水中菌落总数测定结果不确定度的评定

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能力验证菌落总数测定结果不确定度的评定

*通讯作者 : 王海华 , 副主任药师, 主要研究方向为食品药品检验及质量标准。E-mail: 13877185340@ *Corresponding author: WANG Hai-Hua, Associate Chief Pharmacist, Guangxi - ASEAN Food and Drug Safety Inspection and Testing Center, Nanning Institute for Food and Drug Control, No.9 Qinghu Road, Qingxiu District, Nanning 530001, China. E-mail: 13877185340 @.
2
uC rel u Arel Y u Brel D uBrel K u Brel V
=0.009606 实验测得菌落总数对数平均值为 lg x =5.2488,
则检测结果的合成不确定度为:
s lg xk
lg xi lg x
aerobic plate count under similar circumstances.
KEY WORDS: proficiency testing; aerobic plate count; uncertainty evaluation 定度的评定。GB/T 27025-2008《检测和校准实验室
[2] 能力的通用要求》中明确规定: 当检测方法有要求、
1 引
言
[1]
测量不确定度是表征合理地赋予被测量之值分散性, 与测量结果相联系的参数。一个完整的测量结果, 除了给出最佳的估算值外, 还要对其进行不确
或用户有要求、或据已作出满足某规范决定的窄限时, 检测报告应提供测量结果的不确定度。但目前不确定度评定大多在理化实验室中开展 , 微生物检验中不

游泳池水菌落总数不确定度评定

游泳池水菌落总数不确定度评定发表时间：2016-07-29T16:40:45.933Z 来源：《医药前沿》2016年7月第20期作者：汪艳玲[导读] 可以减少试验误差，提高检测结果的准确度，在日常工作中具有很高的操作性，对于微生物菌落总数不确定度评定较为适用。

汪艳玲（淮安市疾病预防控制中心江苏淮安 223001）【摘要】目的：通过评定菌落总数的不确定度，提高公共卫生监测中检测结果准确度。

方法：按照GB18204.9-2000《游泳池水微生物学检验菌落总数测定》检测20份游泳池水样品中菌落总数，依据JJF1059.1-2012《测量不确定度评定与表示》，分析菌落总数的不确定度来源，采用合并样本标准差计算，评定菌落总数的不确定度。

结果：在包含概率为95%时，游泳池水中菌落总数的扩展不确定度为0.073（以对数计），此结果适用于同类样本的检测。

结论：用合并样本标准差评定多个同类样本菌落总数的不确定度较为方便，随着检验结果的不断增加，数据可随时加入到合并样本中，更新不确定度的取值范围。

【关键词】游泳池水；菌落总数；不确定度【中图分类号】R12 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2016）20-0391-02 测量结果的不确定度评定目前是国际上公认的评定检测结果质量的参数，对结果合理、准确的评定是检验检测机构提供正确检测结果的前提[1]。

测量不确定度是表征合理地赋予被测量之值的分散性，是与测量结果相联系的参数，一切测量结果都有不确定度[2]。

本文以20份游泳池水样为例，依据GB18204.9-2000《游泳池水微生物学检验菌落总数测定》[3]和JJF1059.1-2012《测量不确定度评定与表示》[4]，对菌落总数检测结果进行不确定度评定。

1.材料与方法1.1 材料本试验所采水样为淮安地区各大游泳池采集的20份游泳池水标本，平板计数琼脂为杭州天和微生物试剂有限公司生产（批号：20150702）。

水产品菌落总数检验不确定度的评定

万方数据
　万方数据
水产品菌落总数检验不确定度的评定
作者：许如苏，罗惠明，林彩华，曾梅锦
作者单位：汕头出入境检验检疫局,广东汕头,515041
刊名：
中国卫生检验杂志
英文刊名：CHINESE JOURNAL OF HEALTH LABORATORY TECHNOLOGY
年，卷(期)：2007,17(3)
被引用次数：1次
1.李慎安食品卫生微生物学,菌落总数测定的不确定度评定《商品检验不确定度评定释例》 2002
2.李玉玲;宋莉莉食品微生物学菌落总数检验中不确定度的评定[期刊论文]-中国卫生检验杂志 2005(07)
3.SN0 168-1992.出口食品平板菌落计数[期刊论文]-
1.胡巅.丁武.李素芳食品的菌落数检测结果不确定度之评定[期刊论文]-中国卫生检验杂志 2008(8)
本文链接：/Periodical_zgwsjyzz200703082.aspx。

