胡萝卜素含量的测定

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高效液相色谱法测定15种蔬菜中的胡萝卜素

2、重复性和精密度
此外，该方法具有较好的重复性和精密度，能够满足实际测定的要求。通过本研究的开展，为准确评估蔬菜的营养价值提供了科学依据。
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2、样品中胡萝卜素的测定结果
表1 15种蔬菜中胡萝卜素的含量（mg/100g）
3、样品中水分含量的测定结果
3、样品中水分含量的测定结果
采用烘干法测定了15种蔬菜中的水分含量，结果如表2所示。由表可知，不同蔬菜中的水分含量也存在显著差异。其中，生菜和芹菜中的水分含量较高，分别为94.7%和92.5%；红薯和土豆中的水分含量较低，分别为79.3%和78.6%。其他蔬菜中的水分含量介于上述两者之间。
采用高效液相色谱法测定蔬菜中类胡萝卜素，需对方法进行重复性和精密度评估。实验结果表明，该方法的重复性和精密度均较好，能够满足实际测定的要求。
2、重复性和精密度
结论本次演示介绍了高效液相色谱法测定蔬菜中类胡萝卜素的方法及注意事项。该方法具有分离效果好、分析速度快、灵敏度高等优点，能够准确测定蔬菜中类胡萝卜素的含量。通过对不同种类蔬菜中类胡萝卜素含量的测定，发现叶菜类蔬菜中类胡萝卜素含量较高，而根茎类蔬菜中类胡萝卜素含量较低。
2、实验方法
（2）色谱条件：采用高效液相色谱仪进行分离分析，色谱柱为C18柱（5μm， 4.6mm×250mm），流动相为甲醇-丙酮（1:1），流速为1ml/min，检测波长为 450nm，柱温为30℃。
2、实验方法
（3）标准曲线绘制：精确称取适量胡萝卜素标准品，用甲醇-丙酮（1:1）混合溶剂配制成不同浓度的标准溶液。分别进样分析，以峰面积（A）对胡萝卜素浓度（C）绘制标准曲线。
3、高效液相色谱法测定类胡萝卜素
3、高效液相色谱法测定类胡萝卜素

水果蔬菜汁类胡萝卜素含量的测定

水果、蔬菜汁类胡萝卜素含量的测定1 主题内容与适用范围本标准规定了水果、蔬菜汁中类胡萝卜素的分离提取方法及提取物中类胡萝卜素总量的测定方法。

本标准适用于水果、蔬菜汁中类胡萝卜素总量的测定。

2 原理果蔬滤液通过溶剂萃取,分离提取类胡萝卜素,在特定波长下用分光光度法测其吸光度。

该吸光度与类胡萝卜素含量成线性关系,通过换算即可得知类胡萝卜素之含量。

3 试剂和溶液本标准所用试剂除特殊规定外,均使用符合国家标准的分析纯试剂,均采用蒸馏水。

3.1 石英砂(Q/HG 22--467)；3.2 萃取剂,2/1(v/v)氯仿(GB 682)-甲醇(GB 683)混合。

4 仪器设备4.1 抽滤器；4.2 无灰分滤纸；4.3 分液漏斗：250mL；4.4 容量瓶,100mL；4.5 移液管,20mL；4.6 烧杯,50mL；4.7 分光光度计,使用的测量波长为440±10nm。

5 分析步骤注：由于类胡萝卜素本身性状的不稳定性,即见光易氧化分解,建议所有操作应避光进行。

5.1 试样的制备5.1.1 液体样品：混合均匀后取样。

5.1.2 固体样品：捣碎机捣碎后,纱布挤汁。

5.2 用移液管吸取20mL样液置50mL烧杯中。

5.3 过滤：在烧杯(5.2)中加入3g石英砂,摇动后用布氏漏斗过滤(布氏漏斗预先铺有无灰滤纸,纸上铺有2g石英砂),然后再用5mL水冲洗滤渣3次。

5.4 萃取：在250mL的分液漏斗中倒入滤液(5.3),再加入20mL萃取剂(3.2),振摇后静置,收集下部分有机相,再用20mL萃取剂提取两次,将三次萃取所得有机相合并,用萃取剂定容为100mL。

注：对果胶含量大的果蔬,萃取时,将三次合并的有机相重新倒回原分液漏斗,继续用20mL萃取洗涤一次,然后用萃取剂定容至100mL。

5.5 测定：在440±10nm波长下测定提取液的最大吸光度A。

6 结果的计算和表示类胡萝卜素总量用mg/L表示,按下式计算：类胡萝卜素(mg/L)＝A×20式中：A——测定的最大吸光度；20——换算系数。

生物实验报告胡萝卜

一、实验目的1. 学习胡萝卜素的提取方法。

2. 掌握胡萝卜素含量的测定方法。

3. 了解胡萝卜的营养价值。

二、实验原理胡萝卜素是一种脂溶性色素，广泛存在于胡萝卜、菠菜、甘蓝等植物中。

胡萝卜素具有丰富的营养价值，对人体健康具有重要作用。

本实验采用有机溶剂提取胡萝卜素，并通过比色法测定胡萝卜素的含量。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：新鲜胡萝卜、无水乙醇、蒸馏水、三氯甲烷、无水硫酸钠、硅胶、标准胡萝卜素溶液等。

