第8章酶的作用机制和酶活性调控
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第八章 酶的作用机制 和酶的调节
本章重点
1.酶的活性中心， 2.酶催化反应高效性的因素 3.酶催化反应机制举例 4.催化活性的调节方式
㈠ 酶的活性部位的特点
一、酶的活性部位
1、概念： 酶分子中只有少数特异的AA残基参与底物的结
合及催化作用。这些特异的AA残基比较集中的区域即与 酶活力直接相关的区域，称为active site。。
许多氧化-还原酶中都含有铜或铁离子，它们作为酶的辅助因子起着传递 电子的功能。
⑶ 通过静电稳定或屏蔽负电荷。
电荷屏蔽作用是酶中金属离子的一个重要功能。 多种激酶的底物是Mg2+－ATP复合物。 Mg2+使负电荷屏蔽
氧更容易接近P
(4)金属离子通过水的离子化促进亲核催化
2014/11/26
海洋生命学院
羧肽酶催化中的电子云形变
定向 极性专一性 契合区 ＋ 靠近 C端确认区
注 意
2014/11/26 海洋生命学院
H2+N＝C 精氨酸
24
3 酸碱催化
酸碱催化是通过瞬时的向反应物提供质子或从反应物接受质 子以稳定过渡态，加速反应的一种催化机制。 酶分子上氨基酸侧链基团可以为反应提供质子或接受质子 酸催化 EH EH2O EH + OH-
1965年Davids
2014/11/26
Phillipis用X-衍射法测定了该酶的结构
海洋生命学院 37
1、酶、 底物与二者复合物的结构 鸡卵清溶菌酶相对分子量14.2×103，129个氨基酸组成的 单链蛋白质，四对二硫键； 溶菌酶是一种葡糖苷酶，能水解NAM的C1与NAG的C4的 糖苷键底物： N - 乙酰氨基葡糖（ N AG ） +N - 乙酰氨基葡糖 乳酸（ N AM ） 的共聚物或几丁质
1、需要金属的酶分类： 2、催化机制：
⑴ 通过结合底物为反应定向 金属离子的催化作用和酸的催化作用相似，可以稳定过渡态的酶底物复合物，但是金属离子带有更多的正电荷，作用更强。而且 在中性pH溶液中，H+浓度很低，金属离子却容易维持一定的浓 度
2014/11/26
海洋生命学院
34
⑵ 通过可逆改变金属离子的氧化态调节氧化还原反应
26
碱催化
酸催化
＋
2014/11/26
ห้องสมุดไป่ตู้
海洋生命学院
27
影响酸碱催化的反应速率的因素有两个： 1、酸或碱的强度： （解离常数，pK值） 2、质子传递速率 His的侧链咪唑基的解离常数约为6.0，在生理pH 条件下，即在中性条件下， His 咪唑基有一半以酸性 形式存在，另一半以碱性形式存在；既可以作质子供 体又可以作质子受体。同时咪唑基给出质子和接受质 子的速度非常快。 His是酶的酸碱催化作用中最活泼的一个催化功能团。
二、酶催化反应的独特性质
⒈ 酶反应分为两大类:电子转移；电子、质子或其他基团转移 ⒉ 催化过程中以活性部位氨基酸侧链上的功能基团和辅酶为 媒介。 His，Ser，Cys，Lys，Glu，Asp ⒊ 酶催化反应的最适pH范围窄 4. 与底物相比，酶分子很大，而活性部位通常之比底物稍大 一点 巨大的酶结构对稳定酶活性部位的构象是必要的
2014/11/26
海洋生命学院
18
三、影响催化效率的有关因素（7个）
1. 底物和酶的邻近效应与定向效应
普通化学反应—随机碰撞（受浓度、碰撞角度影响） 相当于——社会上的自由恋爱 酶的活性中心—相当于“婚姻介绍所” 邻近效应提高了酶的活性中心（“婚介”）底物的浓度（— 非婚男女集中） 定向效应缩短了底物与催化基团间（“男女”）的距离
2014/11/26
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29
亲电催化
2A- :
亲核催化
B+
+ Mg2+
A A: ¨ Mg
+ 2B+
A- :
B+
¨ + -OH
A- + HO :B
2014/11/26
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30
酶蛋白上的重要亲核基团
亲核基团
Ser-OH
： —CH —O
2
亲电中心
酰基
· H ·
Cys-SH
： —CH —S
2014/11/26
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38
空间结构上， 酶分子呈椭圆形， α 螺旋占25% ， 某些区域存 在伸展的β 折叠片；分子内部几乎全部为疏水性的 分子表面有较深的裂缝 ， 大小可容纳六个单糖分子 ， 是酶 的活性部位。
2014/11/26
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39