纯化水微生物测定不确定度评定报告

纯化水中微生物测定结果的不确定度评定一．目的评定纯化水中微生物测定结果的不确定度。

二．测量程序对同一纯化水样品重复测量20次。

三．数学模型1.数学模型测量是直接数微生物菌落总数，所以数学模型为：y =x 2.不确定度的主要来源与通常的测量相比较，微生物测量的特点是测量结果相差极大。

因此用常规的直接根据平均值得到标准偏差的方法显得有些不合理，通常的做法是取对数以后进行计算。

由于微生物分析测量结果散发极大，因此仅考虑由散发引起的测量不确定度，其它不确定度来源均可以忽略不计。

四．不确定度评定1.列出测量结果x i 。

i i 3.求log x i 的标准差()log i S x ==0.087364.平均值的标准差()log log i S x S x ==0.019535.平均值的标准不确定度等于一倍平均值的实验标准差，所以()log i u x =0.01953 五．扩展不确定度1.平均值的扩展不确定度如前所述，全部测量过程只有一项不确定度，所以直接由平均值的标准不确定度给出测量结果的扩展不确定度。

取包含概率p =95%，根据自由度ν=20，由t 分布表得到包含因子k =2.09。

于是得到扩展不确定度U 95＝k ×()log i u x =2.09×0.01953=0.040832.取反对数，由log x坐标换算回x坐标由于log x与x之间的非线性关系，不能直接求扩展确定度U95的反对数。

因此首先应确定log x 的取值范围为log i x=1.5616±0.040831.5208≤log i x≤1.60243.再取反对数后，得测量结果x分布区间为33≤x≤40。

六．测量结果表示由于测量结果散发极大，不能准确报告测量结果和测量不确定度。

通常以测量结果取值区间的形式报告测量结果。

微生物测定结果的取值区间为33≤x≤40，提供95％的包含概率。

食品微生物学检测中菌落总数测定测量结果的不确定度评定

食品微生物学检测中菌落总数测定测量结果的不确定度评定依据JJF1059－1999《测量不确定度评定与表示》、CNAL/AG06《测量不确定度政策实施指南》和CNAL/AR11《测量不确定度政策》分析一、测量方法按照国家标准GB/T4789.2-2003《食品卫生微生物学检验菌落总数测定》规定的检测程序进行。

检测过程为：1）以无菌操作将检样25g（mL）剪碎放于含有225mL灭菌生理盐水或其它稀释液灭菌玻璃瓶内（瓶内预置适当数量的玻璃珠）或灭菌乳钵内，经充分振摇或研磨做出1：10的均匀稀释液。

固体检样在加入稀释液后，最好置均置器中以8000r/min～10000r/min的速度处理1min，做出1：10的均匀稀释液。

2）用1mL灭菌吸管吸取1：10稀释液1mL，沿管壁徐徐注入含有9mL灭菌生理盐水或其它稀释液的试管内（注意吸管尖端不要触及管内稀释液），振摇试管，混合均匀，做出1：100的稀释液。

3）另取1mL灭菌吸管，按上条操作方法，做10倍递增稀释，如此每递增稀释一次，即换用1支1mL灭菌吸管。

4）根据食品卫生标准要求或对标本污染情况的估计，选择2个～3个适宜稀释度，分别在做10倍递增稀释的同时，即以吸取该稀释度的吸管移1mL稀释液于灭菌培养皿内，每个稀释度做两个培养皿。

5）稀释液移入培养皿后，应及时将凉至46℃营养琼脂培养基（可放置于46℃±1℃水浴保温）注入培养皿约15mL，并转动培养皿使混合均匀。

同时将营养琼脂培养基倾入加有1mL稀释液灭菌培养皿内作空白对照。

6）待琼脂凝固后，翻转平板，置36℃±1℃温箱内培养48h±2h。

7）作平板菌落计数时，可用肉眼观察，必要时用放大镜检查，以防遗漏。

在记下各平板的菌落数后，求出同稀释度的各平板平均菌落总数。

8）选取菌落数在30～300之间的平板作为菌落总数测定标准。

一个稀释度使用两个平板，应采用两个平板平均数，其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数，若片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘2以代表全皿菌落数。

