丙酮酸脱羧酶( pyruvate decarboxylase,PDC )活性测定试剂盒说明书
丙酮酸脱羧酶的化学本质
丙酮酸脱羧酶的化学本质
丙酮酸脱羧酶是一种将丙酮酸转化为丙酮的酶。
它是一种重要的代谢酶，参与细胞呼吸、糖原代谢等生理过程。
它存在于细胞的线粒体内，属于脱羧酶家族。
丙酮酸脱羧酶由两个不同的亚单位组成，分别是E1和E2亚单位。
E1亚单位是一种由亚泊酸钙诱导的二硫键（S-S）稳定的多聚体，总共由60个亚基组成。
每个亚基含有一个催化位点（TPP位点，即硫代硬皮素），可以与丙酮酸结合。
TPP位点能够在酸性环境中促进亲电亚硫酸根（HS-S-）的形成，从而使丙酮酸脱羧。
同时，E1亚单位还能够与E2亚单位发生酰基转移反应，将脱羧后的丙酮酰结构转移至E2亚单位的空腔中。
E2亚单位是一种催化酰基转移的辅酶，由24个亚基组成。
每个亚基含有一个硫化去羟基辅基（LipoVitBd，或称为lipoyl）和一个酰化位点（CoA位点）。
LipoVitBd是具有心形结构的辅基，它可以通过催化酰基转移反应，将丙酮酰结构转移给CoA结构，形成乙酰辅酶A（Acetyl-CoA），同时再次释放出LipoVitBd辅基，以参与下一轮的反应。
丙酮酸脱羧酶的化学本质是通过两个不同的亚单位的协同作用，完成从丙酮酸到乙酰辅酶A的转化过程。
其中，E1亚单位负责催化丙酮酸的脱羧反应，E2亚单位负责催化酰基转移反应。
两个亚单位之间还需要一定的辅助因子，如硫辅酶A等。
丙酮酸脱羧酶对于细胞正常代谢的最终产物——乙酰辅酶A的合成是至关重要的，对健康和生命都有着重要的作用。
代谢木糖生产乙醇的基因工程菌研究进展
代谢木糖生产乙醇的基因工程菌研究进展洪解放 张敏华 刘 成 邹少兰 吴经才(天津大学石油化工技术开发中心,天津,300072)摘 要 木糖广泛存在于林业及农业废弃物中,木糖发酵生产乙醇是再生资源的有效利用。
文中报道了近几年来在利用基因工程菌发酵木糖生产乙醇方面的研究进展。
重点介绍了大肠杆菌、酿酒酵母、树干毕赤酵母及运动发酵单胞菌的基因改造情况。
关键词 木糖发酵,半纤维素,乙醇,基因工程第一作者:硕士研究生。
收稿时间:2004-10-25,改回时间:2004-12-06 20世纪以来人们利用石油作为主要能源和化工原料,为人类社会的发展做出了巨大贡献。
但由于大量开采,消耗过快,石油储备日趋减少,现已面临枯竭的地步。
因此,寻找新的代用品已成为刻不容缓的战略性问题。
地球上每年植物光合作用的生物量可达1145亿t ,其中大部分为木质纤维素类。
木质纤维素是纤维素、半纤维素和木质素等聚合物的复合物,其中半纤维素约占30%。
从总量上看,纤维素、半纤维素和木质素是世界上最广泛的可再生性生物资源。
木质纤维素广泛存在于林业及农业废弃物中,利用酸解或酶解的方法将木质纤维素转化为还原性糖会产生大量的五碳糖(D 2木糖和L 2阿拉伯糖)和六碳糖(葡萄糖、半乳糖和甘露糖),其中六碳糖约占2/3,五碳糖约占1/3。
而在半纤维素的水解产物中,D 2木糖约占90%。
燃料乙醇是一种清洁便捷的可再生能源,是来自可再生资源中最有发展前景的液体燃料,被纳入许多国家的发展战略规划。
木质纤维素水解产物中的六碳糖可由传统酿酒酵母很容易地发酵成酒精,而五碳糖则不能由传统酿酒酵母发酵产生乙醇。
因此,如果能找到一种可以混合糖为原料产乙醇的工程菌,理论上可使乙醇产量提高25%,从而降低生产成本。
现有的产醇发酵菌种中有些虽然具有较强的产醇能力,但可利用碳源范围窄(如运动发酵单胞菌只能以葡萄糖、蔗糖或果糖作为发酵原料;酿酒酵母亦只能利用六碳糖,不能利用五碳糖);有些虽然可利用碳源范围较广(如大肠杆菌可同时利用五碳糖和六碳糖),但产醇能力极为有限。
13-2三羧酸循环
通过与柠檬酸的羧基和羟基相互作用与柠檬酸形成复合物。顺
乌头酸酶有立体专一性，只产生一种异柠檬酸。
顺乌头酸酶是个相当复杂的酶，其中含有由4个铁原子，4个无
机硫原子及4个半胱氨酸硫原子形成的铁硫中心参与底物的去水 和加水反应。这个酶是含铁的非铁卟啉蛋白。
3．异柠檬酸氧化脱羧生成α酮戊二酸和第一个CO2 这是三羧酸循环中第一个氧化脱羧反应，反应由异柠檬酸脱 氢酶催化。
反应1： 二个碳原子以乙酰辅酶A形式进入循环
乙酰CoA与草酰乙酸缩合形成柠檬酸。 由柠檬酸合成酶催化的起始反应是一个类似于醛醇缩合的反应。
CH3
+
柠檬酸合成酶反应机制
B是酶分子中的一个碱 性氨基酸残基
负碳离子
+
柠檬酰辅酶A
乙酰辅酶A上活化的乙酰基的甲基碳在柠檬酸合成酶的作用下丢失一个质子，所产生的负 碳离子对草酰乙酸的羰基碳进行亲核攻击。 这导致缩合产生高度不稳定的柠檬酰辅酶A，可自发水解产生柠檬酸。这个反应是高度放 能的，是整个反应的调节位点。
一。
E.coli丙酮酸脱氢酶 复合体电镜照片
大肠杆菌中丙酮酸脱氢酶的分子量为4600000，是由60条多肽链组成的多面体，直径约
30nm，在电镜下可观察到复合体的存在。 二氢硫辛酸乙酰转移酶位于中心，有24条肽链。丙酮酸脱羧酶也有24条肽链，二氢硫 辛酸脱氢酶由12条肽链组成。
三羧酸循环的途径 三羧酸循环共有八步反应。
盖28埃的距离，两个硫辛酰胺臂就可连接相距56埃的两个功能基团。
第一条硫辛酰胺臂接受了酶1的二碳片段，然后以乙酰基形式转移到第二条臂，再直接转 移到辅酶A上。 带有两个巯基的还原的硫辛酰胺再由酶3氧化，酶3的FAD还原成FADH2。 这些酶（E1,E2和E3)物理上的并列可以保证反应没有不需要的副反应，不使中间物从催化 位点扩散，使反应能顺利进行。 丙酮酸脱氢酶复合体是细胞通过催化连续反应的酶的并列来最经济的实现其功能的例子之
酶的种类以及相关性质
一、氧化还原酶1、乙醇脱氢酶：系统名：乙醇：辅酶I氧化还原酶，英文名：Alcohol dehydrogenase，ADH 底物：乙醇产物：乙醛最适温度：37℃（30-40℃时酶活力较稳定，超过45℃后酶活力急剧下降）最适pH：7.0~10.0，在pH=8.0时酶活力最大Km：0.013mol/L作用：与乙醛脱氢酶构成了乙醇脱氢酶系,参与体内乙醇代谢，是人和动物体内重要的代谢酶。
作为生物体内主要短链醇代谢的关键酶，它在很多生理过程中起着重要作用。
相关病症：乙醇脱氢酶异常会使人更易酒精中毒2、乙醛脱氢酶：英文名：acetaldehyde dehydrogenase，ALDH底物：乙醛产物：乙酸最适温度：37℃左右最适pH：7.0~7.5作用：氧化乙醛为乙酸，可用于预防喝酒脸红相关病症：患有某种遗传病的人，体内无法分泌乙醇脱氢酶，酒精在肝脏处无法分解，乙醛会到达全身，喝醉即是死亡。
例如：阿什美人。
