发酵过程各环节操作规程

酵母培养物产品发酵过程各环节操作规程

菌种室操作规程

1、菌种室和无菌室应保持整洁，严禁在其内饮食，无菌室应定期进行消毒灭菌，并进行无菌检查。

2、所用培养基及操作工具必须灭菌后才可带入无菌室。

3、进入无菌室工作人员应换上无菌衣，无菌鞋及无菌口罩。

4、操作前先用75％酒精擦手，待酒精挥发后点燃酒精灯，之后进行操作。

5、操作完毕，整理好工作台，然后离开。

6、对菌种室的菌中和资料应保密，不得外流。

7、所用药品不得品尝

8、显微镜及其它贵重仪器，要细心操作，轻拿轻放，保护好，并做好使用记录。

9、所做实验，认真做好记录，以便总结分析。

10、实验时切勿将酒精等易燃物品接近火源，如遇险情，应及时采用适当的灭火措施。

11、工作完毕，所用仪器，药品放回原处，保持工作台洁净。

12、离开工作室前，应检察门窗，电源灯，火源，然后离开。

13、报废菌种，应灭菌处理后倒入下水道，实验后不用的药品，倒入所指定的地方。

发酵罐灭菌操作规程

一、空消

1、打开夹套底阀，把夹套中的水排尽。

2、打开排气阀门。

3、分别打开空气蒸汽阀门、物料管蒸汽阀门、取样管蒸汽阀门，三路蒸汽同时进气。

4、当罐内温度上升到95℃调节三路蒸汽阀门，使温度平衡升至125℃时，再调节进排气阀门，使温度控制在125℃左右保温40分钟。

5、灭菌结束后，关闭所有进气阀门，打开排气阀门，排气待发酵罐冷却后，方可打开罐盖，然后进行配料。

二、实消

1、开启电机搅拌，打开排气阀门。

2、分别打开空气蒸汽阀门、料管蒸汽阀门、取样管蒸汽阀门、三路管道同时进蒸汽。

3、当温度升至100℃时，调节四路蒸汽阀门，使温度平缓的上升至116℃，再调节进排气阀门，使温度控制在114℃-116℃之间，保温20分钟。

4、灭菌结束后，关闭四路蒸汽阀门，使罐内压力低于空气压力后，再打开空气进气阀门，进气保压，然后打开冷却水阀门，进气冷却，等待接种。

高效空气过滤器消毒操作规程

1、关闭空气阀门后，一定要彻底排尽过滤器内的空气，是压力表指针显示为零。

2、打开过滤器蒸汽阀门，再打开蒸汽过滤器排气阀门，排尽所有水分。

3、缓慢拧开空气过滤器蒸汽阀门，切忌迅速升压。

4、消毒时控制蒸汽压力0.09-0.1MPa之间，保温时间30分钟。

5、灭菌结束时，关闭蒸汽阀门，要缓慢通入空气，防止膜变形，用空气吹过滤器1小时左右，吹干后方能使用。

种子罐消毒操作规程（300L）

一、空消操作

1、打开夹套底阀，把夹套中的水排尽；

2、打开排气阀门；

3、分别打开空气、蒸汽阀门、物料管蒸汽阀门、取样管蒸汽阀门，三路蒸汽同时进气；

4、当罐内温度上升到95℃调节三路蒸汽阀门，使温度平衡升至125℃时，再调节进排气阀门，使温度控制在125℃左右保温40分钟；

5、灭菌结束后，关闭所有进气阀门，打开排气阀门，排气待发酵罐冷却后，方可打开罐盖，然后进行配料。

二、实消操作

1、配料结束后，关紧罐盖，打开搅拌，打开夹套蒸汽阀门，使罐内温度升至80℃时，关闭夹套蒸汽阀门；

2、分别打开空气蒸汽阀门、料管蒸汽阀门、取样管蒸汽阀门，三路蒸汽同时进入蒸汽；

3、当温度升至100℃时，调节三路蒸汽阀门，使温度平缓的升至116℃，再

调节近排蒸汽阀门，保持温度控制在116℃-120℃之间，控温30分钟；