浅析饮用纯净水微生物检验中菌落总数的不确定度检验

浅析饮用纯净水微生物检验中菌落总数的不确定度检验发表时间：2019-08-15T09:31:21.717Z 来源：《中国医学人文》(学术版)2019年3月下第6期作者：孙宗祥姜勇波蔡路王蕾于丹[导读] 在本文中，首先介绍了引用纯净水微生物检验中菌落总数实验，然后在实验中应用了不确定度检验，对菌落总数进行检验，实验结果表明，不确定度检验的方法具备的简便性是非常好的，适合微生物检验。

哈尔滨市疾病预防控制中心 150056【摘要】在进行微生物检验时，应用不确定度检验的目前还很少，通过此种检验方法的应用，可以有效的提升微生物检验结果的科学性，增强检验结果的可用性。

在本文中，首先介绍了引用纯净水微生物检验中菌落总数实验，然后在实验中应用了不确定度检验，对菌落总数进行检验，实验结果表明，不确定度检验的方法具备的简便性是非常好的，适合微生物检验。

【关键词】引用纯净水；微生物检验；菌落总数；不确定度检验ABSTRACT：In microbial testing，the application of uncertainty testing is still rare. The application of this method can effectively improve the scientificity of microbial testing results and enhance the usability of testing results. In this paper，the total number of bacteria in the microbial test of purified water is introduced firstly，and then uncertainty test is applied in the experiment to test the total number of bacteria. The experimental results show that the method of uncertainty test is very simple and suitable for microbial test.Key words：citing pure water；microbial testing；total number of colonies；uncertainty testing前言：在进行微生物检验时，不确定度是一个重要的参数，与测量结果具有很大的关联性，被测量值的分散性都是通过不确定度的表征来赋予的，而且赋予具备合理性，通过不确定度的正确测量和评定，提升了测量结果分析的有效性。

水质检测中菌落总数测定的不确定度评定

水质检测中菌落总数测定的不确定度评定摘要：目的：为了减少实验误差，提高检测的精确度，评定水质检测中菌落总数的不确定度，确定水样的置信区间。

方法：对于某一水样，根据GB/T 5750.12—2006《生活饮用水标准检验方法微生物指标》和CCBLAC/AG05附录规定的方法进行检测，采用对数的平均值评定菌落总数的不确定度。

结果：该水样本次检测结果的置信区间为（1400—1700）CFU/ml。

结论：根据本次检测结果的置信区间说明，当菌落总数的离散程度高时，应该采用对数平均值评定菌落总数的不确定度。

关键词：菌落总数；不确定度由于测量值不可避免地会偏离准确值，因此研究不确定度变得有意义，通过不确定度表示被测量真值所处的量程范围。

在近些年来，不确定度在理化检测相对比较成熟，集中。

然而在微生物检测方面对于不确定度的评定相对较少。

因此针对在水质检测中关于微生物检测以生活饮用水为例评定菌落总数的不确定度，同时采用平均值和对数平均值的方法评定菌落总数的不确定度，比较得出结论。

1、原理与方法1.1、测试原理：不确定度定义为表征合理地赋予被测量值的分散性，与测量结果相联系的参数。

不确定度包括合并标准不确定度和扩展不确定度，通常情况下，不确定度采用扩展不确定度表示。

根据CCBLAC/AG05附录规定进行菌落总数测试要求：每个样品都包含可计算得出数目的微生物；在实验室由不同人员按照规定的测试方法进行一段时间的测试[1]，测试样品是均匀的，每个样品均做平行样，必须由同一测试人员进行操作。

根据GB/T 5750.12—2006《生活饮用水标准检验方法微生物指标》定义，菌落总数是指水样在营养琼脂上有氧条件下37℃培养48小时，所得1ml水样所含菌落的总数[2]。

1.2、测试方法：根据中华人民共和国国家标准GB/T 5750.12—2006《生活饮用水标准检验方法微生物指标》进行测试。

对于生活饮用水，菌落总数在适宜计数的范围内，应该以无菌操作方法用灭菌吸管吸取1ml充分混匀的水样，注入灭菌平皿中，倾注约15ml已融化并冷却到45℃左右的营养琼脂培养基，并立即旋转平皿，使水样和培养基充分混匀，每次检测做一个平行样对照，同时一个平皿倾注营养琼脂培养基作为空白对照。

