牛肉膏蛋白胨琼脂培养基配制步骤审批稿
实验法二 牛肉膏蛋白胨培养基的制备
实验二牛肉膏蛋白胨培养基的制备与灭菌实验目的:掌握培养基的配制原则与方法;熟悉高压灭菌器的使用方法和注意事项;实验材料:器材:试管、三角瓶、烧杯、量筒、玻璃棒天平、牛角匙、高压蒸汽灭菌锅等。
试剂:牛肉膏、蛋白胨、NaCl、葡萄糖、琼脂等实验原理:培养基是人工按一定比例配制的供微生物生长繁殖和合成代谢产物所需要的营养物质的混合物。
牛肉膏提供碳源和能源;蛋白胨主要提供氮源;NaCl提供无机盐;根据微生物的种类和实验目的不同,培养基要选择合适的配比关系;选择合适的理化性质;配后要及时灭菌。
牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称为普通培养基。
由于这种培养基中含有一般细胞生长繁殖所需要的最基本的营养物质,所以可供细菌生长繁殖之用。
高压蒸汽灭菌方法主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生物的效果。
实验内容:1.牛肉膏蛋白胨培养基的制备(1)计算根据配方计算出实验中各种药品所需要的量,然后再分别称量。
(2)称量准确称取各种成分。
牛肉膏3g、蛋白胨10g、NaCl5g、葡萄糖2g、琼脂18-20g、蒸馏水1000ml (3)溶解向烧杯内加入所需的水量,将牛肉膏用水洗下后,取出硫酸纸弃去。
加热搅拌全溶后稍放冷。
(4)调pH值用酸度计或精密pH试纸测定其pH值,并用10%NaOH和10%盐酸调至所需pH=7-8值,一般比要求的pH高出0.2,因为高压蒸汽灭菌后,pH常降低。
(5)分装根据不同需要,可将配好的培养基分装入配有棉塞的试管或三角瓶内。
如液体培养基,应装试管高度的1/3或1/2左右;固体培养基装试管高度的1/5左右;装入三角瓶的量以三角瓶容量的一半为限(250ml-300ml)。
(6)包扎试管扎成捆。
试管和三角瓶的棉塞外用硫酸纸和牛皮纸包扎,纸上表明培养基的名称、配制日期等。
(7)灭菌培养基用0.1Mpa(15lb/in2)高压蒸汽灭菌15~20min,2.培养基的高压蒸汽灭菌灭菌原理:水的沸点可随压力的增加而提高,当高压蒸汽灭菌锅中水煮沸时,因锅是密闭的,蒸汽不能溢出,而使压力增加,水的沸点和温度也随之增加。
牛肉膏蛋白胨培养基配方
牛肉膏蛋白胨培养基配方:牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称为普通培养基。
它含有牛肉膏、蛋白胨和NaCl。
其中牛肉膏为微生物提供碳源和能源,磷酸盐、蛋白胨主要提供氮源,而NaCl提供无机盐。
在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂。
琼脂在常用浓度下96℃时溶化,一般实际应用时在沸水浴中或下面垫以石棉网煮沸溶化,以免琼脂烧焦。
琼脂在40℃时凝固,通常不被微生物分解利用。
固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的不同而有所不同。
由于这种培养基多用于培养细菌(荤食),因此,要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性,以利于细菌的生长繁殖。
牛肉膏蛋白胨培养基的配方如下:牛肉膏3g、蛋白胨10g、NaCl5g、琼脂15—20g、水1000ml、pH7.4—7.6(7.0—8.0)三、器材牛肉膏,蛋白胨, NaCl,琼脂;1mol/LNaOH,1mol/L HCl;试管,三角烧瓶,烧杯,量筒,玻棒,培养基分装器,扭力天平,牛角匙,高压蒸汽灭菌锅,pH试纸(pH5.5—9.0),棉花,牛皮纸,记号笔,麻绳,纱布等。
四、操作步骤1.称量按培养基配方比例依次准确地称取牛肉膏、蛋白胨、NaCl放入烧杯中。
牛肉膏常用玻棒挑取,放在小烧杯或表面皿中称量,用热水溶化后倒入烧杯。
也可放在称量纸上,称量后直接放入水中,这时如稍微加热,牛肉膏便会与称量纸分离,然后立即取出纸片。
蛋白胨很易吸潮,在称取时动作要迅速。
另外,称药品时严防药品混杂,一把牛角匙用于一种药品,或称取一种药品后,洗净、擦干,再称取另一药品,瓶盖也不要盖错。
2.溶化在上述烧杯中可先加入少于所需要的水量,用玻棒搅匀,然后,在石棉网上加热使其溶解。
待药品完全溶解后,补充水分到所需的总体积。
如果配制固体培养基,将称好的琼脂放入已溶化的药品中,再加热溶化,在琼脂溶化的过程中,需不断搅拌,以防琼脂糊底使烧杯破裂。
最后补足所失的水分。
3.调pH在未调pH前,先用精密pH试纸测量培养基的原始pH值,如果pH偏酸,用滴管向培养基中逐滴加入1mol/L NaOH,边加边搅拌,并随时用pH试纸测其pH值,直至pH达7.6。
牛肉膏蛋白胨培养基配方
实验三牛肉膏蛋白胨培养基的制备、微生物的分离与纯化实验目的:掌握培养基的配制原则与方法;掌握划线分离纯化微生物的原理与方法熟悉手提式高压灭菌器的使用方法和注意事项;实验材料:器材:试管、三角瓶、烧杯、量筒、玻璃棒天平、牛角匙、高压蒸汽灭菌锅等。
试剂:牛肉膏、蛋白胨、NaCI、琼脂等实验原理:培养基是人工按一定比例配制的供微生物生长繁殖和合成代谢产物所需要的营养物质的混合物。
培养基的原材料可分为碳源、氮源、无机盐、生长因素、能源和水。
根据微生物的种类和实验目的不同,培养基要选择合适的配比关系;选择合适的理化性质;配后要及时灭菌。
牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称为普通培养基。
由于这种培养基中含有一般细胞生长繁殖所需要的最基本的营养物质,所以可供细菌生长繁殖之用。
高压蒸汽灭菌方法主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生物的效果。
从混杂的微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物的分离与纯化。
常用的分离、纯化方法:单细胞挑取法,稀释涂布平板法,稀释混合平板法,平板划线法等实验内容:1.牛肉膏蛋白胨培养基的制备(1)计算根据配方计算出实验中各种药品所需要的量,然后再分别称量。
(2)称量准确称取各种成分。
一些不易称量的成分如牛肉膏,可用玻璃棒取出放硫酸纸上称量,然后连同硫酸纸一起放入烧杯中。
(3)溶解向烧杯内加入所需的水量,将牛肉膏用水洗下后,取出硫酸纸弃去。
加热搅拌全溶后稍放冷。
(4)调pH值用酸度计或精密pH试纸测定其pH值,并用10% NaOH调至所需pH值,必要时用滤纸或脱脂棉过滤。
一般比要求的pH高出0.2, 因为高压蒸汽灭菌后, pH 常降低。
(5)分装根据不同需要,可将配好的培养基分装入配有棉塞的试管或三角瓶内(附图 1-1)。
注意分装时避免培养基挂在瓶口或管口上引起杂菌污染。
如液体培养基,应装试管高度的 1/4 左右;固体培养基装试管高度的 1/5左右;装入三角瓶的量以三角瓶容量的一半为限。
牛肉膏蛋白胨培养基的配制与灭菌
将已融化的培养基瓶身擦干净,转移入工作台; 待培养基冷却至50°C左右(不烫手为原则,但是 不可冷却过度),倒平板。
第四十当前一4页1页,,共共5五5页十,五星期页日。。
平板要求:平板平整,无凸起;平板无“挂壁”;培养基布 满整个平皿 倒平板操作视频
第四十二页,当前共42页五,共十55五页,页星期。日。
第五十二页,当前共52页五,共十55五页,页星期。日。
斜面培养基接种法
将已灭菌且已冷却的接种环伸入菌种管内, 从斜面上轻轻挑取少量菌苔退出菌种管。 再伸进待接种的培养基管,进行斜面培养 基接种,从斜面底部轻轻向顶端弯曲划线, 不要触破培养基表面。
第五十当前三5页3页,,共共5五5页十,五星期页日。。
第二十八当页前2,8页共,共五55十页,五星页期日。。
7.微量移液器的使用
第二十当前九2页9页,,共共5五5页十,五星期页日。。
今天的工作:
1.固体物品的灭菌 2.配制培养基并进行灭菌 3.学习倒平板 4.学习斜面培养基制作 5.超净台的准备 6.划线接种 7.灭菌效果检查
第三十页,当前共30页五,共十55五页,页星期日。。
无菌
第十当前三1页3页,,共共5五5页十,五星期页日。。
消毒灭菌方法:
(一)干热灭菌法 (二)湿热灭菌法 (三)过滤除菌 (四)紫外线杀菌 (五)药物杀菌
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▪ (一)干热灭菌法
▪ 1.火焰灭菌法
▪ 2.热空气灭菌法
▪ 140~160℃2~3h
当第前十15五页页,共,5共5页五,十星五期页日。。
1
微生物吃什么?
2 微生物长的什么样?
培养基的制备实验报告
一、实验目的1. 掌握培养基的基本制备原理和方法。
2. 学会牛肉膏蛋白胨培养基的配制过程。
3. 了解培养基灭菌的重要性及常用灭菌方法。
4. 熟悉实验室无菌操作的基本规范。
二、实验原理培养基是微生物生长繁殖的营养基质,主要由碳源、氮源、无机盐、生长因素和水等成分组成。
根据微生物的种类和实验目的,培养基可以有不同的配方和种类。
牛肉膏蛋白胨培养基是一种常用的细菌基础培养基,适用于培养大多数细菌。
三、实验材料与仪器实验材料:- 牛肉膏- 蛋白胨- 氯化钠- 琼脂- 蒸馏水- pH试纸- 灭菌棉塞- 高压蒸汽灭菌锅- 三角瓶- 烧杯- 量筒- 移液管- 玻璃棒- 培养皿- 等等。
四、实验步骤1. 称量:根据牛肉膏蛋白胨培养基的配方,准确称取牛肉膏、蛋白胨、氯化钠等成分。
2. 溶解:将称量好的牛肉膏、蛋白胨等成分放入烧杯中,加入适量的蒸馏水,用玻璃棒搅拌使其充分溶解。
3. 调整pH值:用pH试纸测定溶液的pH值,根据需要加入适量的1M盐酸或氢氧化钠溶液调整pH值至7.2-7.6。
4. 灭菌:将溶解好的培养基转移至三角瓶中,加入灭菌棉塞,用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌,灭菌时间为15-20分钟。
5. 冷却:灭菌后,待培养基冷却至50-60℃,加入适量的琼脂,充分搅拌使其溶解。
6. 分装:将冷却后的培养基分装至培养皿中,待凝固后备用。
7. 无菌操作:在无菌操作条件下,用移液管吸取适量的菌液,接种至培养基中。
五、实验结果与分析1. 培养基制备:成功制备了牛肉膏蛋白胨培养基,颜色呈淡黄色,透明度高。
2. 灭菌效果:通过高压蒸汽灭菌,确保了培养基的无菌状态,避免了微生物污染。
3. 接种结果:接种后,培养基上出现了菌落生长,表明培养基对细菌具有良好的培养效果。
六、实验讨论1. 在培养基的制备过程中,称量、溶解、调整pH值等步骤对培养基的质量至关重要,应严格按照实验步骤进行操作。
2. 灭菌是防止培养基污染的关键环节,应选择合适的灭菌方法,确保灭菌效果。
配置牛肉膏蛋白胨培养基的操作步骤
配置牛肉膏蛋白胨培养基的操作步骤
嘿,朋友们!今天咱就来讲讲怎么配置牛肉膏蛋白胨培养基,这可是个很有趣的事儿呢!