3、黄嘌呤氧化酶：英文名：xanthine oxidase底物：次黄嘌呤，黄嘌呤产物：尿酸最适温度：37℃左右最适pH：8.2Km：0.043mmol/L作用：既能催化次黄嘌呤生成黄嘌呤，进而生成尿酸，又能直接催化黄嘌呤生成尿酸。
相关病症：最近研究发现，黄嘌呤氧化酶活动异常可诱发冠心病，而且其活动异常也会导致肝病发生。
4、葡萄糖氧化酶：英文名：glucose oxidase底物：D-葡萄糖产物：D-葡糖酸最适温度：37℃，在30℃~40℃范围内较稳定最适pH：5.6，在5~7范围内较稳定Km：0.001mol/L级别作用：催化氧化D-葡萄糖为D-葡糖酸和过氧化氢5、氨基酸氧化酶：英文名：amino-acid oxidase底物：氨基酸产物：酮酸最适温度：37℃左右最适pH：7左右Km：0.0033mol/L作用：D-氨基酸氧化酶和L-氨基酸氧化酶分别催化氧化D-氨基酸和L-氨基酸为酮酸6、过氧化氢酶：英文名：catalase底物：过氧化氢产物：氧气和水最适温度：30℃~40℃最适pH：7左右Km：0.025mol/L作用：存在于红细胞及某些组织内的过氧化体中，能催化H2O2分解为H2O 与O2，使得H2O2不至于与O2在铁螯合物作用下反应生成非常有害的-OH二、转移酶1、天冬氨酸转氨基酶：英文名：aspartateaminotransferase，AST底物：天冬氨酸最适温度：37℃左右最适pH：7左右作用：是体内重要的转氨酶，在体内各组织中广泛存在，AST以心脏活性最高，正常人血清中含量甚微。
发酵乳后熟期间嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌产乙醛特性
发酵乳后熟期间嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌产乙醛特性白娜;于洁;王宏梅;乌仁图雅;秦艳婷;扎木苏;刘文俊;孟和毕力格;张和平【摘要】目的:分析嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌在发酵乳后熟期间产乙醛特性,并研究乙醛合成与其关键调控基因表达量之间的关系.方法:以传统发酵乳制品中筛选出的具有优良发酵特性的嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌为研究对象,将各试验菌株在复原全脂乳中进行单菌发酵,发酵结束后(pH4.5～4.6)于4℃冷藏后熟,测定48 h 内发酵乳中的乙醛含量;采用反转录定量PCR技术检测乙醛合成关键调控基因pdc、pdh、ald、ldh的表达特征.结果:6株嗜热链球菌产乙醛量介于2.59～14.53 μg/g 之间,6株保加利亚乳杆菌产乙醛量介于9.17～39.45 μg/g之间;乙醛合成量随着基因pdc、ald及pdh表达量的升高而增加,而与基因ldh的表达量呈负相关.结论:发酵乳后熟期间嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌不同菌种、不同菌株乙醛产量差异显著,相同菌株在不同后熟时间产乙醛量差异明显,存在菌株特异性和时序变异性;调控基因pdc、pdh及ald具有促进乙醛合成的作用,基因ldh的表达不利于乙醛含量的积累.【期刊名称】《乳业科学与技术》【年(卷),期】2014(037)001【总页数】5页(P1-5)【关键词】发酵乳;嗜热链球菌;保加利亚乳杆菌;乙醛;调控基因【作者】白娜;于洁;王宏梅;乌仁图雅;秦艳婷;扎木苏;刘文俊;孟和毕力格;张和平【作者单位】内蒙古农业大学乳品生物技术与工程教育部重点实验室,内蒙古呼和浩特 010018;内蒙古农业大学乳品生物技术与工程教育部重点实验室,内蒙古呼和浩特 010018;内蒙古农业大学乳品生物技术与工程教育部重点实验室,内蒙古呼和浩特 010018;内蒙古农业大学乳品生物技术与工程教育部重点实验室,内蒙古呼和浩特 010018;内蒙古农业大学乳品生物技术与工程教育部重点实验室,内蒙古呼和浩特 010018;内蒙古农业大学乳品生物技术与工程教育部重点实验室,内蒙古呼和浩特 010018;内蒙古农业大学乳品生物技术与工程教育部重点实验室,内蒙古呼和浩特 010018;内蒙古农业大学乳品生物技术与工程教育部重点实验室,内蒙古呼和浩特 010018;内蒙古农业大学乳品生物技术与工程教育部重点实验室,内蒙古呼和浩特 010018【正文语种】中文【中图分类】TS252.54根据2010年我国发酵乳国家标准GB19302―2010《食品安全国家标准：发酵乳》定义，发酵乳（fermented milk）是以生牛（羊）乳或乳粉为原料，经杀菌、发酵后制成pH值较低的产品[1]。
丙酮酸羧化酶（PC）活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法
丙酮酸羧化酶（PC）活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法丙酮酸羧化酶（PC）活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号:BC0730规格:50T/48S产品内容：提取液：液体110mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体30mL×1瓶，4℃保存；试剂二：液体10mL×1瓶，4℃保存；试剂三：粉剂×1瓶，-20℃保存；临用前加入5mL蒸馏水溶解；可分装后-20℃保存，避免反复冻融；试剂四：粉剂×1瓶，-20℃保存；临用前加入5mL蒸馏水溶解；可分装后-20℃保存，避免反复冻融；试剂五：液体5mL×1瓶，4℃保存；试剂六：液体10μL×1支，4℃保存；试剂六稀释液：液体10mL×1支，4℃保存。
产品简介：丙酮酸羧化酶(pyruvate carboxylase，PC，EC 6.4.1.1)广泛存在于动物、霉菌和酵母的线粒体中，但在植物体和大部分细菌中却不含此酶。
是供给草酰乙酸的主要补充反应，是糖异生过程的第一个限速酶。
和水生成草酰乙酸、ADP和Pi，苹果酸脱氢酶进一步催化草酰乙酸PC不可逆的催化丙酮酸、ATP、CO2和NADH生成苹果酸和NAD+，在340nm下测定NADH氧化速率，即可反映PC活性。
试验中所需的仪器和试剂：紫外分光光度计、低温离心机、水浴锅、1mL石英比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：一、粗酶液提取：1称取约0.1g组织或收集500万细胞，加入1mL提取液，用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