生活饮用水菌落总数检验中不确定度的评定

生活饮用水菌落总数检验中不确定度的评定发表时间：2012-01-04T15:21:36.803Z 来源：《医药前沿》2011年第21期供稿作者：宋驰萍刘继倩骆玲飞王小光欧阳霖陈秀华陈国强[导读] 准确、合理的不确定度评定，是提供正确测量结果的前提和保证。

宋驰萍刘继倩骆玲飞王小光欧阳霖陈秀华陈国强（上海市闵行区疾控中心 201101）【中图分类号】R115【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2011）21-0093-02 【摘要】目的评定菌落总数的不确定度。

方法分析样品中菌落总数的不确定度来源,采用合并样本标准差的方法来评定菌落总数的不确定度。

结果测量结果表明扩展不确定度为0.067%，适合于菌落总数检验结果的评定。

结论该法简便，适合于每一个样本的检验结果，随着检验结果的不断增加，可随时加入到合并样本中，重新计算和合并样本标准差，更新不确定度的取值范围。

【关键词】菌落总数不确定度不确定度是国际公认的用来评定测量结果质量的参数，是报告度量的尺度。

准确、合理的不确定度评定，是提供正确测量结果的前提和保证。

目前，国际上统一使用的是检测和校准实验室认可准则即ISO/IEC17025：2005，在内容和技术要求方面强化了评定测定不确定度[1]。

故对测量结果进行不确定度的评定成为检测实验室的重要内容。

本文通过对生活饮用水进行卫生微生物菌落总数检测后作不确定度的评定。

1 原理与方法1.1 测试原理根据CCBLAC/AG05附录规定进行菌落总数测试要求：测试样品是均匀的，每个样品都包含可计算得出数目的微生物；在实验室由不同人员按规定的测试方法进行一段时间测试[2]；每个样品均做平行样，必须由同一测试人员进行操作。

测试完成后得到的测试结果取对数，即可用于菌落总数不确定度的评定。

1.2 测试方法依据GB/T 5750.12-2006《生活饮用水标准检验方法微生物指标》的方法进行检验。

以无菌操作方法吸取1ml充分混匀的水样，注入盛有9ml无菌生理盐水的试管中，混匀制成1：10的稀释液；吸取1：10的稀释液1ml注入盛有9ml无菌生理盐水的试管中，混匀制成1：100稀释液；按同法依次制成1：1000、1：10000的稀释液备用；用灭菌吸管取未稀释的水样和2～3个适宜稀释度的水样1ml，分别注入灭菌平皿内，每个稀释度作2个平皿。

能力验证菌落总数测定结果不确定度的评定

设备。１．２方法
００５７７４／１＝０．００５７７４。
合成相对标准不确定度为：１．２．１检测依据。食品中微生物学能力验证计划参试指导书，４ｕＪ．ｔ（ｒ）＂＋＂ｉｒｍａ（Ｄ）＂＋ｔｑｔｒｔｌ（Ｋ）＂＋ｔｑｔｔ￣（ＶＧＢ４７８９．２ —２０ｌＯ《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数ｌ＿ｏ０Ｏ９６Ｏ６测定》。实验测得菌落总数对数平均值为ｌｇｘ＝５．２４８８，则检测结果的合成１．２．２实验过程。在无菌的环境下打开西林瓶，将３ｍＬ的稀释溶液加人到西林瓶中溶解，稀释溶液一共有４０ｍＬ。等待溶解完成后，将溶解不确定度为：鞠ｉ — 吣０５０４２
２结果３讨论
一
般测量不确定度的地点为理化性的实验室，虽然相关专家已经提出了测量不确定度的实验要求，但是在具体的实验以及检测工作中，并没有落实下来。通过本次实验可以有效地对自邑力验证进行检测，本次其中，样品菌落的总数为Ｙ，稀释倍数记为Ｋ，在检测稀释度的平的实验中，为了避免实验样品中的琼脂的表面有以弥漫的生长方式生板上检测的聚落数量记为ｘ，在—定的稀释度下的样品的体积记为Ｖ。长出的菌落，因此在琼脂的表面覆盖了一层培养基，另外还进行了直接２．３判定。由于重复１０次检测的菌落总数结果相差较大，因此对倾注法作为对比陛的实验。在琼脂的外部的培养基呈固体状时，对平板根据—定的培养条件进行培养。结合实验结果来观测这两种检测结果取对数后，再计算检测结果对数值的样本标准偏差。按Ａ类进行翻转，评定，根据贝塞尔公式，得到检测结果对数值的样本标准偏差。对比实验可以发现，两种实验的实验结果相差不多，因此本次的实验效

