脂肪蛋白质的鉴定试验原理可溶性还原糖+斐林试剂砖红色

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还原糖脂肪蛋白质的鉴定

还原糖脂肪蛋白质的鉴定教学目的初步掌握鉴定生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的基本方法。

实验原理1．可溶性还原糖+本尼迪特试剂→（浅蓝-棕-）砖红色沉淀呈色反应 2．脂肪+苏丹Ⅲ染液→橘黄色（+苏丹Ⅳ染液→红色）3．蛋白质+双缩脲试剂→紫色反应实验程序一、可溶性还原糖的鉴定选材：含糖类较高、白色或近于白色的植物组织。

制浆制备组织液过滤（用一层纱布）取液呈色反应结论：可溶性还原糖与本尼迪特试剂在加热煮沸的过程中生成砖红色沉淀。

关键步骤：水浴加热。

二、脂肪的鉴定取材：花生种子（浸泡3-4小时）将子叶削成薄片（1）最理想的薄片（2）在薄片上滴2-3滴苏丹Ⅲ染液（2-3min）制片（3）去浮色（4）制成临时装片观察：在低倍镜下寻找已着色的圆形小颗粒，然后用高倍镜观察。

结论：脂肪能被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色。

关键步骤：子叶削成理想薄片。

三、蛋白质的鉴定选材与制备组织样液：卵清或黄豆（浸泡1-2d）呈色反应结论：蛋白质与双缩脲试剂发生紫色反应。

关键步骤：先加试剂A再加试剂B。

实验的注意事项1．还原性糖：分子中含有醛基的糖。

如葡萄糖、果糖、麦芽糖。

但是蔗糖不是。

2．双缩脲试剂的使用，应先加试剂A（0．1g/ml的NaOH溶液），造成碱性的的反应环境后，再加试剂B（0．01g/ml的CuSO4溶液）。

否则，紫色会被Cu(OH)2的蓝色遮蔽。

实验二生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定班级姓名【同类题库】1．在还原性糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中，最佳的一组实验材料是①甘蔗的茎②油菜子③花生种子④梨⑤甜菜的块根⑥豆浆⑦鸡蛋清A．④⑦⑥ B．⑤①⑦ C．①②⑥ D．④③⑥2．从某生物体细胞中提取出物质A和B，分析其化学元素组成：A中主要含有C、H、O、N 等元素，B 中主要含有C、H、O、N、P等元素。

A与双缩脲试剂会产生颜色反应，B则易被碱性染料染成深色。

由此推断：A物质是，B物质是。

3．用本尼迪特试剂鉴定可溶性还原性糖时，溶液的颜色变化过程为A．浅蓝色→棕色→砖红色 B．无色→浅蓝色→棕色C．砖红色→浅蓝色→棕色 D．棕色→绿色→无色4．在生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中，对实验材料的选择，叙述错误的是A．甘蔗茎的薄壁组织、甜菜的块根等，都含有较多的糖且近于白色，因此可以用于进行可溶性还原糖的鉴定B．花生种子含脂肪多且子叶肥厚，是用于脂肪鉴定的理想材料C．大豆种子蛋白质含量高，是进行蛋白质鉴定的理想植物组织材料D．鸡蛋清含蛋白质多，是进行蛋白质鉴定的动物材料5．鉴定脱脂奶粉是否为伪劣产品，需用的化学试剂是A．本尼迪特试剂 B．苏丹Ⅲ溶液 C．双缩脲试剂 D．红墨水6．（多选）鉴定脱脂淡．奶粉是否为伪劣产品，需用的化学试剂是A．本尼迪特试剂 B．苏丹Ⅲ溶液 C．双缩脲试剂 D．红墨水7．下列能与本尼迪特试剂反应生成砖红色沉淀的是①葡萄糖②果糖③蔗糖④麦芽糖⑤淀粉⑥纤维素A．①②⑤ B．②③④ C．①⑤⑥ D．①②④8．下列物质中，与双缩脲试剂发生作用，产生紫色反应最明显的是A．苹果组织样液 B．豆浆 C．浸软的油葵种子 D．马铃薯组织样液9．根据“生物组织中还原性糖的鉴定”的实验原理，设计一个鉴定淀粉酶对淀粉具有消化作用的实验。

生物实验生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定

生物实验生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定一、实验目的初步掌握鉴定生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的基本方法。

