微生物限度检验记录(液体)
药品微生物限度检查实验记录
药品微生物限度检查实验记录（口服）检品编号_____________________________ 室温_____℃湿度_____% 第___页检品名称_____________________________ 规格数量____________________________ 批号_____________________________ 包装____________________________ 生产单位_____________________________ 检验目的____________________________ 供养单位_____________________________ 检验日期____________________________ 检验依据《中国药典年版部》报告日期____________________________ 供试液制备：⒈常规法：供试品称(吸)取_________g(ml) 0.9%无菌氯化钠溶液______ml①45℃水浴/振荡_____分钟②研钵法③匀浆仪_____r/分钟_____分钟⒉非水溶性：供试品_______g(ml) 加乳化剂______g(ml)⒊抑菌性：供试品_______g(ml) 0.9%无菌氯化钠溶液______ml处理方法：A.稀释法B.离心沉淀集菌法C.薄膜过滤法 D.中和法 E.沉降法计数测定方法：平皿法（________ml/皿）薄膜法（冲洗量_______ml/膜）编号：_______________ 批号：_____________大肠菌群大肠埃希菌检查沙门菌检查规定：不得检出规定：不得检出规定：不得检出规定：不得检出检验者：__________ 校对者：__________药品微生物限度检查实验记录（局部用药）检品编号_____________________________ 室温_____℃湿度_____% 第___页检品名称_____________________________ 规格数量____________________________ 批号_____________________________ 包装____________________________ 生产单位_____________________________ 检验目的____________________________ 供养单位_____________________________ 检验日期____________________________ 检验依据《中国药典年版部》报告日期____________________________ 供试液制备：⒈常规法：供试品称(吸)取_________g(ml) 0.9%无菌氯化钠溶液______ml②45℃水浴/振荡_____分钟②研钵法③匀浆仪_____r/分钟_____分钟⒉非水溶性：供试品_______g(ml) 加乳化剂______g(ml)⒊抑菌性：供试品_______g(ml) 0.9%无菌氯化钠溶液______ml处理方法：A.稀释法B.离心沉淀集菌法C.薄膜过滤法 D.中和法 E.沉降法规定：不得过__________cfu/g或ml 规定：不得过_________cfu/g或ml 金黄色葡萄球菌检查铜绿假单胞菌检查规定：不得检出规定：不得检出规定：不得检出规定：不得检出检验者：__________ 校对者：__________。
07微生物限度检查记录(稀释法)
微生物限度检查记录（稀释法）文件编码：SOP-JHJY00301-07样品名称批号检验编号规格检验日期报告日期检验目的培养时间结束时间检验依据《中国药典》年版部供试液制备取供试品10g，加胰酪大豆胨液体培养基至 ml，用匀浆仪或其他适宜方法混匀，制成1：10供试液，进一步稀释成1：100,1:1000等适宜的稀释级。
