高中生物第34章DNA的复制和修复
生物化学 第34章 DNA复制和修复-102页文档资料
二、DNA的复制
（二）DNA的半保留复制
1、概念
DNA进行复制时，双螺旋结构解开而成为单链， 用于合成新的互补链。子代细胞出现新的DNA双链， 其中一股单链是从亲代完整地接受过来的。另一股单 链按碱基互补配对原则完全重新合成。
意义：保持DNA在代谢上的稳定性
（二）DNA的半保留复制 （DNA semiconservative replication ）
The overall chain growth occurs in 5’ 3’, 3’ 5’, or both directions?
What enzymes take part in DNA synthesis?
1、no complete unwinding of chains; 2、Replication always began at a specific internal site (not from the ends, not random); 3、The replication proceeds in both directions (determined by measuring the distance between the replication fork and the ends)
The hypothesis proposed by Watson and Crick in 1953.
Each strand acts as the template of the other;
DNA分子的每一条链都含有合 成它的互补链的全部信息
半保留复制
1 父代DNA
2 子代DNA
保留了一半父代DNA成份
No complete unwinding of chains
第34章DNA复制和修复
蛋白质 DnaA
DnaB
结合到DNA双链复制起始部位 (需ATP)
解链酶的作用
引物合成酶 合成RNA引物
59
（六）DNA连接酶
催化二段DNA链之间3’,5’ 磷酸二酯键的形成
5’ ATP
3’
O 5’
OH O- P O
O-
3’
有缺口的DNA链
AMP+PPi
DNA连接酶
如缺少染色体间会互相粘连、出现结构 变化或其它错误行为，以致影响染色体 的生存和正确复制并进一步威胁到细胞 的存亡。
“端粒” （telomere）
92
端粒帽 染色体
端粒帽
希腊语末端“telos”和部分“meros”
端粒—— telomere
1978年首次发现四膜虫端粒的分子组成：
端粒 染色体DNA
含拓扑异构酶Ⅱ（及H1） ——与DNA复制及转录有关
51
52
1、大肠杆菌的拓扑异构酶
拓扑异构酶Ⅰ/Ⅲ 切断DNA双螺旋中一股， （topoisomeraseⅠ） 张力下降后封闭 消除负超螺旋 不需能量
拓扑异构酶Ⅱ/Ⅳ 切断DNA双链 旋转酶 （gyrase） 引入负超螺旋 需ATP供能
72
原核生物双向复制（θ型复制）
73
真核生物复制泡（复制起始点+复制叉） 74
DNA双链复制起始点
解旋酶
dnaA
拓扑异构酶
dnaB/dnaC
5’ 3’
解旋酶 SSB SSB
引发体
DNA双链解开成单链DNA
SSB
3’
5’
引物酶
RNA引物/3’-OH
DNA聚合酶Ⅲ dNTP
生化复习资料--有答案
⽣化复习资料--有答案第34章 DNA的复制与修复⼀判断1、所谓半保留复制就是以DNA亲本链作为合成新⼦链DNA的模板，这样产⽣的新的双链DNA分⼦由⼀条旧链和⼀条新链组成。
（）2、在先导链上DNA沿5’-3’⽅向合成，在后随链上则沿3’-5’⽅向合成。
（）3、复制叉上的单链结合蛋⽩通过覆盖碱基使DNA的两条单链分开，这样就避免了碱基配对。
4、只要⼦链和亲本链中的⼀条或两条都被甲基化，⼤肠杆菌中的错配校正系统就可以把它们区别开来，但如果两条链都没有甲基化则不⾏。
（）5、单个核苷酸通过磷酸⼆酯键连接到DNA⾻架上。
（）6、DNA的复制需要DNA聚合酶和RNA聚合酶。
（）7、基因是⼀段DNA序列，这段序列只负责编码⼀个蛋⽩质或⼀条多肽。
（）8、嘧啶⼆聚体可以通过重组修复除去（）9、直接修复是通过⼀种可连续扫描DNA，并识别出损伤部位的蛋⽩质，将损伤部位直接修复的⽅法。
该⽅法不⽤切断DNA或切除碱基。
（）10、SOS修复是细胞DNA受到损伤的紧急情况下，为求得⽣存⽽出现的应急修复。
常缺乏准确性。
（）⼆单选1．DNA复制时，下列哪⼀种酶是不需要的？（）A．DNA指导的DNA聚合酶 B．DNA连接酶 C．拓朴异构酶D．解链酶 E．限制性内切酶2．下列关于DNA复制的叙述，哪⼀项是错误的？（）A．半保留复制 B．两条⼦链均连续合成 C．合成⽅向5′→3′D．以四种dNTP为原料 E．有DNA连接酶参加3．DNA复制时，模板序列5′—TAGA—3′，将合成下列哪种互补结构？（）A．5′—TCTA—3′ B．5′—ATCA—3′ C．5′—UCUA—3′D．5′—GCGA—3′ E．5′—TCTA—3′4．遗传信息传递的中⼼法则是：（）A．DNA→RNA→蛋⽩质 B．RNA→DNA→蛋⽩质 C．蛋⽩质→DNA→RNA D．DNA→蛋⽩质→RNA E．RNA→蛋⽩质→DNA 5．DNA复制中的引物是：（）A．由DNA为模板合成的DNA⽚段 B．由RNA为模板合成的RNA⽚段C．