二、实验原理1.还原糖的鉴定原理生物组织中普遍存在的还原糖种类较多，常见的有葡萄糖、果糖、麦芽糖。

它们的分子内都含有还原性基团(游离醛基或游离酮基)，因此叫做还原糖。

蔗糖的分子内没有游离的半缩醛羟基，因此叫做非还原性糖，不具有还原性。

本实验中，用斐林试剂只能检验生物组织中还原糖存在与否，而不能鉴定非还原性糖。

斐林试剂由质量浓度为0.1 g/mL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液配制而成，二者混合后，立即生成淡蓝色的Cu(OH)2沉淀。

Cu(OH)2与加入的葡萄糖在加热的条件下，能够生成砖红色的Cu2O沉淀，而葡萄糖本身则氧化成葡萄糖酸。

其反应式如下：CH2OH—(CHOH)4—CHO+2Cu(OH)2→CH2OH—(CHO H)4—COOH+Cu2O↓+2H2O用斐林试剂鉴定还原糖时，溶液的颜色变化过程为：浅蓝色棕色砖红色(沉淀)。

2.蛋白质的鉴定原理鉴定生物组织中是否含有蛋白质时，常用双缩脲法，使用的是双缩脲试剂。

双缩脲试剂的成分是质量浓度为0.1 g/mL的氢氧化钠溶液(A)和质量浓度为0.01g/mL(B)的硫酸铜溶液。

在碱性溶液(NaOH)中，双缩脲(H2NOC—NH—CONH2)能与Cu2+作用，形成紫色或紫红色的络合物，这个反应叫做双缩脲反应。

由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键，因此，蛋白质可与双缩脲试剂发生颜色反应。

3.脂肪的鉴定原理脂肪可以被苏丹Ⅲ染成橘黄色，被苏丹Ⅳ染成红色三、实验过程(见书P18)四、实验用品(见书P18)五、注意1.关于鉴定还原糖的实验，在加热试管中的溶液时，应该用试管夹夹住试管上部，并放入盛开水的大烧杯中加热。

注意试管底部不要接触烧杯底部，同时试管口不要朝向实验者，以免试管内溶液沸腾时冲出试管，造成烫伤。

生物实验1生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定

苏丹Ⅲ染液可将脂肪染成橘黄色。
在显微镜下观察，可观察到染色的脂肪颗粒。

蛋白质的鉴定原理
双缩脲试剂与蛋白质发生反应，生成紫色络合物。
该反应基于蛋白质分子中含有肽键的特性。
02
实验原理
还原糖的鉴定原理
还原糖与斐林试剂反应生成砖红色沉淀：还原糖中含有醛基，能与斐林试剂中的铜离子在加热条件下反应，生成氧化亚铜的砖红色沉淀。
双缩脲试剂由氢氧化钠溶液和硫酸铜溶液混合而成，使用时需先加A液（氢氧化钠溶液），再滴加B液（硫酸铜溶液）。
03
实验步骤
还原糖的鉴定步骤
制备组织样液
将生物组织研磨成匀浆，然后过滤制成组织样液。
加入斐林试剂
取两支试管，分别加入组织样液和斐林试剂，混合均匀。
加热
将试管放入沸水中加热一段时间，观察颜色变化。
脂肪鉴定
通过苏丹Ⅲ染色，待测组织中的脂肪颗粒被染成橘黄色，说明组织中存在脂肪。
蛋白质鉴定
待测组织与双缩脲试剂混合后，呈现紫色反应，说明组织中存在蛋白质。
分析实验结论与实际应用的联系
01
还原糖鉴定在实际应用中可用于食品质量检测，判断食品是否符合安全标准。
02
脂肪鉴定可用于食品营养成分标注和营养学研究。
03
蛋白质鉴定在食品、生物医药等领域有广泛应用，如蛋白质纯度检测、药物研发等。
对实验过程的反思与改进建议
反思
实验过程中，应严格控制实验条件，确保试剂的新鲜度和准确性，以提高实验结果的可靠性。
改进建议
建议在实验前对实验器材进行清洁，避免交叉污染；在脂肪鉴定的过程中，应掌握好苏丹Ⅲ染色的时间，以获得最佳染色效果；在蛋白质鉴定的双缩脲试剂使用中，应控制好试剂的浓度和pH值，以确保紫色反应的明显性。