24℃1000g离心10min。
3将上清液移至另一离心管中，4℃11000g离心15min。
4上清液即胞浆提取物，可用于测定从线粒体泄漏的PC（此步可选做，可以判断线粒体提取效果）。
5在沉淀中加入1mL提取液，超声波破碎（功率20％，超声5秒，间隔10秒，重复12次），用于PC活性测定，并且用于蛋白含量测定。
丙酮酸脱羧酶（PDC）活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法
丙酮酸脱羧酶（PDC）活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法丙酮酸脱羧酶（PDC）活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号:BC1070规格:50T/48S产品内容：提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体36mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体20mL×1瓶，4℃保存。
试剂三：粉剂×1支，﹣20℃保存。
试剂四：粉剂×1支，﹣20℃保存。
混合试剂：临用前配制，将试剂三和试剂四用适量试剂二溶解后再全部转移到试剂二中备用。
试剂五：液体5mL×1瓶，4℃保存。
产品说明：PDC主要存在于酵母中，是乙醇发酵的关键酶之一，催化丙酮酸脱羧生成乙醛。
PDC催化丙酮酸脱羧生成乙醛，添加乙醇脱氢酶（ADH）来进一步催化NADH还原乙醛生成乙醇和NAD+；NADH在340nm有吸收峰，而NAD+没有；通过测定340nm光吸收下降速率，来计算PDC 活性。
试验中所需的仪器和试剂：台式离心机、紫外分光光度计、水浴锅、1mL石英比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：一、粗酶液提取：1、细胞或微生物样品的制备：先收集细胞或微生物样品到离心管内，弃上清，按照每500万细胞或微生物加入1mL提取液，超声波破碎细菌或细胞（功率20％，超声3s，间隔10s，重复30次）。
10000rpm，4℃离心20min，取上清，置冰上待测。
2、组织样品：称取约0.1g组织，加入1mL提取液，冰上充分研磨。
16000g4℃离心20min，取上清，置冰上待测。
3、血清（浆）样品：直接检测。
二、测定步骤：1、紫外分光光度计预热30min以上，调节波长至340nm，蒸馏水调零。
2、试剂一37℃（哺乳动物）或25℃（其他物种）水浴提前预热30min。
3、操作表：试剂名称（μL）测定管空白管试剂一700700试剂五100100混合试剂100100样本100-蒸馏水-100迅速混匀后于340nm比色，记录10s和70s的吸光值，测定管的记为A1和A2，空白管的记为A3和A4，计算ΔA=（A1-A2）-（A3-A4）。
淹水胁迫对不同丝瓜品种根系呼吸生理和通气组织的影响
淹水胁迫对不同丝瓜品种根系呼吸生理和通气组织的影响作者：朱进李文静徐兰婷来源：《中国瓜菜》2022年第08期摘要：為筛选耐涝丝瓜砧木，探讨丝瓜耐涝机制，采用双因素完全随机设计研究了淹水胁迫对3个丝瓜品种根系呼吸生理和通气组织的影响。
结果表明，淹水胁迫4 d，3个丝瓜品种的根系干质量均显著低于对照;淹水胁迫4～16 d，3个丝瓜品种主根根系活力均显著低于对照;淹水胁迫8～16 d，3个丝瓜品种不定根的根系活力均显著高于对照。
淹水胁迫2～16 d，3个丝瓜品种主根的乳酸脱氢酶（LDH）、丙酮酸脱羧酶（PDC）活性均显著高于对照;淹水胁迫2～16 d开始，除绿冠丝瓜与对照差异不显著外，其他2个品种主根中乙醇脱氢酶（ADH）活性均显著高于对照。
3个丝瓜品种不定根中均形成了通气组织。
在淹水胁迫下，早佳丝瓜根系干质量最大，达到236.7 mg，分别比荆李和绿冠高出43.98%和100.59%;最早形成不定根，通气组织最发达;不定根的根系活力最强，达到7.73 mg·g-1·h-1，分别比荆李和绿冠高出22.40%和64.44%;不定根的PDC活性和ADH活性应急反应最快，淹水胁迫2 d就显著高于对照，分别比荆李和绿冠早2 d和6 d。
因此，3个丝瓜品种均耐淹，早佳丝瓜最耐淹水，是较理想的耐涝丝瓜砧木。
关键词：丝瓜;淹水胁迫;无氧呼吸;通气组织中图分类号：S642.4 文献标志码：A 文章编号：1673-2871（2022）08-062-08Waterlogging stress affects root respiration physiology and aerenchyma of different luffa varietiesZHU Jin1， 2， LI Wenjing1， XU Lanting1（1. College of Horticulture and Gardening， Yangtze University， Jingzhou 434025，Hubei， China; 2. Hubei Key Laboratory of Vegetable Germplasm Enhancement and Genetic Improvement， Wuhan 430070， Hubei， China）Abstract： In order to screen waterlogging-resistant luffa rootstocks and explore the mechanism of waterlogging-resistant luffa， the effects of waterlogging stress on root respiratory physiology and aerated tissue of three luffa varieties were studied by two-factor completely random design. The results showed that the root dry weight of the three varieties of luffa was significantly lower than that of the control after 4 days of waterlogging stress. After 4 to 16 days of waterlogging stress， the root activity of the main root of the three varieties of luffa was significantly