一、需氧菌（30~35℃，3-5天）；胰酪大豆胨琼脂，批号，温度：℃二、霉菌和酵母菌（20~25℃，5-7天）；沙氏葡萄糖琼脂，批号，温度：℃培养时间1：10 1：100 1：1000 阴性对照1：10 1：100 1：1000 阴性对照皿1 1天2天3天4天5天6天/ / / / 7天/ / / /皿2 1天2天3天4天5天6天/ / / / 7天/ / / /皿3 1天2天3天4天5天6天/ / / / 7天/ / / /皿4 1天2天3天4天5天6天7天接下页样品名称批号1：10 1：100 1：1000 阴性对照1：10 1：100 1：1000 阴性对照皿5 1天2天3天4天5天6天/ / / / 7天/ / / /菌落总数结果计数： cfu/g；（规定：≦cfu/g）计数： cfu/g；（规定：≦cfu/g）三、大肠埃希菌培养内容胰酪大豆胨液体（30-35℃；18-24h）温度：℃，培养时间：h麦康凯液体（42-44℃；24-48h）温度：℃，培养时间：h麦康凯琼脂培（30-35℃；18-72h）温度：℃，培养时间：h供试品阳性对照阴性对照结果□检出□未检出大肠埃希菌（规定：不得检出cfu/g）四、耐胆盐革兰阴性菌培养内容肠道菌增菌液体培养基（30-35℃；24-48h）温度：℃，培养时间：h紫红胆盐葡萄糖琼脂（30-35℃；24-48h）温度：℃，培养时间：h供试品1：10 1：100 1：1000阳性对照阴性对照结果每1g为cfu （规定：≦ cfu/g）五、沙门菌检查培养内容胰酪大豆胨液体（30-35℃；18-24h）温度：℃，时间：hRV沙门菌增菌液体（30-35℃；18-24h）温度：℃，时间：h木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂（30-35℃；18-48h）温度：℃，时间：h三糖铁琼脂斜面（30-35℃；18-24h）温度：℃，时间：h供试品阳性对照阴性对照结果□检出□未检出沙门菌（规定：不得检出10g）结论本品按《中国药典》年版部检验，结果。
微生物限度检查法—— 稀释剂
微生物限度检查法—稀释剂0.9％无菌氯化钠溶液，取氯化钠9.0g，加水使溶 解成1000ml，121℃灭菌20分钟。
无菌吐温80－氯化钠溶液，取吐温80 1ml，加0.9％ 氯化钠溶液使成100ml,121℃灭菌20分钟。
无菌磷酸盐缓冲液(pH7.2)，取磷酸氢二钠25.8g 与 磷酸二氢钠4.4g，加水稀释至1000ml，121℃灭菌20分 钟。
一、指示液 1、中性红指示液，取中性红1.0g，细研，加乙醇 60ml 使溶解，再加水至100ml。
变色范围 pH6.8～8.0（红→黄）。
2、酚红指示液 取酚红1.0g，加1mol/L 氢氧化钠 2.82ml 使溶解,再加水稀释至100ml。
变色范围 pH6.8～8.4（黄→红）。
3、溴甲酚紫指示液 取溴甲酚紫1.6g，加乙醇使 溶解成100ml。
变色范围 pH5.2～6.8（黄→紫）。
4、溴麝香草酚蓝指示液，取溴麝香草酚蓝0.4g,加 1mol/L 氢氧化钠溶液0.64ml 使溶解,再加水稀释至100ml。
变色范围 pH6.0～7.6（黄→蓝）。
5、酸性复红指示液(Andrade 指示剂) 取酸性复红0.5g，加水100ml,使溶解，再逐渐加入1mol/L 氢氧化 钠溶液16ml，每加1滴均应将溶液充分摇匀后再加第二 滴,直至溶液呈草黄色；于沸水内保持15分钟，再静置2 小时，滤过，即得。
变色范围 pH 6.0～7.4（黄→红）。
二、供试品的检验量 每批供试品检验量一般为10g 或10ml 。
化学药膜 剂为100cm2,贵重的或微量包装的供试品检验量可以 酌减，但口服药品不得少于3g，外用药品不得少于5g。
供试品均须取自2 个以上的包装单位，大蜜丸、膜剂 除须取自2 个以上包装单位外，应取自4 丸（片）以 上样品。
。
2015版纯化水微生物限度检查记录
累计培养时间
年月日时
年月日时
h
培养
时间
/
取样点编号
阴性对照
24h
1
□长菌
□未长菌
2
48h
1
□长菌
□未长菌
2
72h
1
□长菌
□未长菌
2
菌数报告
CFU/ml
/
标准规定
需氧菌总数每1ml不得过100CFU。
项目结论
□符合规定
□不符合规定
□符合规定
□不符合规定
纯化水微生物限度检查记录
检验日期
年月日
报告日期
年月日
检验依据
《中国药典》2015年版二部、四部通则微生物检查法
需氧菌总数检查：取纯化水50ml，用薄膜过滤器（0.45±0.02um，50MM直径）过滤，减压抽干。取出滤膜，将滤膜放入制备好的R2A培养基平板上，在30～35℃培养3天，计数。
需氧菌阴性对照：取50ml已灭菌的纯化水按供试品同法处理，作为阴性对照。
□符合规定
□不符合规定
□符合规定
□不符合规定
□符合规定
□不符合规定
□符合规定
□不符合规定
/
检验人：复核人：
微生物限度检验
Cetrimide 琼 脂 35-37 ℃,1872h
金黄色葡萄球 菌 10g (10ml)样 品 90ml 缓冲蛋 白胨水
10ml加入 100ml TSB 35-37 ℃,1848h
Baird Parker 琼脂 35-37 ℃,1872h
11
验证内容