先准备好各种材料,就像厨师做菜前要把食材都备好一样。
你得有牛肉膏,这可是培养基的重要成分,就像菜里的盐,少了它可不行。
还有蛋白胨,那也是宝贝呀,能给微生物提供丰富的营养。
然后就是氯化钠,就像是给培养基加点味道。
再加上琼脂,这琼脂啊,就像是给微生物搭个小房子,让它们能舒舒服服地待着。
接下来,就是动手操作啦!把这些材料按照一定的比例放到水里,就像是调一碗特别的汤。
这可不是随便搅和搅和就行的,得仔细点,不然比例不对,培养基可就不完美啦。
然后,把这锅“汤”放到火上加热,让它们慢慢融合在一起。
看着它们咕嘟咕嘟地冒泡,你是不是觉得很有意思呀?就好像在看着一群小精灵在跳舞。
等它们都融合好了,就可以分装啦。
把这热乎乎的培养基分到一个个小瓶子或者培养皿里,可别洒出来哦,就像给小朋友分糖果一样,要公平公正。
然后把它们盖好盖子,就等着它们冷却凝固啦。
凝固后的培养基,就像是一个个小蛋糕,等待着微生物们来大快朵颐。
你想想,那些小小的微生物在上面快乐地生长,是不是很神奇?
这配置牛肉膏蛋白胨培养基呀,说难也不难,说简单也不简单。
就好像骑自行车,一开始可能会摇摇晃晃,但多练几次就熟练啦。
你只要认真去做,肯定能成功的。
而且当你看到自己配置的培养基培养出了好多微生物,那种成就感,简直没法形容!
所以呀,别害怕,大胆去尝试吧!让我们一起在微生物的世界里遨游,感受科学的魅力!。
牛肉膏蛋白胨培养基配方
牛肉膏蛋白胨培养基配方:牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称为普通培养基.它含有牛肉膏、蛋白胨和NaCl.其中牛肉膏为微生物提供碳源和能源,磷酸盐、蛋白胨主要提供氮源,而NaCl提供无机盐。
在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂。
琼脂在常用浓度下96℃时溶化,一般实际应用时在沸水浴中或下面垫以石棉网煮沸溶化,以免琼脂烧焦。
琼脂在40℃时凝固,通常不被微生物分解利用.固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的不同而有所不同。
由于这种培养基多用于培养细菌(荤食),因此,要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性,以利于细菌的生长繁殖.牛肉膏蛋白胨培养基的配方如下:牛肉膏3g、蛋白胨10g、NaCl 5g、琼脂15—20g、水1000ml、pH 7.4-7.6(7.0-8。
0)三、器材牛肉膏,蛋白胨, NaCl,琼脂;1mol/L NaOH,1mol/L HCl;试管,三角烧瓶,烧杯,量筒,玻棒,培养基分装器,扭力天平,牛角匙,高压蒸汽灭菌锅,pH试纸( pH 5.5—9.0),棉花,牛皮纸,记号笔,麻绳,纱布等。
四、操作步骤1.称量按培养基配方比例依次准确地称取牛肉膏、蛋白胨、NaCl放入烧杯中。
牛肉膏常用玻棒挑取,放在小烧杯或表面皿中称量,用热水溶化后倒入烧杯。
也可放在称量纸上,称量后直接放入水中,这时如稍微加热,牛肉膏便会与称量纸分离,然后立即取出纸片。
蛋白胨很易吸潮,在称取时动作要迅速。
另外,称药品时严防药品混杂,一把牛角匙用于一种药品,或称取一种药品后,洗净、擦干,再称取另一药品,瓶盖也不要盖错。
2.溶化在上述烧杯中可先加入少于所需要的水量,用玻棒搅匀,然后,在石棉网上加热使其溶解。
待药品完全溶解后,补充水分到所需的总体积。
如果配制固体培养基,将称好的琼脂放入已溶化的药品中,再加热溶化,在琼脂溶化的过程中,需不断搅拌,以防琼脂糊底使烧杯破裂。
最后补足所失的水分。
牛肉膏蛋白胨培养基配方
牛肉膏蛋白胨培养基配方:牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称为普通培养基.它含有牛肉膏、蛋白胨和NaCl.其中牛肉膏为微生物提供碳源和能源,磷酸盐、蛋白胨主要提供氮源,而NaCl提供无机盐。
在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂。
琼脂在常用浓度下96℃时溶化,一般实际应用时在沸水浴中或下面垫以石棉网煮沸溶化,以免琼脂烧焦。
琼脂在40℃时凝固,通常不被微生物分解利用.固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的不同而有所不同。
由于这种培养基多用于培养细菌(荤食),因此,要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性,以利于细菌的生长繁殖.牛肉膏蛋白胨培养基的配方如下:牛肉膏3g、蛋白胨10g、NaCl 5g、琼脂15—20g、水1000ml、pH 7.4-7.6(7.0-8。
0)三、器材牛肉膏,蛋白胨, NaCl,琼脂;1mol/L NaOH,1mol/L HCl;试管,三角烧瓶,烧杯,量筒,玻棒,培养基分装器,扭力天平,牛角匙,高压蒸汽灭菌锅,pH试纸( pH 5.5—9.0),棉花,牛皮纸,记号笔,麻绳,纱布等。
四、操作步骤1.称量按培养基配方比例依次准确地称取牛肉膏、蛋白胨、NaCl放入烧杯中。
牛肉膏常用玻棒挑取,放在小烧杯或表面皿中称量,用热水溶化后倒入烧杯。
也可放在称量纸上,称量后直接放入水中,这时如稍微加热,牛肉膏便会与称量纸分离,然后立即取出纸片。
蛋白胨很易吸潮,在称取时动作要迅速。