4、灭菌结束后，关闭三路蒸汽阀门，待罐内压力低于空气压力后，打开空气进气阀门，供气保压，然后打开冷却水阀门，进水冷却，等待接种。

配料罐消毒操作规程（3000L）

一、空消操作

1、打开夹套底阀，把夹套中的水排尽；

2、打开排气阀门；

3、分别打开空气、蒸汽阀门、物料管蒸汽阀门、取样管蒸汽阀门，三路蒸汽同时进气；

4、当罐内温度上升到95℃调节三路蒸汽阀门，使温度平衡升至125℃时，再调节进排气阀门，使温度控制在125℃左右保温30分钟；

5、灭菌结束后，关闭所有进气阀门，打开排气阀门，排气待发酵罐冷却后，方可打开罐盖，然后进行配料。

二、实消操作

1、配料结束后，关紧罐盖，打开搅拌，打开夹套蒸汽阀门，使罐内温度升至80℃时，关闭夹套蒸汽阀门；

2、分别打开空气蒸汽阀门、料管蒸汽阀门、取样管蒸汽阀门，三路蒸汽同时进入蒸汽；

3、当温度升至100℃时，调节三路蒸汽阀门，使温度平缓的升至116℃，再调节近排蒸汽阀门，保持温度控制在116℃-120℃之间，控温30分钟；

4、灭菌结束后，关闭三路蒸汽阀门，待罐内压力低于空气压力后，打开空气进气阀门，供气保压，然后打开冷却水阀门，进水冷却，等待接种。

发酵罐消毒操作规程（5000L）

一、空消操作

1、打开夹套底阀，把夹套中的水排尽；

2、打开排气阀门；

3、分别打开空气、蒸汽阀门、物料管蒸汽阀门、取样管蒸汽阀门，三路蒸汽同时进气；

4、当罐内温度上升到95℃调节三路蒸汽阀门，使温度平衡升至125℃时，再调节进排气阀门，使温度控制在125℃左右保温30分钟；

5、灭菌结束后，关闭所有进气阀门，打开排气阀门，排气待发酵罐冷却后，方可打开罐盖，然后进行配料。

二、实消操作

1、配料结束后，关紧罐盖，打开搅拌，打开夹套蒸汽阀门，使罐内温度升至80℃时，关闭夹套蒸汽阀门；

2、分别打开空气蒸汽阀门、料管蒸汽阀门、取样管蒸汽阀门，三路蒸汽同时进入蒸汽；

3、当温度升至100℃时，调节三路蒸汽阀门，使温度平缓的升至116℃，再调节近排蒸汽阀门，保持温度控制在116℃-120℃之间，控温25分钟；

4、灭菌结束后，关闭三路蒸汽阀门，待罐内压力低于空气压力后，打开空气进气阀门，供气保压，然后打开冷却水阀门，进水冷却，等待接种。

一级种子罐接种操作规程

1、接种前关好门窗，避免接种区域空气流动；

2、操作人员，戴好口罩，用75%酒精棉擦手消毒；

3、打开考克排气，调节空气进气阀门，使罐压接近为零，注意当考克有空气排出，不得使罐压回到零；

4、接种时，接种口套上放上浸有95%酒精的接种火焰环，点燃火焰环，打开接种口盖，盖应在火焰中，菌种应在火焰中迅速倒入罐内，火焰中盖好盖子，并拧紧，熄灭接种火焰环；

5、关闭考克，打开空气进气阀门。

发酵过程中参数控制及记录操作规程

1、每隔2hr记录一次发酵参数，包括ph、溶氧、温度，并取样涂片观察，观察菌体形态，是否有其他杂菌等。

2、每隔4hr取样，离心，测定生物量，并采用3,5—二硝基水杨酸法测定上清液中的残唐含量。结束之后再次测定活菌数。

固体发酵工艺操作规程

1、先开启提料机，和混合机

2 按固体发酵配方投500KG固体原料进入混合机混合3分钟。

3 液体计量罐加入325L发酵液用泵泵入混合机与固体原料混合5分钟。