实验2 LD50的测定
实验二 经口急性毒性LD50测定
实验二经口急性毒性LD50测定实验二经口急性毒性LD50测定一、试验目的1. 熟悉急性毒性LD50测定的剂量设计2. 掌握小鼠灌胃技术3. 掌握改进寇氏法计算LD50的方法二、试验原理选择健康的实验动物，依据LD50计算的设计原则，将实验动物随机分成数个染毒组和一个阴性对照组。
一次或24小时内多次给予实验组受试物后，观察动物所产生的急性毒性反应及其严重程度，中毒死亡的特征以及可能的死亡原因。
根据受试物毒性反应与剂量的关系，求出半数致死剂量(LD50)，并根据LD50值将受试物进行急性毒性分级。
三、材料和试剂1. 实验动物:健康成年小鼠60只，雌雄各半2. 器材:灌胃针(小鼠适用)、注射器、吸管、容量瓶、烧杯、滴管、分析天平、台秤、外科手术剪、镊子3. 受试物:(敌百虫或克佰威)4. 染色剂:苦味酸酒精饱和溶液、0.5%品红溶液四、实验内容1. 实验动物称重、编号和随机分组2. 染毒剂量设计及试剂配制3. 小鼠灌胃染毒技术4. 毒性反应的观察及LD50计算五、试验方法(一)预实验1. 探索剂量范围先找出100%与0%的致死量(或阳性反应的剂量)为实验的上、下限剂量(Dmax和Dmin)。
据经验或文献定出一个估计量，取动物若干，每4只一组，按估计量给药，如出现4/4死亡时，下一组剂量降低，当出现3/4死亡时，则上一剂量为Dmax;如降低一档剂量出现的死亡率2/4或1/4时，应考虑到4/4死亡剂量组在正式实验时可能出现死亡率低于70%，为慎重起见可将4/4死亡剂量乘以1.4倍，作为Dmax。
以次类推，找出Dmin。
2. 剂量分组一般染毒组数(G)以5-8组为宜，组间剂量比值为r。
在确定组数后，按下列公式计算r。
1/(G-1)r = (Dmax/Dmin) 3. 受试物溶液的配制配制等比浓度的敌百虫溶液，并使每只动物在给药容量上相等(如0.5ml/20g)。
剂量按等比级数增减，相邻两剂量比值1:0.6,0.9，设5个剂量组。
实验普鲁卡因半数致死量(LD50)的测定
DJY
2
测定LD50的方法很多 本实验用的是简化机率单位法
y = a+bx
机 率 单 位 y
对数剂量x
DJY 3
药物的剂量与效应关系
死 亡 数 累 积 死 亡 率
剂量
累 积 死 亡 率 对数剂量
DJY
剂量 机 率 单 位 对数剂量
4
测定药物LD50的设计方法 1.预实验：摸索接近100%和0%死亡的剂量 2.按比例设5-7个剂量组（0.65~0.90） 3.随机分组，动物数不少于10只（小鼠） 4.实验条件均应相等
【注意事项】
1.动物应随机分组
2.各小组的动物标记要统一
3.剂量由小到大，注射量要准。
DJY
9
思考题
1.什么是LD50?
2.测定LD50的根据和意义何在?
DJY
10
【结果与统计】
对数剂量 动物数 死亡率 机率单位 死亡数 (mg/kg) (x) (n) (%) (y) 剂量 1 2 110.8 147.7 2.0445 2.1694
3 4
5
196.9 262.5
350.0
2.2942 2.4191
2.5441
y = a+bx
用直线回归法求 a, b, r
DJY 8
DJY
5
测定LD50的用药设计方法 同一浓度 不同浓度 不同剂量 同一剂量
DJY
6
【方法与步骤】
1.分组：随机分成5个剂量组，每组2只小白鼠。
2.给药：采用不同浓度,同一剂量的方法
0.20ml/10g,腹腔注射，涂上标记
3.观察：用药1小时后,观察小白鼠死亡情况,并记
录各组动物的鲁卡因半数致死量(LD50)的测定
ld50的测定实验报告
ld50的测定实验报告
LD50的测定实验报告
实验目的：本实验旨在测定一种化学物质对实验动物的半数致死量（LD50），以评估其毒性水平。
实验材料和方法：我们选取了实验室常用的小鼠作为实验动物，以及待测化学物质。
首先，我们将小鼠随机分为不同剂量组，每组包含5只小鼠。
然后，我们分别给不同剂量组的小鼠口服待测化学物质，并观察其死亡情况。
根据实验结果，我们利用经典的Probit分析法计算出LD50值。
实验结果：经过实验观察和数据统计分析，我们得出了待测化学物质的LD50值为X mg/kg。
根据国际毒性标准，我们将其毒性水平评定为（低/中等/高）。
实验讨论：LD50值是评估化学物质毒性水平的重要参数，它可以帮助我们确定合理的安全使用剂量，并指导相关毒性评价和风险评估工作。
通过本次实验，我们对待测化学物质的毒性水平有了清晰的认识，并为其在实际应用中提供了科学依据。
结论：本次实验成功测定了待测化学物质的LD50值，并对其毒性水平进行了评估。
我们将继续深入研究，以便更好地了解该化学物质的毒性机制，并为其安全使用提供更多的科学依据。
通过本次实验，我们对LD50的测定方法有了更深入的了解，并对化学物质的毒性评估工作有了更清晰的认识。
我们相信，这将有助于更好地保障人类和环境的安全。
ld50的测定实验报告
ld50的测定实验报告LD50的测定实验报告概述：LD50是一种常用的毒性测定指标，用于衡量某种物质对于生物体的毒性程度。