（一）计数方法验证 （二）控制菌检验方法验证
12
微生物限度检验方法验证 （一）
计数方法验证
13
供试液制备（ 中国药典2005版）
- 表面活性剂、中和剂或灭活剂：应证明其有效性及 对微生物的生长和存活无影响。
- 供试液从制备至加入检验用培养基，不得超过1小 时。
- 供试液制备若需用水浴加温时，温度不应超过45℃。 - 供试液的体积：100ml。
MacConkey 琼 脂 35-37 ℃,1872h
沙门菌
10g (10ml)样品
90ml TSB 35-37 ℃,1824h
1ml 加入10ml TTB 肉汤 41-43 ℃,1824h
脱氧胆盐琼脂 XLD琼脂 亮绿(BG)琼脂 35-37 ℃,1872h
铜绿假单胞菌
10g (10ml)样 品 90ml 缓冲蛋白 胨水
肠杆菌和G-杆
10g (10ml)样 品 90ml乳糖肉汤 35-37 ℃,2-5h
10ml 加入 100ml Mossel 肉汤 (EE肉汤) 35-37 ℃,1848h VRBG 琼脂 35-37 ℃,1824h
大肠杆菌
10g (10ml)样品
90ml TSB 35-37 ℃,1848h
1ml 加入100ml McConkey 肉 汤 43-45 ℃,1824h
雪碧液体残留的微生物限度检查实验报告
雪碧液体残留的微生物限度检查实验报告雪碧是一种由水、二氧化碳和其他原料配制而成的饮料。
产品颜色鲜艳，有多种口味，可以直接饮用。
雪碧的饮用方法是：将雪碧倒入大口玻璃瓶中制成饮品。
雪碧属碳酸饮料，由于其营养价值高、易于保存、饮用方便，已成为人们日常生活中的重要饮料。
作为碳酸饮料来说，雪碧属于酸性饮料，因此有较强的酸性物质，使其更容易被人体吸收。
人体一旦过量饮用就会引起消化不良和胃溃疡。
但是很多人对自己身体的情况不了解，所以为了避免不必要的麻烦以及降低自己对身体的伤害性，很多人会选择将雪碧制成饮料食用或者饮用。
但是这也会造成污染食品等问题。
因此国家食品药品监督管理局根据《食品安全国家标准雪碧》、《食品安全国家标准碳酸饮料》等国家标准规定对雪碧进行了微生物限度检查实验操作规程并出具了检验报告。
1、按照《GB 2762-2011碳酸饮料》国家标准要求，准备好样品，将配制好的液体样品置于培养皿中；将待检样品置于培养皿中，用乙醚溶解。
再加入适量的无菌生理盐水，搅拌均匀；将待检样品置于琼脂板上，搅拌均匀后，置于平板上。
然后将平板放置于待检样品周围；盖上平板。
将待检样品置于玻璃瓶中，然后加入已知浓度的醋酸和柠檬酸溶液。
最后用乙醇滴加适量待检样品。
将待检样品置于乙醇溶液内0.5 g,加热至沸腾（或蒸汽）或自然冷却至室温的条件下。
用滴定管固定。
将待测样品置于玻璃瓶中，用蒸馏水冷却备用。
然后将待测试样品与上述反应液混匀。
最后将混匀后的待测样品置于无菌生理盐水中冷却（或自然冷却)5 min后进行微生物限度检查（试验操作）。
2、取0 mL离心管，用0.45 M甲醇定容到50 mL混合液中；用无菌水定容到20 mL的试管中得到的样品溶液。
将试管置于恒温培养箱中37℃培养24小时，以未被污染的溶液为空白对照品，使用移液管注入40 mL的稀释溶液。
滴加100倍量的无菌水至刻度线。
于100 nm波长下测定光密度。
用 HPLC法测定吸光度和荧光强度。
微生物限度检验记录表 2015版药典
阴性对照
菌落数(cfu)
平皿
1∶1
1∶10
1∶102
1
2
平均
样品编号
平皿编号
各稀释度菌落数
阴性对照
菌落数(cfu)
平皿
1∶1
1∶10
1∶102
1
2
平均
标准规定
纯化水需氧菌总数不超过100cfu/mL
注射用水需氧菌总数不过超过10cfu/100ml
结论
微生物限度□符合□不符合标准要求。
审核：复核：检验-01-0
使用编号
微生物限度检验记录
样品名称：□纯化水□注射用水取样日期：
取样数量:样品编号：
培养开始时间：月日结束培养时间：月日
R2A琼脂培养基批号：培养温度：℃
样品编号
平皿编号
各稀释度菌落数
阴性对照
菌落数(cfu)
平皿
1∶1
1∶10
1∶102
1
2
平均
样品编号
平皿编号
微生物限度检验
2007.4
1
微生物限度检查 (Microbial Limits Test) ：
是指非无菌制剂及原，辅料受到微生物污染程度的检查。 包括：
1）细菌计数； 2）霉菌及酵母菌计数； 3）控制菌检查：大肠杆菌，沙门菌，铜绿假单胞菌，金黄色葡 萄球菌，大肠菌群
2
细菌、霉菌及酵母菌计数
