生物药物质量检测技术铁盐检查法
生物药物分析实验指导书
生物药物分析实验指导书蚌埠学院生物与食品工程系二0一0年十二月目录目录 ----------------------------------------------------------1 实验一药物分析基本操作 --------------------------------------2 实验二葡萄糖的杂质检查 ------------------------------------6 实验三药物的鉴别试验-----------------------------------------9 实验四异烟肼片含量测定--------------------------------------10 实验五阿司匹林含量测定--------------------------------------11 实验六阿司匹林片剂含量分析----------------------------------12 实验七对乙酰氨基酚片的含量测定------------------------------14 实验八片剂的含量均匀度与溶出度测定 -------------------------15 参考文献------------------------------------------------------17实验一药物分析基本操作一、目的要求1、掌握电子分析天平的使用与维护；2、掌握容量仪器和滴定管的使用二、主要仪器与药品电子分析天平、容量瓶、酸式滴定管、碱式滴定管。
三、实验方法1-1电子分析天平的使用与维护分析天平是定量分析工作的最常用的仪器之一，称量准确与否对分析结果有重大影响。
因此，必须掌握天平的正确使用和必要的日常维护，以保证仪器的精度和分析结果的准确性。
1、称量前检查与校正水平位置：揭去天平罩，检查天平的水平位置，调节天平底座后面的两个脚扭，使水泡置于圆圈中央。
察看天平上标明的最大载重量，称量时切勿超过最大载重量。
药物的杂质及检查方法 铁盐检查法
硫氰酸铁还原或分解褪色。
铁盐的检查法
注意事项
03
反应中加入的硫氰酸铵量较大,这是因为铁盐与硫氰酸根离子的反应为可逆反应,
加入过量的硫氰酸铵,不仅可以增加生成的配位离子的稳定性,提高反应灵敏度,还能消
除氯化物等与铁盐生成配位化合物所引起的干扰。
04
本法用硫酸铁铵 FeNH(SO4)2·12H2O配制标准铁溶液,并加入硫酸防止铁盐水解,
使易于保存。标准铁溶液每lmL相当于10ug的Fe3+。本法以在50mL溶液中含10～
50ugFe3+为宜,相当于标准铁溶液1～5mL。在此范围内,显色梯度明显易于区别。
铁盐的检查法
注意事项
05
某些有机药物,特别是具环状结构的有机药物,在实验条件下不溶解或对检查有干
扰,需经炽灼破坏,使铁盐成三氧化二铁留于残渣中,处理后再依法检查。如盐酸普鲁卡
50mL
比色
铁盐的检查法
注意事项
01
供试管与对照管色调不一致时,可分别移至分液漏斗中,各加正丁醇20mL提取,待分
层后,将正丁醇层移置50mL纳氏比色管中,再用正丁醇稀释至25mL,比较,即得。
02
在盐酸酸性条件下反应,可防止Fe3+的水解。经试验,以50mL溶液中含稀盐酸
4mL为宜。加入氧化剂过硫酸铵氧化供试品中的Fe2+氧化成Fe3+,同时可防止光线使
因、泛影酸、羧丙纤维素等。
06
标准铁贮备液应存放于阴凉处,存放期如出现浑浊或其他异常情况时,不得再使用。
小结
01 检查对象：亚铁离子和铁离子
02
反应试剂：硫氰酸铵
03
杂质对照品：标准硫酸铁铵
04
药物的杂质检查
例：ChP中：无水葡萄糖中氯化物检查：
S=0.60g，V=6.0ml，C=10ug/ml，求限量L
L=（V•C/S）×100%=0.010%
讨论： 1．AgCl易感光，变成灰紫色，所以放置时避免直射日光，比较时
背景为黑色。 2．温度30—40℃时比浊度最大，实际检查时不控制温度，室温，
平行操作。 3．最适检出浓度为：0.05—0.08mg/50ml，标准NaCl为
氰酸铁配位离子,再与一定量标准铁溶液用同法处理后所呈的颜 色进行比较,颜色不得更深. 方法: 供试品----加水溶解使成25ml----置于50ml纳氏比色 管中----加稀盐酸4ml与过硫酸铵50mg----加水稀释至35ml---加30%硫氰酸铵溶液3ml----加水成50ml----如显色,立即 与标准铁溶液一定量按相同方法制成的对照品比较. 注意事项: 实验前供试品处理某些药物(如葡萄糖、糊精和硫 酸镁）在检查过程中需加硝酸处理，则不再加过量硫酸铵，但 必须加热煮沸除去氧化氮.
与硝酸银试液作用，生成氯化银白色浑浊液，与一定量标准氯 化钠溶液在相同条件下生成的氯化银浑浊液比较，浊度不得更 大。 样品管：Ag++Cl-→AgCl（白色浑浊） 标准管： Ag++Cl-→AgCl（白色浑浊） 样品管浊度＞标准管浊度，样品不合格 样品管浊度 ＜标准管浊度，样品合格
方法：取两支50ml纳氏比色管：
成NaCl，再依法检查。
11. 不溶于水的有机药物
（1）加水振摇，过滤，取滤液进行检查。 （2）加热，放冷，过滤，取滤液进行检查。 （3）溶于有机溶剂如稀乙醇、丙酮，可加稀乙醇
或丙酮溶解后进行检查。
二、硫酸盐检查法
原理: 药物中存在的微量硫酸盐与氯化钡在盐酸酸性介质中生成 硫酸白色浑浊,与一定两标准硫酸钾溶液在相同条件下生成的浑浊 比较,浊度不得更大.