微生物检验中菌落总数的不确定度如何评定

微生物检验中菌落总数的不确定度如何评定在ISO/IEC17025《校准和检测实验室能力的通用要求》中明确指
出实验室出具的检测报告应包含有关评定校准或测试结果的不确定度说明，故对测量结果进行不确定度的评定成为检测实验室的重要内容。

下面是yjbys 小编为大家带来的关于微生物检验中菌落总数的不确定度如
何评定的知识，欢迎阅读。

1 .检验方法
依据GB 4789.2-2010 《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定》中要求以无菌操作取检样25 g(ml)剪碎放于含有225 ml 灭菌生理盐水或磷酸盐缓冲液中，经振摇或研磨做成1︰10 的均匀稀释样液，按照标准要求制备10 倍系列稀释样品匀液。

根据污染情况的估计，选择2～3 个稀释度，每个稀释度作2 个平皿，每个平皿注入培养
基约15~20 ml，并转动培养皿使混合均匀，待琼脂凝固后，翻转平板，置36℃±1℃温箱内培养48 h±2 h。

计数后以同稀释度的各平板平均菌落总数报告。

2. 数学模型
设菌落总数为A，检测结果为X，则A=X CFU/g(ml)。

3 .计算不确定度
3.1 在微生物检验中，样品中细菌分布的均匀性和重复测量带来的不确定度是影响检验结果准确度的主要原因，而B 类不确定度分量对合成不确定度影响较少。

按GB 4789.2-2010 《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定》中方法，同一样品每个稀释度作两个平衡样，因此可以采用合并样本标准差求检测结果的不确定度见表1。

3.2 从检验结果可知，如直接用贝塞尔公式计算合并样本标准。

水质检测中菌落总数测定的不确定度评定孙广伟1李瑞辉2

水质检测中菌落总数测定的不确定度评定孙广伟 1 李瑞辉 2发布时间：2021-12-22T05:50:43.189Z 来源：《基层建设》2021年第20期作者：孙广伟 1 李瑞辉 2 [导读] 完整的测量结果应包括表征结果分散性的信息，即测量不确定度，这已成为测量领域的共识。

也适用于对生物样本的测量。

对测量不确定度的了解，有助于更恰当地解释和应用测定值1.山东典图生态环境工程有限公司山东淄博 255000；2.山东建兰化工股份有限公司山东淄博 255000摘要：完整的测量结果应包括表征结果分散性的信息，即测量不确定度，这已成为测量领域的共识。

也适用于对生物样本的测量。

对测量不确定度的了解，有助于更恰当地解释和应用测定值。

尤其当测量值与某判定限值相近时，同时测量不确定度也是测量质量的一个重要指标。

关键词：水质检测；菌落总数；不确定度目前，国际公布的不确定度评定的基础文件是《测量不确定度表示指南 MISO/IEC Guide 98-3: Guide to the Expression of Uncertainty inMeasurement,GUM :1995 ) ，GUM 从原埋上阐述了测量不确定度和其评定原则。

我国在不确定度评定方面现行的基础标准为 JJF1059.1 《测量不确定度评定与表示》、 JJF1059.2 《用蒙特卡洛法评定测量不确定度》和 JJF1059.3 《测量不确定度在合格评定中的使用原则》。

测量不确定度评定常用的方法有：白下而上(bottom-up)方法、白上而下(top-down)方法和蒙特卡洛方法。

生物样本测量具有更复杂的不确定性来源，如被分析物的定义不完善、样本不稳定、不能溯源至 SI 单位、测量的是物质的“活性”、复杂的基体、在医学检验领域通常采用单次测量的值作为结果等，导致了评定生物样本测量结果的不确定度在实际工作中难以像化学分析一样容易满足方法规定的理想条件或其复杂程度与检测需求有冲突。

菌落总数测定结果不确定度评估报告

废水菌落总数测定结果不确定度评估1. 实验前准备1.1 设备：恒温培养箱、无菌吸管10ml（具0.1ml刻度）、微量移液器、无菌锥形瓶、无菌培养皿1.2 培养基及试剂：平板计数琼脂、无菌生理盐水1.3 因浓缩苹果清汁中一般菌落不容易生长，故用废水作为样品检测。