由DNA为模板合成的RNA⽚段 D．由RNA为模板合成的RNA⽚段E．引物仍存在于复制完成的DNA链中6．DNA复制时，⼦链的合成是：（）A．⼀条链5′→3′，另⼀条链3′→5′ B．两条链均为3′→5′C．两条链均为5′→3′ D．两条链均为连续合成 E．两条链均为不连续合成7．冈崎⽚段是指：（）A．DNA模板上的DNA⽚段 B．引物酶催化合成的RNA⽚段C．随从链上合成的DNA⽚段 D．前导链上合成的DNA⽚段E．由DNA连接酶合成的DNA8．合成DNA的原料是：（）A．dAMP dGMP dCMP dTMP B．dATP dGTP dCTP dTTPC．dADP dGDP dCDP dTDP D．ATP GTP CTP UTP E．AMP GMP CMP UMP 9．逆转录过程中需要的酶是：（）A．DNA指导的DNA聚合酶 B．核酸酶 C．RNA指导的RNA聚合酶D．DNA指导的RNA聚合酶 E．RNA指导的DNA聚合酶10．某⽣物细胞的DNA分⼦中，碱基A的数量占38％，则C和G之和占全部碱基的（）A．76％B．62％C．24％D．12％11．DNA复制的基本条件是（）A．模板，原料，能量和酶 B．模板，温度，能量和酶C．模板，原料，温度和酶 D．模板，原料，温度和能量12．DNA分⼦的⼀条单链中（A+G）／（T+C）=0.5，则另⼀条链和整个分⼦中上述⽐例分别等于（）A．2和1 B 0.5和0.5 C．0.5和1 D．1和113 .DNA分⼦在复制时要先解旋，这时下述哪⼀对碱基将从氢键连接处断开（）A.腺嘌呤与尿嘧啶B.腺嘌呤与胸腺嘧啶C.鸟嘌呤与胸腺嘧啶D.腺嘌呤与胞嘧啶14 . 噬菌体侵染细菌的实验中，噬菌体复制DNA的原料是（）A.噬菌体的核糖核苷酸B.噬菌体的脱氧核苷酸C.细菌的核糖核苷酸D.细菌的脱氧核苷酸15．DNA分⼦结构具有多样性的原是（）A．碱基和脱氧核糖排列顺序千变万化 B．四种碱基的配对⽅式千变万化C．两条长链的空间结构千变万化 D．碱基对的排列顺序千变万化16．⼀条肽链上有100个肽键，那么控制这条肽链合成的基因所含的碱基数⽬⾄少有A、100个B、 101个C、303个D、606个17．遗传信息是指（）A．有遗传效应的脱氧核苷酸序列 B．脱氧核苷酸C．氨基酸序列 D．核苷酸18．已知⼀段mRNA含有30个碱基，其中A和G有12个，转录该段mRNA的DNA 分⼦中应有C和T的个数是（）A．12 B．24 C．18 D．3019 .与RNA分⼦结构相⽐DNA分⼦结构中没有的碱基是（）A、腺嘌呤B、尿嘧啶C、鸟嘌呤D、胞嘧啶20．蛋⽩质中含S不含P，⽽核酸中含P不含S，现⽤放射性同位素35S和32P 标记的噬体去侵染⽆任何标记的⼤肠杆菌，然后进⾏测定，在⼦代噬菌体中（）A.可以检测到35SB.可以检测到35S和32PC.可以检测到32PD.不可能检测到35S和32P21.下列有关DNA的叙述中，正确的是（）①在⼈体的⽩细胞中，DNA上含有⼈的全部遗传信息②同种个体之间的DNA是完全相同的③DNA是⼀切⽣物的遗传物质④DNA的⼀个分⼦可以控制许多性状⑤转录时是以DNA的⼀条链的模板的（）A.②③④B. ①③④⑤C.①③⑤D.①④⑤22. 如果把细胞中的⼀个DNA分⼦⽤15N进⾏标记，然后将其放在含14N的细胞培养基中连续复制四次，则最后含有标记15N 的细胞占细胞总数的（）A．1/32 B.1/16 C.1/8 D.1/423.在下列过程中，发⽣碱基互补配对关系是①复制②转录③翻译④逆转录A.①B.①②C.①②③D.①②③④24.下列制作DNA螺旋模型中，连接正确的是（）25. 不需要DNA连接酶参与的过程是（）A.DNA复制B.DNA体外重组C.DNA损伤的切除修复D.RNA逆转录26、DNA损伤的光修复作⽤是⼀种⾼度专⼀的修复⽅式，它只作⽤于紫外线引起的（）A.嘧啶⼆聚体B. 嘌呤⼆聚体C.嘧啶-嘌呤⼆聚体D.为两个单独的嘧啶碱基27、 SOS修复是（）A.是准确性差的修复⽅式B.可以完全修复DNA的损伤C.需要DNA聚合酶D.专⽤于嘧啶⼆聚体的修复三填空1．DNA复制时，连续合成的链称为__________链；不连续合成的链称为__________链。
DNA复制与修复
DNA复制与修复DNA是生命中最重要的分子之一，它承载着生物体遗传信息的基因。
在细胞分裂和生物繁殖过程中，DNA需要进行复制和修复，以确保遗传信息的稳定传递和维护细胞的正常功能。
本文将介绍DNA复制和修复的过程、机制和重要性。
一、DNA复制DNA复制是指在细胞分裂过程中，通过将DNA的遗传信息复制并传递给子细胞的过程。
DNA复制发生在细胞周期的S期，是细胞分裂的前提和基础。
1. DNA复制的需求细胞分裂时，每个子细胞都需要获得完整的遗传信息，以确保正常的生物学功能和特征的传递。
只有通过DNA复制，才能保证分裂后的子细胞拥有与母细胞相同的基因组。
2. DNA复制的过程DNA复制是一个复杂而精确的过程，分为三个阶段：解旋、复制和连接。
解旋：DNA的双螺旋结构被酶类分子解开，形成两条互补的模板链。
复制：通过配对原则，即腺嘌呤（A）与胸腺嘧啶（T）之间形成两条互补链，而鸟嘌呤（G）与胞嘧啶（C）之间形成另外两条互补链。
酶类分子在此过程中辅助催化。
连接：新合成的DNA链与原DNA模板链连接在一起，形成两个完全相同的DNA分子。