药物分析实验讲义
实验一葡萄糖的一般杂质检查一、目的要求1、熟悉药物中一般杂质限量检查的方法及限量计算方法。
2、熟悉药物中一般杂质检查的目的和意义。
3、掌握氯化物、硫酸盐、铁盐的检查原理。
二、实验原理(一)葡萄糖的生产工艺葡萄糖是用淀粉以无机酸水解或在酶催化下经过水解得稀葡萄糖液，再经脱色、浓缩结晶制得。
国内生产方法如下：1、酸水解法以无机酸将淀粉水解为葡萄糖。
2、双酶水解法以生物酶为催化剂将淀粉水解为葡萄糖。
3、酸酶水解法以盐酸为液化剂，糖化酶为催化剂，将淀粉水解为葡萄糖。
根据葡萄糖生产工艺特点，应进行氯化物、硫酸盐、铁盐等一般杂质检查，进行蛋白质、可溶性淀粉等特殊杂质检查。
(二)各种杂质检查原理l、氯化物检查法氯化物在硝酸酸性溶液中与硝酸银作用，生成氯化银白色浑浊液，与一定量的标准氯化钠溶液和硝酸银在同样条件下处理生成的氯化银浑浊相比较，测定供试品中氯化物的限量。
2、硫酸盐检查法药物中微量硫酸盐与氯化钡在酸性溶液中作用，生成硫酸钡微粒而显白色浑浊液，同一定量标准硫酸钾溶液与氯化钡在同样条件下，用同法处理生成的浑浊比较，判断药物中含硫酸盐的限量。
3、铁盐检查法三价铁盐在硝酸酸性溶液中与硫氰酸盐生成红色可溶性硫氰酸铁络离子，与一定量标准铁溶液用同法处理后进行比色。
进行葡萄糖的铁盐检查时，需在显色前加硝酸3滴，煮沸5min，使Fe2+氧化为Fe3+。
由于硝酸中可能含有亚硝酸，亚硝酸也能与硫氰酸根离子反应生成红色的亚硝酰硫氰化物，影响比色，因此加入显色剂之前加热煮沸有助于除去氧化氮，以消除氧化氮生产的亚硝酸干扰。
三、试剂与器材1、材料葡萄糖(药用)。
2、试剂(1)酚酞指示液：取酚酞l g，加乙醇100ml使溶解，即得。
(2)氢氧化钠滴定液(0.02mol／L)：取氢氧化钠4.000g，加水振摇使溶解成饱和溶液，冷却后，置聚乙烯塑料瓶中，静置数日，澄清后备用。
取澄清的氢氧化钠饱和溶液5.6ml，加新沸过的冷水使成1000ml，摇匀，精密量取溶液2 m1，置10ml容量瓶中加水稀释至刻度，即得。
15药物的杂质检查
供 试 品
+ AgNO3 +水
暗处放置 5min后比较
（2）外消色法：如高锰酸钾中氯化物的检查， 可先加乙醇适量，使其还原褪色后再依法检查。
二、硫酸盐检查法 1.原理： 供试液：SO４2－＋ Ba2＋→ BaSO４↓（白色混浊） 比浊 对照液：标准硫酸钾溶液……………………… 2.方法
水 2 ml 供试品 40ml 稀盐酸 水 2ml 标准液 40ml 稀盐酸
（silver diethyl dithio carbamate) （Ag-DDC法） 1.原理： 供试液：AsH3+ 6Ag（DDC）→６Ag＋… （红色胶态） 对照液：标准砷溶液……………………… 比色或 测定A
Ag(DDC)的 吡啶溶液
仪器装臵
小结
Hale Waihona Puke 六、溶液颜色检查法 控制药物中有色杂质的含量
1.原理：
供试液：Fe3＋＋ 6SCN－→[Fe(SCN)6]3－（红色） 对照液：标准铁溶液……………………………… 2.方法: 比色
供试品 25ml
水
标准液 25ml
水
稀盐酸 4 ml 过硫酸铵 50 mg
水 ％硫氰酸铵 3 ml 水 35ml 30 50ml，摇匀比较
③抑制锑化氢的生成 ④形成Zn-Sn齐，去极化
Pb(AC)2棉的作用： S2H 2S H 2S + + + 2H+ HgBr2 Pb(Ac)2 H 2S 2HBr PbS + + HgS （汞斑） 2HAc
消除锌粒和供试品中可能含有的少量的硫化物的影响。
2.供试品处理
（1）供试品为S2-,SO32-, S2O32-等: 因在酸中生成H2S, SO2,与HgBr作用生成HgS或Hg，干扰砷斑检查。
药品质量检测技术
1 ．下列属于片剂常规检查项目的是( )。
A.热原B.无菌C.可见异物D.溶出度2 ．干燥失重主要检查药物中的( )。
A.硫酸灰分B.水分C.易碳化物D.水分及其他挥发性成分3 ．铁盐检查需要的试剂是( )。
A．硝酸盐试液 B ．氯化钡溶液 C ．硫氰酸按试液 D ．溴化汞4．《中国药典》四部 ( 2015 年版)规定“凉暗处”是指 ( )。
A. 避光，温度不超过20℃B. 放在阴暗处，温度不超过10℃C. 放在阴暗处，温度不超过2℃D. 温度不超过20℃5 ．在药物重金属检查法中，溶液的最佳 pH 在( )。
A．3.5 B．4.5 C．6.5 D．8.56 ．砷盐检查法中，在检砷装置导气管中塞入醋酸铅棉花的作用是( )。
A．吸收砷化氢 B ．吸收溴化氢 C．吸收硫化氢 D ．吸收氯化氢7 ．紫外光区的波长范围为( )。
A．100 ~ 190nm B．200~400nm C．400~760nm D．2．5 ~25μm8 ．在色谱分析中要使两组分完全分离，即分离度( R)必须 ( )。