本实验旨在通过测定某种化学物质对小白鼠的LD50值，评估其毒性，并为毒性研究提供参考。
实验材料与方法：实验所需材料包括小白鼠、待测物质、标准饲料、饮水、实验器材等。
按照以下步骤进行实验：1. 实验组织与分组：将小白鼠随机分为若干组，每组10只。
其中一组为对照组，其余组为实验组。
2. 毒性物质的制备：待测物质按照一定浓度配制成溶液。
3. 毒性物质的给药：将待测物质溶液按照一定剂量注射到小白鼠体内，对照组注射生理盐水。
4. 观察与记录：观察小白鼠在给药后的行为、食欲、体重等变化，并记录观察结果。
5. LD50的计算：根据实验数据，利用统计学方法计算出LD50值。
实验结果与分析：根据实验数据统计，不同剂量的待测物质对小白鼠产生了不同程度的毒性反应。
观察到高剂量组小白鼠出现明显的行为异常、食欲减退、体重减轻等现象，而低剂量组则没有明显异常。
LD50值是指在给定时间内，使一半实验动物死亡的物质剂量。
通过计算LD50值，可以评估待测物质的毒性程度。
LD50值越小，表示物质对生物体的毒性越高。
实验的结果显示，待测物质的LD50值为X mg/kg。
根据国际毒理学标准，该物质被归类为高毒性物质。
这意味着在相同剂量下，该物质对生物体的毒性较强，需谨慎使用。
实验的局限性与改进：本实验仅使用小白鼠作为实验对象，其生物体特征与人类存在差异，因此对于人体的毒性评估仍需谨慎。
此外，实验中仅测定了一种待测物质，结果无法推广到其他物质。
为了提高实验的准确性和可靠性，可以考虑以下改进措施：1. 使用多种动物模型，如小鼠、大鼠、兔子等，以更全面地评估待测物质的毒性。
2. 增加实验组数和样本量，以提高统计学分析的可靠性。
3. 结合其他毒性指标，如生化指标、组织病理学等，对待测物质的毒性进行更全面的评估。
结论：LD50测定实验是一种常用的毒性测定方法，通过计算LD50值可以评估待测物质的毒性程度。
ld50测定的实验报告
ld50测定的实验报告LD50测定的实验报告引言：药物的安全性评价是药物研发过程中至关重要的一环。
在药物研发的早期阶段，需要进行一系列的实验来评估药物的毒性。
其中，LD50测定是评估药物毒性的重要方法之一。
本实验旨在通过LD50测定，评估某药物对实验动物的毒性，为进一步的药物研发提供参考。
材料与方法：1. 实验动物：选取同龄、同种、同性别的小鼠作为实验动物。
2. 药物制备：将待测药物按照一定比例配制成不同浓度的溶液。
3. 实验组设置：将小鼠随机分为若干组，每组6只，其中一组作为对照组，其余组分别注射不同浓度的药物溶液。
4. LD50测定：将药物溶液通过静脉注射的方式给予小鼠，记录注射后小鼠的行为、体重变化、呼吸等生理指标。
5. 数据处理：根据实验结果，计算出药物的LD50值。
结果与讨论：在实验过程中，观察到小鼠在注射药物后出现了一系列的生理反应。
随着药物浓度的增加，小鼠的行为异常、体重减轻、呼吸困难等现象逐渐加重。
通过对实验数据的统计分析，可以得出药物的LD50值。
LD50值是指将药物给予实验动物后，导致50%的动物死亡所需的药物剂量。
LD50值越小，说明药物的毒性越大；LD50值越大，说明药物的毒性越小。
通过LD50测定，可以初步评估药物的毒性，并为药物的安全性评价提供参考。
然而，需要注意的是，LD50测定只是评估药物毒性的初步方法，其结果并不能完全代表药物的毒性水平。
在实际的药物研发过程中，还需要进行更加全面、细致的毒性评价，包括长期毒性、亚慢性毒性和慢性毒性等实验。
此外，LD50测定也存在一定的局限性。
由于药物对不同物种的毒性可能存在差异，所以LD50值只能作为初步参考，不能直接推广到人体。
在进行LD50测定时，需要选择合适的实验动物，并进行合理的数据分析，以得出准确可靠的结果。
结论：LD50测定是评估药物毒性的重要方法之一。
通过LD50测定，可以初步评估药物的毒性水平，为药物研发提供参考。
ld50测定实验报告
ld50测定实验报告LD50测定实验报告引言：毒性测定是评价化学物质或其他物质对生物体的危害程度的重要手段之一。
其中，LD50测定是最常用的方法之一，用于确定半数致死剂量。
本实验旨在通过对小白鼠进行LD50测定，评估某种物质的毒性。
实验方法：1. 实验动物的选择与饲养：本实验选用健康的小白鼠作为实验动物。
在实验前，小白鼠需接受一段时间的适应饲养，以保证其体内没有其他药物残留。
实验动物的饲养环境应保持清洁、温度适宜，并提供充足的食物和水。
2. 实验物质的制备与稀释：实验物质应按照一定的浓度进行稀释，以便确定LD50值。
稀释过程中需注意保持实验物质的纯度和稳定性，避免因杂质或变质导致实验结果的误差。
3. 实验组的设定：将小白鼠随机分为若干组，每组包含一定数量的动物。
实验组应包括不同浓度的实验物质，以及对照组。
对照组给予生理盐水或其他无毒物质，用于与实验组进行比较。
4. 实验操作：将实验物质按照一定剂量注射到小白鼠体内，记录下注射的剂量和时间。
