细菌的分布、消毒和灭菌
细菌的生理分布消毒灭菌
❖ 高压蒸汽灭菌法
在高压蒸汽灭菌器里进行,在蒸汽不外溢得情况下,随 着灭菌器压力得增高,温度液逐渐上升。适用于耐高 温、不怕潮湿得物品灭菌,如基础培养基手术器械。 121、3℃, 15-30分钟 最常用、最有效
间接灭菌法
100℃加热30分钟(杀死繁殖体,为杀死芽孢)后37℃温 箱过夜(芽孢繁殖),再于100℃加热30分钟,重复3次, 可达灭菌效果。适用于不耐高温得物品,如含有糖,鸡 蛋,血清得培养基。
细菌在培养基中得生长现象
1、液体培养基:
菌膜生长 混浊生长 沉淀生长
枯草芽胞菌 大多数细菌 链球菌
菌膜生长
混浊生长
沉淀生长
2、 固体培养基:
菌落 菌苔
菌落
菌苔
3、半固体培养基:
无鞭毛
有鞭毛
大家有疑问的，可以询问和交流
可以互相讨论下，但要小声点
培养基得用途
❖ 液体培养基:增菌 ❖ 固体培养基:纯化,增菌 ❖ 半固体培养基:动力检测,保种
氧化、蛋白酶变性 蛋白变性,细胞膜损伤 干扰氧化、抑制繁殖 破坏膜、壁,蛋白凝固 蛋白质、核酸烷基化
常用种类 石炭酸 乙醇 高锰酸钾、过氧乙 酸、碘酒
红汞、硫柳汞 新洁而灭 龙胆紫 醋酸、生石灰 环氧乙烷
电辐射
超声波
(1)热力灭菌 高温加热
干热灭菌法
热空气为导热介质
焚烧 烧灼 干烤(160~170℃/2h) 红外线
湿热灭菌法
高温得水或水 蒸气为导热介质
巴氏消毒法 低温、营养成分不被破坏 煮沸法 流动蒸气消毒法 间歇蒸气灭菌法 高压蒸气灭菌法
同一温度下,湿热比干热效果好
穿透力、受热均匀、水分多蛋白易变性,潜热
第三节 细菌得分布与消毒灭菌
细菌的分布消毒和灭菌
细菌的分布消毒和灭菌 SANY标准化小组 #QS8QHH-HHGX8Q8-GNHHJ8-HHMHGN#实验报告课程名称： 医学微生物学 指导老师：________________成绩：__________________实验名称： 细菌的分布、消毒和灭菌 实验类型：_______________同组学生姓名：_____ _____一、 实验目的1. 了解细菌广泛分布于自然界及正常人体，树立“有菌观念”，从而认识无菌操作对于微生物学及医学实践的重要性。
2. 了解正常人体中寄居着种类繁多的细菌，正常情况下不引起人类疾病，称为正常菌群。
熟悉外界因素对细菌的影响，掌握常用的消毒和灭菌方法 3. 观察细菌鞭毛的变异4. 熟悉生物因素对细菌的作用 二、 实验材料三、 普通琼脂平板培养基、大肠杆菌肉汤培养液、枯草杆菌肉汤培养液、无菌毛细吸管、肉汤培养基管、电炉、锅子、高压灭菌器、接种环、酒精灯、紫外线灯、大肠杆菌培养物四、 操作方法1. 细菌的分布1) 空气中的细菌(8人一组)2) 取普通琼脂平板一个，打开盖暴露于空气中约15-30分钟，然后盖好，放37℃温箱孵育24小时后观察结果，计算有多少个菌落。
3) 手指皮肤上的细菌(8人一组)4) 用手指直接涂于普通琼指平板上，放37℃温箱孵育，24小时后观察结果，记录有多少种不同特征的菌落。
2. 消毒和灭菌1) 煮沸与高压灭菌法(2人一组)2) ●菌液：大肠杆菌/枯草杆菌3) ●甲组：煮沸（100℃，5min ）4) ●乙组：高压灭菌法（121 ℃，20min ） 5) ●丙组：不作任何加热处理6) 紫外线灭菌(8人一组) 图1 图1① 以灭菌接种环挑取大肠埃希菌培养物，于琼脂平板上作来回密集划线接种。
② 半启皿盖(将皿盖遮住涂面的1／2)，置于紫外线灯下lm 以内接受照射30分钟。
③ 盖上皿盖，于37℃培养24小时后观察结果。