大肠杆菌 1g (1ml)样品 样 100ml 胆盐乳糖 培养基 35-37 ℃,18-24h 大肠菌群 1g (1ml)样品 样 3X10ml 胆盐乳 糖发酵管 35-37 ℃,18-24h 沙门菌 10g (10ml)样品 样 200ml 营养肉汤 营养肉 铜绿假 铜绿假单胞菌 1g (1ml)样品 样 100ml 胆盐乳糖 培养基 35-37 ℃,18-24h 金黄色葡萄球菌 1g (1ml)样品 样 100ml 亚碲酸钾 碲酸钾 肉汤 (或营养肉汤) 或营养肉 35-37 ℃,18-24h 梭菌 1g (1ml)样品X2 样 (其中一份样品80 其中一份样 其中一份 ℃,10分钟) 分 100ml 新鲜庖肉 培养基 厌氧, 35-37 ℃,72-96h
8
验证目的
确认一种检验方法。 验证实验 检验条件 检验方法
检验规程
样品量 稀释液种类 稀释液体积 中和剂 培养基 培养时间 培养温度 ……
SOP
9
影响微生物检验的因素
- 样品/药品自身的特殊性 - 样品/药品中添加的防腐剂/抑菌剂 - 培养基的特性 - 培养条件 - 人员因素 - 实验器材的选择
甘露醇氯 甘露醇氯化钠琼 脂 (或卵黄氯化钠琼 或卵黄氯 或卵黄 脂) 35-37 ℃,18-72h
0.2ml 涂抹于 含庆大霉素的哥 亚琼脂 伦比亚琼脂 厌氧, 35-37 ℃,48-72h
微生物限度检查记录版
表：2.1-024微生物限度检查记录（通用）1. 常规法：取供试品10為1,用胰酪大豆胨液体培养基稀释至 100ml ，用匀浆仪等适宜的方法混匀，制成1:10供试液。
2. 薄膜过滤法：取供试品10mi ,用胰酪大豆胨液体培养基稀释至 100ml ，用匀浆仪等适宜的方法混匀，制成1:10供试液。
吸取1:10的供试液10ml ,过滤，加0.1%无菌蛋白胨水溶液 300ml 分 三次冲洗，每次100ml ;冲洗后，将滤膜正贴于胰酪大豆胨固体培养基和沙氏葡萄糖琼脂培养基 上，每种培养基平行制备 2个平皿。
按平皿法测定其菌数。
胰酪大豆胨液体培养基（配制批号:）、麦康凯液体培养基（配制批）麦康凯琼脂培养基（配制批号: ）供试液制备微生物限度检查记录、需氧菌总数检查30〜353〜5）、霉菌、酵母菌总数检查20C〜25C,5〜7天）三糖铁琼脂斜面穿刺接种 （18〜24h ）三、控制菌检查 （30-35 C ）检验者:表：2.1-024号:结论本品经按《中国药典》2015年版“非无菌产品微生物限度检查法”进行检验，结果审核者:微生物限度检查记录（丸剂）供试液制备供试液。
胰酪大豆胨增菌 （18〜24h ）RV 沙门选择培养木糖赖氨酸脱氧胆酸分离培养（18〜48h ）胰酪大豆胨液体培养基（配制批号:）麦康凯琼脂培养基（配制批号:）四、沙门菌检查 （30 °C 〜35C ） 胰酪大豆胨液体培养基（配制批号： ）、RV 沙门增菌液体培养基（配制批号： ）,木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂培养基（配制批号:）、三糖铁琼脂（配制批号：五、耐胆盐革兰阴性菌检杳胰酪大豆胨液体培养基（配制批号：）、肠道菌增菌液体培养基（配制批号：）,紫红胆盐葡萄糖琼脂培养基（配制批号：审核者：检验者: 表：2.1-024阴性对照阳性对照三、大肠埃希菌检查）、麦康凯液体培养基（配制批结果□检出大肠埃希菌□未检出大肠埃希菌（规定：不得检出/g）四、沙门菌检查（30°C〜35C）胰酪大豆东液体培养基（配制批号：）、肠道菌增菌液体培养基（配制批号：）,紫红胆盐葡萄糖琼脂培养基（配制批号：、表: 2.1-024 微生物限度检查记录（蛇胆川贝液）三、大肠埃希菌检查胰酪大豆胨液体培养基（配制批号：）、麦康凯液体培养基（配制批号：）麦康凯琼脂培养基（配制批号：）胰酪大豆胨液体培养基（配制批号：）、RV沙门增菌液体培养基（配制批号：）,木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂培养基（配制批号：）、三糖铁琼脂（配制批号：）审核者：检验者:表：2.1-024 微生物限度检查记录（30〜353〜5天）、霉菌、酵母菌总数检查20C〜25C, 5〜7天）1、 口服液体药用聚酯瓶：取数个试瓶，加入1/2标示容量的氯化钠注射液，将盖旋紧，振摇1分钟，即得供试液。
稀释法 微生物限度检查记录(原料、成品)
一、培养基配制
名称
胰酪大豆胨培养基
沙氏葡萄糖琼脂
麦康凯液体培养基
蛋白胨
麦康凯琼脂培养基
批号
配制数量
二、需氧菌测定（30℃-35℃)设备名称：电热恒温培养箱；编码：TS-YQ-JY-014；型号：HN303-5
培养基稀释法――培养基:
培养温度
开始培养时间