lower than that of the control. Root activity of adventitious roots of the three luffa cultivars was significantly higher than that of the control during 8 to 16 days of waterlogging stress. The activity of lactate dehydrogenase （LDH）and pyruvate decarboxylase （PDC） of the main roots of the three varieties of luffa were significantly higher than those of the control during 2 to 16 days of waterlogging stress. The activity of ethanol dehydrogenase （ADH） in the main root of luffa was significantly higher than that of the control except that there was no significant difference between Lüguan luffa and the control from 2 to 16 days after waterlogging stress. Aerenchyma was formed in adventitious roots of three luffa varieties. Among the three varieties， the root dry weight of Zaojia luffa was the highest， reaching 236.7 mg， 43.98% and 100.59% higher than that of Jingli and Lüguan， respectively. Adventitious roots were first formed and aerenchyma was most developed. The root activity of adventitious roots were 7.73 mg·g-1·h-1， 22.40% and 64.44% higher than that of Jingli and Lüguan， respectively. The PDC activity and ADH activity of adventitious roots were the fastest in emergency response. The PDC activity and ADH activity of adventitious roots were significantly higher than those of the control at 2 d under waterlogging stress， and were 2 d and 6 d earlier than those of Jingli andLüguan， respectively. Therefore， the three luffa varieties are all waterlogging resistant， among which， Zaojia luffa is the most waterlogging resistant rootstock.Key words： Luffa; Waterlogging stress; Anaerobic respiration; Aerenchyma淹水胁迫是植物生长发育过程中会面临的最具有破坏性的不利环境条件之一[1]。
丙酮酸脱羧酶检测
迪信泰检测平台
丙酮酸脱羧酶检测
丙酮酸脱羧酶（Pyruvate decarboxylase, PDC），又称为α-羧化酶，是作用于
α-酮酸的羧化酶的一种。
丙酮酸脱羧酶是乙醇发酵途径的关键酶之一，存在于酵母和植物体中，以硫胺素焦磷酸为辅基，催化丙酮酸脱羧生成乙醛。
迪信泰检测平台采用生化的方法检测辅酶类物质，使用相应的酶类的试剂盒可以高效、精准的检测丙酮酸脱羧酶。
此外，我们还提供其他辅酶类的检测服务，以满足您的不同需求。
生化法测定丙酮酸脱羧酶样本要求：
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。
周期：2~3周。
项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告，报告包括：
1. 实验步骤（中英文）。
2. 相关参数（中英文）。
3. 图片。
4. 原始数据。
5. 丙酮酸脱羧酶活性信息。
迪信泰检测平台可根据需求定制其他物质测定方案，具体可免费咨询技术支持。
丙酮酸去氢酶复合物
广州市人民政府办公厅印发广州市对外贸易经济合作局主要职责内设机构和人员编制规定的通知文章属性•【制定机关】广州市人民政府•【公布日期】2010.03.04•【字号】穗府办[2010]20号•【施行日期】2010.03.04•【效力等级】地方规范性文件•【时效性】现行有效•【主题分类】机关工作正文广州市人民政府办公厅印发广州市对外贸易经济合作局主要职责内设机构和人员编制规定的通知（穗府办〔2010〕20号）各区、县级市人民政府，市政府各部门、各直属机构：《广州市对外贸易经济合作局主要职责内设机构和人员编制规定》已经市人民政府批准，现予印发。
广州市人民政府办公厅二○一○年三月四日广州市对外贸易经济合作局主要职责内设机构和人员编制规定根据《中共广州市委广州市人民政府关于印发〈广州市人民政府机构改革方案〉、〈广州市人民政府机构改革方案实施意见〉的通知》（穗字〔2009〕11号），设立广州市对外贸易经济合作局（以下简称市外经贸局），为市人民政府工作部门。
一、职责调整（一）取消和调整已由市人民政府公布取消和调整的行政审批事项。
（二）取消协调、指导市外商投资管理服务中心的职责。
（三）将原市劳动和社会保障局承担的境外就业管理职责划入市外经贸局。
（四）加强综合协调和指导各类对外贸易业务功能区的有关职责。
（五）加强服务贸易进出口、服务外包规划和统筹协调的职责。
（六）加强反倾销、反补贴、反垄断、保障措施以及贸易救济措施、维护产业安全等方面的职责。
二、主要职责（一）贯彻执行国家、省和市对外贸易、经济合作、外商投资、对外贸易业务功能区的方针政策和法律、法规，起草有关地方性法规、规章草案，拟订有关政策、规划、计划、管理办法等，并组织实施。