A． <1.5 B． >1 C．≤1 D ．≥1.59 ．二剂量法测抗生素效价，高低浓度的剂量比一般为( )。
A．1：1 B．2：1 C．5：1 D．10：110. 紫外分光光度法常采用的参比溶液也称空白溶液，其作用是( )。
A．避免待测溶液分解 B ．消除人为误差带来的干扰C ．消除待测物质本身的干扰D ．消除溶液中其他成分的干扰11．按《中国兽药典》( 2015 版) 一部附录进行崩解时限检查时，应调节吊篮位置使其下降时筛网距烧杯底部( ) mm ，调节水位高度使吊篮上升时筛网在水面下( ) mm 处。
A．25、 25 B．25、 15 C．15、 15 D．15、 2512 ．薄膜衣片应在包衣后检查( )。
A ．装量差异B ．溶散时限C ．脆碎度D ．重量差异13 ．测定葡萄糖的旋光度时 ,向供试液中加氨水是为了 ( )。
第三章药物的杂质检查(二)_药物分析与检验技术
四 重金属检查法
1 原理 硫代乙酰胺在弱酸性 （pH3.5醋酸盐缓冲液）条件下水 解产生H2S,与重金属离子（Pb2+） 生成黄色到棕黑色的硫化物混悬 液,与一定量标准铅溶液经同法处 理所呈颜色比较,判断供试品中重 金属的限量.
四 重金属检查法
CH 3 CSNH
2
pH 3 . 5 H 2 O CH 3 CONH
砷 斑
五
砷盐检查法
3．讨 论 1)试剂的作用 a. KI的作用-还原剂
AsO
3 4
2I
2H
AsO
3 3
I 2 H 2O
五价砷反应速度比三价砷反应速度 慢,加入KI使五价砷还原为三价砷,以 增大生成AsH3的速度.
五
砷盐检查法
b.酸性SnCl2的作用 (1)还原剂：(表现在3方面) ① As5+→As3+
四 重金属检查法
④ 供试品溶液有颜色时的处理方法
重金属检查时常用外消色法来消除 供试品溶液颜色的影响. 外消色法不能使供试品管颜色与对 照品管颜色相同时,可使用内消色法.
四 重金属检查法 a. 外消色法
ⅰ.在加硫代乙酰胺试液之前用 稀焦糖溶液调节对照管颜色与样 品管颜色一致. ⅱ．用对测定不干扰的指示剂调 节对照管颜色与样品管颜色一致.
四 重金属检查法
b 内消色法 （与氯化物检查时的处理方法类似）
两倍量的供试品 第一份 第二份 pH3.5 ，分成二等份
硫代乙酰胺 过滤 标准 Pb 溶液 滤液 作对照管
除去 PbS
硫代乙酰胺 作样品管
[讲解]生物药物分析与检验
![[讲解]生物药物分析与检验](https://img.taocdn.com/s3/m/23c98ffd18e8b8f67c1cfad6195f312b3169eb34.png)
生物药物分析与检验生物药物分析与检验的特点：1.需要进行相对分子质量的测定、2.需要检查生物活性3.需做安全性检查4.需做效价测定5.要用生化法确证结构终点测定法的条件：1.必须有专一地作用该被测物质的酶，并能得到它的制品；2.能够确定使这种酶反应接近进行完全的条件；3.反应中底物的减少、产物的增加、辅酶物质的改变等可以借助简便的方法进行测定高效液相色谱法的定性分析1.利用已知物质定性的方法①利用保留特性②利用不同柱比较2.色谱法与其他方法结合定性①利用化学反应定性②利用选择性检测器定性③液相色谱-质谱联用技术、液相色谱-核磁共振联用技术生物检定的范围:1.药物的效价测定2.体内微量生物活性物质的测定3.中药质量的控制4.某些有害杂质的限度检查基因工程药物的特点：1.分泌量极低而生理、药理活性极高2.具有细胞和组织特异性3.多数细胞生长因子具有多功能性4.细胞因子间存在复杂的相互作用5.具有低免疫原性特殊杂质检查方法：物理化学区分方法一、物理法“1. 臭味及挥发性的差异2. 颜色上的差异3. 溶解行为上的差异二、化学分析法1. 酸碱反应2. 呈色或沉淀反应4.氧化还原反应免疫电泳技术：将琼脂电泳与免疫扩散结合起来，即利用电场作用下带电蛋白质在琼脂凝胶中具有不同的迁移率，以及相同的蛋白质具有完整的抗原性的特点，用于分析抗原或抗体性质的一种技术。
电泳：带电颗粒在电场的作用下，向着与其电性相反的电极移动的现象。
终点测定法：先借助酶反应（单独的反应或几种酶构成的偶数酶反应）使被测物质定量地进行转变，然后在转化完成后，测定底物、产物或辅酶物质（第二底物）等的变化量生物检定：利用生物体（整体动物、离体组织/器官、细胞和微生物等）的作用以测定其效价或生物活性的一种方法。
质反应：当一定剂量的药物注入动物体内后，观察某一反应或反应的某一程度出现与否，只有质的变化。
量反应：药物对生物体所引起的反应随着药物剂量的增加产生的量变可以测量者。
分析方法原理及解读
数据分析及注意事项
平行测量3次，且RSD＜5% 查看测量结果的平均值、渗透压比的平均值 注意事项：
在从传感器上取下测定管时，一定要小心谨慎。取下的方 法是，旋转同时，向下垂直取出，千万不能前后、左右晃 动测定管，以免将玻璃传感器头部损坏。
测量时，应尽量避免污染仪器，如有药物撒落在仪器上， 应及时清扫干净，以免腐蚀仪器。