3. 抗生素的抗菌试验 图24. ●菌株：金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大肠杆菌1号、2号 5. 示教抑菌圈uv30’培养箱1) 化学消毒剂对细菌的影响 2) ●观察抑菌圈3) 细菌鞭毛的变异 %石炭酸 图2 迁徙生长（H ）变形杆菌 点状生长、单个菌落（O ） 五、 实验结果1. 细菌分布的实验结果表1细菌分布的实验结果检查材料 空气手指细菌生长情况菌落个数平板培养基表面或多或少有菌落生长。
实验三 细菌的分布消毒和灭菌ppt实用资料
掌握常用的消毒和灭菌方法
菌株：金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌
化学消毒对细菌的影响
乙组：高压灭菌法（121 ℃，20min）
化学消毒剂对细菌的影响
紫外线灭菌(8人一组)
掌握常用的消毒和灭菌方法
抑菌圈
鞭毛变异
变形杆菌
迁徙生长（H）
0.1%石炭酸 点状生长、单个菌落（O）
接种大 肠杆菌
班级、姓名/学号、 大肠 枯草
uv30’
培养箱
接种枯 草杆菌
抗生素的抗菌试验
• 4人一组 • 菌株：金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌
菌株：金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌
大肠杆菌1号、2号 丙组：不作任何加热处理
故紫外线常用于手术室、无菌室的空气消毒及物体表面消毒
• 密集划线 化学消毒剂对细菌的影响
• 观察细菌鞭毛的变异 • 熟悉生物因素对细菌的作用
空气中细菌的检查
• 取普通琼脂平板一个，打开盖暴露于 空气中约15-30分钟，然后盖好，放 37℃温箱孵育24小时后观察结果，计 算有多少个菌落。
手指细菌的检查
• 用手指直接涂于普通琼指平板上，放37℃ 温箱孵育，24小时后观察结果，记录有多 少种不同特征的菌落。
煮沸与高压灭菌法
• 2人一组 • 菌液：大肠杆菌/枯草杆菌 • 甲组：煮沸（100℃，5min） • 乙组：高压灭菌法（121 ℃，20min） • 丙组：不作任何加热处理
细菌分布与消毒灭菌实验报告
细菌分布与消毒灭菌实验报告一、实验目的本实验旨在探究不同环境下细菌的分布情况，并利用不同的消毒灭菌方法进行对比实验，以了解细菌在不同环境下的分布情况及不同消毒灭菌方法的效果。
二、实验材料与方法1. 实验材料- 实验室培养基- 培养皿- 取样棉签- 75%酒精- 进口细菌培养基- 紫外线消毒仪- 温度控制箱2. 实验方法a. 取样在实验室内外各选取5个不同环境的位置，如洗手间、桌面、空气、水龙头等，用棉签进行取样，并分别划线涂抹于培养皿中。
然后在同一位置同时用另一根消毒过的棉签进行擦拭，作为对照组。
b. 培养将涂抹过的培养皿置于37摄氏度的温度控制箱中进行培养。
c. 观察观察培养皿中细菌的产生情况，记录细菌的数量和分布情况。
d. 消毒灭菌将消毒液涂抹于部分培养皿中，将部分培养皿放置于紫外线消毒仪中进行消毒处理。
e. 对比观察对消毒前后的培养皿进行数量和分布情况的观察，比较不同消毒方法对细菌的杀灭效果。
三、实验结果实验结果显示，在不同环境下取样可观察到细菌培养的差异性，如洗手间细菌数量较高，空气中细菌数量较低。
对比消毒灭菌后的培养皿发现，75%酒精对大部分细菌具有杀灭效果，紫外线消毒亦能显著减少培养皿中细菌的数量。
四、实验分析由实验结果可知，细菌的分布受环境因素影响较大，不同环境下细菌数量和多样性存在明显差异。
消毒方法对细菌的杀灭效果也存在显著差异，不同环境和细菌种类可能需要采用不同的消毒方法。
五、实验结论本实验通过对细菌分布与消毒灭菌的对比研究，揭示了细菌在不同环境下的分布情况和不同消毒方法的杀灭效果。
实验结果为环境卫生管理和细菌防控提供了重要的参考依据，也为细菌学研究提供了新的思路和方法。
六、实验意义本实验结果为加强环境卫生管理提供了科学依据，为制订合理的消毒措施提供了重要参考。