活性中心具有G l u35 和 Asp52 ， 位于裂缝的两侧 不同的微环境中 Asp处于极性区， 是氢受 体； G l u处于非极性区， 在 pH 5. 0 时 ， ASP以 C O O 离子状态形式， G l u以质 子化（ C O O H） 形式存在。
14
⑶ 亲和标记法
修饰剂的特点：① 结构与底物类似， 能专一性引入到酶活性部位； ②具活泼化学基团， 能与活性部位某一氨基酸共价结合。 作用机制：利用酶对底物的特殊亲和力将酶加以修饰标记 ， 称亲和 标记， 相应的试剂称“ 活性部位指示剂”
胰凝乳蛋白酶和胰蛋白酶 TPE是酶的底物，TPCK是 酶的亲和试剂，当酶与 TPCK温浴后，酶活性丧失， 这种结合具有空间结构的 需求，同时也阻止其他试 剂如DFP结合。 对酶活性中心的组氨酸 （His57）咪唑环进行修 饰。 2014/11/26
2014/11/26
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28
4. 共价催化
又称为亲核催化（亲电子催化）：在催化时，亲核催化剂 （亲电子催化剂）能放出（汲取）电子作用于底物的缺电 子中心（负电子中心），迅速形成不稳定的共价中间复合 物，降低反应活化能，使反应加速。 亲电基团—— Mg2+、 Mn2+ （有空轨道）；
亲核基团—— OH 、SH、咪唑基、某些辅酶（有孤对电子）
H2N CH CH2 OH O CH CH2
CH2
O C OH
OH
酸碱性基团： 天冬氨酸和谷氨酸的羧 基， 赖氨酸的氨基， 酪氨酸的酚羟基， 组氨酸的咪唑基等。
O C H2N CH OH CH O C OH COOH
H2N
C
OH
SH
CH2 H2N CH2 C OH H2N CH CH2 O
O
C O OH O C H2N OH CH CH2 CH2 CH2 CH2 OH NH2 C OH O
海洋生命学院 20
邻近效应实例：对硝基苯酚乙酸酯
如果以酶来催化，底物结合于活性中心，活性中心的His残基 与底物邻近（相当于分子内反应），反应将能高效率地发生
2014/11/26
海洋生命学院
21
定向效应实例:定向效应使难于定向的分子 间反应变为准确定向的分子内反应。
催化基团为羧基，反应为羧酸酯的分解； 分子内的催化效率是分子间的105到108倍
2014/11/26 海洋生命学院 22
2. 底物的形变与诱导契合
当酶遇到其专一性底 物时，酶分子中的某些 基团或离子使底物分子 内的敏感键中的某些基 团的电子云密度增高或 降低，产生“电子张 力”，使敏感键的一端 更加敏感，底物分子发 生“形变” ，从而促使 酶－底物中间产物进入 过渡态，降低反应活化 能，是反应易于发生。
酶的高效性因素不是同时在一个酶中起作用，也不 是一种因素在所有的酶中作用。对于某一种酶来说， 可能分别受一种或几种因素的影响 2014/11/26 36 海洋生命学院
四、催化反应机制的实例 ㈠ 溶菌酶
溶菌酶的作用是水解多糖链， 细菌细胞壁上的多糖链可被溶 菌酶水解而破坏。 溶菌酶广泛存在于泪液及卵清 蛋白液中。
没有酶的空间结 构也就没有酶的 活性部位
(3) 酶的活性部位与底物的形状不是严格互 补。而是一个动态的辨认过程
诱导-契合
（4） 酶的活性中心位于酶分子表面的 “裂缝” 内，这是一个疏水区域，非极性基团较多，还含 有某些极性的氨基酸残基，与底物发生结合并发 生催化作用。在此裂缝内底物的有效浓度可以达 到很高
海洋生命学院
15
2、动力学参数测定法：通过动力学方法求得相关参 数，作出相应判断。 3、X-射线晶体衍射法：如溶菌酶和胰凝乳蛋白酶活 性中心的测定 4、定点诱变法：改变编码蛋白质的基因，研究酶活 性部位的必需氨基酸。如胰蛋白酶定点突变， Asp102诱变为 Asn102，Kcat降低5000倍。
2014/11/26 海洋生命学院 16
2014/11/26
海洋生命学院
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5. 酶分子结构和活性部位特点利于催化反应：
①活性部位存在一个以上的催化基团，所以能进行协同 催化； ②活性中心 存 在结合部位，使底物以固 有的方式结合在 活性部位； ③多底物反应存在多个底物结合位点，保证反应有序进 行； ④ 底物结合后，活性部位能诱导底物键能的变化，利于 过渡态复合物的形成
SH H2N CH CH2 N H N NH C OH N
2014/11/26
NH2 OH
海洋生命学院
8
(2) 酶的活性部位是一个三维实体。 活性部位的三维结构是由酶的一级结构决定并且 在一定外界条件下形成的。活性中心的几个氨基酸 残基在一级结构上可能相距很远，甚至位于不同肽 链上，通过肽链的盘绕折叠而在空间结构上相互靠 近。
2014/11/26
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19