2. 实验仪器：电子天平、离心机、分光光度计、研钵、烧杯、试管、漏斗、滤纸等。

四、实验步骤1. 胡萝卜素的提取（1）将新鲜胡萝卜洗净，去皮，切成小块，放入研钵中。

（2）加入适量无水乙醇，研磨成匀浆。

（3）将匀浆倒入漏斗中，用滤纸过滤，收集滤液。

（4）将滤液倒入烧杯中，加入适量无水硫酸钠，搅拌均匀，静置。

（5）待滤液分层后，取出上层清液，用分液漏斗分离。

（6）将分离出的上层清液倒入试管中，加入适量硅胶，搅拌均匀，静置。

（7）待硅胶沉淀后，取出上层清液，用分光光度计测定其吸光度。

2. 胡萝卜素含量的测定（1）将标准胡萝卜素溶液稀释成一系列浓度，分别测定其吸光度。

（2）以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。

（3）根据实验测得的胡萝卜素吸光度，从标准曲线上查得胡萝卜素含量。

五、实验结果与分析1. 胡萝卜素的提取通过实验，成功提取了胡萝卜素，提取率为（此处填写提取率）。

2. 胡萝卜素含量的测定根据标准曲线，计算出实验样品中胡萝卜素的含量为（此处填写含量）mg/g。

六、实验结论1. 本实验成功提取了胡萝卜素，提取率为（此处填写提取率）。

2. 通过比色法测定，实验样品中胡萝卜素的含量为（此处填写含量）mg/g。

3. 胡萝卜中含有丰富的胡萝卜素，具有很高的营养价值。

七、实验讨论1. 实验过程中，提取胡萝卜素的关键步骤是研磨、过滤和分离。

在研磨过程中，要注意研磨时间不宜过长，以免胡萝卜素氧化降解。

2. 在分离过程中，要注意分液漏斗的使用，避免混合液分离不完全。

胡萝卜实验报告数据

胡萝卜实验报告数据引言胡萝卜是一种常见的蔬菜，富含维生素A、维生素C、纤维素等营养物质，并且具有抗氧化和免疫增强的功效。

为了研究胡萝卜中维生素含量与颜色的关系，我们进行了一项实验。

本报告旨在介绍实验的设计和结果分析，以及对实验结果的讨论。

实验设计我们从市场上购买了不同颜色的胡萝卜，包括红色、橙色和黄色三种。

为了保证实验的准确性和可比性，我们选择了相同规格和品种的胡萝卜，将它们均分为若干组，每组含有相同数量的胡萝卜。

在实验中，我们选取了三个不同的处理组：对照组、煮熟组和蒸煮组。

对照组的胡萝卜没有进行任何处理，只是晾晒后保存。

煮熟组的胡萝卜用开水煮熟后晾晒保存，而蒸煮组的胡萝卜则是用蒸锅蒸煮后晾晒保存。

实验步骤1. 将胡萝卜按照颜色分类切割成相同大小的块状。

2. 将每组胡萝卜放置于通风良好的地方晾晒48小时。

3. 称量每组胡萝卜的质量，并记录下来。

4. 使用高效液相色谱仪测定每组胡萝卜中维生素A和维生素C的含量。

5. 对照组的维生素含量作为基准，计算煮熟组和蒸煮组的维生素损失率。

实验结果通过高效液相色谱仪的测定，我们得到了不同处理组中胡萝卜维生素含量的数据。

胡萝卜颜色对照组(mg/100g) 煮熟组(mg/100g) 蒸煮组(mg/100g)红色 2.1 1.7 1.9橙色 1.8 1.4 1.6黄色 1.5 1.2 1.4根据实验结果，我们可以得出以下结论：1. 经过煮熟和蒸煮处理后，胡萝卜中的维生素A和维生素C的含量都有所下降。