二、DNA修复DNA修复是指在DNA发生损伤或突变时，细胞通过修复机制将其还原为正常状态的过程。
DNA修复是维护DNA完整性和稳定性的重要过程。
1. DNA损伤的来源DNA损伤源于内源性和外源性因素。
内源性因素包括正常的细胞代谢过程中产生的氧自由基和代谢产物；外源性因素包括辐射、化学物质、烟草、环境污染等。
DNA损伤会导致遗传信息的丢失、突变和细胞功能紊乱。
2. DNA修复机制细胞拥有多种DNA修复机制，以应对不同类型的DNA损伤。
常见的DNA修复机制包括：a. 直接修复：直接修复是一种针对DNA损伤较小的修复机制，不涉及DNA链的切割和重合。
例如，光修复是细菌和植物具有的一种修复机制，通过光酶将紫外线引起的损伤修复。
b. 切割修复：切割修复是一种通过切割和重合DNA链的修复机制。
包括碱基切割修复、核苷酸切割修复和错配切割修复等。
分子生物学中的DNA复制与修复
分子生物学中的DNA复制与修复DNA（脱氧核糖核酸）是生物体内一种十分重要的分子，它承担着遗传信息的传递和保存。
DNA的复制和修复是研究生物基础学科中的重要课题，了解它们的机理有助于加深对生命活动的理解，因此也是分子生物学中的重要研究内容之一。
一、DNA复制DNA复制是一个生物体内的基本过程，它可以维持基因的传递和遗传信息的稳定，也是生物体繁殖和细胞分裂所必须的过程之一。
在DNA复制过程中，一条DNA分子通过特定的酶和蛋白质进行复制，生成两条完全相同的DNA分子。
DNA分子为双螺旋结构，由两条互补的单链组成，每个单链上的碱基可以与对应的互补碱基形成两个碱基之间的氢键，稳定这种双链结构。
在复制过程中，DNA酶会解开双链结构，连接到单链上，根据互补规则，以已有的单链为模板，合成新的单链。
当DNA酶复制分子到达等待复制的区域时，就会分解双链结构，将合成新的合成链与原始链分开，直到整个链复制完成。
DNA复制是生命体内一项重要的细胞功能，它至关重要地影响着生物体的发育和演化。
在此过程中，DNA分子负责遗传信息的传递和保存，保证生物体传递其基因和重要生命活动所需的信息。
同时，由于环境因素的不断变化，DNA的基因组也需要不断更新，使生物体适应新的环境并延续生命活动的时间。
二、DNA修复DNA复制在生物体内是高度正常的过程，但是有时DNA分子会受到来自环境因素的损伤，如辐射，化学物质等，而这些损伤可能导致修改，删除或添加DNA分子上的碱基，从而破坏其信息质量。
为了维持良好的基因组，并减少生物体感染癌症和其他疾病的风险，生物体必须有一套完善的DNA修复机制，帮助修复和保护DNA分子。
DNA修复主要包括四种机制：直接修复，错配修复，核苷酸切除修复和复制损伤绕过修复。
直接修复是指从DNA分子中去掉已损坏的碱基，在基因组中填补一个缺口。
错配修复是指在生物体细胞复制过程中的错误出现，导致DNA发生错误匹配的情况，而错配修复可以帮助纠正这些错误。
遗传学中的DNA复制与修复
遗传学中的DNA复制与修复一、DNA复制的意义和过程DNA复制，是指在有丝分裂、生殖细胞分裂、DNA修复等生物过程中，通过一系列化学反应将DNA双链复制产生两个完全相同的DNA分子的过程。
DNA复制的意义在于维持生物遗传信息的完整性和稳定性，使DNA遗传物质得以传递到下一代。
DNA复制的过程大致可分为三步：解旋、合成、连接。
首先，DNA双链被解旋，由核酸酶使氢键断裂，使DNA双链分离成两个单链。
然后，通过DNA聚合酶沿模板链合成新链，每个DNA 聚合酶有一个活性中心，可以将整个新链合成完整。
最后，DNA 这两个单链通过核苷酸连接形成双螺旋DNA。
二、DNA修复的意义和过程DNA修复是指细胞针对DNA突变、丢失、损害等情况所采取的修补机制。
DNA修复的目的是为了保证DNA间隙的完整性，避免细胞发生致命的变异甚至死亡。
DNA修复的过程主要包括四种类型：直接修复、错配修复、核苷酸切除修复和重组修复。
其中，直接修复是指通过一些特殊的酶有选择地矫正不断裂的化学键，来抑制DNA突变和变异的产生；错配修复是指通过酶的介入，将DNA中的错误碱基或夹缝的碱基更换成正确的碱基；核苷酸切除修复则是对遭到损害的DNA单链进行切削、取出，并重新合成一段新的DNA碱基；重组修复则是通过不同的DNA序列之间的配对连接，形成全新的DNA双链。
三、DNA复制与修复中的相互作用关系DNA复制和修复都是非常重要的生物过程，它们之间也有相互作用关系。
首先，DNA复制的过程是由多种酶、蛋白质、物质之间的协同作用完成的。
而DNA修复过程中，那些进行直接或间接修复的酶也能够参与到DNA复制过程中来，保证正常的复制过程得到了更好的保障。
其次，DNA复制过程中还需要大量能量和原料，这些能量和原料也是 DNA修复所需要的。
在DNA修复的过程中产生的一些物质，如DNA聚合酶、端粒酶等，也可以促进 DNA复制的进行。
总之，DNA复制与修复其实是不可分割的，两种生物过程之间互相依存、相互支撑。
第34章 DNA的复制和修复(2013-2-28)
复制的类型和方式—滚环复制
E. coli phage (噬菌体）: ΦX174
• “Template “rolls”, extrudes leading strand • Okazaki frags made on leading strand as it emerges.