观察实验动物在注射后的行为、反应和症状，并记录下来。
在一定时间内观察动物的生存情况，并记录下死亡的动物数量。
实验结果与分析：根据实验数据，我们可以计算出不同剂量下的生存率，并绘制出生存率-剂量曲线。
LD50值即为使50%的实验动物死亡的剂量。
LD50值越小，说明物质的毒性越大。
实验结果显示，实验物质的LD50值为Xmg/kg。
这表明该物质具有较高的毒性，对生物体的危害较大。
LD50值的确定有助于评估物质的毒性，并为相关领域的研究和应用提供参考。
实验误差与改进：在实验过程中，可能存在一些误差，如实验动物个体差异、实验条件的变化等。
为减少误差，可以增加实验动物的数量，提高实验的重复性。
同时，控制实验条件的稳定性，如温度、湿度等因素的控制，有助于减少误差。
结论：通过LD50测定实验，我们成功评估了某种物质的毒性。
LD50值的确定对于评估物质的毒性和安全性具有重要意义。
ld50测定的实验报告
ld50测定的实验报告
LD50测定实验报告
摘要：本实验旨在通过LD50测定法评估某种化学物质对实验动物的毒性。
实
验结果表明，该化学物质的LD50值为Xmg/kg，属于中等毒性。
引言：LD50（半数致死量）是指一种化学物质对实验动物的毒性的一种度量标准，它表示在一定时间内，使一组实验动物中有50%死亡的最小剂量。
LD50的
测定对于评估化学物质的毒性和制定安全使用标准具有重要意义。
材料与方法：本实验选取了X只实验动物，分为X组，每组X只。
将化学物质
溶解在适量的溶剂中，然后按照一定的剂量分别给不同组的实验动物进行灌胃。
观察实验动物的死亡情况，并记录下各组动物的死亡数。
通过计算得出LD50值。
结果：实验结果显示，给予Xmg/kg剂量的化学物质后，第一组实验动物有X
只死亡，第二组有X只死亡，第三组有X只死亡，第四组有X只死亡，第五组
有X只死亡。
通过计算得出该化学物质的LD50值为Xmg/kg。
讨论：根据LD50值的大小，我们可以判断该化学物质的毒性程度。
通常，
LD50值越小，表示该化学物质对实验动物的毒性越大。
在本实验中，该化学物质的LD50值为Xmg/kg，属于中等毒性。
因此，在使用该化学物质时，需要谨
慎操作，避免对人体和环境造成不良影响。
结论：通过LD50测定法，我们成功评估了该化学物质的毒性，并得出了其
LD50值。
这对于制定安全使用标准和保护人体健康具有重要意义。
在今后的工作中，我们将继续深入研究该化学物质的毒性机制，以及寻找相应的防护措施
和解毒方法。
急性毒性试验-LD50的测定
急性毒性试验-LD50的测定急性毒性试验是一种通过给实验动物注射、灌胃或其他途径给予高剂量试验物质来评估其致死或严重的毒性反应的试验。
LD50是一种常用的急性毒性指标，表示半数实验动物在接受单位剂量试验物质后死亡的剂量。
本文将介绍LD50的测定方法和其应用。
一、LD50的测定方法1. 实验动物的选择LD50实验通常使用小鼠、大鼠、兔子和狗等动物进行。
选用实验动物需要秉持道德原则，并考虑到动物的生物学特征、毒物代谢能力等方面的因素。
例如，小鼠和大鼠体型较小、代谢能力较低，适合于测定具有代谢性毒性的化合物的LD50；兔子和狗体型较大，代谢能力较强，适合于测定纯化、非代谢性毒性的化合物的LD50。
2. 给药途径和剂量选择通常使用口服、皮下注射、静脉注射等给药途径。
对于口服试验，需要注意试验物质的水溶性和毒性，对于毒性高的化合物，通常使用灌胃的方式。
实验的剂量需要考虑到实验动物体型、种类、代谢能力等因素，并进行逐步递增以确定LD50。
3. 实验计划设计实验计划设计需要考虑到试验物质的毒性、剂量效应关系和死亡率等因素。
一般采用正反两次递增的方法，进行急性毒性试验评估。
根据试验物质的毒性情况和实验者的安全考虑，同时采取风险预警措施。
4. 数据处理和计算完成实验后，需要统计每个剂量组的死亡率和死亡时间。
按照统计学原理，可以根据实验数据计算出LD50值。
LD50值表示使用单位剂量试验物质对半数实验动物致死的剂量。
该值越小，试验物质的毒性越高。
二、LD50的应用LD50值可以作为急性毒性评估的定量指标，用于比较不同化合物的毒性。
在化学品、药品等领域里进行LD50测定可以帮助人们更好地预测和评估一些原料与产品的安全性，以便于过程优化和产品开发，同时为相关政策制定提供科学依据。
LD50值的应用最为广泛的领域是毒性测试和安全性评估。
在毒理学和环境毒理学领域里，常用LD50为评估的标准；在某些国家的法律法规中，也要求企业对使用的化学品或产品进行毒性测试，以保证工人和消费者的安全。
ld50的测定方法的实验报告思考题
导语：LD50是一种常用的毒性测定方法，对于评估一种物质的毒性大小具有重要意义。
通过对动物进行实验观察其逝去率，可以计算出半数致死剂量LD50值，从而判断物质的毒性程度。
本文将围绕LD50测定方法展开探讨，从理论到实践，为你详细解读这一重要的毒性评价方法。
一、LD50的概念与意义LD50代表的是半数致死剂量，通常用于表示一种毒性物质对于生物体的毒性程度。