2. 检测依据及步骤2.1依据：GB4789.2—2010《食品卫生微生物学检验菌落总数测定》2.2步骤：定量吸取废水，制备成15份均匀的检测样品，每份样品做两个平行样。

↓↓↓↓3. 不确定度来源分析检测步骤主要包括样品的吸取、稀释（移液器）、培养、计数、及结果修约等，由于结果发散性较大的特点，在本次实验中，我们只对样品吸取、重复测定结果的不确定度进行量化分析。

3.1 样品吸取过程中使用刻度吸管体积的相对标准不确定度u rel （V ） 3.1.1 吸管体积校准引入的标准不确定度u （V ）在吸取样品的过程中均使用经检定合格的10ml 刻度吸管，其允许误差为±0.05ml ，故10ml 吸管体积校准引起的不确定度按矩形分布（k=3）为： u 1（V ）=305.0=0.029ml则样品吸取过程中使用刻度吸管体积的相对标准不确定度： u rel （V ）=()V V u =10029.0=0.0029ml 3.2 重复测定结果的标准不确定度菌落总数测定结果不确定度评定3.2.1 对测定结果X 1、X 2分别取对数，得到lg X 1和lg X 23.2.2 每一个样品的残差(在重复性条件下得出n 个观测结果X k 与n 次独立观测结果的算术平均值X 的差)平方和：()221lg lg ∑=-i iX X式中：i X lg —每一个样品测定结果的对数值；X lg —每一个样品测定结果对数的平均值。

3.2.3 根据《JJF —1999测量不确定度评定》中4.3,计算15个样品的合并标准偏差： ()=X S lg ()()()X u XX n m m j ni i lg lg lg 11112=--∑∑==式中：m —测定样品总个数，本次实验共15个；n —对每个样品的独立测定次数，本次实验每个样品平行测定两次。

菌落总数测定不确定度分析

菌落总数测定不确定度分析作者：聂庆丽樊云霄来源：《中国食品》2021年第21期隨着经济的高速发展和GDP的不断增长以及人们生活水平的不断提高，人们对于饮食的安全性要求也在不断提高。

食品中微生物的检测已经得到了有关部门的高度重视，特别是食品中菌落总数的测定已经被国家列为食品检测的强制检测项目。

因此，菌落总数测定不确定度分析是很有必要的。

为了减少实验误差，提高检测结果准确性，检测实验室应具有并应用评定测量不确定度的程序。

微生物检验的性质决定其无法运用计量学和统计学正确评估测量的不确定度，但我们旨在找出影响不确定度的各个分量，并评估出它们对结果的影响程度，从而作出合适的质量控制。

微生物不确定度的评定主要针对定量测试。

测量的目的是为了得到测量结果是否准确或者有效。

如果报告中只表述测量结果而未给出其可信程度或者可信的范围，则测量结果是不准确的。

判断测量结果是否准确需要多次测量结果的重复性，也就是测量的质量和准确度，这就需要使用不确定度来表示。

文章主要介绍了测量不确定度的方法程序，分析了不确定度来源等。

一、测量方法程序实验室依照ISO《测量不确定度表示指南》2005版分析评估本实验室菌落总数测试的测量不确定度的评定方法与结果。

程序如下：（1）培养基及稀释液配制;（2）样品稀释;（3）样品培养;（4）菌落计数。

二、建立数学模型根据测量原理及计算公式，建立测定不确定度评定所需数学模型：三、不确定度分析来源菌落总数测定主要是称/吸取25g（mL）样品置于盛有225mL磷酸盐缓冲液的无菌袋中，均质，制成1∶10的样品匀液。