另外,称药品时严防药品混杂,一把牛角匙用于一种药品,或称取一种药品后,洗净、擦干,再称取另一药品,瓶盖也不要盖错。
2.溶化在上述烧杯中可先加入少于所需要的水量,用玻棒搅匀,然后,在石棉网上加热使其溶解。
待药品完全溶解后,补充水分到所需的总体积。
如果配制固体培养基,将称好的琼脂放入已溶化的药品中,再加热溶化,在琼脂溶化的过程中,需不断搅拌,以防琼脂糊底使烧杯破裂。
最后补足所失的水分。
牛肉膏蛋白胨培养基配方
牛肉膏蛋白胨培养基配方
配方:
1.牛肉膏粉:10克
2.蛋白胨:10克
3.氯化钠:5克
4.水:1000毫升
制备过程:
1.将牛肉膏粉、蛋白胨和氯化钠加入烧杯中。
2.加入适量的水,充分搅拌,直到完全溶解。
3.将溶液转移到一个大容量瓶中。
4.加入适量的水,使总体积达到1000毫升。
5.用盖子或气密塞封闭瓶口,避免细菌的污染。
6.将培养基在121摄氏度的高压灭菌器中高压灭菌20分钟。
7.灭菌后,将培养基冷却至室温,并存储在4摄氏度的冰箱中。
牛肉膏蛋白胨培养基是一种富含营养物质的培养基,适用于广泛的细菌种类。
牛肉膏提供了蛋白质、胆碱和其他有机物质,支持细菌的生长。
蛋白胨是由动物和植物的蛋白质消化得到的营养物质,富含氨基酸,可提供能量和生长因子。
氯化钠提供细菌所需的离子平衡。
制备好的牛肉膏蛋白胨培养基可用于分离和培养广谱细菌。
在培养细菌时,可以向培养基中添加其他适当的抗生素或指示剂来选择特定的细菌
菌种。
此外,还可以向培养基中添加其他营养物质,如血清、糖类、氨基酸等,以增强培养基的适用性,满足特定细菌的生长需求。
总结:
牛肉膏蛋白胨培养基是一种常用的细菌培养基,它以富含营养的牛肉膏和蛋白胨为基础,提供了细菌所需的能量、氨基酸和生长因子。
配方简单,制备过程相对简单,适用于广泛的细菌菌种的培养。
根据具体的实验需求,可以对配方进行适当的修改和补充,以提高培养基的适用性和选择性。
简述牛肉膏蛋白胨培养基制备的基本流程
简述牛肉膏蛋白胨培养基制备的基本流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。
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制备培养基实验报告
一、实验目的1. 掌握培养基的制备原理和方法。
2. 了解不同类型培养基的配制过程和用途。
3. 掌握高压蒸汽灭菌的操作步骤。
4. 体验无菌操作技术,确保实验结果的准确性。
二、实验原理培养基是人工配制的供微生物生长繁殖和合成代谢产物所需要的营养物质的混合物。
根据微生物的营养需求和实验目的,培养基可以含有碳源、氮源、无机盐、生长因素和水等成分。
不同类型的培养基适用于培养不同的微生物。
三、实验材料1. 培养基原料:牛肉膏、蛋白胨、琼脂、葡萄糖、酵母提取物、氯化钠等。
2. 器材:三角瓶、烧杯、量筒、玻璃棒、pH试纸、高压蒸汽灭菌锅、无菌操作台等。
四、实验步骤1. 培养基配制1.1 称取牛肉膏、蛋白胨、葡萄糖、酵母提取物、氯化钠等原料,按照一定比例溶解于去离子水中。
1.2 将溶解后的溶液转移至三角瓶中,用玻璃棒搅拌均匀。
1.3 调整培养基的pH值至适宜范围(一般为7.0-7.6)。
1.4 将三角瓶置于高压蒸汽灭菌锅中,进行高压蒸汽灭菌,温度为121℃,压力为0.1MPa,时间为15分钟。
1.5 灭菌后,将培养基冷却至室温。
2. 平板制备2.1 将灭菌后的培养基倒入平板模具中,使其均匀分布。
2.2 将平板模具置于室温下冷却凝固。
2.3 将平板翻转,放置于无菌操作台上。
3. 无菌操作3.1 在无菌操作台中,用无菌接种环取适量菌种,接种于平板培养基上。
3.2 用无菌接种环在平板培养基上划线,形成菌落。
3.3 将接种好的平板置于适宜的温度和湿度条件下培养。
五、实验结果1. 通过高压蒸汽灭菌,制备的培养基均无菌,可用于微生物培养。
2. 在适宜的温度和湿度条件下培养,平板培养基上出现单菌落。
六、实验讨论1. 培养基的制备是微生物实验的基础,掌握培养基的制备原理和方法对于微生物实验的成功至关重要。
2. 高压蒸汽灭菌是保证培养基无菌的关键步骤,操作过程中要注意密封、压力和时间等因素。
3. 无菌操作是微生物实验的重要环节,要严格按照无菌操作规范进行。
牛肉膏蛋白胨培养基配方
牛肉膏蛋白胨培养基配方:之邯郸勺丸创作牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称为普通培养基.它含有牛肉膏、蛋白胨和NaCl.其中牛肉膏为微生物提供碳源和能源,磷酸盐、蛋白胨主要提供氮源,而NaCl提供无机盐.在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂.琼脂在经常使用浓度下96℃时溶化,一般实际应用时在滚水浴中或下面垫以石棉网煮沸溶化,以免琼脂烧焦.琼脂在40℃时凝固,通常不被微生物分化利用.固体培养基中琼脂的含量按照琼脂的质量和气温的不合而有所不合.由于这种培养基多用于培养细菌(荤食),因此,要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性,以利于细菌的生长繁衍.牛肉膏蛋白胨培养基的配方如下:牛肉膏 3g、蛋白胨 10g、NaCl 5g、琼脂 15—20g、水1000ml、pH 7.4—7.6(7.0—8.0)三、器材牛肉膏,蛋白胨, NaCl,琼脂;1mol/L NaOH, 1mol/L HCl;试管,三角烧瓶,烧杯,量筒,玻棒,培养基分装器,扭力天平,牛角匙,高压蒸汽灭菌锅,pH试纸( pH 5.5—9.0),棉花,牛皮纸,记号笔,麻绳,纱布等.