蛋白质还原糖脂肪的鉴定实验课件

R—CHO+2Cu(OH)2→R—COOH+Cu2O↓+2H2O
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试剂配制甲液（0.1g/mL的氢氧化钠溶液）
斐林试剂乙液（0.05g/mL的硫酸铜溶液）
甲液乙液等量混合，现用现配，切不可分开滴加，或者久置后才用。
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（二）生物组织中蛋白质的鉴定
1 实验原理在碱性溶液（NaOH）中，双缩脲
（H2NOC-NH-CONH2）能与Cu 2+作用，形成紫色的络合物，这个反应叫做双缩脲反应。
由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键，因此，蛋白质都可与双缩脲试剂发生颜色反应。
滴上清水可防止盖盖玻片时产生气泡。
低倍镜下找到花生子叶薄片的最装片不宜久放。薄处，可看到细胞中有染成橘黄色或红色圆形小颗粒。
时间一长，油滴会溶解在乙醇中。
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实验步骤
（1）切片制作
甲乙液等量混合，现配先用，
切勿将甲液、乙液分别加切不可分开滴加，或者久置后
入苹果组织样液中进行检才用。
测。
4. 试管放在盛有50-65℃温最好用试管夹夹住试管上水的大烧杯中，加热约2分部，使试管底部不触及烧
钟，观察到溶液颜色：浅蓝杯底部，试管口不朝向实色 → 棕色 → 砖红色（沉验者。淀）
体积分数为50%的酒精溶液，碘液、蒸馏水。
（１）可溶性还原糖糖的鉴定 5、方法步骤：文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。

生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定

生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定1．实验原理可溶性糖中的还原糖（葡萄糖、果糖）与斐林试剂作用生成砖红色沉淀；脂肪被苏丹Ⅲ溶液或苏丹Ⅳ溶液染成橘黄色或红色；蛋白质与双缩脲试剂发生作用，能产生紫色反应。

2．材料用具做可溶性还原糖的鉴定实验，应选择含糖量高，颜色为白色或近于白色的植物组织，以苹果、梨为最好，使实验效果明显；做脂肪的鉴定实验，应该选择富含脂肪含量高的种子，以花生种子为最好，实验前需浸泡3~4 h；做蛋白质的鉴定实验，可用浸泡1~2 d的黄豆种子（或用豆浆），或用蛋清（必须稀释10倍后再使用）。

3．实验试剂由质量浓度为0.1 g/mL的NaOH溶液和质量浓度为0.05 g/mL的CuSO4溶液刚配制而成的斐林试剂；苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ溶液；双缩脲试剂。

4．实验过程可溶性糖的鉴定：注意：蛋白质的鉴定在试剂使用上与还原糖鉴定不同的是，先加入质量浓度为0.1 g/mL的NaOH溶液，造碱性环境，观察颜色变化后再加入3~4滴质量浓度为0.01 g/mL的CuSO4溶液，而不是混合使用。

讨论：（1）用斐林试剂鉴定可溶性糖（还原糖）时，溶液的颜色变化为什么是浅蓝色→棕色→砖红色（沉淀）？（提示：棕色为浅蓝色与砖红色的混合色）（2）鉴定可溶性还原糖试验中，苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜的颜色反应最明显的是哪一种？（提示：经试验比较，颜色反应的明显程度，依次为苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜）在［实验1］生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中，斐林试剂与双缩脲试剂都由NaOH和CuSO4组成，但两者有如下三点不同：（1）溶液浓度不同。

斐林试剂中NaOH的浓度为0.1g/mL,CuSO4的浓度为0.05 g/mL;双缩脲试剂中NaOH的浓度为0.1 g/mL,CuSO4的浓度为0.01 g/mL。

（2）使用原理不同。

斐林试剂实质是新配制的Cu(OH)2溶液；双缩脲试剂实质是在碱性环境下的Cu2+。

（3）使用方法不同。

检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质【范本模板】

实验一检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质一．实验目的：尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质,阐明实验原理—颜色反应，识记和区分用于可溶性还原糖、脂肪、蛋白质鉴定的试剂及产生的特定颜色，初步掌握鉴定上述化合物的基本方法，学会描述实验现象，掌握NaOH溶液和CuSO4溶液的使用方法。

二．实验原理：某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物，产生特定的颜色反应。

1．生物组织中普遍存在的可溶性糖类较多，有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖.前三种糖的分子内都含有游离的具还原性的半缩醛羟基，因此叫做还原糖；蔗糖分子内没有,为非还原糖.实验中所用的斐林试剂,只能鉴定生物组织中可溶性还原糖，而不能鉴定可溶性非还原糖。

可溶性还原糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖）与斐林试剂发生作用,可生成砖红色的Cu 2O沉淀。

如:葡萄糖+ 2Cu2+ + 4OH—加热葡萄糖酸+ Cu 2O↓(砖红色）+ H 2O 即Cu 2+被还原成Cu 2O，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸.用斐林试剂鉴定还原糖时，溶液变化过程为：浅蓝色→棕色→砖红色沉淀淀粉遇碘变蓝色(直链)或紫（红）色(支链）。