相较于对照组，煮熟组和蒸煮组的胡萝卜中维生素的损失率略高一些。

2. 在三种颜色的胡萝卜中，红色胡萝卜的维生素含量最高，黄色胡萝卜的维生素含量最低。

这可能与胡萝卜颜色中的类胡萝卜素含量有关。

结论与讨论综合实验结果，我们可以得出如下结论：1. 胡萝卜中的维生素含量受到处理方法的影响，煮熟和蒸煮处理会导致维生素的损失。

2. 在胡萝卜的颜色方面，红色胡萝卜相较于橙色和黄色胡萝卜，含有更多的维生素。

高效液相色谱法测定血清中维生素A、E、β-胡萝卜素

1．样品处理

血清样品在采血后立即离心，分离血清；置5ml塑料试管中，充氮、密封，于 -40℃保存备用。

在5ml棕色具塞玻璃离心管中，加入 0.25ml血清、1ml 10％邻苯三酚乙醇溶液、0.5ml 60％KOH，用氮气将管内空气置换，37℃水浴1h。

冷水浴3min后加入5％NaCl 1ml，己烷 /乙酸乙酯(9:1)3ml，用氮气将管内空气置换，盖紧塞子，水平振荡器上振荡5min(40次/min)；

β-胡萝卜素遇光和氧会被迅速破坏，所以应临用新配，并注意避光保存。样品的提取液比较稳定，可以隔夜后进行分析。
五、思考题
1. 维生素A族维生素与能量代谢有关？
四、质量控制
1. 配制标准液时：

若有条件应对配制好的标准稀释液维生素A、维生素E、β-胡萝卜素 200～600nm扫描，观察最大吸收峰的波长。

如果所用HPLC仪能作波长变换，则在测定组分的最大吸收波长下测定可取得较高的灵敏度。
2. 吸取上清液时：

注意不可触及界面；

否则：一方面会吸入水，影响分析和柱的分离能力；另一方面，界面上的脂肪层可能会影响分析结果。

β-胡萝卜素以氯仿配制成不同浓度的标准液，同样品一样处理。

分别以标准应用液浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制工作曲线。
三、数据处理

将样品中三种待测组分平行测定的峰面积均值分别代入各自的工作曲线，求得测定样液中各自的含量。

再乘以样品处理时的稀释倍数，即得到血清样品中维生素A、维生素 E及β胡萝卜素的含量。
高效液相色谱法测定血清中维生素A、E、β-胡萝卜素

纸层析法测定植物样品胡萝卜素含量

古量。
臂应用设备较简单，操作技术性较强．但因此这两种方法的应用都有一定的局限性．对上述阃题．们针我进行了纸层析法测定植物样品中胡萝素售量的实验，在寻找一种操作简单、本较低、于掌握的旨成易
ＮＨ。０．０１００ｇ４月下旬或５月初当植株ＨＰ５００。
攥露地段的土复古水量高２以上．太雨状态下ｏ在可使地面径流量减少４左右，土冲涮量减少Ｏ泥
６～７，减少水土流失、制水患和治理荒漠５５对控化或沙漠化具有显著作用。近几年来．国沙尘暴我的发生次数明显增多管原因是多方面舶．乱挖尽但药材对加剧生态环境恶化的事宴却是无可争议的为保护生态．绝中药材的滥采，展麻黄的＾工栽杜开培对台理恢复沙漠植被有重要意义。在河西闲滩空地进行中麻黄的种植前量广阔。４栽培技术要点
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中圈分娄号：￥５．６８１文１哇标识码，Ａ文章编号：１０ — ４３２ｏ）４ｏ４ — ２０１１６（０２０一０００１材料与方ｊ壹
１．１谢定原理

HPLC测定食品维生素预混料中β-胡萝卜素的含量

ｔｅｐａｅｃｌｍｃｏｓｒｈｈｏｕｎｌｈｓｏｓｉｂ一１０Ｒ０Ｐ一８（ｕ５ｍ）一２０Ｘ．）ｗｔｔｅｍｂｅｐａｅｃｍｏｅｆａｅｎｔｌａｄ５４０ｉｈｏｉｈｓｏｐｓｄｏｃｔｉｉｈｌｏｒｅｎ
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ＨＬＰＣ测定食品维生素预混料中１限公司检测中心，上海上
摘
２０３）０３１
要：从检测波长、流动相、柱温等方面优化了反相高效液相色谱仪测定维生素预混料中１胡萝卜３一素
（ｃｒｔｅ，Ｂ— ａｏｎ）并对该检测方法的适用性进行验证和评价。并用实验方法优化得到的反相高效液相色谱分析维ｅ
生素预混料分析Ｂ一胡萝卜的条件为：用１：（／乙醇和环己烷混合液直接提取，取液用纯水洗涤至素采１ｖＶ）提
ｆｍａｅｉｕｄｃｒｍｔｒｐｉｍｔｏｒｅｒｉａｏｆｏｎｅＬｑｉｈｏａｇａｈｃｅｄｆｔｍｎｔｎｏＢ—ｃｒｔｅｉｉｍｉｄｘｒ．Ａｓ，ｔｅｐｌａｉｒｏｈｏｄｅｉａｏｎｖａｎａｍｉｕｅｌｏｈｐｉｂｌｅｎｔｅｔａｃ —
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胡萝卜素含量测定

食物中胡萝卜素的测定方法Method for determination of carotene in foods1 主题内容与适用范围本标准规定了食物中胡萝卜素的测定方法——纸层析法。

本标准适用于植物性食物和含有植物性食物的混合食物中胡萝卜素的测定，其最小检出限为0.11μg。

2 原理以丙酮和石油醚提取食物中的胡萝卜素及其他植物色素，以石油醚为展开剂进行纸层析，胡萝卜素极性最小，移动速度最快，从而与其他色纱分离；剪下含胡萝卜素的区带，洗脱后于450nm波长下定量测定。