也为细菌分布与消毒灭菌领域的研究提供了新的视角和方法，具有一定的理论和实际价值。
本实验通过对细菌分布与消毒灭菌的研究，为我们深入了解细菌在不同环境下的分布特点和不同消毒方法的效果提供了重要的条件和数据支持。
细菌的分布与消毒灭菌优秀课件
第一节 细菌的分布
• 土壤:多为非病原菌,能形成芽胞的可存活数年。 • 水：来自土壤和动物排泄物，易引起消化系统
传染病。 • 空气：唾液、飞沫传染。人口密集的公共场所
或医院细菌种类和数量多，注意消毒。 • 无生命物体的表面和与外界相通的腔道中 • 正常人体：有生命物体的表面和与外界相通的
• 电离辐射
高速电子、X射线、γ射线
• 微波 波长1mm~1m
（三）滤过除菌法
• 滤过除菌法：用物理阻留的方 法将液体或空气中的细菌去除 以达到无菌的目的。主要用于 不耐高温的血清、抗毒素、抗 生素、药液等的除菌。
• 滤菌器：效能与滤孔大小、滤 器电荷有关
二 化学消毒灭菌法
➢消毒剂的种类：酚类、醇类、重金属盐类、
操作技术。
一 物理消毒灭菌法
➢热力灭菌法 ➢辐射杀菌法 ➢滤过除菌法
㈠物理消毒灭菌法
• 1、热力灭菌法
巴氏消毒法 湿热灭菌法煮沸法
流通蒸汽法(间歇灭菌法) 高压蒸汽灭菌法 121℃,103.4kPa,15-30分钟
焚烧 干热灭菌法 烧灼
干烤（160~170℃/2h）
同一温度下,湿热比干热效果好
巴氏消毒法:用较低温度杀灭液 体中的病原菌或特定微生物， 而仍保持物品中所需的不耐热 成分不被破坏的消毒方法。
正常菌群与条件致病菌
❖ 正常菌群：正常人体的体表以及与外界相通的腔 道黏膜上广泛存在着不同种类和一定数量的细菌。 这些细菌通常对人体是无害的，称为正常菌群。
❖ 正常菌群的生理学意义： 生物拮抗作用 营养作用 免疫作用 抗衰老作用
表皮葡萄球菌
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ件致病菌
▪ 寄居在人体一定部位的正常菌群相对稳定，但在特定
细菌的分布与消毒灭菌
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抗衰老作用 产生抗氧化损伤的生物酶， 保护组织细胞免受损害
抗肿瘤作用
通过将某些致癌物质转化为 无害物质或通过激活巨噬细 胞发挥免疫功能抑制肿瘤
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（二）条件致病菌
概念：寄居在人体一定部位的正常菌群相 对稳定，正常情况下不表现致病作用，只 有当机体免疫力降低、寄居部位改变或菌 群失调时方可致病。这些在特定条件下能 够引起疾病的正常菌群称为条件致病菌。
杀菌机理：
诱导了胸腺嘧啶二聚体的形成 和 DNA 链 的 交 联 ， 从 而 抑 制 了 DNA的复制
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特点：
紫外线穿透力较弱，对皮 肤、眼睛有损伤
应用范围：
•空气消毒 •手术室、传染病房、细菌实验室 •不耐热物品的表面消毒
紫外线灯距离照射物以不超过2 m为宜。
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湿热灭菌法
4. 超高温杀菌 ：135～150℃和 2～8s
对牛乳或其他液态食品（如果汁及果汁 饮料、豆乳、茶、酒及矿泉水等）
最大优点是既能杀死产品中的微生物， 又能较好地保持食品品质与营养价值。
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同一温度下湿热比干热灭菌好的原因：
我国规定饮用水的标准为1ml水中 的细菌总数不超过100个,1000ml水中 大肠埃希菌不超过3个.