碟号
1
2
3
4
5
微生物限度检查记录
温度：湿度：压差：
检品名称：
规格：
批号：
检品数量：
检品来源：
检验日期：
检验目的：是否符合微生物限度检查标准
报告日期：
供试液制备：常规法供试品10 g(ml)，加PH7.0无菌氯化钠－蛋白胨缓冲液至ml，混匀。
使用仪器：立式压力蒸汽灭菌器(编码：SOP-SB-097),架盘药物天平（编码：TS-YQ-JY-023)
碟号1
碟号2
平均值
空白
结果
cfu/g
标准规定
≤80cfu/g
四、大肠埃希菌检查（30℃－35℃）培养温度：
BL
MUG
靛基质
EMB
革兰氏染色
乳糖
发酵
I
M
V-P
C
结果
供试品
阳性对照
阴性对照
五、活螨检查
检查方法
直检法□飘浮法□分离法□
检查结果
未检出□检出□
结论：本品按《中国药典》2015版检验，检验结果
检验人：复核人：
观察时间
观察温度
第一组
第二组
碟号
6
7
8
9
10
28微生物限度检测原始记录
规 格 检验日期结论：活螨检验：供试品 用直接检查法， 活螨结论：产品名称 产品批号产品名称产品批号 控制菌检查 阳性对照菌 取沙门菌 新鲜营养肉汤（配制批号：）培养物1ml, 9ml0.9%无菌NaCI 溶液10倍递增稀释取供试品10g 直接接种至300ml 的营养肉汤（配制批号： ）中，混匀，培养18〜24小时。
取上述培养物1ml ，接种于10ml 四硫磺酸钠亮绿培养基（配制批号：）中，培养18〜24小时后，分别划线接种于胆盐硫乳琼脂培养基 （或沙门、志贺菌属琼脂培养基） 和麦康凯琼脂培养基（配制批号：）（或曙红亚甲蓝琼脂培养基）的平板上，培养18〜24小时（必要时可延长至 40-48小时）。
若平板上生长的菌落与下表所列的菌落形态特征相符或疑似，用接种针挑选 2-3个菌落分别于三糖铁琼脂培养基高层斜面上进行斜面和高层穿刺接种，培养18〜24小时。
阳性对照试验 阳性对照试验方法同供试品的检查，对照菌加菌量为 10-100cfu 。
阴性对照试验 取稀释液10ml 照控制菌检查法检查。
结论：规 格 检验日期检测室净化工作台编号：SB02-020-02 阳性菌室净化工作台编号：SB02-020-01供试液制备：取本品用开孔面积为20cm2的消毒过的金属模板压在内层面上，将无菌棉签用0. 9%无菌氯化钠溶液，稍沾湿，在板孔范围内擦抹5次，换1支棉签再擦抹5次，每个位置用2支棉签共擦抹10次，共擦抹5个位置100cmt每支棉签抹完后立即剪断（或烧断），投入盛有30ml 0.9 %无菌氯化钠溶液的锥型瓶（或大试管）中。
全部擦抹棉签投入瓶中后，将瓶迅速摇晃1分钟，即得供试液。
供试品检查：平皿法：分别取100cm：30 ml、100cm：300 ml供试液各1ml，置无菌平皿中，注入15〜20ml温度不超过45C的溶化的营养琼脂培养基或玫瑰红钠琼脂培养基，混匀，凝固，倒置于培养箱中培养。
阴性对照试验取试验用的稀释液1ml，置无菌平皿中，注入培养基，凝固，倒置培养。
微生物限度检查记录表
（18~24h）
RV沙门选择培养
（18~24h）
木糖赖氨酸脱氧胆酸盐分离培养
（18~48h）
三糖铁琼脂斜面穿刺接种
（18~24h）
供试品
阴性对照
阳性对照
结果
□检出沙门菌□未检出沙门菌（规定：不得检出/10g）
五、耐胆盐革兰阴性菌检查
胰酪大豆胨液体培养基（配制批号：）、肠道菌增菌液体培养基（配置批号：）、紫红胆盐葡萄糖琼脂培养基（配置批号：）
2天
3天
4天
5天
6天
7天
均值
结果
cfu/gml（规定：≦8000cfu/gml）
cfu/gml（规定：≦80cfu/gml）
三、大肠埃希菌检查
胰酪大豆胨液体培养基（配制批号：）、麦康凯液体培养基（配置批号：）、麦康凯琼脂培养基（配置批号：）
胰酪大豆胨液体培养基增菌培养
（30~35℃，18~24h）
麦康凯液体培养基选择培养
微生物限度检查记录（通用）
样品名称
检验编号
批号
规格
检品来源
数量
检验依据
消毒时间
紫外：
检验日期
完成日期
供
试
液
制
备
1.常规法：取供试品10gml，用胰酪大豆胨琼脂培养基稀释至100ml，用匀浆仪等适宜的方法混匀，制成1:10供试液。
2.薄膜过滤法：取本品用开口面积为20cm2的灭过菌的金属模板压在内层面上，将无菌棉签用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液稍沾湿，在板孔范围内擦抹5次，换1支棉签再擦抹5次，每个位置用2支棉签共擦抹10次，共擦抹5个位置,擦拭总面积为100cm2。每支棉签擦抹完后立即用灭菌剪刀将棉签头剪断，将剪下的棉签头投入盛有30mlpH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液的灭菌广口瓶（或大试管）中。全部擦抹棉签投入瓶中后，振摇1分钟，静置10分钟，即得供试液。