在毒性评价中，了解LD50值能够帮助我们正确评估和比较不同物质的毒性大小，为毒性监测和风险评估提供重要依据。
二、LD50的测定方法及实验步骤1. 选择实验动物：常用的实验动物包括小鼠、大鼠、家兔等，选择合适的实验动物是确保实验结果准确性的重要保障。
2. 确定给药途径：给药途径可以通过饮水、灌胃、皮下注射等方式进行，不同途径的给药方式会对LD50值产生影响。
3. 确定给药剂量范围：根据前期实验结果或文献调查，确定一系列逐渐递增的给药剂量范围。
4. 观察实验动物逝去情况：记录实验动物在给药后的逝去情况和逝去时间，根据实验结果计算LD50值。
在进行LD50测定方法的实验报告时，需要考虑以下几个要点：1. 实验设计的科学性：实验是否符合科学规范，是否考虑到各种可能的影响因素。
2. 结果的准确性：对实验结果进行综合分析和比较，确保数据的准确性和可靠性。
3. 实验中的伦理道德：对实验动物的使用是否符合伦理原则和动物保护法规。
4. 实验中的安全措施：在实验过程中是否采取了充分的安全防护措施，保障实验人员和实验动物的安全。
四、个人观点与理解LD50测定方法作为一种常用的毒性评价方法，具有重要的指导意义。
在实践中，我们需要充分考虑实验的科学性和伦理道德，确保实验结果的准确性和可信度。
也需要重视实验中的安全问题，在保障实验人员和实验动物的安全的前提下进行实验研究。
总结：LD50测定方法是一种重要的毒性评价方法，对于评估一种物质的毒性大小具有重要意义。
在进行LD50实验报告时，需要充分考虑实验设计的科学性、数据的准确性、伦理道德和安全措施，以确保实验的科学性和可靠性。
测定ld50的方法
测定ld50的方法
LD50的方法是通过给试验动物（通常是小鼠或大鼠）以不同剂量的物质，然后观察其死亡率来确定该物质对生物体的毒性程度。
LD50是指半数致死量（Lethal Dose 50），即致死一半动物所需的剂量。
LD50的测定方法包括以下几种：
1.固体物质方法：将固体物质溶解成适当的溶液，通过灌胃或皮下注射等方式给予小鼠或大鼠不同剂量，然后观察其死亡率。
2.液体物质方法：将液体物质稀释成一系列不同的浓度，然后通过灌胃或静脉注射给予试验动物，观察其死亡率。
3.气体物质方法：将气体物质暴露给试验动物，通常通过密封的容器或特定装置来控制气体浓度和曝光时间，然后观察其死亡率。
4.皮肤接触方法：涂抹或注射测试物质于试验动物的皮肤上，然后观察其死亡率。
测定LD50的实验通常需要一系列的试验动物和剂量，可以通过统计方法计算出剂量-死亡率的关系曲线，从而确定LD50值。
然而，如今在伦理方面的考虑下，使用动物实验来测定LD50已经受到了限制，许多国家已经禁止或限制了这种做
法，并提倡使用替代方法来评估物质的毒性。
ld50测定
实验一、LD50的测定[目的] 通过测定药物LD50的方法、步骤和计算过程，了解急性毒性试验的常规。
[材料] 小鼠50只(体重17－25g，雌雄各半) 注射器及针头1. 探索剂量范围取小鼠8-10只，以2只为一组分成4-5组，选择组距较大的一系列剂量，按腹腔注射哈顿佐剂，观察出现的症状并记录死亡数，找出引起0％及100％死亡率(至少应找出引起20％—80％死亡率)剂量的所在范围。
2. 进行正式试验在预初试验所获得的0％和100％致死量范围内，选用5个剂量按等比级数增减；尽可能使半数组的死亡率都在50％以上，另半数组的死亡率都在50%以下。
每组10只左右，动物的体重和性别要均匀分配。
完成动物分组和剂量计算后按组腹腔注射给药。
最好先从中剂量组开始，以使能从最初几组动物接受药物后的反应来判断两端的剂量是否合适，否则可随时进行调整。
LD50测定中应观察记录的项目：1、实验各要素：实验题目，实验日期，室温，检品的批号、规格、来源、理化性状、配制方法及所用浓度等；动物品系、来源、性别、体重、给药方式及剂量(药物的绝对量与溶液的容量)和给药时间等。
给药后各种反应；潜伏期(从给药到开始出现毒性反应的时间)；中毒现象及出现的先后顺序，开始出现死亡的时间；死亡集中时间；末只死亡时间；死前现象。
逐日记录各组死亡只数。
尸解及病理切片：从给药时开始记时，凡两小时以后死亡的动物，均及时尸解以观察内脏的病变，记录病交情况．若有肉限可见变化的则需进行病理检查．整个实验一般要观察7-14天，观察结束时，对全部存活动物称重，尸解，同样观察内脏病变并与中毒死亡鼠尸解情况相比较。
当发现有病变时，也同样作病理检查，以比较中毒后病理改变及恢复情况。
2、结果计算根据试验设计，采用相应的方法计算LD50，一般采用按Reed－Muench法计算或寇氏改进法karber法。
实验二、急性毒性试验试验目的：急性毒性试验是在24小时内给药1次或2次（间隔6-8小时），观察动物接受过量的受试药物所产生的急性中毒反应，为多次反复给药的毒性试验设计剂量、分析毒性作用的主要靶器官和观察指标的设计提供参考信息等。
LD50的测定
LD50的测定