2．脂肪和类脂（磷脂、糖脂、固醇脂等）统称为脂类。

它是构成人体组织的正常成分，不溶于水而易溶于酒精、乙醚、氯仿等脂溶剂中。

在化学组成上，脂类属于脂肪酸的酯或与这些酯有关的物质。

脂类的主要功能是氧化供能。

脂肪主要存积于脂肪组织中,并以油滴状的微粒存在脂肪细胞浆内。

在病理检验中,脂类染色法最常用以证明脂肪变性，脂肪栓子以及肿瘤的鉴别。

脂类染色使用最广泛的染料是苏丹染料，最常用的有苏丹Ⅲ，苏丹Ⅳ,苏丹黑及油红O等。

脂肪被染色，实际上是苏丹染料被脂肪溶解吸附而呈现染料的颜色。

经研究认为组织中脂质在液态或半液态时，对苏丹染料着色效果最好。

根据这一原理，适当提高温度（37℃—60℃）对组织切片染色效果是有好处的.脂类染色，用冰冻或石蜡切片，以水溶性封固剂封固，如甘油、明胶和阿拉伯糖胶等。

蛋白质还原糖脂肪的鉴定实验

生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的检测
1、实验原理：
（1）斐林试剂鉴定还原糖时，溶液的颜色变化为：由蓝色变成砖红色(沉淀)。斐林试剂只能检验生物组织中还原糖存在与否，而不能鉴定非还原性糖。葡萄糖、麦芽糖、果糖是还原糖。（2）苏丹Ⅲ染液遇脂肪的颜色反应为橘黄色，苏丹Ⅳ染液遇脂肪的颜色反应为红色。（3）蛋白质可与双缩脲试剂产生紫色反应（肽键）。
烘烤种子后,把子叶放在白纸上用手指挤压,白纸上会出现透明的油迹,说明子叶含有脂肪。
试剂配制 A液（0.1g/mL的氢氧化钠溶液）
双缩脲试剂
B液（0.01g/mL的硫酸铜溶液）
2、实验目的：尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质 3、实验选材（1、材料应富含相关物质，使现象更加明显；2、材料本身应无色，以免对结果产生干扰）（1）做可溶性还原性糖鉴定实验，应选含糖高，颜色为白色的植物组织，如苹果、梨，也可用白萝卜替代。（因为组织的颜色较浅，易于观察。）（2）做脂肪的鉴定实验。应选富含脂肪的种子，以花生种子为最好，实验前一般要浸泡3～4小时。（3）做蛋白质的鉴定实验，可用富含蛋白质的黄豆(可用豆浆替代）或鸡蛋清。
用吸水纸吸去薄片周围酒精，滴上1~2滴蒸馏水，盖上盖玻片。低倍镜下找到花生子叶薄片的最薄处，可看到细胞中有染成橘黄色或红色圆形小颗粒。
实验步骤
（1）切片制作
①去掉花生种皮 ②用左手的三个手指夹住花生的一片子叶，使花生子叶高于手指之上（为什么？）。右手持刀片，将子叶削去一层，形成平面。
R—CHO+2Cu(OH)2→R—COOH+Cu2O↓+2H2O
试剂配制甲液（0.1g/mL的氢氧化钠溶液）斐林试剂乙液（0.05g/mL的硫酸铜溶液）

高中生物实验生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定

生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定
实验原理
实验原理：化学试剂+有机化合物→特定的颜色还原糖 + 斐林试剂水浴加热砖红色沉淀蛋白质 + 双缩脲试剂 →紫色脂肪 +苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ）→橘黄色（红色）淀粉 + 碘 →蓝色还原糖：葡萄糖、果糖、麦芽糖
还原糖 + 斐林试剂加热→ 砖红色沉淀先混合再加入糖中（ NaOH +CuSO4）
• 第二步：分别向3支试管内加入相应的液体。一号加 2mL正常尿液；2号加_2m__l含__有__葡__萄__糖_的__尿_；液3号加 _2_m_l_待__测_尿__液_____________。
• 第三步：向3支试管内分别加入刚配好的斐林试剂1mL, 振荡试管，使溶液混合均匀，并将这3支试管放入盛有 50～60°C温水的大烧杯中，加热约2min。
先加NaOH 液于样液中，再加CuSO4 液于样液中
蛋白质 + 双缩脲试剂 → 紫色
二、目的要求三、材料用具
四、方法步骤
1、可溶性还原糖的鉴定
取材、研磨、过滤
制备生物组织样液
取样取2mL组织样液
注入试管
注入试剂向试管注入2mL斐林试剂
加热和观察
注意事项：1、若用斐林试剂要现配现用； 2、对试管加热时，试管口不要朝向实验者； 3、检测还原糖时应水浴50~60度加热。
去浮色滴1~2滴50%的酒精溶液制作临时装片
放在显微镜下观察
注意事项：花生种子要提前浸泡3~4小时；
六、探究试验
通常情况下，正常人的尿液中没有葡萄糖。当一次食用大量糖时，尿液中是否有葡萄糖存在？试运用对照的方法设计实验方案进行鉴定。