邻近效应：E与S结 合形成中间复合物后，S 和S之间，酶的催化基团 和S之间结合于同一分子 而使有效浓度得以极大 地提高，从而使反应速 率增加
2014/11/26
定向效应：由于活性 中心的立体结构和相关基 团的诱导和定向作用，反 应物的反应基团之间、酶 的催化基团和底物的反应 基团之间相互接近，并被 严格定向定位，正确取位 。
A- :
碱催化
B+ + H+ H+ + E-COO-
AH + B+
A- :
2014/11/26
A- + E-COOH
+ E-COO- + H25
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狭义的酸碱催化：通过H+，OH-进行的催化 广义的酸碱催化：通过H+，OH-以及能提供H+和OH-的供体 进行的催化
2014/11/26
海洋生命学院
结合部位：专一性 催化部位： 催化底物键的断裂形成新键。决定酶的催化能力 对需要辅酶的酶分子，辅 酶或其一部分就是活性中 心的组成部分
2014/11/26
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3
调控部位
酶分子中存在着一些可以与其他分子发生某种程 度的结合的部位，从而引起酶分子空间构象的变 化，对酶起激活或抑制作用。
在酶的活性部位，E与S结合形成中间复合物
2014/11/26
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5
2、酶活性中心的特点（6点）
⑴ 活性部位在酶分子的总体中只占相当小的部分（1%～2%）
催化部位一般只由2-3个氨基酸组成，结合部位残基数因不同的酶而异
2014/11/26
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7
酶活性中心的必需基团
亲核性基团：丝氨酸的羟基，半胱氨 酸的巯基和组氨酸的咪唑基。
• •
（5）底物通过次级键较弱的力结合到酶上。 氢键，盐键，范德华力，和疏水相互作用
（6） 酶活性部位具有柔性 在酶的变性过程中，当酶分子的整体构象还没有 受到明显影响之前，活性部位已经大部分被破坏， 因而造成活性的丧失
㈡ 研究酶活性部位的方法
1、酶分子侧链基团的化学修饰 ⑴非特异性共价修饰：某些化学试剂能和酶分子中aa残基的侧 链基团反应，使基团的结构和性质发生变化。如果修饰后 引起酶活力的丧失或降低，则此基团可能酶的必需基团。 鉴别标准：
2
磷酰基
· H ·
His-咪唑基 —CH2—C=CH HN CH N：
糖基
酶分子中的亲核中心攻击底物的亲电中心，形成一 个反应活性很高的共价中间物。
2014/11/26
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32
－OH的亲核催化(胰蛋白酶)
2014/11/26
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33
5 金属离子催化
① 金属酶：紧密结合：多是过渡金属离子 Fe 2+， Fe 3+， Cu 2+， Zn 2+， Mn 2+ ② 金属-激活酶：松散结合：多是碱和 碱土金属离子 Na+， K+， Mg 2+， Ca 2+
① ②
活力丧失程度与修饰剂浓度有正比关系； 底物或可逆的抑制剂可保护共价修饰剂的修饰作用。
2014/11/26
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13
⑵ 特异性共价修饰：分离标记肽段，可判断活性部位的 氨基酸残基。如二异丙基氟磷酸（DFP）专一性与胰 凝乳蛋白酶活性部位Ser-OH共价结合。
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6.多元催化和协同效应
在酶催化反应中，常常是几个基元催化反应配合在一起共同起 作用。 胰凝乳蛋白酶：Asp，His，Ser 包括亲核催化和碱催化，多种催化效应协同作用，使酶反应 加速
7. 活性部位的微环境的影响
酶分子表面的活性部位是一个疏水环境，在这个非极性环境 中的介电常数较低，带电基团之间的静电作用显著提高。 当S与酶的活性部位结合后，S就处于非极性的微环境中，这 一疏水的微环境大大有利于酶的催化作用
本章重点
1.酶的活性中心， 2.酶催化反应高效性的因素 3.酶催化反应机制举例 4.催化活性的调节方式
㈠ 酶的活性部位的特点
一、酶的活性部位
1、概念： 酶分子中只有少数特异的AA残基参与底物的结
合及催化作用。这些特异的AA残基比较集中的区域即与 酶活力直接相关的区域，称为active site。。
许多氧化-还原酶中都含有铜或铁离子，它们作为酶的辅助因子起着传递 电子的功能。
⑶ 通过静电稳定或屏蔽负电荷。
