→加 试剂→记录细胞质停止流动的时间 →吸水纸 吸干→加清水 →流动是否能恢复
圾筐里（或先放在自己的桌面废物缸内），严 禁随地投弃！
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2
实验室守则
细胞生物学实验
6、实验器具应保持清洁，用过的玻璃器皿必须 洗净后放回原处。实验台面应保持整洁，仪器、 药品摆放整齐。公用试剂及用具盒用完后，应 立即盖好放回原处。
7、执行值日生制度，每天安排3-4人值日，其职 责是负责实验器具的整理、操作台、水槽、地 板等实验室卫生工作。
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10
细胞生物学实验
实验材料试剂仪器
实验材料：紫鸭趾草花丝，黑藻（水王 荪、轮叶黑藻）叶。
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11
细胞生物学实验
实验材料试剂仪器
实验试剂：
➢ 0.17 mol/L, 0.35 mol/L, 1 mol/L 氯化钠 ➢ 0.17 mol/L， 0.35 mol/L , 1 mol/L 丙二酸钠 ➢ 1 mmol/L 2,4﹣二硝基酚(dinitrophenol, DNP） ➢ 1 mol/L 甘露醇
实验目的
➢观察植物细胞质流动现象 ➢了解影响细胞质流动的因素
细胞生物学实验
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7
实验原理
细胞生物学实验
➢在多种植物的细胞中都能观察到植物细 胞质流动现象，它是细胞活动强弱的重 要指标。
➢细胞质流动现象的产生，是细胞骨架中 微丝肌动蛋白与肌球蛋白相互滑动的结 果。
➢细胞质流动要消耗能量，受各种因素诸 如温度、渗透压及各种离子的影响。
实验一、细胞质流动及其影响因素 实验二、叶绿体的分离与荧光观察
实验三、线粒体的制备与活性鉴定 实验四、细胞膜的渗透性与植物液泡系的观察
实验五、细胞的凝集反应与细胞融合 实验六、动植物细胞骨架的观察 实验七、细胞吞噬作用和细胞中过氧化物酶的显示
实验八、电子显微镜演示
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5
细胞生物学实验
实验一
细胞质流动及其影响因素
注意：高浓度丙二酸钠有双重影响
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18
实验结果
细胞生物学实验
黑藻叶
紫鸭趾草花丝毛
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19
注意事项
Biblioteka Baidu
细胞生物学实验
选 材（老与嫩叶）
细胞质流动的形式与方向 细胞质流动的快慢（未加试剂前） 加入试剂量（当装片中的水份没完全吸
干，则影响加入试剂的实际浓度） 计时
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20
实验报告
细胞生物学实验
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17
细胞生物学实验
实验设计：不同因素对细胞质流动的影响
渗透压：
➢ 0.17 mol/L ➢ 0.35mol/L NaCl ➢ 1.0mol/LNaCl溶液（高渗）
➢ 1 mol/L 甘露醇
生物氧化抑制剂：
➢ 1mmol/L 2,4-二硝基酚（解偶联剂） ➢ 0.17、0.35、1.0mol/L丙二酸钠溶液（竞争性抑制剂）
不同，是向相反方向来回穿梭。由于流动方向在一定时间内来回 交换，因此叫穿梭流动。
布朗运动：在活细胞中可以看到细胞质内的许多小颗粒在无
规则地跳动着，这在暗视野显微镜下观察更为明显，叫做布朗运 动。布朗运动的产生除了与微丝的存在有关外，还与微梁网格的 收缩有关。
1.绘制紫鸭趾草雄蕊花丝毛(或黑藻)细胞 质流动图 (标明流动方向) 。
2.记录各种因素对细胞质流动影响的结果 (如流动停止的时间与流动能否恢复)，并 分析原因(可以表格形式完成)。
14
三羧酸循环
细胞生物学实验
可编辑版
15
细胞生物学实验
2,4-二硝基酚（DNP）
结构式
DNP是氧化磷酸化的解偶联剂 ，解偶联剂使氧化和磷 酸化脱偶联，氧化仍可以进行，而磷酸化不能进行， 解偶联剂作用的本质是增大线粒体内膜对H+的通透性， 消除H+的跨膜梯度，因而无ATP生成，解偶联剂只影 响氧化磷酸化而不干扰底物水平磷酸化，解偶联剂的 作用使氧化释放出来的能量全部以热的形式散发。
细胞生物学实验
2008生物科学5班
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1
细胞生物学实验
实验室守则
1、不迟到，不早退，更不能无故缺课； 2、进实验室要穿白大褂。实验室内禁止喧哗。 3、实验前必须认真预习，熟悉实验的内容。
4、实验中应严格按操作规程进行，认真操
作、仔细观察，及时记录实验现象及结果； 5、在实验的过程中制造的任何垃圾都要丢到垃
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细胞生物学实验
引起细胞质流动的因素
内因
➢微丝束（肌动蛋白纤维）、肌球蛋白、ATP
外因
➢物理：温度、光、机械刺激 ➢化学： pH、电解质、非电解质、渗透压、
呼吸抑制剂
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细胞生物学实验
细胞质流动的主要形式
细胞质环流：在液泡发达的植物(如黑藻、 轮藻、伊乐藻)细
胞中，细胞质成薄层沿着细胞膜以一定的速度和方向循环流动。 这种不断地循环流动称为细胞质环流。