注射用水微生物计数原始记录
产品名称
注射用水
型号/规格
批量
取样量
取样日期
来源
检验日期
产品批号
产品编号
有效期至
请验单号
温湿度
报告日期
报告编号
检验依据
《中国药典》2015年版
试验方法：薄膜过滤法
试验组：取注射用水100ml至无菌滤杯中，过滤，过滤完毕，取出滤膜，菌面朝上，贴于R2A琼脂培养基上，平行制备2张滤膜。30〜35℃培ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ不少于5天，计数。
阴性对照：以100ml 0.9%无菌氯化钠代替供试液，按试验组方法和条件进行操作，制备1张滤膜。30〜35℃培养不少于5天，计数。
使用稀释液
0.9%无菌氯化钠，配制批号：
微生物计数
判断标准
100ml注射用水中需氧菌总数不大于10cfu，阴性对照无菌生长，为合格
培养基名称
R2A琼脂培养基
培养基配制编号
仪器名称
仪器编号
培养温度
培养时间
观察时间
注射用水
阴性对照
皿1
皿2
皿3
第1天
第2天
第3天
第4天
第5天
第6天
第7天
平均值
计数结果
结论：注射用水，批号，
微生物限度检查——微生物计数结果：
操作人：日期：复核人：日期：
微生物限度检查2015
供试液制备：1.常规法：供试品____________g/ml , PH7.0无菌氯化钠一蛋白胨缓冲液至__________ml。
（1）匀浆仪档 min；（2）研钵法；（3）保温振摇法。
1.常规法：供试品____________g/ml , PH7.0无菌氯化钠一蛋白胨缓冲液至__________ml。
（1）匀浆仪档 min；（2）研钵法；（3）保温振摇法。
2.非水溶性供试品：供试品g/ml，加____g司盘80、____g单硬脂酸甘油酯、____g聚山梨酯80的无菌混合物，慢慢加入45℃的PH7.0无菌氯化钠---蛋白胨至100ml，边加边搅拌，充分乳化。
3.抑菌性供试品处理方法：供试品__g/ml, PH7.0氯化钠一蛋白胨缓冲液至_ml。
（1）采用级为供试液的最低稀释级；（2）培养基稀释法；（3）薄膜过滤法；（4）中和法。
供试液制备：1.常规法：供试品____________g/ml , PH7.0无菌氯化钠一蛋白胨缓冲液至__________ml。
（1）匀浆仪档 min；（2）研钵法；（3）保温振摇法。
2.非水溶性供试品：供试品g/ml，加____g司盘80、____g单硬脂酸甘油酯、____g聚山梨酯80的无菌混合物，慢慢加入45℃的PH7.0无菌氯化钠---蛋白胨至100ml，边加边搅拌，充分乳化。
3.抑菌性供试品处理方法：供试品______________g/ml, PH7.0氯化钠一蛋白胨缓冲液至______________ml。
（1）采用____________________级为供试液的最低稀释级；（2）培养基稀释法；（3）薄膜过滤法；（4）中和法。
微生物限度检查方法学验证实验
生物安全柜（Biological safety cabinets， BSCs）是为操作原代培养物、菌毒株以及诊 断性标本等具有感染性的实验材料时，用来 保护操作者本人、实验室环境以及实验材料， 使其避免暴露于上述操作过程中可能产生的 感染性气溶胶和溅出物而设计的。
生物安全柜正广泛用于微生物和生物工程及 其他对操作环境有苛刻要求的场所，目前正 在为医疗卫生、制药、科学研究领域提供无 菌、无尘的可移动的工作环境。
用于微生物限度验证的菌种
菌株选择的原则:代表性,普遍性,低或非致病性,标准 菌株(或该药品中常见的污染菌)
菌种的要求：不得超过5代,采用适宜的方法保存。
CMCC (China Medical Culture Collection Center) 中国医学微生物菌种保藏管理中心 B- Bacteria(细菌) F-Fungi(真菌)
(1) 不确定性:药品受外来微生物的污染,这种 污染是可有可无;在有中又可多可少;其种类可 以多样.污染的情况依生产,设备,原材料,管理, 剂型等等条件而定,非药品本身所固有.所以微 生物限度检验的对象是不确定的.药品所规定 的项目,除无菌检查,热原具有上述性质,其他 项均无此特征.这一点往往被忽视.污染对药品 而言是一个意外事件.污染批号中的不合格品 是一个随机变量.