电荷屏蔽作用是酶中金属离子的一个重要功能。 多种激酶的底物是Mg2+－ATP复合物。 Mg2+使负电荷屏蔽
氧更容易接近P
(4)金属离子通过水的离子化促进亲核催化
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羧肽酶催化中的电子云形变
定向 极性专一性 契合区 ＋ 靠近 C端确认区
注 意
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H2+N＝C 精氨酸
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3 酸碱催化
酸碱催化是通过瞬时的向反应物提供质子或从反应物接受质 子以稳定过渡态，加速反应的一种催化机制。 酶分子上氨基酸侧链基团可以为反应提供质子或接受质子 酸催化 EH EH2O EH + OH-
1965年Davids
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Phillipis用X-衍射法测定了该酶的结构
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1、酶、 底物与二者复合物的结构 鸡卵清溶菌酶相对分子量14.2×103，129个氨基酸组成的 单链蛋白质，四对二硫键； 溶菌酶是一种葡糖苷酶，能水解NAM的C1与NAG的C4的 糖苷键底物： N - 乙酰氨基葡糖（ N AG ） +N - 乙酰氨基葡糖 乳酸（ N AM ） 的共聚物或几丁质
1、需要金属的酶分类： 2、催化机制：
⑴ 通过结合底物为反应定向 金属离子的催化作用和酸的催化作用相似，可以稳定过渡态的酶底物复合物，但是金属离子带有更多的正电荷，作用更强。而且 在中性pH溶液中，H+浓度很低，金属离子却容易维持一定的浓 度
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⑵ 通过可逆改变金属离子的氧化态调节氧化还原反应
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碱催化
酸催化
＋
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影响酸碱催化的反应速率的因素有两个： 1、酸或碱的强度： （解离常数，pK值） 2、质子传递速率 His的侧链咪唑基的解离常数约为6.0，在生理pH 条件下，即在中性条件下， His 咪唑基有一半以酸性 形式存在，另一半以碱性形式存在；既可以作质子供 体又可以作质子受体。同时咪唑基给出质子和接受质 子的速度非常快。 His是酶的酸碱催化作用中最活泼的一个催化功能团。
二、酶催化反应的独特性质
⒈ 酶反应分为两大类:电子转移；电子、质子或其他基团转移 ⒉ 催化过程中以活性部位氨基酸侧链上的功能基团和辅酶为 媒介。 His，Ser，Cys，Lys，Glu，Asp ⒊ 酶催化反应的最适pH范围窄 4. 与底物相比，酶分子很大，而活性部位通常之比底物稍大 一点 巨大的酶结构对稳定酶活性部位的构象是必要的
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三、影响催化效率的有关因素（7个）
1. 底物和酶的邻近效应与定向效应
普通化学反应—随机碰撞（受浓度、碰撞角度影响） 相当于——社会上的自由恋爱 酶的活性中心—相当于“婚姻介绍所” 邻近效应提高了酶的活性中心（“婚介”）底物的浓度（— 非婚男女集中） 定向效应缩短了底物与催化基团间（“男女”）的距离
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亲电催化
2A- :
亲核催化
B+
+ Mg2+
A A: ¨ Mg
+ 2B+
A- :
B+
¨ + -OH
A- + HO :B
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酶蛋白上的重要亲核基团
亲核基团
Ser-OH
： —CH —O
2
亲电中心
酰基
· H ·
Cys-SH
： —CH —S
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空间结构上， 酶分子呈椭圆形， α 螺旋占25% ， 某些区域存 在伸展的β 折叠片；分子内部几乎全部为疏水性的 分子表面有较深的裂缝 ， 大小可容纳六个单糖分子 ， 是酶 的活性部位。
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活性中心具有G l u35 和 Asp52 ， 位于裂缝的两侧 不同的微环境中 Asp处于极性区， 是氢受 体； G l u处于非极性区， 在 pH 5. 0 时 ， ASP以 C O O 离子状态形式， G l u以质 子化（ C O O H） 形式存在。