仪器操作顺序：
开机
仪器系统校准 测量摩尔浓度
数据统计分析
关机
标准液
纯水测试零点，回零说明仪器状态正常 参照药典规定，对样品预测值上、下两点的
量程校准值进行校准 200mOsmol/kg标准液 300mOsmol/kg标准液 400mOsmol/kg标准液 800mOsmol/kg标准液
一、氯化物检查法 二、硫酸盐检查法 三、铁盐检查法 四、重金属检查法 五、溴化物或碘化物 六、钙盐检查 七、亚硫酸盐检查 八、渗透压检查法 九、电导率测定法 十、相对密度检查法
氯化物检查法
原理：氯化物在硝酸酸性溶液中与砂酸银作用生成氯化银
浑浊液与一定量的标准氯化钠溶液在同样操作条件下生成的 氯化银浑浊液比较，检查供试品中的氯化物的限量。
溶液如有颜色，除另有规定外，取供试品两份， 加25%氯化钡5ml，放置10分钟，如显浑浊， 可反复过滤，直至澄清加入标准硫酸钾溶液 作为对照液。
铁盐检查法
当供试溶液管与对照溶液管色调不一致，或 所呈硫氰酸铁的颜色较浅不便比较时，可分 别移入分液漏斗中，加正丁醇或异戊醇提取， 分取正丁醇层比色。因硫氰酸铁配位离子在 正丁醇等有机溶剂中的溶解度大，经萃取后 比色，不仅能增加颜色深度，还能排除某些 干扰物质的影响。
Ch.p收载的测定方法有比重瓶和韦氏比 重秤法。
3-2药物杂质检查技术
对照： Fe3 C、V 6SCN HCl FeSCN 6 红色
3
（二）检查方法
标准铁溶液的制备→供试品溶液和对照溶液
的制备→加入显色剂30%硫氰酸铵溶液→比色→记
录和结果判断等
三、铁盐检查
（二）检查方法
供试品 加水溶解 25ml 稀HCl 4ml
过硫酸铵 50mg
药物： Pb2 H2S pH3.5 PbS黄色～棕黑色
对照：PbNO3 c、V H2S pH3.5 PbS黄色～棕黑色
（二）检查方法
1.标准铅溶液的制备
2.检查溶液的制备
对照溶液的制备（甲管）
供试品溶液的制备（乙管） 监控管溶液的制备（丙管）
3.比色
1、原理： 三价As 五价As
Zn+HCl
AsH3
HgBr2试纸
砷斑 黄棕色
五价砷的反应较慢，需先还原为三价砷
（二）检查方法
1.标准砷溶液的制备
2.标准砷斑的制备
3.供试品砷斑的制备
4.比色 5.结果判断
（三）注意事项
1.在反应液中加入碘化钾和酸性氯化亚锡的目
的
2.在检砷装置的导气管中装入醋酸铅棉花的目
第三章 药物杂质检查技术
（三）杂质限量计算
允许杂质存在的最大量 杂质限量＝ 100% 供试品量
L C V 100 % S
L：杂质限量 V：标准溶液体积 S：供试品的量 C：标准溶液浓度
对乙酰氨基酚中硫酸盐的检查 取本品2.0g，加水100ml，加热溶解后，冷却、滤过， 取 滤 液 25ml ， 依 法 检 查 ， 与 标 准 硫 酸 钾 溶 液 1.0ml （100µ g/ ml SO4）制成的对照液比较，不得更浓。计 算硫酸盐的限量。
药物分析重点整理
药物分析重点整理绪论1、药物分析：利用分析测定手段，发展药物的分析方法，研究药物的质量规律，对药物进行全面检验与控制的科学。
2、药物分析任务：对药物进行全面的分析研究，确立药物的质量规律，建立合理有效的药物质量控制方法和标准，保证药品的质量稳定与可控，使用安全和有效。
3、药品四大管理规范：①GLP：药物非临床研究质量管理规范②GCP：药品临床试验质量管理规范③GMP：药品生产质量管理规范④GSP：药品经营质量管理规范第一章药品质量研究的内容与药典概况1、药品制定的标准基础：对药物的研制、开发、生产的全面分析研究的结果2、国家药品标准构成：①凡例：共性问题的统一规定（称为药品标准术语）②正文③通则：制剂通则、通用检测方法、指导原则3、溶解度：P14（易溶：1-不到10ml，微溶：100-不到1000ml，不溶：10000ml）4、药品检查项目：安全性、有效性、均一性、纯度5、标示量：每一支、片或其他每一个单位制剂中含有主药的重量或含量或装量6、称重与量取：①精密称定：千分之一；②称定：百分之一；精密量取：对该体积移液管的精度的要求7、恒重：指供试品连续2次干燥后称重的差异在0.3mg以内的重量8、药品的原则：科学性、先进性、规范性、权威性9、中药材名称：中文名称+拉丁名称10、熔点：①初熔：供试品在毛细管内开始局部液化出现明显液滴的温度②全熔：供试品全部液化时的温度③药物含有杂质时，熔点低于纯品，熔程增大11、比旋度：在一定波长与温度下，偏振光透过每1ml中含有1g旋光性物质的溶液且光路长为1dm时，测得的旋光度12、百分吸收系数：当溶液浓度c为1%（g/ml）、液层厚度l为1cm时的吸光度A（A=Ecl）13、药物含量测定方法选择标准：①化学原料药：容量分析法②药物制剂：色谱法14、稳定性实验：影响因素试验、加速试验、长期试验15、《中国药典》的内容：一部中药、二部化学药品、三部生物制品、四部通则和药用辅料16、假药、劣药：P66第二章药物的鉴别试验（鉴别真伪）1、有机氟化物鉴别原理：经氧瓶燃烧法破坏，被碱性溶液吸收成为无机氟化物，与茜素氟蓝、硝酸亚铈在pH4.3溶液中形成蓝紫色络合物2、无机酸根：P753、专属性鉴别试验：是证实某一种药物的依据，根据每一种药物化学结构的差异及其所引起的物理化学特性不同，选用某些特有的灵敏的定性反应来鉴别药物的真伪4、影响鉴别试验的条件：溶液浓度、溶液温度、溶液pH 