四、操纵步调1.称量按培养基配方比例依次准确地称取牛肉膏、蛋白胨、NaCl放入烧杯中.牛肉膏经常使用玻棒挑取,放在小烧杯或概略皿中称量,用热水溶化后倒入烧杯.也可放在称量纸上,称量后直接放入水中,这时如稍微加热,牛肉膏便会与称量纸别离,然后立即取出纸片.蛋白胨很易吸潮,在称取时动作要迅速.另外,称药品时严防药品混杂,一把牛角匙用于一种药品,或称取一种药品后,洗净、擦干,再称取另一药品,瓶盖也不要盖错.2.溶化在上述烧杯中可先加入少于所需要的水量,用玻棒搅匀,然后,在石棉网上加热使其溶解.待药品完全溶解后,弥补水分到所需的总体积.如果配制固体培养基,将称好的琼脂放入已溶化的药品中,再加热溶化,在琼脂溶化的过程中,需不竭搅拌,以防琼脂糊底使烧杯破裂.最后补足所失的水分.3.调pH在未调pH前,先用精密pH试纸丈量培养基的原始pH值,如果pH 偏酸,用滴管向培养基中逐滴加入1mol/L NaOH,边加边搅拌,并随时用pH试纸测其pH值,直至pH达7.6.反之,则用1mol/L HCl 进行调节.注意pH值不要调过头,以避免回调,不然,将会影响培养基内各离子的浓度.对于有些要求pH值较精确的微生物,其pH的调节可用酸度计进行(使用办法,可参考有关说明书).4.过滤趁热用滤纸或多层纱布过滤,以利结果的不雅察.一般无特殊要求的情况下,这一步可以省去(本实验无需过滤).5.分装按实验要求,可将配制的培养基分装入试管内或三角烧瓶内.分装装置见图Ⅴ-1.分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上,以免沾污棉塞而引起污染.(1)液体分装分装高度以试管高度的1/4左右为宜.(2)固体分装分装试管,其装量不超出管高的1/5,灭菌后制成斜面,如图Ⅴ-2.分装三角烧瓶的量以不超出三角烧瓶容积的一半为宜. (3)半固体分装试管一般以试管高度的1/3为宜,灭菌后垂直待凝. 6.加塞培养基分装完毕后,在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞,以阻止外界微生物进入培养基内而造成污染,并包管有良好的通气性能(棉塞制作办法附本实验后面).7.包扎加塞后,将全部试管用麻绳捆扎好,再在棉塞外包一层牛皮纸,以避免灭菌时冷凝水润湿棉塞,其外再用一道麻绳扎好.用记号笔注明培养基名称、组别、日期.三角烧瓶加塞后,外包牛皮纸,用麻绳以活结形式扎好,使用时容易解开,同样用记号笔注明培养基名称、组别、日期.8.灭菌将上述培养基以1.05kg/cm2(15磅/英寸2),121.3℃, 20分钟高压蒸汽灭菌.如因特殊情况不克不及及时灭菌,则应放入冰箱内暂存.9.放置斜面将灭菌的试管培养基冷至50℃左右,将试管棉塞端搁在玻棒上,放置的斜面长度以不超出试管总长的一半为宜.10.无菌检查将灭菌的培养基放入37℃的温室中培养24—48小时,以检查灭菌是否完全.PDA培养基配方:特点及用途PDA培养基是人们对马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称,即Potato Dextrose Agar (Medium),依次对应马铃薯、葡萄糖、琼脂的英文.一种经常使用的培养基,宜培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌(素食).酵母菌PH(3.8~6.0),霉菌(4.0~5.8)等.按物理性状划分:固体培养基,按培养基成分划分:半合成培养基配方马铃薯 200克葡萄糖 20克琼脂 15~20克自来水 1000毫升自然PH配制步调其做法是称取200g马铃薯,洗净去皮切成小块,加水煮烂(煮沸20~30分钟,能被玻璃棒戳破即可),用四层纱布过滤,再据实际实验需要加葡萄糖和琼脂,继续加热搅拌混匀,稍冷却后再补足水分至1000毫升,分装试管,加塞、包扎,(121℃)灭菌20分钟左右后取出试管摆斜面,冷却后贮存备用.其他事项1.培养基经灭菌后,必须放在37C温箱培养24h,无菌生长者方可使用.2.PDA培养基一般不需要调pH.对于要调节pH的培养基,一般用pH试纸测定其pH.如果培养基偏酸或偏碱时,可用lmol/LNaOH或lmol/LHCL溶液进行调节.调节时应逐滴加入NaOH或HCl溶液,避免局部过酸或过碱破坏培养基成分.3.培养基在使用时也可以做成不含琼脂的液体培养基,用于菌类的震荡培养.4.培养基也可以加入氯霉素或土霉素,加入量为0.1g/L培养基,主要是为了抑制细菌的生长,减少搅扰性高氏1号培养及配方:培养放线菌用 ,改进的高氏可溶性淀粉2g ,KNO3 0.1g ,K2HPO4 0.05g ,MgSO4• 7H2O0.05g ,NaCl 0.05g ,FeSO4• 7H2O 0.001g (母液),琼脂 2g ,自来水 100mL ,pH 7.2~7.4 ,灭菌 1.05kg/cm2,20min。
牛肉膏蛋白胨培养基配方
牛肉膏蛋白胨培养基配方:牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称为普通培养基。
它含有牛肉膏、蛋白胨和Na Cl。
其中牛肉膏为微生物提供碳源和能源,磷酸盐、蛋白胨主要提供氮源,而NaCl提供无机盐。
在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂。
琼脂在常用浓度下96℃时溶化,一般实际应用时在沸水浴中或下面垫以石棉网煮沸溶化,以免琼脂烧焦。