实验动物：啮齿类小鼠原因：①经济，该实验动物试验经费低且受试药量较低，经济实惠；②易于获得及便于实验室饲养和管理；③毒理学研究背景较多，便于比较。
实验动物要求：健康、年龄和体重应尽量一致，尽量减少因实验动物个体差异对实验的影响。
还有，实验动物应为雌雄各一半。
剂量水平的选择：
在实验前应该先查阅有关文献，找出大致的LD50，而实验时应先进行预实验，先摸索出0％及100％估计致死量的范围。
LD50的计算方法：
LD50计算的统计学原理：剂量与死亡率之间呈偏态分布曲线关系。
实验动物对于药物毒性作用的敏感性存在差异，对药物特别敏感的动物很少，对药物很不敏感的动物也很少，多数实验动物处于中等敏感状态，符合“两头多，中间少”的规律。
以剂量为横坐标，死亡率为纵坐标，则可描绘出偏态分布曲线。
由于剂量与死亡率符合偏态分布，既符合对数正态分布，则可用孙氏改进寇氏法计算LD50.
孙氏改进寇氏法（点斜法）基本要求：①反应情况应符合或接近对数正态分布；②相邻了、相邻两剂量比值应相等：③各组动物数目相等，一般为10只。
注意：不要求死亡率一定包括0％和100％，但两者之和最好在80％和120％之间。
计算公式：
当最小剂量组的死亡率为0％，最大剂量组的死亡率为100％时可按下式计算：
当最小剂量组的死亡率大于0%而又小于30%。
或最大剂量组的死亡率小雨100%
而又大于70%时，按下式计算：
LD50的标准误按下式计算：，
LD50的95%可信限按下式计算：
●
●。
实验1-小鼠经口染毒LD50测定
√
pq ∑ n
根据lg LD50及其95%可信限值： 计算：lg LD50± 1.96Sm 得出 LD50及其95%可信区间范围。
急性毒性分级（评价）
毒性分级 剧毒 高毒 中等毒 低毒 实际无毒 大鼠一次经口LD50 （mg/kg） <1 1~ 50~ 500~ 5000~
实验报告撰写(经口LD50测定)
* 小鼠的编号是按体重由轻至重排序后填到表中的
甲 1
乙 2
丙 3
丁 4
戊 0
6.灌胃操作（等体积，1ml）
受试物配置：母液+生理盐水=1ml
母液量ml= 鼠重(kg)×吸取药剂量(剂量 组量mg/kg÷100mg/ml)
氯化镉小鼠经口染毒死亡情况
组别 1 2 3 4 5 剂量 mg/kg 112 150 200 267 356 对数 2.049 2.176 2.301 2.427 2.551 动物数 （n） 10 10 10 10 10 死亡数 （只） 死亡率 存活率 （p） （q） pq
称重和编号注意事项：
先编号（雌性1-25，雄性26-50）； 再称重;并记录每个号和对应的重量；等 标号干后再放入笼中，以免鼠间摩擦使 编号不清。
பைடு நூலகம்
⑶ 随机分组 随机数字的获取方法： f（x）=RAND()*100 同性别同一组动物体重差异应小于平 均体重的10% 不同组间的平均体重差异应小于5%
药物急性毒性实验
药物急性毒性实验实验⼀药物急性半数致死量（LD50）的测定【⽬的】了解药物半数致死量(LD50)测定的意义、原理，掌握半数致死量的测定⽅法和计算过程。
【原理】LD50是指在⼀群动物中能使半数动物死亡的剂量。
由于实验动物的抽样误差，药物的致死量对数值⼤多在50％质反应的上下呈正态分布。
在这样的质反应中药物剂量和质反应间呈S型曲线，S型曲线的两端处较平，⽽在50％质反应处曲线斜率最⼤，因此这⾥的药物剂量稍有变动，则动物的死或活的反应出现明显差异，所以测定半数致死量能⽐较准确地反映药物毒性的⼤⼩。
【实验材料】1、动物：⼩⽩⿏，体重18-24g，雌、雄各半，实验前禁⾷12⼩时，不禁⽔。
2、药品：盐酸普鲁卡因，苦味酸。
3、器械：⼩⿏笼，天平，注射器（1mL），电⼦计算器。
【⽅法和步骤】（⼀）预备实验1、探索剂量范围：先找出100%及0%死亡的剂量，此即上下限剂量（D m及D n）。
⽅法是先取出⼩⿏9-12只，每组3只，按估计量（根据经验或⽂献资料定出）给药，如3只⼩⿏全死则降低剂量⼀半，如全不死则增加剂量⼀倍，如部分死亡，则按2：1的⽐例向上、向下调整剂量，由此找出上下限剂量。
2、确定组数，计算各组剂量：确定组数（G）：可根据适宜的组距确定组数，⼀般分5-8个剂量组。
计算各组剂量：要求各组剂量按等⽐级数排列，在找出D m及D n和确定组数后，可按下列公式求出公⽐r：r再按公⽐计算各组剂量D1,D2,D3,D4,D5……D m，其中D1=D n=最⼩剂量，D2=D1?r; D3=D2?r; D4=D3?r; D5=D4?r; ……D G=D G-1?r。
r值⼀般以1.7~1.15之间为宜。
计算举例：已知某药在致死毒性实验中，Dm=187.5 mg/kg; Dn=76.8 mg/kg, 确定组数G=5，求r及各组剂量。
先代⼊公式求r=1.25，再计算各组剂量D1=Dn=76.8 mg/kg,D2=76.8?1.25=96 mg/kg, 依次计算D3，D4，及D G(D5)分别为120，150，187.5 mg/kg。
普鲁卡因急性毒性测定
普鲁卡因急性毒性（LD50）的测定【目的】通过实验学习测定药物LD50的方法、步骤及计算过程，观察受试药品一次给予动物后所产生的急性毒性反应和死亡情况。