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空气:空气中的细菌来源于人蓄 呼吸道的飞沫及飘扬起来的尘埃,受 日光紫外线的照射细菌不易繁殖.人 口聚集的地方数量较多,常见的病院 菌有金黄色葡萄球菌.链球菌.结核分 枝杆菌.白喉棒状杆菌及脑膜炎奈瑟 菌等,可引起伤口或呼吸道的感染.
细菌的分布、消毒灭菌
(二) 机会致病菌和医源性感染
(opportunist and nosocomial infection)
机会致病菌：opportunist
医源性感染：nosocomial infection
正常菌群(normal flora) Colonization: 人的皮肤表面： 1012 ， 口腔： 1010 ， 胃肠道：1014
口腔正常菌群的形成： 1. 出生时无菌，随着母亲的第一次喂食，细菌
开始定居; 2. 在出牙之前（6-9月），Streptococcus salivarius
为优势菌，占98%； 3. 随着出牙， S. mutans 和 S. Sanguis（血）
开始定居，厌养菌定居于牙垠与牙根的空隙 中，口腔菌群趋于复杂。 4. 到青春期，类杆菌及螺旋体开始定居
口腔正常菌群的作用： 1． 占领口腔，使其它微生物不能定居 2． 合成营养物质 3． 刺激交叉抗病原体免疫 4． 产生细菌素、脂肪酸、过氧化物
佶抗细菌
正常菌群与宿主的生态关系
(Ecologic relationship) 1. 共生 synbiosis
病源与非病源的微生物及芽胞。 灭菌后的物品为无菌(asepsis)状态。
防腐(antisepsis)─ 用物理或化学的方法防止和抑制
微生物 的生长繁殖, 称为防腐或抑菌。
消毒剂与防腐剂的区别在于tics： microbicidal 但必须对皮肤及黏膜无害 Preservatives： static agents 通常用于食物，食入无毒。 Disinfectants： Microbicidal 不一定杀芽孢。
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2.水中的细菌
(1)水体中微生物的来源 土壤、空气、动植物尸体、人和动物的排泻物、工业及
生活污水。
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ(2)水体中的病原微生物 通过水体传播的病原微生物主要有沙门氏菌属、志贺氏
菌属、霍乱弧菌等。可引起消化系统传染病，甚至爆发流行。
因此，做好水的卫生学检查对预防疾病至关重要。
3.空气中的细菌
（1）空气中缺乏营养物质与水分，且受日光照射，细菌不易繁殖。 （2）但由于人群和各种动物的呼吸道及口腔中的细菌可随唾液、
。
抹布和砧板上的 细菌模式图
针头上的细菌模式图
第一节 细菌的分布
一、细菌在自然界的分布 二、人体正常菌群及分布
一、细菌在自然界中的分布
1.土壤中的细菌
☆ 土壤是细菌生存的天然场所（因为土壤中有水分、营养物 质、空气、一定的PH环境和温度）。
☆ 自然界中，以土壤的含菌量（种类）最多，土壤素有“天 然培养基”之称。
{ 消毒（disinfection）：杀死物体上病原微生物的方法，