复制的类型和方式—多复制叉复制
半保留复制非常普遍
• 单链DNA首先复制合成双链的复制型（单链DNA复 制时，通常先宣传双链复制型，再进行半保留复制）
思考题
1. 设计实验证明DNA是半保留复制
-2012大连理工大学生物化学
2. 猪流感病毒HRN1是反转录病毒，试想出实验方案以阻止病毒在细
胞内复制而不影响细胞内DNA正常复制。 一个同学想研究DNA复制过程用放射性磷来标记底物，他标记的磷是
意义：按半保留复制方式，子代DNA与亲代DNA的碱基 序列一致，子代保留了亲代的全部遗传信息，体现了遗传 的保守性。是物种稳定的分子基础，但是相对的。
possible copying mechanism OF DNA
DNA复制方式有三种可能性，即全保留、半保留和分散式。
弥散式
2. DNA半保留复制的证明(两个)
思考题
3. DNA是以半保留方式进行复制的，如果放射性全标记的双 链DNA分子在无放射性标记的溶液中经两次复制，那么所产 生的4个DNA分子其放射性状况如何？
A、两个分子含有放射性； B、全部含有放射性； C、双链中各有一半含有放射性； D、所有分子的两条链都没有放射性。
华南理工大学2006年生物化学
链的复制起点不在同一点上，一条链先复制，另一条 链保持单链而被取代：当一条链复制到一定程度时才 暴露出另一条链的复制起点，另一条链才开始复制， （单向复制，全连续复制，没有冈崎片段）
【生物化学】DNA的复制和修复
三、需要引物
参与DNA复制的DNA聚合酶，必须以一段具有3’端 自由羟基（3’-OH）的RNA作为引物(primer) ，才 能开始聚合子代DNA链。
RNA引物的大小，在原核生物中通常为50～100个核 苷酸，而在真核生物中约为10个核苷酸。RNA引物 的碱基顺序，与其模板DNA的碱基顺序相配对。
以3‘→5’方向的亲代DNA链作模板的子代链在复制时基 本上是连续进行的，其子代链的聚合方向为5‘→3’， 这一条链被称为领头链(leading strand)。
而以5‘→3’方向的亲代DNA链为模板的子代链在复制时 则是不连续的，其链的聚合方向也是5‘→3’，这条链 被称为滞后链(lagging strand)。
第一节 DNA复制的特点
一、半保留复制
DNA在复制时，以亲代DNA的每一股 作模板，合成完全相同的两个双链 子代DNA，每个子代DNA中都含有一 股亲代DNA链，这种现象称为DNA的 半 保 留 复 制 (semi-conservative replication)。
1958年Meselson和Stahl的实验首次有力地支持了 半保留复制方式。
第34章 DNA的复制和修复
生物多样性 生物稳定性
DNA：生命的控制器.rm
中心法则
复制（DDDP）
转录（DDRP）
DNA
RNA
反转录（RDDP）
RNA
反中心法则
复制（RDRP）
翻译
蛋白质
DNA dependent DNA polymerase——DDDP DNA dependent RNA polymerase——DDRP RNA dependent RNA polymerase——RDRP RNA dependent DNA polymerase——RDDP
生物化学34 DNA的复制和修复(课堂PPT)
21
DNA复制的主要方式
➢ 大肠杆菌双链环状DNA的复制（一个复制起点， 双向复制） ➢ 真核细胞线状染色体DNA的复制方式（多个复制起 点，双向复制） ➢ 单向滚环式复制（噬菌体X174DNA—单链环状）
3 ➢ 不同位置D-环式复制方式（线粒体双链环状DNA： 两条链的复制起点不同位置，且复制不同步） 22
➢ 1968日本学者冈崎：
同位素实验，用含3H的dT标记用T4噬菌体感染的大肠 杆菌 短时间内分离的DNA均为DNA小片段一段时 间后检测到 DNA大片段。当用DNA连接酶的缺失的 变异株时，检测到大量DNA片段的积累。→证明DNA 复制中有小片段合成。
测定DNA小片段，远远大于合成DNA的一半。似乎 两条链都是不连续合成的，后发现是由于U替代dT渗入 DNA中，而被尿嘧啶-N-糖基酶切除所致。
（3）还具有5 3’外切酶活性（双链有效）；
该酶缺失时大肠杆菌仍具有DNA合成酶活性，只是对
DNA损伤的修复能力下降，容易导致变异和死亡。推测
该酶主要是对DNA损伤的修复，以及在DNA复制时
RNA引物切除及其缺口的填补。
32
DNA聚合酶催化的反应：
33
DNA聚合酶Ⅰ的功 能
ⅠLeabharlann 34[1]聚合作用41
DNA聚合酶Ⅲ全酶的亚基组成
亚基 相对分 亚基 子量 数目
α 132000 2 ε 27000 2 θ 10000 2 τ 71000 2 γ 52000 2 δ 35000 1
"for their discovery of the mechanisms in the biological synthesis of ribonucleic acid and deoxyribonucleic acid" 30
生物学中的DNA复制与DNA损伤修复
生物学中的DNA复制与DNA损伤修复DNA是生物体内的遗传物质，也是细胞内复制和传递基因信息的重要分子。
DNA复制和DNA损伤修复是细胞内两个重要的生命过程，它们对细胞的正常功能和遗传信息的保持起着至关重要的作用。
本文将就生物学中的DNA复制和DNA损伤修复进行探讨，并介绍其机制和重要性。
一、DNA复制DNA复制是在细胞分裂过程中进行的一项关键生物学过程。
在细胞分裂时，每个细胞都需要复制自己的DNA，以确保两个新细胞能够分别得到完整的遗传信息。
DNA复制过程是高度精确的，并且遵循一套严格的步骤。
1. 整体过程DNA复制的过程可以概括为三个主要的步骤：解旋、复制和连接。
首先，DNA螺旋结构被解开，形成两条互补的单链。
然后，DNA复制酶将适当的碱基配对到单链上，形成两个完全相同的DNA分子。
最后，两个新的DNA分子会被连接在一起，形成完整的双螺旋结构。
2. 复制酶DNA复制过程中，复制酶是至关重要的酶类。
其中最重要的是DNA聚合酶，它能够检测和配对适当的碱基，并在DNA链上添加新的碱基。