（二）研究、分析国际经贸形势和进出口状况，提出总量平衡、结构调整等宏观调控意见；依法办理各类企业的进出口经营资格备案登记；贯彻执行进出口商品配额招标政策及实施办法，按有关规定组织实施进出口商品配额（除粮食、棉花外）计划；负责加工贸易工作；建立健全对外贸易促进体系；研究和推广新型贸易方式，指导组织境内外各类进出口商品交易会和对外经济技术贸易交流会、展览会。
丙酮酸脱氢酶与丙酮酸脱羧酶
丙酮酸脱氢酶与丙酮酸脱羧酶丙酮酸脱氢酶与丙酮酸脱羧酶的关系一、介绍丙酮酸脱氢酶和丙酮酸脱羧酶丙酮酸脱氢酶（Pyruvate Dehydrogenase，简称PDH）和丙酮酸脱羧酶（Pyruvate Decarboxylase，简称PDC）都是与丙酮酸代谢相关的酶。
丙酮酸是碳水化合物代谢的中间产物，在细胞中起到重要的作用。
PDH和PDC是促进丙酮酸的利用和转化的关键酶，它们在多个生物反应中起着不可或缺的作用。
二、丙酮酸脱氢酶的功能1. 丙酮酸脱氢酶是一种重要的催化酶，它能够通过脱氢作用将丙酮酸转化为乙醛。
2. 此过程生成的乙醛能够进一步参与乳酸发酵、酒精发酵和柠檬酸回路等生物代谢途径。
三、丙酮酸脱氢酶的调控1. 丙酮酸脱氢酶的活性可以通过多种途径进行调控，包括磷酸化和去磷酸化等。
这些调控机制直接影响酶的催化活性和功能。
四、丙酮酸脱羧酶的功能1. 丙酮酸脱羧酶是解羧酶家族中的一员，它能够催化将丙酮酸转化为乙醛和二氧化碳。
2. 此过程是丙酮酸进入三羧酸循环的前提和基础。
五、PDH和PDC在细胞代谢中的配合作用1. PDH和PDC相互配合，共同参与丙酮酸的代谢过程，发挥协同作用。
2. PDH将丙酮酸转化为乙醛，而PDC则负责将乙醛进一步转化为二氧化碳，同时释放能量。
六、个人观点和理解丙酮酸脱氢酶和丙酮酸脱羧酶是细胞代谢过程中的重要参与者，它们共同作用于丙酮酸的转化和利用。
丙酮酸是碳水化合物代谢的中间产物，其代谢过程对于细胞能量供应和有机物的合成具有重要意义。
PDH和PDC的相互配合使得丙酮酸能够被高效地转化为能量和其他有机物。
在细胞内，PDH和PDC的活性受到多种因素的调控，这些调控机制能够使细胞能够在不同的条件下调整丙酮酸的代谢速率。
通过磷酸化和去磷酸化等调控途径的变化，细胞可以根据能量需求和代谢物的供应情况，灵活地调整PDH和PDC的活性。
丙酮酸脱氢酶和丙酮酸脱羧酶在细胞代谢中起着重要的作用。
它们的功能和调控机制共同参与碳水化合物的代谢过程，为细胞提供能量和原料。
利用可重复使用的URA3标记基因建立热带假丝酵母基因敲除系统
利用可重复使用的URA3标记基因建立热带假丝酵母基因敲除系统项峥;陈献忠;张利华;沈微;樊游;陆茂林【摘要】Candida tropicalis, a diploid asporogenic yeast, is frequently utilized in industrial applications and research studies. However, the low efficiency of genetic transformation limits the strain improvement by metabolic engineering. A reliable transformation and efficient deletion of target gene are prerequisite for molecular improve-ment ofC. tropicalis. In this study, an efficient approach for genetic transformation ofC. tropicalis was devel-oped based on the URA3 gene as a reusable selection marker and both ofPDC allele genes encoding pyruvate decar-boxylase were successfully deleted by this approach. Firstly, an auxotrophic mutant strain ofC. tropicalis XZX which is defective in orotidine-5′-phosphate decarboxylase (URA3) was isolated by chemical mutagenesis combined with nystatin enrichment selection and 5-fluoro-orotic acid (5-FOA) resistance selection using C. tropicalisATCC 20336 as the parent strain. Then, the firstPDC deletion cassettePDC1-hisG-URA3-hisG-PDC1(PHUHP) which contains a 1.6 kb URA3 marker gene, two copies of 1.1 kbSalmonellahisG fragments and homologous arms of target gene was con-structed and transformed intoC. tropicalis XZX cells. Transformants with a single copy ofPDC deleted were isolated and identified by PCR and DNA sequencing, which was designated asC.tropicalis XZX02.TheC.tropicalis XZX02 cells were spread on the minimal mediumcontaining 5-FOA to generate mutant C. tropicalis XZX03 in whichURA3 marker gene was excised from PHUHP fragment integrated into thePDC gene site. The secondPDC gene dele-tion cassettePDCm-URA3-PDCm(MUM) was constructed and transformed intoC. tropicalis XZX03 to generate C.tropicalis XZX04 in which both ofPDC allele genes were deleted. All strains were confirmed by PCR and DNA sequencing. This efficient genetic transformation approach laid a foundation for further metabolic engineering ofC. tropicalis.%热带假丝酵母(Candida tropicalis)在发酵工业中具有重要的应用潜力，但二倍体遗传结构和较低的遗传转化效率限制了其代谢工程育种技术的应用。