但不一定杀死细菌芽胞。 { 灭菌（sterilization）：杀死物体上包括芽胞在内的所 有病原性和非病原性微生物的方法。 { 防腐（antisepsis）：防止或抑制细菌生长繁殖的方法， 细菌一般不死亡。 { 无菌（asepsis）：不含活菌的意思。防止微生物进入机 体或物体的操作方法，称为无菌操作或无菌技术。进行微生 物实验、外科手术及医疗技术操作等过程，均需进行严格的 无菌操作。
{煮沸法：水温100℃经5分钟可杀死细菌繁殖体，常用 于食具、刀剪、注射器等的消毒，细菌芽胞需煮沸1～ 2小时才被杀灭。水中加入2%碳酸氢钠，可使沸点达 105℃，既可促进杀灭芽胞，又能防止金属器械生锈。
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实验报告
课程名称： 医学微生物学 指导老师：________________成绩：__________________ 实验名称： 细菌的分布、消毒和灭菌 实验类型：_______________同组学生姓名：_____ _____
一、实验目的
1. 了解细菌广泛分布于自然界及正常人体，树立“有菌观念”，从而认识无菌操作对于微生物学及
医学实践的重要性。
2. 了解正常人体中寄居着种类繁多的细菌，正常情况下不引起人类疾病，称为正常菌群。
熟悉外界
因素对细菌的影响，掌握常用的消毒和灭菌方法 3. 观察细菌鞭毛的变异
4. 熟悉生物因素对细菌的作用 二、实验材料
三、普通琼脂平板培养基、大肠杆菌肉汤培养液、枯草杆菌肉汤培养液、无菌毛细吸管、肉汤培养基管、
电炉、锅子、高压灭菌器、接种环、酒精灯、紫外线灯、大肠杆菌培养物 四、操作方法
1. 细菌的分布
1) 空气中的细菌(8人一组)
2) 取普通琼脂平板一个，打开盖暴露于空气中约15-30分钟，然后盖好，放37℃温箱孵育24
小时后观察结果，计算有多少个菌落。
3) 手指皮肤上的细菌(8人一组)
4) 用手指直接涂于普通琼指平板上，放37℃温箱孵育，24小时后观察结果，记录有多少种不
同特征的菌落。
2. 消毒和灭菌
1) 煮沸与高压灭菌法(2人一组)
2) ●菌液：大肠杆菌/枯草杆菌 3) ●甲组：煮沸（100℃，5min ）
4) ●乙组：高压灭菌法（121 ℃，20min ） 5) ●丙组：不作任何加热处理
6) 紫外线灭菌(8人一组) 图1 图1
① 以灭菌接种环挑取大肠埃希菌培养物，于琼脂平板上作来回密集划线接种。
② 半启皿盖(将皿盖遮住涂面的1／2)，置于紫外线灯下lm 以内接受照射30分钟。
③ 盖上皿盖，于37℃培养24小时后观察结果。
3. 抗生素的抗菌试验 图2
4. ●菌株：金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大肠杆菌1号、2号
5. 示教
1) 化学消毒剂对细菌的影响
2) ●观察抑菌圈
3) 细菌鞭毛的变异
0.1%石炭酸 图2 迁徙生长（H ） 变形杆菌 点状生长、单个菌落（O ）
抑菌圈uv30’
培养箱
五、实验结果
1.细菌分布的实验结果
表1细菌分布的实验结果
检查材料空气手指
细菌生长情况菌落个数平板培养基表面或多或少