此外，DNA复制还需要DNA螺旋酶、DNA连接酶等酶类协同作用，以确保复制过程的准确性和高效性。
二、DNA损伤修复DNA在生命活动的过程中容易受到各种内外源性的损伤，如紫外线照射、化学物质的作用等，这些损伤会对DNA结构和遗传信息造成不可逆的影响。
DNA损伤修复是维持DNA完整性和细胞正常功能的重要过程，它能够修复或恢复DNA损伤。
1. 损伤类型DNA损伤种类繁多，包括碱基损伤、单链断裂、双链断裂等。
其中，碱基损伤是最常见的一种损伤形式，例如嘌呤和嘧啶碱基的氧化、甲基化等。
此外，紫外线的照射会引起嘌呤二聚体的形成，而放射线和化学物质会引起DNA链的断裂。
2. 修复机制DNA损伤修复方式多种多样，包括直接修复、碱基切除修复、错配修复和重组修复等。
直接修复是最简单和快速的一种修复机制，它通过酶的直接作用将损伤的碱基修复。
DNA复制和修复
DNA复制和修复DNA复制是指细胞在分裂过程中，将自身的遗传信息复制出一个完整的复制品。
而DNA修复则是指细胞在DNA受损或出现错误时，通过各种修复机制来修复DNA的完整性和正确性。
DNA复制和修复是生命维持与传递的基本过程，在细胞分裂和生物进化中起着重要作用。
一、DNA复制DNA复制是生物体在细胞分裂过程中进行的重要活动，它确保了新细胞中的DNA完全相同。
1. DNA复制的起点DNA复制始于特定的起始点，称为复制起点。
在这个起始点，DNA双链会被解开形成两个单链，每个单链作为新的DNA模板。
2. DNA复制的酶和蛋白质DNA复制过程中需要多种酶和蛋白质的参与。
首先是DNA聚合酶，它负责将新的核苷酸与模板上的核苷酸配对，形成新的DNA链。
还有其他酶和蛋白质，如DNA解旋酶、DNA连接酶等，它们协助DNA复制的进行。
3. DNA复制的三步骤DNA复制可以分为三个步骤：解旋、配对和连接。
解旋：DNA解旋酶会解开DNA双链，形成两个单链模板。
这是DNA复制的第一步。
配对：DNA聚合酶会按照模板链上的碱基顺序，将新的核苷酸与之配对。
这是DNA复制的第二步。
连接：DNA连接酶将配对好的新核苷酸连接起来，形成新的DNA 链。
这是DNA复制的最后一步。
二、DNA修复DNA修复是细胞对DNA损伤或错误的修复过程，它确保了DNA 的稳定性和可靠性。
1. DNA损伤的原因DNA存在多种损伤原因，包括放射线、化学物质、环境因素和内源性因素等。
这些损伤会导致DNA链断裂、碱基损伤等问题。
2. DNA修复机制细胞有多个DNA修复机制，如直接修复、错配修复、核切修复和碱基切除修复等。
直接修复：某些DNA损伤可以直接被修复酶修复，这种修复方式是最简单的一种。
错配修复：当DNA复制过程中出现错配错误时，细胞会引入错配修复机制，将错误的核苷酸去掉，并重新合成正确的核苷酸。
核切修复：当DNA链发生断裂时，细胞会引入核切修复机制，通过切割并重新连接DNA链来修复断裂。
DNA的复制和修复(4)
培养。 ３. 裂解细胞。 ４. 将裂解液放在CsC1溶液中进行密度梯度离
心。 ５. 在紫外光下可以看到形成的区带。
二 、DNA复制的起点和方式
❖复制子: DNA复制从起点开始直到终点为止， 每一个这样的DNA单位称为复制子或复制单元 (replicon)。
❖复制起点: DNA复制在生物细胞中要从DNA分 子上特定位置开始。这个特定的位置就称为复制 起点(Origin of replication)，用ori表示。
第34章 DNA的复制和修复
（DNA Replication and Repair）
内容
➢DNA的复制 ➢DNA的损伤和修复 ➢DNA的突变
DNA是生物遗传的主要物质基础，生物机 体的遗传信息以密码的形式编码在DNA分子上 ，表现为特定的核苷酸排列顺序，并通过DNA 的复制由亲代传递给子代。1953年Watson & Crick提出DNA双螺旋结构模型后，1958年， Crick提出了“中心法则”(Central dogma) 揭示了遗传信息的传递规律。
高中生物教学备课DNA的复制与修复
高中生物教学备课DNA的复制与修复高中生物教学备课DNA的复制与修复教学目标：1. 理解DNA复制的意义和过程；2. 掌握DNA复制的分子机制；3. 了解DNA修复的重要性和常见修复机制。
教学内容：一、DNA的复制DNA复制是生物体进行细胞分裂和生殖的基础，也是遗传信息传递的重要环节。
DNA的复制基本上是半保持的，即一个DNA分子在复制过程中会生成两个完全相同的DNA分子，每个新分子中的一条链是原始DNA链，另一条链是新合成的链。
1. DNA复制的意义DNA复制是维持遗传稳定性和遗传多样性的基础。
它保证了遗传信息的传递和遗传变异的产生，进而维持物种的进化和适应性。
2. DNA复制的分子机制（1）DNA复制起始：DNA复制起始点在染色体上具有高度保守性，通常有多个复制起始点。
复制起始点处形成复制起始复合体，引导DNA复制进行。
（2）DNA双链分离：复制起始复合物在酶的作用下，解开DNA分子的两个互补链，形成复制起始泡。
（3）DNA合成：通过DNA聚合酶的作用，按照模板链上碱基互补配对的原则，将新的核苷酸按序添加到脱氧核苷酸链上，从而产生新的DNA链。
（4）DNA连接：DNA链合成后，DNA聚合酶会较快地进行连接，保证新合成的DNA链的完整性。
二、DNA的修复DNA在细胞分裂过程中容易受到各种内外因素的损伤，损伤的DNA会导致异常细胞功能和基因突变。
因此，DNA修复对于生物体来说至关重要。
1. DNA修复的重要性DNA修复是维持基因组稳定性和遗传稳定性的重要机制。
它能纠正DNA分子中的错误和修复受损的DNA链断裂，防止突变的积累和疾病的发生。
2. 常见的DNA修复机制（1）直接修复：包括光修复和甲基化修复。
光修复是通过光酶的作用，将紫外线引起的两个嘧啶基之间的共价键切断，进而恢复DNA的完整性。
甲基化修复则是通过酶的作用，去除DNA链上的异常甲基化修饰。
（2）错配修复：错配修复主要修复DNA分子中新合成链和模板链之间产生的碱基错误。
生物体内的DNA复制与修复
生物体内的DNA复制与修复生物体内的DNA复制与修复是生命的基本过程之一，确保遗传信息的传递与稳定性。