8、保证安全 9、实验结束后认真分析和总结，实事求是、独
立地完成实验报告
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实验报告格式
细胞生物学实验
班级、姓名、学号、日期
实验项目
实验目的
实验原理
实验器材(实验材料,实验试剂,实验仪器)
实验步骤
实验结果（重点）
分析和讨论（重点）
参考文献
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4
细胞生物学实验安排 第2-9周36学时
实验仪器：显微镜，载玻片，盖玻片，尖头镊 子，刀片,吸水纸等
可编辑版
12
丙二酸钠
结构简式：NaooC-CH2-COONa
细胞生物学实验
丙二酸在结构上与琥珀酸（丁二酸）相似，可 与琥珀酸竞争和琥珀酸脱氢酶的活性中心结合。
若琥珀酸脱氢酶与丙二酸等结合，则不能再与 琥珀酸结合而使之脱氢，产生抑制作用，且抑 制程度取决于琥珀酸与抑制剂在反应体系中浓 度的相对比例，所以这种抑制是竞争性抑制。
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13
生物氧化的三个阶段
脂肪
多糖 蛋白质
脂肪酸、甘油 葡萄糖、 其它单糖
氨基酸
乙酰CoA
磷酸化
+Pi
电子传递 （氧化）
三羧酸 循环
可编辑版
细胞生物学实验
大分子降解成基本结构单位
小分子化合物分解成共同 的中间产物（如丙酮酸、 乙酰CoA等
共同中间产物进入三羧酸循 环,氧化脱下的氢由电子传递 链传递生成H2O，释放出大 量能量，其中一部分通过磷 酸化储存在ATP中。
2,4-二硝基苯酚(DNP)等药剂因阻碍磷酸化(形成高能磷 酸键)，会抑制或减慢细胞质流动
可编辑版
16
实验步骤
细胞生物学实验
细胞质流动及其影响因素
➢载玻片，滴1~2滴蒸馏水 →紫鸭趾草雄蕊花 丝(黑藻嫩叶)→装片→低倍物镜(10×)观察 →高倍物镜(40×)观察→吸水纸吸干水→加 试剂→记录细胞质停止流动的时间 →吸水纸 吸干→加清水 →流动是否能恢复
圾筐里（或先放在自己的桌面废物缸内），严 禁随地投弃！
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实验室守则
细胞生物学实验
6、实验器具应保持清洁，用过的玻璃器皿必须 洗净后放回原处。实验台面应保持整洁，仪器、 药品摆放整齐。公用试剂及用具盒用完后，应 立即盖好放回原处。
7、执行值日生制度，每天安排3-4人值日，其职 责是负责实验器具的整理、操作台、水槽、地 板等实验室卫生工作。
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10
细胞生物学实验
实验材料试剂仪器
实验材料：紫鸭趾草花丝，黑藻（水王 荪、轮叶黑藻）叶。
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11
细胞生物学实验
实验材料试剂仪器
实验试剂：
➢ 0.17 mol/L, 0.35 mol/L, 1 mol/L 氯化钠 ➢ 0.17 mol/L， 0.35 mol/L , 1 mol/L 丙二酸钠 ➢ 1 mmol/L 2,4﹣二硝基酚(dinitrophenol, DNP） ➢ 1 mol/L 甘露醇
实验目的
➢观察植物细胞质流动现象 ➢了解影响细胞质流动的因素
细胞生物学实验
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7
实验原理
细胞生物学实验
➢在多种植物的细胞中都能观察到植物细 胞质流动现象，它是细胞活动强弱的重 要指标。
➢细胞质流动现象的产生，是细胞骨架中 微丝肌动蛋白与肌球蛋白相互滑动的结 果。
➢细胞质流动要消耗能量，受各种因素诸 如温度、渗透压及各种离子的影响。
实验一、细胞质流动及其影响因素 实验二、叶绿体的分离与荧光观察
实验三、线粒体的制备与活性鉴定 实验四、细胞膜的渗透性与植物液泡系的观察
实验五、细胞的凝集反应与细胞融合 实验六、动植物细胞骨架的观察 实验七、细胞吞噬作用和细胞中过氧化物酶的显示
实验八、电子显微镜演示
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5
细胞生物学实验
实验一
细胞质流动及其影响因素
注意：高浓度丙二酸钠有双重影响
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18
实验结果
细胞生物学实验
黑藻叶
紫鸭趾草花丝毛
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19
注意事项
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细胞生物学实验
选 材（老与嫩叶）
细胞质流动的形式与方向 细胞质流动的快慢（未加试剂前） 加入试剂量（当装片中的水份没完全吸
干，则影响加入试剂的实际浓度） 计时
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20
实验报告
细胞生物学实验
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细胞生物学实验
实验设计：不同因素对细胞质流动的影响
渗透压：
➢ 0.17 mol/L ➢ 0.35mol/L NaCl ➢ 1.0mol/LNaCl溶液（高渗）
➢ 1 mol/L 甘露醇
生物氧化抑制剂：
➢ 1mmol/L 2,4-二硝基酚（解偶联剂） ➢ 0.17、0.35、1.0mol/L丙二酸钠溶液（竞争性抑制剂）