14
⑶ 亲和标记法
修饰剂的特点：① 结构与底物类似， 能专一性引入到酶活性部位； ②具活泼化学基团， 能与活性部位某一氨基酸共价结合。 作用机制：利用酶对底物的特殊亲和力将酶加以修饰标记 ， 称亲和 标记， 相应的试剂称“ 活性部位指示剂”
胰凝乳蛋白酶和胰蛋白酶 TPE是酶的底物，TPCK是 酶的亲和试剂，当酶与 TPCK温浴后，酶活性丧失， 这种结合具有空间结构的 需求，同时也阻止其他试 剂如DFP结合。 对酶活性中心的组氨酸 （His57）咪唑环进行修 饰。 2014/11/26
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4. 共价催化
又称为亲核催化（亲电子催化）：在催化时，亲核催化剂 （亲电子催化剂）能放出（汲取）电子作用于底物的缺电 子中心（负电子中心），迅速形成不稳定的共价中间复合 物，降低反应活化能，使反应加速。 亲电基团—— Mg2+、 Mn2+ （有空轨道）；
亲核基团—— OH 、SH、咪唑基、某些辅酶（有孤对电子）
H2N CH CH2 OH O CH CH2
CH2
O C OH
OH
酸碱性基团： 天冬氨酸和谷氨酸的羧 基， 赖氨酸的氨基， 酪氨酸的酚羟基， 组氨酸的咪唑基等。
O C H2N CH OH CH O C OH COOH
H2N
C
OH
SH
CH2 H2N CH2 C OH H2N CH CH2 O
O
C O OH O C H2N OH CH CH2 CH2 CH2 CH2 OH NH2 C OH O
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邻近效应实例：对硝基苯酚乙酸酯
如果以酶来催化，底物结合于活性中心，活性中心的His残基 与底物邻近（相当于分子内反应），反应将能高效率地发生
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定向效应实例:定向效应使难于定向的分子 间反应变为准确定向的分子内反应。
催化基团为羧基，反应为羧酸酯的分解； 分子内的催化效率是分子间的105到108倍
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2. 底物的形变与诱导契合
当酶遇到其专一性底 物时，酶分子中的某些 基团或离子使底物分子 内的敏感键中的某些基 团的电子云密度增高或 降低，产生“电子张 力”，使敏感键的一端 更加敏感，底物分子发 生“形变” ，从而促使 酶－底物中间产物进入 过渡态，降低反应活化 能，是反应易于发生。
酶的高效性因素不是同时在一个酶中起作用，也不 是一种因素在所有的酶中作用。对于某一种酶来说， 可能分别受一种或几种因素的影响 2014/11/26 36 海洋生命学院
四、催化反应机制的实例 ㈠ 溶菌酶
溶菌酶的作用是水解多糖链， 细菌细胞壁上的多糖链可被溶 菌酶水解而破坏。 溶菌酶广泛存在于泪液及卵清 蛋白液中。
没有酶的空间结 构也就没有酶的 活性部位
(3) 酶的活性部位与底物的形状不是严格互 补。而是一个动态的辨认过程
诱导-契合
（4） 酶的活性中心位于酶分子表面的 “裂缝” 内，这是一个疏水区域，非极性基团较多，还含 有某些极性的氨基酸残基，与底物发生结合并发 生催化作用。在此裂缝内底物的有效浓度可以达 到很高
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2、动力学参数测定法：通过动力学方法求得相关参 数，作出相应判断。 3、X-射线晶体衍射法：如溶菌酶和胰凝乳蛋白酶活 性中心的测定 4、定点诱变法：改变编码蛋白质的基因，研究酶活 性部位的必需氨基酸。如胰蛋白酶定点突变， Asp102诱变为 Asn102，Kcat降低5000倍。
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5. 酶分子结构和活性部位特点利于催化反应：
①活性部位存在一个以上的催化基团，所以能进行协同 催化； ②活性中心 存 在结合部位，使底物以固 有的方式结合在 活性部位； ③多底物反应存在多个底物结合位点，保证反应有序进 行； ④ 底物结合后，活性部位能诱导底物键能的变化，利于 过渡态复合物的形成
SH H2N CH CH2 N H N NH C OH N
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NH2 OH