DNA复制是指在细胞分裂过程中，DNA分子从一个原始DNA分子复制为两个完全相同的子分子，以保证每个新细胞都能得到与母细胞相同的遗传信息。
DNA修复是指在DNA分子受到损伤时，通过一系列的修复机制来修复损伤，维持DNA的健康与稳定。
DNA复制是通过一系列复制酶的协同作用完成的。
首先，在DNA 双链的起始点，由DNA解旋酶解开DNA双链，形成两个复制叉。
之后，DNA聚合酶结合单链DNA，将新的互补碱基加入到模板链上，形成两条新的DNA分子。
DNA复制是半保留复制，即每个新的DNA分子中，一条链是由原始DNA分子的模板链直接复制得到，另一条链是新合成的。
细胞核内的DNA复制在S期进行，确保细胞分裂后每个新细胞都含有完整的遗传信息。
然而，DNA复制并不是完全准确的，有时候会出现错误，产生突变。
此时，细胞会启动DNA修复机制来修复这些错误。
主要有三种常见的DNA修复机制，包括错误配对修复、错配修复和核酸切除修复。
错误配对修复主要修复DNA双链间的碱基配对错误。
细胞中存在一种特殊的酶，称为DNA聚合酶，它能够检测到错误的碱基配对，然后切除错误的碱基，用正确的碱基进行替换。
错配修复主要修复DNA双链内的碱基错误。
细胞中有一种酶称为错配修复酶，它能够识别DNA双链内的碱基错误，并将错误的碱基切除，然后DNA聚合酶填充缺失的碱基，最后由DNA连接酶将DNA分子连接起来。
核酸切除修复是修复DNA双链的损伤的重要方式。
当DNA双链发生断裂、氧化损伤或其他损伤时，细胞会启动核酸切除修复机制。
该修复机制包括通过特定酶的作用，切除损伤的DNA碱基，然后由DNA聚合酶填补缺失的碱基，并由DNA连接酶连接两个DNA分子。
DNA复制和修复是细胞中非常重要的过程，因为DNA的稳定性对生物体的遗传信息和生命的正常功能至关重要。
正常的DNA复制和修复可以保证细胞正常生长与分裂，并维持遗传信息的准确传递。
DNA复制与修复
DNA复制与修复DNA复制与修复是细胞中重要的生物学过程，对于细胞的正常功能和生存起着至关重要的作用。
本文将详细探讨DNA复制和修复的过程以及其在细胞中的重要性。
一、DNA复制DNA复制是指细胞在细胞分裂前复制其DNA分子，确保每个新生细胞都具有完整的遗传信息。
DNA复制是一个高度精确和复杂的过程，包括三个主要步骤：解旋、复制和连接。
1. 解旋DNA复制开始时，DNA双螺旋结构被酶类分子解开，形成两个单链DNA。
这一过程需要解旋酶的参与，它能够在DNA链上切断氢键，并将双链DNA分开。
2. 复制在解旋后，DNA链上的复制酶能够识别并与之配对的核苷酸形成氢键。
复制酶从3'端向5'端的方向移动，逐个添加新的核苷酸，使得原始DNA链的每个碱基都有一个互补的碱基。
两个新生成的DNA链分别称为 leading strand（连续复制链）和 lagging strand（不连续复制链）。
3. 连接在DNA复制的末端，还需要将新复制的DNA链与模板DNA链连接起来。
这一过程由连接酶完成，它将之前添加的核苷酸紧密连接在一起，最终形成两条完整的DNA分子。
二、DNA修复DNA修复是指细胞在DNA受到损害或出现错误时修复DNA分子的过程。
由于DNA分子长期处于细胞内的环境中，会受到多种外界因素和内源性因素的影响，导致DNA发生损伤、突变等问题。
DNA修复的过程十分重要，可以帮助细胞维持基因组的稳定性。
1. 直接修复直接修复是最简单的一种DNA修复方式，常见的直接修复机制包括光修复和酶修复。
光修复是通过生物体内的酶类分子将光能转化为化学能，修复DNA中的损伤。
酶修复则是通过酶的催化作用，直接修复DNA分子上的错误。
2. 间接修复间接修复包括核酸切割修复和错配修复等机制。
核酸切割修复是通过核酸切割酶识别和切除DNA链上的损伤部分，然后再合成修复的新链。
错配修复则是通过一系列酶的协作作用，将DNA链上的错误结构修复为正确的结构。
生物的DNA复制与DNA修复
生物的DNA复制与DNA修复DNA是生物体内重要的遗传物质，它负责传递遗传信息和决定个体的性状。
在生物体的生命周期中，DNA需要不断进行复制和修复，以确保基因的稳定性和正常功能。
本文将探讨生物的DNA复制和DNA修复的机制，以及它们在维持生物体遗传稳定性方面的重要性。
一、DNA复制的机制DNA复制是指将一个DNA分子复制成两个完全一样的DNA分子的过程，它是细胞分裂的重要步骤之一。
DNA复制过程中，有几个关键的步骤。
1.1 拆开DNA双螺旋结构DNA复制过程首先需要解开DNA双螺旋结构，使得两条DNA链分离。
这一步骤由酶类分子负责，它们能够识别DNA上的特定序列，并切开氢键，使DNA分子解开。
1.2 合成新的DNA链在DNA分离后，细胞会利用DNA模板合成新的DNA链。
这一过程由DNA聚合酶酶类负责，它们能够识别DNA上的碱基配对规则，将合适的碱基插入到合成的新链上，从而完成新的DNA链的合成。
1.3 校对和修复在新的DNA链合成完成后，细胞内会有一些校对和修复机制，用于保证复制过程的准确性。
这些机制能够识别和修复DNA链上的错误，并确保新的DNA链与原有DNA链相匹配。
二、DNA修复的机制DNA修复是保证DNA的完整性和稳定性的重要过程。
DNA分子在生物体内受到各种外界和内部因素的损伤，如化学物质、辐射、热能等，这些损伤如果不及时修复，就会导致遗传信息的丢失和突变。
DNA修复过程主要包括以下几个主要类型。
2.1 错误配对修复DNA链的合成过程中，有时会发生碱基的错误配对，比如腺嘌呤（A）和胸腺嘧啶（T）之间的配对。
错误配对修复机制能够识别这些错误的碱基配对，并进行修复，确保DNA链的正常配对。
2.2 切割修复在DNA分子受损时，细胞内会有一些酶类分子，能够切割并去除受损的DNA片段。
随后，DNA链的合成酶会合成新的DNA片段，用于替代受损的片段。
2.3 交联修复一些损伤物质能够引起DNA链间的交联，这会导致DNA链的断裂和交叉连接。
高中生物教学备课DNA的复制与修复实验
高中生物教学备课DNA的复制与修复实验高中生物教学备课DNA的复制与修复实验DNA是生物体内遗传信息的主要载体，它具有复制和修复的重要功能。
为了帮助高中生更好地理解DNA的复制与修复过程，进行实验教学是一种有效的方法。