3 试剂3.1 石油醚（沸程30～60℃）：同时是展开剂。

3.2 丙酮：分析纯。

3.3 丙酮-石油醚混合液：3：7（V/V）。

3.4 无水硫酸钠：分析纯。

3.5 5%硫酸钠溶液。

3.6 1：1氢氧化钾溶液：取50g氢氧化钾溶于50mL水。

3.7 无水乙醇：需经脱醛处理。

3.8 β-胡萝卜素标准溶液：取5mgβ-胡萝卜素标准品，溶于10mL三氯甲烷中，浓度约为500μg/mL，准确测其浓度。

取标准溶液10.0μL，加正己烷3.00mL，混匀，测吸光值，比色杯厚度1cm，以正己烷为空白，入射光波长450nm，平行测定三份，取均值。

计算公式： (1)式中：X1——胡萝卜素标准溶液浓度，mg/mL；A——吸光值；E——β-胡萝卜素在正己烷溶液中，入射光波长450nm，比色杯厚度为1cm，溶液浓度为1ppm的吸光系数，为0.2638；——将ppm,换算成mg/mL;——测定过程中稀释倍数的换算。

3.9 β-胡萝卜素标准使用液：将已标定的标准液用石油醚准确稀释后，每毫升溶液相当50μg，避光保存于冰箱中。

4 仪器和设备4.1 实验室常用设备。

4.2 玻璃层析缸。

4.3 分光光度计。

4.4旋转蒸发器：具150mL球形瓶。

4.5 恒温水浴锅。

4.6 皂化回馏装置。

4.7 点样器或微量注射器。

4.8 新华滤纸：定性，快速或中速，101号。

5 样品的采集和处理5.1 粮食：样品用水洗三次，置60℃烤箱中烤干，磨粉，储于塑料瓶内，放一小包樟脑精，盖紧瓶塞保存，备用。

胡萝卜营养成分分析测定

本科生毕业论文（设计）鉴定表题目胡萝卜营养成分分析测定姓名王晴晴学号200912401009 院系生命科学学院专业生物工程指导教师蒋娟职称讲师年月日曲阜师范大学杏坛学院教务处制目录摘要 (1)关键词 (1)Abstract (1)Key words (1)引言 (2)1材料与方法 (2)1．1实验材料 (2)1．2实验器材与试剂 (2)1．3实验方法 (3)1．3．1可滴定酸酸度测定 (3)1．3．2可溶性固形物测定 (3)1．3．3可溶性蛋白质含量的测定 (3)1．3．4 总糖含量的测定 (4)1．3．5 胡萝卜素含量的测定 (5)2结果与分析 (5)2．1可滴定酸和可溶性固形物测定与分析 (5)2．2可溶性蛋白质含量测定与分析 (6)2．2．1 可溶性蛋白质含量测定 (6)2．2．2 可溶性蛋白质含量分析 (7)2．3总糖含量测定与分析 (7)2．3．1 总糖含量测定 (7)2．3．2 总糖含量分析 (8)2．4胡萝卜素含量测定与分析 (8)2．4．1 胡萝卜素含量测定 (8)2．4．2 胡萝卜素含量分析 (8)2．5胡萝卜各段营养成分分析 (8)3讨论 (9)3．1胡萝卜营养成分分析的结果 (9)3．2胡萝卜营养成分分析的意义 (9)致谢 (11)参考文献 (12)胡萝卜营养成分分析测定生物工程专业学生王晴晴指导教师蒋娟摘要：以胡萝卜为主要原料，对可滴定酸、可溶性固形物、可溶性蛋白质、总糖和胡萝卜素等营养成分含量进行分段测定。

结果：三部分营养成分含量相差不大，整体来看pH值为6.26，可溶性固形物为10.3%，可溶性蛋白质含量为0.18g/100g，总糖含量为6.82g/100g，胡萝卜素含量为3.8mg/100g。

关键词：胡萝卜营养成分分析Analysis and Determination of Nutritional Components inDaucus CarrotStudent majoring in bioengineering Wang QingqingTutor Jiang JuanAbstract：To determine and evaluate titratable acidity, soluble solids, soluble protein, total sugar and carotene of daucus carrot. Results:the contents of titratable acidity and soluble solids in the carrot were 6.26,10.3% respectively. The amounts of soluble protein and total sugar in 100g fresh weight of carrots were 0.18g,6.82g respectively. In addition, the amounts of carotene in 100g fresh weight of carrots were 3.8mg.Key words: daucus carota nutrients analysis引言胡萝卜(Daucus carota L. var. sativa DC.) 原产于亚洲西南部、中亚西亚地区，元末传入我国，故称胡萝卜，又名甘荀、金笋、丁香萝卜，为伞形科胡萝卜属两年生草本植物，我国各地均有种植，素有“小人参”的美誉，是一种富含蛋白质、糖类、维生素和胡萝卜素等营养成分的蔬菜。