丙酮酸脱氢酶(Pyruvate dehydrogenase,PDH)试剂盒说明书
货号：MS2103 规格：100管/96样丙酮酸脱氢酶（Pyruvate dehydrogenase，PDH）试剂盒说明书微量法正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定测定意义：PDH（EC 4.1.1.1）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是丙酮酸脱氢酶复合体(PDHC)催化丙酮酸氧化脱羧的限速酶，催化丙酮酸脱梭生成羟乙基-TPP，把糖酵解和三羧酸循环连接起来。
测定原理：PDH催化丙酮酸脱氢，同时还原2,6-二氯酚靛酚（2,6-DCPIP），从而导致600nm光吸收的减少。
自备实验用品及仪器：可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制：试剂一：100mL×1瓶，-20℃保存；试剂二：20mL×1瓶，-20℃保存；试剂三：1.5mL×1支，-20℃保存；试剂四：液体20mL×1瓶，4℃保存；试剂五：粉剂×1瓶，4℃保存；样本的前处理：组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离：1、称取约0.1g组织或收集500万细胞，加入1mL试剂一和10uL 试剂三，用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
2、将匀浆600g，4℃离心5min。
3、弃沉淀，将上清液移至另一离心管中，11000g，4℃离心10min。
4、上清液即胞浆提取物，可用于测定从线粒体泄漏的PDH（此步可选做）。
5、在步骤④的沉淀中加入200uL试剂二和2uL 试剂三，超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3秒，间隔10秒，重复30次），用于线粒体PDH活性测定。
测定步骤：1、分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至605nm，蒸馏水调零。
2、样本测定（1）在试剂五中加入19mL试剂四充分溶解，置于37℃（哺乳动物）或25℃（其它物种）水浴10min；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融；（2）在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本和190μL试剂五，混匀，立即记录605nm 处初始吸光值A1和 1min后的吸光值A2，计算ΔA=A1-A2。
丙酮酸脱羧酶(PDC)检测试剂盒(丙酮酸比色法)
加入物(ml) ADH Lysis buffer 待测样品 PDC Lysis buffer 工作液 NADH-ADH 工作液
对照管(备选) 0.025 — 1.6 0.2
测定管 —
0.025 1.6 0.2
5、 PDC 测定：加入 PDC 启动剂，立即以分光光度计(1cm 光径比色杯)测定吸光度(记为 A0)并同时计时，每隔 30s 测定一次吸光度，其中至 1min 时 3 吸光度记为 A1，记录其 变化。Leagene 建议加入 PDC 启动剂后立即检测，加样时间越短越好，其反应基本在 1-3min 内，其后反应趋于平缓。
北京雷根生物技术有限公司
式中：ΔA=A0−A1(如有必要，可再减去对照最初 1min 的吸光度变化量) 0.01=每分钟 NADH 氧化吸光度变化 0.01 为 1 个酶活力单位 t=1=检测时间(min) 0.025=待测样品体积(ml)
组织样品 PDC(U/g·min)=ΔA/(0.01×t×W) 式中：ΔA=A0−A1(如有必要，可再减去对照最初 1min 的吸光度变化量)
组成：
编号 名称 试剂(A): PDC Lysis buffer 试剂(B): PMSF 试剂(C): ADH Assay buffer 试剂(D): NADH 试剂(E): ADH 使用说明书
TE0483 50T
Storage
250ml 4℃ 避光
1ml -20℃
100ml 4℃
1 支 -20℃
1 支 -20℃
Leagene 丙酮酸脱羧酶(PDC)检测试剂盒(丙酮酸比色法)检测原理是在弱酸条件下， 以丙酮酸为底物，催化 ADH 生成乙醛和 CO2，乙醛在 ADH 催化下被 NADH 还原为乙醇， ADH 每催化 1 分子乙醛消耗 1 分子 NADH，通过分光光度比色法(分光光度计)测定吸光度 的变化，计算出 NADH 的消耗速率进一步推算出丙酮酸脱羧酶活性水平。该试剂盒主要用 于检测植物样本、血清等中丙酮酸脱羧酶活性。该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床 诊断或其他用途。
丙酮酸脱氢酶与丙酮酸脱羧酶
丙酮酸脱氢酶与丙酮酸脱羧酶丙酮酸脱氢酶和丙酮酸脱羧酶是两种与丙酮酸代谢途径密切相关的酶。
它们在生物体内负责丙酮酸的转化，参与糖酵解、柠檬酸循环、脂肪酸合成等重要代谢过程。
本文将重点介绍这两种酶的结构、功能、催化机理及其在生物体内的作用。
丙酮酸脱氢酶（Pyruvate dehydrogenase, PDH）是一种催化丙酮酸氧化为乙酰辅酶A（Acetyl-CoA）的酶。
乙酰辅酶A是一种重要的中间产物，可以输入到柠檬酸循环中继续被代谢。
丙酮酸脱氢酶是由几个亚单位（E1-E3）组成的复合物，其中E1亚单位含有丙酮酸脱氢酶活性中心。
该亚单位存在于线粒体内，与多个辅酶、酶促等因子结合形成多酶复合物。
丙酮酸脱羧酶（Pyruvate decarboxylase, PDC）在酵母菌等真核生物中广泛存在。
它是一种催化丙酮酸脱羧生成乙醛的酶。
乙醛是酵母菌中的重要中间产物，可以通过酒精发酵途径生成乙醇。