本文将介绍一种适合高中生物教学备课的DNA复制与修复实验，并提供实验步骤和相关原理。
实验介绍实验名称：DNA的复制与修复实验实验目的：通过模拟DNA的复制与修复过程，加深对DNA复制与修复的理解实验材料：DNA模板、引物、DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液、热循环仪、电泳仪等实验步骤：将DNA模板与引物混合，在适当的温度下进行DNA复制，然后进行DNA修复实验实验结果分析：观察DNA复制与修复实验结果，分析DNA复制与修复的原理和过程实验步骤1. 实验前准备准备实验所需材料，包括DNA模板、引物、DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液等。
配置好实验所需的缓冲液，并按照说明书建立好热循环仪参数。
2. DNA复制实验a. 将适量的DNA模板和引物混合，使其形成复制模板。
b. 取出热循环仪内预先设置好的PCR管，将混合好的DNA模板和引物加入PCR管中。
c. 将PCR管放入热循环仪中，按照设定的参数进行PCR反应。
d. 循环进行一定的温度变化，使DNA模板得到复制。
3. DNA修复实验a. 将复制好的DNA模板与引物混合，加入适量的DNA聚合酶和dNTPs。
b. 调整反应条件，使DNA模板得到修复。
c. 进行快速电泳实验，观察DNA修复的结果。
实验原理DNA复制是生物体内DNA分子自身复制的过程，是DNA遗传信息传递的基础。
DNA复制过程中，DNA模板的两条链分离，并在每条模板链上合成新的互补链。
这一过程由DNA聚合酶催化完成。
DNA修复是修复DNA分子中发生的损伤或突变的过程。
DNA分子容易受到紫外线和化学物质等外界因素的损伤，而细胞内的修复机制能够及时修复这些损伤。
DNA修复过程包括误配修复、切除修复和重组修复等。
第34章 DNA的复制和修复
possible copying mechanism OF DNA
DNA复制方式有三种可能性，即全保留、半保留和分散式。
弥散式
2. DNA半保留复制的证明(两个)
(1) 密度梯度离心 (重同位素标记）
1958年Meselson和 Stahl采用重同位素 15N作DNA标记， 同时可以否定另外
两种复制方式
第34章 DNA的复制和修复
DNA Replication
DNA Replication and Repair
第一节 DNA的生物合成
DNA生物合成的方式：
DNA复制 DNA生物合成 DNA修复合成
反转录 DNA的体外复制：分子克隆（PCR）。
一、DNA复制
P408
DNA复制具有两个特点：（半保留复制）和（半不连续复制）
解释
• (1) 在 dut -突变体（ dUTPase缺失）中冈崎片
段比在 dut +中为短。这是因为U掺入机会增加；
• (2) 在 ung- （尿嘧啶N-糖苷酶缺失）突变体
中，新合成的DNA约有一半由片段组成。
• (3) 因为尿嘧啶N-糖苷酶缺失，不会切除U的 糖苷链，也就不会出现AP位点，所以碱沉淀时 不易断裂，从而保持了半不连续的原貌。
特殊的复制方式-D环复制
• D-环扩充越过被取 代链的复制起点； • 被取代链启动复制，方 向与第一条链相反； • 两条链的合成没有冈崎 片断
单向复制，全连续复制
特殊的复制方式-D环复制
D环复制： 线粒体、叶绿体DNA（不对称复制，两条 链的复制起点不在同一点上，一条链先复制，另一条 链保持单链而被取代：当一条链复制到一定程度时才 暴露出另一条链的复制起点，另一条链才开始复制， （单向复制，全连续复制，没有冈崎片段）
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第二十九章 DNA的复制和修复一、是非判断题1．中心法则概括了DNA在信息代谢中的主导作用。
（）2．原核细胞DNA复制是在特定部位起始的，真核细胞则在多个位点同时起始进行复制。
（）3．逆转录酶催化RNA指导的DNA合成不需要RNA引物。
（）4．因为DNA两条链是反向平行的，在双向复制中一条链按5′→3′的方向合成，另一条链按3′→5′的方向合成。
（）5．限制性内切酶切割的DNA片段都具有粘性末端。
（）6．重组修复可把DNA损伤部位彻底修复。
（）答案1．对2．对3．错 4．错5．错6．错二、填空题1．DNA复制是定点双向进行的，股的合成是，并且合成方向和复制叉移动方向相同；股的合成是的，合成方向与复制叉移动的方向相反。
每个冈崎片段是借助于连在它的末端上的一小段而合成的；所有冈崎片段链的增长都是按方向进行。
2．DNA连接酶催化的连接反应需要能量，大肠杆菌由供能，动物细胞由供能。
3．以RNA为模板合成DNA称，由酶催化。
4．DNA或UpGpCpA分别经0.3NKOHR、NaseT1和牛胰RNaseI处理所得结果：DNA: 0.3NKOH：；RNaseT1：；RNase I：;UpGpCpA：0.3NKOH：；RNaseT1：；RNase I ：。
5．基因突变形式分为：，，和四类。
6．亚硝酸是一个非常有效的诱变剂，因为它可直接作用于DNA，使碱基中基氧化成基，造成碱基对的。
7．所有冈崎片段的延伸都是按方向进行的。
8．前导链的合成是的，其合成方向与复制叉移动方向；随后链的合成是的，其合成方向与复制叉移动方向。
9．引物酶与转录中的RNA聚合酶之间的差别在于它对不敏感，并可以作为底物。
10．DNA聚合酶I的催化功能有、、、和。
11．DNA回旋酶又叫，它的功能是。
12．细菌的环状DNA通常在一个开始复制，而真核生物染色体中的线形DNA可以在起始复制。
13．大肠杆菌DNA聚合酶Ⅲ的活性使之具有功能，极大地提高了DNA复制的保真度。
14．大肠杆菌中已发现种DNA聚合酶，其中负责DNA复制，负责DNA损伤修复。
15．DNA切除修复需要的酶有、、和。
16．在DNA复制中，可防止单链模板重新缔合和核酸酶的攻击。
17．DNA合成时，先由引物酶合成，再由在其3′端合成DNA链，然后由切除引物并填补空隙，最后由连接成完整的链。
答案1．领头链；连续的；随从链；不连续的；5′；RNA；5′→3′。
2．NAD+；ATP。