胡萝卜素的柱层析分离

胡萝卜素的柱层析法测定Determination of carotene by column chromatography摘要：胡萝卜素存在于辣椒、胡萝卜、菠菜等绿色植物中，由于各种胡萝卜素的化学结构不同，它们被氧化铝吸附的强度以及有机溶剂中溶解度都不相同，同植物其他色素比较，胡萝卜素的吸附最差，故最先被洗脱下来。

层析法是近代生物学中应用较为广泛的物理化学分析方法之一，为了胡萝卜素分离试验的结果较好，生物化学课中也开设了柱层析法分离胡萝卜素的试验。

关键词：胡萝卜素菠菜柱层析法胡萝卜素存在于辣椒和胡萝卜等黄绿色植物中，因其在动物体内可转变成维生素A，故称为维生素A原。

胡萝卜素可用酒精、石油醚和丙酮等有机溶剂从食物中提取出来，且能被氧化铝（Al2O3）所吸附，先用高温处理氧化铝以除去水分，提高氧化铝的吸附力。

由于胡萝卜素与其它植物色素的化学结构不同，它们被氧化铝吸附的强度以及在有机溶剂中的溶解度都不相同，故将提取液利用氧化铝层析，再用石油醚等冲洗层析柱，即可分离成不同的色带。

同植物其它色素比较，胡萝卜素吸附最差，跑在最前面，故最先被洗脱下来.层析法（Chromatography）是近代生物化学中应用较为广泛的物理化学分析方法之一。

1906年俄国植物学家米哈伊尔·茨维特将此法用于植物色素的分离，故又称色层分析法，最初命名采用Chromatography这一词来描述这一技术（源于希腊文Chromatos，颜色）[1]。

该法是利用混合物中各组分分子结构互不相同，理化性质（溶解度、吸附力、分子大小形状及分子极性等）各异，因而在支持物（吸附剂）上分布于不同的区带，以达到分离的目的。

层析法一般利用两个相，一个称固定相，一个称流动相。

目前常用的层析法根据分离原理不同而分为吸附层析、分配层析、离子交换层析、凝胶层析和亲和层析法等。

其中吸附层析法又可根据操作形式的不同分为柱层析法和薄板层析法等。

[2]柱层析法是用一根玻璃柱（1cm×16cm）内装吸附剂粉末（MgO、Al2O3、硅胶等），在柱顶部加入要分离的样品溶液，再加入一定的有机溶剂（流动相）以洗脱样品中各组分，由于吸附剂对各组分的吸附力不同及各组分在洗脱剂中的溶解度不同，因而在洗脱过程中各组分随洗脱剂向下流动时，层析柱中连续不断地产生吸附、溶解（解吸附），再吸附、再解吸附的现象。

高效液相色谱法测定β-胡萝卜素含量

高效液相色谱法测定β-胡萝卜素含量任科;李清平;张海容【摘要】用高效液相色谱法(HPLC)同时测定野核桃、胡萝卜两种食品中的β-胡萝卜素含量.采用的色谱条件为:Symmetry C18色谱柱(4.6 mm×250 mm, 5 μm),以60%乙腈、20%乙酸乙酯、20%甲醇混合溶液为流动相,在波长450 nm,柱温25 ℃流速1 mL/min;进样量10 μL条件进行试验.在优化实验条件下,测得野核桃中含β-胡萝卜素为6.5 μg/g,胡萝卜中含β-胡萝卜素为358.15 μg/g.方法简便、快速,适合高效液相色谱法测定植物样品中β-胡萝卜含量.%The contents of β-carotene in wild walnut and carrot were simultaneously determined by HPLC. The chromatographic conditions were as follows:symmetryC18column (4.6 mm×250 mm,5 μm) was used with mobile phase of a mixture of 60% acetonitrile, 20% methanol at a wavelength of 450 nm, and a column temperature of 25 ℃ with 1 mL/min as the flow rate, injection volume of 10 μL. Under the optimized experimental conditions, the β-carotene content was obtained in wild walnut conta ining 6.5 μg/g and in carrots containing 358.15 μg/g for real samples. The method was simple, rapid and suitable for the determination of β-carrot content in plant samples by high performance liquid chromatography.【期刊名称】《广州化工》【年(卷),期】2018(046)004【总页数】3页(P104-106)【关键词】β-胡萝卜素;高效液相色谱;野核桃;胡萝卜【作者】任科;李清平;张海容【作者单位】忻州师范学院生化分析研究所,山西忻州 034000;忻州师范学院生化分析研究所,山西忻州 034000;忻州师范学院生化分析研究所,山西忻州 034000【正文语种】中文【中图分类】O657.7β-胡萝卜素(C40H56)是类胡萝卜素之一，也是橘黄色脂溶性化合物，它是自然界中最普遍存在也是最稳定的天然色素。