结果时 。 定期的验证。
同一产品不同批次、不同企业生产的同一产品。
当建立药品的微生物限度检查方法时，应进 行细菌、霉菌及酵母菌计数的方法学验证， 以确认所采用的方法适合于该药品的细菌、 霉菌及酵母菌数的测定。
验证时，按供试液的制备和细菌、霉菌及酵 母菌计数所规定的方法及下列要求进行，对 各试验菌的回收率逐一进行验证。
产单位全面质量管理水平与提高药品质量的 重要措施.
纯化水微生物限度检查方法
纯化水微生物限度检查方法1. 纯化水微生物限度检查方法纯化水是指经过特殊处理后去除了多种杂质和微生物的水，主要用于实验室、制药、电子工业等领域。
为确保纯化水的质量，需要进行微生物限度检查。
以下为纯化水微生物限度检查方法及其详细描述。
2. 样品采集要选择好样品采集点。
在采集前要将取样的操作员的手洗净，然后用70%的酒精或其他消毒剂在取样点上喷洒并擦拭，等待其干燥。
样品可以用无菌的容器，如无菌烧杯或无菌注射器采集。
3. 检查项目常规情况下，对于纯化水的微生物限度检查主要包括大肠杆菌、菌落总数和霉菌的检测。
4. 大肠杆菌检测大肠杆菌是一种重要的致病菌，其检测可以反映样品是否受到粪便污染。
根据GMP规定，1毫升纯化水中的大肠杆菌不应超过10个。
5. 菌落总数检测菌落总数是指在一定条件下，菌落形成的总数。
对纯化水进行菌落总数检测，可以评估其细菌含量及其污染情况。
普遍认为，1毫升纯化水中的细菌菌落总数不应超过100CFU （菌落形成单位）。
6. 霉菌检测霉菌是一种常见的微生物，常常伴随着水污染。
过多的霉菌会对人体健康造成危害。
对于纯化水，检测霉菌可以评估其存在程度和可能的污染源。
GMP规定，1毫升纯化水中的霉菌不应超过10CFU。
7. 检测方法目前，常用的检测方法有培养法、分子生物学方法和流式细胞仪法。
培养法是一种较为传统的方法，通常通过在培养基上进行菌落总数检测，可以获得较为准确的结果。
分子生物学方法则是一种新兴的技术，可以通过检测DNA、RNA或蛋白质，进行微生物的检测。
流式细胞仪则是一种高通量的技术，可以进行密集的细胞计数和分类。
8. 注意事项在进行微生物限度检查时，要特别注意以下几点。
所有的操作应当严格按照GMP要求进行，确保检测的结果准确可靠。
其次要加强检测设备的维护及保养，确保设备的准确性和稳定性。
最后需要注意的是，纯化水的质量与检测方法密切相关，应根据不同领域的需求，选择相应的检测方法和标准。
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名称
胰酪大豆胨琼脂培养基
培养
温度
30~35℃
培养时间
3天
批号
稀释倍数
10-1
阴性对照
判定结果
碟号
1
2
3
4
5
菌落数
菌落数总计
霉菌及酵母菌总数
取样量：取混合均匀的供试品10ml加入90ml稀释液中，每一浓度吸1ml。
培养基
名称
沙氏葡萄糖琼脂培养基
培养
温度
20~25℃
培养时间
5天
批号
稀释倍数
10-1
液，其中一份加入对照菌作阳性对照，第3份加入稀释液作阴性对照。
培养瓶名
检品培养瓶
阳性对照培养瓶
阴性对照培养瓶
培养结果
选择和分离培养
检验程序
取上述培养物1ml接种于100ml麦康凯液体培养基中培养，42~44℃培养24~48小时。取麦康凯液体培养物划线接种于麦康凯琼脂培养基平板上，30~35℃培养18~72小时。
XXXXXXX有限公司
微生物限度检验记录
编号：
品 名
包装规格
检品数量
批 号
检验日期
请验部门
报告日期
检验依据
臭氧消毒时间
小时
需氧菌总数
取样量：取样品10ml加入90ml稀释液中，每一浓度吸0.5ml。
培养基
名称
胰酪大豆胨琼脂培养基
培养温度Leabharlann 30~35℃培养时间
3天
批号
稀释倍数
10-1
阴性对照
判定结果
碟号
培养基
名称
胰酪大豆胨琼脂培养基
培养
温度
30~35℃
培养时间
3天
批号
稀释倍数
10-1
阴性对照
判定结果
碟号
1
2
3
4
5
菌落数
菌落数总计
霉菌及酵母菌总数