琼脂在40℃时凝固,通常不被微生物分解利用。
固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的不同而有所不同。
由于这种培养基多用于培养细菌(荤食),因此,要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性,以利于细菌的生长繁殖。
牛肉膏蛋白胨培养基的配方如下:牛肉膏3g、蛋白胨10g、NaCl 5g、琼脂15—20g、水 1000ml、pH 7.4—7.6(7.0—8.0)三、器材牛肉膏,蛋白胨,NaCl,琼脂;1mol/L NaOH,1mol/L HCl;试管,三角烧瓶,烧杯,量筒,玻棒,培养基分装器,扭力天平,牛角匙,高压蒸汽灭菌锅,pH试纸(pH 5.5—9.0),棉花,牛皮纸,记号笔,麻绳,纱布等。
四、操作步骤1.称量按培养基配方比例依次准确地称取牛肉膏、蛋白胨、NaCl放入烧杯中。
牛肉膏常用玻棒挑取,放在小烧杯或表面皿中称量,用热水溶化后倒入烧杯。
也可放在称量纸上,称量后直接放入水中,这时如稍微加热,牛肉膏便会与称量纸分离,然后立即取出纸片。
蛋白胨很易吸潮,在称取时动作要迅速。
另外,称药品时严防药品混杂,一把牛角匙用于一种药品,或称取一种药品后,洗净、擦干,再称取另一药品,瓶盖也不要盖错。
2.溶化在上述烧杯中可先加入少于所需要的水量,用玻棒搅匀,然后,在石棉网上加热使其溶解。
待药品完全溶解后,补充水分到所需的总体积。
牛肉膏蛋白胨培养基配方
牛肉膏蛋白胨培养基配方:牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称为普通培养基.它含有牛肉膏、蛋白胨和NaCl.其中牛肉膏为微生物提供碳源和能源,磷酸盐、蛋白胨主要提供氮源,而NaCl提供无机盐。
在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂。
琼脂在常用浓度下96℃时溶化,一般实际应用时在沸水浴中或下面垫以石棉网煮沸溶化,以免琼脂烧焦。
琼脂在40℃时凝固,通常不被微生物分解利用.固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的不同而有所不同。
由于这种培养基多用于培养细菌(荤食),因此,要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性,以利于细菌的生长繁殖.牛肉膏蛋白胨培养基的配方如下:牛肉膏3g、蛋白胨10g、NaCl 5g、琼脂15—20g、水1000ml、pH 7.4-7.6(7.0-8。
0)三、器材牛肉膏,蛋白胨, NaCl,琼脂;1mol/L NaOH,1mol/L HCl;试管,三角烧瓶,烧杯,量筒,玻棒,培养基分装器,扭力天平,牛角匙,高压蒸汽灭菌锅,pH试纸( pH 5.5—9.0),棉花,牛皮纸,记号笔,麻绳,纱布等。
四、操作步骤1.称量按培养基配方比例依次准确地称取牛肉膏、蛋白胨、NaCl放入烧杯中。
牛肉膏常用玻棒挑取,放在小烧杯或表面皿中称量,用热水溶化后倒入烧杯。
也可放在称量纸上,称量后直接放入水中,这时如稍微加热,牛肉膏便会与称量纸分离,然后立即取出纸片。
蛋白胨很易吸潮,在称取时动作要迅速。
另外,称药品时严防药品混杂,一把牛角匙用于一种药品,或称取一种药品后,洗净、擦干,再称取另一药品,瓶盖也不要盖错。
2.溶化在上述烧杯中可先加入少于所需要的水量,用玻棒搅匀,然后,在石棉网上加热使其溶解。
待药品完全溶解后,补充水分到所需的总体积。
如果配制固体培养基,将称好的琼脂放入已溶化的药品中,再加热溶化,在琼脂溶化的过程中,需不断搅拌,以防琼脂糊底使烧杯破裂。
最后补足所失的水分。
牛肉膏蛋白胨培养基配方
牛肉膏蛋白胨培养基配方:牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通地细菌基础培养基,有时又称为普通培养基.它含有牛肉膏、蛋白胨和.其中牛肉膏为微生物提供碳源和能源,磷酸盐、蛋白胨主要提供氮源,而提供无机盐.在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂.琼脂在常用浓度下℃时溶化,一般实际应用时在沸水浴中或下面垫以石棉网煮沸溶化,以免琼脂烧焦.琼脂在℃时凝固,通常不被微生物分解利用.固体培养基中琼脂地含量根据琼脂地质量和气温地不同而有所不同.由于这种培养基多用于培养细菌(荤食),因此,要用稀酸或稀碱将其调至中性或微碱性,以利于细菌地生长繁殖.牛肉膏蛋白胨培养基地配方如下:牛肉膏、蛋白胨、、琼脂—、水、.—.(—)三、器材牛肉膏,蛋白胨,,琼脂;,;试管,三角烧瓶,烧杯,量筒,玻棒,培养基分装器,扭力天平,牛角匙,高压蒸汽灭菌锅,试纸(.—.),棉花,牛皮纸,记号笔,麻绳,纱布等.四、操作步骤.称量按培养基配方比例依次准确地称取牛肉膏、蛋白胨、放入烧杯中.牛肉膏常用玻棒挑取,放在小烧杯或表面皿中称量,用热水溶化后倒入烧杯.也可放在称量纸上,称量后直接放入水中,这时如稍微加热,牛肉膏便会与称量纸分离,然后立即取出纸片.蛋白胨很易吸潮,在称取时动作要迅速.另外,称药品时严防药品混杂,一把牛角匙用于一种药品,或称取一种药品后,洗净、擦干,再称取另一药品,瓶盖也不要盖错..溶化在上述烧杯中可先加入少于所需要地水量,用玻棒搅匀,然后,在石棉网上加热使其溶解.待药品完全溶解后,补充水分到所需地总体积.