分子诊断技术在肿瘤诊断中的应用

分子诊断技术在肿瘤诊断中的应用

1、肿瘤易感基因检测

单独遗传因素造成肿瘤的概率低于5％。肿瘤的发生主要是遗传基因和环境因素共同作用的结果，其中遗传基因是内因，与人体是否具有肿瘤易感基因有关。肿瘤易感基因检测就是针对人体内与肿瘤发生发展密切相关的易感基因而进行的，它可以检测出人体内是否存在肿瘤易感基因或家族聚集性的致癌因素，根据个人情况给出个性化的指导方案。肿瘤易感基因检测特别适合家族中有癌症病例的人群，可以帮助这类人群提前了解自身是否存在肿瘤易感基因。已知的肿瘤易感性基因有Rb1、WT1、p53、APC、hMSH2、hMLH1和BRCA1等，与其相对应的癌症综合征（附表）。

遗传性癌症综合征与易感基因

癌症综合征易感基因

视网膜母细胞瘤Rb1

Wilms瘤WT1

LI-Fraumeni综合征p53

家族性腺瘤性息肉瘤（FAP）APC

遗传性非息肉性结肠癌（HNPCC） hMSH2，hMSH1

乳腺癌BRCA1

卵巢癌BRCA1

2、肿瘤相关病毒检测

业已证明一部分肿瘤的发生和病毒感染有关，因而检测这些相关病毒不仅可探计肿瘤和病毒的关系，而且可以找出肿瘤的易患人群。由于病毒太小，且难以培养，一般方法检测病毒效果极差。而核酸杂交技术与PCR技术用于病毒检测具有特异性强、敏感性高等特点。

人类某些肿瘤可能与病毒有关

病毒相关肿瘤

HPV6、11亚型 宫颈尖锐湿疣（乳头状瘤）

HPV16、18亚型 宫颈上皮内新生物和癌

HSV及CMV宫颈恶性病变

HBV原发性肝癌

EB病毒伯基特淋巴瘤、鼻咽癌

HSV6型 霍奇金病和鼻咽癌

微小病毒葡萄胎

ATL病毒成人T细胞白血病/淋巴瘤

3、肿瘤的早期分子诊断

研究发现，肿瘤相关基因的突变出现在肿瘤发生的最早期，远早于肿瘤临床症状的出现，是肿瘤早期诊断的重要依据。通过基因突变检测进行早期诊断能够从最根本的基因上寻找肿瘤发生的微小趋势，第一时间作出肿瘤预警，通过针对性的环境或生活方式调整，能有效预防肿瘤的形成；在肿瘤发生初期实施针对性治疗，能极大程度增加治愈的概率。

K-ras基因突变是一种胰腺癌、结肠癌和肺癌等肿瘤中发生率较高的分子事件，突变集中在第12、13和61编码子。应用细针穿刺活检材料检测胰腺癌的第12编码子变突，检出

率可达100%，应用PCR-RFLP方法检测结肠癌患者粪便中的Ras基因突变，其检出率与瘤组织中相似，可用于高危人群的筛选。

目前临床诊断技术包括影像学检查及生化指标的检测，近年来这些技术手段已经有了很大的发展，但仍存在准确度低、灵敏度不足的缺陷，对疾病的早期诊断易出现假阴性。基因检测灵敏度高特异性强，多靶标可排除假阳性，早期发现病变，并可用于疾病的早期筛查，提高疾病治愈率。

4、肿瘤的诊断与鉴别诊断

肿瘤标记物由肿瘤组织和细胞产生的与肿瘤的形成、发生相关的物质，这些物质存在于肿瘤细胞的胞核、胞质、胞膜上或体液中；不存在于正常成人组织而见于胚胎组织，或在肿瘤组织中含量超过正常含量。