、试验时间、试剂用量、干扰物质5、对照试验：为了阐明某种因素的影响、效应或意义时，常改变此因素而保持其它因素不变进行试验，并把试验结果进行比较，这种试验叫对照试验第三章 药物的杂志检查1、杂质来源：①生产过程中引入的杂质；②贮藏过程中引入的杂质2、杂质分类：①来源：一般杂质（信号杂质）、特殊杂质（有关物质）②毒性：毒性杂质、信号杂质（一般无毒）③性质：无机杂质、有机杂质（特定杂质、非特定杂质）3、杂质限量：①定义：药物中所含杂质的最大允许量②杂质限量=%100*供试品量杂质最大允许量 ③限量检查法：A 、对照法：需要供试品%100**SV C L 供试品量杂质标准溶液 B 、灵敏法：不需要对照品C 、比较法：需要待测杂质的参数4、检查方法：①化学方法：显色反应法、沉淀反应法、生成气体法、滴定法②色谱法：A 、薄层色谱法B 、HPLC ：（1）外标法：（2）加校正因子法R R s C A C A f //s = x''s //C A C A f x s = C 、GC③光谱法：紫外-可见光光度法、红外分光光度法、原子吸收分光光度法 ④热分析法：（1）热重分析法TG ：利用热天平在程序控制温度的条件下，测量物质的重量随温度变化的曲线（2）差热分析法DTA ：测试品与参比物之间温度差与温度（或时间）关系的技术（3）差示扫描量热分析DSC ：测量传送给供试品与参比物的热量差与温度（或时间）关系的技术（4）TG 、DTA （纵坐标T ）、DSC （纵坐标dQ/dT ）曲线图P1125、氯化物检查法： ①原理：白色浑浊药物：AgCl AgNO Cl 3HNO 3−−→−+-白色浑浊）（对照：AgCl AgNO ,NaCl 3HNO 3−−→−+V c②注意事项：（1）纳氏比色管刻度线高度差不超过2mm（2）放置在黑色背景上，从上向下观察（3）标准氯化物的浓度以50ml 中含50-80ug 的CI（4）加硝酸的目的：加速氯化银沉淀、产生较好浑浊、避免弱酸银盐形成（5）滤纸可预先用硝酸的水洗净后使用（6）暗处放置是为了避免Ag 单质析出6、硫酸盐检查法：①原理：白色浑浊药物：4HCl224BaSO BaCl SO −−→−+-白色浑浊）、（对照：4HCl 242BaSO BaCl SO K −−→−+V c ②注意事项：（1）标准K2SO4溶液0.1mg/ml ，50ml 溶液中含2ml 盐酸为好（2） 盐酸酸性条件下进行，防止碳酸钡等弱酸形成钡盐沉淀对比浑浊的影响7、铁盐检查法：①原理： []{()[]红色药物：--−→−−→−++++36HCl Fe Fe Fe SCN Fe 6SCN 3o 23()()[]红色、对照：--+−→−+36HCl 3SCN Fe 6SCN Fe V c②注意事项：（1）显色剂：硫氰酸铵溶液（2）氧化剂：过硫酸铵：二价铁氧化为三价铁；防止硫氰酸铁还原褪色（3离子，以免在氨碱性溶液中产生氢氧化铁沉淀8、重金属检查法：①重金属：在实验条件下能与硫代乙酰胺或硫化钠作用显色的金属②硫代乙酰胺法：（1）原理：硫代乙酰胺在弱酸性pH3.5条件下水解，产生硫化氢，与重金属粒子生成黄色到棕黑色硫化物混悬液，与一定量标准铅溶液经同法处理后颜色比较（2）适用于溶于水、稀酸和乙醇的药物（3）注意事项：置于白纸，自上而下观察；标准铅浓度为10ug/ml；标准铅溶液1-2ml；硫代乙酰胺为显色剂；酸为醋酸铅缓冲液③炽灼后的硫代乙酰胺法④硫化钠法：（1）原理：在碱性介质中，以硫化钠为沉淀剂，使Pb2+生成PbS微粒的混悬液，与一定量标准铅溶液同法处理后颜色比较（2）适用于溶于碱而不溶于稀酸或在稀酸中生成沉淀的药物。
执业药师药物分析学考点：药物的杂质检查
执业药师药物分析学考点：药物的杂质检查执业药师药物分析学考点：药物的杂质检查执业药师是指经全国统一考试合格，取得《执业药师资格证书》并经注册登记取得《执业药师注册证》，在药品生产、经营、使用单位中执业的药学技术人员。
下面是应届毕业生店铺为大家编辑整理的执业药师药物分析学考点：药物的杂质检查，希望对大家有所帮助。
药物的杂质检查掌握药物中杂质的来源和分类，杂质限量的定义和计算;氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐、溶液颜色、易炭化物、澄清度、炽灼残渣、干燥失重、有机溶剂残留量等检查项目的原理和方法。
第一节杂质和杂质的限量检查一、杂质来源和分类1.杂质是指药物中存在的无治疗作用或影响药物的稳定性和疗效，甚至对人健康有害的物质。