如果配制固体培养基,将称好地琼脂放入已溶化地药品中,再加热溶化,在琼脂溶化地过程中,需不断搅拌,以防琼脂糊底使烧杯破裂.最后补足所失地水分..调在未调前,先用精密试纸测量培养基地原始值,如果偏酸,用滴管向培养基中逐滴加入,边加边搅拌,并随时用试纸测其值,直至达..反之,则用进行调节.注意值不要调过头,以避免回调,否则,将会影响培养基内各离子地浓度.对于有些要求值较精确地微生物,其地调节可用酸度计进行(使用方法,可参考有关说明书). .过滤趁热用滤纸或多层纱布过滤,以利结果地观察.一般无特殊要求地情况下,这一步可以省去(本实验无需过滤)..分装按实验要求,可将配制地培养基分装入试管内或三角烧瓶内.分装装置见图Ⅴ.分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上,以免沾污棉塞而引起污染.()液体分装分装高度以试管高度地左右为宜.()固体分装分装试管,其装量不超过管高地,灭菌后制成斜面,如图Ⅴ.分装三角烧瓶地量以不超过三角烧瓶容积地一半为宜.()半固体分装试管一般以试管高度地为宜,灭菌后垂直待凝..加塞培养基分装完毕后,在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞,以阻止外界微生物进入培养基内而造成污染,并保证有良好地通气性能(棉塞制作方法附本实验后面)..包扎加塞后,将全部试管用麻绳捆扎好,再在棉塞外包一层牛皮纸,以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞,其外再用一道麻绳扎好.用记号笔注明培养基名称、组别、日期.三角烧瓶加塞后,外包牛皮纸,用麻绳以活结形式扎好,使用时容易解开,同样用记号笔注明培养基名称、组别、日期..灭菌将上述培养基以.(磅英寸),.℃,分钟高压蒸汽灭菌.如因特殊情况不能及时灭菌,则应放入冰箱内暂存..搁置斜面将灭菌地试管培养基冷至℃左右,将试管棉塞端搁在玻棒上,搁置地斜面长度以不超过试管总长地一半为宜..无菌检查将灭菌地培养基放入℃地温室中培养—小时,以检查灭菌是否彻底.培养基配方:特点及用途培养基是人们对马铃薯葡萄糖琼脂培养基地简称,即(),依次对应马铃薯、葡萄糖、琼脂地英文.一种常用地培养基,宜培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌(素食).酵母菌(),霉菌()等.按物理性状划分:固体培养基,按培养基成分划分:半合成培养基配方马铃薯克葡萄糖克琼脂克自来水毫升自然配制步骤其做法是称取马铃薯,洗净去皮切成小块,加水煮烂(煮沸分钟,能被玻璃棒戳破即可),用四层纱布过滤,再据实际实验需要加葡萄糖和琼脂,继续加热搅拌混匀,稍冷却后再补足水分至毫升,分装试管,加塞、包扎,(℃)灭菌分钟左右后取出试管摆斜面,冷却后贮存备用. Zzz6Z。
牛肉膏蛋白胨培养基制备流程
牛肉膏蛋白胨培养基制备流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。
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简述牛肉膏蛋白胨培养基制备的基本流程
简述牛肉膏蛋白胨培养基制备的基本流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。
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牛肉膏蛋白胨琼脂培养基配制步骤
牛肉膏蛋白胨琼脂培养基配制步骤(总1页)-CAL-FENGHAI.-(YICAI)-Company One1-CAL-本页仅作为文档封面,使用请直接删除牛肉膏蛋白胨琼脂培养基配制步骤牛肉膏蛋白胨琼脂培养基这是一种应用十分广泛的天然培养基,其中的牛肉膏为微生物提供碳源、磷酸盐和维生素,蛋白胨主要提供氮源和维生素,而NaCl提供无机盐。
配制具体步骤1.称量按培养基配方比例依次准确地称取牛肉膏、蛋白胨、NaCl放入烧杯中。
牛肉膏常用玻棒挑取,放在小烧杯或表面皿中称量,用热水溶化后倒入烧杯。
也可放在称量纸上,称量后直接放入水中,这时如稍微加热,牛肉膏便会与称量纸分离,然后立即取出纸片。
蛋白胨很易吸潮,在称取时动作要迅速。
另外,称药品时严防药品混杂,一把牛角匙用于一种药品,或称取一种药品后,洗净、擦干,再称取另一药品,瓶盖也不要盖错。
2.溶化在上述烧杯中可先加入少于所需要的水量,用玻棒搅匀,然后,在石棉网上加热使其溶解。
待药品完全溶解后,补充水分到所需的总体积。
如果配制固体培养基,将称好的琼脂放入已溶化的药品中,再加热溶化,在琼脂溶化的过程中,需不断搅拌,以防琼脂糊底使烧杯破裂。
最后补足所失的水分。
3.调pH 在未调pH前,先用精密pH试纸测量培养基的原始pH值,如果pH偏酸,用滴管向培养基中逐滴加入1mol/L NaOH,边加边搅拌,并随时用pH试纸测其pH值,直至pH达7.6。
反之,则用1mol/L HCl进行调节。
注意pH值不要调过头,以避免回调,否则,将会影响培养基内各离子的浓度。
对于有些要求pH值较精确的微生物,其pH的调节可用酸度计进行(使用方法,可参考有关说明书)。
4.过滤趁热用滤纸或多层纱布过滤,以利结果的观察。
一般无特殊要求的情况下,这一步可以省去(本实验无需过滤)。
5.分装按实验要求,可将配制的培养基分装入试管内或三角烧瓶内。