高效液相色谱法测定保健食品中β-胡萝卜素

高效液相色谱法测定保健食品中β-胡萝卜素蔡伟江;黄康惠【摘要】建立保健食品中β-胡萝卜素含量的测定方法。

采用高效液相色谱法，色谱柱：岛津Inertsil C18（4.0 mm ×75 mm，3μm），以甲醇∶乙腈=90∶10为流动相，流速1.0 mL/min。

结果：β-胡萝卜素的浓度与峰面积线性关系良好（R2=0.99981），平均回收率为99.4%，RSD=0.4%（n=9）。

因此，高效液相色谱法可靠、灵敏、快速，可用于保健食品中β-胡萝卜素含量测定。

%To establish a method for determination ofβ-carotene in health foods. Methods:high performance liquid chromatography (HPLC), column:using Shimadzu Inertsil C18column (4.0 mm ×75 mm, 3 μm),Methanol∶Acetonitrile=90∶10 as the mobile phase, flow rate:1.0 mL/min. The linear relatio nship betweenβ-carotene concentration and peak area are good (R2=0.999 81), the average recovery was99.3%,RSD=0.4%(n=9).Conclusion:The method is reliable, sensitive, rapid and can be used for determination ofβ-carotene in health foods.【期刊名称】《食品研究与开发》【年(卷),期】2016(037)004【总页数】3页(P161-163)【关键词】β-胡萝卜素;保健食品;高效液相色谱;含量测定【作者】蔡伟江;黄康惠【作者单位】汤臣倍健股份有限公司，广东珠海519040;汤臣倍健股份有限公司，广东珠海519040【正文语种】中文β-胡萝卜素是类胡萝卜素之一，是橘黄色脂溶性化合物，它是自然界中最普遍存在也是最稳定的天然色素。

胡萝卜素含量的测定

4. 稀释与测定
将滤液稀释到适当浓度，用分光光度计在450nm波长处测定吸光度。
1. 样品处理
将样品（如蔬菜、水果等）清洗干净，晾干后切碎并称重，放入研钵中研磨成匀浆。
5. 数据处理
根据吸光度值，利用标准曲线或回归方程计算胡萝卜素的含量。
实验结果分析
数据处理
将测定的吸光度值代入标准曲线或回归方程，计算出样品中胡萝卜素的含量。
参考文献
06
参考文献
作者
01
张三
发表时间
02
XXXX年
期刊名称
03
食品科学
谢谢聆听
结果与文献比较
我们将实验结果与相关文献中的数据进行比较，以验证我们的实验方法和结果的可靠性。通过比较，我们可以发现我们的结果与其他研究者的结果基本一致，说明我们的实验方法是可靠的。
结果的意义和影响
分析实验结果的意义和影响，可以帮助我们更好地了解胡萝卜素含量的影响因素以及其在食品和健康领域的应用价值。例如，高胡萝卜素含量的食品可能具有更高的营养价值，对人们的健康有益。
结果分析
比较不同样品中胡萝卜素的含量，分析其影响因素，如品种、生长环境、采摘时间等。同时，将实验结果与国家标准或行业标准进行比较，评估样品的营养价值或质量。
03
实验材料与设备
实验材料
新鲜胡萝卜
用于提取胡萝卜素，要求新鲜、无病虫害。
甲醇
用于提取胡萝卜素，具有较高的溶解度。
石油醚
用于提取胡萝卜素，具有较高的溶解度和较低的沸点。
硅藻土
用于过滤提取液，去除杂质。
实验设备
电子天平
用于称量实验材料，要求精度高。
定胡萝卜素含量，通过比色法进行定量分析。

β-胡萝卜素测定

β-胡萝卜素测定1仪器设备751分光光度计等。

2操作方法称取含有约10μgβ-胡萝卜素试样一份，磨碎后放入圆底烧瓶中，每克试样（少于1g以1g计）加入10ml含10%KOH的甲醇溶液，在水浴上加热避光回流30min。

冷却后离心，残渣用约10倍于残渣量的甲醇悬浮后再离心。

合并上清液放入分液漏斗中，加入10倍量水和10倍量乙醚，摇匀振荡萃取胡萝卜素。

静止分层后分出乙醚，下层再用等量乙醚苯取多次，直到醚层无色为止。

合并乙醚层，加入等体积水振荡，以洗去醚层中的残碱，重复数次，直到水层不呈碱性为止（用酚酞试验）。

醚层尽量分去水分后，放入无水硫酸钠干燥数小时。

经干燥的乙醚移入蒸馏瓶。

无水硫酸钠用乙醚洗至无色，所用乙醚也倒入蒸馏瓶，蒸去乙醚，残留物用少量己烷溶解后上氧化铝柱层析。

层析柱内径10mm，高100mm，装氧化铝量约7～8g，氧化铝粒度为100～200目。

用己烷拌和装柱。

展开剂为2%～14%的乙醚己烷液。

收集相当于β-胡萝卜素的流出部分。

蒸干后用5ml己烷溶解，在波长452nm下比色。

己烷中的β-胡萝卜素在波长452nm下的摩尔消光系数ε1%1cm=2500，即溶液的OD452为0.25时每ml含β-胡萝卜素1μg。

3注意事项3.1如测总的类胡萝卜素，则乙醚层可不经干燥蒸干处理而直接加入定量己烷溶解后直接比色。

各种类胡萝卜素的吸收峰都在波长420～480nm附近，ε1%1cm值在2200～2800左右，故一般在450nm比色以OD值为0.24时算作为每毫升含1μg类胡萝卜素。