【原理】药物给药剂量与动物死亡率间呈正态分布，以对数剂量为横坐标、死亡率为纵坐标作图，可得到一对称S型曲线，其两端较平坦，中间较陡，说明两端处剂量稍有变化时死亡率的改变不易表现出来，在50%死亡率处斜率最大，该处剂量稍有变动时，其死亡率变动最明显，即最灵敏，在技术上也最容易测得准确，所以人们常选用LD50值作为反映药物的指标。
若将死亡率换算成机率单位，则对数剂量与机率单位呈直线关系，用数学方法可拟合其回归方程式，可精确地计算LD50及引起任何死亡率的剂量及相关数据。
【器材和药品】注射器（1ml）、天平、小鼠笼、苦味酸；盐酸普鲁卡因。
【动物】18～22g健康小鼠50只(正式试验)，雌雄各半（雌鼠应无孕），实验前禁食12h，不禁水。
【方法】1.预试验目的是寻找引起0%和100%动物死亡的剂量范围，以便正式实验时确定各组剂量。
一般是取小鼠9～12只，分3～4组，选择组距较大的一系列剂量腹腔注射给药，观察出现的症状并记录死亡数，找出引起0%及100%死亡率，至少应找出引起20%～80%死亡率的剂量范围，以保证量-效曲线跨越足够的范围。
普鲁卡因小鼠腹腔注射（ip）引起0%和100%动物死亡的剂量范围的参考值为：最小剂量（Dmin）121.3mg/kg，最大剂量（Dmax）290mg/kg。
2.剂量计算及药液配制(1)剂量计算根据预试结果找出Dmax及Dmin，设正式实验的剂量组数为n，剂量公比为r，则各组剂量为Dmax·rk-1，k为第几组，一般选用4～5组动物，r为0.6～0.85为宜。
例已知普鲁卡因Dmin=121.3mg/kg，Dmax=290mg/kg当n=6时，r=0.84, 各组剂量为：1. 290 mg/kg2. 290 mg/kg×0.84 = 243.6mg/kg3. 290 mg/kg×0.842= 204.6mg/kg4. 290 mg/kg×0.843= 171.9mg/kg5. 290 mg/kg×0.844= 144.4mg/kg6. 290 mg/kg×0.845= 121.3mg/kg当n=5时，r=0.81，各组剂量为：1. 290 mg/kg2. 290 mg/kg×0.81 = 234.9mg/kg3. 290 mg/kg×0.812= 190.3mg/kg4. 290 mg/kg×0.812= 154.1mg/kg5. 290 mg/kg×0.812= 124.8mg/kg（2）药液配制①药源充足时的配药方法最高浓度药液（母液）的配制小鼠腹腔注射体积为0.2ml/10g= 20ml/kg，每组药液量为4ml左右，为留有余地，各组动物所需药液体积定为6ml。
ld50的测定实验报告讨论
ld50的测定实验报告讨论
LD50是指致死50%的剂量，通常用于测定某种物质的毒性。
这种测定实验需要进行多次，以确定LD50的准确剂量。
在实验设计和数据分析方面，有许多要素需要考虑。
实验设计：实验设计必须具有严密的结构和随机化，这样才能确保实验的可靠性和可重复性。
比如，实验要确保实验对象数量充足，同时要选择不同的剂量水平来测定，并且要选择不同的应变采样点进行测试，这样才能确保数据的相关性和可靠性。
数据分析：数据分析是LD50测定实验中至关重要的步骤。
实验数据必须通过有效的统计方法进行处理，以识别出可能与处理变量相关的差异。
数据分析可以揭示出不同剂量水平之间的关系，以及剂量和死亡率之间的关系。
误差分析：误差分析是LD50测定实验中非常重要的一个环节。
误差来源包括实验操作的错误、测量仪器的偏差、试验对象环境的变量等。
测量误差需要消除或控制，因为他们可能导致数据无法可靠地反映状态。
比如，将数据转换成比例或百分比等，可能会使误差得到更好的控制。
除了以上重要的要素外，还有一些其他的因素也会影响LD50测定实验结果，比如实验前期的检测、样品处理、实验环境偏差等。
这些因素都需要正确处理和控
制，以确保实验结果可靠。
总之，LD50测定实验需要进行精密的实验设计和数据分析，以建立准确和可重复的实验模型，并它可以促进毒理学和环境科学领域的研究工作。
LD50测定预试(采用改良寇氏法)
)
④操作条件要统一。 2. 药品的配置 ①确定用药容量（d） ，小白鼠腹腔注射为 0.2mg/10g。 ②计算每组药液量：V 组=每组动物数×动物平均体重×d（5ml 或以上为好） 。 为留余地。使 V 能被（1-K）整除。 ③计算母液药液量及浓度 V 母=V/（1-1：r） C 母=Dmax/d 例：C 母=（2200ｕg/10g/0.2ml/10g） ④用 5%敌百虫稀释 求 5%敌百虫中多少 ml 才含有母液所需溶质数多少克？
X=
100×?克 2%
=？ml
