不同产地南葶苈子中多糖的含量比较

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参考文献
[1]国家药典委员会. 中国药典 2005 年版一部[S]. 北京,化学工业 出版社,2005: 234.
定方法准确、可靠。
[2]何燕,吴雄志,曾升平. 中药多糖的免疫调节作用[J]. 四川中医,
回收率
=
测得多糖量 - 样品中含有多糖量 加入葡萄糖 × 换算因子
×
100%
2001,19( 2) : 15 - 17.
櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴
2. 7 溶液稳定性考察 精密吸取同一份供试品溶液,按上述液相色谱条件,每
隔一定时间进样一次,结果供试品溶液中原阿片碱在 15 小 时内峰面积无明显变化,其相对标准偏差为 1. 0% 。 2. 8 重复性试验
50 mL,精密量取 0. 5 mL,按标准曲线绘制方法操作,利用标
酚、蒽酮、苯胺等缩合生成有色物质,该有色物质在特定波长
准曲线计算单糖浓度,按下式计算换算因子 f,f = W × 1000 /
处和一定浓度范围内,吸光度与浓度呈线性关系,从而可用
C × D。W 为多糖的重量( mg) ,C 为溶液中单糖的浓度( μg /
3
河北安国
10. 15
0. 77
的含量影响较大。葶苈子喜欢温暖、湿润、阳光充足、土壤肥
4
江苏南通
10. 01
0. 88
沃、疏松、排水良好的环境和条件,山东地处北纬 34. 25 ~
5
内蒙古赤峰
8. 55
0. 65
6
陕西商洛
9. 68
0. 69
7
湖北宜昌
9. 81
1. 15
8
安徽亳州
11. 11
0. 56
/ mg
样品中含有 多糖量 / mg
1 1. 1351 239. 87
118. 05
加入葡萄 糖量 / mg
39. 4
回收率 平均回 RSD ( % ) 收率( % ) ( % )
100. 39
时,药渣挥干溶剂,转移至圆底烧瓶中,以电热套加热,用 20 倍水回流提取 4 小时,提取液浓缩至一半体积,加入 1% 活
江西中医药 2010 年 9 月第 9 期总 41 卷第 333 期
不同产地南葶苈子中多糖的含量比较
★ 马梅芳1 李芳2 方君卉1 ( 1. 山东省枣庄市药品检验所 枣庄 277102; 2 陕西省中医药研究院 西安 710003)
关键词: 南葶苈子; 多糖; 产地; 含量测定
中图分类号: R 284. 1 文献标识码: B 南 葶 苈 子 为 十 字 花 科 植 物 播 娘 蒿 ( Descurainia Sophia
9
河南南阳
10. 40
0. 80
38. 23°、东经 114. 36 ~ 122. 43°,属暖温带半湿润季风气候类 型,气候温和、四季分明,阳光充足、雨量充沛,土壤肥沃,是 我国重要的农 业 大 省,历 史 上 曾 经 是 葶 苈 子 的 道 地 产 区 之 一,现在仍是南葶苈子的主产区之一,山东产的南葶苈子多
( 收稿日期: 2010-04-26 责任编辑: 曹征)
·74·
取样品粉末 1 g,精密称定,置索氏提取器中,加乙醚 100
却时间应严格控制,以保证结果的准确; ( 3) 空白溶液与供
mL,回流提取至提取液无色,药渣挥干溶剂,继续以 80% 乙
试品溶液的制备应平行进行。
● 醇 100 mL 回流提取至提取液无色,药渣挥干溶剂,转移至圆
根据南葶苈子的特点及多糖的性质,样品用乙醚、80%
硫酸蒽酮法测定多糖含量的原理是根据多糖在强酸性
3. 36% 。
条件下,被浓硫酸水合产生的高温迅速水解,产生单糖,单糖