用1mL无菌吸管吸取1∶10样品匀液1mL，沿管壁缓慢注于盛有9mL稀释液的无菌试管内，混匀，制成1∶100的样品匀液。

以此类推梯度稀释。

选择2-3个适宜稀释度的样品匀液，吸取1mL样品匀液于无菌平皿内，每个稀释度做两个平行。

同时，分别吸取1mL空白稀释液加入两个无菌平皿内作空白对照。

及时将15-20mL冷却到50℃的平板计数琼脂倾注平皿，并混合均匀。

生活饮用水菌落总数检测结果的不确定度评定

定在下述三种情况下
，
0 0 33 6
样品菌落总数的不确定度为：
U。
：
① 当不确定度与检测结果的有效性或应用有关； ② 客户有
。
‰／2
’ 。。
=
2 0 0 33 6／
．
’。。
=
0 02 4
．
要求； ③ 不确定度影响到对结果符合性的判定。 Nhomakorabea，
其扩展不确定度为：
取置信水平
=
U
，
=
T U。，
=
确定度评定应该是实验室质量管理体系的重要组成部分
查
x
P
=
95 ％
V
20
．
，
T
．
分布表得： b
’
(2 0 )
在常规的实验室工作中应包含对检测结果的不确定度评定
结果与讨论
水质菌落总数检验中不确定度的主要
来源有：重复性，包括检验环境、培养时间、培养温度、样品的均匀性、取样的重复性、人员计数、数值修约等。培养条件，包括培养时间的允差和培养湿度的允差；取样，包括稀释体积和取样体积；仪器与试剂，包括吸管和培养
４ｈ，所得ｌｌ８后ｍ水样所含菌落总数。由实验室的不同人员按规定的方法对日常样品进行检验；每个样品由同一实验
表１２份水样检测结果（ｆ／１０ｅｍ）ｕ

02-水中细菌总数检测的不确定度分析

1 目的对水中细菌总数测定不确定度进行分析，找出影响不确定度的因素，给出不确定度，如实反映检测的置信度和准确性。

2 适用范围适用于水中细菌总数的检测。

3 职责3.1 检测人员严格按照操作规程操作，确保检测过程各环节的正常运转，消除各种影响试验结果的意外因素，掌握不确定度的计算方法，了解影响不确定度的因素。

3.2 复核人员了解操作规程，检查原始记录及不确定度的计算方法。

3.3 部门负责人确保操作人员具有上岗资格，检测环境满足实验的操作要求，对仪器的使用维护进行监督管理，负责审核计算结果。

4 过程要求举例说明计算方法与步骤。

4.1 测量方法（依据GB4789.2）4.2 一份水样经过微生物测试后得到下列结果1.3⨯102.6⨯10 2.2⨯10 2.7⨯101.1⨯102.1⨯103.0⨯10 1.5⨯101.6⨯102.5⨯10由微生物学的角度来看,这些结果的差异并不大。

然而将这些数值平均后发现会产生以10为单位的不合理偏差。

算术平均值及log平均值所表示出的不同结果如下所列：S=11⎥⎥⎥⎥⎥⎦⎢⎢⎢⎢⎢⎣-⎪⎪⎭ ⎝-∑=n x x i n i (1)使用公式S=1100.205757-=0.1512 查表2得知在95%置信水平时， t=2.26。

此微生物测试以log 的方式表示，其结果=1.2922±102.026.2⨯=1.2922±0.1429这说明此测试结果分布于1.1493及1.4351之间。

取反对数的值时，此测试结果分布于1.4×10及2.7×10之间。

例废水中菌落总数测量的不确定度评定

废水中菌落总数测量不确定度的评定1．检验方法依据GB/T4789.2-2003《食品卫生微生物学检验》中的方法，测定废水中的菌落总数。

定量吸取废水，需要时用0.85%无菌生理食盐水稀释n 倍。

用无菌的移液管吸取1mL 稀释液置于无菌的培养皿内，再向培养皿中注入约15mL 培养基，转动培养皿使培养基与试样混合均匀，待培养基凝固后，置于36℃±1℃培养温箱内培养48 h 。

每个试样同时做两个平行试验，计数后取其平均值报告菌落总数。

2．结果计算二次平行检测菌落总数检测结果分别计为12A A 和，废水中的菌落总数A 按下式计算： 12A A A n 2+=⨯ 3．影响因素分析经验表明，样品中菌落总数的检测结果的不确定度主要取决于细菌分布的均匀性，表现为测量的重复性。