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(2) 酶的活性部位是一个三维实体。 活性部位的三维结构是由酶的一级结构决定并且 在一定外界条件下形成的。活性中心的几个氨基酸 残基在一级结构上可能相距很远，甚至位于不同肽 链上，通过肽链的盘绕折叠而在空间结构上相互靠 近。
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邻近效应：E与S结 合形成中间复合物后，S 和S之间，酶的催化基团 和S之间结合于同一分子 而使有效浓度得以极大 地提高，从而使反应速 率增加
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定向效应：由于活性 中心的立体结构和相关基 团的诱导和定向作用，反 应物的反应基团之间、酶 的催化基团和底物的反应 基团之间相互接近，并被 严格定向定位，正确取位 。
A- :
碱催化
B+ + H+ H+ + E-COO-
AH + B+
A- :
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A- + E-COOH
+ E-COO- + H25
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狭义的酸碱催化：通过H+，OH-进行的催化 广义的酸碱催化：通过H+，OH-以及能提供H+和OH-的供体 进行的催化
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结合部位：专一性 催化部位： 催化底物键的断裂形成新键。决定酶的催化能力 对需要辅酶的酶分子，辅 酶或其一部分就是活性中 心的组成部分
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调控部位
酶分子中存在着一些可以与其他分子发生某种程 度的结合的部位，从而引起酶分子空间构象的变 化，对酶起激活或抑制作用。
在酶的活性部位，E与S结合形成中间复合物
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2、酶活性中心的特点（6点）
⑴ 活性部位在酶分子的总体中只占相当小的部分（1%～2%）
催化部位一般只由2-3个氨基酸组成，结合部位残基数因不同的酶而异
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酶活性中心的必需基团
亲核性基团：丝氨酸的羟基，半胱氨 酸的巯基和组氨酸的咪唑基。
• •
（5）底物通过次级键较弱的力结合到酶上。 氢键，盐键，范德华力，和疏水相互作用
（6） 酶活性部位具有柔性 在酶的变性过程中，当酶分子的整体构象还没有 受到明显影响之前，活性部位已经大部分被破坏， 因而造成活性的丧失
㈡ 研究酶活性部位的方法
1、酶分子侧链基团的化学修饰 ⑴非特异性共价修饰：某些化学试剂能和酶分子中aa残基的侧 链基团反应，使基团的结构和性质发生变化。如果修饰后 引起酶活力的丧失或降低，则此基团可能酶的必需基团。 鉴别标准：
2
磷酰基
· H ·
His-咪唑基 —CH2—C=CH HN CH N：
糖基
酶分子中的亲核中心攻击底物的亲电中心，形成一 个反应活性很高的共价中间物。
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－OH的亲核催化(胰蛋白酶)
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5 金属离子催化
① 金属酶：紧密结合：多是过渡金属离子 Fe 2+， Fe 3+， Cu 2+， Zn 2+， Mn 2+ ② 金属-激活酶：松散结合：多是碱和 碱土金属离子 Na+， K+， Mg 2+， Ca 2+
① ②
活力丧失程度与修饰剂浓度有正比关系； 底物或可逆的抑制剂可保护共价修饰剂的修饰作用。
2014/11/26
海洋生命学院
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⑵ 特异性共价修饰：分离标记肽段，可判断活性部位的 氨基酸残基。如二异丙基氟磷酸（DFP）专一性与胰 凝乳蛋白酶活性部位Ser-OH共价结合。
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6.多元催化和协同效应
在酶催化反应中，常常是几个基元催化反应配合在一起共同起 作用。 胰凝乳蛋白酶：Asp，His，Ser 包括亲核催化和碱催化，多种催化效应协同作用，使酶反应 加速
7. 活性部位的微环境的影响
酶分子表面的活性部位是一个疏水环境，在这个非极性环境 中的介电常数较低，带电基团之间的静电作用显著提高。 当S与酶的活性部位结合后，S就处于非极性的微环境中，这 一疏水的微环境大大有利于酶的催化作用