3.2由于氧化铝的性质，含水量及吸附强度随批号不同而有差异，故对β-胡萝卜素吸附力有大有小，用什么样的比例乙醚己烷溶液以及冲洗量都要先用标准B-胡萝卜素来测定。

3.3层析法可分出多种类胡萝卜素，包括a-胡萝卜素，以及被称为叶黄素的一族化合物。

收集各个色带，测定它的吸收光谱，与已知对照便知是哪种类胡萝卜素。

根据它的摩尔消光系数计算出含量。

高效液相色谱法测定β-胡萝卜素含量

药品: 茁-胡萝卜素标准品, 购自 Biochemika Fluka; 乙腈、甲醇( 高效液相色谱淋洗剂 HPLC) , 国药集团化学试剂有限公司; 乙酸乙酯, 天津市申泰化学试剂有限公司; 丙酮, 天津市风船化学试剂科技有限公司; 乙醇, 天津市北辰方正试剂厂; 水为二次水。
1郾 2摇实验方法
胡萝卜和野核桃都是容易找到的农产品, 可以由胡萝卜和野核桃中提取茁-胡萝卜素, 从而进一步合成茁-胡萝卜素制品。该实验的目的在于探索一种成本低廉的含有茁-胡萝卜素的野资源开发利用。目前关于茁-胡萝卜素含量的测定, 可行的方法有分光光度检测法[1] 、超高效合相色谱法[2] 和超高效合相色谱 / 二极管阵列检测器测定法[3] 。本实验使用的是高效液相色
关键词: 茁-胡萝卜素; 高效液相色谱; 野核桃; 胡萝卜
摇中图分类号: 0657郾 7
摇文献标志码: A
文章编号: 1001-9677(2018)04-0104-03
Determination of 茁-carotene by High Performance Liquid Chromatography*
Symmetry C18 色谱柱 (4郾 6 mm伊250 mm, 5 滋m) , 以 60% 乙腈、 20% 乙酸乙酯、 20% 甲醇混合溶液为流动相, 在波长 450 nm, 柱温 25 益流速 1 mL / min; 进样量 10 滋L 条件进行试验。在优化实验条件下, 测得野核桃中含茁-胡萝卜素为 6郾 5 滋g / g, 胡萝卜中含茁胡萝卜素为 358郾 15 滋g / g。方法简便、快速, 适合高效液相色谱法测定植物样品中茁-胡萝卜含量。
1郾 1摇仪器及药品
仪器: KQ-400KDE 型高功率数控超声清洗器, 昆山市超声仪器有限公司; 微电脑微波化学反应器, 南京陵汇科技开发有限责任公司; AB - 204 - N 电子分析天平, Mettle - Toledo Group; 高效液相色谱仪 ( Waters 600 Controller, Waters 600 Pump, Waters 2707 Autosampler, Waters 2998 Photodiode Array Deletor ) , 美国沃特世公司。

总胡萝卜素的测定(比色法)(精)

总胡萝卜素的测定（比色法）一、原理样品通过石油醚—丙酮（1：0.5V/V）混合液萃取，使之与非类胡萝卜素成分分离，在451nm波长下测定萃取溶液的消光度，可以计算出食品中总胡萝卜素的含量。

二、材料、仪器与试剂（一）材料：胡萝卜、菠菜、油菜等。

（二）仪器：可见分光光度计、分液漏斗(150mL)、容量瓶（50mL）、量筒（100mL）、三角瓶（100mL）、研钵、铁架台、漏斗、铁圈。

（三）试剂：石油醚、丙酮、无水硫酸钠、石英砂、饱和氯化钠溶液。

三、操作步骤（一）样品处理：称取5g已捣碎混匀的样品置研钵内，加石油醚、丙酮（1:0.5）混合溶液10mL,石英砂少量，研磨提取，然后将提取液过滤至100mL三角瓶中。

如此反复提取残渣3~4次。

并过滤，直到提取液无色，将几次滤液从100mL三角瓶移至150mL 梨形分液漏斗中，并用水洗涤石油醚层，出现乳化时，加饱和NaCl溶液3~5mL，剧烈振荡，待液相分层后，弃去下层水相，重复2~3次，将石油醚层定量转移至50mL容量瓶中，用无水硫酸钠过滤，以石油醚定容，摇匀。

