秋水仙素诱导大葱多倍体的研究

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ａｆｔｅｒｔｒａｎｓｐｌａｎｔｉｎｇ．Ｂｙｔｉｓｓｕｅｃｕｌｔｕｒｅｗｅｏｂｔａｉｎｅｄｔｅｔｒａｐｌｏｉｄｓ．Ｔｈｅｃｈｏｒｏｍｏｓｏｍｅｎｕｍｂｅｒｏｆｔｅｔｒａｐｌｏｉｄｓｗａｓ
摘
要：以章丘大葱种子为材料，研究了秋水仙素处理浓度和时间对大葱体细胞染色体加倍的效果，
并利用形态观察，根尖细胞染色体计数及流式细胞仪等方法进行倍性鉴定。结果表明，０．８％秋水仙素处理４８ｈ的诱变效果最佳。诱变植株存在明显 “ 玻璃化 ”现象，生根困难，移栽后不能成活。通过组织培养去 “ 玻璃化 ” ，获得正常生长的四倍体植株。四倍体植株的细胞染色体数２ｎ＝４ｘ＝３２，植株多倍体形态
１２期
董
飞等：秋水仙素诱导大葱多倍体的研究
１．４形态学观察
将经组织培养获得的组培苗进行驯化移栽，首先在组培室内打开组培瓶盖驯化培养３ｄ，然后将幼苗小心的用镊子取出，用水将根基部的培养基冲洗干净，移栽到经高温灭菌的基质中，直至幼苗成活。在组培苗移栽至基质中４０ｄ后，以正常二倍体植株为对照，比较多倍体与正常二倍体植株的生长势、叶色、株高、单株质量、葱白长度、葱白直径、最大管状叶长度、最大管状叶直径等性状
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅｗｅｌｓｈｏｎｉｏｎｓｅｅｄｓｗｅｒｅ仃ｅａｔｅｄｗｉｔｈｃｏｌｃｈｉｃｉｎｅｓａｔｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎａｎｄ
园
艺
学
报
２０１１，３８（１２）：２３８１ — ２３８６
ｈｔｔｐ：／／ Ⅵ ｎ）
ａｈｓ．ａｃ．ｃａ
ＡｃｔａＨｏｒｎｃｕｌｔｕｒａｅＳｉｎｉｃａ
Ｅ — ｍａｉｌ：ｙｕａｎｙｉｘｕｅｂａｏ＠１２６．ｃｏｍ
特征明显，植株生长健壮，叶色浓绿，叶面气孔变大，气孔密度减少；株高、葱白长度等与二倍体植株
相比极显著增加。
关键词：大葱；秋水仙素；四倍体诱导；鉴定
中图分类号：Ｓ６３３．１
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
文献标识码；Ａ
文章编号：０５１３．３５３Ｘ（２０ｌ１）１２．２３８１ — ０６
２ｎ＝４ｘ＝３２，ｔｈｅｐｌａｎｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈｅｇｅｎｅｒａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆｔｅｔｒａｐｌｏｉｄｓ，ｓｕｃｈａｓｄａｒｋｅｒｌｅａｆｃｏｌｏｒ，ｌａｒｇｅｒｓｔｏｍａｔａ，ｆｅｗｅｒｓｔｏｍａｔａｐｅｒｕｎｉｔａｒｅａ．Ｃｏｍｐａｒｉｎｇｔｈｅｐｌａｎｔｈｅｉｇｈｔａｎｄｗｅｌｓｈｏｎｉｏｎｓｔａｌｋｌｅｎｇｔｈ，ｔｈｅｒｅｗｅｒｅ
ａｎｄｌｆｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ．ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｂｅｓｔｅｆｅｃｔｗａｓｏｂｔａｉｎｅｄｂｙｔｈｅｔｒｅａｍｅｔｎｔｏｆＯ．８％ｃｏｌｃｈｉｃｉｎｅｓｗｉｔｈ４８ｈｏｕｒｓ．Ｔｈｅｍｕｔａｔｅｄｐｌａｎｔｓｗｅｇｏｔｗｅｒｅｖｉｒｔｅｏｕｓｓｅｅｄｌｉｎｇｓ，ｔｈｅｙｃｏｕｌｄｎｏｔｓｕｒｖｉｖｅ
裹１秋水仙素不同浓度和处理时间对大葱种子的诱变效应
