黑曲霉乳糖酶固定化
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黑曲乳糖酶的固定化
方法:吸附交联法
载体:以阳离子交换树脂D151
交联剂:戊二醛
与游离酶性质相比:
最适作用温度:降低
热稳定性:降低。
最适pH值:乳糖酶经固定化处理后,其最适pH值较游离酶稍向碱性方向移动
酸碱稳定性:固定化酶酸碱稳定pH值范围在2.5 ~ 4.5;而游离酶酸碱
稳定pH值范围在5.0 ~7.0。
总之,应用吸附交联法制得的固定化乳糖酶, 较游离酶在牛奶的天然pH值下使用
更为适宜, 且操作稳定性好。
脂环酸芽孢杆菌α-葡萄糖苷酶固定化
方法:物理交联法
载体:壳聚糖
交联剂:戊二醛
最适pH:固定化α-葡萄糖苷酶的最适pH 4.5,与游离酶的pH 5.2 相比,其最适pH 值向酸性方向偏移,具有更强的耐酸性,但对碱的耐受性有所降低。
最适温度:固定化酶的最适温度较游离酶有所提高,从游离酶的52 ℃提高到固定化酶的55 ℃,说明固定化后α-葡萄糖苷酶的热稳定性有所提高。
酸碱稳定性:游离酶的耐碱性较固定化酶弱,而pH 大于9.5 时固定化酶活性降低,小于游离酶。
热稳定性:经固定化处理的α-葡萄糖苷酶的热稳定性有了极大的提高。当温度65 ℃时,固定化酶保持近100%酶活力,而游离酶完全失去活性。
总之,相对于游离酶,经壳聚糖固定化后酶的活性中心构象更稳固,削弱了不利因素对酶活性的影响,增加了固定化α-葡萄糖苷酶的稳定性,有利于工业化应用。
漆酶固定化
方法:物理吸附法
载体:纳米多孔金
最适pH:固定化后漆酶具有与游离酶相似的活力-pH 轮廓图, 最佳反应pH 都是
4.5。与游离酶相比固定化不但使漆酶可稳定的pH 范围变宽了(pH 3.5~6.0), 也明显提高了漆酶的耐酸耐碱性
最适温度:固定化酶的最佳反应温度为60 ℃, 较游离酶的40 ℃上升了20 ℃
热稳定性:固定化后漆酶的热稳定性明显提高
重复利用性:固定化酶具有很好的重复利用性
总之,相对于游离态, 固定化漆酶的最适pH 没有改变, 但最适温度却从游离态的40 ℃上
升至60 ℃. 尽管固定化漆酶的催化效率要低于游离漆酶, 然而固定化后漆酶的pH 和热稳定性都明显提高了;重复使用8 次仍能保持初始活力的65%, 且在4 ℃下保存1 个月几乎观察不到明显的活力下降.