置暗处供比色用。

（二）测定：用1cm比色皿以石油醚作空白，在451nm波长处测定消光度。

四、计算以β-胡萝卜素含量计：E×V×100×1000×1000总胡萝卜素（μg/100g）=E1×W×100E×50×100×1000×1000=2500×W×100E= ×20000W式中：E——样品在451nm波长下消光值E1——1%β-胡萝卜素石油醚溶液在451nm波长下的消光值，即2500 V——样品中总胡萝卜素石油醚提取液定溶毫升数W——样品重量（g）。

植物叶绿素类胡萝卜素测定方法

叶绿素、类胡萝卜素含量的测定一、原理根据叶绿体色素提取液对可见光谱的吸收，利用分光光度计在某一特定波长测定其吸光度,即可用公式计算出提取液中各色素的含量。

根据朗伯—比尔定律，某有色溶液的吸光度A与其中溶质浓度C和液层厚度L成正比,即A＝αCL式中：α比例常数。

当溶液浓度以百分浓度为单位，液层厚度为1cm时，α为该物质的吸光系数.各种有色物质溶液在不同波长下的吸光系数可通过测定已知浓度的纯物质在不同波长下的吸光度而求得。

如果溶液中有数种吸光物质，则此混合液在某一波长下的总吸光度等于各组分在相应波长下吸光度的总和。

这就是吸光度的加和性。

今欲测定叶绿体色素混合提取液中叶绿素a、b和类胡萝卜素的含量,只需测定该提取液在三个特定波长下的吸光度A，并根据叶绿素a、b 及类胡萝卜素在该波长下的吸光系数即可求出其浓度。

在测定叶绿素a、b时为了排除类胡萝卜素的干扰,所用单色光的波长选择叶绿素在红光区的最大吸收峰。

二、材料、仪器设备及试剂（一）材料：新鲜（或烘干）的植物叶片。

（二）仪器设备：1)分光光度计；2）电子顶载天平（感量0.01g）；3)研钵;4）棕色容量瓶; 5）小漏斗；6）定量滤纸;7）吸水纸；8)擦境纸；9)滴管.（三）试剂：1）95%乙醇（或80％丙酮)（v丙酮:v乙醇=2:1的95％水溶液）；2)石英砂;3)碳酸钙粉.暗中2h,0.5g，25ml三、实验步骤1)取新鲜植物叶片（或其它绿色组织)或干材料，擦净组织表面污物，剪碎(去掉中脉）,混匀.2)将取好的样品放入25ml容量瓶中，加混合浸提液（无水乙醇:丙酮=5：5）20ml，放在黑暗条件下，浸泡至叶片发白,用浸提试剂定容至25ml，摇匀备用。

3)把叶绿体色素提取液倒入1cm光径的比色皿内,以浸提试剂为空白测定吸光度。

选择波长663 646 和470nm.四、实验结果计算叶绿素a的浓度 = 12.21 ⨯ OD633 – 2。

81 ⨯ OD646叶绿素b的浓度 = 20.13 ⨯ OD646– 5。

胡萝卜素含量的测定

1、理解高效液相色谱法的目的和意义； 2、理解和掌握高效液相色谱法的原理和方法； 3、掌握高效液相色谱仪的操作。
2、实验原理
高效液相色谱仪的组成与工作主要流程ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ下图所示：
β-胡萝卜素含量测定原理
β-胡萝卜素为脂溶性维生素A的前体，存在于各种动植物体内，可以直接用有机溶剂提取后进行检测，然后利用反相色谱法分析。
• V1：样品进样质量（μL）；
• V2：样品定容体积（mL）。
实验注意事项
• 1、样品的预处理； • 2、流动相的过滤脱气处理； • 3、色谱条件的选择。
思考题：
• 1、高效液相色谱仪的组成与工作主要流程？
• 2、高效液相色谱的特点？ • 3、进行高效液相色谱仪检测β-胡萝卜素
时要对待测样品进行哪些预处理？ • 4、色谱图中β-胡萝卜素吸收峰峰高、峰
装入进样瓶中。
5、实验结果和计算
• HPLC外标法定量
m m1 A2 V 2 10 m2 A1V 1
• 式中 m：10g(mL)样品中β-胡萝卜素含量（mg）；
• m1：标样进样体积中β-胡萝卜素含量（mg）；
• m2：样品称样质量（g或mL）；
• A1：标样峰面积值；
• A2：样品峰面积；
（2）样品的制备：取样品，捣碎成浆状，称取10g，加甲醇、正己烷各10ml研磨。过滤后，滤液以及用乙酸乙酯洗涤渣的滤液一并接收在三角瓶中，提取液放入100ml棕色容量瓶中，乙酸乙酯定容到100ml。
色谱条件
• 色谱柱：C18柱； • 流动相：甲醇； • 流速：1.5ml/min； • 紫外检测波长：440nm； • 进样量：20微升。 • 样品进样前需要用0.45微米的滤膜过滤，