分子生物学 基因与蛋白质组学

1.什么是SNP？试述研究SNP的意义。

单核苷酸多态性(SNP)---由基因组DNA上的单个碱基的变异引起的DNA序列多态性。

包括置换、颠换、缺失和插入。从理论上来看每一个SNP位点都可以有4种不同的

变异形式，但实际上发生的只有两种，即转换和颠换，二者之比为2:1。SNP在CG

序列上出现最为频繁，而且多是C转换为T，原因是CG中的C常为甲基化的，自发

地脱氨后即成为胸腺嘧啶。

SNPs的研究意义：

①具有已知性、可遗传性、可检测性，用于疾病基因的定位、克隆和鉴定。寻找疾病相关的

突变位点，发展疾病预防策略。

②研究SNP本身对机体的影响，尤其是疾病的易感性、个性化医疗。通过对药物靶点个体

差异性分析，个性化药物、方法治疗。SNP可以作为新的“遗传标志”，人体许多表型

差异、对药物或疾病的易感性等等都可能与SNP有关。

③法医学研究。人类基因组是一个结构十分稳定的体系，同时又是一个变异的体系。在长期的进化过程中，基因组DNA的序列不断发生变异。这些变异有些被保存下来，导致了不同种族、群体和个体间基因组的差异和多态性，除同卵双生子外，没有两个个体基因组是完全相同的。

④器官移植中供体/受体配对分析。预测启动子SNP位点与转录因子结合的改变，编码区SNP 对蛋白质的空间结构，生物功能的影响等。

⑤人类基因组计划。人类基因组单体型图谱的逐渐绘制完成，提供了详尽的人类DNA序列

的变异信息，对人类个体遗传背景的研究提供了强大的机遇和挑战。

2.简述蛋白质组学研究中，蛋白质分离常用的方法及其原理。

⑴双向凝胶电泳：其基本原理是：先将蛋白质根据其等电点在pH梯度胶内进行等电聚焦，

即按照它们等电点的不同进行分离。然后按照它们的相对分子质量大小进行SDS-PAGE

第二次电泳分离。样品中的蛋白经过等点电和分子质量的两次分离后，可以得到分子的等

电点、分子质量和表达量等信息。

⑵液相色谱法(LC)

对在双向电泳中难以分离鉴定的高分子量、低分子量、极酸性、极碱性和疏水性强的

蛋白进行有效的分离鉴定。

液相色谱分离系统由两相---固定相和流动相组成。液相色谱的固定相可以是吸附剂、

化学键合固定相、离子交换树脂或多孔性凝胶；流动相是各种溶剂。被分离混合物由流动

相液体推动进入色谱柱。根据各组分在固定相及流动相中的吸附能力、分配系数、离子交

换作用或分子尺寸大小的差异进行分离。色谱分离的实质是样品分子与溶剂以及固定相分

子间的作用，作用力的大小，决定色谱过程的保留行为。

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