2. 4 多糖换算因子测定
进一步脱水形成糠醛衍生物,糠醛衍生物在强酸性条件下,
取南葶苈子多糖 16 mg,精密称定,加水溶解并定容至
与一些具有活性亚甲基并有共轭未饱和系统的化合物,如苯
检测波长。
2. 1. 3
标准曲线绘制
精密量取对照品溶液 0. 1、0. 2、0. 3、
● 中
0. 4、0. 5、0. 6 mL,分别置 10 mL 具塞刻度试管中,各加水至 药
2. 0 mL,摇匀,在冰水浴中缓缓滴加 0. 2% 蒽酮 - 硫酸溶液至 研
刻度,混匀,放冷后置水浴中保温 10 分钟,取出,立即置冰水 究
mL 范围内,葡萄糖浓度与吸光度之间线性关系良好。
2. 2 精密度实验
2. 1. 1 葡萄糖对照品溶液的制备 精密称取 105 ℃ 干燥至 恒重的无水葡萄糖对照品 34. 7 mg,置 100 mL 容量瓶中,加 水溶解并稀释至刻度,摇匀,作为对照品溶液( 浓度 347 μg / mL) 。 2. 1. 2 检测波长的选择 精密量取对照品溶液 0. 2 mL,置
取样品粉末 60 g,置索氏提取器中,用 20 倍石油醚( 30
表 2 南葶苈子多糖含量测定加样回收率实验结果( n = 6)
~ 60℃ ) 回流提取 4 小时,药渣挥干溶剂; 用 20 倍乙醚回流 提取 4 小时,药渣挥干溶剂; 用 20 倍 80% 乙醇回流提取 4 小
编号
取样量 测得多糖量
/g
硫酸蒽酮法测定南葶苈子中多糖的含量,操作简便、准
稀释倍数,W 为样品的重量( g) ,f 为换算因子。
确、回收率高,为科学评价南葶苈子药材的质量提供了新的
表 1 不同产地南葶苈子中多糖的含量测定结果( n = 3)
实验依据。实验结果表明,不同产地的南葶苈子多糖含量差
样品编号 1 2
产地 山东临沂 河北保定
UV-2401 PC 紫外分光光度计( 日本 岛津) ; D-无水葡萄 糖对照品( 中国药品生物制品检定所,批号 110833-200302) ; 所用试剂均为分 析 纯。山 东、河 北、江 苏、陕 西、河 南、安 徽、 湖北、内蒙古 8 个省( 自治区) 的 2009 年的南葶苈子样品,经 山东中医药大学石俊英教授鉴定为十字花科植物播娘蒿 Descurainia sophia( L. ) Webb ex Prantl. 的种子。 2 方法与结果 2. 1 标准曲线的制备
相对平均偏差( % ) 0. 09 1. 35 1. 75 0. 35 0. 34 0. 77
根据表 1 测定结果,拟定本品的限度为,每 1 片含原阿 片碱( C20 H19 NO5 ) 不得少于 0. 30 mg。
( 收稿日期: 2010-07-18 责任编辑: 曹征)
·73·
JIANGXI JOURNAL OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
精密量取对照品溶液 0. 4 mL,6 份,按标准曲线绘制方 法操作,测得吸光度分别为 0. 549 4、0. 543 1、0. 543 1、0. 543 7、0. 543 7、0. 541 5,平均值 0. 544 1,RSD = 0. 50% ( n = 6) 。 表明仪器的精密度良好。 2. 3 多糖的提取及精制
浴中冷却 10 分钟,取出,以相应试剂为空白,照紫外 - 可见 ●
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
分光光度法,在 582 nm 波长处测定吸光度,以吸光度 A 为纵
坐标,浓度 C 为横坐标,绘制标准曲线,得回归方程: A = 0.