2.杂质的来源，主要有两个：一是由生产过程中引入。
(精制未能完全除去，原料不纯或存在反应不完全，中间产物与副产物)。
二是在贮藏过程中产生。
(贮藏过程外界条件影响，或因微生物的作用，发生水解、氧化、分解、异构化、晶型转变、聚合、潮解和发霉等变化，产生有关的杂质)。
3.杂质按来源分类，可分为一般杂质和特殊杂质。
一般杂质是指在自然界中分布较广泛，在多种药物生产和贮藏过程中容易引入的杂质。
如酸、碱、水份、氯化物、硫酸盐等。
特殊杂质是指在个别药物的生产和贮藏过程中引入的杂质。
杂质按其性质还可分为信号杂质和有害杂质，信号杂质本身一般无害，其含量多少可以反映出药物纯度水平。
有害杂质如重金属、砷盐，在质量标准中要严格控制，以保证用药安全。
二、杂质的限量检查由于杂质不可能完全除尽，所以在不影响疗效和不发生毒性的原则下，既保证药物质量，又便于制造、贮藏和制剂生产，对于药物中可能存在的杂质，允许有一定限量，通常不要求测定其准确含量。
《药典》中规定的杂质检查均为限量(或限度)检查。
杂质限量：指药物中所含杂质的最大容许量。
表示方法：通常用百分之几或百万分之几(ppm)来表示。
对危害人体健康、影响药物稳定性的杂质，必须严格控制其限量。
生物药物检测技术
生物药物检测技术生物药物检测技术是指利用生物体（整体组织，离体组织微生物和细胞等）来测定药物的生物活性的一种方法。
它以药物的药理为基础，以生物统计为工具，运用特定的实验设计，在一定条件下比较供试品和相当的标准品或对照品所产生的特定反应，通过等反应剂量间比例的运算，从而测得供试品的效价。
本文主要介绍生物监测一些常用的方法。
一般杂质检查一、氯化物检查法氯化物检查法是利用氯化物在硝酸酸性溶液中与硝酸银试液作用，生成氯化银的白色浑浊液，与一定量标难氯化钠溶液在相同条件下生成的氯化银浑浊液比较，以判断供试品中的氯化物是否超过了限量。
除另有规定外，取各药品项下规定量的供试品，加水溶解使成25m1(溶液如显碱性，可滴加硝酸使成中性)，再加稀硝酸10m1；溶液如不澄清，应滤过；置50ml 纳氏比色管中，加水使成约40ml，摇匀，即得供试溶液。
另取各药品项下规定量的标准氯化钠溶液，置50m1纳氏比色管中，加稀硝酸10ml，加水使成40ml，摇匀，即得对照溶液。
于供试溶液与对照溶液中，分别加入硝酸银试液1.0ml，用水稀释至50ml，摇匀，在暗处放置5min，同置黑色背景上，从比色管上方向下观察，比较，即得。
以上检查方法中使用的标难氯化钠溶液每lml相当于10μg的Cl。
在测定条件下，氯化物浓度以50ml中含50~80μg的Cl为宜，相当于标准氯化钠溶液5~8ml。
在此范围内氯化物所显浑浊梯度明显，便于比较。
二、硫酸盐检查法微量的硫酸盐杂质，也是一种信号杂质。
药物中微量的硫酸盐在稀盐酸酸性条件下与氯化钡反应，生成硫酸钡微粒显白色浑浊，与一定量标准硫酸钾溶液在相同条件下产生的硫酸钡浑浊程度比较，判定供试品硫酸盐是否符合限量规定。
检查方法：取供试品，加水溶解成约40ml，置50ml纳氏比色管咖稀盐酸2ml，摇匀即得供试溶液；另取标准硫酸钾溶液，置50ml纳氏比色管中，加水使成约40ml，加稀盐酸2ml，摇匀即得对照溶液；于供试溶液与对照溶液中分别加入25%氯化钡溶液5ml，用水稀释成50ml，摇匀，放置10分钟，比浊。
3章药物的杂质检查
b ＜(a-b)，符合规定；b ＞(a-b)，不合格。
维生素C中铁、铜离子的检查 碳酸锂中钾盐的检查
（四）其他方法
1、热分析法
在程序控制温度下，测量物质的物理 化学性质与温度关系的一类技术。
中国药典规定检查砷盐时，应取标准 砷溶液2.0ml（每1ml相当于1μg的 As）制备的标准砷斑，今依法检查溴 化钠中的砷盐，规定含砷量不得超过 0.0004%，问应取供试品多少克？
取溴化钠0.5g，检查砷盐，与标准砷 溶液2.0ml制备的标准砷斑比较，不得 超过规定限量（0.0004%）。标准砷 溶液的浓度是多少（μg/ml）？
Ba2+ + SO42-
BaSO4
2、方法：
50ml纳氏比色管 —规定量的供试品+水→40ml+稀盐酸2ml —规定量的标准硫酸钾溶液+水→40ml+稀盐酸
2ml 分别加入25%氯化钡溶液5ml+水→50ml 放置10分钟 黑色背景上，从比色管上方向下观察、比较。
3、注意事项：
（1）供试品带颜色：内消色法。
葡萄糖中重金属检查：取葡萄糖 4.0g，加水23ml溶解后，加醋酸盐 缓冲液（PH3.5）2ml，依法检查 重金属（中国药典），含重金属不 得超过百万分之五，问应取标准铅 溶液多少毫升（每1ml相当于10μg 的Pb）？
磷酸可待因中吗啡检查：取本品0.10g， 加盐酸溶液（9→100）使溶解成5ml， 加亚硝酸钠试液2ml，放置15min， 加氨试液3ml，所显颜色与吗啡溶液 [取无水吗啡2.0mg，加盐酸溶液 （9→100）使溶解成100ml]5.0ml用 同一方法制成对照液比较，不得更深， 问限量为多少？
