HPLC法测定魟鱼鱼油中二十碳五烯酸_二十二碳六烯酸的含量

表 2 卡托普利片中主药含量测定结果 Tab 2 Content determination of the main component of
Captopril tablets
批号
20080504 20080703 20080903
衍生紫外法
标示量/％ RSD％
99.35
0.23
99.64
0.41
101.10
2 方法与结果
2.1 色谱条件 色谱柱为 Diamonsil C1（8 200 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相
为乙腈- 水（95 ∶ 5）；检测波长为 220 nm；流速为 1.0 mL·min－1； 柱温为 25 ℃；进样量：10 μL。理论塔板数按 EPA 甲酯、DHA 甲酯计应≥5 000。取流动相、溶剂（正己烷）及“2.2”项下 EPA 甲酯对照品、DHA 甲酯对照品溶液和“2.3”项下供试品溶液进 样分析，色谱详见图 1。 2.2 对照品溶液的制备
0.56
《中国药典》方法
标示量/％
RSD％
91.73
0.48
92.40
1.95
95.51
0.83
《中国药典》中[6]采用碘酸钾法测定卡托普利片剂主药含 量时，由于其辅料大部分都是淀粉，过滤时不能全部过滤干净 或淀粉部分溶于水中使滴定终点提前到达，因此使测定结果 很不准确。经验证，采用 DNFB 作为衍生化试剂与卡托普利反 应，使吸收峰波长增至 342 nm，且形成的衍生产物很稳定，能 更方便地测定卡托普利片剂中主药的含量。本试验结果表 明，本方法稳定、可靠，且操作简便、快速，适用于卡托普利片 剂中主药的含量测定。
ABSTRACT OBJECTIVE：To establish a method for the determination of EPA and DHA in ray oil. METHODS：The determination was carried out on Diamonsil C18 column. The mobile phase consisted of acetonitrile- water（95 ∶ 5）with flow rate of 1.0 mL· min－1 and detection wavelength set at 220 nm. The column temperature was set at 25 ℃. RESULTS：The linear ranges were 1～4 μg for EPA（r＝0.999 1）and 2～8 μg for DHA（r＝0.999 4）. The average recoveries were 99.23％ for EPA（RSD＝0.49％）and 99.30％ for DHA（RSD＝0.27％）. CONCLUSION：The method is simple，rapid，accurate and reproducible for the detection of EPA and DHA in ray oil. KEY WORDS Ray；EPA；DHA；HPLC method；Content determination
精密称取 EPA 甲酯 5 mg，用正己烷定容至 10 mL，摇匀。 再精密吸取 5 mL 定容至 10 mL。制成 0.25 mg·mL－1的对照品 溶液。
精密称取 DHA 甲酯 10 mg，用正己烷定容至 10 mL，摇 匀。再精密吸取 5 mL 定容至 10 mL。制成 0.5 mg·mL－1的对 照品溶液。 2.3 供试品溶液的制备
1 仪器与试药
鱼鱼油，经辽宁医学院提纯： 鱼肝脏经正己烷超声提 取鱼油，磷酸脱胶、氢氧化钠脱酸、活性炭脱色、旋转蒸发脱臭 和脱腥、盐析法提取总脂肪酸、尿素乙醇包合分离纯化获得高 纯度的不饱和脂肪酸，为肝脏质量的 16.1％。各项质量指标均 达到了精制鱼油国家标准（SC/T3502- 2000）中的一级标准要 求。
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[ 6 ] 国家药典委员会编.中华人民共和国药典（二部）[S].2005 年版.北京：化学工业出版社，2005：105.
（收稿日期：2009- 05- 15 修回日期：2009- 06- 25）
· 1228 · China Pharmacy 2010 Vol. 21 No. 13
中国药房 2010 年第 21 卷第 13 期
A 1
mAU 200
150
100
50
B 2
-10
-20
0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 min
0 2 4 6 8 10 12 15 min
C
D
mAU
150
125
100பைடு நூலகம்
2
75
50
1
25
-10 0 2 4 6 8 10 12 14 16 min
E
图 1 高效液相色谱图
A.流动相；B.溶剂；C.EPA 甲酯对照品；D.DHA 甲酯对照品；E.供试品； 1. EPA 甲酯；2. DHA 甲酯
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HPLC 法测定 鱼鱼油中二十碳五烯酸、二十二碳六烯酸的含量Δ
彭宏伟 1＊，张 博 2，杨小川 3，郭 斌 1（# 1.辽宁医学院，锦州市 121001；2.滕州中和医药有限公司，滕州市 277500；3.锦州药品检验所，锦州市 121001）
中图分类号 R927.2
文献标识码 A
文章编号 1001- 0408（2010）13- 1228- 03
精密称取鱼油 60 mg 左右置于 10 mL 磨口离心管中，加 3 mL 0.5 mol·L－1 KOH- 甲醇溶液，混匀充氮气。于 60 ℃水浴加 热，中间振摇 3 次，20 min 内油滴完全消失呈透明液。室温冷 却，加入三氟化硼- 甲醇（1 ∶ 3）溶液 3 mL。混匀充氮气，于 60 ℃水浴加热 5 min，室温冷却，再加入 2 mL 饱和 NaCl 溶液、 2 mL 正己烷充分混匀。振摇 1 min。离心（4 000 r·min－1）10 min 分层，取上清液用 0.45 μm 微孔滤膜滤过，取续滤液 1.0 mL 用正己烷定容至 10 mL，再取 2.5 mL 用正己烷定容至 10 mL 充 入氮气，置于 4 ℃冰箱中待色谱分析。 2.4 线性范围的考察
高效液相色谱仪，包括 P680 泵、UVD 170U 检测器（美国 戴安公司）；YP202N 电子天平（上海精密科学仪器有限公司）； SZ- 97A 自动三重纯水蒸馏器（上海亚荣生化仪器厂）。
EPA 甲酯对照品（批号：068K1627，含量：≥97％）；DHA 甲 酯对照品（批号：088K5201，含量：98％）均由美国 Sigma 公司 提供；氮气（锦州市鞍锦气体厂，纯度：99.99％）；乙腈为色谱 纯；其余试剂均为分析纯；水为三蒸水。
摘 要 目的：建立 鱼鱼油中二十碳五烯酸（EPA）、二十二碳六烯酸（DHA）的含量测定方法。方法：色谱柱为 Diamonsil C18，流 动相为乙腈- 水（95 ∶ 5），流速为 1.0 mL·min－1，检测波长为 220 nm，柱温为 25 ℃。结果：EPA 和 DHA 进样量检测线性范围分别为 1～4 μg、2～8 μg（rEPA＝0.999 1，rDHA＝0.999 4），平均加样回收率分别为 99.23％、99.30％，RSD 分别为 0.49％、0.27％。结论：本方 法简便、快速、稳定、重复性好，可用于 鱼鱼油中 EPA、DHA 的鉴别和含量测定。 关键词 鱼；二十碳五烯酸；二十二碳六烯酸；高效液相色谱法；含量测定