实验一、生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定

实验一生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定·实验指导（攻关不畏难）一．目的要求：1、初步掌握鉴定是生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质的基本方法；2、识记鉴定所用材料、试剂、仪器，懂得选材的要求；3、能熟练使用低倍镜，制作徒手切片、临时装片，了解规范使用显微镜的方法；4、理解实验的目的、原理和方法步骤，进一步归纳出生物组织中可溶性还原糖、脂肪和蛋白质的鉴定原理。

二．材料用具1、实验材料：1）做还原糖的鉴定，应该选择含糖量较高、颜色为白色的植物组织，以苹果、梨为最好。

2）做脂肪的鉴定实验，应该选择富含脂肪的种子，以花生种子为最好，实验前需浸泡3—4h。

3）做蛋白质的鉴定实验，可用浸泡1—2d的大豆种子（或用豆浆），或用鸡蛋蛋白。

2、仪器和试剂：1）仪器：剪刀，解剖刀，双面刀片，试管，试管架，试管夹，大小烧杯，小量筒，滴管，玻璃漏斗，酒精灯，三脚架，石棉网，火柴，研钵，石英砂，载玻片，盖玻片，毛笔，吸水纸，显微镜。

2）试剂：斐林试剂（主要由质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液和质量浓度为0.05g/mL的CuSO4溶液配制而成，）苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液，双缩脲试剂，体积分数为50%的酒精溶液，蒸馏水。

三．实验原理：某些化学试剂能够使生物组织中的有机化合物产生特定颜色的反应。

1、可溶性还原糖的鉴定原理：可溶性还原糖（如葡萄糖、果糖）与斐林试剂发生作用，可以生面碳红色沉淀，斐林试剂实际是Cu2+的碱性溶液，能使具有自由醛基或酮基的糖氧化，Cu2+则被还原成硕红色的Cu2O沉淀，反应式为：CH2OH—（CHOH）4—CHO+2Cu（OH）2CH2OH—（CHOH）4—COOH+Cu2O +2H2O 用斐林试剂鉴定还原糖时，溶液颜色变化过程为：浅蓝色棕色2、脂肪鉴定原理：脂肪可以被苏丹Ⅲ染成橘黄色（或被苏丹Ⅳ染成红色），苏丹Ⅲ在脂肪中的溶解度比在酒精中的溶解度大，当用苏丹Ⅲ的酒精溶液处理含有脂肪的生物组织时，酒精中的苏丹Ⅲ生进入脂肪中，将脂肪染成橘黄色。

糖类脂肪蛋白质的检测

橘黄色
脂肪+苏丹IV染液
红色
B:实验步驟选材:花生种子最好,浸泡.
制备样品:花生去皮------切薄片.
鉴定:
d 显微镜观察
c 制片
花生切片
b 50%酒精漂洗 a 苏丹III染色
实验现象:脂肪+苏丹III染液
橘黄色
脂肪+苏丹IV染液
红色
显微镜
三、蛋白质的鉴定
A: 实验原理：蛋白质+双缩脲试剂
四、淀粉的检测与观察
淀粉遇碘变蓝
紫色反应
B: 实验步驟:
选择:大豆豆浆或鸡蛋蛋白(稀释) ,鲜肝提取液.
制备样液: 大豆----研磨------过滤
鉴定步驟:
0.01 g/ml的CuSO4溶液
b 再加双缩脲试剂B液
a 先加双缩脲试剂A液
0.1 g/ml的NaOH溶液, 先为实验制造碱性环境.
豆浆
蛋白质与双缩脲试剂发生作用，产生紫色反应
斐林试剂的本质是Cu(OH)2 的悬浊液，还原糖把 Cu(OH)2 还原成Cu 2 O 沉淀。
NaOH + CuSO4
Cu(OH)2 蓝色沉淀 + … …
Cu(OH) 2 + 还原糖
Cu 2 O 砖红色沉淀 + … …
3.为什么要用新配制的试剂？因为斐林试剂稳定性较差，要现用现配，混合使用。
二、脂肪的鉴定 A:实验原理: 脂肪+苏丹III染液
① B液要求量适中，否则多余的B液将会与A液发生反应生成Cu(OH)2显色而遮盖原有的颜色。
②鉴定前，留出一部分组织样液，以便对比
③用于蛋白质鉴定的蛋清必须稀释，以免实验后粘住试管壁，不易洗刷

