浙科版高中生物选修1《植物的组织培养》导学案

实验11 植物的组织培养

【学习目标】

1.说明植物组织培养的基本原理。

2.学习植物组织培养的基本技术。

3.进行菊花的组织培养，尝试植物激素的应用。

【教学重点】

1.植物组织培养的相关概念和过程

2.影响植物组织培养的因素

3.植物组织培养过程中使用的无菌技术。

【教学难点】

1.影响植物组织培养的因素。

2.植物组织培养过程中使用的无菌技术。

【诱学导思】

一、植物组织培养的相关概念和基本过程

1.植物组织培养的相关概念

（1）细胞分化：植物的个体发育过程中，细胞在__________、__________和__________上都会出现稳定性的差异，形成这些差异的过程就叫做细胞分化。细胞分化是基因__________的结果。

（2）细胞的全能性：__________的植物细胞仍然具有发育成为__________的潜能。细胞全能性是组织培养的基本原理。

（3）愈伤组织：由离体的植物器官、组织或细胞在一定的培养条件下经过__________过程形成的组织，就叫愈伤组织，愈伤组织的细胞排列疏松而无规则，是一种__________的呈无定形状态的__________。

（4）脱分化：由__________的植物组织或细胞产生__________的过程，称为脱分化，又叫去分化。

（5）再分化：脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成

__________，这个过程叫做再分化。

（6）外植体：用于离体培养的植物器官或组织片段。

二、影响植物组织培养的因素

1.内部因素：不同的植物组织，培养的难易程度差别很大。同种植物材料，__________ ，__________ 等也会影响实验结果。菊花的组织培养，一般选择__________的茎上部新萌生的侧枝。

2.外部因素：（1）营养条件常用的是__________ 培养基，其主要成分包括：__________，如_____________________________；__________ ，如

___________；__________ 等。

（2）植物激素中__________ 和__________ 是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性因素。____________________、____________________ 以及

__________等，都会影响实验结果。

（3）环境因素__________ 、__________ 、__________等条件也能影响植物组织培养。菊花组织培养，一般PH控制在__________ ；温度控制在

__________ ；每天用日光灯照射__________小时。

【思考】（1）MS培养基中，各种营养成分各有什么作用？与微生物培养基的配方相比，有什么不同?

（2）生长素使用的先后顺序、用量比例不同分别会造成哪些影响？

三、实验操作过程

1.制备MS固体培养基

实验室一般使用4℃保存的配制好的培养基母液来制备

（1）配制各种母液。

配制母液时，大量元素浓缩__________ ，微量元素浓缩__________ 。常温保存。激素类、维生素类以及用量比较小的有机物可以按照1mg/ml的质量浓度单独配制母液。用母液配制培养基时，需要根据各种母液的浓缩倍数，计算用量。

（2）配制培养基。

（3）灭菌。高压蒸汽灭菌

2.接种

接种前，用体积分数70%的酒精将工作台擦拭，然后点燃酒精灯。所有的接种操作必须在酒精灯旁进行，并且每次使用器械后，都要用火焰灼烧灭菌

3.培养

接种后的锥形瓶最好放在__________中培养。培养期间定期消毒，温度控制在18-25 ℃，并且每天用日光灯光照14.5 h

4.移栽

5.栽培

附：一般来说，容易进行__________的植物，也容易进行组织培养。

【思考】：（1）实验操作过程中为什么要进行一系列的消毒、灭菌，实验中是如何做到无菌操作的？

（2）你打算做几组重复？你打算设置对照实验吗？

【练习题】

1.下面有关细胞分化的叙述不正确的是（）

A.细胞分化发生在生物体的整个生命过程中

B.细胞分化仅发生在胚胎时期

C.经过细胞分化会形成各种不同的细胞和组织

D.细胞分化是一种持久的变化。

2.关于细胞分化的叙述，下列哪一项是错误的（）

A.细胞分化是一种持久的变化，它发生在生物体的整个生命过程

B.细胞分化在胚胎时期达到最大限度

C.随着分化的进行，细胞中的遗传物质的种类会发生变化

D.高度分化的动物细胞的细胞核保持着全能性

3.在外植体脱分化形成愈伤组织的过程中，下列哪个条件是不需要的（）

A.消毒灭菌

B.适宜的温度

C.充足的光照

D.适宜的养料和激素

4.在植物组织培养过程中，愈伤组织的形成和形态发生是十分关键的一步。而这除需要必备的营养和一些刺激因素外，还需要起诱导作用的物质，其中包括（）

A.铜、锌等微量元素

B.细胞分裂素和生长素

C.蔗糖和葡萄糖

D.维生素和氨基酸

5.MS培养基与微生物培养基相比，不同的是（）

A.MS培养基不含有机物

B.微生物培养基以有机物为主

C.MS培养基不含微量元素

D.MS培养基需提供大量无机营养

6.当先使用细胞分裂素，后使用生长素时，实验结果：（）

A.有利于细胞分裂，但细胞不分化

B.细胞既分裂又分化

C.分化频率高

D.有利分化，但不分裂

7.下列那组符合菊花组织培养的基本步骤（）

A.制备MS培养基→ 外植体消毒→ 接种→ 培养→ 移栽→ 栽培

B.制备MS培养基→ 外植体消毒→ 接种→ 培养→ 栽培→ 移栽

C.制备MS培养基→ 外植体消毒→ 接种→ 栽培→ 培养→ 移栽

D.制备MS培养基→ 外植体消毒→ 接种→ 移栽→ 培养→ 栽培

8.植物组织培养技术的理论基础之一是（）

A.植物细胞的完整性

B.植物细胞的多样性

C.植物细胞的全能性

D.植物细胞杂交

9.某园艺场经过长期精心选育，培养出一株形态优美的兰花，如果要保持母本的优良性状，并尽快大规模繁殖，最适合的繁殖方式是（）

A.分裂生殖

B.有性生殖

C.孢子生殖

D.组织培养

10.某株名贵花卉用种子繁殖会发生性状分离。为了防止性状分离并快速繁殖，可以利用该植株的一部分器官或组织进行离体培养，发育出完整的植株。进行离体培养时不应采用该株（）

A.茎尖

B.子房壁

C.叶片

D.花粉粒