由于肿瘤细胞具有侵袭能力、转移、无限增殖、逃逸凋亡及血管生成等独特的生物学特征，且均由复杂的分子通路介导，因此这些分子通路中任何组成成分均可能作为肿瘤分子标记物。通过肿瘤分子标记物的存在或量的改变可了解肿瘤的组织发生来源、细胞分化及功能，以进行肿瘤筛查（仅AFP与PSA用于高危人群）、肿瘤分子诊断、分类、判断预后及指导治疗。

（1）肿瘤标记物的分类：肿瘤标志分为基因型标志和基因表型标志：基因型标志是指基因本身突变和表达异常，能反映癌前启动阶段的变化；基因表型标志是指基因表达产物异常，表现为其所编码的表达产物合成紊乱，产生胚胎性抗原、异位蛋白等，一般出现较晚。因此，寻找特异性肿瘤基因型标志进行肿瘤基因诊断，对于肿瘤的早期发现和诊断，以及肿瘤的预防和治疗具有至关重要的意义。

（2）常见肿瘤与其相关的血清学标志物

部分常见肿瘤与其相关的血清学标志物

肿瘤名称血清中的肿瘤标志物

肝癌AFP、CEA、TPS、TPA、γ-GT等

肠道肿瘤CEA、CA199、CA242、CA72-4、TPS等

胃癌MG7-Ag、CEA、CA199、TPS等

卵巢癌CA125、CA153、CEA、AFP、TPS等

乳腺癌CA153、CA125、CEA、TPS等

鼻咽癌EBV-IgA、 EBV-IgM、TPA、TPS、SCCA、CEA等

胰腺癌CA199、CA242、CEA、TPS等

肺癌SCCA、NSE、CA125、CA153、CEA、TPS等

恶黑S100、TPS、TPA、CEA等

淋巴瘤LDH、TPS、CEA、β2-MG等

甲状腺癌TSH 、T3、T4、CEA、TPS、β2-MG等

垂体瘤性激素6项(泌乳素等)、HCH、TPS等

绒癌HCG、CEA、CA125、TPS等

防癌普查C12蛋白芯片、TPS等

（3）常见肿瘤与相关的免疫组化标志物

鳞 癌CK10&13、CK5&6、CK34bE12、CK(AE3)

腺 癌CK8、CK18、CK35bH11

乳腺癌GCDFP-15、Mammaglobin、 ER、PR、HER2、EGFR、VEGR、E-cadherin、34bE12、P63

卵巢癌ER、PR、PCNA、Ki-67、c-erbB-2、HCG、AFP、CK7+、CK20-、CA125

卵巢粘液癌CK7+、CK20-

甲状腺癌ER、PR、PCNA、c-erbB-2、P53、nm23、TG、Calcitonin、PH（甲状腺素）

消化系统CDX-2、CEA、CA199、CK7、CK20

胰腺癌PCNA、P53、nm23、CA199、CK7+、CK20-

前列腺癌PSA、PSAP、PSMA、P504S、 ER、PR、AR、P53、P21、CK7+、CK20-、CK34bE12 子宫内膜癌ER、PR、C-erbB-2、P53、CK7+、CK20-

肝细胞癌HepPar-1、Glypican-3、AFP、CK8、CK18、CEA、CK7+、CK20-

胆管癌CD10、CEA、CK7、CK18、CK19

肾细胞癌RCC、PAX2、ER、PR、P53、CK7+、CK20-

移行细胞癌P53、P21、CK7+、CK20+

肺癌P53、nm23、TTF-1

间皮瘤Keratin、Vimentin、HBME-1、Calretinin

睾丸肿瘤Oct-4、D2-40、CD117、HCG、AFP、ALAP 、AE1/AE3、CK8

GIST CD117、CD34

（4）肿瘤染色体与基因重排：下表列举了部分近年来诊断发现的具有特征性染色体易位及相应融合基因的肿瘤，这些分子表达谱（expression profiling）已经被用作重要的诊断和鉴别诊断的依据。