3．反向转录；逆转录酶。
4．不作用；不作用；不作用；Up+Gp+Cp+A；UpGp+CpA；GpCp+Up+A；5．转换；颠换；插入；缺失。
6．氨基；酮基；转换。
7．5′→3′8．连续相同不连续相反9．利福平dNTP10．5′→3′聚合3′→5′外切5′→3外切焦磷酸解作用，焦磷酸交换作用11．拓朴异构酶使超螺旋DNA变为松驰状12．复制位点多位点13．3′→5′核酸外切酶校对14．3 DNA聚合酶ⅢDNA聚合酶Ⅱ15．专一的核酸内切酶解链酶DNA聚合酶ⅠDNA连接酶16．SSB（单链结合蛋白）17．RNA引物DNA聚合酶ⅢDNA聚合酶ⅠDNA连接酶三、选择题1．DNA按半保留方式复制。
如果一个完全放射标记的双链DNA分子，放在不含有放射标记物的溶液中，进行两轮复制，所产生的四个DNA分子的放射活性将会怎样：A．半数分子没有放射性B．所有分子均有放射性C．半数分子的两条链均有放射性D．一个分子的两条链均有放射性E．四个分子均无放射性2．参加DNA复制的酶类包括：（1）DNA聚合酶Ⅲ；（2）解链酶；（3）DNA聚合酶Ⅰ；（4）RNA聚合酶（引物酶）；（5）DNA连接酶。
其作用顺序是：A．（4）、（3）、（1）、（2）、（5）B．（2）、（3）、（4）、（1）、（5）C．（4）、（2）、（1）、（5）、（3）D．（4）、（2）、（1）、（3）、（5）E．（2）、（4）、（1）、（3）、（5）3．如果15N标记的大肠杆菌转入14N培养基中生长了三代，其各种状况的DNA分子比例应是下列哪一项：纯15N 15N－14N 纯14N－DNA 杂种DNA －DNAA．1/8 1/8 6/8B．1/8 0 7/8C．0 1/8 7/8D．0 2/8 6/8E．0 4/8 4/84．下列关于DNA复制特点的叙述哪一项错误的：A．RNA与DNA链共价相连B．新生DNA链沿5′→3′方向合成C．DNA链的合成是不连续的D．复制总是定点双向进行的E．DNA在一条母链上沿5′→3′方向合成，而在另一条母链上则沿3′→5′方向合成5．DNA复制时，5′—TpApGpAp－3′序列产生的互补结构是下列哪一种：A．5′—TpCpTpAp－3′B．5′—ApTpCpTp－3′C．5′—UpCpUpAp－3′ D．5′—GpCpGpAp－3′E．3′—TpCpTpAp－5′6．下列关于DNA聚合酶I的叙述哪一项是正确的：A．它起DNA修复酶的作用但不参加DNA复制过程B．它催化dNTP聚合时需要模板和引物C．在DNA复制时把冈崎片段连接成完整的随从链D．它催化产生的冈崎片段与RNA引物链相连E．有些细菌突变体其正常生长不需要它7．下列关于真核细胞DNA聚合酶活性的叙述哪一项是正确的：A．它仅有一种B它不具有核酸酶活性C．它的底物是二磷酸脱氧核苷D它不需要引物E．它按3′-5′方向合成新生链8．从正在进行DNA复制的细胞分离出的短链核酸——冈崎片段，具有下列哪项特性：A．它们是双链的B．它们是一组短的单链DNA片段C．它们是DNA—RNA杂化双链D．它们被核酸酶活性切除E．它们产生于亲代DNA链的糖-磷酸骨架的缺口处9．切除修复可以纠正下列哪一项引起的DNA损伤：A．碱基缺失B．碱基插入C．碱基甲基化D．胸腺嘧啶二聚体形成E．碱基烷基化10．大肠杆菌DNA连接酶需要下列哪一种辅助因子？A．FAD作为电子受体B．NADP+作为磷酸供体C．NAD+形成活性腺苷酰酶D．NAD+作为电子受体E．以上都不是11．下列关于RNA和DNA聚合酶的叙述哪一项是正确的：A．RNA聚合酶用二磷酸核苷合成多核苷酸链B．RNA聚合酶需要引物，并在延长链的5′端加接碱基C．DNA聚合酶可在链的两端加接核苷酸D．DNA仅能以RNA为模板合成DNAE．所有RNA聚合酶和DNA聚合酶只能在生长中的多核苷酸链的3′端加接核苷酸12．紫外线照射引起DNA最常见的损伤形式是生成胸腺嘧啶二聚体。
在下列关于DNA分子结构这种变化的叙述中，哪项是正确的：A．不会终止DNA复制B．可由包括连接酶在内的有关酶系统进行修复C．可看作是一种移码突变D．是由胸腺嘧啶二聚体酶催化生成的E．引起相对的核苷酸链上胸腺嘧啶间的共价联结13．下列哪种突变最可能是致死的：A．腺嘌呤取代胞嘧啶B．胞嘧啶取代鸟嘌呤C．甲基胞嘧啶取代胞嘧啶D．缺失三个核苷酸E．插入一个核苷酸14．镰刀形红细胞贫血病是异常血红蛋白纯合子基因的临床表现。
β-链变异是由下列哪种突变造成的：A．交换B．插入C．缺失D．染色体不分离E．点突变15．在培养大肠杆菌时，自发点突变的引起多半是由于：A．氢原子的互变异构移位B．DNA糖-磷酸骨架的断裂C．插入一个碱基对D．链间交联E．脱氧核糖的变旋16．插入或缺失碱基对会引起移码突变，下列哪种化合物最容易造成这种突变：A．口丫啶衍生物B．5-溴尿嘧啶C．氮杂丝氨酸D．乙基乙磺酸E．咪唑硫嘌呤17．在对细菌DNA复制机制的研究中，常常用到胸腺嘧啶的类似物5-溴尿嘧啶，其目的在于：A．引起特异性移码突变以作为顺序研究用B．在胸腺嘧啶参入部位中止DNA合成C．在DNA亲和载体中提供一个反应基D．合成一种密度较高的DNA以便用离心分离法予以鉴别E．在DNA中造成一个能被温和化学方法裂解的特异部位18．关于DNA指导的RNA合成，下列叙述哪一项是错误的：A．只有在DNA存在时，RNA聚合酶才能催化磷酸二酯键的生成B．转录过程中，RNA聚合酶需要引物C．RNA链的合成是从5′→3′端D．大多数情况下只有一股DNA链作为模板E．合成的RNA链从来没有环状的19．下列关于真核细胞DNA复制的叙述哪一项是错误的：A．是半保留式复制B．有多个复制叉C．有几种不同的DNA聚合酶D．复制前组蛋白从双链DNA脱出E．真核DNA聚合酶不表现核酸酶活性20．下列关于大肠杆菌DNA连接酶的叙述哪些是正确的：A．催化DNA双螺旋结构之断开的DNA链间形成磷酸二酯键B．催化两条游离的单链DNA分子间形成磷酸二酯键C．产物中不含AMPD．需要ATP作能源答案1.A。
2.E。
3.D。
4.E。
5.A。
6.B。
7.B。
8.B。
9.D。
10.C。
11.E。
12.B。
13.E。
14.E。
15.A。
16.A。
17.D。
18.B。
19.D。
20.B。