虽然在检测中有诸多影响因素，如培养基的组成、稀释倍数、培养温度和时间对测量结果会有一定程度的影响，但只要在规定的条件下培养，上述影响可以忽略不计。

再说，也很难在微生物检测结果和影响因素之间建立确定的函数关系，不能像物理化学测量那样从计量学上进行严密的评估，所以本评定将不讨论上述因素的影响。

4．不确定度的评估通常检测菌落总数时，每个试样仅平行检测两份，取其平均值报告菌落总数。

显然，不能凭两个数据计算标准偏差。

为了利用实验室早先积累的检测数据资源，计算具有较大自由度的重复性标准偏差，TELARC[1]提出了用菌落总数的对数值计算合并样本标准偏差的方法。

倪育才根据TELARC 的实例进行了改写[2]。

在《分析测量不确定度评估指南》[3]的实例中介绍了计算标准化差值标准偏差的方法，计算了数值相差一百多倍的多组观测值的合并样本标准偏差。

本评定参考了该方法，但在计算中用残差代替了差值。

为了与TELARC 的对数值计算法的结果相比较，本报告引用倪育才改写的文章中的原始数据计算标准化残差标准差。

表1列出了15组检测原始数据，以及每组数据的平均值、残差和标准化的残差（残差除以平均值）。

微生物检验中菌落总数的不确定度如何评定

微生物检验中菌落总数的不确定度如何评定微生物检验中菌落总数的不确定度如何评定在ISO/IEC17025《校准和检测实验室能力的通用要求》中明确指出实验室出具的检测报告应包含有关评定校准或测试结果的不确定度说明，故对测量结果进行不确定度的评定成为检测实验室的重要内容。

下面是yjbys店铺为大家带来的关于微生物检验中菌落总数的不确定度如何评定的知识，欢迎阅读。

1 .检验方法依据 GB 4789.2-2010 《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定》中要求以无菌操作取检样25 g(ml)剪碎放于含有225 ml 灭菌生理盐水或磷酸盐缓冲液中，经振摇或研磨做成1︰10的均匀稀释样液，按照标准要求制备10倍系列稀释样品匀液。

根据污染情况的估计，选择2～3个稀释度，每个稀释度作2个平皿，每个平皿注入培养基约15~20 ml，并转动培养皿使混合均匀，待琼脂凝固后，翻转平板，置36℃±1℃温箱内培养48 h±2 h。

计数后以同稀释度的各平板平均菌落总数报告。

2. 数学模型设菌落总数为A，检测结果为X，则A=X CFU/g(ml)。

3 .计算不确定度3.1 在微生物检验中，样品中细菌分布的均匀性和重复测量带来的不确定度是影响检验结果准确度的主要原因，而B类不确定度分量对合成不确定度影响较少。

按 GB 4789.2-2010 《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定》中方法，同一样品每个稀释度作两个平衡样，因此可以采用合并样本标准差求检测结果的不确定度见表1。

3.2 从检验结果可知，如直接用贝塞尔公式计算合并样本标准差，由于数据的散发性较大，计算出的合并样本标准差很大，当样本均值较小时其不确定度则会过大，此时可以对上述数据取对数后，计算出样本检验结果对数值的均值和残差，将中间计算结果见表2。

根据贝赛尔公式，可计算出检测结果对数值的合并样本标准差：取置信水平P=95%，自由度ν=19，查t分布表得：分布于X±0.043之间。

水产品菌落总数检验不确定度的评定

［文章编号］１００４—８８（０７００４０６５２０）３— ５９— ２
测量结果不确定度评定是Ｉ／Ｅ１０５的要求，作用ＳＩＣ７２Ｏ其
越来越受到人们的认同与重视。目前，于测量结果不确定关度评定的书籍、报道如雨后春笋，出不穷，主要集中在分层但析化学上。关于微生物学检验结果的不确定度评定只有少数
报道，而且仅限于同一样品分多次测量而进行的细菌总数检
２０个样品菌落总数的检验结果及对数值（表１。见）
表１０份样品菌落总数检验结果（ｆ／２ｃｕｇ）
测结果的不确定度评定。笔者试图利用同类产品的日常检验结果。采用统计学方法对水产品的菌落总数检验结果进行不确定度评定。具体报道如下：
［参考文献］
［］Ｓ０６ — ２１Ｎ１８９．出口食品平板菌落计数［］ｓ．［］李玉玲，２宋莉莉．品微生物学菌落总数检验中不确定度的评定食
５０５该样品的菌落总数的ｌ值为５０５± ．５，．５，ｏｇ．５００６分布于４９９—５１１之间，．９．１取反对数，其结果分布于９，７９７０—１９２，１２ｃ／；２ｆｇ基于本次检验方法所得的不确定度，１个样品菌ｕ第
３不确定度来源及其分析
、
检验结果的不确定度来源见图１。
重复性
根据贝塞尔公式，可计算出合并样品标准差：