生物药物检测技术
生物药物检测技术生物药物检测技术是指利用生物体（整体组织，离体组织微生物和细胞等）来测定药物的生物活性的一种方法。
它以药物的药理为基础，以生物统计为工具，运用特定的实验设计，在一定条件下比较供试品和相当的标准品或对照品所产生的特定反应，通过等反应剂量间比例的运算，从而测得供试品的效价。
本文主要介绍生物监测一些常用的方法。
一般杂质检查一、氯化物检查法氯化物检查法是利用氯化物在硝酸酸性溶液中与硝酸银试液作用，生成氯化银的白色浑浊液，与一定量标难氯化钠溶液在相同条件下生成的氯化银浑浊液比较，以判断供试品中的氯化物是否超过了限量。
除另有规定外，取各药品项下规定量的供试品，加水溶解使成25m1(溶液如显碱性，可滴加硝酸使成中性)，再加稀硝酸10m1；溶液如不澄清，应滤过；置50ml纳氏比色管中，加水使成约40ml，摇匀，即得供试溶液。
另取各药品项下规定量的标准氯化钠溶液，置50m1纳氏比色管中，加稀硝酸10m l，加水使成40m l，摇匀，即得对照溶液。
于供试溶液与对照溶液中，分别加入硝酸银试液1.0ml，用水稀释至50ml，摇匀，在暗处放置5m in，同置黑色背景上，从比色管上方向下观察，比较，即得。
以上检查方法中使用的标难氯化钠溶液每l ml相当于10μg的Cl。
在测定条件下，氯化物浓度以50ml中含50~80μg的Cl为宜，相当于标准氯化钠溶液5~8ml。
在此范围内氯化物所显浑浊梯度明显，便于比较。
二、硫酸盐检查法微量的硫酸盐杂质，也是一种信号杂质。
药物中微量的硫酸盐在稀盐酸酸性条件下与氯化钡反应，生成硫酸钡微粒显白色浑浊，与一定量标准硫酸钾溶液在相同条件下产生的硫酸钡浑浊程度比较，判定供试品硫酸盐是否符合限量规定。
检查方法：取供试品，加水溶解成约40ml，置50ml纳氏比色管咖稀盐酸2ml，摇匀即得供试溶液；另取标准硫酸钾溶液，置50ml纳氏比色管中，加水使成约40ml，加稀盐酸2ml，摇匀即得对照溶液；于供试溶液与对照溶液中分别加入25%氯化钡溶液5ml，用水稀释成50ml，摇匀，放置10分钟，比浊。
生物药物分析第二章作业答案
单选题1、杂质检查又称为A.药物检查B.均一性检查C.限量检查D.有效性检查E.安全性检查正确答案：C试题解析：单从杂质产生的影响来看，以及经济成本角度考虑，对杂质的要求通常只要不致对人体产生有害影响，不影响疗效，同时又便于生产、调制、贮藏，那么对于药物中可能存在的杂质允许有一个限度。
药典上称之为杂质限量（limittest）。
杂质限量是指药物中所含杂质的最大容许量，它通常不要求准确测定其含量，只要杂质含量在一定限度内。
常用百分之几或百万分之几来表示。
所以该题选择C。
2、检查某药品杂质限量时，称取供试品S（g），量取标准溶液V（ml），其浓度为C（g/ml），则该药的杂质限量（%）是A.VS/C×100%B.CS/V×100%C.VC/S×100%D.S/CV×100%正确答案：C试题解析：杂质限量的计算公式为VC/S×100%，所以该题选择C3、药品杂质限量是指A.药物中所含杂质的最小允许量B.药物中所含杂质的最大允许量C.药物中所含杂质的最佳允许量D.药物中的杂质含量正确答案：B试题解析：杂质限量是指药物中所含杂质的最大容许量，它通常不要求准确测定其含量，只要杂质含量在一定限度内。
所以该题选择B。
4、检查硫酸盐时，若供试溶液有颜色干扰观察比较结果，处理的方法是A.分离法B.炽灼法C.过滤法D.活性炭脱色法E.内消色法正确答案：E试题解析：供试液如有色，可采用内消色法处理。
内消色法是指出去所检查杂质成分的供试品溶液做对照溶液的溶剂。
所以选择E选项5、药物氯化物检查，适宜的比浊浓度范围是A.（50-80μg）Cl/50mlB.（10-50μg）Cl/50mlC.（0.5-0.8mg）Cl/50mlD.（0.1-0.51μg）Cl/50mlE.（5-8μg）Cl/50ml正确答案：A试题解析：在测定条件下，氯化物浓度（以Cl计）以50ml中含0.05-0.08mg（相当于标准氯化钠溶液50-80ml），所显浑浊最大，结果稳定。
第三章+药物的杂质检查
NHCH2CH2NH2
芳伯氨基
O2N
NH2 + NaNO2 + 2HCl
+ O2N
Cl
Cl
杂质：2-氯-4-硝基苯胺
O2N
NN
Cl
N2Cl + NaCl + 2H2O NHCH2CH2NH2
2.沉淀反应：杂质与一定试剂反应产生沉淀
盐酸肼屈嗪中游离肼的检查:
治疗高血压、心力衰竭。
生成沉淀
盐酸肼屈嗪
检查方法:同高效液相色谱法. 标准溶液加入法（P110）
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4.毛细管电泳法 ——用于酶类药物中酶类杂质的检查。 检查方法:同高效液相色谱法.