Ｔａｂｌｅ１Ｔｈｅｉｎｄｕｃｔｉｏｎｅｆｆｅｃｔｏｆｃｏｌｃｈｉｃｉｎｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎａｎｄｄｕｒａｔｉｏｎｏｎｗｅｌｓｈｏｎｉｏｎｓｅｅｄｓ
ｒｅｍａｒｋａｂｌｅｄｉｆｅｒｅｎｃｅｂｅｔｗｅｅｎｔｅｔｒａｐｌｏｉｄｓａｎｄｔｈｅｃｏｎｒｔｏ１．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｗｅｌｓｈｏｎｉｏｎ；ｃｏｌｃｈｉｃｉｎｅ；ｔｅｔｒａｐｌｏｉｄｉｎｄｕｃｔｉｏｎ；ｉｄｅｎｔｉｉｃｆａｔｉｏｎ
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ＣｏｌｃｈｉｃｉｎｅｓＩｎｄｕｃｅｄＰｏｌｙｐｌｏｉｄＰｌａｎｔｓａｎｄＩｄｅｎｔｉｉｃｆａｔｉｏｎｉｎＷｅｌｓｈＯｎｉｏｎ
ＤＯＮＧＦｅｉ，ＣＨＥＮＹｕｎ— ｑｉ２，ＬＩＵＳｈｉ — ｑｉ，ＧＡＯＬｉ — ｍｉｎ２，ＷＡＮＧＣｈｕａｎｚｅｎｇ，ａｎｄＣＨＥＮＷｅｉ２
差异。
１．５叶面气子Ｌ观察
用镊子撕取大葱植株基部向上第３叶片的外表皮置于载玻片上，滴上蒸馏水，于４Ｏ倍显微镜下观察气孔的大小和数量。
１．６倍性鉴定
染色体数的鉴定采用宗红（２００７）的方法，每株取根数总量的１／２为观察试材，进行根尖染色体鉴定。叶细胞ＤＮＡ相对含量测定采用Ｅｎｄａｎｇ和Ｙｏｓｕｋｅ（２００３）的方法，用ＰＡ流式细胞仪测定变异植株和正常二倍体植株细胞ＤＮＡ的相对含量。
秋水仙素诱导大葱多倍体的研究
董飞，陈运起２，，刘世琦，高莉敏２，王传增，陈伟２
（山东农业大学园艺科学与工程学院，山东泰安２７１０１８；。山东省农业科学院蔬菜研究所／山东省设施蔬菜生物学重点实验室／国家蔬菜改良中心山东分中心，济南２５０１００）
ｔｒｅａｔｍｅｎｔｔｉｍｅｄｕｒａｔｉｏｎ，ａｎｄｔｈｅｐｌｏｉｄｙｌｅｖｅｌｗａｓｉｄｅｎｔｉｉｆｅｄｂｙｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌｔｒａｉｔ，ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｎｕｍｂｅｒ
收稿日期：２０１１ —０９ —２２；修回日期：２０１１ —１１ — ２９
基金项目：国家公益性行业（农业）科研专项（２００９０３０１８）；山东省良种产业化项目
通信作者Ａｕｔｈｏｒｆｏｒｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｅｎｃｅ（Ｅ－ｍａｉｌ．ｃｈｙｑ．５７７２１＠１６３．ｃｏｍ）
大葱（ＡｌｌｉｕｍｉｆｓｔｕｌｏｓｕｍＬ．）以植株营养体为产品器官，因此培育植株高大的新品种是提高大葱
产量的关键，也是大葱育种者普遍追求的目标（张国进等，２０１０）。依据多倍体具有相对 “ 巨大性 ” 等特点，开展大葱多倍体诱导技术研究，对培育植株高大的大葱新品种具有重要的现实意义。
２结果与分析
２．１秋水仙素浸泡大葱种子的诱导效果
以植株粗壮，叶色浓绿，生长缓慢为形态变异标准，统计形态变异株数及形态变异株率。由表１可以看出，随着秋水仙素浓度的升高和处理时间的延长，种子的发芽率呈现下降趋势。从多倍体诱变效果看，０．４％～１．Ｏ％的秋水仙素对大葱种子的诱导均有效；相同浓度下处理时间越长诱导率越高；处理２４ｈ时，随着秋水仙素浓度的升高诱导率也呈现上升趋势；处理４８ｈ时，秋水仙素浓度在Ｏ．２％～Ｏ．８％时随浓度升高诱导率上升，当浓度达到１．０％时，诱导率反而下降。在ｌ２个处理组合中，以秋水仙素浓度０．８％处理４８ｈ的形态变异株率（２２％）最高，与其他处理有极显著的差异，为本试验最佳组合。