取样量：取混合均匀的样品10g加入100ml稀释液中，每一浓度吸1ml。
培养基
名称
沙氏葡萄糖琼脂培养基
培养
温度
20~25℃
培养时间
5天
批号
稀释倍数
10-1
10-2
批号
稀释倍数
10-1
10-2
10-3
阴性对照
判定结果
碟号1
碟号2
平均菌落数
大肠埃希菌(菌种编号： )
取样量:取供试品10ml加入100m胰酪大豆胨液体培养基中。
增
菌
培
养
培养基名称
胰酪大豆胨液体培养基
培养
温度
30~35℃
培养时间
18～24h
批号
检验程序
取胰酪大豆胨液体培养基3份，每份100ml，2份分别加入规定量的供试
1
2
3
4
5
菌落数
菌落数总计
霉菌及酵母菌总数
取样量：取样品10ml加入90ml稀释液中，每一浓度吸1ml。
培养基
名称
沙氏葡萄糖琼脂培养基
培养
温度
20~25℃
培养时间
5天
批号
稀释倍数
10-1
10-2
10-3
阴性对照
判定结果
碟号1
碟号2
平均菌落数
培养基
名称
玫瑰红钠琼脂培养基
培养
温度
20~25℃
培养时间
5天
培养
温度
30~35℃
培养时间
18～24h
批号
检验程序
取胰酪大豆胨液体培养基3份，每份100ml，2份分别加入规定量的供试
液，其中一份加入对照菌作阳性对照，第3份加入稀释液作阴性对照。
培养瓶名
检品培养瓶
阳性对照培养瓶
阴性对照培养瓶
培养结果
选择和分离培养
检验程序
取上述培养物1ml接种于100ml麦康凯液体培养基中培养，42~44℃培养24~48小时。取麦康凯液体培养物划线接种于麦康凯琼脂培养基平板上，30~35℃培养18~72小时。
培养瓶名
检品培养瓶
阳性对照培养瓶
阴性对照培养瓶
培养结果
初步结论
结 论
复核人： 检验人：
XXXXXXX有限公司
微生物限度检验记录
编号
品 名
包装规格
检品数量
批 号
检验日期
请验部门
报告日期
检验依据
臭氧消毒时间
小时
需氧菌总数
取样量：取样品5袋，将其混匀，再称取10g加入100ml稀释液中，每一浓度吸0.5ml。
10-2
10-3
阴性对照
判定结果
碟号1
碟号2
平均菌落数
培养基
名称
玫瑰红钠琼脂培养基
培养
温度
20~25℃
培养时间
5天
批号
稀释倍数
10-1
10-2
10-3
阴性对照
判定结果
碟号1
碟号2
平均菌落数
大肠埃希菌(菌种编号： )
取样量:取供试品10ml加入100m胰酪大豆胨液体培养基中。
增
菌
培
养
培养基名称
胰酪大豆胨液体培养基
培养瓶名
检品培养瓶
阳性对照培养瓶
阴性对照培养瓶
培养结果
初步结论
结 论
复核人： 检验人：
10-3
阴性对照
判定结果
碟号1
碟号2
平均菌落数
培养基
名称
玫瑰红钠琼脂培养基
培养
温度
20~25℃
培养时间
5天
批号
稀释倍数
10-1
10-2
10-3
阴性对照
判定结果
碟号1
碟号2
平均菌落数
大肠埃希菌(菌种编号： )
取样量:取供试品10ml加入100m胰酪大豆胨液体培养基中。
增
菌
培
养
培养基名称
胰酪大豆胨液体培养基
培养
温度
30~35℃
培养时间
18～24h
批号
检验程序
取胰酪大豆胨液体培养基3份，每份100ml，2份分别加入规定量的供试
液，其中一份加入对照菌作阳性对照，第3份加入稀释液作阴性对照。
培养瓶名
检品培养瓶
阳性对照培养瓶
阴性对照培养瓶
培养结果
选择和分离培养
检验程序
取上述培养物1ml接种于100ml麦康凯液体培养基中培养，42~44℃培养24~48小时。取麦康凯液体培养物划线接种于麦康凯琼脂培养基平板上，30~35℃培养18~72小时。
培养瓶名
检品培养瓶
阳性对照培养瓶
阴性对照培养瓶
培养结果
初步结论
结 论
复核人： 检验人：
XXXXXXXXXX有限公司
微生物限度检验记录
编号
品 名
包装规格
检品数量
批 号
检验日期
请验部门
报告日期
检验依据
臭氧消毒时间
小时
需氧菌总数
取样量：取5个最小包装的供试品，将其混匀，量取10ml加入90ml稀释液中，每一浓度吸0.5ml。