6.加塞培养基分装完毕后,在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞,以阻止外界微生物进入培养基内而造成污染,并保证有良好的通气性能(棉塞制作方法附本实验后面)。
实验五 牛肉膏蛋白胨培养基的制备及高压蒸汽灭菌
实验五牛肉膏蛋白胨培养基的制备及高压蒸汽灭菌一实验目的:掌握培养基的配制原则与方法;熟悉手提式高压灭菌器的使用方法和注意事项;二实验材料:器材:试管、三角瓶、烧杯、量筒、玻璃棒天平、牛角匙、高压蒸汽灭菌锅等。
试剂:牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂等三实验原理:牛肉膏蛋白胨培养基:是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称为普通培养基。
由于这种培养基中含有一般细胞生长繁殖所需要的最基本的营养物质,所以可供细菌生长繁殖之用。
高压蒸汽灭菌:主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生物的效果。
将灭菌的物品放在一个密闭和加压的灭菌锅内,通过加热,使灭菌锅内水沸腾而产生蒸汽。
待蒸汽将锅内冷空气从排气阀中趋尽,关闭排气阀继续加热。
此时蒸汽不溢出,压力增大,沸点升高,获得高于100℃的温度导致菌体蛋白凝固变性,而达到灭菌的目的。
四实验步骤:1.牛肉膏蛋白胨培养基的制备(1)称量准确称取各种成分。
一些不易称量的成分如牛肉膏,可用玻璃棒取出放称量纸上称量,然后连同称量纸一起放入烧杯中。
(2)溶解向烧杯内加入所需的水量,将牛肉膏用水洗下后,加热搅拌全溶后稍放冷。
(4)调pH值精密pH试纸测定其pH值,并用NaOH调至所需pH值(5)分装根据不同需要,可将配好的培养基分装入配有棉塞的试管或三角瓶内。
注意分装时避免培养基挂在瓶口或管口上引起杂菌污染。
如液体培养基,应装试管高度的1/4左右;固体培养基装试管高度的1/5左右;装入三角瓶的量以三角瓶容量的一半为限。
(6)包扎纸上表明培养基的名称、配制日期等。
(7)灭菌培养基用0.1Mpa高压蒸汽灭菌15~20min,五注意事项1.要严格按配方配制。
2.调pH不要过头。
3.高压灭菌要注意物品不要过多,加热后排除冷空气,到时降压回零取物。
配方:牛肉膏:1.5g 蛋白胨5.0g 氯化钠2.5g水500mL 琼脂 7.5g pH 7.2。
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牛肉膏蛋白胨琼脂培养
基配制步骤
YKK standardization office【 YKK5AB- YKK08- YKK2C- YKK18】
牛肉膏蛋白胨琼脂培养基配制步骤
牛肉膏蛋白胨琼脂培养基这是一种应用十分广泛的天然培养基,其中的牛肉膏为微生物提供碳源、磷酸盐和维生素,蛋白胨主要提供氮源和维生素,而NaCl提供无机盐。
配制具体步骤
1.称量
按培养基配方比例依次准确地称取牛肉膏、蛋白胨、NaCl放入烧杯中。
牛肉膏常用玻棒挑取,放在小烧杯或表面皿中称量,用热水溶化后倒入烧杯。
也可放在称量纸上,称量后直接放入水中,这时如稍微加热,牛肉膏便会与称量纸分离,然后立即取出纸片。
蛋白胨很易吸潮,在称取时动作要迅速。
另外,称药品时严防药品混杂,一把牛角匙用于一种药品,或称取一种药品后,洗净、擦干,再称取另一药品,瓶盖也不要盖错。
2.溶化
在上述烧杯中可先加入少于所需要的水量,用玻棒搅匀,然后,在石棉网上加热使其溶解。
待药品完全溶解后,补充水分到所需的总体积。
如果配制固体培养基,将称好的琼脂放入已溶化的药品中,再加热溶化,在琼脂溶化的过程中,需不断搅拌,以防琼脂糊底使烧杯破裂。
最后补足所失的水分。
3.调pH
在未调pH前,先用精密pH试纸测量培养基的原始pH值,如果pH偏酸,用滴管向培养基中逐滴加入1mol/L NaOH,边加边搅拌,并随时用pH试纸测其pH值,直至pH达7.6。
反之,则用1mol/L HCl进行调节。
注意pH值不要调过头,以避免回调,否则,将会影响培养基内各离子的浓度。
对于有些要求pH值较精确的微生物,其pH的调节可用酸度计进行(使用方法,可参考有关说明书)。
4.过滤
趁热用滤纸或多层纱布过滤,以利结果的观察。
一般无特殊要求的情况下,这一步可以省去(本实验无需过滤)。
5.分装
按实验要求,可将配制的培养基分装入试管内或三角烧瓶内。
6.加塞
培养基分装完毕后,在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞,以阻止外界微生物进入培养基内而造成污染,并保证有良好的通气性能(棉塞制作方法附本实验后面)。
7.包扎
加塞后,将全部试管用麻绳捆扎好,再在棉塞外包一层牛皮纸,以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞,其外再用一道麻绳扎好。
用记号笔注明培养基名称、组别、日期。
三角烧瓶加塞后,外包牛皮纸,用麻绳以活结形式扎好,使用时容易解开,同样用记号笔注明培养基名称、组别、日期。
8.灭菌
将上述培养基以1.05kg/cm2(15磅/英寸2),121.3℃, 20分钟高压蒸汽灭菌。
如因特殊情况不能及时灭菌,则应放入冰箱内暂存。
9.搁置斜面
将灭菌的试管培养基冷至50℃左右,将试管棉塞端搁在玻棒上,搁置的斜面长度以不超过试管总长的一半为宜。
10.无菌检查
将灭菌的培养基放入37℃的温室中培养24—48小时,以检查灭菌是否彻底。