丙酮酸脱羧酶的催化需要依赖于辅因子硫代乙酸（Thiamine pyrophosphate,TPP）。
该辅因子与酶底物相结合后形成稳定的共价中间体，经过一系列的重排反应最终生成乙醛。
丙酮酸脱氢酶和丙酮酸脱羧酶在丙酮酸代谢中起到重要的作用。
丙酮酸脱氢酶参与糖酵解和柠檬酸循环，在线粒体内将丙酮酸转化为乙酰辅酶A，为细胞提供能量和中间产物。
丙酮酸脱氢酶活性的变化会直接影响葡萄糖的代谢途径选择，从而影响细胞内的乳酸、乙醇等产物的产生。
丙酮酸脱羧酶参与酵母菌中的酒精发酵过程，将丙酮酸脱羧为乙醇。
这个过程在一些重要的实际应用中具有特殊意义，如酿造酒类、面包发酵等。
丙酮酸脱羧酶也参与乙酸发酵途径，将丙酮酸转化为乙酸。
丙酮酸脱氢酶和丙酮酸脱羧酶的催化机理与结构特点有许多共同之处。
在催化反应中，两种酶均通过形成共价中间体来实现丙酮酸的转化。
丙酮酸脱氢酶和丙酮酸脱羧酶的活性中心结构和活性位点也存在一定的相似性，具有类似的催化机制。
总的来说，丙酮酸脱氢酶和丙酮酸脱羧酶是两种在丙酮酸代谢途径中发挥重要作用的酶。
【实用】丙酮酸脱氢酶复合体PPT文档
2．由二氢硫辛酸乙酰转移酶（E2）催化使羟乙基被氧化成乙酰
基，同时转移给硫辛酸与酶蛋白的赖氨酰ε氨基所形成的硫辛酰 胺上，形成乙酰硫辛酰胺。
3．二氢硫辛酸乙酰转移酶（E2）还催化乙酰硫辛酰胺上的乙酰
基转移给CoA形成乙酰CoA。
4．二氢硫辛酸脱氢酶（E3）使被还原的硫辛酰氨重新氧化， 并将氢传递给它的辅基FAD。
这个反应包括脱水和水化，顺乌头酸是脱水中间物。在250C,这 三个酸的平衡混合物含有90%柠檬酸，4%顺乌头酸,6%异柠檬酸 。顺乌头酸酶有铁-硫中心，包括非血红素铁和酸不稳定硫。铁 通过与柠檬酸的羧基和羟基相互作用与柠檬酸形成复合物。顺 乌头酸酶有立体专一性，只产生一种异柠檬酸。
顺乌头酸酶是个相当复杂的酶，其中含有由4个铁原子，4个无 机硫原子及4个半胱氨酸硫原子形成的铁硫中心参与底物的去水 和加水反应。这个酶是含铁的非铁卟啉蛋白。
这样合成酶不会因水解乙酰CoA而造成浪费。
A)硫辛，酰胺而与且酶1结会合引的羟起乙基硫TP酯P相键互作水用；解的天门冬氨酸残基，只有在形成柠檬酰CoA后才会
接近活性中心。
柠檬酸合成酶是一个调控酶。酶活性在体外受ATP， NADH，
琥珀酰CoA和长链脂肪酸的抑制。它催化的反应是可调控的限 速步骤。
氟乙酰CoA可与柠檬酸合成酶反应形成氟柠檬酸，因它可抑制 酶的下一步反应，所以称这步反应为致死合成。
顺乌大头肠酸酶杆有菌铁-中硫中丙心酮，包酸括脱非血氢红酶素铁的和分酸不子稳量定硫为。4600000，是由60条多肽链组成的多面体，直径约
30nm，在电镜下可观察到复合体的存在。
二氢硫辛酸乙酰转移酶位于中心，有24条肽链。丙酮酸脱羧酶也有24条肽链，二氢硫
辛酸脱氢酶由12条肽链组成。
丙酮酸脱氢酶系多酶复合物ppt课件
脱氢产生一个 NADH（ATP？）
进入 TCA
TCA循环将乙酰CoA彻底氧化为CO2 ，同时产生 NADH和FADH2（ATP）.
在TCA循环中，大部分的ATP都是通过氧化磷酸 化(电子传递链)产生的。
转醛醇酶
转酮醇酶
转酮醇酶
HMP途径能量的生成
葡萄糖 ATP ADP
6(葡萄糖-6-P)＋6O2
5(葡萄糖-6-P)+6CO2＋5H2O
6×2NADP 6×2NADPH+H＋ 因此，1分子葡萄糖经HMP彻底氧化可产生35ATP.
HMP途径的特点与生物学意义
葡萄糖直接脱氢和脱羧； 糖彻底氧化的又一途径； 五碳糖合成和分解的代谢途径（提供核酸合成的必须
原料）； 生成大量的NADPH，是重要的还原力，用于生物合成
（脂肪酸和固醇类化合物等）；
后面内容直接删除就行 资料可以编辑修改使用 资料可以编辑修改使用
资料仅供参考，实际情况实际分析
主要经营：课件设计，文档制作，网络软件设计、 图文设计制作、发布广告等
秉着以优质的服务对待每一位客户，做到让客户满 意！
8ATP 6ATP
24ATP
合计: 38ATP
葡萄糖＋6O2＋38ADP＋38Pi
6CO2＋6H2O+38ATP
EMP-TCA代谢途径的生物学意义
糖、脂、蛋白质等物质彻底氧化的途径； 生成大量的ATP，是机体利用糖或其它物质氧化获得能
量的最有效方式； 糖、脂、蛋白质三大物质转化的枢纽； 为合成代谢提供原料。
NAD
草酰乙酸
三种锰源对珍珠龙胆石斑鱼幼鱼生长性能、抗氧化能力和肠道形态的影响
三种锰源对珍珠龙胆石斑鱼幼鱼生长性能、抗氧化能力和肠道形态的影响殷彬;迟淑艳;谭北平;姚红梅;姚亚军;董晓慧;杨奇慧;刘泓宇;章双【摘要】为研究硫酸锰(MnSO4·H2O)、甘氨酸锰[MnC4H8O4N2]和羟基蛋氨酸锰(MnC5H11NO6S2)对珍珠龙胆石斑鱼(Epinephelusfuscoguttatus♀×nceolatu♂)生长性能、抗氧化能力、血清生化指标以及肠道形态的影响.实验选取体重为(11.00±0.12) g 的珍珠龙胆石斑鱼幼鱼 270 尾, 随机分为 3 组(每组 3 个重复, 每个重复 30 尾), 分别添加MnSO4·H2O、MnC4H8O4N2和 MnC5H11NO6S2(分别记作 MnSO4、Mn-Gly 和 Mn-MHA), 使饲料中 Mn 元素水平分别为37.74 mg/kg、40.66 mg/kg和38.15 mg/kg, 投喂等氮等脂的试验饲料, 饲养8周.结果表明, Mn-Gly和Mn-MHA组的增重率(WGR)均显著高于MnSO4组(P＜0.05), Mn-MHA组饲料系数(FCR)显著低于MnSO4组(P＜0.05), 存活率(SR)和特定生长率(SGR)方面, 各组之间无显著性差异(P＞0.05).肝脏丙二醛(MDA)含量方面, Mn-Gly和Mn-MHA组均显著低于MnSO4 组(P＜0.05), Mn-MHA 组锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)活力显著高于MnSO4 和 Mn-Gly 组(P＜0.05), Mn-Gly和Mn-MHA组铜锌超氧化物歧化酶(CuZn-SOD)活力均显著低于MnSO4组(P＜0.05).Mn-Gly和Mn-MHA组血清葡萄糖(GLU)含量显著高于MnSO4组(P＜0.05), 总胆固醇(CHOL)方面, MnSO4组和Mn-Gly组均显著高于 Mn-MHA 组(P＜0.05).与 MnSO4组相比, Mn-MHA 组显著提高了前肠和中肠皱襞高度(P＜0.05), 增大了后肠肌层厚度(P＜0.05); Mn-Gly 组中肠皱襞宽显著高于 MnSO4 组(P＜0.05), 后肠皱襞高度显著高于 MnSO4 和Mn-MHA组(P＜0.05).