取 2%敌百虫？ml 加生理盐水至？ml 即为母液。以此类推。 从母液中取出？ml？ml 取？ml 作为 3 号液。以此类推。 3. 计算剂量填入表格 以第一组剂量×比值按顺序填入各组剂量值。 4. 将稀释好的药液按顺序给每组小鼠 0.2ml/10g 腹腔注射，1 号液注射 1 组；2 号液 2 组……观察 10ˊ～15ˊ内死亡情况以翻正反射消失为准，并将死亡数 填入表格，一只未死的剂量组为 0%全部死亡的为 100%。 组号 剂 量 对数 实验动物 死亡数 死亡数 P P2 mg/10g 剂量 数
摇匀
1 2 3 4
实验一、LD50 测定预试（采用改良寇氏法） ——小白鼠腹腔注射敌百虫
目的：初步确定 0%和 100%死亡率的剂量范围。 1. 基本要求：步骤： （1）实验动物的选择：♂、♀各半后兼取，剔除病鼠及（远 ♂、近♀）孕鼠，体重应较接近 20±2g。品系、年龄、饲料、饥饱与环境因 素尽可能一致。本实验采用昆明小鼠 20 只。 （2）随机分组：减少人为的偏差，采用随机数字表。每个小鼠称（按体重轻 重分）重编号，和随机数字表对应，用组数去除时（本实验分四组） ，按如下 分配。 ①余数等于零时，其余数用组数表示如： 4÷4→余 0→4 组。 ②不够除时，直接把分子落下来。如：3÷4→3→3 组。 ③能除时，余数即为组数。如：0.5÷4→1→1 组。 如此类推，分完了不均衡（每组应相等） ，每组多的重新按随机数字表分配，随 机数字除以该组的动物数（参见例 1～例 3） 。 （3）确定剂量 ①剂量范围选择：据经验，预试找出 0%～100%范围，Dm 为使试验动物全部死亡 的最小剂量，Dn 为使试验动物一个也不死亡的最大剂量。 Dm =10mg/kg ;Dn =3.3mg/kg 二步法大致 a 新药——————→ 10x 稀释————→ 2 倍稀释 范围 x b 无资料：治疗量×100 作为最大剂量 ②剂量分组：5～8 组为宜，要求 50%死亡上下各有一半的组，包括 0%和 100% 组，两头舍去。 ③各组剂量呈等比级数，换成对数为等差级数。 比值=log −1 (
ld50的测定实验报告讨论
LD50的测定实验报告1. 背景1.1 LD50的定义LD50（Lethal Dose 50）是一种用于衡量化学物质或生物毒素对实验动物的致死性的指标。
它表示在给定时间内，能够导致一半实验动物死亡的剂量。
LD50通常以毫克/千克（mg/kg）的形式表示。
1.2 LD50测定的重要性LD50测定是评估化学物质或生物毒素对人类和环境健康风险的重要手段之一。
通过确定一个化学物质或生物毒素对实验动物的致死剂量，可以推断出这种剂量对人类和其他生物可能产生的危害程度。
2. 实验目的本次实验旨在测定某化学品A对小鼠的LD50值，并进一步分析其对人类可能产生的潜在风险。
3. 实验设计与方法3.1 实验设计本次实验采用了经典的“上下限法”来确定化学品A对小鼠的LD50值。
3.2 实验步骤1.随机选择一批同种小鼠，并将其分为不同剂量组和对照组。
2.按照一定的剂量范围，给每个剂量组的小鼠灌胃或注射化学品A。
3.观察每组小鼠在给定时间内的死亡情况，并记录下来。
3.3 数据处理与分析1.统计每个剂量组的死亡率，并根据死亡率绘制出LD50的图表。
2.使用统计学方法计算出化学品A对小鼠的LD50值。
4. 实验结果4.1 死亡情况统计根据实验数据，我们得到了不同剂量组小鼠的死亡情况统计如下：剂量组死亡数总数死亡率低剂量组0 10 0%剂量组死亡数总数死亡率中低剂量组 2 10 20%中高剂量组 5 10 50%高剂量组9 10 90%4.2 LD50值计算根据上述数据，我们可以绘制出LD50曲线，并通过插值法确定化学品A对小鼠的LD50值。
根据计算结果，化学品A的LD50值为xx mg/kg。
5. 风险评估与建议5.1 风险评估通过LD50测定，我们可以初步评估化学品A对人类的潜在风险。
根据人体与小鼠的相似性，我们可以推断出化学品A对人类的LD50值可能在相同数量级上。
5.2 安全建议基于LD50测定结果，我们提出以下安全建议：1.禁止直接接触或摄入高剂量的化学品A。
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半数致死量的意义
测定药物的LD50是药物急性毒性实验的重 要内容。 LD50是恒量药物急性毒性的重要指标。
LD50的测定
一、测定LD50的常用方法：
1. 改良冠氏法：方法简单，计算简便。 2. 序贯法（上下法）：使用动物少，费时多， 不适于作用慢的药物 3. Biss法：设计严谨，结果可靠，是目前公认 的最佳方法，但计算复杂，一般需借助于计 算机或计算器才能进行计算。
100个自然数的随机排列
1 0 10 20 30 40 50 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9
Back
60
70 80 90
26 23 49 51 04 00 58 15 70 64
03 08 34 52 53 27 83 90 63 88
86 20 97 47 98 40 78 57 67 59
37 36 66 83 43 29 23 95 32 64
19 54 65 28 63 05 04 20 89 00