检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质

实验1：检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
一、可溶性还原糖的检测：（1）原理：还原糖 + 斐林试剂砖红色沉淀。（2）选材：苹果、梨、白萝卜。含糖量较高，颜色为
水浴加热
白色或近于白色的植物组织。
（3）检测过程：
2mL 组织样液
刚配制的斐林试剂2mL
振荡混匀
呈现浅蓝色
50～65℃水浴加热2min
反应条件反应现象 50～65 ℃水浴加热样液变砖红色沉淀不需加热，摇匀即可样液变紫色
双缩脲试剂B 3-4滴
（创造碱性条件）
无色紫色
（提供Cu2+）
原理：在碱性条件（NaOH）下，蛋白质中的肽键（—NH— CO—）与Cu2＋作用生生紫色络合物。因此，操作时，应先加 A再加B
四、淀粉的检测：
（1）原理：淀粉 + 碘（2）选材：马铃薯匀浆（3）检测过程：
2 ml组织样液 2滴碘液观察颜色变化
蓝色
蓝色
斐林试剂与双缩脲试剂的比较
斐林试剂甲液成分鉴定物质 0.1 g/mL NaOH溶液乙液 0.05 g/mL CuSO4溶液双缩脲试剂 A液 B液 0.1 g/mL NaOH溶液 0.01 g/mL CuSO4溶液
可溶性还原糖
蛋白质或多肽
添加甲乙两液等量混匀后立即使用先加入A液1 mL，摇匀，再加入B液4滴（不能过量），摇匀顺序（现配现用）
选取最薄的切片置于洁净的载玻片中央染色：在薄片上滴加23滴苏丹Ⅲ染液，染色23min
制片
洗去浮色：用吸水纸吸去染液，滴加体积分数为50%的酒精12滴制成临时装片：滴12滴蒸馏水，盖上盖玻片
镜检观察：在低倍镜下寻找到已着色的圆形小颗粒，然后用高倍镜观察。

生物物质鉴定实验报告

一、实验目的1. 掌握生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定方法。

2. 熟悉斐林试剂、苏丹染液、双缩脲试剂等试剂的使用方法。

3. 培养实验操作技能，提高观察和分析实验现象的能力。

二、实验原理生物组织中的还原糖、脂肪、蛋白质等物质可以通过特定的化学试剂进行鉴定。

这些试剂与特定物质发生反应，产生颜色变化，从而实现物质的鉴定。

1. 还原糖的鉴定：还原糖与斐林试剂反应，生成砖红色沉淀。

2. 脂肪的鉴定：脂肪与苏丹染液反应，被染成橘黄色或红色。

3. 蛋白质的鉴定：蛋白质与双缩脲试剂反应，生成紫色复合物。

三、实验材料与试剂1. 实验材料：苹果、梨、白萝卜、花生子叶、豆浆、稀蛋清等。

2. 试剂：斐林试剂（甲液：0.1g/mL的NaOH溶液，乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液）、苏丹染液、双缩脲试剂（A液：0.1g/mL的NaOH溶液，B液：0.01g/mL的CuSO4溶液）。

