免疫球蛋白AIgA测定免疫比浊法-检验科免疫室作业指导书

免疫球蛋白AIgA测定免疫比浊法

1.原理

分析原理是液相免疫沉淀散射比浊终点测定法。抗血清用缓冲液稀释后加到一份病人血清中，经过孵育后可以测定抗原抗体复合物产生的散射光。散射光结果和血清中的IgA浓度成正比。

2.标本采集：

2.1标本采集前病人准备：受检者空腹

2.2标本种类：血清或血浆

2.3标本要求：取被检者静脉血2ml，室温放置不超过4小时，分离血清备用。

3.标本储存：待测标本在2-8℃存放不超过24小时，-20℃不超过三个月，-70℃长期保存。避免反复冻融。

4.标本运输：室温运输

5.标本拒收标准：细菌污染、溶血、脂血不能作测定。

6.试剂

6.1试剂名称：免疫球蛋白A检测试剂盒

6.2试剂生产厂家：芬兰Orion诊断试剂公司

6.3包装规格：60Test/kit

6.4试剂盒组成：

缓冲液30ml

空白缓冲液30ml

抗血清试剂0.5ml

定标液0.5ml

磁卡1张

7.仪器设备：

7.1仪器名称：OrionTurboxRplus特定蛋白分析仪

7.2仪器厂家：芬兰Orion集团公司

7.3仪器型号：Turboxplus

8.操作步骤：

8.1试剂配制：

8.1.1抗血清应用液准备：吸取500ul抗血清加到反应缓冲液中，轻轻混匀，应用液2-8℃可保存12个星期。

8.1.2空白缓冲液：液体待用。

8.1.3定标液：用0.9%NaCL进行1：51稀释。定标液根据IFCC提供的材料CRM470进行标定。

收集与处理样品：样品用0.9%Nacl进行1：51稀释。

为每一份样本测定准备一份样品空白，同样，为定标液另外准备一份定标液空白。

准备两份定标液测定（定标完成后，标准曲线数据存储在磁卡内。下次检测如使用同批试剂，可以不必做定标而直接使用磁卡上的定标信息）。

如下准备各比色管：

轻轻摇动混匀，室温18-25℃放置30±5分钟。

仪器测试步骤：参见TurboxR特定蛋白分析仪作业指导书。

9.结果计算：仪器直接计算并打印结果。

10.临床意义：IgA分为血清型和分泌型两种。IgA是机体粘膜局部抗感染的重要物质。如IgA合成障阻，对微生物的局部感染便增加易感性，很多病人常发生感并发呼吸道感染是常与分泌型的IgA低下和缺乏有关。如反复的慢支感染、胃肠道疾患常与IgA缺乏有关。11.参考范围：0.7-4.0g/L

质量控制：建议使用厂家或临检中心提供的免疫球蛋白A质控液和临床标本同时检测，结果必须在控制范围内。

13.操作性能：迅速简便、灵敏度高、重复性好、特异性高。

14.超出范围结果处理：线性测定范围：0.3-6.0g/L，如果结果超过6.0g/L，那么将样品用0.9%NaCl行1：2（1+1）稀释后再进行测定，结果乘以2。

15.其它

15.1试剂中含有0.1%的叠氮钠作为保护剂，叠氮钠易和铅铜急剧化合生成易爆炸的金属叠氮化合物，因此试剂一旦有溢出须用大量的

水冲去。.

15.2当要丢弃包括所有的实验材料和试剂时，须经121℃一个小时的高压灭菌。

15.3定标液中的含有来源于人血清的材料，已经测定HCV、HBsAg 和HIV抗体阴性，应仍然视为传染源。

15.4骨髓瘤的病变蛋白会干扰免疫球蛋白的测定，这时候建议用免疫电泳法进行校正。