62 81 78 59 48 17 52 68 15 79
47 30 84 92 94 26 71 99 02 08
10 55 61 13 85 33 88 69 87 97
16 86 53 56 80 06 74 67 90 22
86 19 34 69 13 54 26 99 30 22
09 94 96 60 77 01 47 50 55 23
48 73 15 98 06 40 18 88 21 16
53 92 95 85 11 29 58 25 78 83
63 59 28 02 91 42 41 71 56 33
66 00 85 67 76 17 90 14 51 46
3.LD5095％的平均可信限： LD50±4.5×Sx50×LD50 (P=0.95) 说明： Xm：最大剂量组的剂量对数 i：相邻两组对数剂量的差值（大剂量组减小剂 量组） Pm：最大剂量组的死亡率 Pn：最小剂量组的死亡率 P：各组死亡率 n：每组动物数
Summary
• 根据实验情况而定
选择分组组数及剂量比值简表
4.观察： 给药后先密切观察12小时，以后每天观察 1-2次，连续观察7天。 5.饲养： 每组动物应♀♂分笼饲养。 6.记录： 每组动物死亡情况（死亡数、死亡时间、 死亡前症状）；中毒情况（中毒症状、出现时 间、消失时间）。 7. 统计计算： 求出LD50及其95％的可信限。
三、本次实验（自做）
89 70 U=79 20 R=0.034 45 08 30 05 81 62 84
剂量比（1：K）K= LD100/LD0 2左右 = 3左右 4左右 6左右 10左右 14左右 0.6 0.65 3-4组 4-5组 5-6组 6-7组 7组 0.7 0.75 0.8 0.85 0.88
返回
0.9
3-4组 4-5组 5-6组 6-7组
3-4组 4组 4-5组 5组 5-6组 6组 7-8组 8组 9-10组 8-9组 10组
（二） 正式实验： 1.剂量分组： 在预试测得的LD0及LD100的剂量范围，按 等比级数（一般按1：0.75-0.8）分成4-9个剂量 组。 Tab. 2. 动物分组： 一般每组可用10只动物，按均衡随机化原 则将动物分成4-9组。 Tab. 3. 给药： 每组动物按相应的浓度0.2ml/10g给药。
改良冠氏法测定解磷定的LD50及其95％ 的可信限。 1.LD50的计算： 1）最小剂量组的死亡率为0％；最大剂量组的 死亡率为100％时： LD50=lg-1〔Xm-i(∑p-0.5)〕 2）最小剂量组的死亡率大于0％而小于30％， 或（和）最大剂量组死亡率小于100％而大于 70％时： LD50=lg-1〔Xm-i〈∑p –(3-pm-pn)/4 〉〕 2.LD50的标准误：Sx50=i×√(∑p - ∑p2)/(n-1)
73 85 60 66 25 13 94 16 68 29
36 64 88 93 21 22 33 52 61 82
91 35 69 81 06 50 18 75 46 07
84 57 96 48 28 09 45 05 10 11
11 80 41 31 62 71 79 30 87 92
19 43 74 02 85 24 12 79 42 99
二、实验步骤：
（一）预试： 目的：找出LD0及LD100 。 方法： 每组用4只动物，分别给予10倍稀释的药 液0.2ml/10g，再在4/4及0/4组的上下分别按 0.14ml/10g、0.1ml/10g、0.07ml/10g、 0.05ml/10g剂量递减或按0.28ml/10g、0.4ml/10g 的剂量递增，直至找出较可靠的LD0及LD100。
51 U=76 93 34 R=0.0459 79 41 42 11 24 62 39
4
5
6
7
8
9
Back
20
30 40 50 60
70
80 90
44 31 72 80 52 43 07 92 65 39
12 64 03 75 79 36 24 49 57 93
07 61 89 82 04 27 97 74 10 60
76 U=74 72 R=0.0659 01 44 17 39 95 36 65 89
2
0 10 20 30 40 50 60
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
Back
70
80 90
48 96 88 44 14 70 27 60 07 21
73 31 09 25 45 91 75 72 58 50
12 57 03 98 76 46 40 01 35 49
4组 5组 7-8组 9组 10组
5-6组 6-7组 7-8组 6-8组 9组 9组 10组
实验动物的均衡随机分组
Back
1.首先将实验动物按性别分为两组 2.对两组动物分别进行称重、标号 3.按体重对动物进行分层 4.对每层的动物查随机号，Tab. 用随机号除欲 分组数，按余数进入相应的组。 5.依次分完全部动物后，再进行调节，使各组 动物数相等。