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1.可见-紫外分光光度法 2.红外分光光度法 3.原子吸收分光光度法
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紫外分光光度法 ——利用药物和待检杂质对光选择吸收性质 的差异进行.
45
例：肾上腺素中肾上腺酮的检查
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1.热分析法
在程序控制温度的情况下,测定物质的物理、 化学变化与温度关系的一类仪器分析方法.
1.1 热重分析法 1.2 差示热分析法 1.3 差示扫描量热法
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1.热重分析法 (TGA)
W
供试品
W
TGA热重曲线
C=10 μg/ml V=1.5 ml S=?
（标准溶液浓度）（标准溶液体积）
L=
CSV ×100% =
10×10-6×1.5
0.30×22— 050
×100%
=
0.04%
（供试品量）
示例二 肾上腺素中酮体的检查
取本品0.2g,置100ml量瓶中，加盐酸溶液(9-2000)溶解并稀释 至刻度，摇匀，在310nm处测定吸光度不得超过0.05，酮体的 百分吸收系数为435，求酮体的限量
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（4）检查Fe2+和Fe3+
（5）铁盐检查时，加氧化剂氧化 Fe2+为Fe3+。加过硫酸铵可氧化Fe2+为 Fe3+ ， 同 时 可 防 止 光 线 使 硫 氰 酸 铁 还 原或分解褪色。
加硝酸后加热也可氧化Fe2+为Fe3+
（6）比色方法：同置于白色背景上， 自上向下观察。
四、铁盐检查法
（一）硫氰酸盐法 ChP（2000）、USP（24）
1. 原理 对照法
药物：Fe2
o Fe 3 Fe3
6SCN
HCl
FeSCN
6
3 红色
对照：Fe3 c、V 6SCN HClFeSCN6 3红色
2. 检查方法 药典附录
除另有规定外，取各药品项下规定 量的供试品，加水溶解使成25ml，移 置50ml纳氏比色管中，加稀盐酸4ml 与过硫酸铵50mg，用水稀释使成
例3. 某药物（黄色）欲进行铁盐检查， 应采用下面哪种方法（E）
A. 倍量法 B. 微孔滤膜过滤法 C. 调色法 D. 600～700℃炽灼残渣后测定 E. 以上都不对
例4. 中国药典收载的铁盐检查，主要 是检查（D）
A. Fe B. Fe2+ C. Fe3+ D. Fe2+和Fe3+ E. 以上都不对
35m1后，加30%硫氰酸铵溶液3ml， 再加水适量稀释成50ml，摇匀；如显 色，立即与标准铁溶液一定量制成的 对照溶液（取各药品项下规定量的标 准铁溶液，置50ml纳氏比色管中，
加水使成25ml，加稀盐酸4ml与过硫 酸铵50mg，用水稀释使成35m1后， 加30%硫氰酸铵溶液3ml，再加水适 量稀释成50ml，摇匀）比较，即得
4. 干扰及排除 （1）为了提高灵敏度或供试管与对
照管色调不一致时，可用正丁醇提取后， 分取正丁醇层比色。
（2）具环状结构的有机药物，需经 700～800℃炽灼破坏处理后再依法检查。
（3）干扰离子的影响
（二）巯基醋酸法 BP（1998）
对照法 药物：FFee32 20%枸橼酸2ml 巯基醋酸 Fe2 NH3H2O 巯基醋酸 红色
3. 测定条件
（1）用FeNH4(SO4)2·12H2O（硫酸 铁铵）配制标准铁贮备液（加入硫酸防 止Fe3+的水解），标准铁溶液临用前稀 释而成，标准铁溶液10g Fe3+/ml， 50ml溶液中含10～50g的Fe3+显色梯度 明显，一般取标准铁溶液1.0～5.0ml
（2）反应需在盐酸酸性条件下进行， 且以50ml供试溶液中含稀盐酸4ml为宜。
对照：Fe3 20%枸橼酸2ml 巯基醋酸 Fe2
NH3H2O 巯基醋酸 红色
本法灵敏度较高，但试剂较贵. 硫氰酸盐法 B. 巯基醋酸法 C. 普鲁士蓝法 D 邻二氮菲法 E. 水杨酸显色法
例2. 中国药典（2000年版）规定，硫 氰酸铵法检查铁盐时，加入过硫酸按 的目的是（AB） A. 使药物中铁盐都转变为Fe3+ B. 防止光线使硫氰酸铁还原或分解 褪色 C. 使产生的红色产物颜色更深 D．防止干扰 E．便于观察、比较