四、实验步骤1. 还原糖的鉴定：（1）取苹果、梨、白萝卜等样品，分别制作匀浆。

（2）取2mL匀浆于试管中，加入1mL斐林试剂（甲液和乙液等量混合均匀后加入）。

（3）将试管放入水浴中加热2min左右，观察颜色变化。

2. 脂肪的鉴定：（1）取花生子叶，制作切片。

（2）将切片放在载玻片中央，滴加苏丹染液2～3滴。

（3）静置2～3min后，吸去染液，滴加体积分数50%的酒精洗去浮色。

（4）吸去多余的酒精，滴加1～2滴清水，盖上盖玻片。

（5）在显微镜下观察，观察染成橘黄色或红色的脂肪颗粒。

3. 蛋白质的鉴定：（1）取豆浆、稀蛋清等样品。

（2）取2mL样品于试管中，加入1mL双缩脲试剂A液，摇匀。

（3）加入4滴双缩脲试剂B液，摇匀。

（4）观察颜色变化。

五、实验结果与分析1. 还原糖的鉴定：苹果、梨、白萝卜匀浆中加入斐林试剂后，水浴加热2min左右，观察到试管内出现砖红色沉淀。

2. 脂肪的鉴定：在显微镜下观察花生子叶切片，观察到染成橘黄色的脂肪颗粒。

还原糖、蛋白质、脂肪的鉴定

实验流程(步骤)
1.可溶性还原糖
选材：含糖量较高的白色或近于白色的植物组织(排除色素对显色的干扰)，苹果、梨最好。
制浆：去皮、切块、研磨，
制备组织样液：过滤：（用单层纱布）
显色反应
取液：（２mL）
(用前混匀)
50～65.C水浴加热2min
现象：
还原糖的检测和观察：
还原糖的检测结果
蛋白质的检测结果
蛋白质的鉴定----双缩脲试剂
鸡蛋清溶液 NaOH 溶液
滴加CuSO2 溶液, 每次滴加均需摇匀
结果显示: 紫色
实验成功的关键与注意事项
1.实验成功的关键在于实验材料的选择：
⑴．在做可溶性还原糖的鉴定实验中，最理想的实验材料是含糖量较高的生物组织(或器官)，而且组织的颜色较浅，最好是白色或近于白色的植物组织，这样可以避免材料自身颜色对实验变化颜色的掩盖。经实验比较，颜色反应的明显程度依次为苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜。
2.脂肪的鉴定
取材：花生种子（浸泡３－４h），去皮，将子叶削成薄片
脂肪微粒
①选取最薄的薄片移至载玻片中央
②在薄片上滴加苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ) 染液2 － 3滴，染色
制片：
２－３min
③滴加体积分数为50%的酒精溶液1—2滴，洗去浮色
(多余的苏丹Ⅲ )
④吸去余液，滴1-2滴蒸馏水，盖上盖玻片，制成临时装片
检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
1.实验原理
生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定
实验原理
鉴定物质还原性糖
脂肪蛋白质
试剂斐林试剂
苏丹Ⅲ 苏丹双缩脲试剂
实验现象
砖红色沉淀橘黄色红色紫色
方法步骤： 1．实验材料、仪器和试剂的选择 2．设计记录表格，记录预测结果 3．检测的方法步骤 (1)还原糖的检测和观察; (2)脂肪的检测和观察; (3)蛋白质的检测和观察;

实验一可溶性还原性糖、脂肪和蛋白质的检测

实验中需要将待测液与染液混合后观察颜色变化。
蛋白质的检测原理
蛋白质与双缩脲试剂反应生成紫色复合物。
实验中需要将待测液与双缩脲试剂混合后观察颜色变化。
双缩脲试剂由A液（质量浓度为 0.1g/mL的NaOH溶液）和B液（质量浓度为0.01g/mL的CuSO4溶液）组成。
03
实验材料与设备
实验材料
根据染色后的颜色深浅判断脂肪含量。
蛋白质的检测步骤
制备组织匀浆
将组织样品研磨成匀浆，以便提取蛋白质。
加入试剂
将制备好的组织匀浆与双缩脲试剂混合。
观察颜色变化
观察混合液的颜色变化，记录结果。
结果判断
根据颜色变化判断是否存在蛋白质。
05
实验结果与分析
可溶性还原性糖的检测结果与分析
01
02
03
掌握脂肪的检测方法
通过使用苏丹Ⅲ染色法或苏丹Ⅳ染色法，将脂肪与染料反应，观察颜色变化，从而确定脂肪的存在。
掌握蛋白质的检测方法
通过使用双缩脲试剂，将蛋白质与双缩脲试剂反应，观察颜色变化，从而确定蛋白质的存在。
了解食品中可溶性还原性糖、脂肪和蛋白质的含量
• 通过实验操作，了解食品中可溶性还原性糖、脂肪和蛋白质的实际含量，为食品营养和安全评估提供依据。
（质量浓度为0.05g/mL的 CuSO4溶液）组成，使用时将
甲液、乙液等量混合均匀。
实验中需要将待测液与斐林试剂混合后水浴加热，观察颜色变化。
脂肪的检测原理
脂肪与苏丹Ⅲ染液或苏丹Ⅳ染液反应生成橘黄色或红色复合物。
苏丹Ⅲ染液由脂溶性的溶剂和苏丹染料组成，苏丹Ⅳ染液则由脂溶性的溶剂和苏丹Ⅳ染料组成。
率和准确性。