由此可见, 与MnSO4相比, Mn-Gly和Mn-MHA能够显著提高珍珠龙胆石斑鱼幼鱼的生长性能, 增强肝脏的抗氧化能力, 调节相关代谢反应, 保护肝脏, 促进前、中、后肠的发育.【期刊名称】《中国水产科学》【年(卷),期】2019(026)003【总页数】9页(P484-492)【关键词】锰源;珍珠龙胆石斑鱼;生长性能;抗氧化能力;血清生化指标;肠道【作者】殷彬;迟淑艳;谭北平;姚红梅;姚亚军;董晓慧;杨奇慧;刘泓宇;章双【作者单位】广东海洋大学水产动物营养与饲料实验室,广东湛江 524088;广东海洋大学水产动物营养与饲料实验室,广东湛江 524088;农业农村部华南水产与畜禽饲料重点实验室,广东湛江 524088;广东海洋大学水产动物营养与饲料实验室,广东湛江 524088;农业农村部华南水产与畜禽饲料重点实验室,广东湛江 524088;长沙兴嘉生物工程股份有限公司,湖南长沙 410128;长沙兴嘉生物工程股份有限公司,湖南长沙 410128;广东海洋大学水产动物营养与饲料实验室,广东湛江 524088;农业农村部华南水产与畜禽饲料重点实验室,广东湛江 524088;广东海洋大学水产动物营养与饲料实验室,广东湛江 524088;农业农村部华南水产与畜禽饲料重点实验室,广东湛江 524088;广东海洋大学水产动物营养与饲料实验室,广东湛江 524088;农业农村部华南水产与畜禽饲料重点实验室,广东湛江 524088;广东海洋大学水产动物营养与饲料实验室,广东湛江 524088;农业农村部华南水产与畜禽饲料重点实验室,广东湛江 524088【正文语种】中文【中图分类】S963锰(Mn)作为水产动物的一种必需微量元素,在参与体内精氨酸酶(arginase)、丙酮酸脱羧酶(pyruvate decarboxylase)、锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)[1]等酶的合成,维持线粒体正常的糖代谢和脂肪代谢[2],调节机体抗氧化防御系统等方面发挥着重要作用[3]。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
货号: QS1006 规格：50管/48样丙酮酸脱羧酶（ pyruvate decarboxylase,PDC ）
活性测定试剂盒说明书
紫外分光光度法
注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
PDC主要存在于酵母中，是乙醇发酵的关键酶之一，催化丙酮酸脱羧生成乙醛。
测定原理：
PDC催化丙酮酸脱羧生成乙醛，添加乙醇脱氢酶（ADH）来进一步催化 NADH还原乙醛生成乙醇和NAD+；NADH在340 nm有吸收峰，而NAD+没有；通过测定340 nm光吸收下降速率，来计算PDC活性。
自备实验用品及仪器：
研钵、冰、台式离心机、紫外分光光度计、1mL石英比色皿、可调式移液枪和蒸馏水。
试剂组成和配制：
试剂一：液体50mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体36mL×1瓶，4℃保存。
试剂三：液体5mL×1瓶，4℃保存。
试剂四：粉剂×1支，﹣20℃保存。
试剂五：液体60μL×1支，﹣20℃保存。
混合试剂：临用前配制，将试剂四和试剂五转移至试剂三中充分溶解待用，用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
试剂六：液体5mL×1瓶，4℃保存。
粗酶液提取：
1、细菌或细胞处理：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照每200万细菌或细胞加入400μL试剂一，超声波破碎细菌或细胞（功率200W，工作3s，间歇10s，工作35次），16000g 4℃离心20min，取上清，置冰上待测。
2、组织处理：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行冰浴匀浆，16000g 4℃离心20min，取上清，置冰上待测。
3、血清（浆）等液体样品：直接检测。
PDC测定操作：
1. 分光光度计预热30min，调节波长到340 nm，蒸馏水调零。
2. 试剂二置于25℃水浴中预热30 min。
3. 空白管：依次在1mL石英比色皿中加入100μL蒸馏水、100μL混合试剂、700μL试剂二和100μL试剂六，迅速混匀后于340nm比色，记录15s和75s的吸光值，分别记为A1和A2。
4. 测定管：依次在1mL石英比色皿中加入100μL上清液、100μL混合试剂、700μL试剂二和100μL试剂六，迅速混匀后于340nm比色，记录15s和75s的吸光值，分别记为A3和A4。
注意：空白管只需测定一次。
PDC活性计算公式：
第1页，共2页
（1）按照蛋白浓度计算
活性单位定义：25℃中，每毫克蛋白每分钟催化1μmol NADH 氧化为1个酶活单位。
PDC (μmol/min/mg prot) ={[(A3－A4)－(A1-A2)]÷ε÷d×V总×106}÷(Cpr×V样) ÷T
=1.61×[(A3－A4)－(A1-A2)]÷Cpr
（2）按照样本质量计算
活性单位定义：25℃中，每克组织每分钟催化1μmol NADH 氧化为1个酶活单位。
PDC (μmol/min /g鲜重) ={[(A3－A4)－(A1-A2)]÷ε÷d×V总×106}÷(W×V样÷V样总) ÷T
=1.61×[(A3－A4)－(A1-A2)]÷W
（3）按细胞数量计算
活性单位定义：25℃中，每104个细胞每分钟催化1μmol NADH 氧化为1个酶活单位。
PDC (μmol/min/104cell) ={[(A3－A4)－(A1-A2)]÷ε÷d×V总×106}÷(细胞数量×V样÷V
样总) ÷T
=1.61×[(A3－A4)－(A1-A2)]÷细胞数量
（4）按血清（浆）体积计算
活性单位定义：25℃中，每毫升血清（浆）每分钟催化1μmol NADH 氧化为1个酶活单位。
PDC (μmol/min /mL) ={[(A3－A4)－(A1-A2)]÷ε÷d×V总×106}÷V样÷÷T
=1.61×[(A3－A4)－(A1-A2)]
ε：NADH摩尔消光系数，6.22×103L/mol/cm；d：比色皿光径，1cm；V总：反应体系总体积，1mL=0.001 L，V样：加入反应体系中上清液体积，0.1mL；Cpr：蛋白浓度（mg/mL），需要另外测定，建议使用本公司BCA蛋白质含量试剂盒；W：样本质量，g ；V样总：加入提取液体积，1mL；T：反应时间，1 min。
第2页，共2页。