有菌落生长。
培养基表面涂抹处
有菌落生长。
2.消毒和灭菌实验结果
表2煮沸和高压灭菌实验结果
细菌名称甲组 100℃ 5分钟乙组 121℃ 20分钟丙组未加热(对照)
枯草芽胞杆菌混浊澄清混浊
大肠埃希菌澄清澄清混浊
3.紫外线灭菌结果
平板上用皿盖遮盖部分的琼脂表面有灰白色菌苔生长，而未遮盖暴露于紫外线部分无菌生长。
说明紫外线具有灭菌作用，但穿透力弱。
4.化学消毒剂对细菌的影响实验结果
表3 化学消毒剂对细菌的影响
5.细菌鞭毛的变异
0.1%石炭酸培养基上变形杆菌只在点种处生长，而在普通培养基上变形杆菌呈迁徙性生长。
六、结果分析
1.细菌广泛分布于自然界及正常人体。
2.高温对细菌有明显的致死作用，主要机制是凝固菌体蛋白质，也可能与细菌DNA单螺旋断裂、
细菌细胞膜功能受损及菌体内电解质浓缩有关。
高压蒸气灭菌，因增加压力而提高沸点，灭菌效果最佳。
有芽胞的细菌由于对热的抵抗力比无芽胞细菌强，所以只有采用高压蒸气灭菌法才能将芽胞彻底杀灭。
本实验中大肠杆菌无芽孢结构，沸水即可杀灭，而枯草芽孢杆菌具芽孢结构，普通沸水杀不死芽孢，需要使用高压蒸汽灭菌。
3.波长240nm~280nm的紫外线，因与DNA吸收光谱一致，而具有明显的杀菌作用。
其机制是使细
菌DNA链中两个相邻的胸腺嘧啶形成二聚体，从而破坏DNA构型，干扰其正常复制，导致细菌死亡。
本实验中暴露于紫外线的培养基中无菌生长被杀灭，而未暴露的菌可以生长实验支持理论。
4.从表3可知不同化学剂对同种细菌产生的抑制作用不同，不同菌种对同种化学消毒剂的反应也存
在差异。
5.普通培养基中的菌落呈现扩布式，可知菌体具有鞭毛，能够移动，另外对比发现0.1%石炭酸能够
抑制该菌的生长。
七、讨论心得
1.在正常人身体的皮肤、毛发以及与外界相通的器官中都存在着—定数量的微生物。
在正常情况下，
它们对人体是有益而无害的，称为正常菌群。
机体正常寄居的微生物是互相依存，互相制约的，保持着动态平衡，与人体之间表现为互生关系。
2.高压蒸汽灭菌在实验室是最常用、最有效的灭菌方法。
3.利用紫外线杀菌限于物体表面的杀菌，比较有效，但对内部效果不佳。
4.实验中新洁尔灭属季铵盐类消毒剂，它是一种阳离子表面活性剂，在消毒学分类上属低效消毒剂。
其杀菌作用机制主要有：①改变细胞的渗透性，使细菌破裂；②使蛋白质变性；③抑制细菌体内某些酶，使之失去活性；④因其有良好的表面活性，可高浓度聚集于菌体表面，影响细胞的新陈代谢。
5.一个理想的化学消毒剂，应具备以下几个特点：（1）杀菌谱广；（2）使用有效浓度低；（3）
杀菌作用速度快；（4）性能稳定；（5）易溶于水；（6）可在低温下使用；（7）不易受各种物理化学因素影响；（8）对物品无腐蚀性；（9）无臭无味，无色；（10）毒性低，消毒后无残留毒害；（11）使用安全，不易燃烧；（12）价格低廉；（13）运输方便；（14）可大量生产供应。
目前的化学消毒剂中，没有一种能够完全符合上述要求的。
因此在使用中，只能根据被消毒物品性质、工作需要及化学消毒剂的性能来选择使用某种消毒剂。
6.实验要有效率必须在实验开始前对实验大体步骤了如指掌从而合理安排实验顺序达到不浪费时
间而且保证实验顺利快速进行。
7.。