蛋白质还原糖脂肪的鉴定实验详解

（２）脂肪的鉴定
操作方法花生种子浸泡、去皮、切下一些子叶薄片，将薄片放在载玻片的水滴中，用吸水纸吸去装片中的水。在子叶薄片上滴2~3滴苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液，染色1分钟。用吸水纸吸去薄片周围染液，用 50%酒精洗去浮色，再用吸水纸吸去酒精。
（需要显微镜）
解释
注意问题
干种子要浸泡3~4小因为浸泡时间短，不易切片，时，新花生的浸浸泡时间过长，组织较软，泡时间可缩短。切下的薄片不易成形。切片要尽可能薄些，便于观察。染色时间不宜过长。苏丹Ⅲ中含有酒精，染色时间久了，把脂肪全部溶解了，观察不到脂肪粒酒精用于洗去浮色，不洗去浮色，会影响对橘黄色脂肪滴的观察。同时，酒精是脂溶性溶剂，可将花生细胞中的脂肪颗粒溶解成油滴。滴上清水可防止盖盖玻片时产生气泡。装片不宜久放。时间一长，油滴会溶解在乙醇中。
R—CHO+2Cu(OH)2→R—COOH+Cu2O↓+2H2O
试剂配制甲液（0.1g/mL的氢氧化钠溶液）斐林试剂乙液（0.05g/mL的硫酸铜溶液）
甲液乙液等量混合，现用现配，切不可分开滴加，或者久置后才用。
（二）生物组织中蛋白质的鉴定
1
实验原理
在碱性溶液（NaOH）中，双缩脲（H2NOC-NH-CONH2）能与Cu 2+作用，形成紫色的络合物，这个反应叫做双缩脲反应。由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键，因此，蛋白质都可与双缩脲试剂发生颜色反应。
试剂配制 A液（0.1g/mL的氢氧化钠溶液）
双缩脲试剂
B液（0.01g/mL的硫酸铜溶液）
2、实验目的：尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质 3、实验选材（1、材料应富含相关物质，使现象更加明显；2、材料本身应无色，以免对结果产生干扰）（1）做可溶性还原性糖鉴定实验，应选含糖高，颜色为白色的植物组织，如苹果、梨，也可用白萝卜替代。（因为组织的颜色较浅，易于观察。）（2）做脂肪的鉴定实验。应选富含脂肪的种子，以花生种子为最好，实验前一般要浸泡3～4小时。（3）做蛋白质的鉴定实验，可用富含蛋白质的黄豆(可用豆浆替代）或鸡蛋清。

高考生物知识点：还原糖、脂肪和蛋白质的检测实验

2019年高考生物知识点：还原糖、脂肪和蛋白质的检测实验高考生物必备知识点：实验之还原糖、脂肪和蛋白的检测原理1.还原糖用斐林试剂或者班氏试剂，这两种试剂都是浅蓝色的，加入还原糖出现砖红色沉淀2.脂肪用苏丹红，可以发现被染成橘红色3.蛋白质有肽键，也就是有双缩脲结构，用双缩脲试剂，变成紫红色高考生物必备知识点：还原糖、脂肪和蛋白质的检测实验材料用具：一、实验材料1、做可溶性还原糖的鉴定实验，应选择含糖量较高、颜色为白色或近于白色的植物组织(如苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等)。

2、做脂肪的鉴定实验，应选择富含脂肪的种子，以花生种子为最佳，实验前需浸泡3-4h。

3、做蛋白质的鉴定实验，可用鸡蛋蛋白或用浸泡1-2d的黄豆种子(或豆浆)。

二、仪器和试剂1、仪器水果刀、镊子、试管、试管夹、试管架、大小烧杯、量筒、滴管、酒精灯、三脚架、石棉网、火柴、载玻片、盖玻片、吸水纸、研钵、石英砂、纱布、显微镜2、试剂班氏试剂、苏丹III染剂、双缩脲试剂、体积分数为20%的酒精溶液、蒸馏水高考生物必备知识点：还原糖、脂肪和蛋白质的检测实验方法步骤：一、可溶性还原糖的鉴定1、制备生物组织样液为节省实验时间，教师在上课之前准备好苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜的组织样液(具体方法参照课本中有关内容)。

2、实验操作方法和观察(1)取A、B编号的2支试管，分别注入2ml组织样液和2ml 蒸馏水。

(2)向2支试管内分别加入5—6滴班氏试剂。

振荡试管，使溶液混合均匀，此时溶液呈蓝色。

(3)将2支试管放进盛有开水的大烧杯中，用酒精灯加热煮沸2min左右。

在对试管加热煮沸过程中，随时仔细观察并对比2支试管中溶液的颜色变化。

3、教学建议(1)将学生分成4个小组，分别选用苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜的组织样液进行实验，比较这些植物组织中含糖量的高低，从而增加实验的探究性。

另外，也可选用同一种植物的不同品种的某器官作为实验材料，以比较它们含糖量的高低，如用不同品种的柑橘果实。