031 16 + 0. 038 125 977C,r = 0. 999 7。在 3. 47 ~ 20. 82 μg /
2. 10 样品测定 取本品 6 批,照上述方法试验,测定结果见表 1。 表 1 样品测定结果
批号 040251 050105 050835 06070401 06092001 06100504
原阿片碱含量 / mg·片 - 1 0. 371 0. 498 0. 535 0. 547 0. 455 0. 406
10 mL 具塞刻度试管中,加水至 2. 0 mL,摇匀,在冰水浴中缓
缓滴加 0. 2% 蒽酮-硫酸溶液至刻度,混匀,放冷后置水浴中
保温 10 分钟,取出,立即置冰水浴中冷却 10 分钟,取出,以
相应试剂为空白,照紫外-可见分光光度法,在 200 ~ 800 nm
之间扫描测试,在 582 nm 处有最大吸收,故选择 582 nm 为
比色法测定其 单 糖 含 量,再 根 据 单 糖 与 多 糖 之 间 的 换 算 因
mL) ,D 为稀释倍数。
子,计算多糖的含量。
测得南葶苈子多糖 f = 3. 081,RSD = 1. 16% ( n = 6) 。
实验过程中需要注意的是: ( 1) 蒽酮试剂不稳定,需用
2. 5 样品测定
时新配; ( 2) 显色反应过程中,水浴保温时间及冰水浴中冷
2 1. 0991 239. 13 3 1. 1145 238. 76 4 1. 1256 238. 02
114. 31 115. 91 117. 06
39. 4 39. 4 39. 4
102. 86 101. 23 99. 68
100. 26
1. 61
性炭,脱色,滤过,滤液加入乙醇使含醇量达 80% ,静置过
中 底烧瓶中,精密加水 200 mL,称定重量,回流提取 2 小时,放
乙醇除去脂溶性杂质及单糖、低聚糖、苷类等干扰性成分后,
药 研 究 ●
冷后用水补足损失的重量,滤过,精密量取续滤液 0. 5 mL, 加水至 2. 0 mL,按标准曲线绘制方法操作,测定其吸光度 值,按下式计算多糖含量。结果见表 1。
多糖含量( % ) 14. 73 9. 45
RSD( % ) 0. 64 0. 68
别较大,其中以山东临沂 产 的 南 葶 苈 子 多 糖 含 量 最 高,达 14. 73% ; 内蒙 古 赤 峰 产 的 南 葶 苈 子 多 糖 含 量 最 低,为 8. 55% ; 前者高出后者 70% 多。可见,产地对南葶苈子中多糖
2. 6 重复性实验 取同一样品粉末 1 g,6 份,按样品测定方法操作平行测
定,计算多糖含量,求得 RSD = 0. 73% 。表明方法的重现性 良好。 2. 7 加样回收率实验
取样品( 已知多糖含量 10. 40% ) 粉末 1 g,6 份,精密称 定,精密加入无水葡萄糖对照品 39. 4 mg,按样品测定方法 制备溶液并测定吸光度值。按下式通过换算因子折算多糖 的回收率,结果见表 2。平均加样回收率 100. 26% ,表明测
( L. ) Webb ex Prantl) 的干燥成熟种子,味辛、苦,性大寒; 可 泻肺平喘,利水消肿; 用于痰涎壅肺,喘咳痰多,胸腹水肿,小 便不利,肺源性心脏病等[1]。实验证明,南葶苈子中多糖含 量较高,通过比较不同产地南葶苈子中多糖的含量差异,可 以为南葶苈子内在质量评价与药材资源的合理开发利用提 供实验数据和参考资料。 1 仪器与试药
取同一批号( 06100504) 样品,照上述制备 6 份供试品溶 液,依法测定,结果原阿片碱平均含量为 1. 4292 mg / g,RSD = 1. 9% 。 2. 9 回收率试验
采用 加 样 回 收 试 验,取 已 知 含 量 的 样 品 ( 批 号 06100504) 约 0. 5 g,九份,精密称定,置具塞锥形瓶中,分别 按 80% 、100% 、120% 添加水平各三份,精密加入原阿片碱对 照品,按 上 述 方 法 试 验,计 算 回 收 率,结 果 平 均 回 收 率 为 100. 16% ,RSD = 1. 7% 。
糖含量有高于其他产区的趋势,提示山东的南葶苈子资源值 得深入开发。
现代药理研究表明,多糖是多种中药的有效成份之一, 具有多种生物活性,是理想的免疫增强剂,它能激活免疫细 胞,提高机体免疫功能,在抗病毒、抗肿瘤等方面有着广泛的 应用[2]。南葶苈子中多糖含量较高,其结构组成和药理活性 还有待于进一步研究。
5 1. 1343 237. 78 6 1. 1223 236. 42
117. 97 116. 72
39. 4 39. 4
98. 73 98. 64
夜,滤过,残渣用乙醚、丙酮、无水乙醇反复洗涤数次,得南葶
3 小结与讨论
苈子 多 糖,置 硅 胶 干 燥 器 中 干 燥 备 用。 计 算 多 糖 得 率
加水回流提取多糖并测定其含量。提取时间我们比较了 1、 2、3 小时,结果显示,回流 2 小时,多糖的溶出即达到平衡,2 小时以后,延长回流时间,测得多糖含量不再增加,故确定加
多糖含量
=
C×D×f W × 106
×
100%
水回流时间为 2 小时。
C 为样品溶液的葡萄糖浓度( μg / mL) ,D 为样品溶液的
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